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Efeito de resinas experimentais contendo inibidores de proteases da matriz sobre gelatinases e colagenases / Effect of experimental resins containing protease inhibitors on gelatinases and collagenaseZarella, Bruno Lara 26 March 2013 (has links)
A evolução das resinas compostas fez com que esses materiais passassem a ter uma durabilidade maior e características estéticas muito boas, mas o risco de cárie recorrente é ainda um problema a ser resolvido. Na tentativa de solucionar esse problema, estudos vêm sendo conduzidos na tentativa de se formularem resinas compostas contendo agentes antibacterianos, como é o caso da incorporação de clorexidina (CHX). Outro fato que impede a longevidade deste material é a degradação de matriz de colágeno por proteases ativadas por pH ácido. Para tentar contornar esse problema, a adição de clorexidina, assim como Epigallocatechin gallate (EGCg), clássicos antibacterianos e inibidores de proteases da matriz , como as metaloproteinases da matriz (MMP) a resinas, poderia melhorar a eficácia destes materiais como substitutos de dentina em procedimentos restauradores, aumentando a longevidade do tratamento restaurador, mediante preservação das propriedades mecânicas do material. Assim, o objetivo desse estudo é avaliar o poder de inibição de resinas experimentais contendo inibidores conhecidos de proteases da matriz sobre gelatinases e colagenase. Para isso, copolímeros experimentais foram preparados combinando Bis-GMA com o diluente TEGDMA (70/30 mol%). Com exceção do copolímero placebo (sem drogas), EGCg ou CHX foram incorporados a 1% em peso isoladamente ou em combinação, a 0,5% em peso cada. Amostras contendo EGCg, CHX ou EGCg e CHX concentradas 10X foram obtidas do armazenamento de espécimes polimerizados da resina experimental em água deionizada (1 mL) após o período de 24h a 37°C e sua posterior concentração. O efeito da ação dos inibidores foi checado por zimografia e confirmado por um ensaio enzimático específico para colagenases e gelatinases. Os dados passaram por teste de homogeneidade (Bartlett) e normalidade (Kolmogorov-Smirnov) e foram avaliados por ANOVA a 2 critérios, seguido pelo teste de Bonferroni para comparações individuais (p<0,05). Os resultados do presente estudo, mostraram que, in vitro, a liberação de EGCg e CHX incorporados em resinas é capaz de reduzir a atividade gelatinolítica das MMPs -2 e -9, bem como a atividade da colagenase bacteriana, sugerindo um efeito potencial no aumento da longevidade de restaurações de resinas. Com isso, podemos afirmar que a liberação de ativos de resinas experimentais é possível e que esses ativos são capazes de inibir as MMPs, assim sugerindo um novo substituto para dentina em procedimentos restauradores. / The evolution of composite resins made these materials to have a greater durability and very good esthetics characteristics, but the risk of recurrent caries is still a problem to be solved. In the attempt to solve this problem, studies are being conducted with the purpose to formulate composite resins containing antibacterial agents, such as chlorhexidine (CHX). Another fact that prevents the longevity of this material is the degradation of the collagen matrix by the proteases activated by acidic pH. In order to solve this problem, the addition of chlorhexidine and/or Epigallocatechin gallate (EGCg), classical antibacterial agents and inhibitors of matrix proteases, such as matrix metalloproteinases (MMP) in resins, could improve the efficacy of these materials as dentin substitutes in restorative procedures, increasing the longevity of the restorative treatment, while preserving the mechanical properties of the material. Thus, the aim of this study is to evaluate the ability of experimental resins containing known matrix protease inhibitors on the inhibition of gelatinases and collagenase. For this purpose, experimental copolymers were prepared combining Bis-GMA with the diluent TEGDMA (70/30 mol%). Except for the placebo copolymer (drug free), EGCg or CHX were incorporated at 1% in weight, isolated or in combination (0.5% in weight each). Samples containing EGCg, CHX or EGCg and CHX concentrated 10X were obtained after storage of polymerized specimens of the experimental resin in deionized water (1 mL) after the period of 24 h, at 37°C and after that were concentra. The effect of the action of the inhibitors was checked by zymography and confirmed by an enzymatic test specific for collagenases and gelatinases. The data passed in the tests of homogeneity (Bartlett test) and normality (Kolmogorov-Smirnov test), and were evaluated by 2-way ANOVA, followed by Bonferroni test for individual comparisons (p<0.05). The results of this study showed that the in vitro release of EGCG and CHX incorporated in resins was able to reduce the gelatinolytic activity of MMPs-2 and -9 and bacterial collagenase activity, suggesting a potential effect in increasing the longevity of resin restorations. It can be concluded that the release of drugs from experimental resins is possible and that these drugs are able to inhibit MMPs, thereby suggesting a new substitute for dentin in restorative procedures.
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Efeito da clorexidina na reidratação da dentina irradiada com laser Er:YAG após envelhecimento / Chlorhexidine effect on rehydration of irradiated dentin with Er:YAG laser after agingGalafassi, Daniel 03 February 2012 (has links)
Esse estudo in vitro avaliou a resistência adesiva da dentina preparada com laser de Er:YAG ou broca, reidratada com clorexidina ou água deionizada, após armazenamento em saliva artificial e termociclagem. Cento e vinte terceiros molares humanos hígidos foram seccionados no terço médio da coroa, expondo a superfície dentinária (n=10). Os espécimes foram divididos aleatóriamente de acordo com o tratamento [laser de Er:YAG + reidratação com água deionizada (LW), laser de Er:YAG + reidratação com clorexidina a 2% (LC), turbina de alta-rotação com broca #245 + reidratação com água deionizada (TW) e turbina de alta-rotação com broca #245 + reidratação com clorexidina a 2% (TC)]. Após o preparo da dentina, os espécimes foram condicionados com ácido fosfórico 35%, lavados e secos com ar. A reidratação da dentina foi realizada através da aplicação de 1.5!L de água deionizada ou clorexidina 2%. Um sistema adesivo etch and rinse foi aplicado seguido da restauração com resina composta. Em cada grupo os espécimes foram sub-divididos de acordo com o envelhecimento [24 horas de armazenamento em saliva artificial / sem termociclagem (NA); 6 meses de armazenamento em saliva artificial / 12.000 ciclos térmicos (6A); 12 meses de armazenamento em saliva artificial / 24.000 ciclos térmicos(12A)]. Após cada período de envelhecimento, os dentes foram seccionados a fim de se obter 4 palitos com area de ±1.0 mm2, que foram submetidos ao teste de microtração usando uma máquina universal de testes com velocidade de 0.5 mm/min. Para a análise da interface adesiva em MEV foram utilizados 36 terceiros molares hígidos (n = 3) que foram restaurados e envelhecidos como descrito no protocolo empregado para o teste adesivo. ANOVA a dois critérios mostrou que não houve diferença significante para a interação entre os fatores e para o fator envelhecimento. O teste de Tukey 5% mostrou que o grupo LC apresentou os menores valores de resistência adesiva. A análise da interface adesiva através da MEV demonstrou que para os grupos irradiados houve formação de camada híbrida irregular com presença de fendas e o envelhecimento não interferiu na morfologia da interface adesiva. A reidratação com clorexidina influenciou negativamente a resistência adesiva do prepare com laser de Er:YAG. O envelhecimento em saliva artificial e termociclagem não interferiram na resistência adesiva da dentina. / This in vitro study evaluated the bond strength of dentin prepared with Er: YAG laser or turbine, rehydrated with chlorhexidine or deionized water after artificial saliva storage and thermocycling. One hundred twenty human third molars were sectioned in order to expose the dentin surface (n=10). The specimens were equally and randomly divided according to treatment [Er:YAG laser + deionized water rehydration (LW), Er:YAG laser + chlorhexidine 2% rehydration (LC), bur on high-speed turbine + deionized water rehydration (BW) and bur on high-speed turbine + chlorhexidine 2% rehydration (BC)]. After dentin preparation, the specimens were etched with 35% phosphoric acid, washed and dried with air. The dentin rehydration method was performed with deionized water or chlorhexidine 2% by applying 1.5!L of each solution. An etch and rinse adhesive system was then applied and the samples were restored with a composite. In each group, the specimens were sub-divided in accordance with the aging method [24 hours artificial saliva storage, no thermocycling (NA); 6 months of artificial saliva storage, 12.000 thermocycling (6A); 12 months of artificial saliva storage, 24.000 thermocycling (12 A)]. After each aging period, each tooth was sectioned in order to obtain 4 sticks with a cross-sectional area of 1.0 mm2, which were submitted to microtensile test using the Universal Test Machine (0.5 mm/min). For the adhesive interface analysis by SEM, 36 healthy third molars (n=3) were restored and aged as the protocol used for the adhesive test. The two-way ANOVA showed no significant differences for the interaction between the factors and for the aging factor. Tukey test 5% showed that the LC group had the lowest bond strength values. The adhesive interface analysis by SEM showed that the irradiated groups presented irregular hybrid layer and cracks and the aging did not affect the adhesive interface morphology. The rehydration with chlorhexidine negatively influenced the bond strength of the preparation with the Er:YAG laser. The artificial saliva aging and thermocycling did not interfere with dentin bond strength.
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Estudo dos produtos químicos originados a partir da degradação do gel de clorexidina a 2%, por meio da Cromatografia Gasosa acoplada à Espectrometria de Massas / Study of chemicals derived from the degradation of 2 % chlorhexidine gel, by means gas chromatography coupled to mass spectrometryDe-Bem, Samuel Henrique Camara 23 January 2012 (has links)
O presente trabalho teve como objetivo determinar, por meio da Cromatografia Gasosa acoplada à Espectrometria de Massas (CG-MS), produtos oriundos da degradação do digluconato de clorexidina (CHX) 2 % em gel. Foram selecionados três géis: comercial Gel_Chlorhexidina® (Maquira), CHX gel UNIARARAS (Manipulado pela Farmácia Ensino Uniararas) e gel CHX 2 % preparado a partir de uma uma solução comercial de CHX 20 % Sigma® no laboratório. Para que fosse possível comparar os resultados, foi preparada uma solução de CHX 2 % partindo da mesma solução comercial de CHX Sigma®. Para a avaliação dos produtos de degradação da CHX 2 %, os géis e a solução foram pesados (1 g / gel 1 mL /solução) e acondicionados em tubos plásticos (Eppendorf®). Os tubos foram subdivididos em quatro diferentes situações de armazenamento (sobre a bancada de trabalho com e sem a presença de luz, em forno de Pasteur a 36,5 °C sem luz e em geladeira a 8 °C sem luz) e quatro diferentes períodos de análise (inicial, após 1 mês, 3 meses e 6 meses de armazenamento) resultando em 52 análises cromatográficas. Após o período determinado, as amostras foram extraídas, filtradas e analisadas por meio de CG-MS. Os resultados mostraram, na análise inicial, que todos os géis e a solução já continham produtos de degradação da CHX (espécies de oxigênios reativos - ROS). Um dos ROS era a pCA. Além da pCA, outros ROS foram observados, oCA e/ou mCA (isômeros da pCA) e os organoclorados orto-isocianato clorofenil e 2-amino-5-clorobenzonitrila. A porcentagem de pCA calculada nas amostras dos géis não foi gradual nem uniforme, levantando a hipótese de falta de homogeneidade da CHX na formulação do gel. A não homogeneidade foi comprovada através de análise em espectrofotometria UV/Vis. Uma sugestão de manipulação dos géis de CHX foi então sugerida e a homogeneidade da CHX nos géis manipulados desta maneira foi comprovada através de análise em espectrofotometria UV/Vis. Concluiu-se que os géis e a solução de CHX a 2 % analisados neste trabalho, apresentaram produtos oriundos da degradação da CHX em todas as situações de armazenamento e tempo de análises propostas, essa degradação é um problema intrínseco da CHX. Os produtos formados a partir da oxidação da CHX são tóxicos e possuem características genotóxicas, podendo trazer riscos ao seres humanos com danos celulares e no DNA. Mais estudos são necessários para verificar o potencial carcinogênico da CHX, de seus produtos de degradação e se o uso de produtos contendo CHX é seguro em seres humanos. / The aim of this study was to determine, by means of gas chromatography coupled to mass spectrometry (GC-MS), products originated from the degradation of 2 % chlorhexidine digluconate (CHX) gel. Three gels were selected: commercial Gel_Chlorhexidina® (Maquira), 2 % CHX gel UNIARARAS (handled at the Pharmacy Education UNIARARAS) and 2% CHX gel prepared in laboratory from a commercial 20% CHX solution (Sigma®). For comparison of the results, a 2% CHX solution was also prepared from the same commercial 20 % CHX solution (Sigma®). For assessment of the products of 2 % CHX degradation, the gels and the solution were weighed (1 g / gel - 1 mL / solution) and placed in plastic tubes (Eppendorf®). The tubes were divided into four different storage conditions (on the workbench with and without the presence of light, Pasteur oven at 36.5 °C without light and in a refrigerator at 8 °C without light) and four different evaluation periods (initial and after 1 month, 3 months and 6 months of storage), resulting in 52 chromatographic analyses. After the specified evaluation periods, the samples were extracted, filtered and analyzed by GC-MS. The results showed that, in the initial analysis, all gels and the solution already contained CHX degradation products (reactive oxygen species - ROS). One of the ROS was para-chloroaniline (pCA). In addition to pCA, other ROS were observed, oCA and/or mCA (pCA isomers) as well as the organochlorines ortho-chlorophenyl isocyanate and 2-amino-5-chloro-benzonitrile. The percentage of pCA calculated in the CHX gel samples was neither gradual nor uniform, raising the possibility of lack of homogeneity in gel formulation. The lack of homogeneity was confirmed by UV/Vis spectrophotometry. Changes in the preparation of the CHX gels were suggested, and the homogeneity of the CHX gels prepared following the suggestions was confirmed by UV/Vis spectrophotometry. It was concluded that the 2% CHX gels and solution evaluated in this study presented products from CHX degradation in all storage conditions and evaluation periods, and this degradation is an intrinsic problem of CHX. The products formed from the oxidation of CHX are toxic and have genotoxic characteristics, and may pose risks for humans such as damage to cells and DNA. Further studies are required to determine the carcinogenic potential of CHX and its degradation products and whether the use of products containing CHX in humans is safe.
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Influência da solução de clorexidina a 2% na resistência adesiva de pinos de fibra de vidro em raízes bovinas: acompanhamento imediato, 6 meses e 1 ano / 2% chlorhexidine influence on fiber posts bond strength to bovine roots: immediate, 6-month and 1-year-agingSilva, Luciana Mendonça da 04 July 2013 (has links)
Este trabalho teve como objetivo avaliar a influência da solução de clorexidina a 2% na resistência adesiva de pinos de fibra de vidro cimentados com cimento resinoso convencional utilizando três diferentes sistemas adesivos (2 convencionais e 1 autocondicionante), no período de 7 dias, 6 meses e 1 ano. Foram selecionadas 180 raízes bovinas, que foram tratadas endodonticamente e divididas em 6 grupos (n=30): MP, sistema adesivo (SA) convencional de 3 passos (ScotchBond Multi Uso); SB, SA convencional de 2 passos (Single Bond); SE, SA autocondicionante de 2 passos (Clearfil SE Bond); MP-CHX, SB-CHX e SE-CHX, com aplicação da clorexidina (CHX). Em todos os grupos, o pino de fibra de vidro Exacto foi cimentado com cimento resinoso dual RelyX ARC. Cada grupo foi dividido em 3, de acordo com o período experimental, 7 dias, 6 meses e 1 ano (n=10). Após a obtenção de fatias com 1mm de espessura, os espécimes foram submetidos ao teste de push-out (100kg, 0,5mm/min). Os tipos de falhas foram analisados em microscópio ótico de luz (40x) e classificados em: adesiva cimento/dentina; adesiva cimento/pino; coesiva em dentina ou cimento, e mista. Os valores, convertidos em MPa, foram analisados pelo teste ANOVA a 4 critérios e teste de Tukey para comparação das médias, com nível de significância de 5%. Não houve diferença estatística com o uso da CHX para os SAs convencionais testados, nos períodos de 7 dias, 6 meses e 1 ano (p>0,05). Dentre os SA, o MP foi o que se manteve constante com ou sem CHX (p>0,05). Houve diminuição de resistência adesiva no terço cervical, em 1 ano, e no terço apical em 7 dias do SE-CHX (p<0,05). Pode-se concluir que o uso da CHX pareceu não interferir na resistência adesiva dos SAs testados, exceto para o SA autocondicionante, em 7 dias e 1 ano. / The aim of this work was to evaluate the 2% chlorhexidine influence on fiber posts bond strength luted with a resin cement, with three different dentin bonding systems (2 etch-and-rinse and 1 self-etching), with 7-day, 6-month and one-year-aging. One hundred and eighty bovine roots were endodontically treated and randomly assigned to 6 groups (n=30): MP, three-step etch-and-rinse dentin bonding system (DBS) (ScotchBond Multi Uso); SB, two-step etch-and-rinse DBS (Single Bond); SE, twostep self-etching DBS (Clearfil SE Bond); MP-CHX, SB-CHX and SE-CHX, with chlorhexidine (CHX) application. Exacto fiber posts were luted with dual cure resin cement RelyX ARC in all groups. Each group was divided in three, according to aging (n=10). After obtainning 1mm-thick slices, push-out test was carried out (100kg, 0,5mm/min). Failure modes were assessed under light microscopy (40x) and classified in: adhesive to dentin; adhesive to post; cohesive in dentin or cement, and mixed failure. Values were converted to MPa and analyzed by 4-way ANOVA and Tukeys test for multiple comparisons, at 5% significance level. There was no difference with the use of CHX for tested etch-and-rinse DBSs, after 7-day, 6-month and one-year-aging (p>0,05). Among DBSs, MP presented constant values (p>0,05). SE-CHX presented significant lower bond strength values on the cervical third, at one year, and apical third at 7 days (p<0,05). It can be concluded that CHX use seemed not to interfere bond strength values of all materials tested, except for the self-etch DBS, after 7 days and one year-aging.
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Efeito da solução de clorexidina a 2% na adesão de um sistema restaurador adesivo à dentina previamente erodida com refrigerante tipo cola regular e light / Effect of 2% chlorhexidine solution on adhesive bond strength to eroded dentin by regular and light cola drinksCasas Apayco, Leslie Caroll 28 June 2013 (has links)
Os refrigerantes são potentes agentes erosivos que podem provocar perda de estrutura dentária e requerer o tratamento restaurador adesivo, dependendo do grau de comprometimento. Pelas diferentes propriedades apresentadas, estas bebidas podem afetar a adesão à dentina de diferentes formas. Este estudo teve como objetivo avaliar a resistência de união (RU) em dentina erodida tratada com solução de clorexidina a 2%. Sessenta terceiros molares tiveram a superfície dentinária do terço oclusal exposta e foram distribuídos em 3 grupos, de acordo com o protocolo erosivo: controle, sem desafio (C), desafio erosivo com Coca-Cola (CC) e desafio erosivo com Coca-Cola Light (CL). As ciclagens erosivas foram por ciclos de 5-min de imersão 3x/dia durante 5 dias. Em seguida, metade dos dentes foi tratado com solução de clorexidina a 2% (1,5ul) e o restante com água deioinizada (1,5ul) e o processo adesivo realizado com Adper Single Bond 2® e resina composta Filtek Z350®. Os espécimes foram mantidos em estufa a 37oC por 24 horas. Após esse período, todos os espécimes foram seccionados em palitos (0,80mm2 a 1mm2). Um terço dos palitos obtidos de cada grupo foi testado imediatamente (I-24 h) pelo teste de microtração. Os espécimes remanescentes foram envelhecidos em saliva artificial por 6 meses (6m) e 1 ano (1a) antes do teste. Os dados obtidos da microtração foram analisados por meio dos testes de ANOVA a três critérios e Tukey (p<0,05). O modo de fratura foi analisado e classificado em adesivo, misto e coesivo em dentina ou resina composta. Simultaneamente, uma fatia (mesiodistal) de cada espécime foi analisado por microscopia confocal para análise da interface resina/dentina e formação de tag nos tempos de envelhecimento. Os valores médios de resistência adesiva (MPa ± dp; 24 horas/6 meses /1 ano) foram: C(38,57 ± 15,36/26,67 ± 19,37/12,21 ± 11,24); C-Chx2%(41,93 ± 9,97/31,12 ± 17,02/11,86 ± 10,4); CC(21,80 ± 7,09/8,33 ± 10,71/4,70 ± 9,04); CC-Chx2%(19,85 ± 7,87/24,32 ± 11,7/6,19 ± 12,37); CL (22,70 ± 9,63/10,25 ± 15,6/4,93 ± 5,54); CL-Chx 2% (22,40 ± 7,34/20,94 ± 14,68/16,05 ± 13,91). A resistência de união à dentina erodida foi significativamente inferior ao do grupo controle, independentemente do tempo de armazenagem dos espécimes. Tanto a dentina normal e erodida, apresentaram redução dos valores de resistência de união ao longo do tempo. Apesar de os espécimes tratados com solução de clorexidina a 2% manterem os valores de resistência de união por 6 meses, eles reduziram após 1 ano. De acordo com as imagens por microscopia confocal, não houve diferenças observadas na qualidade geral da camada híbrida e formação de tags entre os grupos. A solução de digluconato de clorexidina a 2% pode ser uma alternativa para manter a estabilidade da interface de união adesiva ate os 6 meses. A resistência de união mais estável à dentina erodida por Coca-Cola Light comparada à dentina erodida por Coca-Cola ao longo do tempo, sugere a implicação de suas propriedades na adesão. / Soft drinks are potent erosive agents, which can provoke loss of dental structure and require adhesive restorative treatment, depending on the compromising level. Due to the different properties, these beverages can affect bonding to dentin in different manners. The aim of this study was to evaluate the bond strength (BS) to eroded dentin treated with 2% chlorhexidine solution. Sixty third human molars had their oclusal thirds removed to expose flat dentin and were divided into three groups, according to erosive protocol: Control (C) with no surface treatment, erosive challenge with Regular Coke (CC), erosive challenge with Light Coke (CL). The erosive challenge was performed by cycles of 5-min immersions, 3x/day during 5 days. After that, half of the teeth were treated with 2% chlorhexidine solution (1,5ul) and the remaining with deionized water (1,5ul) before adhesion procedure with Adper Single Bond 2® and FiltekTMZ350®. Specimens were stored at 37oC in deionized water for 24 hours. After this period, all specimens were sectioned into sticks (≈0.81 mm2 to 1mm2). A third of the specimens were tested immediately (I-24 h), for microtensile test. The remaining sticks aged in artificial saliva for 6 months (6m) and 1 year (1y) before testing. The failure mode was analyzed and classified as adhesive, mixed and cohesive in dentin or resin. Bond strength data was analyzed by three-way ANOVA and Tukey tests (p<0.05). Simultaneously, one slice (mesial-distal) of each specimen was analyzed by confocal microscopy for analysis of the interface resin/dentin and tag formation over the aging time. Means and standard-deviation (MPa) of each group (I, 6m and 1y) were: C (38.57±15.36, 26.67±19.37, 12.21±11.24), C-Chx 2% (41.93±9.97, 31.2±17.02, 11.86±10.4), CC (21.80±7.09, 8.33±10.71, 4.70±9.04), CC-Chx 2% (19.85±7.87, 24.32±11.7, 6.19±12.37) CL (22.70±9.63, 10.25±15.6, 4.93±5.54) and CL-Chx 2% (22.40±7.34, 20.94±14.68, 16.05±13.91). Adhesive and/or mixed failures were frequently observed in all specimens. Bond strength of eroded dentin specimens was lower than of the normal dentin specimens, for all testing times. Both normal and eroded dentin showed decrease on µTBS values with time. Although the specimens treated with 2% chlorhexidine solution maintained the bond strength values for 6 months, they reduced significantly, after 1 year. after this period the bond strength values went down. According to confocal microscopy images, no difference in the overall quality of hybrid layer and tags formation among groups was observed. The use of 2% chlorhexidine solution could be an alternative to maintain the stability of bonding interface. More stable bonding strength to eroded dentin with Coca-Light over time, compared to dentin eroded by Regular Cola suggests the implication of their properties on bonding.
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Towards a more efficacious treatment for oropharyngeal candidiasis (OPC) : hydrogel-forming tablets for the controlled release delivery of chlorhexidine diacetateAl-Ani, Enas Atallah January 2018 (has links)
Oropharyngeal candidiasis is a localised infection in the oropharynx region caused by Candida species, predominately C. albicans. It is commonly spread among immunocompromised patients and aggravated by hyposalivation or xerostomia. Current treatment is by systemic antifungals, which might be accompanied by gastrointestinal tract disorders, headache, allergic reactions and drug interactions or Candida becoming resistant to them. In the present work, the anti-candida activity of chlorhexidine diacetate (CHD) was tested as the drug of choice, it has no systemic side effects and microorganisms do not develop resistance against it. Thymol and farnesol were also tested individually and in combination with CHD to investigate a synergistic effect against Candida planktonic cells. The effects of CHD and thymol were investigated against C. albicans biofilm after two hours exposure by testing the metabolic stress, vacuolar activity and protein content. The results of the anti-Candida activity of CHD and thymol based on the minimum inhibitory concentration (MIC) and the minimum biocidal concentration (MBC) were 2.5 and 5 μg/ml for the former and 125 and 250 μg/ml for the later. Farnesol did not show an MIC and MBC at the investigated concentrations, however, it increased the MIC and MBC of CHD to 5 and 40 μg/ml and of thymol to 250 and >250 μg/ml, respectively. The antibiofilm activity of CHD and thymol was concentration dependent and CHD was more potent than thymol. A concentration of 20 μg/ml and 2 hours treatment of Candida biofilm grown for 24 hours showed an 85% decrease in oxidative stress, 78% and 60% loss of vacuolar activity and protein content, respectively. The combination of both drugs showed a limited increase in the activity. The cytotoxic effects of CHD and thymol were tested on human embryo kidney epithelial cell line (HEK 293); the metabolic stress, lysosomal activity and protein content were tested. The cytotoxic effects were also concentration dependent and the combination have increased the cytotoxicity. A concentration of 20 μg/ml and 2 hours treatment showed a 40% decrease in oxidative stress and neither the lysosomal activity nor protein content of HEK 293 cells was affected by the treatment Finally, a mucoadhesive hydrogel buccal tablets for the controlled release of CHD were designed and prepared to increase the residence time of an effective concentration of CHD in the oral cavity for two hours. They were prepared using Poloxamer 407 (P407), hydroxypropyl methylcellulose (HPMC) and either sorbitol, mannitol or xylitol at different ratios. The tablets were investigated for their physical properties, ex vivo mucoadhesion, the rate of hydration, gelling efficiency using image analysis, differential scanning calorimetry (DSC), Fourier transforms infrared spectroscopy (FTIR), X-ray diffractometry (XRD) and in vitro dissolution using Apparatus I and a novel method based on controlled flow rate to mimic salivary drug delivery in the oral cavity. Based on the antibiofilm activity and the cytotoxic effect of CHD a concentration of 20 μg/mL was chosen to be released from the tablets to maintain both efficacy and safety. Accordingly, to maintain this concentration the final formulations were prepared with a 2.5 mg dose of CHD. Tablets analysis showed no chemical interaction with the excipient based on DSC, FTIR and XRD. Furthermore, a novel dissolution method was developed based on a constant flow rate of the dissolution media to mimic oral salivary flow. By comparing CHD release using App I and the flow rate method it was shown that hydrogel-forming tablets successfully controlled the release of CHD regardless of the volume of the dissolution media with approximately 90% release and an average release concentration of 19 μg/ml and 1 ml/min flow rate. This making it a potential candidate for future application for treatment of candidiasis in all types of patients.
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Efeito do uso de primers bioativos na interface dentina-adesivo / Effect of bioactive primers on dentin--adhesive interfaceSousa, Ana Beatriz Silva 29 July 2015 (has links)
A longevidade das restaurações com compósitos está diretamente relacionada ao sucesso do tratamento estético. A vida útil das restaurações pode ser influenciada por vários fatores como o material empregado, tempo de uso clínico e a degradação da matriz dentinária por metaloproteinases da matriz (MMPs), que podem afetar a integridade da interface adesiva, fazendo com que a união dentina-adesivo seja comprometida. Assim, buscando melhores resultados na durabilidade das restaurações adesivas, o objetivo deste estudo foi avaliar o efeito de substâncias inibidoras de MMPs (soluções de clorexidina - CHX a 0,2% e doxiciclina a 3%) e agente de ligação cruzada (extrato de semente de uva - grape seed extract - GSE a 15%) na Resistência de União (RU) de restaurações de resina composta submetidas à ciclagem mecânica. Cavidades de Classe I foram preparadas na área central da superfície exposta de 48 molares humanos hígidos, posteriormente separados em 4 grupos (n=12) de acordo com o tratamento de superfície recebido após o condicionamento de ácido: Grupo I - Controle (Sistema Adesivo - Adper Single Bond Plus - 3M ESPE); Grupo II - CHX 0,2% + Sistema Adesivo; Grupo III - GSE 15% + Sistema Adesivo e Grupo IV - Doxiciclina 3% + Sistema Adesivo. Após os procedimentos restauradores (Filtek Supreme Ultra - 3M ESPE), as amostras foram armazenadas em água destilada durante 24 horas a 37°C e subdividas em dois subgrupos: A - Controle (armazenado em saliva artificial) e B - Submetido à ciclagem mecânica (Coil Cycler, Proto-tech, forca de 50 N, frequência de 1,5 Hz em 1 x 106 ciclos de aplicação). Após ciclagem mecânica, os corpos de prova foram cortados em palitos (0,8 x 0,8 mm; n = 5 por dente) e submetidos ao teste de microtração (Bisco) a velocidade de 1 mm/min. A atividade colagenolítica da MMP-2 sob a ação dos primers bioativos foi analisada utilizando o kit EnzChek Gelatinase/Colagenase Assay (D-12054, Molecular Probes, Eugene, OR, EUA). A atividade gelatinolítica das MMPs-2 e -9 após incubação com os primers bioativos foi avaliada através de zimografia convencional. Os resultados obtidos das duas análises foram apresentados na forma de porcentagem de inibição. Zimografia in situ foi realizada utilizando gelatina de fluorescência conjugada (Kit EnzChek Gelatinase/Collagenase Assay) como substrato de MMPs e avaliada com aumento de 40x através de microscopia de fluorescência. Posteriormente, os fótons fluorescentes foram analisados em software (ImageJ). Obtidos os resultados, os dados foram submetidos à análise estatística (2way ANOVA, Tukey, p>0,05) e demonstraram que os primers bioativos não exerceram influência significante sobre a RU dentina-adesivo, independente da ação da ciclagem mecânica. A atividade colagenolítica, segundo zimografia convencional, demonstrou que os primers bioativos foram capazes de inibir as MMPs, sendo a CHX menos eficiente. Na análise de zimografia in situ, os primers bioativos diminuíram a atividade das MMPs localizadas na interface adesiva, com aumento da atividade gelatinolítica do grupo Controle sendo maior quando submetidos à ciclagem mecânica, efeito não encontrados no grupos tratados com primers bioativos. Concluiu-se que, apesar de não apresentarem efeitos sobre a RU da interface adesiva, os primers bioativos apresentam ação sobre a degradação da camada híbrida. / The durability of composite resin restorations is one of the main points related to the success in aesthetic treatments. The longevity of adhesive restorations can be affected by various factors such as the materials, the clinical time of use and the dentin matrix degradation mediated by matrix metalloproteinases (MMPs). MMPs can affect the adhesive interface, compromising the bonding between dentin and adhesive. Thus, searching for better results on longevity of adhesive restorations, the aim of this study was to evaluate the effect of MMPs inhibitors (chlorhexidine - CHX 0.2% and doxycycline 3% ) and crosslinking agent (grape seed extract - GSE 15%) on resin composite bond strength (BS) of restorations submitted to load cycling. Class I cavities were performed in the central area of the exposed surface of 48 sound human molars. Then, it was divided into 4 groups (n=12) according to the surface treatment received after the acid etching: Group I - Control (Adhesive System - Adper Single Bond Plus - 3M ESPE); Group II - CHX 0.2% + Adhesive System; Group III - Doxycycline 3% + Adhesive System e Group IV - GSE 15% + Adhesive System. After restorative procedures (Filtek Supreme Ultra - 3M ESPE), the samples were stored in distilled water for 24 hours at 37°C and then subdivided into two subgroups (n=6): A - Control (stored in artificial saliva) and B - Submitted to load cycling (Coil Cycler, Proto-tech, 50 N, 1.5 Hz, 1 x 106 cycles). After load cycling, the specimens were cut into sticks (0.8 x 0.8 mm; n = 5 per teeth) and submitted to the microtensile test (Bisco) at 1 mm/min. The collagenolytic activity of MMP-2 under action of bioactive primers was analyzed using EnzChek Gelatinase/Colagenase Assay Kit (D-12054, Molecular Probes, Eugene, OR, EUA). The gelatinolytic activity of MMPs-2 and -9 after incubation with the bioactive primers was evaluated by gelatin zymography. The results of these two analyzes were presented by percentage of inhibition. In situ zymography was performed using fluorescence conjugated gelatin (EnzChek Gelatinase/Collagenase Assay Kit) as MMP substrate and evaluated using 40x magnification under fluorescence microscopy. Then the fluorescent photons were analyzed with an appropriate software (ImageJ). The results were subjected to statistical analysis (2-way ANOVA, Tukey, p<0.05) and the bioactive primers showed no significant influence on the dentin-adhesive BS, regardless the load cycling action. According to gelatin zymography, the collagenolytic activity demonstrated that the bioactive primers were able to inhibit MMPs activity and CHX was less efficient. In situ zymography analysis, showed that the bioactive primers decreased the activity of MMPs located in adhesive interface. The data also demonstrated increased gelatinolytic activity on Control group, being higher when submitted to load cycling, and which effect was not found in the groups treated with bioactive primers. It could be concluded that although the bioactive primers did not influenced the BS of adhesive interface, they demonstrated positive results on hybrid layer degradation.
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Estudo in vitro da influência de soluções irrigantes tradicionais e soluções irrigantes e soluções alcoólicas de Azadirachta indica (Neem) na resistência de união de um cimento resinoso auto-adesivo utilizado na fixação de pinos de fibra de vidro / In vitro study of the influence of traditional irrigation solutions and alcoholic irrigating solution of Azadirachta indica (Neem) on the bond strength of a self-adhesive resin cement used for fixation of glass fiber postsSturaro, Rafael Hayaxibara 21 January 2016 (has links)
O uso de pinos de fibra de vidro são cada vez mais comuns em reabilitação oral, dessa forma vários sistemas de adesão são encontrados no mercado. Porém ainda há o desafio de manter assepsia do conduto para cimentação do pino sem contaminação. O objetivo deste trabalho foi avaliar a interação de soluções irrigantes na adesão de cimento auto-adesivo em casos de cimentação de pinos de fibra de vidro. Foram utilizados 75 caninos superiores humanos hígidos seccionados transversalmente, de modo que restaram16mm de comprimento radicular partindo do ápice. Estes dentes foram tratados endodonticamente e receberam preparo com profundidade de 12 mm. Após a inclusão das raízes em resina acrílica receberam irrigação com as soluções: G1 - Soro fisiológico; G2 - Extrato Alcoólico de Neem; G3 - EDTA 17%; G4 Hipoclorito de Sódio 2,5%; G5 - Gluconato de Clorexidina 2%. Após a cimentação dos pinos de fibra de vidro com cimento auto-adesivo estes foram submetidos a teste de tração pull out. Foram obtidos slices das raízes em corte transversal para análise em microscópio confocal a laser e microscopia eletrônica de varredura. Realizou-se teste ANOVA e Tukey para análise estatística. As seguintes médias em Newtons foram observadas: G1 - 334,0; G2 - 265,9; G3 - 281,7; G4 - 205,7; G5 - 303,1.Pela microscopia eletrônica de varredura notou-se que G4 apresentou maior degradação da dentina, G2 mostrou maior deposição de debris. Pela análise confocal observou-se prevalência de falhas adesivas. Após análise dos dados concluiu-se que o gluconato de clorexidina foi a solução que apresentou melhor força de adesão comparada às demais, além de não degradar a dentina e não deixar resíduos. Conclui-se que a Clorexidina ainda é um interessante irrigante prévio a cimentação de pinos de fibra de vidro devido às propriedades apresentadas. / The use of glass fiber posts are increasingly common in oral rehabilitation thus various adhesion systems are found on the market. But there is still the challenge of maintaining the root canal aseptic for luting post without contamination. The objective of this study was to evaluate the interaction between irrigating solutions in the selfadhesive cement in cases of luting glass fiber post. A total of 75 human maxillary canines healthy were sectioned, so that remaining 16 mm of root length from the apex. The roots were endodontic treated and post space preparation were12mm. Then, after inclusion in acrylic resin they were separated in groups according to irrigation protocol: G1 - Saline Solution; G2 - Neem Alcoholic Extract; G3 - EDTA 17%; G4 Sodium Hipocloryte 2,5%; G5 - Chlorhexidine Gel 2%. After luting of glass fiber posts with self adhesive cement these were subjected to tensile test pull out. Slices were obtained in the root cross section for analysis in confocal microscopy and scanning electron microscopy. The statistical analysis was performed by ANOVA and Tukey tests. The following averages in Newtons were observed: G1 - 334,0; G2 - 265,9; G3 - 281,7; G4 - 205,7; G5 - 303,1. By scanning electron microscopy it was noted that G4 showed higher degradation of dentin, G2 showed greater deposition of debris. By confocal analysis showed a prevalence of adhesive failures. After analyzing the data it is concluded that the G5 group showed the best bond strength compared to the others, and does not degrade the dentine and not leaving residue. It follows that the chlorhexidine is still an interesting prior irrigating cementing glass fiber post due to the properties presented.
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Avaliação da reação do hipoclorito de sódio e do gel de clorexidina na superfície do canal radicular / Evaluation of the interaction between sodium hypochlorite and chlorhexidine gel on the root dentin surfaceBrum, Thiago Cardoso Bulhões 17 September 2008 (has links)
Quando combinados no interior do canal, hipoclorito de sódio e clorexidina formam um produto insolúvel em água. Esse trabalho teve como objetivo avaliar as conseqüências da utilização do hipoclorito de sódio 1% pH 9 (NaOCl) como substância durante o preparo e do gel de clorexidina a 2% (CLX) como medicação intracanal em diferentes condições, sob a luz do microscópio eletrônico de varredura ambiental (MEVA). Cinqüenta pré-molares humanos inferiores foram preparados com ProTaper Universal®, sendo quarenta com auxílio de NaOCl e Endo-PTC Leve®. Outros dez dentes foram preparados apenas com CLX (Grupo 2). Os espécimes foram submetidos à irrigação final com ácido cítrico (Grupos 1 e 2) e com tiosulfato de sódio 10% e ácido cítrico (Grupo 3). Todos os grupos experimentais foram medicados por 7 dias com clorexidina. Após esse período, a medicação foi removida e foram contados os túbulos visíveis e os túbulos patentes da superfície dentinária, nas imagens obtidas através do MEVA. Houve diferença estatística entre os grupos experimentais e o Grupo controle negativo, exceto no Grupo 3, em que foi utilizado o tiosulfato. Portanto, apenas quando o NaOCl foi inativado, pode-se observar quantidades desejáveis de túbulos visíveis e patentes. / When combined in the interior of the canal, sodium hypochlorite and chlorhexidine form an insoluble product. The aim of this study was to evaluate the consequences of the use of the hipoclorito of sodium 1% pH 9 (NaOCl) as substance during prepare and gel of clorexidina 2% (CHX) as intracanal medication in different conditions, using environmental scanning electron microscope (ESEM). Fifty extracted mandibular premolars had been prepared with ProTaper Universal®. In forty, was used NaOCl and EndoPTC Leve (Tween 80, Urea peroxide and Carbowax associated) during the prepare. Ten teeth had been prepared using CHX only (Group 2). These had been submitted to the final irrigation with citric acid (Groups 1 and 2) and with sodium thiosulfate 10% and citric acid (Group 3). All the experimental groups received 7 days of intracanal medication with CHX. After this period, the medication was determined the numbers of visible and patent tubules on the root dentin surface, using the images captured on ESEM. There were significant differences between the control group and the experimental groups, except in the case where the tiosulfato was used. Therefore, only when NaOCl is inactivated, desirable amount of visible and patent tubules can be observed.
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Efeito de um dentifrício com digluconato de clorexidina a 0,12% sobre a saúde bucal durante o período pós-operatório de pacientes submetidos à cirurgia de enxerto alveolar secundário com rhBMP-2 / Effect of a dentifrice containing 0.12% chlorhexidine digluconate on the oral health during the postoperative period in individuals submitted to secondary alveolar graft with rhBMP-2Palone, Marcos Roberto Tovani 14 November 2014 (has links)
Indivíduos com fissuras labiopalatinas frequentemente apresentam dificuldade em realizar higiene bucal adequada, apresentando maior acúmulo de placa bacteriana com consequente desequilíbrio microbiano na cavidade bucal; assim, clinicamente tornam-se considerados pacientes de alto risco para cárie dentária e doença periodontal. O controle de placa é particularmente importante no período pós-operatório do enxerto alveolar secundário, com vistas a evitar infecção pós-operatória, manter a saúde do periodonto de proteção e por consequência promover melhor reparo. O objetivo deste estudo foi avaliar a efetividade de um dentifrício com digluconato de clorexidina a 0,12% sobre a saúde bucal em indivíduos com fissuras labiopalatinas durante o período pós-operatório após enxerto alveolar secundário. Um estudo duplo cego foi realizado em 20 indivíduos aleatoriamente divididos em dois grupos (A e B). Indivíduos do grupo A (controle) receberam dentifrício convencional e indivíduos do grupo B um dentifrício à base de clorexidina a 0,12%; sendo para ambos distribuídos escovas de dente de cabeça pequena e cerdas extramacias, acrescido de instruções de higiene bucal a ser realizada três vezes ao dia (manhã, após o almoço e antes de dormir). Os indivíduos foram avaliados em dois períodos, pré-operatório e pós-operatório tardio (após três meses), nos quais foram clinicamente avaliados os índices gengival, de placa, CPOD, ceod, manchamento dentário, além da ocorrência de alterações no paladar. A análise estatística para avaliação dos parâmetros índice gengival, índice de placa, CPOD, ceod para ambos os grupos revelou ausência de diferença estatisticamente significativa entre os grupos, e entre os períodos do estudo para ambos os grupos. Apenas uma criança, a qual fez uso do dentifrício A, relatou alteração no paladar durante o período correspondente. Em todos os exames clínicos realizados não foram diagnosticados qualquer tipo de manchamento dentário indicativo de associação com o uso de clorexidina. Por conseguinte, de acordo com os resultados deste estudo, destaca-se a importância e influência positiva da atenção individualizada durante o processo de ensino da técnica de escovação, principalmente por tratar-se de procedimento cirúrgico dirigido ao público infantil ou pré-adolescente, estando a responsabilidade da execução correta dos cuidados operatórios incumbidas aos seus responsáveis. / Individuals with cleft lip and palate often present difficulty to perform adequate oral hygiene, presenting greater dental plaque accumulation with consequent microbial imbalance in the oral cavity; therefore, they were clinically considered high risk individuals for dental caries and periodontal disease. Plaque control is particularly important in the postoperative period after secondary alveolar graft, aiming to avoid postoperative infection, maintain the periodontal health and consequently promote better repair. This study evaluated the effectiveness of a dentifrice containing 0.12% chlorhexidine digluconate on the oral health of individuals with cleft lip and palate during the postoperative period after secondary alveolar graft. A double blind study was conducted on 20 individuals randomly divided in two groups (A and B). Individuals in group A (control) received conventional dentifrices, and individuals in group B received a dentifrice containing 0.12% chlorhexidine digluconate. Individuals in both groups received small head toothbrushes with extra-soft bristles, as well as oral hygiene instructions for toothbrushing three times a day (at morning, after lunch and before sleep). The individuals were analyzed in two periods, namely preoperative and late postoperative (after three months), comprising evaluation of gingival index, plaque index, DMFT, dmft, tooth staining, as well as the occurrence of taste changes. Statistical analysis for the variables gingival index, plaque index, DMFT and dmft for both groups revealed no statistically significant difference between groups, and between the study periods for both groups. Only one individual, in group A, reported taste changes during the study period. No tooth staining indicating association with the utilization of chlorhexidine was observed in the clinical examinations. This study highlighted the importance and positive influence of individualized care for toothbrushing instructions, especially considering that this surgical procedure is usually performed in children or pre-teens, under responsibility of proper accomplishment of postoperative care measured by their caregivers.
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