Submitted by Marco Antônio de Ramos Chagas (mchagas@ufv.br) on 2017-05-09T17:14:16Z No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 865049 bytes, checksum: e1f0232ee5da962b69abe15831e4525c (MD5) / Made available in DSpace on 2017-05-09T17:14:16Z (GMT). No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 865049 bytes, checksum: e1f0232ee5da962b69abe15831e4525c (MD5) Previous issue date: 2001-08-12 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / Os objetivos deste trabalho foram avaliar a resposta ginogênica em 11 genótipos, adequar metodologia para indução in vitro de poliplóides e detectar alelos da auto - incompatibilidade em maracujazeiro azedo ( Passiflora edulis f. flavicarpa Degener). Para avaliar os 11 genótipos, óvulos não -fertilizados foram inoculados em meio MS suplementado com as vitaminas do meio B5, 100 mg.L -1 de mio-inositol, 3% de sacarose, 5,0 mg.L -1 de 2,4 – D e 1,0 mg.L -1 de BAP e cultivado na ausência d e luz a 27°C ± 1. Na indução dos poliplóides, utilizou -se explantes de segmentos de hipocótilo (1,0 cm de comprimento) de plantas germinadas in vitro e o meio MS suplementado com agentes antimitóticos, colchicina (0, 25, 250 e 1250 μM) e orizalina (0, 5, 15 e 30 μM). A determinação do nível ploidia das plantas regeneradas e aclimatadas foi feita por meio da contagem do número de cromossomos em células metafásicas de ponta de raiz. Na detecção molecular dos alelos S da auto -incompatibilidade, reações de PCR foram conduzidas utilizando DNA genômico extraído de folhas jovens e oligonucleotídeos iniciadores específicos para os alelos-S das classes I e II. O genótipo II – 20 apresentou melhor resposta ginogênica, produzindo 21 embriões (7,0 7% dos óvulos inoculados). Na indução dos poliplóides, os meios mais adequados foram MS suplementado com colchicina a 25 μM e MS suplementado orizalina a 15 μM. A colchicina, em concentrações superiores (250 e 1250 μM) foi fitotóxica aos explantes. Os indivíduos diplóides apresentaram 2n = 2x = 18 cromossomas, enquanto os tetraplóides, 2n = 4x = 36. O número de cloroplastos por célula guarda foi eficiente indicador do nível de ploidia nesta espécie. Plantas diplóides possuem quatro cloroplastos por célula-guarda e as tetraplóides oito, em média. Utilizando- se os iniciadores específicos para os alelos -S, foi possível detectar e incluir a nível molecular, os alelos S 1 e S 3 do maracujazeiro, no subgrupo I das glicoproteínas do loco -S (SLG) das brassicas. / The objectives of this work were to evaluate the gynogenic ability of 11 genotypes, to adapt in vitro methodology for poliploidy induction and detection of self -incompatibility alleles in yellow passion fruit (Passiflora edulis f. flavicarpa Degener). For the evaluation of gynogenic ability, no-fertilized ovules were inoculated in a MS medium supplemented with vitamin B5, 100 mg.L -1 mio-inositol, 3 g.L -1 sucrose, 5,0 mg.L -1 2,4 - D and 1,0 mg.L -1 BAP and cultivated in dark at 27°C ± 1. For poliploidy induction, explants from hypoc otyl segments (1,0 cm length) of plants germinated in vitro were inoculated in BAD medium, supplemented with antimitotic agents: colchicine (0, 25, 250 and 1250 μM) and orizaline (0, 5, 15 and 30μM). The ploidy level of regenerated and acclimatized plants was determinated by counting the number of chromosomes at root tips metaphasic cells. For the molecular detection of self-incompatibility S-alleles, genomic DNA was extracted from young leaves and submitted to PCR reaction with specific oligonucleotides primers for the classes I and II of the S-alleles. The genotype II - 20 presented the better gynogenic ability, producing 21 embryos (7,07% of the inoculated ovules). For the induction of poliploidy, the most appropriate media were BAD supplemented with 25 μM colchicine and BAD supplemented with 15 μM orizaline. Higher concentrations of colchicine (250 and 1250 μM) were toxic to the explants. The diploid individuals presented 2n = 2x = 18 chromosomes, while the tetraploids had 2n = 4x = 36. The number of chlor oplasts in the guard-cells was an efficient indicator of the ploidy level in this species. The guard -cells had four chloroplasts in diploid plants and eight in tetraploid ones. The alleles S1 and S3 were detected at molecular level and included in the subgroup I of glicoproteins of S-locus (SLG) of the Brassica. / Tese importada do Alexandria

Submitted by Marco Antônio de Ramos Chagas (mchagas@ufv.br) on 2017-05-10T11:57:57Z No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 953824 bytes, checksum: 33083238f7a3fe7fee3d7c79c6ae674d (MD5) / Made available in DSpace on 2017-05-10T11:57:57Z (GMT). No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 953824 bytes, checksum: 33083238f7a3fe7fee3d7c79c6ae674d (MD5) Previous issue date: 2002-03-04 / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico / A espécie de abelha sem ferrão Melipona quadrifasciata Lep. é um importante agente polinizador, assim como um ótimo material para estudos biológicos. Nessa espécie, assim como na maioria dos Hymenoptera, os machos se desenvolvem a partir de óvulos não fecundados e são haplóides, enquanto as fêmeas se originam de óvulos fertilizados e são diplóides. Melipona quadrifasciata possui um sistema de determinação do sexo de um único loco e múltiplos alelos e, sob endogamia, há produção de machos diplóides. Estes machos diplóides são, geralmente, inviáveis ou estéreis, e impõem um custo significativo no sucesso reprodutivo de seus progenitores. Nesta espécie, os machos diplóides emergem como adultos, possuindo, no entanto, uma menor longevidade que os machos haplóides. Em Melipona quadrifasciata, estes machos se assemelham visualmente aos haplóides. Neste trabalho, buscou-se características que distinguissem machos diplóides de haplóides de Melipona quadrifasciata. A característica analisada foi o tamanho dos testículos, que em outras espécies apresentou uma considerável variação entre machos diplóides e haplóides. Para realizar esta comparação, utilizou-se duas colônias fornecedoras de machos diplóides e duas fornecedoras de machos haplóides. Dez pupas de cada população foram analisadas, com medição do tamanho dos testículos e largura do tórax. Foi observado que machos haplóides possuem testículos significativamente maiores que machos diplóides, tornando esta característica útil para a diferenciação destes machos. Houve uma correlação positiva entre o tamanho dos testículos e a largura do tórax em machos diplóides. A produção de machos diplóides em Melipona quadrifasciata foi acompanhada em três colônias submetidas à cruzamentos endogâmicos. Uma destas colônias foi obtida pelo cruzamento de uma rainha com um de seus filhos, resultantes de um prévio cruzamento desta rainha com um macho estéril. As outras duas foram obtidas pelo cruzamento de uma rainha com um irmão. Todas as colônias produziram machos diplóides. Na colônia resultante do cruzamento mãe x filho houve uma produção considerável de machos haplóides, aparentemente devido ao primeiro cruzamento com um macho esterilizado. Nesta colônia a proporção entre machos diplóides e fêmeas não foi estatisticamente diferente de 1:1, como esperado pelo sistema de determinação de sexo desta espécie. Em ambas as colônias de cruzamento irmã x irmão, os machos foram todos diplóides. Em uma destas colônias a proporção de machos e fêmeas foi aproximadamente 1:1. No entanto, na outra colônia houve um número significativamente maior de fêmeas. Demonstrou-se, por meio de marcadores RAPD, que parte das operárias produzida nesta colônia era resultado de um segundo acasalamento da rainha. Foi feita uma análise para identificação do loco sexual. Um total de 376 marcadores polimórficos foram obtidos pela amplificação do DNA de cinco machos haplóides com 343 primers, obtendo-se um polimorfismo médio de 1,1 bandas polimórficas por primer. Para a análise de ligação ao sexo, amplificou-se o DNA de três machos diplóides e três operárias (da mesma colônia) com 119 primers polimórficos, não se obtendo evidências de ligação de nenhum destes marcadores ao loco sexual. / The species of stingless bee Melipona quadrifasciata Lep is very important in pollination, as well as a great model for biological studies. In this species, as in the majority of Hymenoptera, males develop from non-fertilized eggs, and are haploids, while females originate from fertilized eggs, and are diploids. Melipona quadrifasciata has a sex determination system of one locus and multiple alleles, and under inbreeding, diploid males are produced. These diploid males usually are unviable or sterile, and decrease the reproductive success of their progenitors. In this species, diploid males emerge as adults, and have less longevity than haploid males. In Melipona quadrifasciata, these males visually resemble the haploids. In this study, traits that distinguish haploid from diploid drones in this species were sought. The trait analyzed was the testis length, which presented a considerable variation between diploid and haploid drones in others species. In order to do this comparison in Melipona quadrifasciata, two colonies that provided diploid males, and two that provided haploid males were used. Ten pupae of each colony were analyzed, by measurements of testes length and thorax width. It was observed that haploid drones had smaller testes than diploid drones, what make this trait useful to distinguish these drones. A positive correlation was observed between the length of testes and width of thorax in diploid drones. The production of diploid drones in Melipona quadrifasciata was analyzed in three colonies submitted to inbreeding crossings. One of these colonies was obtained by crossing a queen with one of her sons, resulted from an earlier crossing of this queen with a sterililized drone. The other two were obtained by the crossing of a queen with her brother. All colonies produced diploid drones. In the colony resulted from mother x son crossing occurred a considerable production of haploid drones, apparently due to the first crossing with a sterilized drone. In this colony, the proportion of diploid drones and females was not statistically different from 1:1, as expected by the sex determination system of this species. In both colonies of sister x brother crossings, the drones were all diploids. In one of these colonies the proportion of males and females was 1:1. However, in the other colony the number of females was significantly greater than the number of males. It was demonstrated that part of the workers produced in this colony was resulted from a second crossing of the queen. An analysis to identify the sexual locus of the species Melipona quadrifasciata was done. A total of 376 RAPD markers was obtained by the DNA amplification of five haploid drones, with 343 primers, obtaining a mean polymorphism of 1,1 polymorphic bands per primer. To analyze sex linkage, DNA of three diploid males and three workers (from the same colony) was amplified with 119 polymorphic primers. However, it was not observed evidences of linkage of any markers to the sexual locus. / Dissertação importada do Alexandria

Submitted by Reginaldo Soares de Freitas (reginaldo.freitas@ufv.br) on 2017-05-11T18:21:11Z No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 507768 bytes, checksum: c1a5b4fb947ae111d0a7a14225630109 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-05-11T18:21:11Z (GMT). No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 507768 bytes, checksum: c1a5b4fb947ae111d0a7a14225630109 (MD5) Previous issue date: 2003-03-12 / Programa de Modernización del Sector Agropecuario / Um dos maiores problemas na comercialização de bananas é o destacamento individual dos frutos das pencas, fazendo que estes percam ou diminuam seus valores comercial e nutricional, além de contribuir para que as perdas pós-colheita atinjam cerca de 40% da produção brasileira. O presente trabalho teve como objetivos caracterizar o comportamento dos componentes da parede celular, de amido e açúcares solúveis; determinar a atividade enzimática de poligalacturonase (PG), pectinametilesterase (PME) e xilanase na região do pedicelo de duas variedades e um híbrido de banana resistente e suscetível ao despencamento natural durante o amadurecimento; e estabelecer a relação entre o comportamento dos componentes da parede celular e a atividade enzimática, bem como a suscetibilidade de bananas à queda natural. Foram utilizados os genótipos triplóides ‘Terra’ (AAB) e ‘Prata’ (AAB) e o híbrido tetraplóide SH-3640 (AAAB). Os resultados evidenciaram uma diferença de comportamento na consistência da polpa entre os genótipos estudados, com a ressalva de que ‘Terra’ apresentou a maior consistência em todos os seus estádios de amadurecimento, seguido de ‘Prata’ e ‘SH-3640’. Verificou-se também que o genótipo ‘Terra’ mostrou resistência ao despencamento, mesmo estando seus frutos maduros, ao contrário de ‘SH-3640’, que, já a partir do estádio 5 (fruto amarelo com pontas verdes), exibiu suscetibilidade à queda. Em todos os estádios de amadurecimento, o genótipo ‘Terra’ teve os maiores teores de matéria seca. Por sua vez, o genótipo ‘SH-3640’ sempre manteve os mais baixos teores. Quanto à taxa respiratória, embora se tenha elevado com o amadurecimento, em nenhum dos três genótipos estudados foi observado comportamento climatérico típico. Do total das frações dos carboidratos estruturais (celulose, hemicelulose e pectina) e não-estruturais (amido, açúcares solúveis redutores e não-redutores), os genótipos ‘SH-3640’ e ‘Prata’ tiveram por volta de 80 e 70% de carboidratos estruturais no fruto verde, mantendo-se relativamente constantes durante o amadurecimento. Nesses cultivares, houve redução na proporção de amido e aumento na de açúcares solúveis, principalmente dos redutores. Já o genótipo ‘Terra’ apresentou variações mais evidentes com relação aos outros dois. Nesse genótipo, diminuíram os teores de pectinas no decorrer do amadurecimento, enquanto os de amido se mantiveram altos mesmo no fruto maduro. Entre as enzimas estudadas, os resultados evidenciaram um papel mais importante de PME e PG na queda de fruto e confirmaram a maior resistência do genótipo ‘Terra’ ao despencamento, permitindo concluir que PG e PME são as enzimas-chave na solubilização da parede celular que acompanha o amadurecimento e, portanto, têm papel fundamental na indução do despencamento natural. A alta suscetibilidade ao genótipo SH-3640 ao despencamento está associada à elevada atividade de PG e PME e ao baixo teor de matéria seca; a maior resistência ao despencamento do genótipo ‘Terra’ está relacionada com o maior acúmulo de matéria seca e amido no pedicelo. / One of the greatest problems for banana commercialization is finger drop of ripe bananas from the bunch since the market as well as the nutritional value of such isolated fruits is reduced or lost. This contributes to post-harvest losses of about 40% of the Brazilian production. In this study, the behavior of the cell wall components, starch, and soluble sugars was characterized; the enzymatic activity of polygalacturonase (PG), pectinmetylesterase (PME), and xylanase in the pedicel region of two varieties and one hybrid determined; and the relation between the behavior of cell wall components, enzyme activities in the pedicel, and the susceptibility of bananas to natural fruit dropping established. The triploid genotypes ‘Terra’ (AAB) and ‘Prata’ (AAB), and the tetraploid hybrid SH- 3640 (AAAB) were used. Results showed a difference in the pulp consistence of the studied genotypes. ‘Terra’ presented the highest consistence throughout all ripening stages, followed by ‘Prata’ and then ‘SH-3640’. Even when the fruits were ripe, ‘Terra’ was most resistant against fruit dropping, while ‘SH-3640’ began to present a high susceptibility to fruit dropping from stage 5 on (yellow fruits with green tips). At all ripening stages, ‘Terra’ presented the highest dry matter content, while ‘SH-3640’ continuously maintained the lowest content. In none of the studied genotypes the respiration rate obeyed a typical climacteric behavior, in spite of increases during the ripening process. Of all carbohydrate structural (cellulose, hemicellulose, and pectin) and non-structural (starch, soluble reducing and non-reducing sugars) fractions, the genotypes ‘SH-3640’ and ‘Prata’ contained around 70 and 80%, respectively, of structural carbohydrates in the green fruits. This proportion remained relatively constant during the ripening process. In these cultivars, there was a reduction in the starch proportion and an increase of soluble sugars, mainly of reducing sugars. The genotype ‘Terra’, on the other hand, presented more evident variations than the other two: there was a reduction of pectin contents during the ripening process (from 2.1 to 0.47%), while the starch contents remained above 2% even in ripe fruit. The ’Terra’ genotype proved to be the most resistant against fruit dropping. Results evidenced the importance of PG and PME for the degradation, or simply, the solubilization of cell wall components during the ripening process, and, therefore, for natural fruit dropping. The high susceptibility of the SH-3640 genotype is related to the high PG and PME activity and the low dry matter content. In the case of ‘Terra’, the high resistance to finger drop is related to a greater accumulation of dry matter and starch in the pedicel. / Não foram localizados o cpf e o curriculo lattes do autor.

Submitted by Marco Antônio de Ramos Chagas (mchagas@ufv.br) on 2017-06-02T14:07:48Z No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 681389 bytes, checksum: 13d59dc39cc9b534b7bc474992b0662b (MD5) / Made available in DSpace on 2017-06-02T14:07:48Z (GMT). No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 681389 bytes, checksum: 13d59dc39cc9b534b7bc474992b0662b (MD5) Previous issue date: 2003-05-06 / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico / Com o objetivo de obter cromossomos morfologicamente adequados para serem caracterizados citogeneticamente e identificados para montagem do cariograma de C. canephora (2n=2x=22), C. arabica (2n=4x=44) e C. eugenioides (2n=2x=22), empregaram-se novas técnicas citogenéticas associadas às metodologias computacionais de análise de imagens. As metodologias utilizadas possibilitaram a obtenção do cariograma das três espécies com cromossomos definidos e resolução adequada para caracterização de cada par de homólogos, aparentemente semelhantes quando obtidos por meio de técnicas convencionais. A análise citogenética revelou que C. canephora possui um par de cromossomos metacêntricos (m) e 10 pares submetacêntricos (sm). Foi observada a presença de satélites no braço curto do cromossomo 6, e o comprimento absoluto de seus cromossomos variou de 1,58 a 3,30 μm. A citometria de fluxo foi usada para estimar a quantidade de DNA (valor 2C), na fase G0/G1, em Coffea. Foram analisadas amostras das espécies de C. canephora (2x), C. eugenioides (2x), C. racemosa (2x) e C. arabica (4x); do Híbrido de Timor, híbrido natural triplóide entre C. arabica e C. canephora (4x); dos supostos híbridos interespecíficos naturais entre C. racemosa e C. arabica, denominados UFV 557; e de plantas resultantes do retrocruzamento entre C. arabica e UFV 557. A diferença na quantidade do conteúdo de DNA entre espécies diplóides foi de até 0,50 pg = 45% (Coffea racemosa 1,11 pg; Coffea eugenioides 1,40 pg e Coffea canephora cv. ‘Robusta’ 1,61 pg). Considerando-se os valores intraespecíficos (Coffea canephora 1,43 a 1,61 pg e Coffea arabica 2,40 a 3,04 pg), estas diferenças foram de 0,18 pg (12,59%) e 0,64 pg (26,67%), respectivamente. A citometria de fluxo também revelou-se uma ferramenta importante no monitoramento e identificação de híbridos interespecíficos de Coffea. A citométria de imagem foi empregada para determinação do índice de densidade óptica de preparações de pontas de raízes esmagadas e coradas com reação de Feulgen. O método prófase/telófase (mensuramento de 10 núcleos em prófase e 10 em telófase por lâmina) foi empregado nesta pesquisa. Assim, valores 4C e 2C, referentes ao núcleos em prófase e telófase, foram estimados, e as razões entre os genomas de Coffea arabica cv. Catuaí Vermelho (2n=44) e Coffea canephora cv. Conillon (2n=22) e entre Coffea arabica cv. Mundo Novo e cv. Catuaí Vermelho puderam ser estabelecidas. As estimativas do índice entre as cultivares obtidas pelo método de citometria de imagem foram comparadas com valores obtidos previamente usando a citometria de fluxo e apresentaram diferenças inferiores a 2,27%. / New cytogenetic techniques together with methods of computer image analyses were utilized to set up the karyogram of C. canephora (2n=2x=22), C. arabica (2n=4x=44), and C. eugenioides (2n=2x=22). Thereby, morphologically appropriate chromosomes were obtained for cytogenetic characterization and identification. These methodologies brought forth a karyogram of the three species with defined chromosomes and a suitable resolution for the characterization of each homologous pair, which, when obtained by conventional techniques, are apparently similar. The cytogenetic analysis indicated that C. canephora owns one metacentric (m) and 10 submetacentric chromosome pairs (sm). Satellites were localized on the short arm of chromosome 6, while the absolute chromosomes length varied between 1,58 and 3,30 μm. Flux cytometry was used to estimate the quantity of the DNA (value 2C) in the G0/G1 phase, for Coffea. Samples of the following species were analyzed: C. canephora (2x), C. eugenioides (2x), C. racemosa (2x), and C. arabica (4x); the Timor Hybrid, natural triploid hybrid of C. arabica and C. canephora (4x); the suspected interspecific natural hybrids of C. racemosa and C. arabica, designated UFV 557; and the backcrosses of C. arabica and UFV 557. The difference in the content quantity of the DNA among the diploid species reached 0,50 pg = 45% (Coffea racemosa 1,11 pg, Coffea eugenioides 1,40 pg, and Coffea canephora cv. ‘Robusta’ 1,61 pg). These differences were 0,18 pg (12,59%) and 0,64 pg (26,67%), respectively, in the intra-species values (Coffea canephora 1,43 to 1,61pg and Coffea arabica 2,40 to 3,04 pg). Flux cytometry proved to be of great usefulness to monitor and identify the interspecific hybrids of Coffea. Picture cytometry was employed in the determination of the optical density index in slide preparations of root tips pressed and dyed by the Feulgen reaction. The prophase/telophase method (measurement of 10 nuclei in prophase and 10 in telophase per slide) was used in this study. The values 4C and 2C of the nuclei in prophase and telophase were estimated, and the genome ratios of Coffea arabica cv. Catuaí Vermelho (2n=44) and Coffea canephora cv. Conillon (2n=22), as well as of Coffea arabica cv. Mundo Novo and cv. Catuaí Vermelho could be established. In a comparison between the estimate indices of the cultivars obtained by the picture cytometry method and the values established previously by flux cytometry, the differences lay below 2,27%. / Tese importada do Alexandria

Submitted by Reginaldo Soares de Freitas (reginaldo.freitas@ufv.br) on 2017-06-02T17:56:07Z No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 21114776 bytes, checksum: 8206d7ff8a0931ce4d6d2dca2c3fbaff (MD5) / Made available in DSpace on 2017-06-02T17:56:07Z (GMT). No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 21114776 bytes, checksum: 8206d7ff8a0931ce4d6d2dca2c3fbaff (MD5) Previous issue date: 2004-07-16 / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de Minas Gerais / O objetivo deste trabalho foi avaliar a resposta de indicadores de vitalidade do solo às homeopatias. Foram adotados indicadores físico- químicos, microbiológicos e vegetais. Assim, as variáveis avaliadas foram: diâmetro médio ponderado e diâmetro médio geométrico dos agregados formados, capacidade de retenção de água do solo, condutividade elétrica, carbono orgânico total, microbiana, quociente respiração microbiana, microbiano carbono da biomassa e quociente metabólico. Dentre os indicadores vegetais avaliou-se o número de dias até o início da germinação das sementes, número de plantas emergidas, número de espécies, média ponderada do grupo de altura, massa da parte aérea vegetal fresca e seca, índice de abundância em função da diversidade e massa das espécies, sendo também descritos sintomas visualizados na parte aérea dos vegetais. Foram também obtidas e descritas bioeletrografias do solo sob os diversos tratamentos homeopáticos. As homeopatias selecionadas originaram de sais orgânicos e elementos minerais comuns em solos e em processos biológicos vitais. Os experimentos foram conduzidos em Duplo-Cego , sendo adotada a escala decimal de diluição e diversas dinamizações. O solo utilizado foi coletado na camada de 0-5 cm de profundidade, no Arboreto-Plantas Medicinais da UFV, em Viçosa, MG, estando a área em processo de revegetação natural há mais de 10 anos. O solo foi responsivo às homeopatias e respectivas dinamizações, sendo as respostas também diferenciadas em função do tempo e freqüência de exposição do solo aos tratamentos. Considerando o solo experimentador sadio, as respostas indicam patogenesia, ou a ação primária da homeopatia. Por outro lado, cabe a hipótese das respostas indicarem similitude sendo, portanto, resposta secundária ou a reação da auto-organização do solo ao estímulo homeopático. Ao ser contrastada a resposta à homeopatia do solo do Arboreto com outros solos provenientes de diferentes manejos, foram verificados comportamentos variados em função da interação homeopatia e vitalidade do experimentador, sendo o tempo de verificação das respostas dependente do estado de vitalidade do solo. Deste modo, quanto mais em equilíbrio o solo, ou quanto menos intoxicado mais rapidamente expressou alterações detectadas pelas variáveis analisadas. As homeopatias demonstraram potencial de interagir com o metabolismo construtivo do solo, podendo interferir nos processos de mobilização e de imobilização de nutrientes, na eficiência microbiana, na dinâmica da água e na estruturação física do solo. A ciência da homeopatia é aplicável ao solo sendo recurso promissor à agricultura orgânica-ecológica. / The objective of this work was to evaluate homeopathic indicators of soil vitality. Physiochemical, microbiology and vegetal indicators were studied. The variables were: weighted mean of diameter and geometric mean of diameter of the formed aggregate, retention capacity of soil water, electric conductivity, total organic carbon, microbial respiration, carbon of the microbial biomass, microbial ratio and metabolic ratio. Among the vegetal indicators the number of days was evaluated from the beginning of seed germination, number of emerged plants, number of species, weighted mean of height group, mass of fresh and dry vegetal aerial part, abundance index as a function of diversity and species mass. It was also described the symptoms that were visualized in the aerial part of the plant. Bio-eletrographies of the soil were described after homeopathic treatments. The homeopathic preparations were done of organic salts and of common mineral elements of soils and in vital biological processes. The "Double-blind" procedure was adopted as well the decimal scale of dilution/dynamizations. The soil was collected from the layer of 0-5 cm of depth, in Arboreto- Medicinal Plant of UFV, in Viçosa, MG, being the area in process of natural succession more than 10 years. The soil was responsive to the homeopathies and respective dynamizations, being the responses differentiated as a function of time of soil treatments. Considering the soil as healthy, the responses indicated pathogenesis, or the primary action of the homeopathy. The hypothesis of the response fits similarity being, therefore, secondary answer or the reaction of the self-organization of soil to the homeopathic estimulation. There was interaction among arboreto soil, soils from several handlings and vitality of soils. The time of responses were dependent on the vitality state of the soil. The more the soil is well balanced or the less the soil is intoxicated the fastest the alteractions detected by the variables. The homeopathies demonstrated potential of interacting with the soil formation. Homeopathies may interfere in the mobilization processes and of immobilization of nutrients, in the microbial efficiency, in the dynamics of the water and in the physical structuring of the soil. The science of the homeopathy is applicable to the soil, being a promising resource to the organic-ecological agriculture.

Submitted by Marco Antônio de Ramos Chagas (mchagas@ufv.br) on 2017-06-05T17:28:45Z No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 224156 bytes, checksum: c00192db7ddd7289a2b8bb337d617069 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-06-05T17:28:45Z (GMT). No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 224156 bytes, checksum: c00192db7ddd7289a2b8bb337d617069 (MD5) Previous issue date: 2003-08-29 / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico / A área global cultivada com transgênicos em 2002 continuou a crescer pelo sexto ano consecutivo, com uma taxa de mais de 10% ao ano, atingindo, em 2002, 58,7 milhões de hectares. No Brasil, o cultivo comercial e o consumo de transgênicos estão suspensos até a presente data, no entanto cultivos clandestinos de soja transgênica têm sido identificados, sobretudo nos estados do sul do país. Inicialmente, este trabalho teve como objetivo oferecer um enfoque sobre a comercialização de soja transgênica e produtos derivados (farelo e ração) no Brasil, com base em amostras enviadas por várias empresas, durante os anos de 2000, 2001 e 2002, ao Laboratório de Análises Genéticas – AgroGenética. Foram analisadas amostras de grãos de soja, farelo e rações à base dessa leguminosa. O método utilizado nas análises foi o da reação em cadeia da DNA polimerase (PCR). “Primers” específicos foram utilizados para detecção do gene RR (“Roundup Ready”), do promotor 35S do vírus do mosaico da couve-flor e da região terminadora NOS do gene da nopalina sintase de Agrobacterium tumefasciens. Como resultados foram identificadas, no ano de 2000, amostras positivas apenas em grãos de soja (77,8%) e farelo (22,2%). Em 2001, 70,8% das amostras positivas foram de grãos de soja, 12,5% de farelo e 16,7% de rações à base de soja. Já, em 2002, 34,9% das amostras positivas foram de grãos de soja, 45% de farelo e 20,1% de ração. Devido à dificuldade em se obter quantidades significativas de DNA em condições de serem analisadas, a partir de alimentos processados, este trabalho teve como segundo objetivo ajustar uma metodologia de extração de DNA para produtos alimentícios processados cárneos para análise quantitativa. Para isso, foram testadas modificações em dois métodos de extração de DNA: o método Wizard (Promega) e o PrepMan Ultra (Applied Biosystems). As modificações no método Wizard incluíram o uso de um volume 1,5 vez maior do tampão de extração que o recomendado pelo fabricante, um maior tempo de incubação (por mais de 12 horas) e a eluição final do DNA em um volume menor de água do que o sugerido. No método do PrepMan Ultra foram testados dois volumes diferentes do reagente de extração, 200 e 400 μL. A reação de PCR em tempo real foi realizada usando-se o sistema ABI Prism SDS 7000 (Applied Biosystems). Os resultados permitiram concluir que a extração de DNA de produtos cárneos utilizando o método Wizard com as modificações propostas, foi mais eficiente que a extração usando o PrepMan Ultra. O presente estudo teve como terceiro objetivo avaliar a real situação do plantio de sementes fiscalizadas e certificadas de soja geneticamente modificada, na safra de 2002/2003, por meio da análise de 2.466 amostras coletadas por laboratórios de análises de sementes dos Estados do Mato Grosso (42%), Rio Grande do Sul (39,5%) e Minas Gerais (10,1%) e pela cooperativa COODETEC, do Estado do Paraná (8,4%). O método empregado nas análises foi o PCR qualitativo, com o uso de “primers específicos”. Detectou-se a presença de soja transgênica apenas nas amostras coletadas no Estado do Rio Grande do Sul (19,69% das amostras analisadas). / The global area cultivated with transgenic plants in 2002 continued to grow for the sixth consecutive year, with a rate of more than 10% a year, reaching in 2002, 58.7 million hectares. In Brazil, the commercial cultivation and consumption of transgenic are suspended to the present date, however, illegal cultivations of transgenic soybean have been identified, mostly in the southern states. Initially, this work had as objective offer a vision of the commercialization of transgenic soybean and derived products (soy flour and soybean based ration) in Brazil based on samples analyzed by the Laboratório de Análises Genéticas – AgroGenética, a private laboratory incubated at the Federal University of Viçosa, sent by several companies during the years of 2000, 2001 and 2002. Samples of soybean grains, soy flours and rations were analyzed. The method used the polymerase chain reaction (PCR). Specific primers were used for the detection of the RR gene ("Roundup Ready"), the promoter 35S of cauliflower mosaic virus and the NOS terminator region of nopaline sintase gene of Agrobacterium tumefasciens. As results it was identified in the year of 2000 positive samples in soybean grains (77.8%) and soy flour (22.2%). In 2001, 70.8% of positive samples were from soybean grains, 12.5% from soy flour and 16.7% from soybean based rations. In 2002, 34.9% of the positive samples were from soybean grains, 45% from soy flour and 20.1% from rations. Due to the difficulty in obtaining significant amounts of DNA in conditions to be analyzed, starting from processed foods, this work had as a second objective to adjust a methodology of DNA extraction for processed meat products containing soybean products for quantitative analysis. Several modifications were tested in two methods of DNA extraction, the Wizard method (Promega) and PrepMan Ultra (Applied Biosystems). The modifications in the Wizard included the use of a bigger volume of the extraction solution (1.5 x recommended by the manufacturer), a larger time of incubation (more than 12 hours) and, the final elution of DNA in a smaller volume of water than recommended. In the PrepMan Ultra method, two different volumes from the extraction reagent, 200 and 400 μL were tested. The real time PCR reaction was accomplished using the ABI Prism SDS 7000 system (Applied Biosystems). The results allowed concluding that the extraction of DNA of meat products using the Wizard method with the proposed modifications was more efficient than the extraction using the PrepMan Ultra. The present study had also as a third objective to evaluate the real situation of the use of fiscalized and certified genetically modified soybean seeds in the agricultural year 2002/2003, through the analysis of 2466 samples collected by laboratories of seed analyses in the states of Mato Grosso (42%), Rio Grande do Sul (39,5%), Minas Gerais (10,1%) and Paraná (8,4%). The method used to analyze the samples was the qualitative PCR using "specific" primers. The presence of transgenic soybean seeds was detected only in samples collected in the state of Rio Grande do Sul (19.69% of the analyzed samples). / Tese importada do Alexandria

Submitted by Nathália Faria da Silva (nathaliafsilva.ufv@gmail.com) on 2017-06-07T17:20:00Z No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 1688152 bytes, checksum: dea3857aba803e685276552e0efbb3a4 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-06-07T17:20:00Z (GMT). No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 1688152 bytes, checksum: dea3857aba803e685276552e0efbb3a4 (MD5) Previous issue date: 2000-07-07 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / Estudou-se criopreservação do sêmen canino, utilizando dois diluidores e dois protocolos de resfriamento do sêmen, para avaliar o efeito desses sobre a qualidade espermática in vitro, após a congelação/descongelação. Os meios diluidores utilizados foram o Tris-citrato e o Tes-Tris e os procedimentos de resfriamento foram realizados em um congelador de células digital e em caixa de isopor. O experimento foi conduzido no Laboratório de Reprodução Animal - DVT-UFV, utilizando-se três machos, submetidos a uma coleta de sêmen por semana, durante cinco semanas, totalizando quinze amostras, em cada delineamento experimental. Os testes in vitro aplicados às amostras de sêmen foram os de: avaliação da motilidade espermática progressiva, vigor espermático, avaliação da integridade da membrana plasmática e do acrossoma, por meio dos testes hipo-osmótico (HOS-T) e câmara úmida, respectivamente e avaliação da longevidade espermática, por meio do teste de termo-resistência rápido (TTR). A análise comparativa entre os meios diluidores evidenciou que o meio diluidor Tris-citrato foi superior (P<0,05) ao meio Tes-Tris, por ter obtido nos resultados de todos os testes in vitro, valores em torno de 15% mais altos. Concluiu-se, portanto, que o Tris-citrato foi mais eficiente em conservar a qualidade espermática, por ter mantido viável uma maior porcentagem de espermatozóides, após a criopreservação. Houve correlação positiva entre vários testes, indicando coerência entre os resultados. A análise comparativa dos protocolos de resfriamento demonstrou que não houve diferença (P>0,05) entre a caixa de isopor e o biocool, logo após o resfriamento. Após a descongelação, os resultados demonstraram que houve igualdade entre os protocolos quanto ao vigor espermático, ao HOS-T e a condição de acrossoma, havendo diferença (P<0,05) apenas na motilidade espermática após a descongelação e durante o teste de termo-resistência, que foram superiores quando o sêmen foi resfriado na caixa de isopor. A curva de resfriamento na caixa de isopor foi de, aproximadamente, -0,45°C/min. e no biocool de -0,55°C/ min., porém, na caixa de isopor a queda de temperatura não foi constante durante os 60 minutos do resfriamento, sendo que nos primeiros dez minutos a temperatura diminuiu 13°C. Parece que o perfil dessa curva favoreceu a manutenção das reservas energéticas dos espermatozóides, por terem tido seu metabolismo mais rapidamente diminuído. Os resultados dos testes para ambos os diluidores e ambos protocolos de resfriamento são compatíveis com os considerados normais para o sêmen criopreservado na espécie canina. / A study on different extenders and cooling systems on the canine semen was taken, in order to evaluate the effects on in vitro characteristics of cryopreserved spermatozoa. The extenders studied were Tris-citrate and Tes-Tris and the cooling systems were accomplished in a programmable cells freezer and in a polystyrene container. The experiment took place at the Animal s Reproduction Laboratory-DVT-UFV, where three stud dogs were collected weekly for five weeks for each experiment protocol. The in vitro evaluations applied to the semen samples were sperm motility and forward progression, plasm membrane and acrosome integrity, through hypo-osmotic swelling test and phase contrast microscopy, respectively and semen longevity, through the thermo resistance test. A comparative analysis between the extenders has showed that Tris-citrate was superior (P<0,05) to Tes-Tris because the results of all the in vitro evaluations after cryopreservation were 15% higher for the first compared to the second extender. It was concluded, therefore, that Tris-citrate was more xivefficient in preserving spermatozoa quality because it has maintained the viability of a larger percentage of them, after cryopreservation. The results of the tests are in agreement with the standard values for the freezing semen in dogs and there was also positive correlation among several semen evaluations, showing relationship among the results. The comparative analysis of the cooling systems has showed that there was no difference (P>0,05) between the programmable freezer and the polystyrene container, immediately after cooling and equilibration time. However, after freezing and thawing the results of forward progression, HOS-T and acrosome integrity was equal for both cooling systems but the motility and thermo resistance test was better (P<0,05) at polystyrene container. The cooling rate at this system was approximately -0,45°C/min. and at the programmable freezer was -0,55°C/ min.. The temperature fall was not constant at the polystyrene container and dropped faster on the beginning of the cooling time, it seems that this cooling rate at the polystyrene container favored the maintenance of spermatozoa energy sources. The tests results for both procedures were close to the standard values for the freezing semen in dogs.

Submitted by Nathália Faria da Silva (nathaliafsilva.ufv@gmail.com) on 2017-06-09T19:13:04Z No. of bitstreams: 1 resumo.pdf: 93956 bytes, checksum: 09bb839dea071f43bfd9ffe5e02560fb (MD5) / Made available in DSpace on 2017-06-09T19:13:04Z (GMT). No. of bitstreams: 1 resumo.pdf: 93956 bytes, checksum: 09bb839dea071f43bfd9ffe5e02560fb (MD5) Previous issue date: 2000-09-20 / Fundação de Amparo a Pesquisa do Estado de Minas Gerais / Seis linhagens de Penicillium foram estudadas quanto à capacidade de produzir a micotoxina patulina. Dentre as seis linhagens de Penicillium testadas, apenas P. expansum GF produziu patulina, em todos os tempos de cultivo, meios testados e em quantidades superiores às permitidas por legislação (50μg/L). A curva de produção da patulina foi determinada para as linhagens de P. expansum isolada de maçã (GF) e de sementes de plantas florestais (VIC), bem como suas capacidades em produzir patulina nas mesmas condições em que há a produção das enzimas poligalacturonase (PG) e xilanase. O isolado de P. expansum (GF) apresentou maior produção de patulina entre o 9 o e o 15 o dia de crescimento, mas apenas em condições de incubação estática. Sob agitação rotacional, concentrações baixas de 0,16 μg/mL de patulina foram detectadas apenas no 9 o dia de crescimento. A linhagem VIC não produziu patulina em nenhuma condição de incubação. Os fungos P. expansum GF e VIC não produziram patulina sob as mesmas condições em que houve a produção de enzimas despolimerizantes da parede celular de plantas, PG e lanase. As características morfológicas e genéticas xidas três linhagens de P. expansum (GF, VIC e CCT-4608) foram testadas por comparação e mostraram que as linhagens de P. expansum GF e VIC possuem grande semelhança entre si, mas se relacionam muito pouco com a terceira linhagem (CCT- 4608), adquirida como linhagem padrão de P. expansum. / Six Penicillium strains were studied in relation to their capacity to produce the mycotoxin patulin. Among them, only P. expansum GF produced patulin in all cultivation times and media tested and in amounts above those allowed by legislation (50 μg/L). Patulin production curves were determined under the same conditions of polygalacturonase (PG) and xylanase production for Penicillium strains isolated from apples (GF) and seeds of forest trees (VIC). The isolate P. expansum GF presented the highest production of patulin between the 9 th and the 15 th day of growth, albeit only under static incubation. Under rotational shaking, concentrations as low as 0.16 μg/L patulin were detected in the 9 th day of growth. The strain VIC did not produce patulin under any incubation condition tested. The strains GF and VIC did not produce patulin under the same conditions under which the production of plant cell wall depolymerizing enzymes, PG, and xylanase was observed. The morphological and genetic characteristics of three strains of P. expansum (GF, VIC, and CCT- 4608) were compared and showed that the strains GF and VIC were highly similar to each other, but were poorly related to CCT-4608, a standard strain of P. expansum.

Submitted by Nathália Faria da Silva (nathaliafsilva.ufv@gmail.com) on 2017-06-13T11:34:47Z No. of bitstreams: 1 resumo.pdf: 15826 bytes, checksum: 80e9778f9db86d01b847c607230b3867 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-06-13T11:34:47Z (GMT). No. of bitstreams: 1 resumo.pdf: 15826 bytes, checksum: 80e9778f9db86d01b847c607230b3867 (MD5) Previous issue date: 2002-04-15 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / O elemento transponível impala, isolado do fungo fitopatogênico Fusarium oxysporum, é capaz de sofrer transposição em Penicillium griseoroseum, porém, com uma baixa frequência. Em trabalho anterior, condições de estresse, testadas com o objetivo de aumentar a transposição de impala em P. griseoroseum, foram eficientes, sendo isoladas 691 colônias revertentes, em que o elemento impala havia sofrido transposição. Neste trabalho, foram feitas a caracterização molecular das linhagens revertentes e a avaliação da produção de enzimas pectinolíticas, com o objetivo de testar a eficiência de impala como ferramenta para a etiquetagem e isolamento de genes que codificam pectinases. As análises por hibridização das linhagens revertentes, utilizando como sonda o elemento impala e o gene niaD de A. nidulans, demonstraram que o tratamento por irradiação foi mais eficiente do que o choque térmico para a ativação da transposição em P. griseoroseum. Nas linhagens revertentes obtidas após a irradiação, um maior número de sítios de reinserção de impala foi observado. Entre as linhagens revertentes provenientes do choque térmico, uma apresentou perda total do elemento impala. Das 650 linhagens revertentes analisadas quanto à produção de pectinases, uma linhagem obtida após choque térmico apresentou atividade significativamente inferior de pectina liase quando comparada à linhagem selvagem. A região flanqueadora do novo sítio de inserção do elemento impala foi amplificada por PCR invertido. O fragmento amplificado de 600pb foi clonado e será utilizado como sonda para o isolamento do gene completo em um banco genômico da linhagem selvagem de P. griseoroseum. Este trabalho demonstra, pela primeira vez, que o elemento impala pode ser usado para a etiquetagem de genes no fungo Penicillium griseoroseum. / The tranposable element impala, isolated from the phytopathogenic fungus Fusarium oxysporum, suffers transposition in Penicillium griseoroseum, albeit at low frequency. In a previous work, stress conditions tested to increase impala transposition in P. griseoroseum have been show to be very efficient, resulting in the production of 691 revertant colonies in which impala had suffered transposition. In this work, a molecular characterization of revertant colonies and the analysis of pectinolytic enzyme were done to test impala efficiency as a tool for tagging and isolating pectinase gene. Hybridization analysis of revertant colonies using impala and the niaD gene of Aspergillus nidulans as probes demonstrated that UV treatment was more efficient than thermal shock for the activation of impala transposition in P. griseoroseum. In the revertant colonies obtained after UV irradiation, a larger number of reinsertion sites was observed. Among the revertants produced by thermal shock, one strain showed total loss of impala. Among 650 revertant colonies analyzed for pectinase production, one isolate obtained after thermal shock treatment presented significantly lower pectin lyase activity than the wild type strain. The flanking region of the new insertion site of impala was amplified by inverted PCR. A 600-pb amplified fragment was cloned and will be used as probe for the isolation of the complete gene from a library of the type strain of P. griseoroseum. ixThis work demonstrates for the first time that the element impala can be used for efficient gene tagging in P. griseoroseum.

Submitted by Nathália Faria da Silva (nathaliafsilva.ufv@gmail.com) on 2017-06-13T13:46:36Z No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 277021 bytes, checksum: b140d81ef2bf2924ec3c8af245e6a87d (MD5) / Made available in DSpace on 2017-06-13T13:46:36Z (GMT). No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 277021 bytes, checksum: b140d81ef2bf2924ec3c8af245e6a87d (MD5) Previous issue date: 2003-03-13 / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico / A dengue é uma doença febril, exantemática aguda considerada a mais importante arbovirose que afeta o homem. O diagnóstico laboratorial da dengue é realizado após suspeita clínica e as técnicas imunoenzimáticas, principalmente ELISA, são as mais difundidas, detectando anticorpos das classes IgM e IgG. Este trabalho teve como objetivo o desenvolvimento de uma técnica de hemaglutinação passiva de fácil execução, rápida e eficiente na detecção de anticorpos antidengue em sangue humano total. As próprias hemácias do paciente foram utilizadas como antígeno figurado, sendo o anti- soro contra hemácias humanas produzido em coelhos e purificado por precipitação e cromatografia. As imunoglobulinas G obtidas foram digeridas com o uso de papaína para a obtenção de fragmentos Fab. Após a separação, os fragmentos foram ligados às partículas virais de dengue, previamente purificadas em gradiente de densidade contínuo de tartarato de sódio e potássio, utilizando o glutaraldeído como agente acoplador. Demonstrou-se que a estratégia de conjugação dos fragmentos Fab à partícula viral é factível com uso de glutaraldeído, contudo, há necessidade do desenvolvimento de estudos para a verificação do grau de eficiência de conjugação. O método de conjugação adotado não impediu os fragmentos Fabs de se ligarem às hemácias e nem os anticorpos antidengue de reconhecerem seus epítopos na partícula viral. A utilização de anticorpos monoclonais, ou sistemas de expressão para proteínas virais assim como para fragmentos de anticorpos facilitariam as etapas de montagem do conjugado, além de otimizar o funcionamento da técnica. Em conclusão, a detecção de anticorpos antidengue em amostras de soro e hemácias foi possível a partir do método proposto. / Dengue is an acute febrile illness considered the most important arthropod-borne viral disease affecting humans. Currently most laboratory diagnoses of dengue are made after some clinical observations and use of immunoenzimatic techniques, notably ELISA can reliably detect small amounts of IgM and IgG classes of antibodies and have deserved worldwide acceptance. However, ELISA is a somewhat laborious, time-consuming technique and requires a expensive equipment. The present work was carried out to develop a feasible, inexpensive, quick and efficient passive hemaglutination technique for detection of anti-dengue antibodies in human whole blood, using the patient's blood cells as figured antigen. Antiserum against human erythrocytes was produced in rabbits and the IgG was purified by precipitation and chromatographic methods. IgG was then fractioned by papain digestion to yield Fab fragments. After separation, these fragments were linked by glutaraldehyde to the dengue viral particles successfully purified following a protocol which included centrifugation through a sodium and potassium tartarate density- gradient. However, the glutaraldehyde-mediated step need further work to establish an efficient degree of conjugation. The method did not alter either the Fab binding to erythrocytes or the recognition of viral epitopes by anti-dengue antibodies. Possibly, the use of monoclonal antibodies or a suitable system for protein expression could improve the conjugation step and help to optimize the routine testing of samples. In conclusion, a simple technique has been demonstrated to be suitable for detection of anti-dengue antibodies in samples of human blood or erythrocytes plus serum.