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Avaliação de extratos de plantas medicinais em biofilmes multiespécie de Candida albicans com Streptococcus mutans, Staphylococcus aureus, Enterococcus faecalis e Pseudomonas aeruginosa /Domingues, Nádia. January 2018 (has links)
Orientador: Luciane Dias de Oliveira / Banca: Antonio Olavo Cardoso Jorge / Banca: Priscila Christiane Susy Liporoni / Banca: Luana M. R. de Vasconcellos / Banca: Cristiane Aparecida Pereira / Resumo: Os micro-organismos estão cada vez mais resistentes aos medicamentos disponíveis tanto na medicina quanto na odontologia, e esta resistência é ainda maior quando estão organizados em biofilmes mono ou multiespécies, de modo que o estudo de antimicrobianos alternativos, como fitoterápicos, estão em crescente ascensão. A interação entre leveduras e bactérias está intimamente presente na cavidade bucal, em que nichos como dentes, língua, mucosa e bolsa periodontal, nutrientes e temperatura adequados promovem condições favoráveis para formação do biofilme. Com isso, o objetivo deste trabalho foi avaliar a atividade antimicrobiana dos extratos de Pfaffia paniculata K (pfaffia), Hamamelis virginiana L. (hamamelis), Stryphnodendron barbatiman (barbatimão) e Gymnema sylvestre (gimena) em biofilmes heterotípicos de Candida albicans (ATCC 18804) com Streptococcus mutans (ATCC 35688), Staphylococcus aureus (ATCC 6538), Enterococcus faecalis (ATCC 4083) e Pseudomonas aeruginosa (ATCC 15442). Para isso, suspensões padronizadas em 107 cels/mL dos micro-organismos testes, foram distribuídos em placas de microtitulação de 96 poços, juntamente 100 µL de caldo BHI. As placas foram incubadas em estufa bacteriológica a 37ºC/48h (5% de CO2 para S. mutans) e, após, os biofilmes foram submetidos ao tratamento com os extratos por 5 min e 24 h, nas respectivas concentrações de 100 mg/mL, 50 mg/mL e 25 mg/mL. Foi utilizado solução salina 0,9% (5 min) ou caldo BHI (24 h) nos grupos controles. Após, os ... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Microorganisms are increasingly resistant to drugs available in both medicine and dentistry, and this resistance is even greater when they are organized into mono or multispecies biofilms, so that the study of alternative antimicrobials, such as herbal medicines, are on the rise. The interaction between yeasts and bacteria is intimately present in the oral cavity, in which niches such as teeth, tongue, mucosa and periodontal pocket, food and adequate temperature promote adequate conditions for biofilm formation. The aim of this study was to evaluate the antimicrobial activity of extracts of Pfaffia paniculata K., Hamamelis virginiana L., Gymnema sylvestre and Stryphnodendron barbatiman M. in heterotopic biofilms of Candida albicans (ATCC 18804) with Streptococcus mutans (ATCC 35688). Staphylococcus aureus (ATCC 6538), Enterococcus faecalis (ATCC 4083), and Pseudomonas aeruginosa (ATCC 15442). Standardized suspensions at 107 cells/mL of the test microorganisms were distributed in 96 well microtiter plates together with 100 μL of BHI broth, the plates were incubated in a bacteriological oven at 37°C/48h (5% CO2 for S. mutans). After the incubation time, treatments were performed at 5 min and 24 h times, applying the respective extracts at the concentrations of 100 mg, 50 mg and 25 mg/mL and applying 0.9% saline solution or BHI broth in the control groups. After the biofilms were washed and disaggregated from the bottom of the plate, performing serial dilutions for later seeding... (Complete abstract click electronic access below) / Doutor
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Atividade antibacteriana ex vivo de diferentes soluções irrigadoras em biofilme de Enterococcus faecalis sobre a matriz dentinária / Antibacterial activity ex vivo of different irrigating solutions on Enterococcus faecalis biofilms on dentin matrixCristiana Francescutti Murad 18 December 2007 (has links)
O presente trabalho teve por objetivo avaliar ex vivo a atividade antimicrobiana hipoclorito de sódio (NaOCl) 2,5% e 5,25%, clorexidina (CHX) gel e líquida 2% e MTAD em biofilme de Enterococcus faecalis, sobre matriz dentinária humana. 118 incisivos inferiores humanos, com canal único, foram instrumentados e seccionados transversal e longitudinalmente. Os fragmentos radiculares obtidos foram imersos em caldo TSB e autoclavados e em seguida foram inoculados com suspensão de E. faecalis e incubados em estufa a 37C, por 72 horas, para permitir a formação do biofilme. As amostras foram randomicamente divididas em 5 grupos experimentais, com 40 amostras para cada grupo, e dois grupos controle, com 3 amostras cada. O biofilme formado sobre a matriz dentinária foi submetido à ação das soluções antimicrobianas pelos tempos 1, 5, 15 e 30 minutos. A atividade antimicrobiana foi avaliada por meio da contagem de UFCs. Após a ação das soluções antimicrobianas, os fragmentos foram imersos em meio seletivo para enterococos, incubados em estufa a 37 C por 72 horas e avaliados quanto à turbidez do meio. A avaliação do percentual de redução bacteriana em função do tempo e da solução demonstrou não haver diferença estatística entre CHX gel, NaOCl 2,5% e NaOCl 5,25% (p>0,05). Entretanto a CHX líquida e o MTAD foram menos efetivos que NaOCl 2,5% e NaOCl 5,25% (p<0,05) e semelhantes a CHX gel. O tempo de ação de 1 minuto foi o menos efetivo na eliminação bacteriana. Apenas a CHX líquida e o MTAD apresentaram diferenças na eficácia em função do tempo. A CHX foi menos efetiva em 1 e 5 minutos (p<0,05) e o MTAD, em 1 minuto de ação. Ao analisar a viabilidade bacteriana intra-dentinária, o NaOCl 5,25% e o MTAD foram superiores a CHX gel, CHX líquida e NaOCl 2,5%; e o tempo de 30 minutos foi estatisticamente significativo em relação aos demais (p<0,05). Baseado nos resultados obtidos parece-nos lícito concluir que o NaOCl 2,5% e 5,25% e a CHX gel 2% foram mais eficazes na eliminação de E. faecalis em todos os tempos testados. O MTAD apresentou efetiva ação antimicrobiana a partir de 5 minutos de ação. Porém quando foi avaliada a atividade antimicrobiana no interior da dentina, o NaOCl 5,25% e o MTAD foram mais efetivos, sendo necessário tempo mínimo de 30 minutos para ampla eliminação bacteriana no interior dos túbulos dentinários. / The present study aimed to evaluate ex vivo the antimicrobial activity of sodium hypochlorite (NaOCl) 2.5% and 5.25%, chlorhexidine (CHX) liquid and gel 2% and MTAD in Enterococcus faecalis biofilms, on human dentin matrix. 118 mandibular human incisors, single rooted, were instrumented and sectioned transversal and longitudinally. The root sections obtained were immersed in TSB broth and autoclaved, thereafter, they were inoculated with suspensions of E. faecalis and incubated at 37C, for 72h to allow biofilm formation. Samples were randomly divided in 5 experimental groups, with 40 samples per group, and 2 control groups, with 3 samples each. The biofilm developed over the dentin matrix was placed under the action the antimicrobial solutions for 1, 5, 15 e 30 minutes. The antimicrobial activity was assessed through CFU counts. After the action of the antimicrobial solutions, the root fragments were immersed in an Enterococci selective broth, incubated at 37 C for 72 hours, and evaluated for broth turbidity. The analysis of the percentage of bacterial reduction depending on the time and on the solution demonstrated no statistic difference among the CHX gel, NaOCl 2.5% and 5.25%(p>0.05). However, the CHX liquid and MTAD were less effective than NaOCl 2,5% and NaOCl 5,25% (p<0.05) and similar to CHX gel. Only CHX liquid and MTAD had statistical differences in its efficacy depending on the time. CHX was less effective in 1 and 5 minutes (p<0.05) and MTAD in 1 minute. When analyzing the bacterial viability in the dentin, NaOCl 5.25% and MTAD were superior to CHX gel, CHX liquid and NaOCl 2,5%; and the time of 30 minutes was statistically different than the others (p<0.05). Based on the results obtained it seems licit to conclude that NaOCl 2,5% and 5,25% and CHX gel 2% were the most effective in the elimination of E. faecalis at all times tested. MTAD presented effective antimicrobial action after 5 minutes of action. However, when the bacterial survival in the dentin was assessed, NaOCl 5.25% and MTAD were the most effective, and the minimum time for wide bacterial elimination in the dentinal tubules was 30 minutes.
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Utilização da terapia fotodinâmica associada ou não ao hipoclorito de sódio na instrumentação de canais radiculares contaminados com Enterococcus faecalis / The use of photodynamic therapy associated or not to sodium hypochlorite in the instrumentation of radicular canals contaminated by Enterococcus faecalisLilian Ferreira Freitas 22 May 2009 (has links)
O presente trabalho teve por objetivo avaliar a ação do laser de baixa intensidade associado ao corante azul de toluidina, como agente bactericida durante a fase de instrumentação dos canais radiculares, comparando sua utilização associada ou não ao hipoclorito de sódio 0,5%. Para tal, 90 caninos humanos foram instrumentados, autoclavados e 88 imersos em caldo TSB(Tryptcase Soy Broth). Em seguida foram inoculados com suspensão de E. faecalis e incubados em estufa a 37C, por 72 horas, para permitir a formação do biofilme. As amostras foram randomicamente divididas em 4 grupos de 22 dentes cada e 1 grupo controle negativo com 2 dentes. Grupo I: reinstrumentados e irrigados com soro fisiológico com posterior aplicação de terapia fotodinâmica (PDT); Grupo II: reinstrumentados e irrigados com hipoclorito de sódio a 0,5% com posterior aplicação de PDT; Grupo III: reinstrumentados e irrigados com hipoclorito de sódio a 0,5%; Grupo IV controle positivo: não foi realizado nenhum tipo de tratamento antes da coleta do material e Grupo V controle negativo:não foram contaminados. Para a coleta da dentina intracanal utilizou-se uma broca Gates Glidden número 6. A atividade antimicrobiana foi avaliada por meio da contagem de UFCs (unidades formadoras de colônias). Os dentes foram então imersos em meio seletivo para enterococos, incubados em estufa a 37 C por 72 horas e avaliados quanto à alteração de coloração do meio. Todas as amostras, exceto o controle negativo, apresentaram-se positivas. Com a finalidade de certificar-se da formação do biofilme e da confirmação dos resultados das contagens das UFCs, 9 amostras foram avaliadas ao MEV (microscopia eletrônica de varredura). Para a análise dos resultados utilizou-se o teste de Kruskal-Wallis e o teste de comparações múltiplas de Tukey, ambos com o nível de significância de 5%. Baseado nos resultados obtidos parece-nos lícito concluir que não houve diferença estatística significante entre o grupo hipoclorito e o hipoclorito com laser e que PDT associada à instrumentação com soro fisiológico não foi capaz de eliminar o E. faecalis de forma significativa. / This current paper aims to assess the action of low-intensity laser together with toluidine blue as a bactericidal agent during the instrumentation phase of radicular canals, comparing its associated or non-associated use with sodium hypochlorite 0.5%. To do so, 90 human canines were instrumented, autoclaved, and 88 were immersed into TSB, and were then inoculated with an E. faecalis suspension and brought into an incubator at 37 degrees Celsius for 72 hours in order to allow the formation of biofilm. The samples were randomly divided into 5 groups, 4 of which composed of 22 samples each plus 1 negative control. Group I: reinstrumented and irrigated with saline solution and subsequent application of photodynamic therapy (PDT); Group II: reinstrumented and irrigated with sodium hypochlorite 0.5% and subsequent PDT application; Group III: reinstrumented and irrigated with sodium hypochlorite 0.5%; Group IV: positive control (no previous treatment before material collection); Group V: negative control (2 samples) with no contamination. The collection of intracanal dentin was obtained by using a Gates Glidden drill #6. The antimicrobial activity was assessed by CFUs counting. The teeth were then immersed in a selected medium for Enterococcus, incubated at 37 degrees Celsius for 72 hours. They were then assessed for medium turbidity. All samples, with the exception of the negative control, showed positive. In order to make sure of the formation of biofilm and the confirmation of the CFUs counting, 9 samples were scavenged under the electron microscope. For result assessment, the Kruskal-Wallis test and the Tukeys multiple comparison test were utilized, presenting both tests a rate and significance of 5%. Based on the results obtained, we may licitly conclude that there was no significant statistical difference between the hypochlorite group and the hypochlorite group with laser. We may still conclude that PDT associated with saline solution instrumentation was not possible to significantly eliminate E. faecalis.
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Avaliação da difusão de íons hidroxila e da atividade antibacteriana de medicação intracanal á base de hidróxido de cálcio /Lima, Regina Karla de Pontes. January 2010 (has links)
Orientador: Juliane Maria Guereiro Tanomaru / Banca: Evandro Watanabe / Banca: Igor Prokopowitsch / Banca: Gisele Faria / Banca: Idomeo Bonetti Filho / Resumo: Este estudo objetivou avaliar a capacidade de liberação e difusão de íons hidroxila, e a atividade antibacteriana de medicações intracanal, in vitro. No primeiro experimento, canais radiculares de dentes bovinos foram instrumentados. Uma cavidade de 4 mm de comprimento, 2 mm de largura e 0,5 mm de profundidade foi confeccionada no terço médio/apical radicular de cada amostra. A abertura coronária e a superfície externa radicular foram seladas com adesivo e esmalte para unhas, exceto a área da cavidade preparada. Os canais radiculares foram preenchidos com as seguintes medicações: G1: hidróxido de cálcio (Ca(OH)2)/soro; G2: Calen; G3: Calen/PMCC; G4: Calen/Clorexidina (CLX) a 0,4%. Os dentes foram armazenados individualmente em frascos contendo água destilada a 37oC. As medições do pH foram realizadas nos períodos de 1, 3, 7, 14, 21, 30 e 60 dias, com utilização de pHmetro digital. Os resultados mostraram aumento significativo do pH a partir de 3 dias para a pasta Calen/CLX e para as demais pastas a partir de 7 até os 14 dias. Para a pasta Calen ocorreu aumento até os 21 dias. A pasta Calen/PMCC apresentou pH mais elevado até 21 dias, sendo os resultados semelhantes para todos grupos aos 30 dias. Aos 60 dias, os maiores valores de pH foram observados para as pastas Calen/PMCC e Calen. Conclui-se que as diferentes composições de pastas à base de Ca(OH)2 proporcionam difusão de íons hidroxila pela dentina radicular. Em outro experimento, 106 dentes humanos unirradiculados tiveram seus canais radiculares contaminados com Enterococcus faecalis e incubados a 37°C por 21 dias. Em seguida, foram divididos de acordo com a medicação intracanal e o período em: G1: Calen - 7 dias; G2: Calen - 14 dias; G3: Calen/PMCC - 7 dias; G4: Calen/PMCC - 14 dias; G5: Calen/CLX a 0,4% - 7 dias; G6: Calen/CLX a 0,4% - 14 dias; G7: Calen/CLX a 1% - 7 dias; G8: Calen/CLX a 1% - 14 dias.... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: The aim of this study was to evaluate the release and diffusion of hydroxil ions, and the antibacterial activity of intracanal medication, in vitro. At first study, root canals from bovine teeth were instrumented. A cavity with 4 mm of length, 2 mm of width and 0.5 mm of depth was opened at middle/apical third of each sample. The coronal opening and the external surface of the roots were coated with a nail polish layer and a layer of sticky wax, except on the cavity area. Root canals were filled with the following intracanal medication: G1: calcium hydroxide powder with saline solution (Ca(OH)2); G2: Calen; G3: Calen/PMCC; G4: Calen/Chlorhexidine (CHX) 0.4%. Teeth were stored individually in recipients with distilled water at 37oC. Measurements of pH were made at periods of 1, 3, 5, 7, 14, 21, 30 and 60 days, using a digital pH meter. Results showed a significant increase of pH from 3 days for Calen/PMCC, and from 7 until 14 days for the other medications. For Calen, an increase was observed until 21 days. Calen/PMCC showed the highest pH until 21 days, and all the groups had similar results at 30 days. At 60 days, the highest pH values were observed for Calen/PMCC and Calen. It is possible to conclude that different compositions of calcium hydroxide pastes caused diffusion of hydroxil ions through radicular dentin. In another study, 106 single-rooted human teeth had their root canals contaminated with Enterococcus faecalis and incubated at 37oC for 21 days. Then, these teeth were divided according to intracanal medication and periods: G1: Calen - 7 days; G2: Calen - 14 days; G3: Calen/PMCC - 7 days; G4: Calen/PMCC - 14 days; G5: Calen/CHX 0.4% - 7 days; G6: Calen/CHX 0.4% - 14 days; G7: Calen/CHX 1% - 7 days; G8: Calen/CHX 1% - 14 days. Microbiological samples were collected immediately after intracanal medication removal and after seven days. After serial 10-fold dilutions and culture... (Complete abstract click electronic access below) / Doutor
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Atividade antibacteriana ex vivo de diferentes soluções irrigadoras em biofilme de Enterococcus faecalis sobre a matriz dentinária / Antibacterial activity ex vivo of different irrigating solutions on Enterococcus faecalis biofilms on dentin matrixCristiana Francescutti Murad 18 December 2007 (has links)
O presente trabalho teve por objetivo avaliar ex vivo a atividade antimicrobiana hipoclorito de sódio (NaOCl) 2,5% e 5,25%, clorexidina (CHX) gel e líquida 2% e MTAD em biofilme de Enterococcus faecalis, sobre matriz dentinária humana. 118 incisivos inferiores humanos, com canal único, foram instrumentados e seccionados transversal e longitudinalmente. Os fragmentos radiculares obtidos foram imersos em caldo TSB e autoclavados e em seguida foram inoculados com suspensão de E. faecalis e incubados em estufa a 37C, por 72 horas, para permitir a formação do biofilme. As amostras foram randomicamente divididas em 5 grupos experimentais, com 40 amostras para cada grupo, e dois grupos controle, com 3 amostras cada. O biofilme formado sobre a matriz dentinária foi submetido à ação das soluções antimicrobianas pelos tempos 1, 5, 15 e 30 minutos. A atividade antimicrobiana foi avaliada por meio da contagem de UFCs. Após a ação das soluções antimicrobianas, os fragmentos foram imersos em meio seletivo para enterococos, incubados em estufa a 37 C por 72 horas e avaliados quanto à turbidez do meio. A avaliação do percentual de redução bacteriana em função do tempo e da solução demonstrou não haver diferença estatística entre CHX gel, NaOCl 2,5% e NaOCl 5,25% (p>0,05). Entretanto a CHX líquida e o MTAD foram menos efetivos que NaOCl 2,5% e NaOCl 5,25% (p<0,05) e semelhantes a CHX gel. O tempo de ação de 1 minuto foi o menos efetivo na eliminação bacteriana. Apenas a CHX líquida e o MTAD apresentaram diferenças na eficácia em função do tempo. A CHX foi menos efetiva em 1 e 5 minutos (p<0,05) e o MTAD, em 1 minuto de ação. Ao analisar a viabilidade bacteriana intra-dentinária, o NaOCl 5,25% e o MTAD foram superiores a CHX gel, CHX líquida e NaOCl 2,5%; e o tempo de 30 minutos foi estatisticamente significativo em relação aos demais (p<0,05). Baseado nos resultados obtidos parece-nos lícito concluir que o NaOCl 2,5% e 5,25% e a CHX gel 2% foram mais eficazes na eliminação de E. faecalis em todos os tempos testados. O MTAD apresentou efetiva ação antimicrobiana a partir de 5 minutos de ação. Porém quando foi avaliada a atividade antimicrobiana no interior da dentina, o NaOCl 5,25% e o MTAD foram mais efetivos, sendo necessário tempo mínimo de 30 minutos para ampla eliminação bacteriana no interior dos túbulos dentinários. / The present study aimed to evaluate ex vivo the antimicrobial activity of sodium hypochlorite (NaOCl) 2.5% and 5.25%, chlorhexidine (CHX) liquid and gel 2% and MTAD in Enterococcus faecalis biofilms, on human dentin matrix. 118 mandibular human incisors, single rooted, were instrumented and sectioned transversal and longitudinally. The root sections obtained were immersed in TSB broth and autoclaved, thereafter, they were inoculated with suspensions of E. faecalis and incubated at 37C, for 72h to allow biofilm formation. Samples were randomly divided in 5 experimental groups, with 40 samples per group, and 2 control groups, with 3 samples each. The biofilm developed over the dentin matrix was placed under the action the antimicrobial solutions for 1, 5, 15 e 30 minutes. The antimicrobial activity was assessed through CFU counts. After the action of the antimicrobial solutions, the root fragments were immersed in an Enterococci selective broth, incubated at 37 C for 72 hours, and evaluated for broth turbidity. The analysis of the percentage of bacterial reduction depending on the time and on the solution demonstrated no statistic difference among the CHX gel, NaOCl 2.5% and 5.25%(p>0.05). However, the CHX liquid and MTAD were less effective than NaOCl 2,5% and NaOCl 5,25% (p<0.05) and similar to CHX gel. Only CHX liquid and MTAD had statistical differences in its efficacy depending on the time. CHX was less effective in 1 and 5 minutes (p<0.05) and MTAD in 1 minute. When analyzing the bacterial viability in the dentin, NaOCl 5.25% and MTAD were superior to CHX gel, CHX liquid and NaOCl 2,5%; and the time of 30 minutes was statistically different than the others (p<0.05). Based on the results obtained it seems licit to conclude that NaOCl 2,5% and 5,25% and CHX gel 2% were the most effective in the elimination of E. faecalis at all times tested. MTAD presented effective antimicrobial action after 5 minutes of action. However, when the bacterial survival in the dentin was assessed, NaOCl 5.25% and MTAD were the most effective, and the minimum time for wide bacterial elimination in the dentinal tubules was 30 minutes.
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Utilização da terapia fotodinâmica associada ou não ao hipoclorito de sódio na instrumentação de canais radiculares contaminados com Enterococcus faecalis / The use of photodynamic therapy associated or not to sodium hypochlorite in the instrumentation of radicular canals contaminated by Enterococcus faecalisLilian Ferreira Freitas 22 May 2009 (has links)
O presente trabalho teve por objetivo avaliar a ação do laser de baixa intensidade associado ao corante azul de toluidina, como agente bactericida durante a fase de instrumentação dos canais radiculares, comparando sua utilização associada ou não ao hipoclorito de sódio 0,5%. Para tal, 90 caninos humanos foram instrumentados, autoclavados e 88 imersos em caldo TSB(Tryptcase Soy Broth). Em seguida foram inoculados com suspensão de E. faecalis e incubados em estufa a 37C, por 72 horas, para permitir a formação do biofilme. As amostras foram randomicamente divididas em 4 grupos de 22 dentes cada e 1 grupo controle negativo com 2 dentes. Grupo I: reinstrumentados e irrigados com soro fisiológico com posterior aplicação de terapia fotodinâmica (PDT); Grupo II: reinstrumentados e irrigados com hipoclorito de sódio a 0,5% com posterior aplicação de PDT; Grupo III: reinstrumentados e irrigados com hipoclorito de sódio a 0,5%; Grupo IV controle positivo: não foi realizado nenhum tipo de tratamento antes da coleta do material e Grupo V controle negativo:não foram contaminados. Para a coleta da dentina intracanal utilizou-se uma broca Gates Glidden número 6. A atividade antimicrobiana foi avaliada por meio da contagem de UFCs (unidades formadoras de colônias). Os dentes foram então imersos em meio seletivo para enterococos, incubados em estufa a 37 C por 72 horas e avaliados quanto à alteração de coloração do meio. Todas as amostras, exceto o controle negativo, apresentaram-se positivas. Com a finalidade de certificar-se da formação do biofilme e da confirmação dos resultados das contagens das UFCs, 9 amostras foram avaliadas ao MEV (microscopia eletrônica de varredura). Para a análise dos resultados utilizou-se o teste de Kruskal-Wallis e o teste de comparações múltiplas de Tukey, ambos com o nível de significância de 5%. Baseado nos resultados obtidos parece-nos lícito concluir que não houve diferença estatística significante entre o grupo hipoclorito e o hipoclorito com laser e que PDT associada à instrumentação com soro fisiológico não foi capaz de eliminar o E. faecalis de forma significativa. / This current paper aims to assess the action of low-intensity laser together with toluidine blue as a bactericidal agent during the instrumentation phase of radicular canals, comparing its associated or non-associated use with sodium hypochlorite 0.5%. To do so, 90 human canines were instrumented, autoclaved, and 88 were immersed into TSB, and were then inoculated with an E. faecalis suspension and brought into an incubator at 37 degrees Celsius for 72 hours in order to allow the formation of biofilm. The samples were randomly divided into 5 groups, 4 of which composed of 22 samples each plus 1 negative control. Group I: reinstrumented and irrigated with saline solution and subsequent application of photodynamic therapy (PDT); Group II: reinstrumented and irrigated with sodium hypochlorite 0.5% and subsequent PDT application; Group III: reinstrumented and irrigated with sodium hypochlorite 0.5%; Group IV: positive control (no previous treatment before material collection); Group V: negative control (2 samples) with no contamination. The collection of intracanal dentin was obtained by using a Gates Glidden drill #6. The antimicrobial activity was assessed by CFUs counting. The teeth were then immersed in a selected medium for Enterococcus, incubated at 37 degrees Celsius for 72 hours. They were then assessed for medium turbidity. All samples, with the exception of the negative control, showed positive. In order to make sure of the formation of biofilm and the confirmation of the CFUs counting, 9 samples were scavenged under the electron microscope. For result assessment, the Kruskal-Wallis test and the Tukeys multiple comparison test were utilized, presenting both tests a rate and significance of 5%. Based on the results obtained, we may licitly conclude that there was no significant statistical difference between the hypochlorite group and the hypochlorite group with laser. We may still conclude that PDT associated with saline solution instrumentation was not possible to significantly eliminate E. faecalis.
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Capacidade de selamento de três materiais retrobturadores frente à infiltração microbiana por Enterococcus faecalis / Sealing ability of three root-end filling materials front to the microbial leakage by Enterococcus faecalisLuciana Carvalho Reis 02 February 2010 (has links)
O objetivo deste estudo foi comparar a capacidade de selamento apical de três materiais retrobturadores em dentes submetidos à infiltração microbiana por Enterococcus faecalis. Além de analisar a ocorrência da infiltração microbiana em relação à variável tempo. Para tal, foram utilizados 80 caninos superiores permanentes humanos extraídos, instrumentados com o sistema rotatório ProTaper Universal (MAILLEFER) e obturados pela técnica de compactação lateral, com dois tipos de cimento endodôntico: Endofill (DENTSPLY) e AH Plus (DENTSPLY). A apicetomia foi realizada com a remoção de 3mm do terço apical e o retropreparo confeccionado com pontas ultrasônicas. As amostras foram subdivididas, aleatoriamente, em 6 grupos com 10 dentes cada, e 2 grupos controles. Os materiais utilizados para a retrobturação foram MTA branco (ANGELUS), IBC BioAggregate (INNOVATIVE BIOCERAMIX INC.) e Acroseal (SEPTODONT). Foram confeccionados dispositivos para fixação dos dentes aos tubos Eppendorfs. As amostras foram inoculadas com cepas de E. faecalis e incubadas a 37C, por um período de 90 dias, para análise da presença de turvação do meio Enterococcosel. Para a realização da análise estatística foram utilizados os seguintes testes: Qui-quadrado com Prova Exata de Fisher e Kruskal-Wallis. Os resultados mostraram que todos os grupos nos quais foi realizada a obturação e a posterior retrobturação apresentaram infiltração. Comparando todos os grupos, não houve diferença significativa entre os materiais testados. Em relação apenas aos materiais retrobturadores, o Acroseal obteve a menor infiltração, seguido do MTA branco e do IBC BioAggregate. As amostras obturadas com o cimento Endofill não apresentaram diferença estatística em relação à variável tempo. Porém, nas amostras obturadas com o cimento AH Plus, houve maior ocorrência de infiltração nas amostras retrobturadas com o IBC BioAggregate e menor infiltração nas amostras retrobturadas com Acroseal, com diferença estatisticamente significante ao nível de 10%. / The objective of this study was to compare the apical sealing ability of three root-end filling materials in teeth submitted to the microbial leakage by Enterococcus faecalis. Besides analyzing the occurrence of the microbial leakage in relation to the variable time.For such, 80 canine permanent superior teeth extracted from humans were used, which were instrumented with ProTaper Universal system (MAILLEFER) and filled by the lateral compaction technique, with two types of endodontic sealers: Endofill (DENTSPLY) and AH Plus (DENTSPLY). The apices were resected with the removal of 3mm of the apical third and the root-end cavities prepared with ultrasonic tips. The samples were subdivided, randomly, in 6 groups with 10 teeth each, and 2 control groups. The materials used for the retrofilling were white MTA (ANGELUS), IBC BioAggregate (INNOVATIVE BIOCERAMIX INC.) and Acroseal (SEPTODONT). Devices were made for fixation of the teeth to the Eppendorf tubes. The filling samples were inoculated with strains of E. faecalis and incubated at 37C, for a period of 90 days, for analysis of the presence of turbidity of Enterococcosel medium. For the accomplishment of the statistical analysis the following tests were used: Qui-square with Exact Proof of Fisher and Kruskal-Wallis. The results showed that all the groups in which the filling was accomplished and the subsequent retrofilling presented leakage. Comparing all groups, there was not significant difference among the tested materials. In regard to only the root-end filling materials, Acroseal obtained the smallest leakage, followed by white MTA and IBC BioAggregate. The samples filled with the sealer Endofill didn't present statistical difference in relation to the variable time. However, in the samples filled with the sealer AH Plus, there was larger leakage occurrence in the samples retrofilled with IBC BioAggregate and smaller leakage in the samples retrofilled with Acroseal, with statistically significant difference at a 10% level.
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Estudo da degradaÃÃo microbiana in vitro do Poli (1,4-trans-isopreno) (in natura) e em cones dentÃrios. / Study of in vitro degradation of poly (1,4-trans-isoprene)(in nature)and in dental conesLute Rafael de Souza 21 September 2012 (has links)
CoordenaÃÃo de AperfeiÃoamento de Pessoal de NÃvel Superior / Os cones de guta-percha usados em endodontia, compostos de poli (1,4-trans-isopreno), ZnO e/ou BaSO4 e ceras/resinas, foram feitos para durar a vida inteira nos canais radiculares por eles preenchidos. Entretanto, existem evidÃncias de que esses materiais sofrem degradaÃÃo com o decorrer do tempo de obturaÃÃo intensificada quando existem infecÃÃes por microrganismos. A bactÃria Enterococcus faecalis à um desses microrganismos, normalmente associada com infecÃÃes periapicais persistentes. A prevalÃncia dessa bactÃria em casos de re-tratamento ocorre entre 29 e 79% dos casos. O objetivo do trabalho à estudar a degradaÃÃo bacteriana de cones de guta-percha em meio contendo E. faecalis, com o foco na matÃria orgÃnica, o poliisopreno. Cada amostra de cone foi imersa em meio de sais minerais com inÃculo de concentraÃÃo de 5,4x105 UFC/mL por perÃodos de 10 a 100 dias. Os cones foram removidos do contato com o inÃculo em tempos variados e analisados. Foram pesados e caracterizados por TGA, GPC, FTIR, MEV e RMN H1. O crescimento do inoculo foi monitorado atravÃs de medidas de densidade Ãptica, determinaÃÃo da porcentagem de mineralizaÃÃo de CO2, medidas da biomassa seca de cÃlulas, medidas de pH e contagem de cÃlulas. A atividade antimicrobiana dos constituintes inorgÃnicos dos cones foi verificada mediante o teste de difusÃo em poÃo. Foi observada perda gradual de massa dos cones com o tempo de degradaÃÃo. O aumento no teor de resÃduos em 800ÂC, mostra que houve uma perda progressiva de matÃria orgÃnica e um aumento na proporÃÃo de constituintes inorgÃnicos. ApÃs o contato com E. faecalis, o poliisopreno isolado dos cones das marcas Odous e Tanari foi analisado e comparado com o poliisopreno in natura por GPC e FTIR. Os resultados mostram que nos trÃs casos ocorre uma pequena e gradual perda de massa molar do poliisopreno constituintes do material, mais evidenciada no poliisopreno in natura. Os espectros de infravermelho mostram que a degradaÃÃo tambÃm ocorre com modificaÃÃes estruturais do polÃmero, especialmente no surgimento de bandas de deformaÃÃo de C=O e OH/OOH; e variaÃÃes no padrÃo de cristalinidade das bandas de C=C-H. As imagens de MEV mostram que podem ocorrer mudanÃas na morfologia da superfÃcie dos cones biodegradados, resultado do ataque seletivo ao componente orgÃnico. Os espectros de RMN de H1 do poliisopreno in natura mostram que o material sofreu pequenas mudanÃas estruturais nas molÃculas de poliisopreno durante o bioensaio. Todos os bioensaios de monitoramento indicaram que o inÃculo cresce continuamente durante o perÃodo de contato com os cones ou com o poliisopreno in natura. A bactÃria degrada a matÃria orgÃnica dos cones usando-os como fonte de substrato e, consequentemente, causando vazios nos cones que podem ocasionar falhas no tratamanto endodÃntico. / The gutta-percha cones used in endodontic therapy, consisting of poly (1,4-trans-isoprene), ZnO and/or BaSO4 and wax/resin, were meant to last a lifetime in root canals filled by them. However, there is evidence that these materials suffer degradation with the passage of time when there shutter intensified infections by microorganisms. The bacterium Enterococcus faecalis is one of those microorganisms commonly associated with persistent periapical infections. The prevalence of this bacterium in cases of re-treatment is between 29% and 79% of cases. The objective is to study the bacterial degradation of gutta-percha in medium containing E. faecalis, with the focus on organic matter, polyisoprene. Each sample cone was immersed in mineral salts medium with inoculum concentration of 5.4 x 105 CFU/mL for periods of 10 to 100 days. The cones were removed from contact with the inoculum at various times and analized. Were weighed and characterized by TGA, GPC, FTIR, NMR H1 and SEM. The growth of the inoculum was monitored by optical density measurements, determining of percentage of mineralization of CO2, measured dry biomass cells, measurements of pH and cell count. The antimicrobial activity of inorganic constituents of cones was verified by diffusion test pit. Was observed gradual loss of mass of the cones with the degradation time. The increase in the ash content at 800 ÂC, shows that there was a progressive loss of organic matter and an increased proportion of inorganic constituents. After contact with E. faecalis, polyisoprene isolated cones marks Odous and Tanari was analized and compared and the fresh polyisoprene by GPC and FTIR. The results show that in all three cases there is small and gradual loss of the molar mass of the polyisoprene constituents of material, the more evidente in polyisoprene in nature. Infrared spectra show that degradation also ocurrs with strutural modifications of the polymer, especially in the occurrence of deformation bands of C=O and OH/OOH, and variations in the pattern of cristalinity of the bands of C=C-H. The SEM images show that changes may ocurr in the surface morphology of the cones biodegraded, resulting the from selective attack to the organic component. The NMR H1 spectra of polyisoprene fresh show that the material has undergone minor structural changes in the molecules of polyisoprene during bioassay. All bioassays monitoring indicated that the inoculum grows continuously during the period of contact with the cones or polyisoprene in nature. The bacteria degrades the organic matter of the cones using them as a source of substrate and thereby causing voids cones that can cause failure in endodontic treatment.
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Avaliação in vitro da atividade antimicrobiana de pastas endodônticas à base de extrato glicólico de Musa paradisiaca frente a Enterococcus faecalisSilva, Maurício Bacarin 15 June 2011 (has links)
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Previous issue date: 2011-06-15 / The products of Musa paradisiaca (banana plantain) are used as a sedative for dental pain, healing of tooth extraction surgical wounds, gastric ulcer, hypoglycemic, antidote for snake bites, diarrhea among other indications in communities that have a tradition of using plants as alternative medicine. In Endodontics, it aspires to be an ideal intracanal medicament against resistant strains in refractory endodontic infections. Therefore, the objective of this study was to test the antimicrobial activity of Musa paradisiaca glycolic extract. To perform the experiment, the Musa paradisiaca glycolic extract replaced Polyethylene glycol 400, which is a vehicle that makes up some pastes used as Endodontic intracanal medication. Well agar diffusion test was used to evaluate the antimicrobial activity against strains of Enterococcus faecalis usually related to refractory endodontic infections. Different materials were inserted in wells in two experimental steps as characterized in the following groups. Experiment A : Group 1, Polyethylene glycol 400 (PEG 400 - negative control); Group 2, PEG 400 and calcium hydroxide (Ca(OH)2); Group 3, Musa paradisiaca Glycolic Extract (EGB); Group 4, EGB and Ca(OH)2; Group 5, 2% chlorhexidine gel (CHX - positive control). Experiment B : Group 1, PEG 400 (negative control); Group 2, PEG 400 and zinc oxide (ZnO); Group 3, PEG 400, Ca(OH)2 and ZnO; Group 4, ZnO and EGB; Group 5, EGB, Ca(OH)2 and ZnO; Group 6, CHX (positive control). After incubation, measurements of inhibition zones were performed after 18 hours with a millimeter ruler. Just EGB and ZnO paste obtained statistically significant antimicrobial activity with similar results to the positive control and was subjected to macrodilution, a finding for minimum inhibitory concentration, but no dilution of the paste was able to prevent the growth of E. faecalis. These data were treated statistically at 95% significance using the Mann-Whitney test and Descriptive Statistics. The composition of EGB was assessed by Mass Spectrometry with Electrospray Ionization and it was found that one of the major components could be maltose. Thin Layer Chromatography (CCD) was carried out in phases of ethyl acetate, dichloromethane and aqueous partition resulting from liquid/liquid held in EGB, after drying under a hood. CCD suggested the presence of flavonoids, terpenes, tannins and steroids in EGB. The Nuclear Magnetic Resonance Spectroscopy was performed in order to also propose the composition of EGB and observed a large number of signal peaks in the region concerning the glycosides, as well as peaks corresponding to the structure of terpenes and a few characteristic of steroids. The EGB showed antimicrobial activity when combined with ZnO and can be an alternative to the composition of an intracanal medication. Every new biomaterial based on ethnobotany should be carefully tested to allow its clinical applicability, which justified the relevance of this preliminary study; however physico-chemical and biocompatibility tests are essential to future employment of herbal medicines in Endodontics / Os produtos de Musa paradisiaca (bananeira) são usados como sedativo para dor de dente, cicatrizante de feridas cirúrgicas de exodontia, úlcera gástrica, hipoglicemiante, antídoto para picada de cobras, diarréia entre outras indicações em comunidades que têm por tradição o uso das plantas como medicina alternativa. Na Endodontia, almeja-se uma medicação intracanal ideal contra cepas resistentes em infecções endodônticas refratárias. Por esse motivo, o objetivo desse trabalho foi testar a atividade antimicrobiana do extrato glicólico de Musa paradisiaca sobre Enterococcus faecalis. Para realizar o experimento, o extrato glicólico de Musa paradisiaca substituiu o Polietileno glicol 400, que é um veículo que compõe algumas pastas endodônticas usadas como medicação intracanal. Foi utilizado o teste de difusão em Ágar, pelo método do poço, para a avaliação da atividade antimicrobiana contra a cepa de Enterococcus faecalis normalmente relacionada a infecções refratárias endodônticas. Foram inseridos nos poços diferentes materiais que caracterizam os seguintes grupos em duas etapas experimentais. Experimento A : Grupo 1, Polietileno glicol 400 (PEG 400 - controle negativo); Grupo 2, PEG 400 e Hidróxido de cálcio (Ca(OH)2); Grupo 3, Extrato Glicólico de Musa paradisíaca (EGB); Grupo 4, EGB e Ca(OH)2; Grupo 5, gel de Clorexidina 2% (CHX controle positivo). Experimento B : Grupo 1, PEG 400 (controle negativo); Grupo 2, PEG 400 e Óxido de zinco (ZnO); Grupo 3, PEG 400, Ca(OH)2 e ZnO; Grupo 4, EGB e ZnO; Grupo 5, EGB, Ca(OH)2 e ZnO; Grupo 6, CHX (controle positivo). Após incubação, as medições dos halos de inibição foram realizadas após 18 horas com uma régua milimetrada. Apenas a pasta de EGB e ZnO obteve atividade antimicrobiana estatisticamente significante com resultados similares ao controle positivo e foi submetida à macrodiluição para que fosse verificada a concentração inibitória mínima, mas nenhuma diluição da pasta foi capaz de evitar o crescimento de E. faecalis. Esses dados foram tratados estatisticamente a 95% de significância usando o teste de Mann-Whitney e a Estatística Descritiva. A composição do EGB foi avaliada por Espectrometria de Massas com Ionização por Electrospray e foi verificado que um dos componentes majoritários poderia ser a maltose. A Cromatografia de Camada Delgada (CCD) foi realizada nas fases de acetato de etila, diclorometano e aquosa resultantes da partição líquido/líquido realizada no EGB, depois de seco em capela. A CCD sugeriu a presença de flavonóides, terpenos, taninos e esteróides no EGB. A Espectroscopia de Ressonância Magnética Nuclear foi realizada com o propósito de supor a composição do EGB e foi observado grande número de picos de sinais na região referente aos glicosídeos, assim como picos referentes à estrutura molecular de terpenos e um sinal característico de esteróides. O EGB apresentou atividade antimicrobiana quando associado ao ZnO, podendo ser uma propriedade importante para a composição de um novo medicamento intracanal. Todo novo biomaterial baseado na etnobotânica deve ser testado criteriosamente para viabilizar sua aplicabilidade clínica, o que justificou a pertinência deste estudo preliminar, no entanto testes físico-químicos e de biocompatibilidade são imprescindíveis para futuro emprego de fitoterápicos na Endodontia
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Efeito antibacteriano proporcionado pelo sistema Endox associado a diferentes protocolos de irrigação no preparo de canais radiculares infectados / Antibacterial effect provided by Endox system associated with different irrigation protocolsCoelho, Alessandra Rossi 12 March 2015 (has links)
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Previous issue date: 2015-03-12 / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de Goiás - FAPEG / Objectives: To determine the antibacterial effect provided by Endox system
associated with different irrigation protocols in the preparation of infected root canals.
Material and methods: A total of 18 extracted human teeth with anatomical
diameters corresponding to approximately 350-400 micrometers were selected. The
teeth were contaminated with suspension of Enterococcus faecalis (ATCC 29212) for
60 days and randomly divided into five groups: 1. root canal preparation (RCP) +
passive ultrasonic irrigation (PUI) with NaOCl + EDTA; 2. RCP + PUI with NaOCl +
EDTA + Endox system; 3. RCP + conventional irrigation (CI) with NaOCl + EDTA 4.
RCP + CI with NaOCl + EDTA + Endox system; 5. RCP + PUI with distilled water +
EDTA + Endox system. Three teeth uncontaminated were the negative control (group
6). Samples were taken from the root canals before the RCP after 20 minutes and 72
hours, immersed in 7 ml of Brain Heart Infusion (BHI) for a period of 48 hours,
incubated at 37 °C. The presence of bacterial was assessed by turbidity of the
culture medium followed by optical density analysis using UV spectrophotometer.
The differences between groups were statistically analyzed by mean, standard
deviation, variance analysis and Tukey test (post hoc). The significance level was 5%.
Results: The presence of E. faecalis was observed after 72 h in all experimental
groups. In Groups 2 and 4 decreased the optical density of the culture medium after
72 h, with no significant difference between them, while in Groups 1, 3 and 5 was
increased. The average optical density of the culture medium was zero in Group 6.
Conclusion: The Endox system used after the root canal preparation, associated
with conventional irrigation or passive ultrasonic irrigation with NaOCl 2,5% / EDTA,
was not effective in eliminating E. faecalis. / Objetivo: Avaliar o efeito antibacteriano proporcionado pelo sistema Endox
associado a diferentes protocolos de irrigação durante o preparo de canais
radiculares (PCR) infectados. Material e método: Foram selecionados 18 dentes
humanos anteriores extraídos com diâmetros anatômicos correspondentes a
aproximadamente 350-400 micrômetros. Os dentes foram contaminados com
suspensão de Enterococcus faecalis (ATCC 29212) por 60 dias, e aleatoriamente
distribuídos em cinco grupos experimentais: Grupo 1. PCR + irrigação ultrassônica
passiva (IUP) com NaOCl 2,5% + EDTA; Grupo 2. PCR + IUP com NaOCL 2,5% +
EDTA + sistema Endox; Grupo 3. PCR + irrigação convencional (IC) com NaOCl
2,5% + EDTA Grupo 4. PCR + IC com NaOCl 2,5% + EDTA + sistema Endox;
Grupo 5. PCR + IUP com água destilada + EDTA + sistema Endox. Três dentes não
contaminados constituíram o grupo controle negativo (Grupo 6). Amostras foram
coletadas dos canais radiculares antes do PCR, após 20 minutos e 72 horas,
imersas em 7 mL de Brain Heart Infusion (BHI) por um período de 48 horas,
incubadas a 37ºC. A presença bacteriana foi analisado pela turvação do meio de
cultura seguido pela mensuração da densidade óptica utilizando espectrofotômetro
UV. As diferenças entre os grupos foram analisadas estatisticamente pela média,
desvio padrão, análise de variância e teste de Tukey (post hoc). O nível de
significância foi de 5%. Resultados: A presença de E. faecalis foi observada, após
72 h, em todos os grupos experimentais. Nos Grupos 2 e 4 houve redução da
densidade óptica do meio de cultura após 72 h, não havendo diferença significativa
entre ambos, enquanto que nos Grupos 1, 3 e 5 houve aumento. A média da
densidade óptica do meio de cultura no Grupo 6 foi zero. Conclusão: O sistema
Endox, utilizado após o preparo do canal radicular, associado a irrigação
convencional ou irrigação ultrassônica passiva, com NaOCl a 2,5%/ EDTA, não foi
efetivo na eliminação do E. faecalis.
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