The effects of environmental contaminants in humans and animals are of great concern. Some contaminants are endocrine disruptors that may interfere with the endogenous hormonal signalling and disturb, for example, reproductive organs and functions. Primary uterine myometrial cells originating from women and Baltic grey seals were exposed to some polychlorinated biphenyls (PCBs) and their metabolites. Even though human and Baltic grey seal myometrial cells responded differently to the tested PCBs, the results indicate that PCBs can influence myometrial cell proliferation in vitro. The prevalence of uterine leiomyomas was investigated among 257 Baltic grey seals. Leiomyomas were only present in females older than 22 years, at a prevalence of 65%. Proliferation in leiomyoma cells was detected in individuals lacking ovarian proliferation support, suggesting the presence of an exogenous stimulant. By taking into account temporal alterations in the contaminant burden of the seals, PCB exposure was found to be associated with leiomyoma prevalence. In conclusion, PCB exposure may be related to uterine leiomyoma development and proliferation in Baltic grey seals in vivo. Human endometrial endothelial cells (HEECs) were exposed to some endocrine disruptors, and the effects of the endocrine disruptors on cell proliferation and viability were studied. All evaluated endocrine disruptors decreased HEEC proliferation and most also decreased HEEC viability. Further studies revealed that the reduction in HEEC proliferation after exposure to o,p’-DDT was associated with differential expression of mRNA involved in proliferation, defence response, and lipid and cholesterol metabolism compared to untreated HEEC. In conclusion, these studies suggest that endocrine disruptors affect cultured cells from the female reproductive tract of humans and grey seals, and may have deleterious effects on proliferation, viability, and genes involved in defence response, and lipid or cholesterol metabolism.

Donada la resistència a la quimioteràpia que presenta el melanoma i el carcinoma d’endometri avançat, és important la investigació destinada a buscar dianes terapèutiques. En aquest treball hem investigat els efectes de d’anàlegs de la somatostatina (SA), d’inhibidors del proteasoma (PI) com Bortezomib, de l’inhibidor de receptors tirosina cinasa Sunitinib i la combinació de Sunitinib i Bortezomib en línies cel•lulars de melanoma. Aquesta combinació també l’hem testat en el carcinoma d’endometri. S’observa que les cel•lules de melanoma expressen varis receptors de la somatostatina. Els PI són eficients a l’hora d’induir una parada en el cicle cel•lular i apoptosi. Les línies cel•lulars que presenten PDGFRα i VEGFR2 són sensibles a Sunitinib, i aquest interacciona amb Bortezomib de forma sinèrgica. En el carcinoma d’endometri, Sunitinib indueix una parada en el cicle cel•lular, apoptosi, inhibeix la via NFκB i interacciona sinèrgicament amb Bortezomib. Els SAs i PI podrien ser útils en combinació amb altres agents i l’ús de Bortezomib i Sunitinib ha mostrat ser efectiu en determinats casos de melanoma i en el carcinoma d’endometri. / Dada la resistencia a la quimioterapia que presenta el melanoma y el carcinoma de endometrio avanzado, es importante aquella investigación destinada a buscar dianas terapéuticas. En este trabajo hemos investigado los efectos de análogos de la somatostatina (SAs), de inhibidores del proteasoma (PI) como Bortezomib, del inhibidor de receptores tirosina cinasa Sunitinib y la combinación de Sunitinib y Bortezomib en líneas celulares de melanoma. Esta combinación también la hemos testado en el carcinoma de endometrio. Se observa que las células de melanoma expresan varios receptores de la somatostatina. Los PI son eficientes a la hora de inducir una parada en el ciclo celular y apoptosis. Las líneas celulares que presentan PDGFR α i VEGFR2 son sensibles a Sunitinib, y éste interacciona con Bortezomib de forma sinérgica. En el carcinoma de endometrio, Sunitinib induce una parada en el ciclo celular, apoptosis, inhibe la via NFκB e interacciona sinérgicamente con Bortezomib. Los SAs y PI podrían ser útiles en combinación con otros agentes y el uso de Bortezomib y Sunitinib ha demostrado ser efectivo en determinados casos de melanoma y en el carcinoma de endometrio. / As advanced melanoma and endometrial carcinoma is highly resistant to chemotherapy it is important the research focused to the search of therapeutic targets. In the present work, we have investigated the effects of somatostatin analogues (SAs), proteasome inhibitors (PI) such as Bortezomib, the tyrosine kinase receptor inhibitor Sunitinib and the combined therapy of Sunitinib and Bortezomib. This combination has been also tested in endometrial carcinoma. It is observed that melanoma cell lines express various somatostatin receptors. In addition, proteasome inhibitors induce a cell cycle arrest and apoptosis. Those cells presenting activated PDGFRα or VEGFR2 are more sensitive to Sunitinib and this interacts synergistically with Bortezomib. In endometrial carcinoma, Sunitinib induces a cell cycle arrest, apoptosis, inhibits NFκB pathway and interacts synergistically with Bortezomib. The SAs and PI could be useful combined with other agents and the use of Bortezomib and Sunitinib has shown to be effective in certain cases of melanoma and in endometrial carcinoma.

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Unter Praxisbedingungen gilt die Erstbelegung einer Sportstute nach Beendigung der sportlichen Karriere als problematisch, viele Sportpferde konzipieren erst nach einer mehrjährigen Pause. Bisher existieren nur wenige wissenschaftliche Studien zu diesem Thema, in diesen ist die Problematik nur teilweise und ausschließlich unter klinischen Gesichtspunkten analysiert worden. Gegenstand dieser Arbeit ist die histopathologische Untersuchung der Endometriumbioptate von Sportstuten im Hinblick auf Befunde, die eine Erklärung für die bei Sportstuten häufig beobachtete Subfertilität darstellen können. Bei den Sportstuten dieser Studie handelte es sich um Stuten mit einer regelmäßigen Partizipation an Turnieren der Klasse M oder S, sowie um internationale Sportpferde, die in 3 Gruppen aufgeteilt wurden (Gruppe 1: seit dem Einsatz im Sport noch nicht besamte Stuten, n= 68; Gruppe 2: seit dem Einsatz im Sport erfolglos besamte Stuten: n= 84; Gruppe 3: Stuten, die seit dem Einsatz im Sport ein oder mehrmals abgefohlt haben, n= 37). Die an den Endometriumbioptaten der Sportstuten erhobenen Daten wurden überdies mit denen einer vierten Gruppe, bestehend aus Freizeitpferden (n= 31) verglichen. Auffällig häufig konnten in Gruppen 1 und 2 Differenzierungsstörungen in Bioptaten, die während der Decksaison entnommen wurden, beobachtet werden; dabei handelt es sich um Endometriopathien, deren Auftreten in der equinen Reproduktionsmedizin häufig auf hormonelle Imbalancen zurückgeführt wird. Von den Sportstuten der Gruppen 1 und 2, welche weniger als 1 Jahr vor Bioptatentnahme noch im Sport eingesetzt wurden, zeigten 16% (5/31) eine glanduläre Inaktivität. Dabei handelt es sich um einen histopathologischen Befund, der auf eine stark eingeschränkte Ovarfunktion schließen lässt. Eine irregulär proliferative Differenzierung des Endometriums wiesen 16% (5/32) der Stuten auf, die circa ein Jahr zuvor ihre Karriere im Sport beendet hatten. Solche, die bereits längere Zeit (≥2 Jahre) pausierten, zeigten vermehrt eine irregulär sekretorische Differenzierung des Endometriums (37%; 7/19). Die diagnostizierten Formen endometrialer Fehldifferenzierung, insbesondere in der zeitlichen Reihenfolge ihres Vorkommens, sprechen dafür, dass bei diesen Stuten unmittelbar nach dem Sport eine Ovarialinsuffizienz vorliegt, und dass die Rückkehr in ein reguläres Zyklusgeschehen begleitet wird von verschieden Störungen der Ovarfunktion. Dabei scheint der Schweregrad der ovariellen Dysfunktion mit fortschreitender Dauer seit dem Einsatz im Sport abzunehmen. Die irregulär proliferative Differenzierung wurde signifikant häufiger bei Stuten beobachtet, die vorberichtlich im Präöstrus bioptiert worden waren (p= 0,016); die irregulär sekretorische und die vollständig irreguläre Differenzierung traten häufiger bei im Interöstrus bioptierten Stuten auf. Die Ergebnisse lassen darauf schließen, dass ein Zusammenhang zwischen der Art der irregulären Differenzierung und dem Zyklusstand besteht. In Bezug auf weitere anamnestische Daten, wurde die irreguläre endometriale Differenzierung überdies gruppenübergreifend signifikant häufiger bei Stuten älter als 15 Jahre beobachtet; außerdem zeigten alle vorberichtlich azyklischen bzw. unregelmäßig zyklierenden Stuten (n= 5), alle Stuten mit Ovartumoren (n= 2), sowie eine Stute mit vorberichtlich Ovarzysten und eine mit sogenannten „intrauterine devices“ ein irregulär differenziertes Endometrium. In dieser Arbeit konnte gruppenübergreifend ein signifikanter Zusammenhang zwischen dem Auftreten von degenerativen Veränderungen des Endometriums (Endometrose: p= 0,008; Angiosklerose: p= 0,002) und dem Alter einer Stute nachgewiesen werden; die bei den Sportstuten gewonnen Daten unterschieden sich allerdings kaum merklich von den bei Zuchtstuten erhobenen Daten aus der Literatur. Endometritiden konnten vor allem bei seit dem Einsatz im Sport erfolglos besamten Stuten (Gruppe 2; 31%) nachgewiesen werden und bei ehemaligen Sportstuten, die seit ihrem Einsatz bereits erfolgreich konzipiert hatten (Gruppe 3; 41%). Der Prozentsatz an Stuten mit Endometritiden war in diesen Gruppen höher als der in der Literatur beschriebene Anteil bei „Nicht-Sportstuten“. Eine mögliche Erklärung für das gehäufte Auftreten von Endometritiden bei diesen Stuten stellen darum wiederholte Besamungsversuche dar, und -bei Stuten der Gruppe 3- auch postpartale Involutionsstörungen. Nach dem Kategorisierungssystem von KENNEY und DOIG (1986) hatten seit dem Einsatz im Sport noch nicht besamte Sportstuten (Gruppe 1) bessere Kategorie als Hobbystuten (Gruppe 4). Die in der vorliegenden Untersuchung bei Sportstuten diagnostizierten Differenzierungsstörungen fließen jedoch nicht in dieses Kategorisierungssytem ein. Bei Sportstuten reicht somit die alleinige Anwendung des Kategorisierungssystems für die Beurteilung einer möglichen Fertilitätsminderung nicht aus; deshalb wird eine ausführliche histopathologische Beurteilung eines Endometriumbioptats unter Einbeziehung der glandulären Funktionsmorphologie empfohlen. Zusammenfassend kann davon ausgegangen werden, dass die beobachteten degenerativen Veränderungen des Endometriums, die bei Sportstuten hinsichtlich Grad und Ausprägung mit denen von Nichtsportstuten vergleichbar waren, keine mögliche Erklärung für die Reproduktionsstörungen von Sportstuten darstellen. Vielmehr lassen die im Rahmen dieser Arbeit erhobenen histopathologischen Befunde vermuten, dass bei Sportstuten Differenzierungsstörungen des Endometriums während der Decksaison eine wichtige Ursache der klinisch beobachteten Subfertilität darstellen. Der Nachweis dieser Veränderungen deutet auf ein gehäuftes Auftreten von hormonellen Störungen, ausgelöst durch ovarielle Dysfunktionen hin; zum abschließenden Beweis bedarf es allerdings klinischer Studien.

The evaluation of microsatellite instability in cancer patients might be of clinical importance as a prognostic and predictor factor. The aim of this study − evaluate the frequency and status of microsatellite instability and DNA mismatch repair protein expression in endometrial cancer and to relate the obtained results to clinicopathologic characteristics as well as patient survival. This study enrolled 109 patients.The objectives of the study: to determine the frequency and status of microsatellite instability by using two marker panels (earlier created BAT-25, BAT-26, NR-21, NR-24, MONO-27 and a new BAT-52, BAT-55, BAT-56, BAT-57, BAT-59 panels) recommended by Promega Corporation (USA); to compare the frequency and status of microsatellite instability with tumor clinicopathologic characteristics; to investigate the expression of DNA mismatch repair proteins (MLH1, PMS2, MSH2, and MSH6) in tumors with high-frequency microsatellite instability; to evaluate the impact of microsatellite instability on the survival of patients. The results showed that high-frequency microsatellite instability was detected two times more frequently with the new panel of markers in comparison while using earlier created panel. A statistically significant difference regarding tumor grade and myometrial invasion was found between the groups with high-frequency microsatellite instability and stable phenotype. There was no association between the survival of patients and microsatellite instability. / Mikrosatelitų nestabilumo tyrimai svarbūs vėžio ligos prognozei vertinti bei parenkant individualų gydymą. Darbo tikslas − ištirti mikrosatelitų nestabilumo dažnį, pobūdį ir klaidingai suporuotų nukleotidų DNR pažaidų taisymo sistemos baltymų raišką sergant gimdos kūno vėžiu ir gautus rezultatus susieti su pacienčių klinikinėmis-patologinėmis charakteristikomis bei jų išgyvenamumu. Į stebėsenos perspektyvinį tyrimą buvo įtrauktos 109 pacientės. Darbo uždaviniai: nustatyti mikrosatelitų nestabilumo dažnį ir pobūdį tarp sergančiųjų gimdos kūno vėžiu, panaudojus Promega Corporation (JAV) sukurtus du žymenų rinkinius (anksčiau sukurtą BAT-25, BAT-26, NR-21, NR-24, MONO-27 ir naująjį BAT-52, BAT-55, BAT-56, BAT-57, BAT-59); palyginti mikrosatelitų nestabilumo dažnį ir pobūdį su pacienčių klinikinėmis-patologinėmis charakteristikomis; ištirti DNR pažaidų taisymo sistemos baltymų (MLH1, PMS2, MSH2, MSH6) raišką gimdos kūno navikuose, kuriuose nustatytas didelio dažnio mikrosatelitų nestabilumas; įvertinti mikrosatelitų nestabilumo įtaką pacienčių išgyvenamumui. Tyrimų rezultatai parodė, kad mikrosatelitų didelio dažnio nestabilumas dvigubai dažniau nustatytas naudojant naująjį žymenų rinkinį, palyginti su anksčiau sukurtu žymenų rinkiniu. Statistiškai reikšminga sąsaja konstatuota tarp mikrosatelitų didelio dažnio nestabilumo arba jo nebuvimo ir naviko diferenciacijos laipsnio bei invazijos į miometriumą gylio. Sergančiųjų išgyvenamumas nebuvo susijęs su mikrosatelitų nestabilumu. ... [toliau žr. visą tekstą]

Mikrosatelitų nestabilumo tyrimai svarbūs vėžio ligos prognozei vertinti bei parenkant individualų gydymą. Darbo tikslas − ištirti mikrosatelitų nestabilumo dažnį, pobūdį ir klaidingai suporuotų nukleotidų DNR pažaidų taisymo sistemos baltymų raišką sergant gimdos kūno vėžiu ir gautus rezultatus susieti su pacienčių klinikinėmis-patologinėmis charakteristikomis bei jų išgyvenamumu. Į stebėsenos perspektyvinį tyrimą buvo įtrauktos 109 pacientės. Darbo uždaviniai: nustatyti mikrosatelitų nestabilumo dažnį ir pobūdį tarp sergančiųjų gimdos kūno vėžiu, panaudojus Promega Corporation (JAV) sukurtus du žymenų rinkinius (anksčiau sukurtą BAT-25, BAT-26, NR-21, NR-24, MONO-27 ir naująjį BAT-52, BAT-55, BAT-56, BAT-57, BAT-59); palyginti mikrosatelitų nestabilumo dažnį ir pobūdį su pacienčių klinikinėmis-patologinėmis charakteristikomis; ištirti DNR pažaidų taisymo sistemos baltymų (MLH1, PMS2, MSH2, MSH6) raišką gimdos kūno navikuose, kuriuose nustatytas didelio dažnio mikrosatelitų nestabilumas; įvertinti mikrosatelitų nestabilumo įtaką pacienčių išgyvenamumui. Tyrimų rezultatai parodė, kad mikrosatelitų didelio dažnio nestabilumas dvigubai dažniau nustatytas naudojant naująjį žymenų rinkinį, palyginti su anksčiau sukurtu žymenų rinkiniu. Statistiškai reikšminga sąsaja konstatuota tarp mikrosatelitų didelio dažnio nestabilumo arba jo nebuvimo ir naviko diferenciacijos laipsnio bei invazijos į miometriumą gylio. Sergančiųjų išgyvenamumas nebuvo susijęs su mikrosatelitų nestabilumu. / The evaluation of microsatellite instability in cancer patients might be of clinical importance as a prognostic and predictor factor. The aim of this study − evaluate the frequency and status of microsatellite instability and DNA mismatch repair protein expression in endometrial cancer and to relate the obtained results to clinicopathologic characteristics as well as patient survival. This study enrolled 109 patients.The objectives of the study: to determine the frequency and status of microsatellite instability by using two marker panels (earlier created BAT-25, BAT-26, NR-21, NR-24, MONO-27 and a new BAT-52, BAT-55, BAT-56, BAT-57, BAT-59 panels) recommended by Promega Corporation (USA); to compare the frequency and status of microsatellite instability with tumor clinicopathologic characteristics; to investigate the expression of DNA mismatch repair proteins (MLH1, PMS2, MSH2, and MSH6) in tumors with high-frequency microsatellite instability; to evaluate the impact of microsatellite instability on the survival of patients. The results showed that high-frequency microsatellite instability was detected two times more frequently with the new panel of markers in comparison while using earlier created panel. A statistically significant difference regarding tumor grade and myometrial invasion was found between the groups with high-frequency microsatellite instability and stable phenotype. There was no association between the survival of patients and microsatellite instability.

Ziel der vorliegenden Arbeit war es, den endometrialen Normalbefund inkl. Zellinfiltration und Funktionsmorphologie im Zyklusverlauf bei fertilen Kühen zu definieren sowie einen Überblick über Art und Häufigkeit pathologischer Befunde an Ovar, Salpinx und Uterus bei sub- und infertilen Rindern zu erhalten. Zudem sollte die Bedeutung endometrialer Befunde für die Fruchtbarkeit durch einen Vergleich mit den bei fertilen Rindern vorliegenden Verhältnissen eingeordnet werden. Darüber hinaus galt es, das Verfahren der Endometriumbiopsie beim Rind im klinischen Kontext auf seine Durchführbarkeit unter Praxisbedingungen sowie seine Aussagekraft und Repräsentativität zu prüfen. Zur Definition des Normalbefundes der endometrialen Infiltration mit freien Zellen im Zyklusverlauf wurden Endometriumbioptate von sieben fertilen Kühen („Zyklusgruppe“) an sechs definierten Tagen des Zyklus entnommen und histologisch untersucht. Die Infiltration mit neutrophilen und eosinophilen Granulozyten, Lymphozyten, Plasmazellen, Makrophagen und Mastzellen wurde quantitativ bestimmt und statistisch analysiert. Anhand dieser Daten wurden die Grenzwerte zwischen der physiologischen zyklischen Selbstreinigung und dem Auftreten einer Endometritis ermittelt: das Vorhandensein von maximal 20 neutrophilen Granulozyten bzw. bis zu 15 mononukleären Zellen (Lymphozyten, Plasmazellen, Makrophagen) pro Gesichtsfeld bei 400-facher Vergrößerung im Bereich des luminalen Epithels und Stratum compactum ist nach den Ergebnissen der vorliegenden Studie als normal anzusehen. Um einen Überblick über Art und Häufigkeit pathologischer Befunde am Genitaltrakt weiblicher Rinder zu erhalten, wurden Ovarien, Eileiter und Uteri von 135 wegen Sub-/Infertililität geschlachteten Färsen (n=13) und Kühen (n=122) pathologisch-anatomisch und -histologisch untersucht. Bei 58 dieser Tiere erfolgte im Vorfeld eine klinisch-gynäkologische, sonografische und zytologische Untersuchung. Im Rahmen der pathologisch-anatomischen und -histologischen Untersuchungen wurden 46 ovarielle Zysten (Gelbkörperzyste: n=25, Follikelzyste: n=21) sowie 16 ovarielle Neoplasien (Adenom des Rete ovarii: n=12, Granulosazelltumor: n=4) festgestellt. Während die ovariellen Zysten in der Mehrheit der Fälle bereits klinisch diagnostiziert wurden, konnten alle ovariellen Neoplasien nur histologisch festgestellt werden. 34 Tiere wiesen eine Salpingitis, 36 Zysten der Salpinx und sechs Rinder Adhäsionen der Salpinx mit dem Ovar auf. Klinisch-gynäkologisch wurde keine dieser Veränderungen erfasst. Nur sieben Rinder zeigten histopathologisch ein unverändertes Endometrium. Der häufigste Befund war die Angiosklerose (n=121), gefolgt von der periglandulären Fibrose (n=85), der Adenomyose (n=58) und der Endometritis (n=42). Die periglanduläre endometriale Fibrose des Rindes entspricht hinsichtlich ihrer lichtmikroskopisch zu erfassenden Charakteristika der Endometrose der Stute und wird deshalb als bovine Endometrose bezeichnet. 64% der Rinder mit histologisch nachgewiesener Endometritis zeigten keinerlei klinisch erfassbaren Symptome. Von allen subklinischen Endometritiden wiesen nur 15,2% der Fälle mehr als 5% PMN in der zytologischen Untersuchung auf. Um die Bedeutung der meist subklinischen endometrialen Befunde, deren Diagnose mittels konventioneller Methoden nur eingeschränkt möglich ist, für die Fruchtbarkeit betroffener Rinder einschätzen zu können, wurden zum Vergleich Endometriumbioptate von 15 fertilen Kühen untersucht. Dabei stellte sich heraus, dass eine mittel- oder hochgradige Endometritis und Endometrose bei sub- und infertilen Rindern signifikant häufiger auftritt als bei fertilen Rindern. Zudem weisen sub- und infertile Rinder signifikant häufiger eine destruierende Endometrose auf als fertile Kühe. Insofern ist anzunehmen, dass sowohl die Endometritis als auch die Endometrose, in Abhängigkeit von ihrem Grad und Charakter, die Fruchtbarkeit betroffener Rinder negativ beeinflussen. Um zu untersuchen, inwieweit die mittels Endometriumbiopsie zu erhebenden Befunde für das gesamte Endometrium repräsentativ sind, erfolgte bei 58 der 135 sub- und infertilen Rinder ein bis drei Tage vor der Schlachtung die Entnahme von Endometriumbioptaten, wobei von jedem Tier zwei Bioptate mit einer Größe von 5-10 x 3 x 3 mm in der Nähe der Bifurkation entnommen wurden. Nach erfolgter histologischer Auswertung der Endometriumbioptate und des Schlachtmaterials wurden für jedes dieser Rinder die Befunde der Bioptate mit den postmortal erhobenen Befunden anonymisiert verglichen. Dabei konnte der Grad entzündlicher oder degenerativer endometrialer Veränderungen in 86% bzw. 93% der Fälle mittels Endometriumbiopsie exakt oder mit leichten Abweichungen festgestellt werden. Der Charakter der entzündlichen Veränderungen stimmte bei 64% der untersuchten Rinder überein. Bezogen auf die Endometrose betraf das 66% der Fälle. Die Ergebnisse der vorliegenden Studie zeigen, dass bei der Mehrheit der Rinder mit Fruchtbarkeitsstörungen subklinische endometriale Befunde (subklinische Endometritis, bovine Endometrose, Angiosklerose) vorliegen, die mittels klinischer, sonografischer und zytologischer Verfahren unentdeckt bleiben, aber histologisch diagnostiziert werden können. Die Endometriumbiopsie erweist sich als ein geeignetes Verfahren, solche endometrialen Befunde intra vitam repräsentativ zu erfassen und ist damit ein wichtiges ergänzendes diagnostisches Hilfsmittel, das dem Tierarzt und Tierhalter Informationen über den endometrialen Gesundheitszustand liefert. Für eine detaillierte prognostische Bewertung der mittels Endometriumbiopsie nachweisbaren endometrialen Veränderungen, insbesondere der verschiedenen Erscheinungsformen der bovinen Endometrose, bedarf es jedoch weiterführender Untersuchungen.

Research Doctorate - Doctor of Philosophy (PhD) / Endometrial cancer is one of the most common female cancers in industrialized countries. Traditional risk factors associated with endometrial cancer are well understood and include excessive exposure to estrogen or estrogen unopposed by progesterone. However, variations in the genes that influence these hormones and their association with endometrial cancer have not been well investigated. By studying genetic variation in endometrial cancer, novel markers of risk may be discovered that can be used to identify women at high risk and for the implementation of specialised treatments. Polymorphisms in the genes involved in the following pathways; hormone biosynthesis, hormone receptors, estrogen metabolism, DNA repair and cell cycle control, have been suggested to be involved in the initiation and development of endometrial cancer. The focus of this study was to examine genetic variants in these pathways to assess the existence of an association with the risk of endometrial cancer. In the first part of this study, the COMT V158M polymorphism was examined in a hereditary non-polyposis colorectal cancer (HNPCC) cohort to determine its association with disease expression. The heterozygous genotype was over-represented in women with endometrial/ovarian cancer that did not harbour mismatch repair (MMR) gene mutations. This result suggested that the COMT V158M polymorphism may alter the risk of developing HNPCC related endometrial/ovarian cancer in MMR mutation negative women. Since COMT is involved in the metabolism of estrogen and that estrogen is the main risk factor for endometrial cancer development, closer examination was warranted to determine the association of genetic variation involved in hormone-related pathways and endometrial cancer risk, outside of the context of an inherited predisposition to disease. In the second part of this study, a cohort of 191 women with endometrial cancer and 291 healthy control women were genotyped for polymorphisms in genes involved in hormone biosynthesis, hormone receptors, estrogen metabolism, DNA repair and cell cycle control. The results revealed that variations in estrogen receptor alpha (ESR1) and beta (ESR2), and the androgen receptor (AR), were associated with an increase and decrease in endometrial cancer risk, respectively. Additionally, polymorphisms in CYP1A1, CYP1B1, GSTM1 and GSTP1 were related to a decrease in endometrial cancer risk. A trend was observed for the cyclin D1 870 G>A polymorphism and an increase in endometrial cancer risk, however, this result did not reach significance. Taken together, these results revealed that perturbations in the hormone receptors and estrogen metabolism genes, may aid in the identification of women at high risk of developing endometrial cancer. Interestingly, stratification of the women with endometrial cancer revealed that combinations of polymorphisms in TP53 and MDM2 were associated with higher grades of cancer. This finding may possibly have significant implications as women with reduced apoptotic ability, due to combinations of polymorphisms in these genes, have an increased risk of presenting with higher grades of endometrial cancer, that are associated with lower survival rates. In summary, the results of this thesis showed that variation in the estrogen and androgen receptors, and estrogen metabolism genes, may alter the risk of developing endometrial cancer. Moreover, polymorphisms in the cell cycle control genes, TP53 and MDM2, appear to be associated with higher grades of endometrial cancer. This study of polymorphisms may help explain genetic differences in individual susceptibility to endometrial cancer and are markers of risk that aid in the development of effective and personalised strategies to prevent disease development. This study has improved the understanding of genetic variation associated with endometrial cancer risk. It has the potential to enhance our ability to treat women with endometrial cancer through improved identification and treatment strategies, by virtue of the genetic variation identified, that appears to predispose to disease.

La classification du cancer de l'endomètre, basée sur l'histologie, conditionne la prise en charge thérapeutique alors qu'elle ne montre pas une pertinence suffisante pour prédire l'envahissement ganglionnaire. La détermination de profils d'expression biologiques corrélés au statut ganglionnaire et à d'autres facteurs pronostiques majeurs tels que les emboles apparait donc fondamentale pour mieux adapter la prise en charge. Nous avons montré, par une analyse de puce à partir des ARNs extraits de tissus sous paraffine de cancer de l'endomètre de type endométrioide, de grade 1-2, supposé limité à l'utérus, que les niveaux d'expression de cinq micro-ARNs (miR-34c-5p, -375, -184, -34c-3p, et -34b-5p) étaient plus faibles dans les tissus tumoraux avec envahissement ganglionnaire. Les niveaux d'expression de trois micro-ARNs (miR-34c-5p, -23b-5p, et -23c) étaient plus faibles dans les tissus tumoraux avec emboles lymphovasculaires. Une analyse par RT-qPCR a permis de déterminer des seuils de micro-ARNs corrélés aux facteurs pronostiques. Les patientes avec seuil d'expression du micro-ARN-184 <0,30 avaient un envahissement ganglionnaire dans 60% des cas, contre 11,5% pour les patientes avec un seuil d'expression de micro-ARN-184 >0,30, p=0,006. Les patientes avec seuil d'expression du micro-ARN-34c-5p <0,15 avaient un risque plus élevé d'avoir des emboles (92,3%) que les patientes avec un seuil d'expression de micro-ARN-34c-5p >0,15 (0,0%), p<0,001. Ces profils d'expression de micro-ARNs fournissent les bases pour de nouvelles études sur la fonction des micro-ARNs dans le cancer de l'endomètre et pourraient constituer un nouvel outil au diagnostic du statut ganglionnaire. / Current histological classification of early-stage endometrial cancer (EC) may show insufficient accuracy to precisely predict lymph node metastases leading to potential over or under treatment. Hence, additional highly sensitive and specific molecular prognostic biomarkers correlated with prognostic factors, such as nodal involvement and lymphovascular space involvement (LVSI), are needed to better adapt surgical management and adjuvant therapies. We fstudied by microarray analysis microRNA expression profiles of formalin-fixed paraffin-embedded grade 1–2 supposed early-stage endometrioid adenocarcinomas specimen. The expression levels of 5 microRNAs (miR-34c-5p, -375, -184, -34c-3p, et -34b-5p) were lower in the EC with positive nodal status compared to those with negative nodal status. The expression levels of 3 microRNAs (miR-34c-5p, -23b-5p, et -23c) were lower in the EC with positive LVSI compared to those with negative LVSI. A quantitative reverse transcriptase–PCR assay was used to determine micro-RNAs thresholds correlated with prognostic factors. Women with a microRNA-184-fold change <0.30 were more likely to have positive lymph node (n=6; 60.0%) compared with those with a microRNA-184-fold change >0.30 (n=3; 11.5%), p=0.006. Women with a microRNA-34c-5p fold change <0.15 were more likely to have positive LVSI status (n=12; 92.3%) compared with those with a microRNA-34c-5p fold change >0.15 (n=0; 0.0%), p<0.001. These microRNA expression profiles may provide a basis for further studies of the micro-RNA function in endometrioid adenocarcinoma, and be used as a diagnostic tool.

Made available in DSpace on 2016-12-23T13:53:38Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Jose Leonardo Gualberto Ramos.pdf: 7271878 bytes, checksum: cf1f84cb539959e4d151199553588ac8 (MD5) Previous issue date: 2012-08-21 / The development of research aimed at better understanding the formation and functioning of the female reproductive system as a basis for development of contraceptive methods has become increasingly relevant. Furthermore, characterization of uterine development, mainly endometrial glands in dogs has not yet the description as observed in other species. The objective of this study was to evaluate the chronology of the uterine development in prepubertal bitches (endometrium, myometrium and perimetrium) with emphasis on the development of endometrial glands. We evaluated uteri of 32 bitches with a prepubertal and 180 days postnatal (DPN). These animals were divided into eight groups of four animals each: G1 = 1DPN, G2 = 15DPN, G3 = 30DPN, 45DPN = G4, G5 = 60DPN, 90DPN = G6, G7 and G8 = 120DPN = 180DPN. We evaluated the type of epithelium, the presence of endometrial glands and quantity, the measurement of the total thickness of the uterine wall (mM), thickness of the myometrium (mM), endometrial thickness (mM), diameter (mm) and number (n°/mm2) of endometrial glands. The histoarchitecture uterus with 1 DPN revealed rudimentary feature supported with simple cubic cells in the stroma in organization, with lamina propria devoid of glands, with 15 DPN observed presence of rudimentary structures, starting from invaginations (endometrial folding) from 30 to 45 days was observed discrete branching glands that became more evident; DPN at 60 and from this period, there was an increase of glandular development in an ongoing process until the last period evaluated (180 DPN). All structures evaluated had low coefficient of variation (<10%) demonstrating homogeneity of data evaluated, as well as significant correlations (P <0.0001) between all variables with age animal [total uterine wall (R2 = 97, 4%), endometrial total (R2 = 99.4%), total myometrium (R2 = 95.8%), number of endometrial glands (R2 = 92.3%); diameters of endometrial glands (R2 = 94.1% ) and epithelial height (R2 = 72.2%). We conclude that the uterus of bitches is devoid of endometrial glands at birth and they begin continuous development from birth to 15 days and 60 days after birth are already fully formed / O desenvolvimento de pesquisas que visam o melhor entendimento da formação e funcionamento do sistema reprodutor da fêmea como embasamento para desenvolvimento de métodos contraceptivos tem se tornado cada vez mais relevante. Além disso, a caracterização do desenvolvimento uterino, principalmente das glândulas endometriais na cadela ainda não se tem à descrição como observado em outras espécies. Objetivou-se com este estudo avaliar a cronologia do desenvolvimento uterino em cadelas pré-púberes (endométrio, miométrio e perimétrio) com ênfase no desenvolvimento das glândulas endometriais. Foram avaliados úteros de 32 cadelas pré-púberes com um a 180 dias pós-nascimento (DPN). Estes animais foram distribuídos em oito grupos com quatro animais cada, sendo: G1=1DPN, G2=15DPN, G3=30DPN, G4=45DPN, G5=60DPN, G6=90DPN, G7=120DPN e G8=180DPN. Foram avaliados o tipo de epitélio, presença e quantidade de glândulas endometriais, a mensuração da espessura total da parede uterina (μm), espessura do miométrio (μm), espessura do endométrio (μm), diâmetro (μm) e número (n°/mm2) de glândulas endometriais. A histoarquitetura do útero com 1 DPN revelou característica rudimentar com células cúbicas simples apoiadas em estroma em organização, com lâmina própria desprovida de glândulas; com 15 DPN observou-se presença de estruturas rudimentares, com início das invaginações (pregueamento endometrial); dos 30 aos 45 dias observou-se discreta ramificação das glândulas que se tornaram mais evidentes; aos 60 DPN e a partir deste período, observou-se aumento do desenvolvimento glandular num processo contínuo até o último período avaliado (180 DPN). Todas as estruturas avaliadas apresentaram baixo coeficiente de variação (<10%) demonstrando uma homogeneidade nos dados avaliados, bem como correlações significativa (P<0,0001) entre todas as variáveis analisadas com a idade animal [parede uterina total (R2=97,4%), endométrio total (R2=99,4%), miométrio total (R2=95,8%), número de glândulas endometriais (R2=92,3%); diâmetro das glândulas endometriais (R2=94,1%) e altura do epitélio (R2=72,2%). Conclui-se que o útero de cadelas é desprovido de glândulas endometriais ao nascimento e que estas iniciam desenvolvimento contínuo a partir dos 15 dias de nascimento e aos 60 dias pósnascimento já estão completamente formadas