Orientadora : Profª. Drª. Iara José de Messias-Reason / Co-orientadores : Prof. Dr. Renato Mitsunori Nisihara e Prof. Dr. Mario Teruo Sato / Dissertação (mestrado) - Universidade Federal do Paraná, Setor de Ciências da Saúde, Programa de Pós-Graduação em Medicina Interna. Defesa : Curitiba, 27/08/2014 / Inclui referências : f. 58-64 / Resumo: Introdução: A Degeneração Macular Relacionada a Idade (DMRI) é a principal causa de cegueira no ocidente em pessoas acima de 65 anos de idade. Nos EUA, estima-se que mais de 8 milhões de pacientes tenham DMRI. A idade é o principal fator de risco e com o aumento da expectativa de vida, espera-se maior número de casos nos próximos anos. A atividade inflamatória na fisiopatologia da DMRI tem sido cada vez mais estudada e cresce em importância a cada dia, com vários mecanismos propostos, com especial atenção ao sistema complemento. Objetivos: Avaliação do papel da lectina ligante de manose (MBL) do sistema complemento em pacientes com DMRI. Pacientes e Métodos: Foram avaliados 136 indivíduos (60 homens e 76 mulheres), com idade acima de 55 anos. Dentre eles, 68 eram portadores de DMRI e 68 eram controles. Esses foram pareados com os pacientes de acordo com idade, sexo, características étnicas, socioeconômicas e origem geográfica. A concentração sérica de MBL foi avaliada através do método TRIFMA. O estudo foi realizado no Centro da Visão do Hospital de Clínicas da Universidade Federal do Paraná e compreendeu: consulta oftalmológica completa (exame oftalmológico, tomografia de coerência óptica com protocolo específico); coleta de sangue, análise laboratorial e estatística. Resultados: As concentrações de MBL não mostraram diferenças significantes quanto a etnia, idade, sexo, IMC ou tabagismo entre grupos de pacientes e controles. A mediana da MBL para os casos foi de 608 ng/mL (30 - 3415ng/mL) e controles 739 ng/mL (30 - 6039 ng/mL); p = 0,4770. Comparando-se DMRI exsudativa com a forma seca, observou-se menor concentração de MBL na forma exsudativa (476 ng/mL) em relação a forma seca (893 ng/mL). Entretanto, esses resultados não mostraram diferença estatisticamente significante (p = 0,1011). Houve discreta diminuição, não significativa, dos níveis de MBL com o avanço da idade nos controles. Conclusões: Os resultados obtidos não demonstraram associação entre a concentração sérica de MBL e a DMRI ou com suas formas clinicas exsudativa e seca. Palavras-chave: Degeneração macular relacionada a idade. Sistema complemento. MBL. Marcadores inflamatórios. / Abstract: Introduction: Age Macular Degeneration (AMD) is the leading cause of blindness in the Western population over 65 years. In the U.S., more than 8 million patients have some degree of AMD. The major risk factor for AMD is the age and due to the increase in the global life expectancy, a higher number of cases are expected. The inflammatory activity in the pathophysiology of the disease has been studied for years, gaining importance in the recent years. Several mechanisms have been proposed with special attention paid to the complement system. Objectives: To evaluate the role of mannose-binding lectin (MBL) of complement system in AMD patients. Patients and Methods: A total of 136 subjects with age over 55 years were evaluated (68 patients with AMD and 68 controls). All subjects were followed up at the Vision Centre of the Hospital de Clínicas - Federal University of Paraná in Curitiba - Brazil. For all individuals complete ophthalmologic exams and optical coherence tomography using a specific protocol were performed. Blood samples were collected for MBL measurement. Results: There was no difference regarding ethnicity, age, gender, BMI or smoking habits between patients and controls. The median MBL levels for AMD patients was 608 ng /mL (30-3415 ng/mL -) and for the controls 739 ng/mL (30-6039 ng/mL), with no statistically significant difference (p= 0,4770). There was no difference either when comparing exudative with dry AMD, with median MBL of 476 ng/mL in the exudative form and 893 ng/mL in the dry form (p=0,1011). There was no difference between men and women regarding MBL serum levels and a not significant decrease in MBL levels was observed with aging in controls. Conclusions: There was no association between MBL serum levels and AMD or with the exudative and dry clinical forms of AMD. Keywords: Age macular degeneration, complement system, MBL, inflammatory markers.

Made available in DSpace on 2014-06-12T16:25:36Z (GMT). No. of bitstreams: 2 arquivo3196_1.pdf: 1609060 bytes, checksum: 56d061c007d949c235169a3a4808b5b6 (MD5) license.txt: 1748 bytes, checksum: 8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33 (MD5) Previous issue date: 2009 / Objetivo: Avaliar a microbiota bacteriana da conjuntiva e sua sensibilidade aos antibióticos em portadores de degeneração macular relacionada à idade (DMRI) exsudativa, comparando com a de portadores de catarata. Métodos: Realizou-se estudo prospectivo, observacional, analítico, com corte transversal em duas populações de estudo. Foram constituídos dois grupos: grupo I (DMRI exsudativa ativa com indicação de injeção intravítrea de bevacizumab) com 16 olhos de 16 pacientes (oito do sexo masculino e oito do feminino) com média de idades de 71,3±9,9 anos; grupo II (catarata em pré-operatório para cirurgia) com 27 olhos de 27 pacientes (nove do sexo masculino e 18 do feminino) com média de idades de 67,6±7,9 anos. Os grupos foram homogêneos em relação à idade (p=0,180) e ao sexo (p=0,280). Foi realizada coleta de secreção do fundo de saco inferior da conjuntiva, através de swab, e imediatamente colocado em tubo contendo meio líquido BHI (brain heart infusion). As amostras foram processadas conforme técnicas laboratoriais padrão e realizado antibiograma de cada colônia isolada. Resultados: Houve crescimento de 17 colônias bacterianas no grupo I, com um olho não apresentando crescimento e 30 colônias no grupo II. Houve maior frequência de bactérias Gram positivas nos dois grupos: 14/17 colônias (82,3%) no grupo I e 29/30 colônias (96,7%) no grupo II, com predomínio de Staphylococcus aureus em ambos os grupos, com oito amostras (47,1%) e 17 (56,7%), respectivamente. Staphylococcus coagulase negativa foi a segunda bactéria mais identificada, com 23,5% no grupo I e 20,0% no grupo II. Nenhuma diferença de freqüência entre os grupos alcançou significância estatística. Não foi observada diferença estatisticamente significante na sensibilidade das bactérias aos antibióticos testados entre os dois grupos, entretanto houve tendência para maior resistência à oxacilina nos portadores de DMRI (p=0,081). Conclusão: Não houve diferença na distribuição das bactérias e sensibilidade aos antibióticos da microbiota conjuntival em portadores de DMRI exsudativa, comparada com a de catarata

Made available in DSpace on 2014-06-12T18:27:29Z (GMT). No. of bitstreams: 2 arquivo1004_1.pdf: 1251472 bytes, checksum: 1f6e464692ea89b8cd077af78f9fa70b (MD5) license.txt: 1748 bytes, checksum: 8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33 (MD5) Previous issue date: 2010 / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico / A injeção intravítrea representa um dos maiores desafios na terapêutica oftalmológica atual para o tratamento da degeneração macular relacionada à idade, na forma exsudativa, embora as injeções intravítreas possam levar a endoftalmite póscirurgica, onde a fonte pricipal é a microbiota conjuntival. Objetivos: descrever a microbiota conjuntival bacteriana e fúngica de portadores de degeneração macular relacionada à idade no peri-operatório com uso de injeção intravítrea de antiangiogênico em um esquema terapêutico trimestral. Métodos: foi realizado um estudo de série de casos com 35 pacientes submetidos a injeção intravítrea de antiangiogênico para o tratamento de DMRI e 30 pacientes controles sadios, na Fundação Altino Ventura-PE. O material da conjuntiva foi coletado em 4 momentos: (t0) antes da primeira aplicação de antiangiogênico; (t1) após uso tópico de 3 dias de antibiótico; (t2) antes da terceira aplicação de antiangiogênico e (t3) no retorno de 30 dias após término, para o grupo DMRI. Com relação ao grupo controle, foi feita apenas uma coleta para o islomento bacteriano e fúngico, correspondente a t0. A coleta foi através de swab no fundo de saco conjuntival inferior, e colocado em meio BHI.O processo de investigação microbiológica seguia as seguintes etapas:bacterioscopia, cultura e antibiograma. Resultados: para o grupo DMRI, o houve crescimento positivo das culturas para os momentos t0, t1, t2 e t3, cujos percentuais foram respectivamente de 91,4%; 28,6%; 74,3% e 94,3%. Para o grupo controle, foi realizada a cultura da microbiota apenas no momento t0, evidenciando-se um percentual de 93,3% de culturas positivas. Para ambos os grupos houve maior freqüência de bactérias Gram-positivas em todos momentos, prevalecendo às espécies Staphyloccocus aureus e Staphyloccocus coagulase negativo. Os fungos mais frequentemente isolados Aspergillus sp e Penicillium sp para ambos grupos.Conclusão: não houve diferença na distribuição dos micro-organismos isolados na conjuntiva dos portadores de DMRI, comparada aos pacientes controles

Submitted by Natalia Vieira (natalia.vieira@famerp.br) on 2016-05-19T19:07:09Z No. of bitstreams: 1 sabrinamayaracezario_dissert.pdf: 2283086 bytes, checksum: 130b0d9b52a17f23980c982605a0dad9 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-05-19T19:07:10Z (GMT). No. of bitstreams: 1 sabrinamayaracezario_dissert.pdf: 2283086 bytes, checksum: 130b0d9b52a17f23980c982605a0dad9 (MD5) Previous issue date: 2015-05-27 / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo - FAPESP / Background - Age-related macular degeneration (AMD) is a complex disease. The identification of risk factors may contribute to the prognosis and treatment. Objectives – Evaluate the influence of genetic variants related to lipid metabolism, angiogenesis and inflammation and its relation with clinical and lipid profile and lifestyle beyond their gene expression in patients with AMD. Casuistic and Methods – We studied 333 individuals aged ≥50 years, 108 with AMD in exudative form (G1); 45 with AMD in dry form (G2), and 180 individuals without clinical and angiographic signs of the disease (G3). The polymorphisms of apolipoprotein E (APOE-rs429358/rs7412), triphosphate binding cassette sub -family A transport -member 4 (ABCA4-rs472908), complement factor H (CFH-rs1061170) and vascular endothelial growth factor (VEGF-rs3025039/rs1570360) were analyzed by PCR/RFLP (polymerase chain reaction/restriction fragments length polymorphism), while the respective gene expression in blood by PCR/RT (reverse transcription-PCR) and serum levels of apo E, ABCR, CFH, VEGF by ELISA (enzyme linked immuno sorbent assay). Clinical and lipid profile data in addition to lifestyle were obtained from medical records and questionnaire. Level of significance was accepted for P<0.05. Results – Systemic arterial hypertension (SAH) and smoking prevailed in patients with AMD exudative form (P<0.05). Genetic polymorphisms: APOE- rs429358/rs7412 - APOE*3/3 was noted in all groups, followed by APOE*3/4, as well APOE*4 (P>0.05). ABCA4-rs472908 - Genotype A/G was more frequent in G3 (68%) versus G2 (44%; P<0.0001), while A/A in G2 (36%) versus G1 (19%; P=0.04) and G3 (14%; P=0.003). The mutant genotype (G/G) prevailed in combination (G1+G2) versus G3 (P< 0.0001), and allele G in all groups (P>0.05). CFH-rs1061170 – The wild homozygous (TT) was in evidence in G3 (58%) versus G1 (39%, P=0.003); as well the homozygous mutant (CC) in G1 (27 %) versus G3 (14%; P=0.002) and allele T in G3 (0.72) versus G1 (0.56; P=0.0002). VEGF-rs3025039 – Genotypic and allelic distribution were similar between groups (P>0.05), highlighting the CC genotype and allele C. VEGF-rs1570360 – Mutant homozygote (A/A) prevailed in G2 (21%) versus G1 (5%; P=0.002) and G3 (8%; P=0.015) as well as the wild type allele (G) G1 (0.75) and G3 (0.71) versus G2 (0.57, P=0.004, P=0.020, respectively). Gene expression – Similar values between groups for all analyzed genes (P>0.05). Serum levels (median values in ng/mL) – ApoE– Increased level in G1 (270.6) versus G2 (196.5; P<0.0001) and G3 (242.8; P=0.035), and G3 versus G2 (P=0.0002). ABCR – High levels in G1 (0.30) versus G2 (0.25; P=0.003) and G3 (0.25, P<0.0001). CFH – Increase in G1 (1198.9) versus G2 (859.8; P=0.0069), both higher than in G3 (618.3; P<0.001, P=0.001, respectively). VEGF – Similar values between groups (P>0.05). Lipid profile – G3 showed the highest level of HDLc (median=71mg /dL), compared to G2 (60mg/dL), and G1 (45mg/dL; P=0.003, P=0.029, respectively). Conclusion – Genetic variants of ABCA4, VEGF and CFH, besides SAH, smoking and increased serum levels of apo E, ABCR and CFH are associated with AMD, whereas the expression of the respective genes not differentiate AMD exsudative and dry forms, in contrast CFH (homozygous wild-type) has a protective character, as well as serum levels of HDLc. / Introdução – Degeneração macular relacionada à idade (DMRI) é uma doença complexa. A identificação de fatores de risco poderá contribuir no seu prognóstico e tratamento. Objetivos – Avaliar a influência de variantes genéticas, relacionadas com o metabolismo de lipídios, angiogênese e inflamação e sua relação com perfil clínico e lipídico e hábitos de vida, além das respectivas expressões gênicas em pacientes com DMRI. Casuística e Métodos – Foram estudados 333 indivíduos com idade ≥50 anos, sendo 108 com DMRI na forma exsudativa (G1); 45 com DMRI na forma seca (G2) e 180 indivíduos sem sinais clínicos e angiográficos da doença (G3). Os polimorfismos de apolipoproteína E (APOE-rs429358/rs7412), triphosphate binding cassette transporte sub-family A-member 4 (ABCA4-rs472908), complemento do fator H (CFH-rs1061170) e fator de crescimento endotelial vascular (VEGF-rs3025039/rs1570360) foram analisados por PCR/RFLP (polymerase chain reaction/restriction fragments lengh polymorphism), enquanto as respectivas expressões gênicas no sangue por PCR/RT (reverse transcription-PCR) e níveis séricos de apo E, ABCR, CFH, VEGF por ELISA (enzyme linked immuno sorbent assay). Dados de perfil clínico e lipídico, além de hábitos de vida, foram obtidos em prontuário médico e questionário. Admitiu-se nível de significância para P<0,05. Resultados – Hipertensão arterial sistêmica (HAS) e tabagismo prevaleceram em pacientes com DMRI exsudativa (P<0,05). Polimorfismos genéticos: APOE-rs429358/rs7412–APOE*3/3 destacou-se em todos os grupos, seguido de APOE*3/4, assim como o alelo APOE*4 (P>0,05). ABCA4-rs472908–O genótipo A/G foi mais frequente em G3 (68%) versus G2 (44%; P<0,0001), enquanto A/A em G2 (36%) versus G1 (19%; P=0,043) e G3 (14%; P=0,003). O genótipo mutante (G/G) prevaleceu na combinação (G1+G2) versus G3 (P<0,0001), e o alelo G em todos os grupos (P>0,05). CFH-rs1061170–O homozigoto selvagem (TT) destacou-se em G3 (58%) versus G1 (39%, P=0,003); já o homozigoto mutante (CC) em G1 (27%) versus G3 (14%; P=0,002), e o alelo T em G3 (0,72) versus G1 (0,56; P=0,0002). VEGF-rs3025039–Distribuição genotípica e alélica semelhante entre os grupos (P>0,05), destacando-se o genótipo CC e alelo C. VEGF-rs1570360–Homozigoto mutante (A/A) prevaleceu em G2 (21%) versus G1 (5%; P=0,002) e G3 (8%; P=0,015), assim como o alelo selvagem (G) em G1 (0,75) e G3 (0,71) versus G2 (0,57; P=0,004; P=0,020, respectivamente). Expressão gênica–Valores semelhantes entre os grupos para todos os genes analisados (P>0,05). Níveis séricos (valores de mediana em ng/mL)–ApoE–Aumento em G1 (270,6) versus G2 (196,5; P<0,0001) e G3 (242,8; P=0,035), e G3 versus G2 (P=0,0002). ABCR–Níveis elevados em G1 (0,30) versus G2 (0,25; P=0,003) e G3 (0,25; P<0,0001). CFH–Aumento em G1 (1.198,9) versus G2 (859,8; P=0,0069), ambos com acréscimo em relação a G3 (618,3; P<0,001; P=0,001, respectivamente). VEGF–Valores semelhantes entre os grupos (P>0,05). Perfil lipídico–G3 mostrou valor mais elevado de HDLc (mediana=71mg/dL), comparado a G2 (60mg/dL) e G1 (45mg/dL) (P=0,003; P=0,029, respectivamente). Conclusão – Variantes genéticas de ABCA4, VEGF e CFH, além de HAS, tabagismo e nível sérico elevado de apoE, ABCR e CFH associam-se a DMRI, enquanto a expressão dos referidos genes não diferencia DMRI exsudativa e seca, em contrapartida CFH (homozigoto selvagem) tem caráter protetor, assim como nível sérico de HDLc.

O comprometimento macular na retinopatia diabética pode ocorrer devido à isquemia macular, à hemorragias maculares intrarretinianas e pré-retinianas, ao descolamento macular tracional, à neovascularização, à heterotropia macular e, mais freqüentemente, ao edema macular. Cerca de 10% da população total de pacientes com diabetes, e 25% destes com mais de 20 anos de evolução da doença, apresentam edema macular, constituindo a principal causa de baixa visual neste grupo de pacientes1,2,3. Em diabéticos do tipo 1, o edema macular é visto raramente antes dos primeiros nove anos após o diagnóstico4; ao contrário, em diabéticos do tipo 2, o início aparece mais cedo. A detecção e o tratamento precoce do edema macular podem resultar na melhora ou na estabilização da visão. Novas teorias sobre a fisiopatologia do edema macular surgiram nos últimos anos, e novas terapias como a Triancinolona sub-tenoneana ou intravítrea, os anti-VEGFs e implantes intravítreos de liberação lenta de dexametasona foram testadas a partir destes conhecimentos. Este artigo propõe a revisão desses conceitos e em especial, dos novos aspectos terapêuticos. / The macular comitment on diabetic retinopathy can occur due to macular isquemy, intraretinal or pré-retinal hemorragies, traccional detachment, neovacularization, macular heterotropy and more frequently on macular edema. About 10% of the diabetic population and 25% of those with more than 20 years of illness, present macular edema, constituting the main cause of visual loss in this group of patients1,2,3. In diabetic type 1 patients, macular edema is rarelly seen before 9 years after the diagnostic4. On the other hand, in diabetic type 2 patients, the illness beginning appears earlier and frequently results in a more important loss of the visual acuity. The deteccion and the precocious treatment of macular edema can result in a visual improvement or stabilization. New theories about the fisiopathology of macular edema had appeared in the last years and new therapies such as sub-tenonean or intravítreal Triamcinolone, the anti-VEGFs and slow liberation intravitreal implants of dexametazone were tested since this knowledge. This article considers the revision of these concepts and therapies.

O comprometimento macular na retinopatia diabética pode ocorrer devido à isquemia macular, à hemorragias maculares intrarretinianas e pré-retinianas, ao descolamento macular tracional, à neovascularização, à heterotropia macular e, mais freqüentemente, ao edema macular. Cerca de 10% da população total de pacientes com diabetes, e 25% destes com mais de 20 anos de evolução da doença, apresentam edema macular, constituindo a principal causa de baixa visual neste grupo de pacientes1,2,3. Em diabéticos do tipo 1, o edema macular é visto raramente antes dos primeiros nove anos após o diagnóstico4; ao contrário, em diabéticos do tipo 2, o início aparece mais cedo. A detecção e o tratamento precoce do edema macular podem resultar na melhora ou na estabilização da visão. Novas teorias sobre a fisiopatologia do edema macular surgiram nos últimos anos, e novas terapias como a Triancinolona sub-tenoneana ou intravítrea, os anti-VEGFs e implantes intravítreos de liberação lenta de dexametasona foram testadas a partir destes conhecimentos. Este artigo propõe a revisão desses conceitos e em especial, dos novos aspectos terapêuticos. / The macular comitment on diabetic retinopathy can occur due to macular isquemy, intraretinal or pré-retinal hemorragies, traccional detachment, neovacularization, macular heterotropy and more frequently on macular edema. About 10% of the diabetic population and 25% of those with more than 20 years of illness, present macular edema, constituting the main cause of visual loss in this group of patients1,2,3. In diabetic type 1 patients, macular edema is rarelly seen before 9 years after the diagnostic4. On the other hand, in diabetic type 2 patients, the illness beginning appears earlier and frequently results in a more important loss of the visual acuity. The deteccion and the precocious treatment of macular edema can result in a visual improvement or stabilization. New theories about the fisiopathology of macular edema had appeared in the last years and new therapies such as sub-tenonean or intravítreal Triamcinolone, the anti-VEGFs and slow liberation intravitreal implants of dexametazone were tested since this knowledge. This article considers the revision of these concepts and therapies.

O comprometimento macular na retinopatia diabética pode ocorrer devido à isquemia macular, à hemorragias maculares intrarretinianas e pré-retinianas, ao descolamento macular tracional, à neovascularização, à heterotropia macular e, mais freqüentemente, ao edema macular. Cerca de 10% da população total de pacientes com diabetes, e 25% destes com mais de 20 anos de evolução da doença, apresentam edema macular, constituindo a principal causa de baixa visual neste grupo de pacientes1,2,3. Em diabéticos do tipo 1, o edema macular é visto raramente antes dos primeiros nove anos após o diagnóstico4; ao contrário, em diabéticos do tipo 2, o início aparece mais cedo. A detecção e o tratamento precoce do edema macular podem resultar na melhora ou na estabilização da visão. Novas teorias sobre a fisiopatologia do edema macular surgiram nos últimos anos, e novas terapias como a Triancinolona sub-tenoneana ou intravítrea, os anti-VEGFs e implantes intravítreos de liberação lenta de dexametasona foram testadas a partir destes conhecimentos. Este artigo propõe a revisão desses conceitos e em especial, dos novos aspectos terapêuticos. / The macular comitment on diabetic retinopathy can occur due to macular isquemy, intraretinal or pré-retinal hemorragies, traccional detachment, neovacularization, macular heterotropy and more frequently on macular edema. About 10% of the diabetic population and 25% of those with more than 20 years of illness, present macular edema, constituting the main cause of visual loss in this group of patients1,2,3. In diabetic type 1 patients, macular edema is rarelly seen before 9 years after the diagnostic4. On the other hand, in diabetic type 2 patients, the illness beginning appears earlier and frequently results in a more important loss of the visual acuity. The deteccion and the precocious treatment of macular edema can result in a visual improvement or stabilization. New theories about the fisiopathology of macular edema had appeared in the last years and new therapies such as sub-tenonean or intravítreal Triamcinolone, the anti-VEGFs and slow liberation intravitreal implants of dexametazone were tested since this knowledge. This article considers the revision of these concepts and therapies.

Orientador: Mônica Barbosa de Melo / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciências Médicas / Made available in DSpace on 2018-08-28T01:54:14Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Hirata_FabioEndo_M.pdf: 1885791 bytes, checksum: ccde99235ea9bbbcda8608e4c5aaf996 (MD5) Previous issue date: 2015 / Resumo: Introdução: A degeneração macular relacionada à idade (DMRI) é uma doença crônica degenerativa que afeta a área macular da retina causando diminuição da visão central. É a causa mais comum de perda visual irreversível nos países desenvolvidos. A DMRI é caracterizada pela presença de drusas, anormalidades do epitélio pigmentar da retina (EPR), atrofia geográfica, descolamento do EPR, neovascularização de coróide e cicatriz disciforme. Sua etiologia permanece pouco esclarecida, entretanto fatores genéticos associados a fatores ambientais possuem papel na etiologia e na progressão da doença. Dentre as variações gênicas, uma associação entre o polimorfismo Ala69Ser do gene LOC387715/ARMS2 ( rs10490924 C/T ) e o desenvolvimento da DMRI tem sido relatada em diferentes populações. Objetivo: O objetivo deste estudo foi avaliar se o polimorfismo rs10490924 está associado com a DMRI em uma amostra da população brasileira. Métodos: Cento e vinte e seis pacientes, sem parentesco, com DMRI (idade média de 74,17 ± 7,64) foram comparados com 86 controles saudáveis (idade média 71,82 ± 7,12). Os sujeitos do estudo foram classificados de acordo com o tipo de DMRI em DMRI seca e DMRI exsudativa. O polimorfismo LOC387715/ARMS2 rs10490924 foi avaliado através da reação em cadeia da polimerase e sequenciamento direto. Resultados: A frequência do alelo T foi significativamente maior em pacientes com DMRI do que nos controles (39,6% em comparação com 20,3%, p = 0,00002). O odds ratio (OR) para DMRI foi de 2,05 (IC95 % 1,09-3,89 ) para os heterozigotos (TG) e 8,45 ( IC95 % 2,21-37,82 ) para homozigotos (TT). Conclusões: Os resultados sugerem que há uma contribuição do SNP rs10490924 do gene LOC387715/ARMS2 para susceptibilidade à DMRI nesta amostra da população brasileira / Abstract: Introduction: Age-related macular degeneration (AMD) is a chronic degenerative disease that affects the macular area causing decreased central vision. It is the most common cause of irreversible vision loss in developed countries. It is characterized by the presence of drusen, abnormalities of the retinal pigment epithelium (RPE), geographic atrophy, RPE detachment, choroidal neovascularization, and disciform scar. The etiology of AMD remains poorly understood, but genetic factors associated with environmental factors have a role in the etiology and progression of the disease. Among the analyzed genetic variations, an association between LOC387715/ARMS2 (rs10490924) gene polymorphism and AMD has been reported in different populations. Purpose: The aim of this study was to evaluate whether this polymorphism is associated with AMD in a Brazilian cohort. Methods: A hundred and twenty six unrelated AMD patients (mean age 74.17 ± 7.64) were compared with 86 healthy controls (mean age 71.82 ± 7.12). Study subjects were classified according to the type of AMD in dry and wet AMD. The LOC387715/ARMS2 rs10490924 polymorphism was evaluated through polymerase chain reaction and direct sequencing. Results: The T allele frequency was significantly higher in AMD patients than controls (39.6% compared to 20.3%, p = 0,00002). The odds ratio (OR) for AMD was 2.05 (CI95% 1.09-3.89) for heterozygotes (TG) and 8.45 (CI95% 2.21-37.82) for homozygotes (TT). Conclusions: These results suggest that there is a contribution of the rs10490924 SNP of the LOC387715/ARMS2 gene to AMD susceptibility in this sample of Brazilian population / Mestrado / Oftalmologia / Mestre em Ciências Médicas

Made available in DSpace on 2015-07-22T20:49:32Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2010-04-28 / O objetivo deste trabalho é avaliar as anormalidades da esclera, coroide e retina de coelhos induzidas pela dieta hipercolesterolêmica, além da possibilidade de prevenção dessas anormalidades com administração sistêmica de rosiglitazona. Para isto, 54 coelhos new zealand foram distribuídos em quatro grupos: grupo-controle (GC) recebeu dieta normal; grupo 1 recebeu dieta hipercolesterolêmica; grupo 2 recebeu dieta hipercolesterolêmica associada à administração diária de 3 mg de rosiglitazona a partir do 14º dia do início do experimento; e grupo 3 recebeu dieta hipercolesterolêmica associada à administração diária de 3 mg de rosiglitazona desde o início do experimento. Os coelhos foram pesados e submetidos à dosagem sérica de colesterol total, triglicerídeos, high density lipoprotein (HDL) colesterol e glicemia de jejum no início do experimento, no 14º dia e no momento da eutanásia (42º dia). A esclera e coroide foram submetidas à análise histológica e histomorfométrica. A retina foi submetida à análise imuno-histoquímica com o anticorpo monoclonal anticalretinina (CR) e anticorpo anti-glial fibrillary acidic protein (GFAP). Quando positivo para o marcador anticalretinina, duas análises quantitativas foram realizadas. Na primeira, foram contadas todas as células ganglionares imunorreativas. Na segunda, todas as células e elementos celulares imunorreativos foram avaliados pelo exame de morfometria de cores. Os dados foram analisados pelo teste nãoparamétrico de Kruskal-Wallis e teste de Shapiro-Wilks-Testand. Valores abaixo de 0,05 foram considerados estatisticamente significantes. Os resultados referentes ao peso demonstraram significativo aumento nos grupos 1 e 3 em relação ao GC no 14º dia (p<0,009), enquanto no 42º dia os grupos 1, 2 e 3 apresentaram representativamente mais peso que o GC (p<0,023). Quanto às variáveis laboratoriais, destacaram-se o aumento significativo da glicose e colesterol total de G1 em relação ao controle (p<0,001), assim como o acentuado aumento da HDL no G3 em relação aos demais grupos (p<0,001), no 14º dia. A HDL manteve-se expressivamente elevada no G3 em relação aos demais grupos no momento da eutanásia (p<0,001). À análise histomorfométrica da esclera e coroide obteve-se normalidade do GC. Por outro lado, o G1 mostrou marcante aumento da espessura da esclera e coroide em relação ao GC (p=0,008), enquanto que no G3 houve espessamento de esclera e coroide menor que no G1 (p=0,048). Elevado número de histiócitos foi observado na parede escleral do grupo submetido à dieta hipercolesterolêmica (G1), seguido de forma decrescente por G2, G3 e GC. A análise imuno-histoquímica da retina com o anticorpo monoclonal anticalretinina ressaltou número mais alto de células ganglionares imunorreativas no G1 que no G3 (p=0,002). O exame de morfometria de cores revelou significativa imunorreatividade das células e elementos celulares do G1 em relação aos outros grupos (p<0,001). Nesta análise evidenciou-se também acentuada imunorreatividade das células e elementos celulares de G2 e G3 em relação ao GC (p≤0,002). GFAP foi negativo em todos os grupos. Neste modelo, os achados permitem concluir que a hipercolesterolemia provoca anormalidades precoces histomorfométricas e imuno-histoquímicas do complexo esclerocoriorretiniano; e a ativação dos receptores do PPAR gama-ocular, a partir da dieta oral de rosiglitazona, foi efetiva em atenuar tais anormalidades nessas estruturas. / The purpose of this study is to evaluate scleral, choroid and retinal abnormalities in rabbits induced by a hypercholesterolemic diet and the prevention of these abnormalities after oral administration of rosiglitazone in rabbits. Fifty-four new zealand rabbits were divided into four groups: the control group (CG) was fed a normal diet; group 1 G1), a hypercholesterolemic diet; group 2 (G2) a hypercholesterolemic diet associated with daily administration of 3 mg of rosiglitazone from day 14 after the beginning of the diet; and group 3 G3), a hypercholesterolemic diet associated with daily administration of 3 mg of rosiglitazone since the beginning of the experiment. The rabbits were weighed and underwent the following examinations: seric dosages of total cholesterol, triglycerides, cholesterol HDL, and fasting glycemia at the beginning of the experiment, on the 14th day and on the 42nd, the euthanasia day. The sclera and choroid underwent histologic and histomorphometric analyses and the retina underwent immunohistochemical analysis with anti-calretinin (CR) and anti-glial fibrillary acidic protein (GFAP) antibody. When positive for the anti-calretinin marker, two quantitative analyses were performed. In the first analysis, all immunoreactive ganglion cells were counted. In the second analysis, all immunoreactive cells and cell elements were studied with the color morphometry method. The data were evaluated using the nonparametric Kruskal-Wallis and the Shapiro – Wilk tests. Values of p<0.05 were considered statistically significant. The results obtained showed a significant weight increase in Groups 1 and 3 in relation to CG on Day 14 (p<0.009). Additionally, a significant weight increase was observed in G1, G2 and G3 in relation to CG on Day 42 (p<0.023). The lab results showed a significant increase in glucose and total cholesterol in G1 in relation to CG (p<0.001) on Day 14, as well as a significant HDL increase in G3, when compared with the other groups (p<0.001) on Day 14. HDL in G3 was significantly high when compared to the other groups, on the euthanasia day (p<0.001). The results obtained regarding weight showed a significant increase in Groups 1, 2 and 3 in relation to CG on Day 14 (p<0.01) and Day 42 (p<0.02). The lab results showed a significant increase in glucose and total cholesterol in Groups 1, 2 and 3 in relation to CG (p<0.01) on Day 14, as well as a significant increase in HDL in G3 when compared with the other groups, on euthanasia day (p<0.01). The histomorphometric analysis of CG sclera and choroid presented normal results. Conversely, G1 showed a significant increase in sclera and choroid thickness in relation to CG (p= 0,008), whereas G3 showed thickness lower than in G1 (p=0,048). A larger number of histiocytes were observed on the scleral wall of the group that was fed the hypercholesterolemic diet (G1), followed, in a descending order, by groups 2 and 3, and the control group. The immunohistochemical analysis of the retina with the anti-calretinin monoclonal antibody showed that G1 presented a larger number of immunoreactive ganglion cells than G3 (p = 0.002). The color morphometry showed significant immunoreactivity of G1 cells and cell elements when compared with the other groups (p<0.001). A significant immunoreactivity of G2 and G3 cells and cell elements in relation to CG was also observed (p<0.002). GFAP results were negative in all groups. The findings of this proposed study model suggest that hypercholesterolemia induces early histomorphometric and immunohistochemical abnormalities in the sclerochorioretinal complex and that the activation of PPAR gamma in ocular cells attenuated these abnormalities with the administration of the oral rosiglitazone diet. / TEDE / BV UNIFESP: Teses e dissertações

Tese (doutorado)—Universidade de Brasília, Faculdade de Ciências da Saúde, 2007. / Submitted by Luis Felipe Souza (luis_felas@globo.com) on 2008-12-01T16:52:13Z No. of bitstreams: 1 Tese_2007_ DavidCruvinelIsaac.pdf: 3988354 bytes, checksum: 32d0b93c9f81c88bba1d50f26c0bf064 (MD5) / Approved for entry into archive by Georgia Fernandes(georgia@bce.unb.br) on 2009-02-11T17:21:20Z (GMT) No. of bitstreams: 1 Tese_2007_ DavidCruvinelIsaac.pdf: 3988354 bytes, checksum: 32d0b93c9f81c88bba1d50f26c0bf064 (MD5) / Made available in DSpace on 2009-02-11T17:21:20Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Tese_2007_ DavidCruvinelIsaac.pdf: 3988354 bytes, checksum: 32d0b93c9f81c88bba1d50f26c0bf064 (MD5) / A Degeneração Macular Relacionada à Idade (DMRI) constitui a principal causa de cegueira legal no mundo ocidental, em faixas etárias superiores a 50 anos. A DMRI é classificada em forma não-neovascular e forma neovascular. Esta última caracteriza-se pela presença da neovascularização de coróide (NVC), sendo responsável por 80% dos casos de cegueira legal atribuídos à doença. A detecção precoce da NVC se faz necessária, uma vez que os tratamentos disponíveis para a doença apresentam melhores resultados quando empregados precocemente. Este estudo tem por objetivo comparar a utilização do Perímetro de Hiperacuidade Preferencial (Preview PHP; Carl Zeiss Meditec, Dublin, Califórnia - EUA) com a tela de Amsler original, ambos métodos não invasivos, na detecção de NVC em pacientes com idade superior a 50 anos, sem doença retiniana ou portadores de diferentes estágios de degeneração macular relacionada à idade (DMRI). Os pacientes incluídos no estudo foram classificados em grupos baseados na gravidade da DMRI e foram submetidos aos testes do PHP e da tela de Amsler. Para comparação entre os métodos foram determinadas asensibilidade, especificidade e acurácia do PHP e da tela de Amsler. Convencionou-se como “Alta”: sensibilidade, especificidade e/ou acurácia, a observação de valores maiores ou iguais a 80%, todos com intervalo de confiança de 95%. Determinou-se como “Baixa”: sensibilidade, especificidade e/ou acurácia, a observação de resultados menores que 80%. Sessenta e cinco pacientes (65 olhos) foram analisados estatisticamente. A sensibilidade de detecção de NVC foi de 70% pela tela de Amsler (95% intervalo de confiança [IC], 58,9%-81,1%) e 90% pelo PHP (95% IC, 82,7%-97,3%), enquanto a especificidade da tela de Amsler foi de 85,5% (95% IC, 76,9%-94,1%) e do PHP 81,8% (95% IC, 74,4-91,2%). A acurácia da tela de Amsler foi de 77,7% (95% IC, 60,1%-95,4%) e do PHP de 85,9% (95% IC, 73,5%-98,4). O PHP apresentou maior sensibilidade que a tela de Amsler (estatisticamente significante). Não houve diferença estatística na especificidade e acurácia entre os métodos. O PHP apresenta maior sensibilidade que a tela de Amsler original na detecção de NVC entre pacientes com idade superior a 50 anos e é um método mais eficaz no monitoramento de pacientes com DMRI. O PHP apresentou alta sensibilidade, alta especificidade e alta acurácia no diagnóstico de NVC secundária à DMRI. A tela de Amsler apresentou alta especificidade e baixa sensibilidade e acurácia no diagnóstico de NVC no grupo de pacientes com idade maior que 50 anos, com diferentes estágios de gravidade da DMRI. _______________________________________________________________________________________ ABSTRACT / Age-related macular degeneration (AMD) is the major cause of blindness in the Western world, among people with 50 years of age or older. AMD is classified in nonexudative AMD and neovascular AMD. The neovascular mainstay is the presence of Choroidal neovascularization (CNV), and it is responsible for 80% of the cases of legal blindness secondary to the disease. The need for early detection is supported by studies that shown that current treatments are associated with better results when the diagnose is precocius. This study has the purpose of compare the use of Preferential Hyperacuity Perimeter (Preview PHP; Carl Zeiss Meditec, Dublin, CA, USA) with the original Amsler grid, both non-invasive methods, in the detection of choroidal neovascularization (CNV) in patients older than 50 years, without retinal disease or different stages of age-related macular degeneration (AMD). Included patients were classified into groups, based on the severity of the AMD and underwent PHP and Amsler grid testing. “High” sensitivity, specificity and/or accuracy of a method were defined as the observation of a value of equal or higher than 80%, with confidence interval of 95%. “Low” sensitivity, specificity and/or accuracy was defined as the observation of a value of less than 80%. Sixty-five patients (65 eyes) were analyzed statistically. The sensitivity of detection of CNV was 70% by the Amsler grid (95% confidence interval [CI], 58.9%-81.1%) and 90% by the PHP (95% CI, 82.7%-97.3%) and the specificity of the Amsler grid was 85.5% (95% CI, 76.9%-94.1%) and the PHP 81.8% (95% CI, 74.4-91.2%). The accuracy of Amsler grid was 77.7% (95% CI, 60.1%-95.4%) and the accuracy of PHP was 85.9% (95% CI, 73.5%-98.4). The PHPhas shown higher sensitivity than the Amsler grid (statistically significant). There was no statistical difference in the specificity and accuracy between both methods. The PHP has greater sensitivity than the Amsler grid in the detection of CNV among patients over 50 years of age and is a more efficient method for monitoring patients with AMD. The PHP has shown to have high sensitivity, high specificity and high accuracy in the diagnosis of CNV. The Amsler grid has shown high specificity and low sensitivity and accuracy.