Submitted by Diana Leocata de Queiroz null (diana_leocata@hotmail.com) on 2017-12-04T13:26:05Z No. of bitstreams: 1 TRANSPLANTE INTRATECAL DE CÉLULAS ESTROMAIS MESENQUIMAIS MULTIPOTENTES EM EQUINOS ATRAVÉS DO ESPAÇO INTERVERTEBRAL C1-C2 finalf.pdf: 1646738 bytes, checksum: b542c7fc14354a10598a5cdea4680f6b (MD5) / Submitted by Diana Leocata de Queiroz null (diana_leocata@hotmail.com) on 2017-12-04T14:43:24Z No. of bitstreams: 1 TRANSPLANTE INTRATECAL DE CÉLULAS ESTROMAIS MESENQUIMAIS MULTIPOTENTES EM EQUINOS ATRAVÉS DO ESPAÇO INTERVERTEBRAL C1-C2 finalf.pdf: 1646738 bytes, checksum: b542c7fc14354a10598a5cdea4680f6b (MD5) / Submitted by Diana Leocata de Queiroz null (diana_leocata@hotmail.com) on 2017-12-05T14:11:15Z No. of bitstreams: 1 TRANSPLANTE INTRATECAL DE CÉLULAS ESTROMAIS MESENQUIMAIS MULTIPOTENTES EM EQUINOS ATRAVÉS DO ESPAÇO INTERVERTEBRAL C1-C2 finalf.pdf: 1646738 bytes, checksum: b542c7fc14354a10598a5cdea4680f6b (MD5) / Approved for entry into archive by ROSANGELA APARECIDA LOBO null (rosangelalobo@btu.unesp.br) on 2017-12-06T16:45:00Z (GMT) No. of bitstreams: 1 queiroz_dl_me_bot.pdf: 1646738 bytes, checksum: b542c7fc14354a10598a5cdea4680f6b (MD5) / Made available in DSpace on 2017-12-06T16:45:00Z (GMT). No. of bitstreams: 1 queiroz_dl_me_bot.pdf: 1646738 bytes, checksum: b542c7fc14354a10598a5cdea4680f6b (MD5) Previous issue date: 2017-11-27 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / Estudos demonstram o grande potencial do uso das células estromais mesenquimais multipotentes (MSCs) como terapia celular. Seu uso em lesões neurológicas, que usualmente apresentam difícil regeneração, tem sido estudado pelo fato das MSCs apresentarem baixa imunogenicidade efeitos imunomoduladores e neuroregenerativos. Nesse contexto, o presente estudo avaliou a viabilidade e a segurança do transplante de MSCs alogênicas provenientes do tecido adiposo, medula óssea e cordão umbilical de equinos, pela via intratecal através do espaço intervertebral C1-C2, por meio de exame neurológico seriado, análises hematológicas e determinação dos níveis séricos de proteínas de fase aguda. Foram utilizados 16 equinos saudáveis, divididos em quatro grupos: grupo SHAM (SHAM) que recebeu o transplante de salina tamponada com fosfato (PBS); grupo tecido adiposo (GTA), recebeu MSCs de origem do tecido adiposo; grupo medula óssea (GMO), recebeu MSCs de origem da medula óssea; e grupo cordão umbilical (GCU), recebeu células de origem da matriz do cordão umbilical. Foram realizadas três aplicações com intervalo de 30 dias em cada grupo, e coletou-se amostras de sangue, nos momentos que antecederam os transplantes, M0, M30 e M60 e 24 horas, após o transplante, M1, M31, M61. E por último foi realizada uma coleta 30 dias após M60, caracterizando M90. Não foram observadas alterações do exame clinico, hematológico e nas proteínas de fase aguda relacionadas aos sucessivos transplantes intratecais de MSCs, tampouco observou-se alterações que contra indicassem o uso de qualquer uma das fontes celulares, demonstrando que o protocolo utilizado, bem como qualquer uma das fontes celulares é viável e seguro. / Studies demonstrate the great potential of using multipotent mesenchymal stromal cells (MSCs) as cell therapy. Its use in neurological lesions, which usually present difficult regeneration, has been studied because MSCs have low immunogenicity and immunoregulatory and neuroregenerative effects. In this context, the present study evaluated the viability and safety of transplantation of allogeneic MSCs from the adipose tissue, bone marrow and umbilical cord of horses, through the intrathecal route through the C1-C2 intervertebral space, through serial neurological examination, hematological analyzes and determination of serum levels of acute phase proteins. Sixteen healthy horses were used, divided into four groups: SHAM group (SHAM) that received phosphate buffered saline (PBS) transplantation; adipose tissue group (GTA), received adipose tissue MSCs; bone marrow group (GMO), received MSCs from bone marrow origin; and umbilical cord (UGC) group, received cells from the umbilical cord array. M0, M30 and M60 were collected at the time of the transplantation, M1, M31 and M61 and 24 hours after transplantation. And finally a collection was performed 30 days after M60, characterizing M90. There were no changes in the clinical, hematological and acute phase-related proteins related to successive intrathecal transplantations of MSCs, nor were there alterations that contra indicated the use of any of the cellular sources, demonstrating that the protocol used, as well as any of cellular sources is viable and safe.

O objetivo do estudo foi estimar a biodisponibilidade de duas fontes de cobre: orgânica (cobre metionina) e inorgânica (sulfato de cobre) na dieta de cordeiros. O experimento foi conduzindo na FZEA USP de Pirassununga utilizando 40 cordeiros da raça Merino X Texel, que foram distribuídos aleatoriamente em cinco grupos, e submetidos a cinco tratamentos, totalizando oito animais por tratamento: Tratamento 0: Dieta controle sem adição de Cu; Tratamento 1: 10 mg de Cu/Kg de MS na forma de sulfato de Cu; Tratamento 2: 30g de Cu/Kg de MS na forma de sulfato de Cu; Tratamento 3: 10 mg de cu/kg de MS na forma de cobre metionina; Tratamento 4: 30 mg de cu/kg de MS na forma de cobre metionina. Foram feitas biópsias do fígado dos animais no tempo zero para análise de cobre e colhidas amostras de sangue nos dias 0, 28, 56 e 84 dias para determinação de Cu sérico, atividade de ceruloplasmina e enzimas de função hepática. Ao final do experimento, os animais foram abatidos para colheita de amostras de fígado, músculo e rim, para determinação dos teores de Cu e da enzima superóxido dismutase (SOD). Nos últimos dez dias do experimento foi realizado um balanço metabólico de cobre. A biodisponibilidade foi calculada pela técnica \"slope ratio\", utilizando como parâmetros a concentração de cobre no fígado. Não houve diferença (P>0,05) no desempenho dos animais (peso vivo e ganho de peso) entre os tratamentos. A concentração sérica de AST e ALT permaneceu abaixo dos níveis de intoxicação em todos os tratamentos, durante todo o período. A atividade da ceruloplasmina não diferiu entre os tratamentos (P>0,05). O teor de cobre no soro, na biópsia do fígado e no músculo não foi diferente (P>0,05) entre os tratamentos. Entretanto, a concentração do mineral no fígado dos animais suplementados (284,28 mg/kg) foi maior (P<0,05), quando comparados ao grupo controle (168,01 mg/kg), assim como o Cu-met 30 mg/kg (341,29 mg/kg) foi superior (P<0,05) ao de 10mg/kg MS (263,02 mg/kg). A atividade da SOD nos animais suplementados (µmol/mg prot foi superior à do grupo controle. Nos rins o teor de cobre foi superior nos animais que receberam 30mg/kg de MS de Cu-met (6,65 mg/kg) em relação aos que receberam 10 mg/kg de MS da mesma fonte (3,86 mg/kg). A absorção e a retenção aparentes do cobre foram maiores para a fonte inorgânica, comparada com a orgânica. A biodisponibilidade do cobre determinada pela concentração de cobre no fígado, utilizando a técnica do \"slope ratio\", considerando o CuSO4 como padrão (100%), apresentou disponibilidade de 150,64% para o Cu-met. / The study was conducted to estimate the relative bioavailability of two sources of supplemental copper: organic (copper methionine) and inorganic (copper sulfate) in the diet of lambs, by analyzing the concentration of copper and enzymes in the liver and metabolic balance calculation, using 40 lambs breed Merino X Texel, which was fed three concentrations of copper (basal + two additions) in two sources, which were randomly allotted to five groups, and subjected to five treatments: treatment 0: control (diet without addition of Cu); treatment 1: (diet with 10 mg Cu/Kg DM of CuSO4); Treatment 2: (diet with 30 g Cu/Kg DM of CuSO4); Treatment 3: (diet with 10 mg Cu/kg DM of copper methionine; Treatment 4: (diet with 30 mg cu/kg DM of copper methionine). Liver biopsies were made on 0 d. Blood samples were taken via the jugular vein on 0, 28, 56 and 84 d to determine serum Cu and serum ceruloplasmin and liver transaminases (AST, ALT) concentrations. The animals were slaughtered and samples of liver, kidney and muscle were taken for the determination of the levels of Cu and superoxide dismutase activity. In the last ten days of the experiment a metabolic balance of copper was conducted. The bioavailability was calculated by the \"slope ratio\" technique, using the concentration of copper in the liver as parameter. There was no difference (P >0.05) on animal performance (live weight and weight gain) among treatments. The serum AST and ALT levels remained below poisoning in all treatments during the period. The ceruloplasmin activity did not differ between treatments (P>0.05). The copper content in biopsy, serum and muscle was not different (P>0.05) between treatments. However, the mineral concentration in the liver of animals fed (284.28 mg/kg) was higher (P <0.05) when compared to the control group (168.01 mg/kg ) and 30 Cu -met mg/kg (341.29 mg/kg) was higher (P <0.05) at 10mg/kg MS (263.02 mg/kg). The SOD activity in the supplemented animals (mmol/mg prot) was superior to the control group. Copper in Kidneys was higher in animals that received 30mg/kg MS meth-Cu (6.65mg/kg) compared those receiving 10 mg/kg DM from the same source (3.86 mg/kg). Apparent absorption and retention of copper were higher for inorganic source, compared with the organic. The bioavailability determined by the concentration of copper in the copper liver, using the technique of \"slope ratio\", considering CuSO4 as standard ( 100% ) presented availability of 150.64 % for Cu-met.

O presente trabalho teve como objetivo estudar os efeitos que as fontes orgânicas e inorgânicas de cobre e enxofre possuem na interação cobre-enxofre-molibdênio, estimando a biodisponibilidade de duas fontes de cobre na dieta de ovinos. Para isso, foram utilizados 40 ovinos desmamados, com aproximadamente 3 meses e peso médio 20 kg, distribuídos em 10 tratamentos, sendo: 1) dieta basal; 2) dieta basal contendo 10 mg de molibdênio/kg de MS; 3) dieta basal + 10 mg cobre inorgânico/kg de MS + 0,2% enxofre inorgânico/kg de MS; 4) dieta basal + 10 mg cobre inorgânico/kg de MS + 0,2% enxofre orgânico/kg de MS; 5) dieta basal + 10 mg cobre orgânico/kg de MS + 0,2% enxofre inorgânico/kg de MS; 6) dieta basal + 10 mg cobre orgânico/kg de MS + 0,2% enxofre orgânico/kg de MS; 7) dieta com 10 mg molibdênio + 10 mg cobre inorgânico/kg de MS + 0,2% enxofre inorgânico/kg de MS; 8) dieta com 10 mg molibdênio + 10 mg cobre inorgânico/kg de MS + 0,2% enxofre orgânico/kg de MS; 9) dieta com 10 mg molibdênio + 10 mg cobre orgânico/kg de MS + 0,2% enxofre inorgânico/kg de MS; 10) dieta com 10 mg molibdênio + 10 mg cobre orgânico/kg de MS + 0,2% enxofre orgânico/kg de MS. O experimento teve duração total de 84 dias, sendo realizadas pesagens dos animais nos dias 1, 28, 56 e 84 dias para acompanhamento do desenvolvimento. Foram realizadas também coletas sanguíneas para estudo de teores de cobre, enxofre e molibdênio sanguíneos, teores de glicose, albumina, ureia, colesterol, triglicerídeos, hematócrito e ceruloplasmina. Foram realizadas biópsias do fígado no tempo zero para análises de cobre, enxofre e molibdênio. Ao término do período experimental os animais foram abatidos e colheu-se amostras de fígado e líquido biliar para determinação final dos teores de minerais, bem como acompanhamento do pH e peso das carcaças quente e fria. No terço final do período experimental foi realizado um balanço metabólico para cobre, enxofre e molibdênio, sendo a biodisponibilidade do cobre calculada pela técnica \"slope ratio\", utilizando-se os teores de cobre hepático. Os parâmetros foram analisados considerando-se a existência de uma estrutura de tratamento fatorial 2 x 2 x 2 (com e sem molibdênio, cobre orgânico e inorgânico e enxofre orgânico e inorgânico) e uma dieta basal e uma basal mais molibdênio, em delineamento inteiramente casualizado. As concentrações de glicose, albumina, ureia, colesterol e hematócrito sanguíneos não sofreram efeito (P>0,05) pela adição de molibdênio ou adição de cobre e enxofre, ou pela interação cobre-enxofre-molibdênio. Entretanto as concentrações de triglicerídeos sanguíneos foram alteradas (P<0,05) pela interação cobre-enxofre, mostrando redução na sua concentração quando da adição de cobre e enxofre nas fontes orgânicas. O peso vivo dos ovinos não foi influenciado (P>0,05) pelos tratamentos, porém o ganho de peso foi influenciado pela interação cobre-enxofre-molibdênio onde se observou redução no ganho de peso com a adição de molibdênio exclusivo e aumento no ganho de peso quando adicionado molibdênio com cobre e enxofre nas fontes orgânicas quando comparados com as fontes inorgânicas. A suplementação de fontes de cobre e enxofre e adição de molibdênio não influenciaram (P>0,05) os valores de pH e peso das carcaças. A presença de molibdênio na dieta diminuiu os teores de ceruloplasmina e a presença e molibdênio exclusivo reduziu as concentrações de cobre no soro dos ovinos, bem como a interação cobre-enxofre-molibdênio com as fontes inorgânicas dos minerais reduziu a ceruloplasmina e cobre no soro. Em contrapartida, a ceruloplasmina mostrou aumento nos níveis quando da administração de enxofre orgânico. Os teores de enxofre sanguíneos não foram influenciados pelos tratamentos. No líquido biliar contatou-se efeito do molibdênio exclusivo sobre os minerais, mostrando redução nas concentrações de cobre e enxofre e aumento na concentração de molibdênio. Os valores hepáticos de cobre e enxofre não foram influenciados (P>0,05) pelos tratamentos, somente o molibdênio hepático mostrou efeito na interação cobre-enxofre-molibdênio. A biodisponibilidade do cobre proteinado (145,09%) foi superior à do sulfato de cobre (100%), independente da fonte de enxofre e na ausência e molibdênio, quando determinado pela regressão múltipla \"slope ratio\". / This research aim to study the effect of organic and inorganic copper and sulfur sources in the interaction copper-sulfur-molybdenum, estimating the bioavailability of two sources of copper in the diet of sheep. For that used 40 weaned sheep at about 3 months of age and weighing 20 kg and distributed in 10 treatments, as follows: 1) basal diet; 2) diet containing molybdenum; 3) basal diet + copper inorganic + sulfur inorganic; 4) basal diet + copper inorganic + sulfur organic; 5) basal diet + copper organic + sulfur, inorganic; 6) basal diet + copper organic + sulfur organic; 7) diet with molybdenum + copper inorganic + sulfur inorganic; 8) diet with molybdenum + copper inorganic + organic sulfur; 9) diet with molybdenum + copper organic + sulfur inorganic, 10) diet with molybdenum + organic copper + organic sulfur. The experimental period lasted 84 days, animal weighing was performed on days 0, 28, 56 and 84 days to monitor its development. Blood collections to study levels of copper, sulfur and molybdenum, concentrations of glucose, albumin, urea, cholesterol, triglycerides, hematocrit and ceruloplasmin were also performed. Liver biopsies were made on zero day for copper, sulfur and molybdenum analysis. At the end of the experimental period, the animals were slaughtered and samples were collected from liver and bile fluid for final determination of mineral, and was measured pH and weight of hot and cold carcasses. At the end of the third experimental period was done a metabolic balance of copper, molybdenum and sulfur. The bioavailability of copper was calculated by \"slope ratio\" technique, using the concentration of copper in the liver. The parameters were analyzed considering the existence of a factorial structure 2 x 2 x 2 (with and without molybdenum, organic and inorganic copper and organic and inorganic sulphur) and a basal diet and a basal diet plus molybdenum. The concentrations of glucose, albumin, urea, cholesterol and blood hematocrit levels were not affected (P>0,05) by the addition of molybdenum or adding copper and sulfur, or the copper-molybdenum-sulfur interaction. However, blood triglyceride concentrations were changed (P<0.05) by copper-sulfur interaction, with a reduction in their concentration after the addition of copper and sulfur in organic sources. The live weight of the sheep was not affected (P>0,05) by the treatments, but the weight gain was influenced by the interaction copper-molybdenum-sulfur there was a reduction in weight gain with the addition of molybdenum and an increase was observed in the weight gain when added with copper and molybdenum in the organic sulfur sources compared to the inorganic sources. The supplemental sources of copper and sulfur and addition of molybdenum had no effect (P>0,05) on pH values and carcass weight. The presence of molybdenum in the diet reduced the levels of ceruloplasmin and the exclusive molybdenum presence reduced copper concentrations in the serum of the sheep. The copper-molybdenum-sulfur interaction with the inorganic sources of minerals decreased serum ceruloplasmin and copper. On the other hand, there was an increase in ceruloplasmin levels with organic sulfur administration. The blood levels of sulfur were not affected by treatments. Bile liquid was affected by molybdenum, it was a reduction in the concentrations of copper and sulfur with increase in the molybdenum concentration. The copper and sulfur liver levels were not influenced (P>0,05) by treatments, only the liver Molybdenum effect showed on copper-molybdenum-sulfur interaction. The bioavailability of organic copper (145.09%) was higher than that of copper sulphate (100%), irrespective of the source and in the absence and sulfur and molybdenum, as determined by multiple regression slope ratio.

O objetivo do estudo foi estimar a biodisponibilidade de duas fontes de cobre: orgânica (cobre metionina) e inorgânica (sulfato de cobre) na dieta de cordeiros. O experimento foi conduzindo na FZEA USP de Pirassununga utilizando 40 cordeiros da raça Merino X Texel, que foram distribuídos aleatoriamente em cinco grupos, e submetidos a cinco tratamentos, totalizando oito animais por tratamento: Tratamento 0: Dieta controle sem adição de Cu; Tratamento 1: 10 mg de Cu/Kg de MS na forma de sulfato de Cu; Tratamento 2: 30g de Cu/Kg de MS na forma de sulfato de Cu; Tratamento 3: 10 mg de cu/kg de MS na forma de cobre metionina; Tratamento 4: 30 mg de cu/kg de MS na forma de cobre metionina. Foram feitas biópsias do fígado dos animais no tempo zero para análise de cobre e colhidas amostras de sangue nos dias 0, 28, 56 e 84 dias para determinação de Cu sérico, atividade de ceruloplasmina e enzimas de função hepática. Ao final do experimento, os animais foram abatidos para colheita de amostras de fígado, músculo e rim, para determinação dos teores de Cu e da enzima superóxido dismutase (SOD). Nos últimos dez dias do experimento foi realizado um balanço metabólico de cobre. A biodisponibilidade foi calculada pela técnica \"slope ratio\", utilizando como parâmetros a concentração de cobre no fígado. Não houve diferença (P>0,05) no desempenho dos animais (peso vivo e ganho de peso) entre os tratamentos. A concentração sérica de AST e ALT permaneceu abaixo dos níveis de intoxicação em todos os tratamentos, durante todo o período. A atividade da ceruloplasmina não diferiu entre os tratamentos (P>0,05). O teor de cobre no soro, na biópsia do fígado e no músculo não foi diferente (P>0,05) entre os tratamentos. Entretanto, a concentração do mineral no fígado dos animais suplementados (284,28 mg/kg) foi maior (P<0,05), quando comparados ao grupo controle (168,01 mg/kg), assim como o Cu-met 30 mg/kg (341,29 mg/kg) foi superior (P<0,05) ao de 10mg/kg MS (263,02 mg/kg). A atividade da SOD nos animais suplementados (µmol/mg prot foi superior à do grupo controle. Nos rins o teor de cobre foi superior nos animais que receberam 30mg/kg de MS de Cu-met (6,65 mg/kg) em relação aos que receberam 10 mg/kg de MS da mesma fonte (3,86 mg/kg). A absorção e a retenção aparentes do cobre foram maiores para a fonte inorgânica, comparada com a orgânica. A biodisponibilidade do cobre determinada pela concentração de cobre no fígado, utilizando a técnica do \"slope ratio\", considerando o CuSO4 como padrão (100%), apresentou disponibilidade de 150,64% para o Cu-met. / The study was conducted to estimate the relative bioavailability of two sources of supplemental copper: organic (copper methionine) and inorganic (copper sulfate) in the diet of lambs, by analyzing the concentration of copper and enzymes in the liver and metabolic balance calculation, using 40 lambs breed Merino X Texel, which was fed three concentrations of copper (basal + two additions) in two sources, which were randomly allotted to five groups, and subjected to five treatments: treatment 0: control (diet without addition of Cu); treatment 1: (diet with 10 mg Cu/Kg DM of CuSO4); Treatment 2: (diet with 30 g Cu/Kg DM of CuSO4); Treatment 3: (diet with 10 mg Cu/kg DM of copper methionine; Treatment 4: (diet with 30 mg cu/kg DM of copper methionine). Liver biopsies were made on 0 d. Blood samples were taken via the jugular vein on 0, 28, 56 and 84 d to determine serum Cu and serum ceruloplasmin and liver transaminases (AST, ALT) concentrations. The animals were slaughtered and samples of liver, kidney and muscle were taken for the determination of the levels of Cu and superoxide dismutase activity. In the last ten days of the experiment a metabolic balance of copper was conducted. The bioavailability was calculated by the \"slope ratio\" technique, using the concentration of copper in the liver as parameter. There was no difference (P >0.05) on animal performance (live weight and weight gain) among treatments. The serum AST and ALT levels remained below poisoning in all treatments during the period. The ceruloplasmin activity did not differ between treatments (P>0.05). The copper content in biopsy, serum and muscle was not different (P>0.05) between treatments. However, the mineral concentration in the liver of animals fed (284.28 mg/kg) was higher (P <0.05) when compared to the control group (168.01 mg/kg ) and 30 Cu -met mg/kg (341.29 mg/kg) was higher (P <0.05) at 10mg/kg MS (263.02 mg/kg). The SOD activity in the supplemented animals (mmol/mg prot) was superior to the control group. Copper in Kidneys was higher in animals that received 30mg/kg MS meth-Cu (6.65mg/kg) compared those receiving 10 mg/kg DM from the same source (3.86 mg/kg). Apparent absorption and retention of copper were higher for inorganic source, compared with the organic. The bioavailability determined by the concentration of copper in the copper liver, using the technique of \"slope ratio\", considering CuSO4 as standard ( 100% ) presented availability of 150.64 % for Cu-met.

O presente trabalho teve como objetivo estudar os efeitos que as fontes orgânicas e inorgânicas de cobre e enxofre possuem na interação cobre-enxofre-molibdênio, estimando a biodisponibilidade de duas fontes de cobre na dieta de ovinos. Para isso, foram utilizados 40 ovinos desmamados, com aproximadamente 3 meses e peso médio 20 kg, distribuídos em 10 tratamentos, sendo: 1) dieta basal; 2) dieta basal contendo 10 mg de molibdênio/kg de MS; 3) dieta basal + 10 mg cobre inorgânico/kg de MS + 0,2% enxofre inorgânico/kg de MS; 4) dieta basal + 10 mg cobre inorgânico/kg de MS + 0,2% enxofre orgânico/kg de MS; 5) dieta basal + 10 mg cobre orgânico/kg de MS + 0,2% enxofre inorgânico/kg de MS; 6) dieta basal + 10 mg cobre orgânico/kg de MS + 0,2% enxofre orgânico/kg de MS; 7) dieta com 10 mg molibdênio + 10 mg cobre inorgânico/kg de MS + 0,2% enxofre inorgânico/kg de MS; 8) dieta com 10 mg molibdênio + 10 mg cobre inorgânico/kg de MS + 0,2% enxofre orgânico/kg de MS; 9) dieta com 10 mg molibdênio + 10 mg cobre orgânico/kg de MS + 0,2% enxofre inorgânico/kg de MS; 10) dieta com 10 mg molibdênio + 10 mg cobre orgânico/kg de MS + 0,2% enxofre orgânico/kg de MS. O experimento teve duração total de 84 dias, sendo realizadas pesagens dos animais nos dias 1, 28, 56 e 84 dias para acompanhamento do desenvolvimento. Foram realizadas também coletas sanguíneas para estudo de teores de cobre, enxofre e molibdênio sanguíneos, teores de glicose, albumina, ureia, colesterol, triglicerídeos, hematócrito e ceruloplasmina. Foram realizadas biópsias do fígado no tempo zero para análises de cobre, enxofre e molibdênio. Ao término do período experimental os animais foram abatidos e colheu-se amostras de fígado e líquido biliar para determinação final dos teores de minerais, bem como acompanhamento do pH e peso das carcaças quente e fria. No terço final do período experimental foi realizado um balanço metabólico para cobre, enxofre e molibdênio, sendo a biodisponibilidade do cobre calculada pela técnica \"slope ratio\", utilizando-se os teores de cobre hepático. Os parâmetros foram analisados considerando-se a existência de uma estrutura de tratamento fatorial 2 x 2 x 2 (com e sem molibdênio, cobre orgânico e inorgânico e enxofre orgânico e inorgânico) e uma dieta basal e uma basal mais molibdênio, em delineamento inteiramente casualizado. As concentrações de glicose, albumina, ureia, colesterol e hematócrito sanguíneos não sofreram efeito (P>0,05) pela adição de molibdênio ou adição de cobre e enxofre, ou pela interação cobre-enxofre-molibdênio. Entretanto as concentrações de triglicerídeos sanguíneos foram alteradas (P<0,05) pela interação cobre-enxofre, mostrando redução na sua concentração quando da adição de cobre e enxofre nas fontes orgânicas. O peso vivo dos ovinos não foi influenciado (P>0,05) pelos tratamentos, porém o ganho de peso foi influenciado pela interação cobre-enxofre-molibdênio onde se observou redução no ganho de peso com a adição de molibdênio exclusivo e aumento no ganho de peso quando adicionado molibdênio com cobre e enxofre nas fontes orgânicas quando comparados com as fontes inorgânicas. A suplementação de fontes de cobre e enxofre e adição de molibdênio não influenciaram (P>0,05) os valores de pH e peso das carcaças. A presença de molibdênio na dieta diminuiu os teores de ceruloplasmina e a presença e molibdênio exclusivo reduziu as concentrações de cobre no soro dos ovinos, bem como a interação cobre-enxofre-molibdênio com as fontes inorgânicas dos minerais reduziu a ceruloplasmina e cobre no soro. Em contrapartida, a ceruloplasmina mostrou aumento nos níveis quando da administração de enxofre orgânico. Os teores de enxofre sanguíneos não foram influenciados pelos tratamentos. No líquido biliar contatou-se efeito do molibdênio exclusivo sobre os minerais, mostrando redução nas concentrações de cobre e enxofre e aumento na concentração de molibdênio. Os valores hepáticos de cobre e enxofre não foram influenciados (P>0,05) pelos tratamentos, somente o molibdênio hepático mostrou efeito na interação cobre-enxofre-molibdênio. A biodisponibilidade do cobre proteinado (145,09%) foi superior à do sulfato de cobre (100%), independente da fonte de enxofre e na ausência e molibdênio, quando determinado pela regressão múltipla \"slope ratio\". / This research aim to study the effect of organic and inorganic copper and sulfur sources in the interaction copper-sulfur-molybdenum, estimating the bioavailability of two sources of copper in the diet of sheep. For that used 40 weaned sheep at about 3 months of age and weighing 20 kg and distributed in 10 treatments, as follows: 1) basal diet; 2) diet containing molybdenum; 3) basal diet + copper inorganic + sulfur inorganic; 4) basal diet + copper inorganic + sulfur organic; 5) basal diet + copper organic + sulfur, inorganic; 6) basal diet + copper organic + sulfur organic; 7) diet with molybdenum + copper inorganic + sulfur inorganic; 8) diet with molybdenum + copper inorganic + organic sulfur; 9) diet with molybdenum + copper organic + sulfur inorganic, 10) diet with molybdenum + organic copper + organic sulfur. The experimental period lasted 84 days, animal weighing was performed on days 0, 28, 56 and 84 days to monitor its development. Blood collections to study levels of copper, sulfur and molybdenum, concentrations of glucose, albumin, urea, cholesterol, triglycerides, hematocrit and ceruloplasmin were also performed. Liver biopsies were made on zero day for copper, sulfur and molybdenum analysis. At the end of the experimental period, the animals were slaughtered and samples were collected from liver and bile fluid for final determination of mineral, and was measured pH and weight of hot and cold carcasses. At the end of the third experimental period was done a metabolic balance of copper, molybdenum and sulfur. The bioavailability of copper was calculated by \"slope ratio\" technique, using the concentration of copper in the liver. The parameters were analyzed considering the existence of a factorial structure 2 x 2 x 2 (with and without molybdenum, organic and inorganic copper and organic and inorganic sulphur) and a basal diet and a basal diet plus molybdenum. The concentrations of glucose, albumin, urea, cholesterol and blood hematocrit levels were not affected (P>0,05) by the addition of molybdenum or adding copper and sulfur, or the copper-molybdenum-sulfur interaction. However, blood triglyceride concentrations were changed (P<0.05) by copper-sulfur interaction, with a reduction in their concentration after the addition of copper and sulfur in organic sources. The live weight of the sheep was not affected (P>0,05) by the treatments, but the weight gain was influenced by the interaction copper-molybdenum-sulfur there was a reduction in weight gain with the addition of molybdenum and an increase was observed in the weight gain when added with copper and molybdenum in the organic sulfur sources compared to the inorganic sources. The supplemental sources of copper and sulfur and addition of molybdenum had no effect (P>0,05) on pH values and carcass weight. The presence of molybdenum in the diet reduced the levels of ceruloplasmin and the exclusive molybdenum presence reduced copper concentrations in the serum of the sheep. The copper-molybdenum-sulfur interaction with the inorganic sources of minerals decreased serum ceruloplasmin and copper. On the other hand, there was an increase in ceruloplasmin levels with organic sulfur administration. The blood levels of sulfur were not affected by treatments. Bile liquid was affected by molybdenum, it was a reduction in the concentrations of copper and sulfur with increase in the molybdenum concentration. The copper and sulfur liver levels were not influenced (P>0,05) by treatments, only the liver Molybdenum effect showed on copper-molybdenum-sulfur interaction. The bioavailability of organic copper (145.09%) was higher than that of copper sulphate (100%), irrespective of the source and in the absence and sulfur and molybdenum, as determined by multiple regression slope ratio.

A Doença de Wilson (DW) é uma moléstia hereditária, caracterizada pela deficiência de excreção do cobre pelo fígado devido à mutação do gene A TP7B. O distúrbio do olfato ocorre com frequência em doenças neurodegenerativas como na doença de Parkinson (DP) e na doença de Alzheimer (DA). A análise do olfato tem sido utilizada como um instrumento útil no diagnóstico diferencial das diversas formas de parkinsonismo degenerativo, e, especialmente, na diferenciação entre DP e tremor essencial. O diagnóstico precoce na DW é a chave para o sucesso do tratamento. Na hipótese de haver comprometimento do olfato em fases iniciais da doença, esse poderia ser um dado a mais para auxiliar no diagnóstico. Até o presente, há apenas um estudo relacionando a DW com a disfunção do olfato. O objetivo deste estudo foi avaliar o olfato em um grupo de pacientes com DW e confrontar com grupo- controle. No presente estudo, foram analisados 37 portadores de DW com manifestação neurológica, 24 portadores de DW sem manifestação neurológica e 59 controles. Todos os indivíduos foram analisados com relação à idade, ao gênero, ao grau de escolaridade, ao uso de tabaco e ao miniexame do estado mental (MEEM), e os portadores de DW foram avaliados quanto ao tempo de doença, tratamento medicamentoso e escore neurológico. O olfato foi avaliado por meio do teste de identificação de odor 8niffin\' 8ticks (88-16 canetas numeradas e quatro opções de resposta para cada uma). Vinte e quatro indivíduos eram pacientes da DW sem manifestação neurológica (45,83% do gênero feminino) e 37 pacientes apresentavam manifestações neurológicas (56,76% do gênero masculino). O qrupo-controle foi composto por 59 indivíduos, 35 (59,33%) do gênero masculino. As médias de- idade foram de 33,38 ± 9,79 anos no grupo de portadores de DW com manifestação neurológica; 29 ± 9,61 anos no grupo de portadores de DW sem manifestação neurológica e 33,81 ± 10,67 anos no grupo-controle. Todos os pacientes com DW estavam em tratamento: 47(77%) com penicilamina, 7 (11,5%) com trientine e 7 (11,5%) com sais de zinco. As médias de respostas corretas no teste de identificação do odor 88-16 foram: 12,03 ± 2, 21 no grupo de portadores de DW com manifestação neurológica, 12, 15 ± 2,07 no grupo de portadores de DW com manifestação hepática e 12,70 ± 2,03 para o grupo- controle. Na avaliação objetiva do olfato com o teste de identificação do odor SS-16, não foi evidenciada diferença significativa entre os três grupos analisados, mas observou-se que o MEEM e o grau de escolaridade influenciaram significativamente no escore do 88-16 na comparação do grupo de pacientes com DW com manifestação neurológica com os outros dois grupos (grupo-controle e o grupo de portadores de DW com manifestação hepática). No presente estudo, não foi evidenciada disfunção olfatória nos pacientes com DW, mas foi observada diminuição da percepção do olfato em alguns pacientes com DW (com e sem manifestação neurológica). Em relação à disfunção olfatória evidenciada em alguns pacientes com DW na presente análise, algumas considerações são pertinentes e poderiam ter influenciado na identificação do olfato neste grupo de pacientes com DW. O acúmulo de cobre e a produção de radicais livres no sistema nervoso central (SNC) podem desencadear processos de neurodegeneração em estruturas envolvidas no olfato, alterações metabólicas, acúmulo de substâncias neurotóxicas (amônia e manganês) e alterações de neurotransmissores, e contribuir para o surgimento da disfunção olfatória / Wilson\'s disease (WO) is a hereditary disease due to a mutation in ATP7B gene, characterized by deficiency of copper excretion by the liver. Smell disorders are frequently encountered in neurodegenerative diseases, such as Parkinson\'s disease (PO) and Alzheimer\'s disease (AO). Smell analysis has been a useful tool for the differential diagnosis of several forms of degenerative parkinsonism, and especially for the differentiation between PO and essential tremor. Early diagnosis in WO is the key for a successful treatment. If there were smell impairment in the early stages of the illness, it could be used as another clue to help on its diagnosis. To the present date, there is only one study connecting WO with smell problems, the aim of this study was to evaluate smell function in a group of WO patients and compare them with a control group. We analyzed 37 WO patients with and 24 WO patients without neurologic symptoms, and 59 controls. Ali subjects were evaluated regarding age, gender, schooling, tobacco use, Mini Mental State Examination (MMSE), and the WO patients were also evaluated regarding duration of the illness, medication and neurologic scoring. Smell was analyzed by means of Sniffin\' Sticks smell identification test (SS-16 numbered pens and four options of answer for each pen). Twenty-four subjects with WO had no neurologic symptoms (45.83% female), and 37 patients had neurologic impairment (56,76% male). The control group was composed by 59 individuais, 35 (59,33%) male. Their age average were 33,38 ± 9,79 years for WO neurologic symptoms; 29 ± 9,61 years for WO without neurologic symptoms; and 33,81 ± 10,67 years for the control group. Ali WO patients were on treatment: 47(77%) with penicillamine, 7(11,5%) with trientine, and 7(11,5%) with zinc salt formulations. The average of correct answers in the SS-16 were: 12,03 ± 2,21 for the WO with neurologic symptoms group; 12,15 ± 2,07 for the WO without neurologic symptoms; and 12,70 ± 2,03 for the control group. In the smell testing with SS-16, there was no significant difference among the three groups, but the MMSE scoring and schooling had a significant influence over SS-16 score when comparing WO with neurologic symptoms patients with the other groups (WO patients without neurologic symptoms and control group). There was no smell dysfunction in WO patients in this study, but diminished smell perception was observed in some WO patients (either with or without neurologic impairment). Regarding smell impairment observed in some WO patients in the current analysis, some considerations must be made that could have influenced smell identification in these individuais. Copper accumulation and free radicais production in the central neNOUS system can trigger neurodegeneration processes in structures involved in srnell perception, metabolic impairment, building up of neurotoxic substances (such as ammonia and manganese), and neurotransmitter disorders, contributing to the emergence of srnell dysfunction

A Doença de Wilson (DW) é uma moléstia hereditária, caracterizada pela deficiência de excreção do cobre pelo fígado devido à mutação do gene A TP7B. O distúrbio do olfato ocorre com frequência em doenças neurodegenerativas como na doença de Parkinson (DP) e na doença de Alzheimer (DA). A análise do olfato tem sido utilizada como um instrumento útil no diagnóstico diferencial das diversas formas de parkinsonismo degenerativo, e, especialmente, na diferenciação entre DP e tremor essencial. O diagnóstico precoce na DW é a chave para o sucesso do tratamento. Na hipótese de haver comprometimento do olfato em fases iniciais da doença, esse poderia ser um dado a mais para auxiliar no diagnóstico. Até o presente, há apenas um estudo relacionando a DW com a disfunção do olfato. O objetivo deste estudo foi avaliar o olfato em um grupo de pacientes com DW e confrontar com grupo- controle. No presente estudo, foram analisados 37 portadores de DW com manifestação neurológica, 24 portadores de DW sem manifestação neurológica e 59 controles. Todos os indivíduos foram analisados com relação à idade, ao gênero, ao grau de escolaridade, ao uso de tabaco e ao miniexame do estado mental (MEEM), e os portadores de DW foram avaliados quanto ao tempo de doença, tratamento medicamentoso e escore neurológico. O olfato foi avaliado por meio do teste de identificação de odor 8niffin\' 8ticks (88-16 canetas numeradas e quatro opções de resposta para cada uma). Vinte e quatro indivíduos eram pacientes da DW sem manifestação neurológica (45,83% do gênero feminino) e 37 pacientes apresentavam manifestações neurológicas (56,76% do gênero masculino). O qrupo-controle foi composto por 59 indivíduos, 35 (59,33%) do gênero masculino. As médias de- idade foram de 33,38 ± 9,79 anos no grupo de portadores de DW com manifestação neurológica; 29 ± 9,61 anos no grupo de portadores de DW sem manifestação neurológica e 33,81 ± 10,67 anos no grupo-controle. Todos os pacientes com DW estavam em tratamento: 47(77%) com penicilamina, 7 (11,5%) com trientine e 7 (11,5%) com sais de zinco. As médias de respostas corretas no teste de identificação do odor 88-16 foram: 12,03 ± 2, 21 no grupo de portadores de DW com manifestação neurológica, 12, 15 ± 2,07 no grupo de portadores de DW com manifestação hepática e 12,70 ± 2,03 para o grupo- controle. Na avaliação objetiva do olfato com o teste de identificação do odor SS-16, não foi evidenciada diferença significativa entre os três grupos analisados, mas observou-se que o MEEM e o grau de escolaridade influenciaram significativamente no escore do 88-16 na comparação do grupo de pacientes com DW com manifestação neurológica com os outros dois grupos (grupo-controle e o grupo de portadores de DW com manifestação hepática). No presente estudo, não foi evidenciada disfunção olfatória nos pacientes com DW, mas foi observada diminuição da percepção do olfato em alguns pacientes com DW (com e sem manifestação neurológica). Em relação à disfunção olfatória evidenciada em alguns pacientes com DW na presente análise, algumas considerações são pertinentes e poderiam ter influenciado na identificação do olfato neste grupo de pacientes com DW. O acúmulo de cobre e a produção de radicais livres no sistema nervoso central (SNC) podem desencadear processos de neurodegeneração em estruturas envolvidas no olfato, alterações metabólicas, acúmulo de substâncias neurotóxicas (amônia e manganês) e alterações de neurotransmissores, e contribuir para o surgimento da disfunção olfatória / Wilson\'s disease (WO) is a hereditary disease due to a mutation in ATP7B gene, characterized by deficiency of copper excretion by the liver. Smell disorders are frequently encountered in neurodegenerative diseases, such as Parkinson\'s disease (PO) and Alzheimer\'s disease (AO). Smell analysis has been a useful tool for the differential diagnosis of several forms of degenerative parkinsonism, and especially for the differentiation between PO and essential tremor. Early diagnosis in WO is the key for a successful treatment. If there were smell impairment in the early stages of the illness, it could be used as another clue to help on its diagnosis. To the present date, there is only one study connecting WO with smell problems, the aim of this study was to evaluate smell function in a group of WO patients and compare them with a control group. We analyzed 37 WO patients with and 24 WO patients without neurologic symptoms, and 59 controls. Ali subjects were evaluated regarding age, gender, schooling, tobacco use, Mini Mental State Examination (MMSE), and the WO patients were also evaluated regarding duration of the illness, medication and neurologic scoring. Smell was analyzed by means of Sniffin\' Sticks smell identification test (SS-16 numbered pens and four options of answer for each pen). Twenty-four subjects with WO had no neurologic symptoms (45.83% female), and 37 patients had neurologic impairment (56,76% male). The control group was composed by 59 individuais, 35 (59,33%) male. Their age average were 33,38 ± 9,79 years for WO neurologic symptoms; 29 ± 9,61 years for WO without neurologic symptoms; and 33,81 ± 10,67 years for the control group. Ali WO patients were on treatment: 47(77%) with penicillamine, 7(11,5%) with trientine, and 7(11,5%) with zinc salt formulations. The average of correct answers in the SS-16 were: 12,03 ± 2,21 for the WO with neurologic symptoms group; 12,15 ± 2,07 for the WO without neurologic symptoms; and 12,70 ± 2,03 for the control group. In the smell testing with SS-16, there was no significant difference among the three groups, but the MMSE scoring and schooling had a significant influence over SS-16 score when comparing WO with neurologic symptoms patients with the other groups (WO patients without neurologic symptoms and control group). There was no smell dysfunction in WO patients in this study, but diminished smell perception was observed in some WO patients (either with or without neurologic impairment). Regarding smell impairment observed in some WO patients in the current analysis, some considerations must be made that could have influenced smell identification in these individuais. Copper accumulation and free radicais production in the central neNOUS system can trigger neurodegeneration processes in structures involved in srnell perception, metabolic impairment, building up of neurotoxic substances (such as ammonia and manganese), and neurotransmitter disorders, contributing to the emergence of srnell dysfunction

Memoria para optar al título de Químico Farmacéutico / El cobre es un elemento traza esencial, necesario e indispensable para numerosos e importantes procesos vitales, como metabolismo energético, modulación de la respuesta inmune y neurotransmisión, entre muchos otros. El cobre, juega un importante rol como cofactor enzimático de distintas proteínas de gran importancia biológica como la citocromo c oxidasa, implicada en el transporte de electrones en la mitocondria; superóxido dismutasa, partícipe en la protección contra los radicales libres; ceruloplasmina, comprometida en el metabolismo de hierro; dopamina β-hidroxilasa, responsable de la síntesis de catecolaminas; etcétera. A pesar de la esencialidad del cobre cuando está presente en concentraciones fisiológicas, también puede ser perjudicial si se ingiere en exceso ya sea en forma aguda o crónica. Esta última, lleva a la acumulación de cobre principalmente en el hígado, pudiendo afectar también otros órganos como riñón y cerebro. La acumulación gradual de cobre en el hígado, puede producir un daño hepático irreversible y en casos extremos la muerte. Desgraciadamente, no existen biomarcadores capaces de revelar efectos tempranos derivados de la acumulación de cobre en el organismo, esto permite que la toxicidad por ingesta crónica de cantidades elevadas de cobre se desarrolle hasta la manifestación de síntomas clínicamente apreciables, los cuales generalmente tienen aparición tardía y representan la exteriorización del daño hepático. Debido a esta dualidad de efecto, que posee el cobre, se hace necesaria la búsqueda de marcadores sanguíneos (poco invasivos) que den cuenta del exceso temprano de este mineral e identifiquen a los individuos en riesgo de desarrollar, en un futuro, un evento tóxico. De este modo la compleja tarea en la cual se enfoca el presente trabajo, es la búsqueda de un posible biomarcador del exceso de cobre. Para ello nos propusimos analizar el efecto de la suplementación con cobre, sobre la actividad y masa de ceruloplasmina plasmática en un modelo animal de primates Cebus apella. Lamentablemente, los resultados sugieren que la actividad y masa de ceruloplasmina no son buenos indicadores de la acumulación de cobre en este modelo animal, sin embargo, no se descarta la posibilidad de utilizar concentraciones de cobre en pelo como posible biomarcador de exposición crónica a altas concentraciones de cobre, para lo cual se requieren estudios posteriores que avalen esta hipótesis / Copper is an essential trace element, necessary and indispensable for many important life processes, such as energy metabolism, modulation of the immune response and neurotransmission, among many others. Copper also plays an important role as an enzymatic cofactor of different proteins of great biological significance as cytochrome c oxidase, involved in the electron transport in mitochondria, superoxide dismutase, which participates protecting against free radicals; ceruloplasmin in the iron metabolism; dopamine β-hydroxylase, responsible for the synthesis of catecholamines, and so on. Despite its essentiality copper can also be harmful if is ingested in excess, either in an acute or chronic manner. The latter leads to the accumulation of copper mainly in the liver and can also affect other organs such as kidneys and brain. The gradual accumulation of copper in the liver, can produce irreversible liver damage and in extreme cases, death. Unfortunately, there are no biomarkers able to reveal early effects arising from the accumulation of copper in the body; this allows that chronic toxicity derived from ingestion of large amounts of copper is not apparent or detectable until clinically significant manifestation of symptoms appear; this usually occurs late and represents the externalization of liver damage. Because of this duality, for a long time now blood markers (non invasive) are sought, such that excess of the mineral can be identified prior to developing a toxic event. Thus, the present work focuses on the complex task of looking for a possible biomarker of excess copper. To do this, we assessed animals supplemented with copper for three years; we measured the activity and mass of plasmatic ceruloplasmin in an animal model of primates Cebus apella. Unfortunately, the results suggest that activity and mass of ceruloplasmin are not good indicators of accumulation of copper in this animal model, however they do not rule out the possibility of using concentrations of copper in hair as a potential biomarker of chronic exposure to high concentrations of copper. Further studies to support this hypothesis are needed

A doença de Wilson (DW) é distúrbio da excreção biliar de cobre, de herança autossômica recessiva, devido a mutações no gene ATP7B. O cobre que não se liga à apoceruloplasmina circula no organismo ligado a aminoácidos, deposita-se principalmente no fígado e no cérebro e é excretado pelos rins. A cuprúria maior que 100ug/24h pode auxiliar no diagnóstico, embora cerca 20% dos pacientes com DW apresentem níveis anormais de cuprúria basal. A administração da d-penicilamina (DPA) pode promover, em crianças, valores maiores que 1.600ug/24h. A fim de se conhecer os níveis de cuprúria de possíveis indivíduos heterozigotos adultos, foram avaliados 25 pais e 25 mães de pacientes (média 61 anos em homens; 57 anos em mulheres) com diagnóstico de DW. Foram obtidos os níveis séricos de enzimas hepáticas, cobre e ceruloplasmina, e quantificada a cuprúria de 24h. A seguir, os indivíduos receberam DPA 1,0g por via oral dividido em duas tomadas, durante nova coleta de urina para dosagem de cuprúria de 24h. Esta análise foi realizada pelo método de espectrometria de absorção atômica eletrotérmica. Os níveis de enzimas hepáticas foram semelhantes nos dois grupos, exceto o nível médio de fosfatase alcalina que foi maior nas mulheres (H= 68,72 UI/L; M=81,68 UI/L). Os níveis de ceruloplasmina (H=21,72mg/dL; M=27,78mg/dL) e de cobre sérico (H=71,38 ?g/dl; M=88,0 ug/dl) foram maiores em mulheres do que em homens (p<0,001). Os níveis de cuprúria basal foram 22,43ug/24h (média) e 21,40ug/24h (mediana); e, após a DPA, de 523,54 ug/24h (média) e 511,5 ug/24h (mediana). A cuprúria média basal masculina foi de 26,19. ug/24h, enquanto a feminina foi de 18,28. ug/24h (p=0,005). Com o presente estudo, ficou definida possível faixa de variação da cuprúria antes e depois da administração de dpenicilamina em pais de portadores com doença de Wilson; que os pais apresentaram cupremia e níveis de ceruloplasmina menores e cuprúria basal maior do que as mães; que as faixas de variação de normalidade para os parâmetros ceruloplasmina, cobre sérico e urinário deveriam ser diferenciadas de acordo com o sexo. / Wilson disease is a biliary copper excretion disturbance, of recessive autossomic heritage, due to ATP7B gene mutations. The copper not bound to apoceruloplasmin circulates in the organism bound to amino acids and accumulates mainly in the liver and brain being excreted by the kidneys. Urinary copper higher than 100ug/24h can be useful in the diagnosis, but only about 20% of Wilson disease patients have abnormal basal levels. In this case, d-penicillamine (DPA) administration can lead, in children, to levels higher than 1.600ug/24h. Twenty five fathers and twenty five mothers of wilson disease patients (mean 61 years for male, and 57 years for female) were assessed in order to obtain urinary copper levels of probable heterozygote adults. Fasting liver enzymes, copper and ceruloplasmin serum levels were obtained along with 24h urinary copper excretion. After, patients got DPA 1.0g by oral route, twice a day, while collecting urine for 24h urinary copper excretion dosage. These analyses were performed by elethrotermic atomic absortion spectrometry method. Liver enzyme levels were similar in men and women but those of alkaline phosphatase were higher in women (M= 68.72 UI/L; F=81.68 UI/L). Serum ceruloplasmin (F=21.72mg/dl; F=27.78mg/dl) and copper (M=71.38 ug/dl; F=88.0 ug/dl) levels were higher in women than in men (p<0.001). Urinary copper levels before DPA were, 43ug/24h (mean) and 21.40 ug/24h (median); and, after DPA, 523.54 ug/24h (mean) and 511.5 ug/24h (median). Basal urinary copper levels in men were 26.9 ug/24h, and in women were 18.67 ug/24h (p=0.005). With the results of this study, we defined a possible range for urinary copper before and after oral intake of DPA in parents of Wilson disease patients. Furthermore, fathers had lower levels of serum copper and of ceruloplasmin, and greater levels of baseline cupriuresis than mothers; and finally the normal range for serum copper and ceruloplasmin, and urinary copper should be differentiated according to the gender.

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:31:11Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2008-12-05Bitstream added on 2014-06-13T19:41:09Z : No. of bitstreams: 1 pereira_wab_dr_jabo.pdf: 854556 bytes, checksum: 9d7af941da3e924cbf09a5ce3f63ef48 (MD5) / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / Os ovinos possuem tendência a acumular cobre no organismo. Quando a capacidade de armazenagem hepática se esgota, o cobre é liberado para o sangue causando sinais clínicos da intoxicação. Para verificar as alterações presentes na bioquímica sérica, hemograma, morfologia eritrocitária, perfil de proteínas séricas e concentração de cobre sérico, durante as fases pré-hemolítica e hemolítica da intoxicação crônica por cobre, foram utilizados seis ovinos distribuídos aleatoriamente em dois grupos: G-1 (controle) e G-2 (experimentalmente intoxicados). Os três ovinos do G-2, além da dieta diária receberam 3mg de CuSO4. 5H2O/Kg PV, seguido de aumentos semanais de 3mg de CuSO4. 5H2O/ Kg PV na dose diária. Diariamente realizou-se o exame físico dos ovinos de ambos os grupos. Para obtenção do hemograma e dos componentes bioquímicos sanguíneos foram colhidas amostras com antes (M0 – M3), durante (M4) e após (M5 e M6) a crise hemolítica. Foram realizadas necropsias dos ovinos do G-2 que morreram e dos ovinos do G-1, submetidos à eutanásia ao fim do experimento e fragmentos do fígado desses animais foram colhidos para avaliação histopatológica. Durante a fase pré-hemolítica evidenciaram-se poucas alterações, entretanto durante a crise hemolítica os ovinos do G-2 apresentaram anemia macrocítica normocrômica, predomínio de hemácias com morfologia de acantócitos, leucocitose por neutrofilia, elevação nas atividades séricas de AST,GGT, CK e hipercupremia; Os teores séricos de ceruloplasmina apresentaram-se diminuídos e os teores de transferrina, proteína de 35.000 Da e IgG de cadeia leve apresentaramse aumentados no M2; os animais intoxicados apresentaram anorexia, membranas mucosas ictéricas, fezes amolecidas de coloração verde-escura e hemoglobinúria. À necropsia observou-se mucosas, fígado e demais tecidos de coloração amarelada... / Sheep have a tendency to accumulate copper in the body. When the liver storage capacity is exhausted, copper is released into the blood causing clinical signs of poisoning. Six lambs fed a basal diet were randomly assigned to 2 groups: G - 1 (control) and G-2 (experimentally intoxicated). The three sheep of the G-2, were drenched initially with 3 mg of CuSO4. 5H2O/ kg bw daily for a week. Every week an additional dose of 3mg CuSO4. 5H2O/ kg bw was included in the drench until signs of copper poisoning appeared. Every day, the lambs were monitored clinically. before (M0 – M3), during (M4) and after (M5 and M6) to hemolytic crisis, sample blood were obtained for biochemical analysis of AST, GGT and CK, blood count, serum proteins and serum concentration of copper. The lambs of the G-2 that died in the course of the experiment and the lambs of the G-1 euthanized at the end, were necropsied and fragments of liver, were obtained for histopathology. During the pre-hemolytic phase few changes were evidenced, however thought the hemolytic crisis the sheep of the G-2 were presented macrocytic normochromic anemia, a predominance of erythrocytes with acantocytes morphology, leukocytosis by neutrophilia, elevation in serum activities of AST, GGT and CK and hipercupremia; Serum levels of ceruloplasmin was presented reduced and the levels of transferrin, 35,000 of protein and IgG- light chain were increased in M2; the lambs of G-2 exhibited anorexia, jaundiced mucous membranes, soften and dark-green feces and hemoglobinuria. Gross examination of poisoned lambs revealed mucous membranes, liver and other tissues yellowish, dark kidneys and brownish urine. Histopathology of the liver showed megalocitose of hepatocytes, the disorganization of strands of hepatocytes, cholestasis and inflammatory infiltrate lymphocytic peri-portal.