Neste trabalho, formularam-se diferentes meios de cultivo para a produção econômica de biomassa de Pleurotus sajor-caju PS-2001 em processo submerso, visando o emprego do micélio na alimentação humana. Foram testadas glicose, frutose e sacarose como fontes de carbono, assim como diferentes concentrações de glicose, óleo de soja, solução de sais, extrato de levedura Prodex®, proteína de soja e sulfato de amônio. Estudos realizados em frascos agitados mostraram que 10g.L-1 de glicose promoveram a maior biomassa micelial (5,98g.L-1) e a melhor produtividade (0,048g.L-1.h-1). A adição de 1mL.L-1 de óleo de soja ao meio de cultivo mostrou ser favorável ao crescimento fúngico, também resultando na presença do aroma típico de corpos de frutificação. Os resultados de otimização do meio de cultivo mostraram que proteína de soja (2,3g.L-1), extrato de levedura (1,86g.L-1) e sulfato de amônio (1,57g.L-1) também favoreceram o crescimento. Estudos realizados em biorreator de bancada, utilizando o meio otimizado e nas condições testadas (temperatura de 28ºC, freqüência do agitador de 100rpm, taxa de aeração de 0,5vvm, O2 dissolvido acima de 30% da saturação), quando comparados aos resultados obtidos em frascos agitados com o mesmo meio, mostraram valores de biomassa, rendimento e produtividade superiores (8,18g.L-1, 0,82g.g-1 e 0,08g.L-1.h-1, respectivamente). Ao comparar os principais componentes do micélio seco de P. sajor-caju PS-2001, obtidos no presente trabalho, com o do corpo de frutificação da mesma linhagem, cultivado em serragem de eucalipto, observaram-se semelhanças na composição química com relação ao percentual de carboidratos totais, proteína bruta e minerais; no entanto, os conteúdos de lipídios brutos e de calorias mostraram-se maiores no micélio. O consumo total de sacarose na presença de óleo de soja foi evidenciado quando o cultivo foi realizado em biorreator, o que não ocorreu em frascos agitados. Ao comparar os resultados dos cultivos variando as fontes de carbono (glicose e sacarose) em biorreator, observaram-se maiores valores de biomassa, rendimento e produtividade com glicose. A determinação dos valores de exopolissacarídeos (EPS) correspondeu a 1,18 e 1,58g de matéria seca.L-1 após 120h e 144h, para glicose e sacarose, respectivamente. Os resultados mostraram ausência de atividade antioxidante in vitro dos EPS e do extrato bruto do micélio, avaliadas através da capacidade de redução do radical livre 1,1-difenil-2-picril-hidrazil (DPPH°). Verificou-se que, para produzir 1kg de micélio seco, utiliza-se 1,69kg de sacarose, a um custo de R$1,63, sendo o valor de kw.h-1 consumido de R$1,26, totalizando R$2,89, não computados os custos de mão de obra e de secagem; entretanto, o valor de mercado para 1kg de cogumelo seco é de R$200,00. / Submitted by Marcelo Teixeira (mvteixeira@ucs.br) on 2014-05-14T17:08:22Z No. of bitstreams: 1 Dissertacao Fernanda G Confortin.pdf: 667228 bytes, checksum: dd5aee415908da35b7dd385fcbfcba0c (MD5) / Made available in DSpace on 2014-05-14T17:08:22Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Dissertacao Fernanda G Confortin.pdf: 667228 bytes, checksum: dd5aee415908da35b7dd385fcbfcba0c (MD5) / In this study, different growth media for the economic production of biomass of Pleurotus sajor-caju PS-2001 in submerged process were formulated, aiming the use of mycelium in human feeding. Glucose, fructose and sucrose as carbon sources, as well as different concentrations of glucose, soy oil, salt solution, Prodex® yeast extract, soy protein and ammonium sulphate were tested. Studies that were carried out in shaken flasks showed that 10g.L-1 of glucose led to the larger mycelium biomass (5.98g.L-1) and the best productivity (0.048g.L-1.h-1). The addition of 1mL.L-1 of soy oil to the medium was favorable to fungal growth, also resulting in the presence of the typical aroma of the fruiting body. The results achieved in the optimization of the growing medium showed that soy protein (2.3g.L-1), yeast extract (1.86g.L-1) and ammonium sulphate (1.57g.L-1) enhanced the mycelium growth. Studies carried out in laboratory-scale bioreactor, using the optimized medium, under standard conditions (temperature of 28ºC, initial impeller speed of 100rpm, initial aeration rate of 0.5vvm, and dissolved oxygen over 30% of saturation), showed superior biomass values, yield, and productivity (8.18g.L-1, 0.82g.g-1 and 0.08g.L-1.h-1, respectively) when compared to the results obtained in shaken flasks with the same medium. By comparing the composition of the dry mycelium of P. sajor-caju PS-2001 obtained in this study with the fruiting body of the same strain, grown on eucalyptus sawdust, similarities in the chemical composition regarding the total carbohydrate percentual, crude protein and minerals were observed. However, the contents of crude lipids and calories were higher in the mycelium. The total consumption of sucrose in the presence of soy oil was evidenced when growth was carried out in bioreactor, which did not occurred in shaken flasks. When comparing the results of cultivation on media containing glucose and sucrose in bioreactor, superior values of biomass concentration, yield and productivity with glucose were observed. With media containing glucose and sucrose, exopolyssaccharide (EPS) values of 1.18 and 1.58g of dry material.L-1, after 120h and 144h, respectively, were observed. No in vitro antioxidant activity of both EPS and mycelium crude extract was detected when these materials were evaluated with respect to their capacity of reducing the free radical 1,1-difenil-2-picrilhidrazil (DPPH°). It was calculated that, to produce 1kg of dry mycelium, it is used 1.69kg of sucrose, costing R$1,63, being the value of kw.h-1 consumed of R$1,26, toting up R$2,89, not being computed the labor and drying costs; however, the market value for 1kg of dry mushroom is R$200,00.

Neste trabalho, formularam-se diferentes meios de cultivo para a produção econômica de biomassa de Pleurotus sajor-caju PS-2001 em processo submerso, visando o emprego do micélio na alimentação humana. Foram testadas glicose, frutose e sacarose como fontes de carbono, assim como diferentes concentrações de glicose, óleo de soja, solução de sais, extrato de levedura Prodex®, proteína de soja e sulfato de amônio. Estudos realizados em frascos agitados mostraram que 10g.L-1 de glicose promoveram a maior biomassa micelial (5,98g.L-1) e a melhor produtividade (0,048g.L-1.h-1). A adição de 1mL.L-1 de óleo de soja ao meio de cultivo mostrou ser favorável ao crescimento fúngico, também resultando na presença do aroma típico de corpos de frutificação. Os resultados de otimização do meio de cultivo mostraram que proteína de soja (2,3g.L-1), extrato de levedura (1,86g.L-1) e sulfato de amônio (1,57g.L-1) também favoreceram o crescimento. Estudos realizados em biorreator de bancada, utilizando o meio otimizado e nas condições testadas (temperatura de 28ºC, freqüência do agitador de 100rpm, taxa de aeração de 0,5vvm, O2 dissolvido acima de 30% da saturação), quando comparados aos resultados obtidos em frascos agitados com o mesmo meio, mostraram valores de biomassa, rendimento e produtividade superiores (8,18g.L-1, 0,82g.g-1 e 0,08g.L-1.h-1, respectivamente). Ao comparar os principais componentes do micélio seco de P. sajor-caju PS-2001, obtidos no presente trabalho, com o do corpo de frutificação da mesma linhagem, cultivado em serragem de eucalipto, observaram-se semelhanças na composição química com relação ao percentual de carboidratos totais, proteína bruta e minerais; no entanto, os conteúdos de lipídios brutos e de calorias mostraram-se maiores no micélio. O consumo total de sacarose na presença de óleo de soja foi evidenciado quando o cultivo foi realizado em biorreator, o que não ocorreu em frascos agitados. Ao comparar os resultados dos cultivos variando as fontes de carbono (glicose e sacarose) em biorreator, observaram-se maiores valores de biomassa, rendimento e produtividade com glicose. A determinação dos valores de exopolissacarídeos (EPS) correspondeu a 1,18 e 1,58g de matéria seca.L-1 após 120h e 144h, para glicose e sacarose, respectivamente. Os resultados mostraram ausência de atividade antioxidante in vitro dos EPS e do extrato bruto do micélio, avaliadas através da capacidade de redução do radical livre 1,1-difenil-2-picril-hidrazil (DPPH°). Verificou-se que, para produzir 1kg de micélio seco, utiliza-se 1,69kg de sacarose, a um custo de R$1,63, sendo o valor de kw.h-1 consumido de R$1,26, totalizando R$2,89, não computados os custos de mão de obra e de secagem; entretanto, o valor de mercado para 1kg de cogumelo seco é de R$200,00. / In this study, different growth media for the economic production of biomass of Pleurotus sajor-caju PS-2001 in submerged process were formulated, aiming the use of mycelium in human feeding. Glucose, fructose and sucrose as carbon sources, as well as different concentrations of glucose, soy oil, salt solution, Prodex® yeast extract, soy protein and ammonium sulphate were tested. Studies that were carried out in shaken flasks showed that 10g.L-1 of glucose led to the larger mycelium biomass (5.98g.L-1) and the best productivity (0.048g.L-1.h-1). The addition of 1mL.L-1 of soy oil to the medium was favorable to fungal growth, also resulting in the presence of the typical aroma of the fruiting body. The results achieved in the optimization of the growing medium showed that soy protein (2.3g.L-1), yeast extract (1.86g.L-1) and ammonium sulphate (1.57g.L-1) enhanced the mycelium growth. Studies carried out in laboratory-scale bioreactor, using the optimized medium, under standard conditions (temperature of 28ºC, initial impeller speed of 100rpm, initial aeration rate of 0.5vvm, and dissolved oxygen over 30% of saturation), showed superior biomass values, yield, and productivity (8.18g.L-1, 0.82g.g-1 and 0.08g.L-1.h-1, respectively) when compared to the results obtained in shaken flasks with the same medium. By comparing the composition of the dry mycelium of P. sajor-caju PS-2001 obtained in this study with the fruiting body of the same strain, grown on eucalyptus sawdust, similarities in the chemical composition regarding the total carbohydrate percentual, crude protein and minerals were observed. However, the contents of crude lipids and calories were higher in the mycelium. The total consumption of sucrose in the presence of soy oil was evidenced when growth was carried out in bioreactor, which did not occurred in shaken flasks. When comparing the results of cultivation on media containing glucose and sucrose in bioreactor, superior values of biomass concentration, yield and productivity with glucose were observed. With media containing glucose and sucrose, exopolyssaccharide (EPS) values of 1.18 and 1.58g of dry material.L-1, after 120h and 144h, respectively, were observed. No in vitro antioxidant activity of both EPS and mycelium crude extract was detected when these materials were evaluated with respect to their capacity of reducing the free radical 1,1-difenil-2-picrilhidrazil (DPPH°). It was calculated that, to produce 1kg of dry mycelium, it is used 1.69kg of sucrose, costing R$1,63, being the value of kw.h-1 consumed of R$1,26, toting up R$2,89, not being computed the labor and drying costs; however, the market value for 1kg of dry mushroom is R$200,00.

Submitted by Erika Demachki (erikademachki@gmail.com) on 2015-10-20T17:56:33Z No. of bitstreams: 2 Dissertação - Estefânia Viano da Silva - 2014.pdf: 4645592 bytes, checksum: f3321dacb1ccfd2f2b017d08f8e3b578 (MD5) license_rdf: 23148 bytes, checksum: 9da0b6dfac957114c6a7714714b86306 (MD5) / Approved for entry into archive by Erika Demachki (erikademachki@gmail.com) on 2015-10-20T17:58:09Z (GMT) No. of bitstreams: 2 Dissertação - Estefânia Viano da Silva - 2014.pdf: 4645592 bytes, checksum: f3321dacb1ccfd2f2b017d08f8e3b578 (MD5) license_rdf: 23148 bytes, checksum: 9da0b6dfac957114c6a7714714b86306 (MD5) / Made available in DSpace on 2015-10-20T17:58:09Z (GMT). No. of bitstreams: 2 Dissertação - Estefânia Viano da Silva - 2014.pdf: 4645592 bytes, checksum: f3321dacb1ccfd2f2b017d08f8e3b578 (MD5) license_rdf: 23148 bytes, checksum: 9da0b6dfac957114c6a7714714b86306 (MD5) Previous issue date: 2014-06-26 / The mushrooms have been used as food and medicine for thousands of years. Among them, Grifola frondosa (“Maitake”) may be on the most versatile and promising medicinal mushrooms for use as a dietary supplement. Besides the high nutritional value, they are a good source of compounds such as carbohydrates that can act as biological response modifiers. In this work, β-D-glucans (PSF2-GfM and MRSF2K-GfM fractions) and heteropolysaccharides unusual in the literature (MEPF3CW-GfM and PF2K-GfM fractions) were isolated from the mycelium, grown in solid culture, of the G. frondosa, by successive aqueous and alkaline extractions, followed by fractionation through freeze-thawing, precipitation of soluble material with a Fehling solution, and dialysis using a membrane with an exclusion limit of 1000 kDa. The chemical structures were established based on monossacharide composition, periodate oxidation, methylation analysis, HPSEC-MALLS and NMR studies. The branched β-D-glucans (GLC-GfM) found were similar to those previously described for the fungus, which contains a (13)- linked β-Glcp main-chain, substituted at O-6 by single-unit -Glcp side-chains, on the average of one to every third residues of the backbone, but with different molar masses and water solubility. In adittion, novel heteropolymers were obtained. One was a fucomannogalactan (FMG-GfM), with a molar mass of 175 x 103 g mol-1, was shown to have a main chain of (1→6)-linked α-D-Galp and 3-O-Me-α-DGalp, both of which are partially substituted at O-2, principally, by 3-O-α-D-Manp-α-LFucp groups. The other was a fucoxylomannan (FXM-GfM) (Mw 202 x 103 g.mol-1), which consisted of backbone of (13)-linked α-D-Manp units, totally substituted at O-4 mainly by 4-O-α-L-Fucp-β-D-Xylp disaccharide. Thus, the polymers obtained from Grifola frondosa may could be good candidates for evaluation of its biological effect, considering the results obtained for others similar mushrooms polysaccharides. / Os cogumelos têm sido usados como alimentos e remédios por milhares de anos. Entre eles, o “Maitake” (Grifola frondosa) pode ser um dos cogumelos medicinais mais versáteis e promissores para o uso como um suplemento dietético. Além do valor nutricional elevado, eles são uma boa fonte de compostos, como os carboidratos, que podem agir como modificadores de resposta biológica. Neste trabalho, foram isolados do micélio (cultivado em meio sólido) de G. frondosa as β-D-glucanas (frações PSF2KGfM e MRSF2K-GfM) e heteropolissacarídeos (frações MePF3CW-GfM e PF2K-GfM) não comumente encontrados na literatura, por sucessivas extrações aquosas e alcalinas, seguido por fracionamento através do processo de congelamento/degelo, precipitação das frações solúveis em água com solução de Fehling e diálise em membranas com limite de exclusão de 1000 kDa. A estrutura química foi determinada através das análises de composição mossacarídica, oxidação com periodato de sódio, metilação, HPSEC-MALLS e RMN. As β-D-glucanas (GLC) isoladas foram similares àquelas previamente descritas para este fungo, as quais contém uma cadeia principal formada por unidades de 3-O-β-D-Glcp, podendo ser substituídas em O-6 por terminais não redutores de β-Glcp (1 ramificação a cada três unidades da cadeia principal), distinguindo-as quanto à solubilidade em água e tamanho (massa molar). Além destas, foram obtidos novos heteropolímeros. Um deles foi uma fucomanogalactana (FMGGfM), com uma massa molar de 175 x 103 g mol-1, a qual possui um core constituído por unidades de 6-O-α-D-Galp e 6-O-(3-O-Me-α-D-Galp), sendo ambas parcialmente substituídas em O-2 por 3-O-α-D-Manp-α-L-Fucp. O outro heteropolissacarídeo isolado consiste em uma fucoxilomanana (FXM-GfM) (Mw 202 x 103 g.mol-1) formada por unidades de α-D-Manp unidas por ligações glicosídicas do tipo (13) as quais se encontram ramificadas em O-4 principalmente pelo dissacarídeo 4-O-α-L-Fucp-β-DXylp. Considerando os efeitos terapêuticos apresentados por moléculas similares descritas para macrofungos, estes podem ser bons candidatos para avaliação do efeito biológico.

Submitted by Luciana Ferreira (lucgeral@gmail.com) on 2014-11-19T13:28:06Z No. of bitstreams: 2 Dissertação - Gracy Kelly Faria Oliveira - 2013.pdf: 3056383 bytes, checksum: 704c745d35b0898a2ea697e0aebcc431 (MD5) license_rdf: 23148 bytes, checksum: 9da0b6dfac957114c6a7714714b86306 (MD5) / Approved for entry into archive by Luciana Ferreira (lucgeral@gmail.com) on 2014-11-20T14:24:58Z (GMT) No. of bitstreams: 2 Dissertação - Gracy Kelly Faria Oliveira - 2013.pdf: 3056383 bytes, checksum: 704c745d35b0898a2ea697e0aebcc431 (MD5) license_rdf: 23148 bytes, checksum: 9da0b6dfac957114c6a7714714b86306 (MD5) / Made available in DSpace on 2014-11-20T14:24:58Z (GMT). No. of bitstreams: 2 Dissertação - Gracy Kelly Faria Oliveira - 2013.pdf: 3056383 bytes, checksum: 704c745d35b0898a2ea697e0aebcc431 (MD5) license_rdf: 23148 bytes, checksum: 9da0b6dfac957114c6a7714714b86306 (MD5) Previous issue date: 2013-07-18 / Partially methylated heterogalactans were isolated from the fruiting bodies of the medicinal mushroom Pleurotus ostreatus (mannogalactan) and Grifola frondosa (mannofucogalactan), via successive cold aqueous extraction, followed by fractionation through freeze-thawing, precipitation with Fehling solution of soluble material, and dialysis using membranes with different exclusion limits (MWCO 50, 100, and 500 kDa). Their chemical structures were established based on monosaccharide composition, methylation analysis and NMR studies. The mannogalactan (Mw = 50.7 x 103 g.mol-1) had a main chain of (1→6)-linked α-D-galactopyranosyl and 3-O-methyl-α-D-galactopyranosyl units, both of which are partially substituted at O-2 by -D-mannopyranosyl nonreducing ends.The other was a mannofucogalactan (Mw = 15.9 x 103 g.mol-1), which had a similar main-chain, being a part of the galactopyranosyl units substituted at O-2 mainly by 3-O-α-D-mannopyranosyl-α-L-fucopyranosyl groups and in a minor proportion with α-L-Fucp single-unit side chains. Recently, the heterogalactans are also recognized for their relevant biological activities, such as antitumor, immunomodulatory, anti-inflammatory and antinociceptive effects. Thus, the heterogalactans obtained from G.frondosa and P. ostreatus could present itself as a good candidate to be evaluated for its biological potential. / Heterogalactanas parcialmente metiladas foram isoladas dos basidiomas dos cogumelos medicinais Pleurotus ostreatus (manogalactana) e Grifola frondosa (manofucogalactana), através de sucessivas extrações aquosas a frio, seguidas de fracionamento por congelamento e degelo, precipitação com solução de Fehling e diálises em membranas com diferentes limites de exclusão (MWCO 50, 100 e 500 kDa). As estruturas químicas foram determinadas por meio das análises de composição monossacarídica, metilação e RMN (mono e bidimensionais). A manogalactana (Mw = 50,7 x 103 g.mol-1) apresentou uma cadeia principal constituída por unidades de -D-Galp e 3-O-Me--D-Galp (16) ligadas, sendo ambas parcialmente substituídas em O-2 por terminais não redutores de -D-Manp. A outra foi uma manofucogalactana (Mw = 15,9 x 103 g.mol-1), a qual apresentou uma cadeia principal similar, sendo uma parte das unidades de -D-galactopiranosil substituídas em O-2 pelo dissacarídeo 3-O-α-D-manopiranosil-α-L-fucopiranosil e em menor proporção com terminais não redutores de α-L-Fucp. Recentemente, as heterogalactanas têm sido reconhecidas pelas suas ações biológicas relevantes, como a atividade antitumoral, imunomodulatória, antinociceptiva e/ou anti-inflamatória. Sendo assim, as heterogalactanas isoladas de G. frondosa e P. ostreatus podem apresentar-se como bons candidatos a serem avaliados quanto ao seu potencial biológico.

Os cogumelos Lentinula edodes (shiitake) e Agaricus blazei (cogumelo-do-sol) apresentam substâncias no corpo de frutificação (basidiocarpo) e no micélio com atividades antibióticas e imuno-regulatórias, havendo uma série de relatos sobre a atuação das mesmas no controle de doenças em animais. Em vegetais, não há informações sobre o efeito protetor do cogumelo-do-sol contra fitopatógenos. No caso de shiitake, embora pouco numerosos, os estudos mostraram o potencial do cogumelo para o controle de doenças de plantas, tais como a murcha bacteriana do tomateiro, a murcha de feijão-lima, além de doenças fúngicas em sorgo e da bacteriose do maracujazeiro. Os objetivos do presente trabalho foram o de avaliar o efeito de diferentes preparações obtidas a partir de L. edodes e de A. blazei em patossistemas agrícolas, visando o controle de moléstias de interesse econômico como a antracnose do pepineiro, a mancha bacteriana do tomateiro e o endurecimento dos frutos do maracujazeiro. Obtida a proteção, os estudos buscaram elucidar o modo de ação das preparações de interesse, bem como purificá-las parcialmente, na tentativa de se concentrar o princípio ativo. Em plantas de pepino, extratos aquosos de basidiocarpos, obtidos a partir de diferentes isolados dos cogumelos, reduziram a severidade da antracnose, na dependência da concentração do extrato. Os extratos não afetaram adversamente o agente causal da doença, Colletotrichum lagenarium, mas provocaram o acúmulo de peroxidases e quitinases nas folhas tratadas e sistemicamente. Utilizando-se precipitação fracionada do extrato aquoso bruto de basidiocarpos de shiitake com sulfato de amônio e cromatografia de troca aniônica, obteve-se uma fração de proteínas, apresentando massa molecular de 29 a 35 kDa, com atividade elicitora de peroxidases em cotilédones de pepino. Em plantas de tomate, o isolado ABL 99/28 de A. blazei foi quem, em média, conferiu maior proteção contra Xanthomonas vesicatoria, a qual foi dependente das concentrações de extrato do cogumelo e de células bacterianas empregadas nos testes. Novamente, o extrato aquoso de basidiocarpos do isolado efetivo não atuou diretamente sobre o patógeno, mas desencadeou o aumento na atividade de b-1,3- glucanases nas folhas tratadas, sugerindo que o mecanismo de ação em pepineiro e tomateiro envolveu a indução de resistência. Já no caso do maracujazeiro, os extratos de basidiocarpos, obtidos a partir de diferentes isolados de ambos os cogumelos, protegeram localmente plantas inoculadas mecanicamente com o Passion fruit woodiness vírus (PWV), por reduzirem a infectividade viral, o que foi comprovado em testes conduzidos com Chenopodium quinoa, hospedeiro de lesão local do vírus. Entretanto, não houve proteção sistêmica em plantas de maracujá, nos experimentos de inoculação mecânica, reduzindo as possibilidades do uso dos cogumelos para o controle dessa virose no campo. De forma geral, os resultados mostraram que os cogumelos L. edodes e A. blazei apresentam compostos que ativam as respostas de defesa em plantas e podem auxiliar no controle de doenças vegetais, dependendo da natureza do agente causal. / The mushrooms Lentinula edodes and Agaricus blazei have substances in the fruiting body and in the mycelia exhibiting antibiotic activity and others able to stimulate the immune system in animals. There are many reports about the performance of these substances in the control of animal diseases. In vegetables, there are no information about the protecting effect of the royal mushroom against plant pathogens. In the case of shiitake, although few in number, the studies showed the potential of the mushroom for the control of plant diseases, such as tomato bacterial wilt, sorghum leave spots and bacterial disease of the passion fruit plant. The objectives of the present work were to evaluate the effect of different preparations from L. edodes and A. blazei to control the diseases cucumber anthracnose, tomato bacterial spot and passion fruit woodiness. As the protection of the plants was obtained, the studies tried to elucidate the way of action of the preparations, as well as partially purify them, in an attempt to concentrate the active compound. In cucumber plants, fruiting body aqueous extracts, from different mushroom isolates, reduced anthracnose severity, depending upon the extract concentration. The extracts did not affect adversely the disease causal agent, Colletotrichum lagenarium, but induced the peroxidase and quitinase accumulation in the treated leaves and systemically. By using fractional precipitation of the shiitake fruiting body aqueous extracts with ammonium sulfate, and anion exchange chromatography, a protein fraction exhibiting molecular mass around 29 to 35 kDa and peroxidase elicitor activity in cucumber cotyledons was obtained. In tomato plants, the isolate ABL 99/28 of A. blazei was the one that, on average, gave higher protection against Xanthomonas vesicatoria, which was dependent upon the extract and bacterial cell concentrations. Again, the fruiting body aqueous extract of ABL 99/28 did not act directly onto the pathogen, but it caused an increase in b-1,3-glucanase activity in the treated leaves, suggesting that the mushroom action in cucumber and tomato plants involved the induced resistance. On the other hand, the fruiting body extracts, obtained from different isolates of both mushrooms, protected locally passion fruit plants inoculated mechanically with the Passion fruit woodiness virus (PWV) by reducing viral infectivity, what was proven through tests carried out with Chenopodium quinoa, a PWV local lesion host. However, there was no systemic protection in passion fruit plants against the virus in the experiments involving mechanical inoculation, reducing the possibilities of the mushroom use for the PWV control in the field. In a general way, the results showed that the mushrooms L. edodes and A. blazei have substances that activate the plant defense mechanisms and they show some potential in the control of vegetable diseases, depending upon the nature of the pathogen.

Orientador: Luiz Antonio Graciolli / Banca: Ana Maria Rodrigues Cassiolato / Banca: Eustáquio Souza Dias / Resumo: O presente trabalho teve por objetivo evidenciar os principais componentes químicos que influenciam o cultivo do cogumelo Pleurotus florida, bem como avaliar a composição química dos corpos de frutificação cultivados em diferentes resíduos agrícolas. Para tanto, foram utilizados seis resíduos agrícolas: palha de arroz (PA), palha de feijão (PF), palha de trigo (PT), palha de sorgo (PS), folha de bananeira (FB) e sabugo de milho (SM). Estes resíduos, coletados na Fazenda de Ensino, Pesquisa e Extensão da UNESP, Campus de Ilha Solteira, foram analisados quanto aos teores de macro (N, P, K, Ca, Mg) e micronutrientes (Fe, Mn e Zn), lignina, celulose, hemicelulose, cinzas e relação C/N. Foram avaliados: o tempo necessário para a colonização do substrato (corrida micelial), o início da formação de primórdios, o tempo total de cultivo, o número de cogumelos, a produção e a eficiência biológica utilizando a fórmula: EB = (peso fresco dos cogumelos/peso seco do substrato inicial) x 100. Além disso, os cogumelos foram avaliados quanto aos teores de macro (N, P, K, Ca e Mg) e micronutrientes (Fe, Mn e Zn) e o teor de proteínas. O substrato PF apresentou resultados semelhantes para produção (189,8 g/kg-1), EB (89,2%) e número de cogumelos (12) à PA, substrato utilizado tradicionalmente no cultivo de Pleurotus em escala comercial. Não foi possível atribuir apenas a um fator químico as altas produções e EB observadas em PA e PF e muito menos para a baixa produção em PS (77,8 g/kg-1) e SM (53,2 g/kg-1). No geral, substratos com conteúdo de N ao redor de 1,0%, relação C/N em torno de 45%, baixo teor lignina, alto conteúdo de cinzas e maiores teores de P, K e Ca foram os melhores para o cultivo de P. florida. Entre os macronutrientes analisados, P. florida apresentou maiores teores de K, seguido por P. O Ca e o Mg estiveram presentes em pequenas quantidades nos corpos... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: This study aimed to show the main chemical components that influence the cultivation of the mushroom Pleurotus florida, and evaluate the chemical composition of fruiting bodies grown on different agricultural residues. For that, six agricultural residues were used: rice straw (RS), bean straw (BS), wheat straw (WS), sorghum straw (SS), banana leaf (BL) and cob of maize (CM). These wastes were collected at Teaching, Research and Extention Farm of UNESP, Campus of Ilha Solteira, analyzed for the levels of macro (N, P, K, Ca, and Mg) and micronutrients (Fe, Mn and Zn), lignin, cellulose, hemicellulose, ash and the C/N ratio. Was evaluated: spawn run time, earliness, the total time of cultivation and mushroom number, production and biological efficiency using the formula: EB = (fresh weight of mushrooms/dry weight of initial substrate) x 100. Moreover, the mushrooms were evaluated for levels of macro (N, P, K, Ca and Mg) and micronutrients (Fe, Mn and Zn) and protein content. The substrate BS showed similar results for yield (189,8 g/kg-1), EB (89,2%) and number of mushrooms (12) as RS substrate traditionally used for the cultivation of Pleurotus in commercial scale. Unable to allocate only the chemical factors and the high yields and EB observed in BS and RS, much less for the yield low in SS (77,8 g/kg-1) and CM (53,2 g/kg-1). In general, substrates with N content of around 1.0%, C/N ratio around 45%, low lignin content, high ash content, increased by higher levels of P, K, Ca were the best for the cultivation of P. florida. Among the macronutrients analyzed, P. florida with higher contents of K, followed by P. The Ca and Mg were present in small amounts in fruiting bodies. Among the micronutrients, Zn was present in high amount, followed by Fe and Mn. P. florida showed high ability to accumulate Zn. The mushrooms obtained in this work could not be considered a source of minerals... (Complete abstract click electronic access below) / Mestre

[pt] As substâncias psicodélicas clássicas são agonistas serotoninérgicos que atuam essencialmente no sistema de neurotransmissão 5HT2A. Essas substâncias podem promover estados alterados de consciência, bem como alterações visuais, afetivas, de humor e alterações cognitivas. Historicamente, eles têm sido usados para fins ritualísticos, recreativos e medicinais. Estudos indicam que essas substâncias apresentam baixa toxicidade, baixo risco de dependência e overdose. Existe um interesse científico atual no uso dessas substâncias como tratamento para uma variedade de condições e, embora muitos estudos busquem investigar objetivamente os resultados vinculados ao seu uso, os conteúdos subjetivos da experiência dos usuários ainda são pouco explorados. Considerando que a perspectiva de primeira pessoa é central para a experiência psicodélica, esta tese buscou investigar experiências subjetivas ligadas a psicodélicos por meio de uma variedade de abordagens. Primeiramente, buscou-se adaptar e validar o Ego Dissolution Inventory (EDI), instrumento amplamente utilizado por pesquisadores para avaliar um fenômeno essencial da experiência psicodélica, para o contexto brasileiro (Artigo 1). Em seguida, buscou-se explorar relatos públicos negativos (Artigo 2) e positivos (Artigo 3) de usuários de psilocibina (princípio ativo dos cogumelos mágicos), por meio do método Reinert, que analisa quantitativamente as falas transcritas. Por fim, discutiu-se a possível influência dos estados alterados de consciência (ASC), incluindo aqueles relacionados ao uso de substâncias psicoativas, na evolução humana (Artigo 4), sugerindo futuras pesquisas para explorar essa hipótese. / [en] Classical psychedelic substances are serotonergic agonists that act essentially on the 5HT2A neurotransmission system. These substances can promote altered states of consciousness, as well as visual, affective, mood, and cognitive changes. Historically, they have been used for ritualistic, recreational, and medicinal purposes. Studies indicate that these substances have low toxicity, low risk of dependence and overdose. There is current scientific interest in the use of these substances as a treatment for a variety of conditions, and while many studies seek to objectively investigate outcomes linked to their use, the subjective contents of the experience of users is seldom explored. Since a first-person perspective is central to the psychedelic experience, this thesis sought to investigate subjective experiences linked to psychedelics through a variety of approaches. First, we sought to adapt and validate the Ego Dissolution Inventory (EDI), an instrument widely used by researchers to assess a central feature of the psychedelic experience, to the Brazilian context (Article 1). Then, we sought to explore public negative (Article 2) and positive (Article 3) reports of psilocybin (the active principle of magic mushrooms) users, through the Reinert method, which quantitatively analyses transcribed speeches. Finally, the possible influence of altered states of consciousness (ASC), including those linked to use of psychoactive substances, in human evolution was discussed (Article 4), suggesting future research to explore this hypothesis.

Devido ao aumento da preocupação com o impacto dos agrotóxicos no meio ambiente e na saúde humana, busca-se uma agricultura sustentável. É no âmbito dessa questão que a resistência induzida torna-se uma ferramenta fundamental no manejo integrado de doenças e indispensável para uma nova agricultura, mais racional e sustentável. Dentre os diversos agentes bióticos e abióticos, utilizados em trabalhos de indução de resistência de plantas a patógenos, os cogumelos Lentinula edodes e Agaricus blazei vem sendo pesquisados. Desse modo, este trabalho teve como objetivos avaliar o efeito de diferentes isolados de L. edodes e A. blazei e do acibenzolar-S-metil (aSm) in vitro contra as bactérias e o controle de doenças de importância econômica para as culturas do tomate e da berinjela, em casa-de-vegetação. Depois de obtida a proteção, estudar os possíveis mecanismos bioquímicos ativados nas plantas através do uso dos extratos dos cogumelos e buscar a purificação parcial destes extratos, a fim de identificar o(s) princípio(s) ativo(s). No patossistema berinjela/Ralstonia, os extratos aquosos dos cogumelos não exerceram nenhum efeito direto sobre o patógeno, sendo que os isolados Abl-11 e Abl-28 de de A. blazei reduziram significativamente a ocorrência de folhas murchas das plantas em casa-devegetação, em relação aos demais tratamentos. Ocorreu um aumento na atividade da peroxidase, fenilalanina amônia-liase e polifenoloxidase nas folhas tratadas. O preciptado 60-80% obtido pela precipitação com sulfato de amônia e a fração 4 da cromatografia de troca aniônica (CTA) de Abl-28 reduziram a ocorrência de folhas murchas, sendo que a separação eletroforética revelou a presença de uma banda no gel com aproximadamente 29 kDa nesta fração. Em tomate, os extratos aquosos dos isolados dos cogumelos e o acibenzolar-S-metil não exerceram nenhum efeito inibitório in vitro no crescimento de Ralstonia solanacearum e Clavibacter michiganensis subsp. michiganensis. Porém, os isolados Abl-26 de A. blazei, Le-96/17 de L. edodes e aSm foram os que conferiram maior proteção das plantas de tomates contra os patógenos, diminuindo a ocorrência de folhas murchas, proporcionando um aumento na atividade da peroxidase no patossistema tomate/Ralstonia e um aumento na atividade de peroxidase, quitinase, fenilalanina amônia-liase e polifenoloxidase no patossistema tomate/Clavibacter. O preciptado 40-80% de Le-96/17 foi submetido à CTA, obtendo-se seis frações protéicas. As frações 3 e 4, junto com aSm e o extrato aquoso de Le-96/17 reduziram a ocorrência de folhas murchas. A separação eletroforética destas frações da CTA, do preciptado 40-80% e do extrato aquoso de Le-96/17 revelaram a presença de mais de uma banda no gel na fração 3 e 4 da CTA, no preciptado 40-80% e no extrato aquoso bruto de Le-96/17. Com base nos resultados, os cogumelos A. blazei e L. edodes apresentam compostos que induziram resistência em plantas berinjela e tomate, podendo auxiliar no controle de doenças. / Because the increase of the impact of chemical products in the environment and in human health, a search by sustainable agriculture is needed. It is in the scope of this problem that the induced resistance becomes a tool in the integrated management of pests and diseases and indispensable for a new agriculture, more rational and sustainable. Among the biotic and abiotic agents used to induce resistance, the mushrooms Lentinula edodes and Agaricus blazei have being studied. Thus, the objectives of the present work were evaluate the effects of different isolates of L. edodes and A. blazei and of the acibenzolar-S-methyl (aSm) on in vitro bacterial growth and the control of the diseases in tomato and eggplant under greenhouse conditions. The studies also tried to elucidate the mode of action of the extracts from the fruiting bodies and partially purify them. In eggplant plants, the aqueos extracts from the different mushroom isolates did not have any direct effect on the pathogen. The isolates Abl-11 and Abl-28 of A. blazei reduced the wilt in eggplant leaves, under greenhouse conditions, and increased peroxidase, phenylalanine ammonia-lyase and polyphenoloxidase activities in treated leaves. The fraction of aqueous extract of A. blazei (Abl-28) obtained with ammonium sulfhate and fraction 4 from anion exchange chromatography reduced bacterial wilt and a protein fraction exhibiting molecular mass around 29 kDa was obtained. In tomato plants, the aqueos extracts from the different mushrooms and the acibenzolar-S-methyl did not inhibit in vitro growth of Ralstonia solanacearum and Clavibacter michiganensis subsp. michiganensis. However, the isolates Abl-26 of A. blazei, Le-96/17 of L. edodes and aSm protected tomato plants against the bacterial pathogens, reducing the wilt and causing an increase in peroxidase activity in the tomato/Ralstonia interaction and an increase in peroxidase, chitinase, phenylalanine ammonialyase and polyphenoloxidase activities in the tomato/Clavibacter interaction. The ammonium sulphate fraction of Le-96/17 was submitted to anion exchange chromatography, and the proteins from fractions 3 and 4, aSm and the aqueous extract of Le-96/17 reduced the occurrence of wilt in the leaves. A protein fraction exhibiting proteins with molecular mass around 29, 37 and 45 kDA was obtained in fractions 3 and 4. Thus, the results showed that the mushrooms A. blazei and L. edodes edodes have substances that induce resistance in eggplant and tomato plants.

Devido ao aumento da preocupação com o impacto dos agrotóxicos no meio ambiente e na saúde humana, busca-se uma agricultura sustentável. É no âmbito dessa questão que a resistência induzida torna-se uma ferramenta fundamental no manejo integrado de doenças e indispensável para uma nova agricultura, mais racional e sustentável. Dentre os diversos agentes bióticos e abióticos, utilizados em trabalhos de indução de resistência de plantas a patógenos, os cogumelos Lentinula edodes e Agaricus blazei vem sendo pesquisados. Desse modo, este trabalho teve como objetivos avaliar o efeito de diferentes isolados de L. edodes e A. blazei e do acibenzolar-S-metil (aSm) in vitro contra as bactérias e o controle de doenças de importância econômica para as culturas do tomate e da berinjela, em casa-de-vegetação. Depois de obtida a proteção, estudar os possíveis mecanismos bioquímicos ativados nas plantas através do uso dos extratos dos cogumelos e buscar a purificação parcial destes extratos, a fim de identificar o(s) princípio(s) ativo(s). No patossistema berinjela/Ralstonia, os extratos aquosos dos cogumelos não exerceram nenhum efeito direto sobre o patógeno, sendo que os isolados Abl-11 e Abl-28 de de A. blazei reduziram significativamente a ocorrência de folhas murchas das plantas em casa-devegetação, em relação aos demais tratamentos. Ocorreu um aumento na atividade da peroxidase, fenilalanina amônia-liase e polifenoloxidase nas folhas tratadas. O preciptado 60-80% obtido pela precipitação com sulfato de amônia e a fração 4 da cromatografia de troca aniônica (CTA) de Abl-28 reduziram a ocorrência de folhas murchas, sendo que a separação eletroforética revelou a presença de uma banda no gel com aproximadamente 29 kDa nesta fração. Em tomate, os extratos aquosos dos isolados dos cogumelos e o acibenzolar-S-metil não exerceram nenhum efeito inibitório in vitro no crescimento de Ralstonia solanacearum e Clavibacter michiganensis subsp. michiganensis. Porém, os isolados Abl-26 de A. blazei, Le-96/17 de L. edodes e aSm foram os que conferiram maior proteção das plantas de tomates contra os patógenos, diminuindo a ocorrência de folhas murchas, proporcionando um aumento na atividade da peroxidase no patossistema tomate/Ralstonia e um aumento na atividade de peroxidase, quitinase, fenilalanina amônia-liase e polifenoloxidase no patossistema tomate/Clavibacter. O preciptado 40-80% de Le-96/17 foi submetido à CTA, obtendo-se seis frações protéicas. As frações 3 e 4, junto com aSm e o extrato aquoso de Le-96/17 reduziram a ocorrência de folhas murchas. A separação eletroforética destas frações da CTA, do preciptado 40-80% e do extrato aquoso de Le-96/17 revelaram a presença de mais de uma banda no gel na fração 3 e 4 da CTA, no preciptado 40-80% e no extrato aquoso bruto de Le-96/17. Com base nos resultados, os cogumelos A. blazei e L. edodes apresentam compostos que induziram resistência em plantas berinjela e tomate, podendo auxiliar no controle de doenças. / Because the increase of the impact of chemical products in the environment and in human health, a search by sustainable agriculture is needed. It is in the scope of this problem that the induced resistance becomes a tool in the integrated management of pests and diseases and indispensable for a new agriculture, more rational and sustainable. Among the biotic and abiotic agents used to induce resistance, the mushrooms Lentinula edodes and Agaricus blazei have being studied. Thus, the objectives of the present work were evaluate the effects of different isolates of L. edodes and A. blazei and of the acibenzolar-S-methyl (aSm) on in vitro bacterial growth and the control of the diseases in tomato and eggplant under greenhouse conditions. The studies also tried to elucidate the mode of action of the extracts from the fruiting bodies and partially purify them. In eggplant plants, the aqueos extracts from the different mushroom isolates did not have any direct effect on the pathogen. The isolates Abl-11 and Abl-28 of A. blazei reduced the wilt in eggplant leaves, under greenhouse conditions, and increased peroxidase, phenylalanine ammonia-lyase and polyphenoloxidase activities in treated leaves. The fraction of aqueous extract of A. blazei (Abl-28) obtained with ammonium sulfhate and fraction 4 from anion exchange chromatography reduced bacterial wilt and a protein fraction exhibiting molecular mass around 29 kDa was obtained. In tomato plants, the aqueos extracts from the different mushrooms and the acibenzolar-S-methyl did not inhibit in vitro growth of Ralstonia solanacearum and Clavibacter michiganensis subsp. michiganensis. However, the isolates Abl-26 of A. blazei, Le-96/17 of L. edodes and aSm protected tomato plants against the bacterial pathogens, reducing the wilt and causing an increase in peroxidase activity in the tomato/Ralstonia interaction and an increase in peroxidase, chitinase, phenylalanine ammonialyase and polyphenoloxidase activities in the tomato/Clavibacter interaction. The ammonium sulphate fraction of Le-96/17 was submitted to anion exchange chromatography, and the proteins from fractions 3 and 4, aSm and the aqueous extract of Le-96/17 reduced the occurrence of wilt in the leaves. A protein fraction exhibiting proteins with molecular mass around 29, 37 and 45 kDA was obtained in fractions 3 and 4. Thus, the results showed that the mushrooms A. blazei and L. edodes edodes have substances that induce resistance in eggplant and tomato plants.

Made available in DSpace on 2014-08-20T14:30:07Z (GMT). No. of bitstreams: 1 dissertacao_rafael_guerra_lund.pdf: 2856587 bytes, checksum: 01149241eaab789cb42b16915e1cbebd (MD5) Previous issue date: 2007-02-05 / A great variety of diseases can affect the oral cavity, such as dental caries, that is considered the most prevalent oral disease worldwide. The multifactorial and infectcontagious characteristics of dental caries have been established, associated with resident bacterial pathogens of dental biofilm. These microorganisms are responsible by the production of acids and citotoxic products, which could respectively promote the demineralization of dental structure and gingival inflammation, with posterior destruction of supporting tissues. Therefore, the use of efficient antimicrobial agents against pathogenic bacteria is an important tool in the control of oral diseases. Several natural antimicrobial agents are been investigated because of their possible pharmacological properties. The mushroom Agaricus brasiliensis S. Wasser et al. ( Royal-Sun-Agaricus ) is pointed out as a natural product with noticeable antibacterial, antifungicidal, anti-inflammatory and antineoplasic properties. In this study the potential effect of this natural product was evaluated using three ethanolic crude extracts (100%, 75% and 50% EtOH) on growth and adherence of mutans streptococci. The ethanolic extracts were obtained by maceration process. Negative controls were 100%, 75% and 50% ethanol. The antimicrobial tests used against Streptococcus mutans UA 159 and Streptococcus sobrinus 6715 were agar diffusion method, Minimum Inhibitory Concentration (MIC), Minimum Bactericidal Concentration (MBC) and bacterial cell adherence to a glass surface. In agar diffusion method, only the 100% etanol extract revealed a slight inhibiton of bacterial growth. Yet, in MIC and MBC tests, the three extracts presented antimicrobial properties and MIC and MBC values ranged between 87.4 and 444.5 μg/mL. The MBC for the three ethanolic extracts was similar to MIC against S. mutans, but only 75% ethanol extract was bactericidal against S. sobrinus. Among the ethanolic extracts tested, 100% ethanol extract was the most active (MIC 87.4μg/mL). The celular adherence also was inhibited at concentrations from 100 to 400 μg/mL of 50% and 75% ethanol extracts. In conclusion, the ethanolic extracts from A. brasiliensis showed remarkable inhibitory effects on bacterial growth and the 100% ethanol extract was the most active / Uma variedade de doenças envolve a cavidade oral, como a cárie dental, considerada a patologia oral mais prevalente em todo o mundo. Atualmente, a cárie dental é uma doença multifatorial infecto-contagiosa, associada a bactérias patogênicas residentes do biofilme dental. Estes microrganismos são os responsáveis pela produção de ácidos e produtos citotóxicos que, respectivamente, levam à desmineralização de esmalte dental e inflamação gengival com posterior destruição dos tecidos de suporte dos dentes. Assim, o uso de agentes antimicrobianos eficientes contra essas bactérias é um importante meio de controle dessa doença bucal. Vários agentes antimicrobianos de origem natural estão sendo investigados devido as suas possíveis propriedades farmacológicas. O cogumelo Agaricus brasiliensis S. Wasser et al. ( cogumelo-do-sol) destaca-se entre os produtos naturais com notáveis propriedades antibacterianas, antifúngicas, antiinflamatórias e antitumorais. Neste estudo foi avaliado o efeito de três extratos etanólicos brutos (EtOH 100%, 75% e 50%) deste cogumelo sobre o crescimento e a aderência de estreptococos do grupo mutans. Os extratos etanólicos foram obtidos através do método de extração por maceração. Os controles negativos foram etanol 100%, 75% e 50%. Os testes antimicrobianos utilizados contra Streptococcus mutans UA 159 e Streptococcus sobrinus 6715 foram o método de difusão em ágar, Concentração Inibitória Mínima (CIM), Concentração Bactericida Mínima (CBM) e aderência dos microrganismos à superfície de vidro (Adh). No método de difusão em agar, apenas o extrato 100% etanólico apresentou sinal de inibição do crescimento microbiano. Já nos testes de determinação da CIM e CBM, os três extratos apresentaram propriedades antimicrobianas e os valores de CIM e CBM variaram entre 87,4 e 444,5 μg/mL. A CBM para os três extratos etanólicos foi igual a CIM para S.sobrinus, mas apenas o extrato etanólico 75% foi bactericida para S. mutans. Entre os extratos etanólicos testados, o extrato 100% etanólico foi o mais ativo (CIM 87.4μg/mL). A aderência celular também foi inibida em concentrações de 100 a 400μg/mL dos extratos obtidos com etanol 50% e 75%. Concluindo, os extratos etanólicos de A. brasiliensis mostraram notáveis efeitos inibitórios no crescimento bacteriano e o extrato 100% etanólico foi o mais ativo