Made available in DSpace on 2014-06-11T19:25:17Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2013-11-04Bitstream added on 2014-06-13T18:26:14Z : No. of bitstreams: 1 000740228.pdf: 486416 bytes, checksum: 3fbeb0e39409e0707c50ade65e946e7a (MD5) / O conhecimento da dinâmica populacional de insetos e inimigos-naturais em grandes áreas de cultivos é fundamental para a implementação de um programa de Manejo Integrado de Pragas. A ocorrência de populações destes insetos em altas densidades populacionais no início de cultivo de grandes culturas deve-se principalmente à sua manutenção na área em outras plantas hospedeiras ou plantas invasoras, que servem como abrigo e fonte de alimentação, permitindo que os mesmos se estabeleçam e permaneçam na área na cultura subsequente, formando o fenômeno chamado de “Ponte Verde”. O presente trabalho teve como objetivos avaliar a ocorrência de espécies de insetos-pragas e inimigos naturais na cultura do nabo forrageiro, semeada como cultura de cobertura de solo e na cultura do milho em sucessão, em um sistema de plantio direto. O experimento foi instalado em Chapadão do Sul, MS, no ano agrícola de 2012/2013, sendo semeado nabo forrageiro na estressafra e milho na safra verão. As avaliações foram realizadas semanalmente, em 10 pontos, amostrando-se cinco plantas por ponto, totalizando 50 plantas por semana em ambas as culturas. Em razão da dinâmica dos insetos nas duas culturas estudadas no presente trabalho, os mesmos foram agrupados de acordo com o seu modo de alimentação ou ataque e relevância para cada uma, sendo assim, agrupados em: grupo das pragas desfolhadoras, grupo de insetos sugadores, grupo de insetos secundários e grupo de insetos predadores nas duas culturas. Os resultados evidenciaram que a cultura do nabo forrageiro é um importante hospedeiro de pragas primárias e secundárias que ocorrem em outras culturas, de modo que a sua colheita ou incorporação como adubação verde ao solo, deve ser realizada com antecedência ao plantio de milho ou soja em rotação de cultura, para não formar uma “Ponte Verde / The knowledge of the population dynamics of insects and natural enemies - in large areas of crops is critical to the implementation of a program of Integrated Pest Management. The occurrence of populations of these insects at high population densities in early cultivation of major crops is mainly due to its maintenance in the area on other host plants or weeds that serve as shelter and power supply, allowing them to settle and remain in the area in subsequent culture, forming the phenomenon called Green Bridge”. This study aimed to evaluate the occurrence of species of insect pests and natural enemies in the culture of turnip sown as cover crop and soil in corn in succession, in a no-till system. The experiment was installed in Chapadão Sul, MS, in the agricultural year 2012/2013, and sowed turnip in offseason and summer maize crop. Evaluations were performed weekly in 10 points, sampling up to five plants per point, totaling 50 plants per week in both culture. Given the dynamics of insects in the two cultures studied in this work, they were grouped according to their feeding mode or attack and relevant to each, so grouped as: group of defoliating pests, group of sucking insects, group of insects and secondary group of predatory insects in the two cultures. The results showed that the culture of the turnip is an important host of primary and secondary pests that occur in other culture, so that your harvest or incorporation as green manure to the soil, should be performed prior to planting corn or soybean crop rotation, not to form a Green Bridge

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:25:18Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2013-06-20Bitstream added on 2014-06-13T20:13:33Z : No. of bitstreams: 1 000740250.pdf: 1666900 bytes, checksum: dd82b6676d1be2569f00bb2f311486fa (MD5) / A família Chrysopidae é considerada a maior da ordem Neuroptera, sendo constituída por predadores generalistas que se alimentam de diversas espécies consideradas pragas agrícolas. A espécie Chrysoperla externa encontra-se tanto em ambientes de vegetação nativa quanto em áreas de cultivo agrícola e possui várias características que a tornam um potencial agente de controle biológico. Entretanto, a capacidade de uma espécie se adaptar à ambientes exóticos, como agroecossistemas, está relacionada à sua variabilidade genética. Assim, os objetivos desse trabalho foram investigar e comparar a variabilidade genética de C. externa em populações estabelecidas no estado de São Paulo, em áreas de vegetação nativa e agroecossistemas, bem como analisar os efeitos da deriva genética e do gargalo populacional sobre essas populações. Foram utilizadas 13 populações coletadas em agroecossistemas, três em áreas nativas e uma linhagem mantida em laboratório sob forte endogamia. Para todas as populações, foram utilizados marcadores moleculares ISSR e para as populações coletadas em agroecossistemas, empregou-se também o gene mitocondrial COI. Altos níveis de variabilidade genética foram observados em todas as populações, o que configura uma característica da espécie. A correlação entre as distâncias genética e geográfica foi baixa, havendo grande compartilhamento de haplótipos entre todas as populações de agroecossistemas. Para essas populações, o gene mitocondrial COI indicou ausência de estrutura genética, enquanto para o marcador ISSR esta pôde ser observada, indicando que as populações estabelecidas em agroecossistema formavam uma única unidade populacional que vem se diferenciando. Quando todas as populações foram analisadas em conjunto, houve a discriminação em três grupos: nativo, agroecossistemas e laboratório, evidenciando a existência de... / The family Chrysopidae comprises the highest number of species in the order Neuroptera, consists of generalist predators that feed on several agricultural pest species. The species Chrysoperla externa is found in native vegetation and agricultural crops and has several features that make it a potential biological control agent. However, the ability of a species to adapt to exotic environments, such as agroecosystems, is related to the genetic variability. The aims of this study were to investigate and compare the genetic variability of C. externa in established populations in the state of São Paulo, in areas of native vegetation and agroecosystems, as well as to analyze the effects of genetic drift and bottleneck on these populations. We used 13 populations collected in agroecosystems, three in native areas and one lineage maintained in the laboratory under strong inbreeding. ISSR molecular markers were used for all populations, but for the populations collected in agroecosystems we used also the mitochondrial COI gene. High levels of genetic variability were observed in all populations, which is one characteristic of the specie. The correlation between genetic and geographic distances was low and a large number of haplotypes was shared among all populations of agroecosystems. For populations of agroecosystems, the mitochondrial COI gene showed no genetic structure, whereas the ISSR marker demonstrated genetic structure, indicating that the established populations in agroecosystems formed a single population unit, which has been under differentiation. When all populations were analyzed together, there was discrimination in three groups: native, agroecosystems and laboratory, showing the existence of genetic structure. The native populations showed a number of polymorphic loci superior to others, but the groups did not differ significantly with respect to the indices of genetic diversity, which ...

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:25:18Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2007-02-22Bitstream added on 2014-06-13T20:32:41Z : No. of bitstreams: 1 viana_cltp_me_jabo.pdf: 681354 bytes, checksum: 292f317000f87f4932ed390de403036a (MD5) / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / A pesquisa foi desenvolvida no Laboratório de Biologia e Criação de Insetos (LBCI) e no Laboratório de Genética de Bactérias e Biotecnologia Aplicada (LGBBA) da FCAV-UNESP,Campus de Jaboticabal, SP. O objetivo geral foi selecionar novos isolados de Bacillus thuringiensis através da caracterização molecular, identificando as diferentes subclasses do gene cry1, determinar a patogenicidade contra lagartas de Plutella xylostella e avaliar a influência no ciclo biológico da praga. Foram utilizados 95 isolados de B. thuringiensis obtidos da coleção do LGBBA. O material genético foi extraído pela matriz de troca iônica Kit Instagene Matrix e submetido a PCR com iniciadores gerais para o gene cry1 e específicos para as subclasses. Realizaram-se bioensaios com 58 isolados, um controle positivo com a linhagem padrão HD-1 B. thuringiensis var. kurstaki, um controle negativo com B. thuringiensis var. tenebrionis e água com espalhante adesivo, como testemunha. O conteúdo das subclasses estudadas para o gene cry1 foi determinado para 58 isolados, o que representa 60% do total. Dentre os 95 isolados estudados, 27,4% demonstraram que o conjunto gênico cry1Aa, cry1Ca, cry1Da, cry1Fa e cry1Bd é a freqüência mais comum. Dos 58 isolados testados, 11 causaram mortalidade total das lagartas e os demais influenciaram negativamente o ciclo biológico da praga. Dentre as características avaliadas, a mortalidade larval e a pupal, bem como a duração larval foram as mais relevantes para se determinar quais isolados influenciaram a biologia da praga. Portanto, os isolados que causaram 100% de mortalidade larval têm grande potencial para formulação de produtos comerciais a serem utilizados em programas de manejo integrado de P. xylostella. / The research was developed in the Laboratório de Biologia e Criação de Insetos (LBCI) and in the Laboratório de Genética de Bactérias e Biotecnologia Aplicada (LGBBA) at the FCAV-UNESP-Campus de Jaboticabal, SP. The general objective was to select new strains of Bacillus thuringiensis through the molecular characterization, identifying the different subclasses of the gene cry1, to determine the patogenicity against caterpillars of Plutella xylostella and to evaluate the influence in the pest biological parameters. It was used 95 isolated of B. thuringiensis obtained of the collection of LGBBA. The genetic material was extracted by the head office of change ionic Kit Instagene Matrix and submitted to PCR with general initiators for the gene cry1 and specific for the subclasses. Bioassays were made using 58 strains of B. thuringiensis, a positive control with var. tenebrionis and water was used with adhesive spreader Tween20®, as a standard the strains HD1 from B. thuringiensis var. kurstaki, a negative control with B. thuringiensis check. The content of the subclasses studied for the gene cry1 was determined for 58 isolated, what represents 60% of the total. Among the 95 isolated studied, 27,4% demonstrated that the genic group cry1Aa, cry1Ca, cry1Da, cry1Fa and cry1Bd is the most common frequency. Total mortality of caterpillars was observed in 11 of studied strains and the remainders affected negatively pest biological lifecycle. Larvae and pupae mortality, and larvae period were more relevants parameters to determine which isolates affect P. xylostella biology. In this way, the isolates caused 100 % larval mortality have higher potential for development a commercial bioinseticide to use in Plutella xylostella integrated pest management programs.

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:25:18Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2010-02-22Bitstream added on 2014-06-13T18:47:49Z : No. of bitstreams: 1 funichello_m_me_jabo.pdf: 341179 bytes, checksum: a0bafa4e42029536b71b4b43944467f2 (MD5) / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / Este trabalho teve como objetivos estudar os parâmetros biológicos de Aphis gossypii nas cultivares comerciais NuOPAL (Bollgard I) e DeltaOPAL, assim como do predador Cycloneda sanguinea, tendo como presa pulgões criados na cultivar transgênica NuOPAL e na sua isolinha DeltaOPAL. Os experimentos foram realizados em laboratório sob condições controladas de temperatura (25 ± 1º C), umidade relativa (70 ± 10%) e fotofase (12 horas), e em casa de vegetação da FCAV/UNESP, em Jaboticabal, SP. No experimento da biologia do pulgão a duração dos estádios ninfais e fase ninfal, duração do período reprodutivo, pós-reprodutivo, longevidade das fêmeas e número total de ninfas por fêmea, não apresentaram diferenças significativas, assim como os parâmetros de fertilidade. A cultivar transgênica NuOPAL não afetou a biologia de A. gossypii em relação a sua isolinha não-Bt. No experimento da biologia de C. sanguinea alimentadas com A. gossypii, a duração da fase larval foi menor quando alimentadas com pulgões criados na cultivar NuOPAL, enquanto a longevidade dos adultos e o período reprodutivo foram maiores. A fertilidade das fêmeas e viabilidade de ovos também foram menores / The objective of this work was to study the biological parameters of Aphis gossypii in NuOPAL cultivars (Bollgard I) and DeltaOPAL, as well as the predator Cycloneda sanguinea with the aphid prey reared on transgenic cultivar NuOPAL and its isoline DeltaOPAL. The experiments were performed in the laboratory under controlled temperature (25 ± 1 º C), humidity (70 ± 10%) and photophase (12 hours) and a greenhouse of FCAV / UNESP, Jaboticabal, SP. In the experiment of the biology of aphids the duration of nymphal phases, duration of reproductive period, post-reproductive longevity of females and total number of nymphs per female, showed no significant differences, as well as the parameters of fertility. The cultivar NuOPAL transgenic cultivar not affect the biology of A. gossypii in relation to its non-Bt isoline. In the experiment of the biology of C. sanguinea fed aphids A. gossypii the larval period was shorter when fed aphids reared on the cultivar NuOPAL, while the longevity of adults and the reproductive period were higher. The female fertility and egg viability were also lower

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:25:18Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2007-02-13Bitstream added on 2014-06-13T19:47:21Z : No. of bitstreams: 1 silva_csb_me_jabo.pdf: 2042563 bytes, checksum: cdf68da9ed502956924c94701e18a405 (MD5) / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / O objetivo deste trabalho foi estudar o padrão de dispersão de Telenomus remus Nixon (Hymenoptera: Scelionidae), parasitóide de ovos de Spodoptera spp. (Lepidoptera: Noctuidae), avaliando os efeitos da velocidade e direção eólicas, do tamanho de plantas e da disponibilidade de hospedeiros neste processo, em agroecossistemas de algodoeiro. Como quase sempre a dispersão é efetuada pelo vôo, nós estudamos também o efeito de um gradiente de temperatura (18, 21, 24, 27, 30 e 33 ºC) sobre sua iniciação de vôo, em condições de laboratório. O processo dispersivo foi monitorado com armadilhas adesivas e posturas de Spodoptera frugiperda (J.E. Smith), sobre plantas com 30, 60 e 90 dias após emergência (DAE). A temperatura afetou a iniciação de vôo de machos e fêmeas de T. remus, sendo a maior percentagem de vôo observada aos 27ºC. O vento constituiu variável importante no processo dispersivo, influenciando a direção do vôo e a distância percorrida. Velocidades eólicas próximas de 2,5 m/s não inibiram o vôo, porém, anularam ou dificultaram bastante o seu controle. Para ventos de 1,25 m/s o vôo de fêmeas foi predominantemente passivo em plantas com 30 DAE e seguiu orientação contrária à direção eólica aos 90 DAE. A idade das plantas não influenciou a distância percorrida, porém, a probabilidade de parasitismo tendeu a diminuir em plantas mais desenvolvidas. A movimentação de fêmeas foi menor em parcelas aonde foram disponibilizados hospedeiros. Modelos de número e espaçamento entre pontos de liberação foram sugeridos para ambas as situações de velocidade eólica. / We studied the dispersal pattern of Telenomus remus Nixon (Hymenoptera: Scelionidae), an egg parasitoid of Spodoptera spp. (Lepidoptera: Noctuidae), evaluating the effects of the wind speed and direction, plant size and the host availability on this process, in cotton agroecosystems. As dispersal is mostly carried by flight, we also studied the effect of a gradient of temperature (18, 21, 24, 27, 30 e 33 ºC) on the T. remus flight initiation, under laboratory conditions. The dispersal was monitored using sticky traps and Spodoptera frugiperda (J.E. Smith) eggs, on plants with 30, 60 and 90 days after emergence (DAE). Temperature affected the flight initiation of T. remus males and females. The highest flight intensity was observed at 27ºC. Wind was an important factor on dispersal, affecting the flight direction and the distance covered. Wind speed near 4.4 m/s did not inhibit flight, but reduced it tremendously or turned its control harder. Under winds near 1.25 m/s the flight of females was predominantly passive on plants with 30 DAE. On plants with 90 DAE, the flight direction was contrary to wind direction. The age of plants did not affect the distance covered, but the probability of parasitism tended to fall on more developed plants. The movement of females was smaller on areas where hosts were available. Models about the number and spacing among release points were suggested for both wind speed situations.

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:25:19Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2008-06-09Bitstream added on 2014-06-13T19:11:54Z : No. of bitstreams: 1 duque_fjs_me_jabo.pdf: 1192633 bytes, checksum: d4e631a59a88c1a2d072b9b7d98d2993 (MD5) / Univ. Centro Ocidental Lisandro Alvarado - Venezuela / O gênero Ceraeochrysa Adams é um dos maiores e amplamente distribuídos do Neotrópico. Muitas de suas espécies têm sido relatadas como importantes controladores biológicos de insetos pragas em culturas. Em Venezuela o estudo dos crisopídeos tem passado despercebido e somente as espécies Ceraeochrysa cubana, C. everes, e C. valida tem relato de ocorrência. Levando em conta esta problemática se realizaram amostragens nos estados Lara (Tarabana), Yaracuy (Aroa, Nirgua), Portuguesa (Las Matas), Barinas (Socopo) e Miranda (Tacata) com o objetivo de fazer um levantamento das espécies de Ceraeochrysa que ocorrem em pomares de Citrus spp., na Venezuela. Os insetos coletados foram coletados com rede entomologia, colocados vivos em garrafas plásticas de 1 Lt de capacidade, levados ao laboratório, congelados, alfinetados e secados. Posteriormente o abdômen foi cortado e macerado em solução de KOH 10% por duas horas, colorado com Clorazol Black, extraída a genitália, fotografada e desenhada com ajuda de microscópio estereoscópico e microscópio biológico, ambos com câmaras lúcidas acopladas. Os exemplares foram identificados comparando as genitálias previas disponíveis em textos e publicações especializadas. Foram identificadas as espécies C. cincta, C. cubana, C. everes e C. valida já relatadas para Venezuela e as espécies C. acmon, C. caligata, C. claveri, C. dislepis, C. montoyana, C. sanchezi, C. scapularis, C squama e C. valida, alem dos exemplares Ceraeochrysa sp1, Ceraeochrysa sp2, Ceraeochrysa sp3 e Ceraeochrysa sp4. Para cada exemplar foram realizadas as redescrições e descrições correspondentes. As redescrições foram justificadas em função das variações intraespecíficas que se observaram, desenhou-se uma chave taxonômica para identificação das espécies e para cada uma delas foram realizadas pranchas de desenhos que mostram os caracteres ressaltantes das espécies estudadas. / Ceraeochrysa Adams is one of the largest and widely distributed green lacewing genus. Many species has been related as an important biological control agents of insects pest in agricultural situations. In Venezuela, the study of green lacewings has been passed over and only Ceraeochrysa cubana, C. everes, and C. valida species has been reported. Considering this problem, several sampling in Lara (Tarabana), Yaracuy (Aroa, Nirgua), Portuguesa (Las Matas), Barinas (Socopo) and Miranda (Tacata) states were made intending to make an inventory of Ceraeochrysa species that occur in orchards of Citrus spp. in Venezuela. The insects samples were collected with proper nets, put on plastic bottles, taken to the lab, frozen, pinned and dried. Afterward, the abdomen was cut and macerated in KOH 10% solution by two hours, tinted with clorazol-black and it was made the corresponding analyses to identify the exemplars by comparing their genitals among available specialized essays and publications. It was found C. cincta, C. cubana, C. everes and C. valida species already reported to Venezuela and the species C. acmon, C. caligata, C. claveri, C. dislepis, C. sanchezi, C. scapularis, C. squama, C. montoyana, in addition to exemplars Ceraeochrysa sp1, Ceraeochrysa sp2, Ceraeochrysa sp3 and Ceraeochrysa sp4. For each sample it had been made the re-descriptions and descriptions correspondents. The re-description were justified by the intraspecifics variations that were observed, then a taxonomic key were drawn to indentify the species and, for each of them, were realized model sheets that brings us the standings characteristics of studied species. Further studies will be necessary to use these species in pest management programs.

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:26:08Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2013-02-25Bitstream added on 2014-06-13T18:29:31Z : No. of bitstreams: 1 figueiredo_cs_me_jabo_parcial.pdf: 433594 bytes, checksum: 5db23a3d4c3ab1bce497f29f193cd674 (MD5) Bitstreams deleted on 2015-06-25T13:00:47Z: figueiredo_cs_me_jabo_parcial.pdf,. Added 1 bitstream(s) on 2015-06-25T13:03:13Z : No. of bitstreams: 1 000718405_20160225.pdf: 327253 bytes, checksum: 949c202d3f1b517f66218611f9a1bd5a (MD5) Bitstreams deleted on 2016-02-26T14:03:56Z: 000718405_20160225.pdf,. Added 1 bitstream(s) on 2016-02-26T14:04:50Z : No. of bitstreams: 1 000718405.pdf: 781931 bytes, checksum: cd606945171aa0e2251919afe0b3aec7 (MD5) / A bactéria Bacillus thuringiensis é vista como uma das melhores opções no controle biológico devido à ação entomopatogênica e a especificidade de suas proteínas. As proteínas Vip3, que são secretadas durante o crescimento vegetativo do B. thuringiensis, atuam no controle de importantes lepidópteros praga. O objetivo deste trabalho foi caracterizar um gene vip3A de um isolado de B. thuringiensis, expressar a proteína e verificar sua toxicidade contra larvas de Anticarsia gemmatalis e. Spodoptera frugiperda Para tanto, o gene foi amplificado com iniciadores específicos por PCR, gerando um fragmento de 2370 pb. O fragmento foi clonado em vetor pGEM - T Easy para sequenciamento, subclonado em vetor de expressão pET-28a (+) e o conjunto inserido em células de Escherichia coli BL21 (DE3). A expressão da proteína foi induzida por IPTG, a proteína Vip3Aa50 foi visualizada em SDS-PAGE e detectada por “Western blotting”. Os ensaios de toxicidade revelaram alta virulência às larvas neonatas de A. gemmatalis e S. frugiperda, sendo as larvas da população de A. gemmatalis mais sensíveis. O isolado utilizado neste estudo é altamente promissor como fonte de gene vip3A para controle de ambas as pragas por meio da produção de plantas transgênicas como milho e soja. / The bacterium Bacillus thuringiensis is seen as one the best options for the biological control due to entomopathogenic action and protein specificity. The Vip3 proteins, which are secreted during the vegetative growth of B. thuringiensis, act to the control the most important lepidopteran pests. The aim of this study was to characterize a vip3A gene from an isolate of B. thuringiensis, to induce the protein and evalute its toxicity against Anticarsia gemmatalis and Spodoptera frugiperda larvae. Therefore, the gene was amplified by specific PCR’s primers, generating a 2370 pb fragment. The fragment was cloned into the pGEM-T Easy vector and subsequently, it was sequenced and subcloned into the pET-28a (+)’s expression vector and inserted in to the Escherichia coli BL21 (DE3) cells. The Vip3Aa50 protein expression was induced by IPTG, observed using SDS-PAGE and detected by Western blotting. The toxicity bioassay showed intense virulence for A. gemmatalis and S. frugiperda’s neonate larvae. The results showed that A. gemmatalis larval population was more sensitive. The isolate used in this study is highly promising as vip3A source gene to control both plagues through transgenic plant production, such as, corn and soybean.

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:26:09Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2011-06-14Bitstream added on 2014-06-13T19:54:07Z : No. of bitstreams: 1 mendes_drp_me_jabo.pdf: 752950 bytes, checksum: da4434743daf49841f285c3909094a1c (MD5) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / Proteínas inseticidas derivadas de Bacillus thuringiensis (Bt) são os inseticidas biológicos mais amplamente utilizados. O trabalho teve por objetivo avaliação da toxicidade das proteínas de Bt, Cry1Ia e Vip3Aa, expressas em Escherichia coli BL21 (DE3), a fim de verificar a eficiência destas toxinas na mortalidade de Spodoptera frugiperda. Para tanto, empregou-se um par de iniciadores específicos para amplificar o fragmento correspondente ao gene vip3Aa completo contendo 2370 pb. O fragmento obtido foi clonado no vetor pET SUMO e transformado em células de E. coli BL21 (DE3) por choque térmico. A expressão das proteínas Vip3Aa e Cry1Ia previamente clonado, foi induzida por tiogalactopiranosídeo de isopropila (IPTG), e as proteínas recombinantes com peso molecular de, aproximadamente, 100 e 81 KDa respectivamente, foram detectadas por SDS-PAGE e Western Blot. Para avaliação da toxicidade os bioensaios foram realizados com as lagartas de primeiro instar que foram alimentadas com dietas artificiais contendo, na superfície, cinco diferentes concentrações da toxina Cry1Ia e cinco diferentes concentrações da toxina Vip3Aa recombinante. Os bioensaios foram estabelecidos em delineamento inteiramente casualizado, com 16 lagartas por repetição, totalizando 4 repetições por tratamento. A quantificação de lagartas mortas pela ação do B. thuringiensis, foi determinada pela CL50. Os resultados demonstraram a eficiência do sistema bacteriano na expressão das proteínas Vip3Aa e Cry1Ia de B. thuringiensis, resultando em toxinas recombinantes com elevada toxicidade frente às lagartas de S. frugiperda, o que sugere o uso destes genes na obtenção de plantas transgênicas, únicas ou piramidada, resistentes a esta praga / Insecticidal proteins derived from Bacillus thuringiensis (Bt) are the most widely used biological insecticides. The study aimed to evaluate the toxicity of Bt proteins, Cry1Ia Vip3Aa and expressed in Escherichia coli BL21 (DE3) to verify the efficiency of these toxins on the mortality of Spodoptera frugiperda. For this we used a pair of specific primers to amplify the fragment corresponding to the gene vip3Aa complete containing 2370 bp. The fragment was cloned into pET SUMO vector and transformed into cells of E. coli BL21 (DE3) by heat shock. The expression of proteins Vip3Aa and Cry1Ia previously cloned, was induced by isopropyl tiogalactopiranosídeo (IPTG), and the recombinant proteins with a molecular weight of approximately 100 and 81 kDa respectively, were detected by SDS-PAGE and Western blot. To evaluate the toxicity bioassays were performed with first instar caterpillars that were fed diets containing artificial, in surface, whit five different toxin concentrations of Cry1Ia and five different concentrations of recombinant toxin Vip3Aa. Bioassays were established in a randomized design, with 16 larvae per repetition, totaling four replicates per treatment. The quantification caterpillar dead by the action of B. thuringiensis, was determined by LC50. The results demonstrated the efficiency of the bacterial system in protein expression Vip3Aa Cry1Ia of B. thuringiensis toxins, resulting in recombinants with high toxicity against the larvae of S. frugiperda, suggesting the use of these genes in the production of transgenic plants, single or pyramided resistant to this pest

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:31:46Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2011-12-21Bitstream added on 2014-06-13T20:02:57Z : No. of bitstreams: 1 viel_sr_dr_jabo.pdf: 828115 bytes, checksum: b974e906f04ebb44b4d4434000bd82f4 (MD5) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / Visando melhorias qualitativas na criação de Cotesia flavipes Cameron, 1891, realizaram-se testes com alimentação de adultos antes do parasitismo em Diatraea saccharalis Fabricius,1794, com 14 dietas: (2,5%; 5% e 10% sacarose; 2,5%; 5% e 10% sacarose + 2,5% lêvedo de cerveja; 2,5%; 5% e 10% mel; 2,5%; 5% e 10% mel + 2,5% lêvedo de cerveja; 2,5% lêvedo de cerveja; água) e testemunha. Avaliaramse: adultos emergidos, razão sexual, porcentagem de emergência, peso das massas de pupas e a longevidade nas gerações F1 e F2. O delineamento foi o inteiramente casualizado com 15 tratamentos e cinco repetições. As dietas a base de 5% de sacarose, 5 e 10% de mel aos adultos de C. flavipes podem proporcionar acréscimo considerável na longevidade dos parasitoides. O consumo de dietas artificiais por C. flavipes antes do parasitismo em D. saccharalis proporcionou melhorias qualitativas. O estudo visou ainda testar um protocolo de qualidade de C. flavipes, quanto à eficiência na busca pelo hospedeiro D. saccharalis. Foi usada uma arena de testes (copo plástico translúcido de 700 mL, com tampa). Lagartas de D. saccharalis foram colocadas em tolete de cana-de-açúcar de 13 cm, perfurado transversalmente e oferecidas ao parasitoide. Os tratamentos foram: (0, 6, 12, 18 e 24 horas de fotofase - L), (6, 12, 18 e 24 horas de disponibilidade do hospedeiro - H), (1, 2, 3, 4 e 5 lagartas por arena - T) e o orifício de entrada da lagarta na cana-de-açúcar (aberto - A ou fechado - F). Foram realizados os testes de Kolmogorov e a homogeneidade da variância foi analisada pelo teste de Bartlett, além das análises de agrupamento e de componentes principais. Foi criado um Índice de performance da qualidade (IPQ), que foi determinante na escolha do melhor tratamento. Foi proposto, o uso do tratamento: 6 horas de disponibilidade... / Aiming at qualitative improvements in the rearing of Cotesia flavipes, tests were carried out with adults feed before parasitism in Diatraea saccharalis, with 14 diets (2.5%, 5% and 10% sucrose, 2.5%, 5% and 10% sucrose + 2.5% brewer's yeast, 2.5%, 5% and 10% honey, 2.5%, 5% and 10% honey + 2.5% yeast, 2.5% yeast, water) and control. Were evaluated: emerging adults, sex ratio, percentage of emergency, mass weight of pupae, and longevity in F1 and F2 generations. The design was completely randomized with 15 treatments and five repetitions. The diets based on 5% sucrose, 5 and 10% honey to adults of C. flavipes, may provide considerable increase in longevity. Consumption of artificial diets by C. flavipes before parasitism in D. saccharalis provides quality improvements. The study also aimed to test a protocol for quality of C. flavipes, for efficiency in the search for host D. saccharalis. We used a testing arena (700 mL plastic cup with lid). Larvae of D. saccharalis were placed in 13 cm cutting canes, drilled across, and offered to the parasitoid. The treatments were: (0, 6, 12, 18 and 24 hours of photophase - L) (6, 12, 18 and 24 hours of availability of the host - H) (1, 2, 3, 4 and 5 larvae per arena - T) and the entrance hole of the larvae in sugar cane (open - A or closed - F). We performed the Kolmogorov´s test and the homogeneity of variance was analyzed by Bartlett's test. Were also carried out cluster analysis and principal components. It created an index of performance quality (IPQ). It is proposed the use of treatment 6 hours of availability, 0 hours of light, one larvae per arena, using the cutting cane with the hole closed, as quality protocol C. flavipes

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:31:46Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2011-12-20Bitstream added on 2014-06-13T18:42:54Z : No. of bitstreams: 1 pedroso_ec_dr_jabo.pdf: 304491 bytes, checksum: bfd448beba5d92c9c2eaf24d085e6a78 (MD5) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / Orius insidiosus é uma espécie generalista, o que o torna apto à exploração do ecossistema. A traça-das-crucíferas, Plutella xylostella, é considerada a principal praga das brassicáceas podendo ocasionar destruição total. Este estudo visou obter informações sobre O. insidiosus para subsidiar o desenvolvimento de programas de controle biológico de P. xylostella em diferentes variedades de brassicáceas. Foram considerados os seguintes objetivos específicos: a) avaliar o desenvolvimento de O. insidiosus; b) confeccionar a tabela de vida de O. insidiosus alimentado com larvas de segundo ínstar de P. xylostella criadas em diferentes variedades de brassicáceas; c) obter a resposta funcional de O. insidiosus. As criações dos insetos (O. insidiosus e P. xylostella) e os experimentos foram desenvolvidos no Laboratório de Biologia e Criação de Insetos (LBCI) da FCAV/UNESP campus de Jaboticabal, sob temperatura de 25±1ºC, umidade relativa de 70±10% e fotofase de 12 horas. Foram mantidas criações de P. xylostella nas seguintes variedades: Brassica oleracea L. var. acephala (couve), var. itálica (brócolis), var. capitata (repolho) e var. botrytis (couve-flor). Oitenta ninfas de primeiro ínstar foram individualizadas em placas de Petri para o acompanhamento da fase ninfal. Os adultos foram separados por sexo, acasalados e mantidos em placas de Petri para a verificação das características reprodutivas e longevidade. Para os estudos de resposta funcional fêmeas foram deixadas sem alimentação por 12h e individualizadas em placas de Petri com larvas nas densidades de 2, 4, 8, 16 e 32 por placa, para cada variedade. A duração média da fase ninfal foi de 11,4; 13,9; 13,0 e 14,1 dias para brócolis, couve, couve-flor e repolho, respectivamente. A longevidade de O. insidiosus não diferiu entre as variedades. O período de pré-oviposição... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaix / Orius insidiosus is a generalist specie, which makes it suitable to explore the ecosystem. The diamondback moth, Plutella xylostella, is a major pest of Brassicaceae and can cause total destruction to the culture. This study aimed at obtaining information about O. insidiosus for use to develop biological control programs of P. xylostella in different varieties of Brassicaceae. We considered the following specific objectives: a) evaluate the development of O. insidiosus; b) to prepare a life table O. insidiosus fed on second instar larvae of P. xylostella reared on different cultivars of Brassicaceae; c) obtain the functional response of O. insidiosus. The rearing of insects (O. insidiosus e P. xylostella) and the experiments were developed in the Laboratory of Insect Biology and Rearing (LBCI), FCAV / UNESP Jaboticabal, under temperature 25 ± 1 ° C, relative humidity of 70 ± 10% and photophase of 12 hours. It was maintained rearing of P. xylostella in the varieties B. oleracea var. acephala (kale), var. italic (broccoli), var. capitata (cabbage) and var. botrytis (cauliflower). Eighty nymphs of first instar were individually placed in Petri dishes to the accompaniment of the nymphal stage. The adults were sexed, mated and kept in Petri dishes for the verification of reproductive traits and longevity. To study the functional response of females were left without feed for 12 hours and individualized in Petri dishes with caterpillars in the densities of 2, 4, 8, 16 and 32 per plate for each variety. The production of females (R0), generation time (T), intrinsic rate of increase (rm) and longevity of females were similar. O. insidiosus is able to grow and reproduce preying larvae of the diamondback moth in different cultivars of Brassicaceae. The average of the nymphal stage were 11.4, 13.9, 13.0 and 14.1 days for broccoli, cabbage, cauliflower and kale... (Complete abstract click electronic access belo