Foi realizado um estudo de pré-formulação, empregando adjuvantes escolhidos por preencherem pré-requisitos tecnológicos e econômicos, sendo determinada a formulação mais viável tecnologicamente. A formulação proposta foi avaliada quanto a estabilidade do princípio ativo e parâmetros de qualidade da forma farmacêutica frente a diversos fatores externos. Vários métodos de doseamento foram estudados quanto a viabilidade de aplicação na quantificação da digoxina isolada e contida nas diversas fases do processamento assim como na verificação da qualidade do produto final. Para a determinação da cedência do princípio ativo foram realizados testes "in vitro". Estudos de avaliação do perfil farmacêutico do comprimido proposto foram feitos através da comparação dos parâmetros de qualidade deste com os existentes no mercado nacional.

Foi realizado um estudo de pré-formulação, empregando adjuvantes escolhidos por preencherem pré-requisitos tecnológicos e econômicos, sendo determinada a formulação mais viável tecnologicamente. A formulação proposta foi avaliada quanto a estabilidade do princípio ativo e parâmetros de qualidade da forma farmacêutica frente a diversos fatores externos. Vários métodos de doseamento foram estudados quanto a viabilidade de aplicação na quantificação da digoxina isolada e contida nas diversas fases do processamento assim como na verificação da qualidade do produto final. Para a determinação da cedência do princípio ativo foram realizados testes "in vitro". Estudos de avaliação do perfil farmacêutico do comprimido proposto foram feitos através da comparação dos parâmetros de qualidade deste com os existentes no mercado nacional.

Foi realizado um estudo de pré-formulação, empregando adjuvantes escolhidos por preencherem pré-requisitos tecnológicos e econômicos, sendo determinada a formulação mais viável tecnologicamente. A formulação proposta foi avaliada quanto a estabilidade do princípio ativo e parâmetros de qualidade da forma farmacêutica frente a diversos fatores externos. Vários métodos de doseamento foram estudados quanto a viabilidade de aplicação na quantificação da digoxina isolada e contida nas diversas fases do processamento assim como na verificação da qualidade do produto final. Para a determinação da cedência do princípio ativo foram realizados testes "in vitro". Estudos de avaliação do perfil farmacêutico do comprimido proposto foram feitos através da comparação dos parâmetros de qualidade deste com os existentes no mercado nacional.

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Dissertação (mestrado)-Universidade Federal do Parana / Resumo: O objetivo deste trabalho ê aquilatar a eficiência do escore de NICHOLSON & DOBBS, método de auxílio ã prescrição da digoxina proposto em 1978. Em 58 pacientes externos ou internados, previamente digitalizados, são praticadas dosagens da digoxina sérica antes (1? fase) e após (2$ fase) um período de tratamento de 3 semanas sob o esquema posolõgico ditado pelo escore. Além da digoxina sérica, são levantados diversos outros parâmetros e variáveis de natureza clínicolaboratorial. O escore revela-se eficiente pela capacidade de assegurar, em 69% dos pacientes, concentrações séricas médias de equilíbrio em digoxina (CSMED) consideradas "terapêuticas" (1,28-2,56 nmol/1), além do que, seu emprego se acompanha de redução significativa da prevalência de intoxicação digítálica e de melhora apreciável do grau de insuficiência cardíaca. Tais benefícios são atribuídos â adequação das doses de digoxina ao perfil clínico-laboratorial de cada paciente. Os dados coletados na 2$ fase são processados através de análises de regressão linear simples e múltipla e de comparações entre médias, com a finalidade de se evidenciar as variáveis de maior importância para a explicação da variância encontrada nos níveis séricos de digoxina. As características. "doença pulmonar obstrutiva crônica", "creatinina sérica", "hidróxido de alumínio", "diurético", "ritmo cardíaco", "potássio sérico", "espironolactona" e "dose diária em jug/kg" apresentam melhor nível de correlação com as CSMED do que as outras variáveis estudadas, razão por que são objeto de comentários, e são cotejadas com os achados da literatura a seu respeito. Embora pouco elevado o coeficiente de determinação (20,9%) fornecido pela combinação linear das 6 variáveis (dose diária em pg/kg, sexo, diurético, ritmo cardíaco, creatinina e potássio séricos) consideradas na análise de regressão linear múltipla, deve ser salientado o fato de a variância global dos níveis séricos de digoxina na > 2$ fase ser, em si, bastante baixa (0,352 n m o l 2 / l 2 ) o que, além de constituir argumento suplementar em favor da eficiência do escore, deixa a margem de variância ainda inexplicada reduzida ã níveis mínimos (0,278 nmol2 / l 2 ). Conclui-se pela validade do escore de NICHOLSON & DOBBS como método de auxílio à prescrição da digoxina, pela necessidade de se dispor de digoxina sólida em apresentações comerciais mícrodosadas sem as quais torna-se aleatório qualquer esquema de digitaloterapia, pelo papel primordial da função renal na farmacocinética da digoxina e pela aparente superioridade da prescrição racional sobre a prescrição intuitiva.

Orientador : Carol H. Collins / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Quimica / Made available in DSpace on 2018-07-19T12:02:21Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Mesquita_ReginaCleliadaCosta_M.pdf: 7376205 bytes, checksum: 64733609cb260a0a2d7b48e3dbc2b0d2 (MD5) Previous issue date: 1994 / Mestrado

A digoxina é um medicamento usado para tratar distúrbios cardíacos, com janela terapêutica muito estreita. Para combater seu efeito tóxico, fragmentos Fab do anticorpo policlonal anti-digoxina estão disponíveis comercialmente. Nosso objetivo foi a obtenção de variantes de fragmentos Fab do anticorpo monoclonal anti-digoxina usando a tecnologia phage display, que permite gerar fragmentos de anticorpos de alta afinidade e especificidade. Uma biblioteca combinatória de fragmentos Fab anti-digoxina foi construída no vetor pComb3X a partir do RNA total do hibridoma anti-digoxina. Seis clones foram isolados, todos com sequência idêntica na cadeia pesada. A cadeia leve apresentou 2 clones idênticos, um pseudogene e um clone com um aminoácido distinto no CDR2. Quatro clones apresentando variações na sequência do framework1 da cadeia leve foram expressos como fragmentos Fab solúveis. Todos apresentaram ligação à digoxina-BSA por ELISA e Western blotting. A ligação específica do anticorpo também foi confirmada pelo BIAcore, que permitiu ranqueamento entre os clones. / Digoxin is a pharmaceutical used in the control of cardiac dysfunction. Its therapeutic window is very narrow. To counteract the toxic effect, polyclonal anti-digoxin Fab fragments are commercially available. Our goal was to obtain variants of monoclonal anti-digoxin Fab fragments by phage display technology, which allows the generation of high affinity and specificity antibody fragments. Anti-digoxin Fab fragments combinatorial library was constructed into pComb3X vector from total RNA of anti-digoxin hybridoma. Six clones were isolated and the heavy chain presented the same sequence. For the light chain, 2 clones were identical, one was a pseudogene and other one presented a distinct amino acid in the CDR2. Four clones presenting variations in the framework 1 were induced to express soluble Fab fragments, all positive for anti-digoxin binding in ELISA assays and Western blotting. The specific binding of the antibody was further confirmed by BIAcore, which allowed ranking of the clones.

Made available in DSpace on 2014-07-29T15:29:05Z (GMT). No. of bitstreams: 1 dissertacao isabel cristina.pdf: 549593 bytes, checksum: ff591d0e143ca66263716f60188e9801 (MD5) Previous issue date: 2008-10-27 / It was investigated the clinical, lab and plasma digoxin concentration profiles in 15 cardiac heart failure (CHF) outpatients of the Cardiac Heart Service of the Goias Federal University Clinical Hospital. It was aimed to know plasma digoxin concentration profile in 15 cardiac heart failure (CHF) outpatients by two analytical methods, taking account clinical, laboratorial, habits, anthropometric data and drug usage. Digoxin dosage was developed by LC/MS/MS and immunoassay methods; questionnaire and consults handbooks were performed. Results and Conclusions: 87% of the patients who over 46 years of age (33% above 61), the masculine majority; the IC of Chagas disease origin presented greater occurrence, followed of the hipertensive and idiopatic (59%); IC functional classroom II (53.33%); hypertension and diabetes had been distinguished as co-morbidities (26.67% and 20%); tobaccoism, overweight and obesity degree I had presented low occurrence. No patients presented relevant clinical data suggestive of digitalis intoxication. No observed changes in biochemical and hematological exams. The ejection fractions were good by means 41.7 ± 9%. Some drugs with interaction potential had been associated to the treatment, apparently without alterations. Statistical significative difference between both methods was observed (P < 0.05, ANOVA, Tukey Test). In the immunoassay method, all the patients were inside of the therapeutical range (0, 5-2, 0 ng/mL), whereas for the LC-MS/MS method, 8 patients they would be in subtherapeutical concentrations. However, no patient presented signals or symptoms of poisoning or inefficacy of the digoxin, demonstrating biological variability. The two methods are useful, since that it has a correlation with the clinical and laboratorial state of the patients. / Investigou-se o perfil clínico, laboratorial e as concentrações de digoxina plasmática em 15 pacientes com insuficiência cardíaca (IC) atendidos no Ambulatório de Insuficiência Cardíaca do HC-UFG. Objetivou-se estudar o perfil de concentrações plasmáticas de digoxina em pacientes com IC, utilizando dois métodos analíticos, e descrever a digoxinemia considerando os dados clínicos, laboratoriais, hábitos, IMC e consumo de medicamentos. A metodologia utilizada consistiu de cromatografia líquida de alta eficiência acoplada a espectrometria de massas (LC/MS/MS) e Imunoensaio, aplicação de questionário e consulta a prontuários. Como resultados, observou-se: 87% dos pacientes maiores que 46 anos de idade (33% acima de 61), a maioria masculina, a IC de origem chagásica apresentou maior ocorrência, seguida da hipertensiva e idiopática (59%); IC classe funcional II (53,33%); hipertensão e diabetes destacaram-se como co-morbidades (26,67% e 20%); tabagismo, sobrepeso e obesidade grau I apresentaram baixa ocorrência. Nenhum dos pacientes apresentou dados clínicos relevantes sugestivos de intoxicação digitálica. Não houve alterações em exames bioquímicos e hematológicos. A fração de ejeção média foi 41,7 ± 9%, portanto nenhum paciente apresentou FE como preditor de mau prognóstico. Vários fármacos com potencial de interação estiveram associados ao tratamento, aparentemente sem alterações. Houve diferença significativa (P < 0,05, ANOVA, Teste de Tukey) entre os métodos analíticos. No método de imunoensaio, todos os pacientes estavam dentro da faixa terapêutica (0,5-2,0 ng/mL), enquanto que pelo método LC-MS/MS, 8 pacientes estariam em sub-dosagens. Entretanto, nenhum paciente apresentou sinais ou sintomas de intoxicação ou de ineficácia da digoxina, demonstrando variabilidade biológica. Os dois métodos são úteis, desde que haja uma correlação com o estado clínico e laboratorial dos pacientes.

A digoxina é um medicamento usado para tratar distúrbios cardíacos, com janela terapêutica muito estreita. Para combater seu efeito tóxico, fragmentos Fab do anticorpo policlonal anti-digoxina estão disponíveis comercialmente. Nosso objetivo foi a obtenção de variantes de fragmentos Fab do anticorpo monoclonal anti-digoxina usando a tecnologia phage display, que permite gerar fragmentos de anticorpos de alta afinidade e especificidade. Uma biblioteca combinatória de fragmentos Fab anti-digoxina foi construída no vetor pComb3X a partir do RNA total do hibridoma anti-digoxina. Seis clones foram isolados, todos com sequência idêntica na cadeia pesada. A cadeia leve apresentou 2 clones idênticos, um pseudogene e um clone com um aminoácido distinto no CDR2. Quatro clones apresentando variações na sequência do framework1 da cadeia leve foram expressos como fragmentos Fab solúveis. Todos apresentaram ligação à digoxina-BSA por ELISA e Western blotting. A ligação específica do anticorpo também foi confirmada pelo BIAcore, que permitiu ranqueamento entre os clones. / Digoxin is a pharmaceutical used in the control of cardiac dysfunction. Its therapeutic window is very narrow. To counteract the toxic effect, polyclonal anti-digoxin Fab fragments are commercially available. Our goal was to obtain variants of monoclonal anti-digoxin Fab fragments by phage display technology, which allows the generation of high affinity and specificity antibody fragments. Anti-digoxin Fab fragments combinatorial library was constructed into pComb3X vector from total RNA of anti-digoxin hybridoma. Six clones were isolated and the heavy chain presented the same sequence. For the light chain, 2 clones were identical, one was a pseudogene and other one presented a distinct amino acid in the CDR2. Four clones presenting variations in the framework 1 were induced to express soluble Fab fragments, all positive for anti-digoxin binding in ELISA assays and Western blotting. The specific binding of the antibody was further confirmed by BIAcore, which allowed ranking of the clones.

A digoxina é um dos medicamentos indicados para o tratamento de falência cardíaca. Possui janela terapêutica estreita, sendo responsável por casos de intoxicação. O único antídoto disponível para a desintoxicação é o anticorpo policlonal DigiFab®, no formato Fab. O seu uso é eficaz, porém de custo elevado. Clones bacterianos produtores de fragmento Fab monoclonal anti-digoxina foram obtidos previamente pelo nosso grupo, pela técnica de phage display. Neste trabalho as variantes Fab dos 4 clones foram expressas em E.coli para estabelecer o método para a purificação. Com a obtenção dos fragmentos Fab purificados, foi caracterizada a sua afinidade ao antígeno e especificidade, em ensaios de inibição por digoxina, digitoxina, digoxigenina e ouabaina. Os parâmetros cinéticos da ligação dos fragmentos Fab dos 4 clones e do DigiFab® foram avaliados por SPR. Nas condições experimentais, não foram verificadas diferenças significativas entre os produtos dos 4 clones e o comercial, demonstrando o potencial dos fragmentos Fab monoclonais obtidos como antídoto à digoxina. / Digoxin is a medication indicated for heart failure treatment. Its therapeutic window is narrow, being responsible for intoxication cases. The only antidote available for the detoxification is a polyclonal antibody - DigiFab® in Fab format. Its use is effective, but costly. Bacterial clones producing anti-digoxin monoclonal Fab fragments were previously obtained by our group using phage display technology. In this work the Fab variants of the 4 clones were expressed in E.coli to establish the purification method. The purified fragments were characterized regarding the affinity to the antigen and the specificity through inhibition assays with digoxin, digitoxin, digoxigenin and ouabain. The binding kinetic parameters of Fab fragments of the 4 clones and the commercial product to Dig-BSA conjugate were assessed by SPR. Under the experimental conditions no significant differences were observed among the 4 clones and the commercial product, demonstrating the potential of monoclonal Fab fragments as an antidote to digoxin.