Pasteurella multocida é um dos principais patógenos envolvidos nas broncopneumonias infecciosas em suínos. Apesar de ser considerada agente secundário à pneumonia enzoótica causada pelo Mycoplasma hyopneumoniae e por agentes virais como o vírus da influenza suína, há evidências do seu envolvimento como agente primário. Neste contexto, o primeiro estudo desenvolvido teve como objetivo desenvolver um método de reprodução experimental de pneumonia por P. multocida A cepa 11246 em suínos infectados com diferentes concentrações de inóculo. Um segundo estudo foi desenvolvido com o objetivo de demonstrar diferenças fenotípicas, moleculares e patogênicas entre cepas de P. multocida A isoladas de casos clínicos de pneumonia em granjas comerciais de suínos de vários estados brasileiros. No primeiro experimento os suínos foram desafiados por gotejamento intranasal lento com inóculo de diferentes concentrações de P. multocida A cepa 11246 [Grupo (G1): 108 Unidades Formadoras de Colônias (UFC)/ml; G2: 107 UFC/ml; G3: 106 UFC/ml e G4: 105 UFC/ml]. Foram utilizados dois suínos por grupo com aproximadamente 100 dias de idade. Neste, todas as concentrações de inóculo demonstraram a capacidade da bactéria em causar doença respiratória grave e septicemia nos animais inoculados. Utilizando-se a mesma metodologia de desafio, com inóculo de 107 UFC/ml, o segundo estudo, ao desafiar 64 suínos igualmente distribuídos em oito grupos (G1 a G8) com oito diferentes cepas de P. multocida A (uma cepa por grupo), os resultados demonstraram a presença de cepas muito patogênicas (G1-11246, G2-11229, G3-16614 e G7-17044); pouco patogênicas (G4-16618 e G5-16972); e apatogênicas (G6-17034 e G8-17078), de acordo com a gravidade das alterações clinico-patológicas desenvolvidas. Na avaliação patológica dos animais desafiados, observaram-se três padrões de lesões distintas, associadas ou não entre si: 1. broncopneumonia fibrinonecrótica cranioventral com pleurite fibrinosa (G1, G3, G7); 2. pleurite difusa uni ou bilateral, associada ou não com pericardite e peritonite (G3, G5, G7) e; 3. pleuropneumonia necrossupurativa focal, geralmente no lobo cardíaco (G1, G2; G3, G4, G7). Na análise genotípica, nos padrões de PFGE obtidos após a macro-restrição com a enzima ApaI, as cepas patogênicas (Nos 11246, 11229, 16614, 16618, 16972 e 17044) foram classificadas no mesmo grupo, com homologia variando de 67,3 a 100%, diferenciando-se das cepas apatogências (Nos 17034 e 17078), que pertenceram a outro grupo, com homologia de apenas 52,7% com as demais amostras. Coletivamente, os resultados demonstraram padrões distintos de patogenicidade de diferentes cepas de P. multocida, os quais podem estar associados à características genéticas das cepas. Adicionalmente o estudo demonstrou a atuação primária de algumas cepas de P. multocida em pneumonias, pleurites e septicemias em suínos. / Pasteurella multocida is one of the main pathogens involved in infectious bronchopneumonia in swine. Although considered a secondary agent to the enzootic pneumonia caused by Mycoplasma hyopneumoniae and viral agents as the swine influenza, there are evidences related to its involvement as a primary agent. In this context, the first study undertaken aimed at developing an experimental reproduction method of pneumonia caused by P. multocida A Strain 11246 in swine infected with different inoculum concentrations. A second study was conducted aiming demonstrating phenotypic, molecular and pathogenic differences between the strains of P. multocida A isolated from clinical cases of pneumonia in commercial swine farms in several Brazilian states. In the first experiment, swine were challenged by slow intranasal drip with different inoculum concentrations of P. multocida A strain 11246 [Group (G1): 108 Colony Forming Units (CFU)/ml; G2: 107 CFU/ml; G3: 106 CFU/ml and G4: 105 CFU/ml]. Two swine per group with approximately 100 days of age were used. In these animals all inoculum concentrations demonstrated the bacteria capability to cause severe respiratory disease and septicemia in the inoculated animals. Using the same challenge methodology inoculating 107 CFU/ml at the second study when challenging 64 swine equally distributed into eight groups (G1 to G8) with eight different strains of P. multocida A (one strain per group) results showed the presence of highly pathogenic strains (G1-11246, G2- 11229, G3-16614 e G7-17044); less pathogenic (G4-16618 e G5-16972); and apathogenic (G6-17034 e G8-17078), according to the severity of the clinical and pathological alterations developed. In the pathologic evaluation of challenged animals, we observed three distinct patterns of injuries associated or not with each other: 1. Cranioventral fibrinonecrotic bronchopneumonia with fibrinous pleuritis (G1, G3, G7); 2. Difuse uni or bilateral pleuritis pleuritis, associated or not with pericarditis and peritonitis (G3, G5, G7) and; 3. Necrosuppurative focal pleuropneumonia, generally in the cardiac lobe (G1, G2, G3, G4, G7). In genotypic analysis, the PFGE patterns obtained after the macro-restriction with ApaI enzyme, the pathogenic strains (# 11246, 11229, 16614, 16618, 16972 and 17044) were classified in the same group, with homology ranging from 67.3 to 100%, differing from the apathogenic strains (# 17034 and 17078), which belonged to another group, with only 52.7% homology with the other samples. Collectively, the results showed distinct patterns in different pathogenic strains of P. multocida, which may be associated with the genetic features of the strains. Additionally, the reasearch demonstrated the primary role of some strains of P. multocida in pneumonia, pleuritis and septicemia in swine.

A infecção por Mycoplasma (M.) hyopneumoniae é responsável por perdas econômicas significativas na suinocultura, causando uma pneumonia crônica que normalmente afeta clinicamente suínos de crescimento e terminação. Considerando-se a importância das matrizes de menor ordem de parto na transmissão de M. hyopneumoniae e que uma grande quantidade de leitoas é introduzida nos planteis anualmente, este projeto teve como objetivo compreender aspectos pouco conhecidos da dinâmica de infecção de M. hyopneumoniae em leitoas de reposição. O primeiro estudo avaliou a dinâmica e persistência da infecção por M. hyopneumoniae em leitoas em condições naturais de campo. Quarenta e quatro leitoas foram selecionadas aos 20 dias de idade (ddi) e a detecção de M. hyopneumoniae por PCR foi avaliada mensalmente por suabe de laringe, resultando em um total de 12 coletas. Além disso, 220 leitões filhos dessas matrizes foram amostrados um dia antes do desmame para avaliação da transmissão vertical. Os resultados deste estudo demonstraram que o início da detecção ocorreu aos 110 ddi e um aumento significativo foi observado aos 140 ddi (p<0,05). Ao desmame, apenas 2,3% das fêmeas foi positiva e não foram detectados leitões desmamados positivos. Adicionalmente, 77,2% das leitoas foi detectada positiva por um a três meses, 4,6% por quatro a cinco meses e 18,2% nunca foi detectada positiva, indicando a presença de subpopulações de animais negativos em granjas positivas. Em um segundo estudo, avaliou-se a detecção de M. hyopneumoniae por PCR em leitoas de reposição interna e a variabilidade genética entre granjas foi avaliada por MLVA (Multiple Locus Variable-number tandem repeats Analysis). Um total de 298 leitoas provenientes de três multiplicadoras positivas foram selecionadas e coletadas uma vez para realização de ELISA e duas a três vezes para PCR em um estudo longitudinal. Ainda, a transmissão vertical foi avaliada em 425 leitões pré-desmame. Aos 150 ddi, 47 a 67,4% das leitoas foi detectada positiva por PCR, decréscimos foram observados até a última amostragem nas três granjas avaliadas (p<0,05), e nenhum leitão foi positivo pré-desmame. Ainda, 30,7% das leitoas não foi detectada positiva em nenhuma nas amostragens e os resultados de MLVA indicaram um ampla variabilidade genética de M. hyopneumoniae em leitoas aos 150 ddi. No terceiro estudo, 210 leitoas de reposição negativas para M. hyopneumoniae introduzidas em três granjas positivas foram selecionadas e avaliadas longitudinalmente por PCR e ELISA com o objetivo de comparar dois tipos de fluxo de aclimatação (all-in all-out ou fluxo contínuo). Ainda, a variabilidade genética foi analisada por MLVA. Observou-se um aumento significativo (p<0,05) nas prevalências de leitoas positivas para M. hyopneumoniae por PCR na segunda coleta e um decréscimo ao longo do tempo independentemente do tipo de fluxo de aclimatação utilizado. Os resultados de ELISA revelaram que as três granjas avaliadas tiveram um aumento significativo na prevalência de leitoas positivas da primeira para a segunda coleta (p<0,05), que se manteve alta até o fim do experimento. Ainda, baixa variabilidade genética de M. hyopneumoniae foi observada por MLVA. Um quarto estudo também foi conduzido com o objetivo de avaliar a absorção e detecção de M. hyopneumoniae utilizando-se suabes de nylon flocados e de ponta de rayon. Os resultados deste experimento indicaram uma maior absorção e uma maior detecção de M. hyopneumoniae por PCR (p<0,05) utilizando-se suabes de nylon flocados. / Mycoplasma (M.) hyopneumoniae infection is responsible for important economic losses to pig production, causing a chronic pneumonia that usually affects growing and finishing pigs. Regarding the importance of low parity dams on M. hyopneumoniae transmission and that a high proportion of gilts is introduced in the farms every year, this project aimed to better understand unknown aspects about the infection dynamics of M. hyopneumoniae in replacement gilts. The first study assessed the dynamics and persistence of M. hyopneumoniae infection in gilts in natural conditions. Forty-four gilts were selected at 20 days of age (doa) and M. hyopneumoniae detection was evaluated using laryngeal swabs for PCR testing every month, resulting in 12 samplings. Additionally, 220 piglets born from the selected dams were sampled one day prior to weaning to evaluate vertical transmission. The results of this study showed that the first detection occurred at 110 doa and a significant increase was observed at 140 doa (p<0.05). A small proportion (2.3%) of positive gilts was detected one day prior to weaning and no piglets were detected positive at the same sampling moment. Moreover, 77.2% of the gilts was detected positive for one to three months, 4.6% for four to five months, and a lack of detection was observed in 18.2% of the gilts, indicating the presence of negative subpopulations in positive farms. A second study assessed the M. hyopneumoniae detection in self-replacement gilts longitudinally. A total of 298 gilts from three positive multiplier farms were selected and sampled once for ELISA testing and two or three times for PCR. Moreover, vertical transmission was evaluated in 425 piglets one day prior to weaning, and the genetic variability within farms was assessed in gilts by MLVA (Multiple Locus Variablenumber tandem repeats Analysis). The prevalence of positive gilts at 150 doa ranged from 47 to 67.4% within farms by PCR, decreases were observed up to the last sampling in all farms (p<0.05), and no positive piglets were detected prior to weaning. A lack of detection was observed in 30.7% of the gilts during the study, and high genetic variability was detected within farms. In the third study, 210 M. hyopneumoniae negative purchased gilts were introduced in three farms with two types of acclimation flow (all-in all-out or continuous flow). The gilts were selected for ELISA and PCR testing in a longitudinal study, which aimed to compare the infection dynamics regarding the type of flow. Also, genetic variability was assessed by MLVA. The results showed a significant increase (p<0.05) in the prevalence of M. hyopneumoniae positive gilts by PCR in the second sampling, and a decrease over time regardless the type of flow. The ELISA results revealed a significant increase in the prevalence of positive gilts in the three farms (p<0.05) from the first to the second sampling, which remained high up to the completion of the study. Moreover, limited genetic variability of M. hyopneumoniae was observed by MLVA testing. A fourth study was also performed, which aimed to assess the absorption and detection of M. hyopneumoniae using two types of swabs (nylon-flocked and rayon-bud). The results indicated a higher absorption and M. hyopneumoniae detection by PCR using nylon-flocked swabs (p<0.05).

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No experimento 1, foram utilizados 27 terneiros, com idade até 20 dias, peso vivo médio de 36kg, subdivididos nos seguintes grupos experimentais: controle (não castrados); submetidos à castração cirúrgica (CC);e submetidos à castração química por injeção intratesticular de cloreto de sódio 20% (IIT). Foram realizadas coletas de sangue em momentos distintos após o procedimento (0, 24, 48, 72 e 96 h) para a determinação dos níveis da proteína de fase aguda negativa Paraoxonase (PON1). A temperatura no canto do olho foi avaliada por termografia, nos mesmos períodos. A temperatura escrotal foi analisada 30 s antes do procedimento (D0), no momento do procedimento (D1) e em três períodos após o procedimento:aos 60 s (D2);às 24 horas (D3) e às 48horas (D4), também por termografia. No experimento 2, os níveis séricos de cortisol foram comparados entre os mesmos métodos, entre os grupos controle, CC, IIT em 24 terneiros, com idade entre 4 -15 dias. As amostras de sangue foram coletadas no momento da realização de cada procedimento e 30 e 60 min depois. No experimento 1, a temperatura de canto de olho (38 – 39ºC, em média) não diferiu entre os métodos (P<0,05). A temperatura escrotal no grupo CC permaneceu superior no D1 em relação aos demais grupos (P<0,05), mas no D4, os grupos CC e IIT apresentaram temperatura superior em relação ao controle (P<0.05). Não houve diferença na concentração de PON1 entre os grupos (P<0,05). No experimento 2, os níveis de cortisol não diferiram entre os grupos(P<0,05), mas ocorreu uma interação entre o momento da coleta e o método (P<0,05), pois no controle houve manutenção dos níveis de cortisol, enquanto os níveis aumentaram no CC após 30 min, mantendo-se até os 60 minutos, mas no IIT,o maior nível de cortisol ocorreu após 30 min, declinando no decorrer do tempo. Nenhum dos métodos procedimentos induziu reação inflamatória relevante que alterasse os marcadores sistêmicos de dor e inflamação. / Reproductive activity, eliminating aggressive behavior and sodomy, thus improving fat deposition and carcass termination in castrated calves. Over the last years, costumers became increasingly concerned about animal welfare and the use of appropriate methods to manage animals. The objectives of this study were to determine the degree of discomfort caused by castration through surgery and intratesticular injection (IIT) on parameters of pain and inflammation in calves. In experiment 1, 27 calves were used, with up to 20 days of age and 36 kg of live weight. Calves were split in three distinct castration methods: control (non-castrated); surgically castrated (CC). and submitted to chemical castration through IIT of 20% NaCl. Blood samples were collected at distinct moments after the procedures (0, 24, 48, 72 and 96 h) to determine the serum levels of acute phase protein paraoxanase (PON1). The temperature in the inner corner of the eye was determined by thermography, at the same periods. Scrotal temperature was measured 30 s before the procedures (D0), at the time of the procedures (D1) and at three periods after the procedures; at 60 s (D2); at 24 h (D3); and at 48 h (D4), also through thermography. In experiment 2, the serum cortisol levels were compared among the same castration methods, in 24 calves (4-15 d of age). Blood samples were collected at the time of the procedure and also at 30 and 60 min after. In experiment 1, the temperature in the inner corner of the eye (38 - 39⁰C, in average) did not differ among methods (P>0.05). Scrotal temperature was greater at D1for CC than for the other groups (P<0.05), with subsequent increase at D4 for calves in CC and IIT, compared to the control (P<0.05). No difference among methods (P>0.05) was observed for serum levels of PON1. In experiment 2, serum cortisol levels did not differ across methods (P>0.05), but a method per period interaction indicated that cortisol levels increased in CC after 30 min and remained stable up to 60 min, although cortisol levels for calves in IIT were greatest after 30 min, declining over time after that. None of the tested methods induced relevant inflammatory reaction capable to alter systemic markers of pain and inflammation.

Made available in DSpace on 2016-04-28T20:18:33Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Claudia Cardoso Maciel Escalhao.pdf: 1608128 bytes, checksum: 01f09a8983a40cd816cd9636e45cfaef (MD5) Previous issue date: 2010-01-28 / Spinal cord injury (SCI) is a highly incapacitating neurological syndrome in both humans and dogs. In dogs, intervertebral disc disease is the main cause of spinal cord injury and has been estimated to account for 1-2% of all cases admitted in veterinary hospitals worldwide. Despite all the advances in the treatment of this condition, compressive lesions such as intervertebral disc disease (IVDD), usually result in permanent sequel. In order to minimize this effect, it is of paramount importance the utilization of techniques for the accurate functional evaluation of post-lesion treatment. The objective of this study is to compare the applicability of functional scales such as Frankel (original and modified), Olby and Texas, in dogs with compressive lesions of the spinal cord resulting from disc herniations with severe, mild to moderate symptoms. To that end, ten dogs with symptoms and radiological confirmation of IVDD by myelography exam were independently evaluated in the Frankel original, modified, Olby and Texas scale before and after hemilaminectomy surgery. These scales proved to be very useful tools in the determination of both the choice of treatment and prognosis in dogs with thoracolumbar SCI from disc herniations. The Olby and Texas scales were the most sensitive in the detection of alterations in the functional progression in those animals. / A les?o da medula espinhal ? uma s?ndrome neurol?gica altamente incapacitante que afeta tanto o homem como animais. Em c?es, a principal causa de les?es medulares s?o as compress?es medulares decorrentes das doen?as do disco intervertebral, que representam de 1 a 2% de todos os casos admitidos em hospitais veterin?rios. Apesar dos esfor?os no tratamento, as les?es compressivas por h?rnia de disco frequentemente causam sequelas permanentes. Assim se faz necess?rio o desenvolvimento de estudos cl?nicos que possam avaliar a efic?cia de novas terapias para les?es compressivas da medula espinhal. Neste sentido, ? fundamental a utiliza??o de t?cnicas de avalia??o precisas da progress?o funcional p?s les?o. O presente estudo tem como objetivo de comparar a aplicabilidade das escalas de Frankel (original e modificada), Olby e Texas em c?es com compress?es medulares provocadas por hernia??es de disco intervertebral com sinais severos e leves a moderados. Para isso dez c?es com sinais e confirma??o mielogr?fica de hernia??es de disco foram avaliados independentemente segundo as escalas de Frankel (original e modificada), Olby e Texas antes e ap?s cirurgia de hemilaminectomia. As escalas de Frankel original, Olby e Texas se mostraram ferramentas ?teis na determina??o do progn?stico e na escolha do tratamento de c?es com les?es medulares compressivas toracolombares produzidas por hernia??es de disco. Sendo escalas de Olby e Texas as mais sens?veis na detec??o de altera??es na progress?o funcional nestes animais.

A leptospirose é uma zoonose de ampla distribuição mundial, causada pela infecção por sorovares patogênicos do gênero Leptospira. Assim como outras espécies de animais acometidos, os cães que sobreviverem à fase aguda da doença podem se tornar portadores, excretando a bactéria através da urina. Algumas alterações no hemograma, bioquímica sérica e urinálise, juntamente com o histórico do paciente e fatores de risco, auxiliam na suspeita da doença; porém, o diagnóstico definitivo é realizado através de testes mais específicos. Estes testes incluem sorologia, técnicas moleculares como a reação em cadeia da polimerase (PCR) e cultura para isolamento do sorovar. O presente trabalho caracterizou e comparou a leptospirose em três populações caninas de Porto Alegre. Foram avaliados 33 cães com suspeita da doença, atendidos no Hospital de Clínicas Veterinárias (HCV) da Universidade Federal do Rio Grande do Sul (UFRGS); 65 cães provenientes do Centro de Controle de Zoonoses (CCZ) de Porto Alegre; e 155 cães residentes no bairro Arquipélago na zona urbana de Porto Alegre, onde existe uma alta incidência de leptospirose humana. O diagnóstico da leptospirose canina foi baseado na sorologia e PCR no soro e urina. Um total de 14,6% (37/253) dos cães apresentaram resultado positivo na PCR no sangue (leptospiremia) e 14,2 % (36/253) na urina (leptospirúria). Em relação à sorologia, 48,2% (122/253) foram positivos para um ou mais sorovares. Os sorovares mais prevalentes foram canicola, icterohaemorrhagiae e copenhageni. A presença de ratos no ambiente foi associada a leptospirúria (P=0,02). Na população do HCV, o aumento da creatinina sérica (P=0,009), icterícia (P=0,004) e glicosúria (P=0,04) foram associados com leptospirúria. Apesar destas associações encontradas, observou-se que a ausência de sinais clínicos ou de alterações no hemograma, bioquímica sérica ou urinálise não excluíram a infecção (P>0.05). Em um segundo estudo, foi investigada a eficácia da doxiciclina na eliminação do estado de portador renal em quatro cães assintomáticos. Destes, três estavam infectados com o sorogrupo Canicola e um com o sorogrupo Icterohaemorrhagiae. Os cães foram acompanhados por 30 dias após o início do tratamento, e a ausência de leptospiras na urina foi confirmada através de três resultados seriados de PCR negativa em cada cão. Finalmente, valor preditivo da proteína C reativa (C-RP) na leptospirose foi investigado em 62 cães, comparando sua concentração sérica e urinária com os resultados de sorologia e PCR. Sorologia positiva foi associada com C-RP urinária (P= 0,038). Houve apenas associação fraca entre proteína C-reativa sérica e PCR no sangue (área sob a curva= 0,68), e não foi observada associação entre C-RP urinária e PCR na urina. Não foram observadas vantagens de se incluir a C-RP como um teste de triagem para leptospirose em cães. As informações obtidas com os estudos aqui citados mostra a importância do diagnóstico definitivo, preferencialmente realizado através de PCR; a necessidade de se testar cães expostos a fatores de risco, independente de seu estado aparente de saúde; a importância de medidas sanitárias para a prevenção da doença e o tratamento adequado para que se elimine o possível estado de portador renal dos cães. / Leptospirosis is a zoonosis of worldwide distribution, caused by infection with pathogenic serovars of the genus Leptospira. As other affected species of animals, the dogs that survive the acute phase of the disease can become carriers, excreting the bacteria in the urine. Some alterations in blood count, serum biochemistry and urinalysis, along with patient history and risk factors, may contribute to a presumptive diagnosis, but the definitive diagnosis is made using more specific tests. These tests include serology, molecular techniques like polymerase chain reaction (PCR) and culture for the serovar isolation. The present study characterized and compared leptospirosis in three canine populations of Porto Alegre, RS. Thirty three dogs with suspected disease were evaluated at the Veterinary Hospital of the Federal University of Rio Grande do Sul, 65 dogs from the Control Center of Zoonoses from Porto Alegre and 155 dogs from Archipelago neighborhood, where there is a high incidence of human leptospirosis. The diagnosis of canine leptospirosis was based on serology and PCR in serum and urine. A total of 14.6% (37/253) of dogs tested positive in PCR in blood (leptospiremia) and 14.2% (36/253) in the urine (leptospiruria). With regard to serology, 48.2% (122/253) were positive for one or more serovars. The most prevalent serovars were canicola, icterohaemorrhagiae and copenhageni. The presence of rats in the environment was associated with leptospiruria (P = 0.02). In the Veterinary Hospital population, increased serum creatinine (P = 0.009), jaundice (P = 0.004) and glucosuria (P = 0.04) were associated with leptospiruria. Despite these associations, it was observed that the absence of clinical signs or changes in blood count, serum biochemistry and urinalysis did not exclude infection (P> 0.05). In a second study, we investigated the effectiveness of doxycycline to eliminate the carrier state in four asymptomatic dogs. Three were infected with serogroup Canicola and one with serogroup Icterohaemorrhagiae. The dogs were followed for 30 days after starting treatment, and the absence of leptospires in urine was confirmed by three serial results of negative PCR in each dog. Finally, the predictive value of C-reactive protein (C-RP) in leptospirosis was investigated in 62 dogs, comparing its serum and urinary concentrations with serology and PCR. Seropositivity was associated with urinary C-RP (P = 0.038). There was only a weak association between C-RP and serum PCR in blood (AUC = 0.68), and no association was found between urinary C-RP and PCR in urine. There were no advantages to include the C-RP as a screening test for leptospirosis in dogs. The information gathered from the studies cited here shows the importance of the definitive diagnosis, preferably performed by PCR; the need to test dogs exposed to risk factors, regardless of their apparent health condition, the importance of sanitary surveillance for the prevention of the disease, and adequate treatment to eliminate the carrier state.

A leptospirose é uma zoonose de ampla distribuição mundial, causada pela infecção por sorovares patogênicos do gênero Leptospira. Assim como outras espécies de animais acometidos, os cães que sobreviverem à fase aguda da doença podem se tornar portadores, excretando a bactéria através da urina. Algumas alterações no hemograma, bioquímica sérica e urinálise, juntamente com o histórico do paciente e fatores de risco, auxiliam na suspeita da doença; porém, o diagnóstico definitivo é realizado através de testes mais específicos. Estes testes incluem sorologia, técnicas moleculares como a reação em cadeia da polimerase (PCR) e cultura para isolamento do sorovar. O presente trabalho caracterizou e comparou a leptospirose em três populações caninas de Porto Alegre. Foram avaliados 33 cães com suspeita da doença, atendidos no Hospital de Clínicas Veterinárias (HCV) da Universidade Federal do Rio Grande do Sul (UFRGS); 65 cães provenientes do Centro de Controle de Zoonoses (CCZ) de Porto Alegre; e 155 cães residentes no bairro Arquipélago na zona urbana de Porto Alegre, onde existe uma alta incidência de leptospirose humana. O diagnóstico da leptospirose canina foi baseado na sorologia e PCR no soro e urina. Um total de 14,6% (37/253) dos cães apresentaram resultado positivo na PCR no sangue (leptospiremia) e 14,2 % (36/253) na urina (leptospirúria). Em relação à sorologia, 48,2% (122/253) foram positivos para um ou mais sorovares. Os sorovares mais prevalentes foram canicola, icterohaemorrhagiae e copenhageni. A presença de ratos no ambiente foi associada a leptospirúria (P=0,02). Na população do HCV, o aumento da creatinina sérica (P=0,009), icterícia (P=0,004) e glicosúria (P=0,04) foram associados com leptospirúria. Apesar destas associações encontradas, observou-se que a ausência de sinais clínicos ou de alterações no hemograma, bioquímica sérica ou urinálise não excluíram a infecção (P>0.05). Em um segundo estudo, foi investigada a eficácia da doxiciclina na eliminação do estado de portador renal em quatro cães assintomáticos. Destes, três estavam infectados com o sorogrupo Canicola e um com o sorogrupo Icterohaemorrhagiae. Os cães foram acompanhados por 30 dias após o início do tratamento, e a ausência de leptospiras na urina foi confirmada através de três resultados seriados de PCR negativa em cada cão. Finalmente, valor preditivo da proteína C reativa (C-RP) na leptospirose foi investigado em 62 cães, comparando sua concentração sérica e urinária com os resultados de sorologia e PCR. Sorologia positiva foi associada com C-RP urinária (P= 0,038). Houve apenas associação fraca entre proteína C-reativa sérica e PCR no sangue (área sob a curva= 0,68), e não foi observada associação entre C-RP urinária e PCR na urina. Não foram observadas vantagens de se incluir a C-RP como um teste de triagem para leptospirose em cães. As informações obtidas com os estudos aqui citados mostra a importância do diagnóstico definitivo, preferencialmente realizado através de PCR; a necessidade de se testar cães expostos a fatores de risco, independente de seu estado aparente de saúde; a importância de medidas sanitárias para a prevenção da doença e o tratamento adequado para que se elimine o possível estado de portador renal dos cães. / Leptospirosis is a zoonosis of worldwide distribution, caused by infection with pathogenic serovars of the genus Leptospira. As other affected species of animals, the dogs that survive the acute phase of the disease can become carriers, excreting the bacteria in the urine. Some alterations in blood count, serum biochemistry and urinalysis, along with patient history and risk factors, may contribute to a presumptive diagnosis, but the definitive diagnosis is made using more specific tests. These tests include serology, molecular techniques like polymerase chain reaction (PCR) and culture for the serovar isolation. The present study characterized and compared leptospirosis in three canine populations of Porto Alegre, RS. Thirty three dogs with suspected disease were evaluated at the Veterinary Hospital of the Federal University of Rio Grande do Sul, 65 dogs from the Control Center of Zoonoses from Porto Alegre and 155 dogs from Archipelago neighborhood, where there is a high incidence of human leptospirosis. The diagnosis of canine leptospirosis was based on serology and PCR in serum and urine. A total of 14.6% (37/253) of dogs tested positive in PCR in blood (leptospiremia) and 14.2% (36/253) in the urine (leptospiruria). With regard to serology, 48.2% (122/253) were positive for one or more serovars. The most prevalent serovars were canicola, icterohaemorrhagiae and copenhageni. The presence of rats in the environment was associated with leptospiruria (P = 0.02). In the Veterinary Hospital population, increased serum creatinine (P = 0.009), jaundice (P = 0.004) and glucosuria (P = 0.04) were associated with leptospiruria. Despite these associations, it was observed that the absence of clinical signs or changes in blood count, serum biochemistry and urinalysis did not exclude infection (P> 0.05). In a second study, we investigated the effectiveness of doxycycline to eliminate the carrier state in four asymptomatic dogs. Three were infected with serogroup Canicola and one with serogroup Icterohaemorrhagiae. The dogs were followed for 30 days after starting treatment, and the absence of leptospires in urine was confirmed by three serial results of negative PCR in each dog. Finally, the predictive value of C-reactive protein (C-RP) in leptospirosis was investigated in 62 dogs, comparing its serum and urinary concentrations with serology and PCR. Seropositivity was associated with urinary C-RP (P = 0.038). There was only a weak association between C-RP and serum PCR in blood (AUC = 0.68), and no association was found between urinary C-RP and PCR in urine. There were no advantages to include the C-RP as a screening test for leptospirosis in dogs. The information gathered from the studies cited here shows the importance of the definitive diagnosis, preferably performed by PCR; the need to test dogs exposed to risk factors, regardless of their apparent health condition, the importance of sanitary surveillance for the prevention of the disease, and adequate treatment to eliminate the carrier state.

O cloridrato de tramadol é um analgésico de ação central, análogo sintético da codeína e morfina, o qual vem sendo amplamente estudado em equinos, sendo avaliado sua farmacocinética e farmacodinâmica. Em humanos, há relato de que o tramadol é substrato para a Gp-P, o que pode ser fator limitante na absorção do tramadol. A Gp-P funciona como uma bomba de efluxo celular, de maneira que, transporta ativamente xenobióticos do meio intracelular para o extracelular, atuando como um mecanismo de proteção contra xenobióticos. O estudo teve como objetivo a detecção do Gene MDR1 a partir do cDNA, e avaliar as alterações fisiológicas e efeito analgésico do tramadol em equinos submetidos a inibição da Gp-P entérica pela ivermectina. Seis equinos, machos e fêmeas, pesando 448±68Kg, foram distribuídos em três grupos autocontrole, recebendo tramadol por sonda nasogástrica na dose 1 mg/kg (GT1), 4 mg/kg (GT4) e recebendo tramadol 1mg/kg associada a ivermectina 0,2mg/kg VO. Foram avaliados FC, f, motilidade intestinal, temperatura corpórea aos 30 min antes, imediatamente antes da administração de qualquer substância para determinação dos valores basais e aos 30min, 60 min, 90 min, 120 min e a cada 60 min até 360 min após o tratamento. A claudicação foi avaliada aos 30 min, 60 min e a cada 60 min até os 360 min. Os parâmetros hemogasométricos foram avaliados no momento 0, 60 min e 120 min. Para as variáveis paramétricas utilizou-se análise de variância (ANOVA) para amostras pareadas, com posterior teste de Dunnett. Para comparações entre os grupos, realizou-se análise de variância, seguido de teste de Tukey. Para a variável não-paramétrica, motilidade intestinal, utilizou-se teste de Wilcoxon para amostras pareadas. As diferenças foram consideradas significantes quando P<0,05. Não foram observadas diferenças na FC e na avaliação analgésica. Houve hipomotilidade no GT1 e GT4 apenas ao final das avaliações e aumento da f em todos os grupos. Houve aumento do HCO3+ e redução do K+ e Ca++. Conclui-se que a inibição da Gp-P entérica pela ivermectina não alterou os efeitos do tramadol nas doses estudadas, sugerindo que o mesmo não é substrato para Gp-P, mas estudos futuros devem ser realizados a fim de avaliar a interação da ivermectina como inibidor da Gp-P na farmacocinética do tramadol. / Tramadol hydrochloride is a centrally acting analgesic, synthetic analogue of codeine and morphine, which has been widely studied in horses, being evaluated its pharmacokinetics and pharmacodynamics. In humans, there is a report that tramadol is a substrate for P-gp, which can be a limiting factor in the absorption of tramadol. P-gp acts as an efflux pump cell, that actively transports xenobiotics from the intracellular to the extracellular environment, acting as a protective mechanism against xenobiotic. The study aimed the detection of MDR1 Gene from cDNA, and the evaluation of physiological parameters and analgesic effect of tramadol in horses submitted to inhibition of enteric P-gp by ivermectin. Six horses, control of themselves, male and female, weighing 448 ± 68kg, were distributed into three groups, receiving tramadol by nasogastric tube in dose of 1 mg/kg (GT1), 4 mg/kg (GT4) and tramadol 1 mg/kg associated with ivermectin 0.2 mg/kg orally. Were evaluated HR, RR, intestinal motility, body temperature 30 min before, and immediately before the administration of any substance for determination of baseline and posterior at 30 min, 60 min, 90 min, 120 min and every 60 min up to 360 min after treatment. The analgesic evaluation occurred at 30 min, 60 min and every 60 min to 360 min. Blood gas parameters were evaluated at 0, 60 min and 120 min. For parametric variables were used analysis of variance (ANOVA) for paired samples, followed by Dunnett's test. For comparisons between groups, ANOVA followed by Tukey test were used. The non-parametric variable, intestinal motility, we used the Wilcoxon test for paired samples. Differences were considered significant when P <0.05. Differences in HR and analgesic evaluation were not observed. Hypomotility occurs in GT1 and GT4 only at the end of evaluation and RR increased in all groups. There was an increase of HCO3- and reduction of K+ and Ca++. We conclude that inhibition of enteric P-gp by ivermectin did not alter the effects of tramadol in the studied doses, suggesting that tramadol it is not a substrate for P-gp, but future studies should be conducted to assess the interaction of ivermectin as inhibitor of P-gp on the pharmacokinetics of tramadol.

Orientador: José Jurandir Fagliari / Banca: Raimundo Souza Lopes / Banca: Eliana Reiko Matushima / Banca: Aureo Evangelista Santana / Banca: Karin Werther / Resumo: Os Psittaciformes representam uma das ordens de aves mais comumente criadas como animais de companhia. A identificação de doenças em aves de companhia pode respresentar um desafio diagnóstico. A carência de dados a respeito de perfis normais para psitacídeos, como hemograma e perfil bioquímico sérico, são notórias no país. Pesquisas dessa natureza podem contribuir no diagnóstico e prognóstico de importantes doenças de aves criadas em cativeiro e de vida livre, dentre elas a clamidiose, zoonose de alta prevalência e com diagnóstico definitivo relativamente difícil, devido à complexa fisiopatogenia da infecção causada por Chlamydophila psittaci. Este estudo objetivou a realização do hemograma e o perfil bioquímico, inclusive as concentrações de imunoglobulinas e de proteínas de fase aguda, pela técnica de eletroforese em gel de poliacrilamida contendo dodecil sulfato de sódio - SDS-PAGE, de papagaios-verdadeiro (Amazona aestiva) e araras-canindé (Ara ararauna), de cativeiro, clinicamente saudáveis e o proteinograma em SDS-PAGE de papagaios-verdadeiro e araras-canindé de cativeiro positivos ou negativos para Chlamydophila psittaci. Os valores hematológicos, incluindo o hemograma e bioquímica sérica, foram determinados para ambas as espécies, demonstrando estar entre os intervalos de referência para as mesmas. O proteinograma sérico em SDS-PAGE permitiu a detecção de até 33 proteínas no traçado eletroforético de papagaios-verdadeiro sadios, e até 29 proteínas no traçado eletroforético de araras-canindé sadias. O proteinograma permitiu visualizar diferenças biologicamente importantes nas concentrações das proteínas de fase aguda e imunoglobulinas de papagaios-verdadeiro e araras-canindé positivos e negativos para C. psittaci, principalmente quanto a evidência da proteína de peso molecular 21 kDa, presente somente em papagaios-verdadeiro positivos... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Psittaciformes represent one of the most common orders of birds bred as pets. Disease identification in birds can represent a diagnostic challenge. The lack of data about normal ranges for psittacines, like hemogram and serum biochemistry are notorious in this country. Research regarding this subject can contribute to the diagnosis and prognosis of important diseases in captive and free-range birds. One of these diseases is clamidiosis, a zoonotic disease with high prevalence and with definitive diagnosis relatively difficult, because of the complex fisiopatogeny of the infection caused by Chlamydophila psittaci. The objective of this study was to determine the hemogram and serum biochemistry, including serum acute phase proteins and imunoglobulins using sodium dodecyl sulphate-polyacrylamide gel electrophoresis (SDS-PAGE), of clinically healthy, adult, captive blue fronted amazon parrots (Amazona aestiva) and blue and gold macaws (Ara ararauna) and the SDS-PAGE proteinograma of blue fronted amazon parrots and blue and gold macaws testing positive and negative for clamidiosis. The hematological values, including hemogram and serum biochemistry, were determined for both species, showing to be between the normal reference ranges. The SDS-PAGE proteinogram allowed visualization of up to 33 proteins of healthy blue fronted amazon and up to 29 proteins of healthy blue and gold macaws. The proteinogram allowed visualization of important biological differences in the concentrations of acute phase proteins and imunoglobulins of blue fronted amazon parrots and blue and gold macaws, testing positive and negative for clamidiosis. Present only in parrots positive for clamidiosis was the molecular weight 21 kDa protein / Doutor

O cloridrato de tramadol é um analgésico de ação central, análogo sintético da codeína e morfina, o qual vem sendo amplamente estudado em equinos, sendo avaliado sua farmacocinética e farmacodinâmica. Em humanos, há relato de que o tramadol é substrato para a Gp-P, o que pode ser fator limitante na absorção do tramadol. A Gp-P funciona como uma bomba de efluxo celular, de maneira que, transporta ativamente xenobióticos do meio intracelular para o extracelular, atuando como um mecanismo de proteção contra xenobióticos. O estudo teve como objetivo a detecção do Gene MDR1 a partir do cDNA, e avaliar as alterações fisiológicas e efeito analgésico do tramadol em equinos submetidos a inibição da Gp-P entérica pela ivermectina. Seis equinos, machos e fêmeas, pesando 448±68Kg, foram distribuídos em três grupos autocontrole, recebendo tramadol por sonda nasogástrica na dose 1 mg/kg (GT1), 4 mg/kg (GT4) e recebendo tramadol 1mg/kg associada a ivermectina 0,2mg/kg VO. Foram avaliados FC, f, motilidade intestinal, temperatura corpórea aos 30 min antes, imediatamente antes da administração de qualquer substância para determinação dos valores basais e aos 30min, 60 min, 90 min, 120 min e a cada 60 min até 360 min após o tratamento. A claudicação foi avaliada aos 30 min, 60 min e a cada 60 min até os 360 min. Os parâmetros hemogasométricos foram avaliados no momento 0, 60 min e 120 min. Para as variáveis paramétricas utilizou-se análise de variância (ANOVA) para amostras pareadas, com posterior teste de Dunnett. Para comparações entre os grupos, realizou-se análise de variância, seguido de teste de Tukey. Para a variável não-paramétrica, motilidade intestinal, utilizou-se teste de Wilcoxon para amostras pareadas. As diferenças foram consideradas significantes quando P<0,05. Não foram observadas diferenças na FC e na avaliação analgésica. Houve hipomotilidade no GT1 e GT4 apenas ao final das avaliações e aumento da f em todos os grupos. Houve aumento do HCO3+ e redução do K+ e Ca++. Conclui-se que a inibição da Gp-P entérica pela ivermectina não alterou os efeitos do tramadol nas doses estudadas, sugerindo que o mesmo não é substrato para Gp-P, mas estudos futuros devem ser realizados a fim de avaliar a interação da ivermectina como inibidor da Gp-P na farmacocinética do tramadol. / Tramadol hydrochloride is a centrally acting analgesic, synthetic analogue of codeine and morphine, which has been widely studied in horses, being evaluated its pharmacokinetics and pharmacodynamics. In humans, there is a report that tramadol is a substrate for P-gp, which can be a limiting factor in the absorption of tramadol. P-gp acts as an efflux pump cell, that actively transports xenobiotics from the intracellular to the extracellular environment, acting as a protective mechanism against xenobiotic. The study aimed the detection of MDR1 Gene from cDNA, and the evaluation of physiological parameters and analgesic effect of tramadol in horses submitted to inhibition of enteric P-gp by ivermectin. Six horses, control of themselves, male and female, weighing 448 ± 68kg, were distributed into three groups, receiving tramadol by nasogastric tube in dose of 1 mg/kg (GT1), 4 mg/kg (GT4) and tramadol 1 mg/kg associated with ivermectin 0.2 mg/kg orally. Were evaluated HR, RR, intestinal motility, body temperature 30 min before, and immediately before the administration of any substance for determination of baseline and posterior at 30 min, 60 min, 90 min, 120 min and every 60 min up to 360 min after treatment. The analgesic evaluation occurred at 30 min, 60 min and every 60 min to 360 min. Blood gas parameters were evaluated at 0, 60 min and 120 min. For parametric variables were used analysis of variance (ANOVA) for paired samples, followed by Dunnett's test. For comparisons between groups, ANOVA followed by Tukey test were used. The non-parametric variable, intestinal motility, we used the Wilcoxon test for paired samples. Differences were considered significant when P <0.05. Differences in HR and analgesic evaluation were not observed. Hypomotility occurs in GT1 and GT4 only at the end of evaluation and RR increased in all groups. There was an increase of HCO3- and reduction of K+ and Ca++. We conclude that inhibition of enteric P-gp by ivermectin did not alter the effects of tramadol in the studied doses, suggesting that tramadol it is not a substrate for P-gp, but future studies should be conducted to assess the interaction of ivermectin as inhibitor of P-gp on the pharmacokinetics of tramadol.

A leptospirose é uma zoonose de ampla distribuição mundial, causada pela infecção por sorovares patogênicos do gênero Leptospira. Assim como outras espécies de animais acometidos, os cães que sobreviverem à fase aguda da doença podem se tornar portadores, excretando a bactéria através da urina. Algumas alterações no hemograma, bioquímica sérica e urinálise, juntamente com o histórico do paciente e fatores de risco, auxiliam na suspeita da doença; porém, o diagnóstico definitivo é realizado através de testes mais específicos. Estes testes incluem sorologia, técnicas moleculares como a reação em cadeia da polimerase (PCR) e cultura para isolamento do sorovar. O presente trabalho caracterizou e comparou a leptospirose em três populações caninas de Porto Alegre. Foram avaliados 33 cães com suspeita da doença, atendidos no Hospital de Clínicas Veterinárias (HCV) da Universidade Federal do Rio Grande do Sul (UFRGS); 65 cães provenientes do Centro de Controle de Zoonoses (CCZ) de Porto Alegre; e 155 cães residentes no bairro Arquipélago na zona urbana de Porto Alegre, onde existe uma alta incidência de leptospirose humana. O diagnóstico da leptospirose canina foi baseado na sorologia e PCR no soro e urina. Um total de 14,6% (37/253) dos cães apresentaram resultado positivo na PCR no sangue (leptospiremia) e 14,2 % (36/253) na urina (leptospirúria). Em relação à sorologia, 48,2% (122/253) foram positivos para um ou mais sorovares. Os sorovares mais prevalentes foram canicola, icterohaemorrhagiae e copenhageni. A presença de ratos no ambiente foi associada a leptospirúria (P=0,02). Na população do HCV, o aumento da creatinina sérica (P=0,009), icterícia (P=0,004) e glicosúria (P=0,04) foram associados com leptospirúria. Apesar destas associações encontradas, observou-se que a ausência de sinais clínicos ou de alterações no hemograma, bioquímica sérica ou urinálise não excluíram a infecção (P>0.05). Em um segundo estudo, foi investigada a eficácia da doxiciclina na eliminação do estado de portador renal em quatro cães assintomáticos. Destes, três estavam infectados com o sorogrupo Canicola e um com o sorogrupo Icterohaemorrhagiae. Os cães foram acompanhados por 30 dias após o início do tratamento, e a ausência de leptospiras na urina foi confirmada através de três resultados seriados de PCR negativa em cada cão. Finalmente, valor preditivo da proteína C reativa (C-RP) na leptospirose foi investigado em 62 cães, comparando sua concentração sérica e urinária com os resultados de sorologia e PCR. Sorologia positiva foi associada com C-RP urinária (P= 0,038). Houve apenas associação fraca entre proteína C-reativa sérica e PCR no sangue (área sob a curva= 0,68), e não foi observada associação entre C-RP urinária e PCR na urina. Não foram observadas vantagens de se incluir a C-RP como um teste de triagem para leptospirose em cães. As informações obtidas com os estudos aqui citados mostra a importância do diagnóstico definitivo, preferencialmente realizado através de PCR; a necessidade de se testar cães expostos a fatores de risco, independente de seu estado aparente de saúde; a importância de medidas sanitárias para a prevenção da doença e o tratamento adequado para que se elimine o possível estado de portador renal dos cães. / Leptospirosis is a zoonosis of worldwide distribution, caused by infection with pathogenic serovars of the genus Leptospira. As other affected species of animals, the dogs that survive the acute phase of the disease can become carriers, excreting the bacteria in the urine. Some alterations in blood count, serum biochemistry and urinalysis, along with patient history and risk factors, may contribute to a presumptive diagnosis, but the definitive diagnosis is made using more specific tests. These tests include serology, molecular techniques like polymerase chain reaction (PCR) and culture for the serovar isolation. The present study characterized and compared leptospirosis in three canine populations of Porto Alegre, RS. Thirty three dogs with suspected disease were evaluated at the Veterinary Hospital of the Federal University of Rio Grande do Sul, 65 dogs from the Control Center of Zoonoses from Porto Alegre and 155 dogs from Archipelago neighborhood, where there is a high incidence of human leptospirosis. The diagnosis of canine leptospirosis was based on serology and PCR in serum and urine. A total of 14.6% (37/253) of dogs tested positive in PCR in blood (leptospiremia) and 14.2% (36/253) in the urine (leptospiruria). With regard to serology, 48.2% (122/253) were positive for one or more serovars. The most prevalent serovars were canicola, icterohaemorrhagiae and copenhageni. The presence of rats in the environment was associated with leptospiruria (P = 0.02). In the Veterinary Hospital population, increased serum creatinine (P = 0.009), jaundice (P = 0.004) and glucosuria (P = 0.04) were associated with leptospiruria. Despite these associations, it was observed that the absence of clinical signs or changes in blood count, serum biochemistry and urinalysis did not exclude infection (P> 0.05). In a second study, we investigated the effectiveness of doxycycline to eliminate the carrier state in four asymptomatic dogs. Three were infected with serogroup Canicola and one with serogroup Icterohaemorrhagiae. The dogs were followed for 30 days after starting treatment, and the absence of leptospires in urine was confirmed by three serial results of negative PCR in each dog. Finally, the predictive value of C-reactive protein (C-RP) in leptospirosis was investigated in 62 dogs, comparing its serum and urinary concentrations with serology and PCR. Seropositivity was associated with urinary C-RP (P = 0.038). There was only a weak association between C-RP and serum PCR in blood (AUC = 0.68), and no association was found between urinary C-RP and PCR in urine. There were no advantages to include the C-RP as a screening test for leptospirosis in dogs. The information gathered from the studies cited here shows the importance of the definitive diagnosis, preferably performed by PCR; the need to test dogs exposed to risk factors, regardless of their apparent health condition, the importance of sanitary surveillance for the prevention of the disease, and adequate treatment to eliminate the carrier state.