Submitted by Fabíola Silva (fabiola.silva@famerp.br) on 2016-10-04T13:48:43Z No. of bitstreams: 1 analiviasilvagalbiatti_dissert.pdf: 5434854 bytes, checksum: b9182b3ea6a5987585226aa5a73bb3f1 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-10-04T13:48:43Z (GMT). No. of bitstreams: 1 analiviasilvagalbiatti_dissert.pdf: 5434854 bytes, checksum: b9182b3ea6a5987585226aa5a73bb3f1 (MD5) Previous issue date: 2014-10-02 / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo - FAPESP / Introduction: Antifolate chemotherapies such as methotrexate (MTX) and 5-fluorouracil (5-FU) act inhibiting enzymes involved in folate pathway. These enzymes are important to DNA synthesis and cell growth. Chemotherapy dose may alter these levels of expression of these genes encoding enzymes involved in folate pathway and to influence in the response to treatment. Objectives: To evaluate relationship between mRNA and protein expression levels expression of MTHFR, DHFR, TYMS and SLC19A1 folate metabolic genes in laryngeal and oral cancer cell lines treated with MTX and 5-FU antifolate chemotherapies, separately. Materials and methods: HEP-2 (laryngeal cancer) and HN13 (oral cancer) cell lines were treated with 0.25, 25.0, and 75 μM of MTX and 10 ng/ml, 50 ng/ml, and 100 ng/ml of 5-FU, separately, for 24 hours/37°C. Flow Cytometry, Real-time PCR and Western blotting techniques were performed to analyzing the level of apoptosis, quantification of mRNA and quantification of proteins of genes, respectively. ANOVA and Bonferroni's post hoc tests were utilized for statistical analysis. P<0.05 was considered significant. Results: The higher concentration of MTX chemotherapeutic was associated with increased expression of MTHFR, DHFR, TYMS and SLC19A1 genes in laryngeal cancer cell line (p <0.05) and increased expression of DHFR and SLC19A1 genes in oral cancer cell line (p <0.05). The lower dose was associated with decreased expression of SLC19A1 gene laryngeal cancer (p <0.05). The higher concentration of 5-FU chemotherapy was associated with increased expression of DHFR gene in laryngeal cancer cell line (p <0.05) and increased expression of DHFR and TYMS genes in oral cancer cell line (p <0.05). The lower dose of 5-FU was associated with decreased expression of SLC19A1 gene. Conclusion: Exposure to low and high-dose of chemotherapeutics in oral cancer cell line can modulate the level of expression of genes involved in folate metabolism in laryngeal and oral cancer cell line. / Introdução: Quimioterápicos antifolato, tais como Methotrexato (MTX) e 5-Fluorouracil (5-FU) agem inibindo enzimas envolvidas na via do folato. Essas enzimas são essenciais para a síntese de DNA e divisão celular. A dose destes quimioterápicos podem alterar níveis de expressão de genes que codificam essas enzimas envolvidas na via do folato e influenciar na resposta ao tratamento. Objetivos: Avaliar a relação entre a expressão do RNAm e de proteínas dos genes MTHFR, DHFR, TYMS and SLC19A1 envolvidos no metabolismo do folato em linhagens celulares de câncer oral e câncer de laringe administradas com os quimioterápicos antifolato MTX e 5-FU em diferentes concentrações e em monoterapia. Materiais e métodos: Duas linhagens celulares HEP-2 (câncer da laringe) e HN13 (câncer de cavidade oral) foram tratadas com 0,25, 25,0 e 75 mM de MTX e 10 ng / ml, 50 ng / ml e 100 ng / ml de 5 -FU, separadamente, durante 24 horas a 37 °C. Técnicas de Citometria de Fluxo, PCR em tempo real e Western blotting foram realizadas para análise do nível de apoptose, quantificação do RNAm e quantificação das proteínas dos genes, respectivamente. Para análise estatística foi utilizado o teste ANOVA com correção de Bonferroni. P <0,05 foi considerado significante. Resultados: O aumento da concentração do quimioterápico MTX foi associado com expressão aumentada dos genes MTHFR, DHFR, TYMS e SLC19A1 na linhagem de câncer de laringe (p<0,05) e expressão aumentada dos genes DHFR e SLC19A1 na linhagem de câncer oral (p<0,05). A dose mais baixa de MTX foi associada com expressão diminuída do gene SLC19A1 em câncer de laringe (p<0,05). O aumento da concentração do quimioterápico 5-FU foi associado com expressão aumentada do gene DHFR na linhagem de câncer de laringe (p<0,05) e expressão aumentada dos genes TYMS e DHFR na linhagem de câncer oral (p<0,05). A dose mais baixa de 5-FU foi associada com expressão diminuída do gene SLC19A1. Conclusão: Exposição à alta ou baixa dose dos quimioterápicos MTX e 5-FU, em monoterapia, pode modular o nível de expressão de genes envolvidos no metabolismo do folato.

Submitted by Fabíola Silva (fabiola.silva@famerp.br) on 2016-10-04T14:10:11Z No. of bitstreams: 1 anacarolinabuzzostefanini_dissert.pdf: 2564521 bytes, checksum: fc9c0d25882e400f1002a6ed99657319 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-10-04T14:10:11Z (GMT). No. of bitstreams: 1 anacarolinabuzzostefanini_dissert.pdf: 2564521 bytes, checksum: fc9c0d25882e400f1002a6ed99657319 (MD5) Previous issue date: 2014-10-08 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES / Introduction - The head and neck squamous cell carcinomas (HNSCCs) are among the most frequent types of cancer, with more than 600,000 new cases per year worldwide. The five-year survival rate is low in this disease and one of the reasons is that patients with tumours in early stages frequently exhibit few symptoms, resulting in diagnosis delay and severe morbidity. The understanding of the molecular pathways involved in the initiation and progression of these tumors is therefore important not only for understanding their biology, but also for the development of more effective preventive and therapeutic approaches. In previous studies of our group, the kallikrein 8 gene (KLK8) was observed differentially expressed in laryngeal carcinomas and its surgical margins, which highlights its potential as a tumor marker, similar to another member of KLK family, kallikrein 3 or PSA. Objectives and Methodology - The overall objective of the present study was to investigate the participation of the kallikrein 8 in the HNSCC development. The specific objectives included (a) to investigate the phylogenetic relationships among KLKs genes using the MEGA program, (b) to analyze, by real time PCR, the expression pattern of the KLK8 gene and its most abundant isoform in HNSCC and their surgical margins, (c) to evaluate the effect of elevated expression of KLK8 in HNSCC secretome, using conditioned medium and proteomic and metabolomic approaches, (d) to develop molecular homology modeling of protein hK8 by bioinformatics tools. Results - The phylogenetic analysis of human kallikrein genes and their isoforms confirmed the idea that these genes evolved from a single common ancestor by successive tandem duplications and chromosomal rearrangements facilitated by repetitive elements. The results of gene expression analysis in tumor tissues showed that the variant 1 of KLK8 has significantly reduced levels in HNSCC, unlike the other five variables. The ectopic expression of this variant resulted in changes of cell morphology, increased proliferation, viability and migratory capacity, but no alterations in invasiveness. The data from cells with ectopic expression of KLK8 revealed small differences in their proteomes compared to control cells. Otherwise, these cells exhibited changes in their glycolytic pattern and in the effect of their secretome on the metabolism of other cells. Conclusion - This study was important to answer some questions and raise others questions about the role of KLK8 gene in carcinomas of the head and neck. For the first time, differences in expression of KLK8 isoforms were observed in HNSCC and the effects of ectopic KLK8 expression on the proteome and the secretome of HNSCC cells. / Introdução - Os carcinomas epidermóides de cabeeça e pescoco (CECPs) estão entre os mais frequentes tipos de câncer, com mais de 600 mil novos casos por ano no mundo e taxas de sobrevida reduzidas. Além de sua incidência e mortalidade altas, os CECPs são clinicamente relevantes por causa de sua morbidade, em geral decorrente do diagnóstico tardio. O entendimento das vias moleculares envolvidas na iniciação e na progressão desses tumores é, portanto, importante, não somente para o entendimento de sua biologia, mas também para o desenvolvimento de abordagens preventivas e terapêuticas mais eficazes. Em estudos prévios do nosso grupo, o gene da calicreína 8 (KLK8) foi observado com expressão diferencial entre carcinomas de laringe e suas margens cirúrgicas, o que evidencia seu potencial como marcador tumoral, como ocorre com outro membro de sua família, a calicreína 3 ou PSA. Objetivos e Metodologia – O presente projeto teve como objetivo geral investigar a participação da calicreína 8 no desenvolvimento de CECPs. Seus objetivos específicos compreenderam (a) investigar as relações filogenéticas entre os genes KLKs com o auxílio do programa MEGA, (b) analisar, por PCR em tempo real, o padrão de expressão do gene KLK8 e de sua isoforma mais abundante em CECP e em tecidos normais correspondentes, (c) avaliar o efeito da expressão elevada de KLK8 no secretoma de células de CECP, utilizando ensaios com meio condicionado e abordagens proteômicas e metabolômicas, (d) desenvolver a modelagem molecular por homologia da proteína hK8 com ferramentas de bioinformática. Resultados – A análise filogenética da família de genes das calicreínas humanas e suas isoformas confirmou a idéia de que esses genes evoluíram de um único ancestral comum por sucessivas duplicações em tandem e rearranjos cromossômicos facilitados por elementos repetitivos. Os dados de expressão gênica em tecidos tumorais mostraram que a variante 1 de KLK8 apresenta níveis significativamente reduzidos em CECP, ao contrário das outras cinco variantes. A indução permanente in vitro desta variante resultou em mudança da morfologia celular, aumento de proliferação, viabilidade e capacidade migratória, sem aumento concomitante de invasividade. Os dados obtidos sobre essas células com expressão ectópica de KLK8 revelaram pequenas diferenças em seu proteoma quando comparadas com células controle. Por outro lado, exibiram modificação no padrão glicolítico e no potencial de seu secretoma de afetar o metabolismo de outras células. Conclusão - O presente estudo foi importante para responder a alguns questionamentos e levantar outras questões sobre a função do gene KLK8 em carcinomas de cabeça e pescoço. O estudo identificou, pela primeira vez, as diferenças de expressão entre as isoformas de KLK8 em CECP e os efeitos da indução de sua expressão sobre o proteoma e o secretoma de suas células.

Submitted by Fabíola Silva (fabiola.silva@famerp.br) on 2018-02-19T12:03:16Z No. of bitstreams: 1 thiagohenrique_tese.pdf: 1021380 bytes, checksum: c215716ce3befdfb390cce0309052b80 (MD5) / Made available in DSpace on 2018-02-19T12:03:16Z (GMT). No. of bitstreams: 1 thiagohenrique_tese.pdf: 1021380 bytes, checksum: c215716ce3befdfb390cce0309052b80 (MD5) Previous issue date: 2016-05-16 / Introduction: The total amount of scientific literature on cancer has grown rapidly in recent years. This makes it difficult, if not impossible, to manually retrieve relevant information on the mechanisms that govern the neoplastic process. Furthermore, cancer is a complex disease, and its. Heterogeneity is particularly evident in head and neck squamous cell carcinoma (HNSCC); one of the most common types of cancer worldwide. Objectives: The present study aimed: a) to identify genes/proteins related to HNSCC; b) to identify ligands that specifically target molecular biomarkers of interest; c) to evaluate computationally protein-ligand complexes and d) to evaluate the effect of ligands on gene expression and on carcinoma cell behavior. Methods: The search for potential markers related to HNSCC was performed by literature mining, following a flow chart that included selection of scientific articles in PubMed by MeSH terms, association of articles with genes/proteins through the gene2pubmed file, selection of genes in external data bases and manual curation steps. In order to identify potential ligands, proteins related to HNSCC and involved in inflammatory processes were used to perform molecular docking assays with known anti-inflammatory drugs. Finally, the role of piplartine, a substance extracted from the Piper longum with anti-inflammatory and antineoplastic effects, on proliferation, migration and gene expression was investigated in neoplastic cells. Results: The curated gene-to-publication assignment yielded a total of 1,370 genes related to HNSCC, with specificity of 74% and sensibility of 87%. The diversity of results allowed identifying new and mostly unexplored gene associations, revealing, for example, that processes linked to response to steroid hormone stimulus are significantly enriched with genes related to HNSCC. The results also showed that piplartine decreases viability and cell migration, and alters expression of genes involved in inflammatory responses. Conclusion: This approach allows the identification of genes related to HNSCC and is able to reveal new associations that deserve to be further studied. Piplartine, the compound selected for in vitro studies, interacts with molecular targets similar to known anti-inflammatory drugs, decreases proliferation and cell migration, and alter the expression of genes associated with HNSCC and inflammatory processes. / Introdução: A literatura científica sobre câncer tem crescido rapidamente nos últimos anos, o que torna difícil, se não impossível, a tarefa de recuperar e analisar manualmente as informações relevantes sobre os mecanismos que governam o processo neoplásico. Além disso, o câncer é uma doença complexa e sua heterogeneidade é particularmente evidente no câncer epidermoide de cabeça e pescoço (CECP), um dos tipos mais comuns de câncer em todo o mundo. Objetivos: Os objetivos do estudo foram (a) identificar genes/proteinas relacionados a CECP a partir de dados da literatura, (b) identificar ligantes que interajam eficiente e especificamente com alvos moleculares selecionados, (c) avaliar computacionalmente o complexo proteína/ligante e (d) avaliar a ação de ligantes na expressão gênica e no comportamento de células de carcinoma. Métodos: A busca de marcadores potenciais relacionados a CECP utilizou a mineração da literatura disponível publicamente, seguindo um fluxograma que incluiu seleção de artigos científicos no PubMed por termos MeSH, associação de artigos com genes/proteínas por meio do arquivo gene2pubmed, seleção de genes em bancos de dados externos e etapas de curação manual. As proteínas identificadas como sendo relacionadas a CECP que apresentaram envolvimento em processos inflamatórios foram submetidas a experimento de docking molecular para identificação de seus ligantes entre drogas disponíveis no mercado. Finalmente, o papel da piplartina, uma substância natural extraída da pimenta Piper longum com evidências de ação anti-inflamatória e antineoplásica, foi avaliado na proliferação, na migração e na expressão gênica de células neoplásicas. Resultados: Um total de 1370 genes relacionados a CECP foi identificado pela abordagem proposta, que mostrou especificidade de 74% e sensibilidade de 87%. A diversidade dos dados permitiu obter associações potenciais ainda não exploradas, revelando, por exemplo, que a resposta ao estímulo esteróide hormonal está significativamente enriquecida com genes relacionados a CECP. Os resultados também mostraram que a piplartina reduz a viabilidade e a migração celular e modifica o padrão de expressão de um painel de genes que atuam em processos inflamatórios. Conclusão: A abordagem empregada permite a identificação de genes relacionados à CECP e revela novas associações que merecem ser estudadas. O composto piplartina selecionado para estudos in vitro interage com alvos moleculares de forma semelhante à de medicamentos anti-inflamatórios conhecidos e é capaz de diminuir a proliferação e a migração celular e de alterar a expressão de genes relacionados à CECP e a processos inflamatórios.

Como em diversos tumores sólidos, no câncer de cabeça e pescoço (HNSCC) a presença de metástases é um importante fator de mal prognóstico. Até o momento, estudos indicam que, no microambiente inflamatório tumoral, a estimulação com o Fator de Necrose Tumoral Alpha (TNF-?) leva à ativação de diferentes vias moleculares, como a via do Fator Nuclear Kappa-B (NF-kB) e PI3K/AKT, que inibem GSK3? e consequentemente, promovem a estabilização e translocação nuclear de SNAIL e betacatenina. De um modo geral, em diversos tipos de câncer, enquanto beta-catenina tem ação em promover a proliferação celular, membros da família SNAIL são capazes de induzir o processo de transição epitélio-mesenquimal (EMT). Sabe-se que os eventos de EMT estão envolvidos tanto na iniciação de metástases quanto na geração de célulastronco tumorais (CSCs), que por sua vez estão associadas à falha terapêutica e recidiva, devido à características que lhe conferem resistência aos tratamentos convencionais. Ao silenciar a expressão gênica de modo pós-transcricional, microRNAs (miRs) tem sido associados à regulação tanto da EMT quanto da geração de CSCs. Com uso da abordagem de High-Content Screening (HCS, análise celular multiparamétrica quantitativa por microscopia automatizada), buscamos investigar a capacidade de um grupo de 30 miRs humanos, muitos deles envolvidos em vias inflamatórias e na pluripotência, em modular aspectos relacionados a sobrevivência celular e EMT, em uma linhagem celular derivada de HNSCC (FADU) sob estímulo inflamatório. Inicialmente, avaliamos o potencial do TNF-? em modular parâmetros morfométricos, bem como a presença/localização de proteínas relacionadas com a EMT e capacidade migratória. Posteriormente, avaliamos o efeito de moléculas miméticas dos miRs em suprimir ou potencializar a sobrevivência celular e EMT em células estimuladas com TNF-?, seguido da identificação de transcritos alvos preditos (bem como das vias de sinalização enriquecidas para estes alvos) comumente alvejados por grupos de miRs que levaram a alterações multiparamétricas similares. De modo geral, miRs que alvejaram RELA e AKT2/AKT3 foram responsáveis pela redução na proliferação celular e EMT, enquanto o oposto foi observado em miRs que alvejaram GSK3B e ARHGAP5 (inibidor de RhoA). O silenciamento por siRNAs específicos contra RELA e CTNNB1, causou à redução na sobrevivência celular, enquanto que o silenciamento de AKT1 e CTNNB1 levou à redução na expressão proteica de SNAIL/SLUG. Finalmente, o silenciamento de RELA, AKT1, GSK3B e CTNNB1 levou a redução na sobrevivência celular e indução a apoptose mesmo na ausência de estimulação com TNF-?. Como um todo, nós demonstramos que a abordagem de HCS permitiu a identificação de miRs com efeitos fenotípicos similares (no contexto de proliferação e EMT) e que, a predição de alvos compartilhados por estes miRs, levou à identificação de alvos e vias de sinalização relevantes do ponto de vista terapêutico. / Like many solid cancers, in head and neck cancer (HNC) the presence of metastases is an important factor of poor prognosis. To date, studies indicate that, in the tumor inflammatory microenvironment, stimulation with Tumor Necrosis Factor Alpha (TNF-?) leads to the activation of different molecular pathways, such as the Nuclear Factor-Kappa B (NF-kB) and PI3K/AKT pathway, inhibiting GSK3? and the degradation of SNAIL and beta-catenin, stabilizing them promoting their nuclear translocation. In general, in several types of cancer, while beta-catenin acts to promote cell proliferation, members of the SNAIL family induce the epithelial-mesenchymal (EMT) transition process. It is known that EMT events are involved both in the initiation of metastases and generation of cancer stem cells (CSCs), which in turn are associated with therapeutic failure and relapse, due to its properties that confer resistance to conventional treatments. By silencing gene expression in a post-transcriptional fashion, microRNAs (miRs) have been associated with the regulation of both EMT and CSCs generation. Using the HighContent Screening (HCS) approach, we sought to investigate the ability of a group of 30 human miRs, many of them involved in inflammatory pathways and pluripotency, to modulate aspects related to cell survival and EMT, in a HNSCC-derived cell line (FADU) under inflammatory stimuli. Initially, we evaluated the potential of TNF-? in modulating morphometric parameters, as well as the presence/location of EMT-related proteins and migratory capacity. Subsequently, we evaluated the effect of miRs mimetic molecules on suppressing or potentiating cell survival and EMT in TNF-?-stimulated cells, followed by the identification of predicted target transcripts (as well as signaling pathways enriched for these targets) commonly targeted by groups of miRs that led to similar multiparametric changes. Overall, miRs that targeted RELA and AKT2/AKT3 were responsible for the reduction in cell proliferation and EMT, while the opposite was observed in miRs that targeted GSK3B and ARHGAP5 (RhoA inhibitor). Gene silencing by specific siRNAs against RELA and CTNNB1 caused a reduction in cell survival, while silencing of AKT1 and CTNNB1 led to reduced protein expression of SNAIL/SLUG. Finally, the silencing of RELA, AKT1, GSK3B and CTNNB1 led to a reduction in cell survival and induction of apoptosis even in the absence of TNF-? stimulation. As a whole, we demonstrated that the HCS approach allowed the identification of miRs with similar phenotypic effects (in the context of proliferation and EMT) and that the prediction of targets shared by these miRs led to the identification of relevant targets and signaling pathways from the therapeutic point of view.

O câncer cervical é o segundo mais comum em mulheres em países em desenvolvimento, sendo causado por infecção persistente por Papilomavírus Humano (HPV). Quando esta persistência ocorre, entre outros fatores, está relacionada a mecanismos de evasão do sistema imune apresentados pelo vírus. A frequência de macrófagos aumenta com a progressão da lesão cervical e há aumento de células mielóides no baço de camundongos com tumor. Este trabalho tem como objetivo observar os efeitos sistêmicos de tumores associados ao HPV sobre a proliferação e recrutamento de células do sistema imune e identificar fatores que tenham papel nesses mecanismos. Utilizando modelos de tumor in vivo, observou-se que tumores associados ao HPV recrutam mais células para o tumor e induzem maior proliferação celular. Também avaliamos o perfil de expressão de citocinas nas linhagens tumorais e o perfil geral de expressão de proteínas através de eletroforese 2D. Com isto, demonstramos que linhagens tumorais positivas para HPV apresentam maior expressão de IL-6, IL-8, CXCL1, sICAM e Serpina E1. / Cervical cancer is the second most common type of cancer in women in developing countries. Its main etiologic factor is persistent infection with high risk human papillomavirus (HPV). This persistence occurs only in some cases and, among other factors, is related to mechanisms of immune evasion displayed by the virus. There is an increase in the frequency of macrophages proportional to cervical intraepithelial lesion grade and an increase of myeloid cells in the spleen of tumor bearing mice. This work aims to observe the systemic effects of HPV associated tumors on the proliferation and recruitment of immune cells, and identify factors that have a role in these mechanisms. Using in vivo tumor models, we found that HPV positive tumors recruit a higher percentage of cells and induce cellular proliferation. We also studied cytokine expression profiles of tumor cell lines, and performed proteomic assay with tumor cells transduced with HPV oncogenes. Our data shows that HPV associated tumor cell lines display higher expression of IL-6, IL-8, CXCL1, sICAM and Serpin E1.

A Disfunção Temporomandibular (DTM) se refere a várias doenças que envolvem os músculos da mastigação e/ou a articulação temporomandibular (ATM). Ao longo da história, o desenvolvimento de técnicas de imagem possibilitou a avaliação das disfunções intra-articulares. A Ressonância Magnética (RM) é considerada o melhor método de avaliação de imagem para diagnosticar doenças da ATM e o exame mais preciso para detectar a posição do disco articular e visualizar estruturas ósseas, como a cabeça da mandíbula e a fossa mandibular, complementando o exame clínico. A associação entre sinais e sintomas de DTM e achados na RM é controversa na literatura e a correlação entre a posição da cabeça da mandíbula dentro da fossa mandibular e a sintomatologia de pacientes diagnosticados com DTM foi pouco elucidada pelos autores. O objetivo do estudo foi analisar os achados imaginológicos da ressonância magnética quanto à posição da cabeça da mandíbula e quanto à posição do disco articular, verificando sua correlação com os sinais clínicos de estalo e de dor à palpação muscular e articular relatados pelo paciente. Foram analisados 163 prontuários contendo ficha clínica e exame de RM de pacientes com DTM. As fichas clínicas forneceram dados referentes a sinais e sintomas dos pacientes, como presença de estalo e de dor à palpação, e o exame de imagem possibilitou a classificação da posição do disco articular (em posição, deslocado com redução e deslocado sem redução) e da cabeça da mandíbula (concêntrica, posterior e anterior). As variáveis clínicas e imaginológicas foram avaliadas por meio de um método de classificação que proporcionou uma análise dos dados sob o ponto de vista holístico, levando em consideração a situação clínica das duas ATMs do mesmo paciente simultanamente. Os dados obtidos foram analisando usando o teste exato de Fischer. A classificação adotada dificultou a comparação com outros estudos, já que usualmente os autores fazem a somatória das articulações do lado direito e esquerdo, porém é válida por proporcionar uma análise das variáveis clínicas e imaginológicas dentro de um sistema, que é o indivíduo. No estudo, 20,2% dos pacientes eram homens e 79,8% eram mulheres com média de idade de aproximadamente 37 anos. Os pacientes se distribuíram em maior porcentagem quando houve a mesma posição dos discos articulares bilateralmente (65,0%), porém quanto à cabeça da mandíbula, combinações heterogêneas foram observadas em maior quantidade (60,7%). Apenas 19,1% da amostra não possuía estalo e 25,8% apresentavam dor posterior à cápsula articular. Os músculos mais álgicos foram pterigoideo lateral e masseter, já os menos álgicos foram temporal posterior e cervical. A média de dor total muscular e articular (10,56) se mostrou maior do que a média de dor muscular (9,60) nos pacientes. A dor total em pacientes com ausência de dor posterior à cápsula articular foi significativamente menor do que a dor total em pacientes que apresentam dor posterior à cápsula bilateral. Não houve correlação entre a posição do disco articular e da cabeça da mandíbula, nem entre as variáveis clínicas e imaginológicas. A nova metodologia proposta permitiu a observação de que a maioria dos pacientes apresenta discos bilateralmente concordantes quanto à posição e que a presença de artralgia está relacionada à maior quantidade de músculos álgicos à palpação. / Temporomandibular Disorder (TMD) refers to various diseases involving masticatory muscles and/or temporomandibular joint (TMJ). Throughout history, the development of imaging techniques enabled the evaluation of intra-articular disorders. Magnetic resonance imaging (MRI) is considered the best method for evaluating image to diagnose TMJ diseases and most accurate test to detect the position of the articular disc and display bone structures as the condyle and glenoid fossa, complementing the clinical examination. The association between signs and symptoms of TMD and MRI findings in the literature is controversial and the correlation between the position of the condyle within the fossa and symptoms of patients diagnosed with TMD was somewhat elucidated by the authors. The aim of the study was to analyze the findings of magnetic resonance imaging as the position of the condyle (posterior, anterior or concentric) and on the position of the articular disc (in position, displaced with or without reduction), verifying its correlation with clinical signs clicking and pain on palpation of muscle and joint reported by the patient. We analyzed 163 records containing medical records and MRI in patients with TMD. The medical records provided data for signs and symptoms of patients such as presence of clicking and pain on palpation, and imaging examination allowed the classification of the position of the articular disc (in position, displaced with reduction and displaced without reduction) and condyle (concentric, posterior and anterior). The clinical and imaging procedures were evaluated using a grading method that provided an analysis of the data under the holistic point of view, taking into account the clinical condition of the two TMJs of the same patient. Data were analyzed using the Fisher exact test. The classification adopted it was difficult to compare with other studies, since usually the authors make the sum of the joints of the right and left side, however it is valid for providing an analysis of clinical and imaging procedures within a system, that is the individual. In the study, 20.2% were men and 79.8% were women with a mean age of approximately 37 years. The patients were divided into greater percentage when there was the same position of the articular disc bilaterally (65.0%), but as condyle heterogeneous combinations were observed in greater amounts (60.7%). Only 19.1% of the sample had no clicking and 25.8% had joint pain. The muscles more algesic were lateral pterygoid and masseter muscles, the less pain conditions were already temporal posterior and cervical. The average overall muscle and joint pain (10.56) was larger than the average muscle pain (9.60) in patients. The total pain in patients with no joint pain was significantly lower than the total pain in patients with bilateral joint pain. There was no correlation between the position of the articular disc and the condyle, or between clinical and imaging procedures. The new methodology allowed the observation that the majority of patients have bilateral agreement discs considering the position and the presence of arthralgia is closely related to the amount of muscles on palpation pain conditions.

A visualização 3D de simulações pelo Método dos Elementos Finitos (MEF) ainda é uma experiência limitada em função da falta de realismo 3D nos monitores disponíveis. Além do monitor 3D realista, a melhor visualização destas simulações depende de uma apresentação MEF desenvolvida adequadamente, de forma a tirar maior proveito deste realismo 3D. Neste trabalho, é realizado o desenvolvimento de um visualizador MEF 3D, que reproduz os efeitos estereoscópicos e de rastreamento de cabeça (head-tracking), explorando melhor as percepções de profundidade com hardware acessível e bibliotecas gráficas utilizadas em aplicações convencionais. / The 3D visualization of Finite Element Method (FEM) simulations is still a limited experience due to the lack of realism of 3D monitors available. In addition to the realistic 3D monitor, better visualization of these simulations depends on a MEF presentation properly developed in order to get the most out of 3D realism. In this work, a 3D MEF viewer is develop, including stereoscopy and head tracking 3D effects, that better explores human depth cues using hardware from cost and benefit perspective and graphics libraries used in conventional applications.

Introdução. Considerando-se a incidência e os reflexos na qualidade de vida, os tumores de cabeça e pescoço constituem-se em relevante problema de saúde pública. A medida de efeito dos principais fatores de risco, tabaco e álcool, no risco de acometimento de cânceres de cabeça e pescoço tem sido pouco relatada no Brasil. Objetivo. Verificar as variações de risco decorrentes do tabagismo e do consumo de bebidas alcoólicas no câncer de cabeça e pescoço nas regiões Sudeste, Sul e Centrooeste do Brasil. Sujeitos e Métodos. Estudo caso-controle de base hospitalar conduzido entre setembro de 1998 e maio de 2003, com base em 1.594 casos diagnosticados com carcinoma espinocelular de cabeça e pescoço, confirmados histologicamente, em hospitais das cidades de São Paulo e Rio de Janeiro (Sudeste), Porto Alegre e Pelotas (Sul), Goiânia (Centro-oeste), e 1.292 controles. Os pacientes foram entrevistados por meio de questionários com informações sobre características e hábitos, bem como dados clínicos e laboratoriais para o diagnóstico de câncer de cabeça e pescoço. A OR (odds ratio) e IC 95 por cento (intervalo com 95 por cento de confiança) para câncer de cabeça e pescoço associados ao tabaco e álcool foram estimados por regressão logística não condicional. O modelo foi ajustado por idade, sexo, escolaridade, consumo de frutas e legumes. Resultados. Na região Centro-oeste observaram-se riscos mais expressivos para tabagismo, ex-fumantes (OR 3,5; IC95 por cento 1,6-7,4) e fumantes (OR 13,6 IC95 por cento 6,4-28,6), com efeito dose-resposta para frequência e tempo de consumo na exposição cumulativa, de 1-9 maços-ano (OR 1,9; IC 95 por cento 0,8-4,4) à 40 maços-ano e mais (OR 8,6; IC95 por cento 4,2-17,5). No consumo de bebidas alcoólicas, observou-se riscos mais elevados para consumidores atuais na região Sul (OR 4,7 IC95 por cento 2,8-7,9); na exposição cumulativa o efeito dose-resposta para frequência de consumo foi nítido a partir da categoria 0-4,99g/ml/dia nas regiões Sudeste, Sul e Centro-oeste. Conclusões. As diferenças que puderam ser observadas no risco para tumores de cabeça e pescoço decorrentes do tabagismo e consumo de bebidas alcoólicas, sugerem diferenças no perfil de consumo nas regiões Sudeste, Sul e Centro-oeste, provavelmente, relacionados ao uso de tipos de preparo do tabaco e consumo de diferentes tipos de bebidas alcoólicas / Introduction. Considering the incidence and reflections on the quality of life, the head and neck tumors constitute an important public health problem. The extent of effect of the main risk factors, tobacco and alcohol, in risk of involvement of head and neck cancers has been rarely reported in Brazil. Objectives. Check the variations the risks caused by smoking and alcohol consumption in head and neck cancer in the Southeast, South and Midwest regions of Brazil. Subjects and Methods. A case-control hospitalbased, conducted between September 1998 and May 2003, based on 1.594 cases diagnosed with squamous cell carcinoma of the head and neck, histologically confirmed, in hospitals in the cities of São Paulo and Rio de Janeiro (Southeast), Porto Alegre and Pelotas (South), Goiania (Midwest), and 1.292 controls. Patients were interviewed using questionnaires with information about characteristics and habits, as well as clinical and laboratory data for the diagnosis of head and neck cancer. The odds ratio (OR) and IC95 per cent (confidence interval 95 per cent ) of head and neck cancer associated with tobacco and alcohol were estimated by unconditional logistic regression. The model was adjusted for age, sex, education, consumption of fruit and vegetables. Results. In the Midwest region we observed more significant risks for smoking, former smokers (OR 3,5; IC95 per cent 1,67,4) and smoking (OR 13,6; IC95 per cent 6,4-28,6), with doseresponse effect for frequency and time consumption in the cumulative exposure, from 1-9 pack-years (OR 1.9, IC95 per cent 0,84,4) to 40 pack-years and more (OR 8,6; IC95 per cent 4,2 17,5). In alcohol consumption was observed increased risks for current consumers in the South (OR 4,7; IC95 per cent 2,8 7,9); in the cumulative exposure dose-response effect for frequency of consumption was clear from the category 0-4,99 g/ml/day in the Southeast, South and Midwest regions. Conclusions. The differences in risk were observed for cancers of the head and neck caused by smoking and alcohol consumption suggest differences in the consumption profile in Southeast, South and Midwest regions, probably related to the use of types of tobacco and consumption of different types of alcoholic beverages

Orientador: Maria Lucia Marçal Mazza Sundefeld / Banca: Tânia Adas Saliba Rovida / Banca: Eder Ricardo Biasoli / Banca: Dalton Francisco de Andrade / Banca: José Eduardo Corrente / Resumo: Introdução- O câncer é responsável por mais de 12% de todas as causas de óbito no mundo, chegando a matar mais de 7 milhões de pessoas por ano. Suspeitar e diagnosticar precocemente o câncer implica em conhecimento relativamente básico sobre o assunto. O questionário é um bom instrumento para medição do conhecimento, e pode ser validado pela Teoria da Resposta ao Item - TRI. O objetivo deste trabalho foi a criação de um instrumento para avaliar o conhecimento sobre o câncer de cabeça e pescoço em diferentes níveis de habilidade. Metodologia: Neste trabalho, inicialmente, foram criados 32 itens para avaliar o conhecimento sobre o câncer de cabeça e pescoço, os quais, antes de serem aplicados a escolares do 3º. Ano do Ensino Médio (n=994), foram incorporados a 24 outros itens, sobre o mesmo construto e população alvo semelhante (n= 1012). Esses itens haviam sido calibrados pela TRI, pelo modelo logístico unidimensional de 3 parâmetros, gerando uma escala (0,1), pela função de informação do item. Durante o processo de incorporação, três itens foram eliminados, restando 53 itens, para esta população. Posteriormente, ainda neste trabalho, 68 novos itens foram criados, sob o mesmo construto, e aplicados aos graduandos dos últimos anos do Curso de Odontologia (n=95) e a cirurgiões dentistas (n=284), totalizando 379 respondentes. Esses 68 itens também foram calibrados naquela mesma escala (0,1), com 2385 respondentes. Resultados: Após a análise, 60, daqueles 68 itens foram mantidos, que somados aos 53 itens iniciais, formaram um questionário com 113 itens sobre câncer de cabeça e pescoço calibrados pela TRI. Também está apresentada a sequência metodológica do processo de incorporação dos itens em uma mesma escala de habilidade. Conclusão: Ainda que um construto não possa ser explorado em sua plenitude semântica, a elaboração... / Abstract: Introduction- Cancer is responsible for over 12% of all causes of death in the world, killing more than 7 million people a year. Early detection and early diagnose cancer implies in basic knowledge on the subject. The questionnaire is a good tool for measuring knowledge, and can be validated by the Item Response Theory - IRT. The aim of this study was to build a tool to assess the knowledge of head and in different level of ability. Methodology: At the beginning 32 items were designed to assess knowledge of head and neck cancer. Before being applied to 3rd High School Students (n=994) these items were joint to 24 others items over the same construct and the same population(n=1012). The previous items had being calibrated by IRT, by parameters of one-dimensional logistic model, getting a scale (0,1) by information function of the item. Over the incorporation process three items were eliminated, coming 53 items for the same population. Further, still in the same study 68 new items, over the same construct and applied to undergraduates of the last years of the Dental School (n-95) and to dental Surgeon (n-284) with a total of 379 respondents. The 68 items were also designed and calibrated in the same scale (o,1), now with a total of 2385 respondents. Results: After the analysis, 60 of the 68 items were kept and added to the previous 53 items and they comprise a questionnaire with 113 items on head and neck cancer calibrated by IRT. This study also presents the methodological sequence of the incorporation process of items in the same scale of ability. Conclusion: Although a construct cannot be totally exploited, the elaboration of this tool to assess the knowledge of head and neck cancer was the result of through analysis. We believe that this bank of items will be eventually useful, as same items might be used to design several different questionnaires allowing different... / Doutor

Orientador: Daniel Galera Bernabé / Resumo: Estudos sugerem que a supressão de melatonina e disfunção circadiana em trabalhadores noturnos podem estar relacionadas ao desenvolvimento e à progressão do câncer. Pesquisas têm mostrado também que a incidência tumoral pode ser aumentada pela pinealectomia. Entretanto, nenhum estudo avaliou a influência da cirurgia de pinealectomia sobre o desenvolvimento e a progressão do câncer de boca. No presente estudo, nós investigamos os efeitos da supressão de melatonina sobre a ocorrência e a progressão tumoral um modelo pré-clínico de câncer de boca induzido quimicamente. Nós demonstramos, pela primeira vez, que ratos pinealectomizados tiveram maior ocorrência de carcinoma espinocelular de boca, comparado aos animais controle. Ratos pinealectomizados também exibiram volume e espessura tumorais cerca de 3 e 2 vezes maior que animais sham, respectivamente. Além disso, pinealectomia induziu atrofia do epitélio não-tumoral adjacente às lesões bucais. Os ratos pinealectomizados apresentaram maior resposta inflamatória no front de invasão tumoral, caracterizada principalmente pelo aumento do número de eosinófilos e macrófagos associados ao tumor. Tumores de ratos submetidos à pinealectomia exibiram maior imunoexpressão de ERK1/2 e p53 no microambiente tumoral. Estes resultados revelam que a supressão de melatonina acelera o desenvolvimento e a progressão do câncer de boca associado ao aumento de eosinófilos e macrófagos no front de invasão tumoral e maior expressão de ERK1/2 e p53 no mic... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Studies suggest that melatonin suppression and circadian dysfunction in shift workers can be related to cancer risk. Furthermore, investigations have shown that pinealectomy promotes higher tumor incidence in rats. However, no study evaluated the influence of pinealectomy surgery on oral cancer onset and progression. In the current study, we investigated the effects of melatonin suppression on tumor occurrence and progression in a preclinical model of oral cancer. We demonstrated for the first time that pinealectomized rats had higher oral squamous cell carcinoma occurrence than sham animals. Furthermore, pinealectomized animals displayed tumor volume and thickness about 3 times and twice higher than sham-operated rats, respectively. Moreover, pinealectomy induced atrophy of non-tumor epithelium adjacent to the oral lesions. Pinealectomized rats showed higher mean number of tumor-associated macrophages and eosinophils in the carcinoma invasion front. In addition, tumors from pinealectomized rats displayed increased immunoexpression of ERK1/2 and p53 in the tumor microenvironment. These results reveal that melatonin suppression promotes higher oral cancer occurrence and progression associated with increasing of inflammatory cells and ERK1/2 and p53 expressions in the tumor microenvironment. / Mestre