Submitted by NÁDIA DOMINGUES null (nadia.domingues@fosjc.unesp.br) on 2018-03-23T14:13:36Z No. of bitstreams: 1 Tese completa.pdf: 3393326 bytes, checksum: 5504238a789ee1c43fe177b59d548064 (MD5) / Approved for entry into archive by Silvana Alvarez null (silvana@ict.unesp.br) on 2018-04-03T21:02:08Z (GMT) No. of bitstreams: 1 domingues_n_dr_sjc.pdf: 3393326 bytes, checksum: 5504238a789ee1c43fe177b59d548064 (MD5) / Made available in DSpace on 2018-04-03T21:02:08Z (GMT). No. of bitstreams: 1 domingues_n_dr_sjc.pdf: 3393326 bytes, checksum: 5504238a789ee1c43fe177b59d548064 (MD5) Previous issue date: 2018-02-07 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / Os micro-organismos estão cada vez mais resistentes aos medicamentos disponíveis tanto na medicina quanto na odontologia, e esta resistência é ainda maior quando estão organizados em biofilmes mono ou multiespécies, de modo que o estudo de antimicrobianos alternativos, como fitoterápicos, estão em crescente ascensão. A interação entre leveduras e bactérias está intimamente presente na cavidade bucal, em que nichos como dentes, língua, mucosa e bolsa periodontal, nutrientes e temperatura adequados promovem condições favoráveis para formação do biofilme. Com isso, o objetivo deste trabalho foi avaliar a atividade antimicrobiana dos extratos de Pfaffia paniculata K (pfaffia), Hamamelis virginiana L. (hamamelis), Stryphnodendron barbatiman (barbatimão) e Gymnema sylvestre (gimena) em biofilmes heterotípicos de Candida albicans (ATCC 18804) com Streptococcus mutans (ATCC 35688), Staphylococcus aureus (ATCC 6538), Enterococcus faecalis (ATCC 4083) e Pseudomonas aeruginosa (ATCC 15442). Para isso, suspensões padronizadas em 107 cels/mL dos micro-organismos testes, foram distribuídos em placas de microtitulação de 96 poços, juntamente 100 µL de caldo BHI. As placas foram incubadas em estufa bacteriológica a 37ºC/48h (5% de CO2 para S. mutans) e, após, os biofilmes foram submetidos ao tratamento com os extratos por 5 min e 24 h, nas respectivas concentrações de 100 mg/mL, 50 mg/mL e 25 mg/mL. Foi utilizado solução salina 0,9% (5 min) ou caldo BHI (24 h) nos grupos controles. Após, os biofilmes foram lavados e desagregados do fundo da placa e diluições seriadas foram semeadas em ágar seletivo para cada micro-organismo. Foram realizadas contagens de UFC/mL (log10) após 24 h de incubação e analisadas estatisticamente pelo método Kruskal-Wallis suplementado pelo teste de Dun’s (p<0.05). Os resultados obtidos indicaram reduções significativas promovidas pelos extratos nos dois tempos de tratamento analisados. Foi observado que o extrato de H. virginiana apresentou redução de todos os grupos analisados no tempo de tratamento de 24 h. Conclui-se que os extratos de P. paniculata, H. virginiana, S. barbatiman e G. sylvestre apresentaram ação antimicrobiana sobre biofilmes muliespécie de C. albicans com as bactérias de interesse médico-odontológico, nos tempos de tratamento de 5 min e 24 h. / Microorganisms are increasingly resistant to drugs available in both medicine and dentistry, and this resistance is even greater when they are organized into mono or multispecies biofilms, so that the study of alternative antimicrobials, such as herbal medicines, are on the rise. The interaction between yeasts and bacteria is intimately present in the oral cavity, in which niches such as teeth, tongue, mucosa and periodontal pocket, food and adequate temperature promote adequate conditions for biofilm formation. The aim of this study was to evaluate the antimicrobial activity of extracts of Pfaffia paniculata K., Hamamelis virginiana L., Gymnema sylvestre and Stryphnodendron barbatiman M. in heterotopic biofilms of Candida albicans (ATCC 18804) with Streptococcus mutans (ATCC 35688). Staphylococcus aureus (ATCC 6538), Enterococcus faecalis (ATCC 4083), and Pseudomonas aeruginosa (ATCC 15442). Standardized suspensions at 107 cells/mL of the test microorganisms were distributed in 96 well microtiter plates together with 100 μL of BHI broth, the plates were incubated in a bacteriological oven at 37°C/48h (5% CO2 for S. mutans). After the incubation time, treatments were performed at 5 min and 24 h times, applying the respective extracts at the concentrations of 100 mg, 50 mg and 25 mg/mL and applying 0.9% saline solution or BHI broth in the control groups. After the biofilms were washed and disaggregated from the bottom of the plate, performing serial dilutions for later seeding in selective agar. UFC/ml (log10) counts were performed after 24 h of incubation and statistically analyzed Kruskal-Wallis method supplemented by the Dun's test (p<0.05%). The obtained results indicated significant reductions promoted by extracts in the two treatment times analyzed. It was observed that the extract of H. virginiana showed reduction of all the analyzed groups without treatment time of 24 h. It is concluded that the extracts of P. paniculata, H. virginiana, S. barbatiman and G. sylvestre presented antimicrobial action after analysis of the heterotypic biofilms of C. albicans with the bacteria of medical and dental interest, in the treatment times of 5 min and 24 h.

Orientador: Wirley Gonçalves Assunção / Coorientadora: Cristiane Duque / Banca: Juliano Milanezi de Almeida / Banca: Erica Alves Gomes / Resumo: O objetivo desta pesquisa foi avaliar a eficácia do material Loctite 2400® como de agente de vedação no selamento da interface pilar/implante contra a infiltração e formação de biofilmes isolados e mistos de C. albicans e E. faecalis no interior de conexões protéticas HE e CM. Foram formados 216 conjuntos de implantes com seus pilares protéticos e parafusos de retenção. Deste total, foram formados 6 grupos (n=36) de acordo com cada biofilme em função do período de incubação (7 e 14 dias) e conexão de implantes HE e CM (n=18) divididos em função do uso do material (n=9). Os biofilmes foram analisados por meio da contagem UFC/ml. Para análise qualitativa do biofilme misto formado aos 7 dias, foi realizada MEV. A análise do agente de vedação nas junções parafusadas foi realizada por meio de fotografias de conjuntos secionados. Para comparar as médias dos dados de contagem das UFC/mL para os ensaios de biofilme isolado de E. faecalis e C. albicans, os dados foram analisados pelo teste de ANOVA a dois critérios seguida pelo teste de Bonferroni considerando (α=5%). E para biofilme misto, foi utilizado o teste t Student. A contagem UFC/ml isolado de E. faecalis e C. albicans, apresentou diferença estatística significante de todos os grupos teste em relação ao controle, em todos os períodos de tempo. Para biofilme misto, não houve crescimento microbiano nos grupos HE, independente do microrganismos e período de tempo avaliado. Nos grupos CM, para E. faecalis, houve diferença estatíst... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / The aim of this research was to evaluate the efficacy of sealing agent in the interface abutment/implant against infiltration of isolated and mixed biofilms of C. albicans and E. faecalis inside EH and MT prosthetic connections. 216 sets of implants with their prosthetic abutments and retaining screws were formed. Of this total, were formed six groups (n = 36) in accordance with each biofilm as function of the incubation period (7 and 14 days) and implant connection EH and MT (n = 18) stratified by use of the material (n = 9). The biofilms were analyzed by counting UFC/mL. For qualitative analysis of the mixed biofilm the SEM analysis was performed at 7 days. The analysis of the sealing agent in the screw joints was performed by photographs of the sectioned sets. To compare the average UFC/mL count data of E. faecalis and C. albicans isolated biofilms, the data were analyzed by two-way ANOVA test followed by Bonferroni test (α = 5%). For mixed biofilms it was applied t Student test. The UFC/mL isolated count for E. faecalis and C. albicans presented statistically significant difference of all the test groups in relation to the control, in all time periods. For mixed biofilm, there was no microbial growth in EH groups, independent of microorganisms and time period evaluated. In MT groups, for E. faecalis, there was statistical difference between MT-C and MT-T groups only in the period of 14-days. For C. albicans, statistically significant difference was observed between the groups MT-C and MT-T independent of the period evaluated. The SEM analysis shows the formation of thick biofilm with a high amount of extracellular matrix for control groups. The visual analysis of the sealing agent shows the presence of the material at the abutment/implant interface and the threads of the screw joint. It was concluded that the presence of the sealing agent... / Mestre

Enterococcus faecalis estão entre as principais causas de infecções hospitalares em todo o mundo e é uma das mais importantes na área clínica devido à presença de inúmeros fatores de virulência que reforçam sua patogenicidade. Estudos mostram que concentrações subinibitórias de antimicrobianos podem alterar a resposta transcricional e fenotípica de bactérias, porém pouco se sabe sobre como a vancomicina pode afetar a expressão gênica nos microrganismos portadores de seus genes de resistência (genes van). Portanto, este trabalho objetivou avaliar presença e expressão de genes vanC em E. faecalis vancomicina-susceptíveis e avaliar o comportamento de isolados Enterococos Vancomicina-Resistentes (EVR) na ausência e presença de concentrações subinibitórias de vancomicina por PCR quantitativa. Identificamos a presença e a expressão de genes vanC em E. faecalis vancomicina-susceptíveis, sendo estes genes específicos para as espécies Enterococcus gallinarum e Enterococcus casseliflavus, sugere-se que o E. faecalis possa tê-los adquirido por transferência horizontal. Verificamos que a presença de vancomicina in vitro é capaz de interferir na modulação de genes de virulência em isolados EVR, porém não interfere na formação de biofilme destes isolados. Embora os dados aqui apresentados refiram-se a testes in vitro, podemos inferir que os genes vanC estão sendo transferidos para outras espécies e que a vancomicina pode estar contribuindo para o aumento na expressão de fatores de virulência in vivo, levando ao agravamento de quadros clínicos. / Enterococcus faecalis are among the leading causes of nosocomial infections worldwide and is one of the most important in the clinical area due to the presence of numerous virulence factors that enhance the pathogenicity. Studies show that sub-inhibitory concentrations of antibiotics can alter the transcriptional and phenotypic response of bacteria, but little is known about the effect of vancomycin in gene expression in microorganism bearers of their resistance genes (genes van). Therefore, this study aimed to evaluate the presence and expression of vanC genes in E. faecalis vancomycin susceptible and evaluate the behavior of vancomycin resistant enterococci (VRE) strains in the absence and presence of sub-inhibitory concentrations of vancomycin for Quantitative-PCR. We have identified the presence and expression of vanC genes in E. faecalis which are specific to Enterococcus gallinarum and Enterococcus casseliflavus species, it is suggested that the E. faecalis may have acquired these genes by horizontal gene transfer. We found that the presence of vancomycin in vitro is able of interfering with modulation of expression of virulence genes in VRE strains but does not interfere in the biofilm formation of these isolates. Although the data presented here were obtained from in vitro tests, we can infer that the vanC genes are being transferred to other species and that vancomycin may be contributing to the increase in the expression of virulence factors in vivo, leading to worseres clinical outcomes.

O peptídeo antimicrobiano P34, produzido por Bacillus sp. P34 é uma substância que vem sendo explorada por apresentar potencial antibacteriano e antiviral. O objetivo deste trabalho foi avaliar o potencial antibiofilme deste composto frente aos biofilmes formados por Staphylococcus aureus e Enterococcus faecalis provenientes de alimentos. Foram realizadas avaliações frente a células planctônicas e sésseis, bem como, sobre os biofilmes formados por estas bactérias. Os resultados obtidos demonstram que a substância antimicrobiana possui capacidade em reduzir o percentual de células microbianas aderidas à superfície, não sendo verificada completa inibição do biofilme. Observou-se um percentual de inibição metabólica das células dos biofilmes dos isolados de S. aureus, porém, as células de E. faecalis apresentaram-se metabolicamente estimuladas. A associação do peptídeo antimicrobiano P34 com a bacteriocina nisina não apresentou efeito sinérgico sobre células de S. aureus F4-1, no entanto, ao ser avaliado individualmente, foi observado efeito bacteriostático sobre este isolado. Na avaliação do efeito deste composto sobre o biofilme polimicrobiano formado por Salmonella Enteritidis ATCC 13076, Candida tropicalis 72-A e S. aureus F4-1 em aço inoxidável tipo AISI 304, observou-se diferença na disposição celular e na arquitetura do biofilme, com diminuição da aderência de células leveduriformes. Na avaliação dos diferentes meios de cultura empregados, a presença de glicose mostra-se como um fator que promoveu um incremento na formação de biofilme de Staphylococcus sp. Os resultados obtidos indicam que a substância apresenta potencial antibiofilme para a espécie S. aureus, e fornecem informações para posteriores estudos sobre os biofilmes polimicrobianos. / The antimicrobial peptide P34, produced by Bacillus sp. P34 is a substance that has been explored by having antibacterial and antiviral potential. The objective of this study was to evaluate the antibiofilm potential of this compound compared to biofilms formed by Staphylococcus aureus and Enterococcus faecalis from food. Evaluations were carried out against planktonic and sessile cells, as well as on biofilms formed by these bacteria. The obtained results evidence that the antimicrobial substance has ability to reduce the percentage of adhered microbial cells to the surface, not being verified complete inhibition of the biofilm. Was observed a metabolic inhibition percentage of cells isolated in the biofilm of S. aureus, however, E. faecalis cells performed metabolically stimulated. The combination of antimicrobial peptide P34 with the nisin bacteriocin showed no synergistic effect on cells of S. aureus F4-1, however, when evaluated individually, bacteriostatic effect was observed on this isolated. In the evaluation of this compound effect on the polymicrobial biofilm formed by Salmonella Enteritidis ATCC 13076, Candida tropicalis 72-A and S. aureus F4-1 on stainless steel AISI 304, difference was observed in the cell layout and biofilm architecture, with reduced adhesion of yeast cells. The evaluation of different culture media used, the presence of glucose is presented as a factor that promoted an increment in the formation of Staphylococcus sp biofilms. The obtained results indicate that the substance presents antibiofilm potential for the S. aureus species, and provide information for further studies about polymicrobial biofilms.

Enterococcus faecalis estão entre as principais causas de infecções hospitalares em todo o mundo e é uma das mais importantes na área clínica devido à presença de inúmeros fatores de virulência que reforçam sua patogenicidade. Estudos mostram que concentrações subinibitórias de antimicrobianos podem alterar a resposta transcricional e fenotípica de bactérias, porém pouco se sabe sobre como a vancomicina pode afetar a expressão gênica nos microrganismos portadores de seus genes de resistência (genes van). Portanto, este trabalho objetivou avaliar presença e expressão de genes vanC em E. faecalis vancomicina-susceptíveis e avaliar o comportamento de isolados Enterococos Vancomicina-Resistentes (EVR) na ausência e presença de concentrações subinibitórias de vancomicina por PCR quantitativa. Identificamos a presença e a expressão de genes vanC em E. faecalis vancomicina-susceptíveis, sendo estes genes específicos para as espécies Enterococcus gallinarum e Enterococcus casseliflavus, sugere-se que o E. faecalis possa tê-los adquirido por transferência horizontal. Verificamos que a presença de vancomicina in vitro é capaz de interferir na modulação de genes de virulência em isolados EVR, porém não interfere na formação de biofilme destes isolados. Embora os dados aqui apresentados refiram-se a testes in vitro, podemos inferir que os genes vanC estão sendo transferidos para outras espécies e que a vancomicina pode estar contribuindo para o aumento na expressão de fatores de virulência in vivo, levando ao agravamento de quadros clínicos. / Enterococcus faecalis are among the leading causes of nosocomial infections worldwide and is one of the most important in the clinical area due to the presence of numerous virulence factors that enhance the pathogenicity. Studies show that sub-inhibitory concentrations of antibiotics can alter the transcriptional and phenotypic response of bacteria, but little is known about the effect of vancomycin in gene expression in microorganism bearers of their resistance genes (genes van). Therefore, this study aimed to evaluate the presence and expression of vanC genes in E. faecalis vancomycin susceptible and evaluate the behavior of vancomycin resistant enterococci (VRE) strains in the absence and presence of sub-inhibitory concentrations of vancomycin for Quantitative-PCR. We have identified the presence and expression of vanC genes in E. faecalis which are specific to Enterococcus gallinarum and Enterococcus casseliflavus species, it is suggested that the E. faecalis may have acquired these genes by horizontal gene transfer. We found that the presence of vancomycin in vitro is able of interfering with modulation of expression of virulence genes in VRE strains but does not interfere in the biofilm formation of these isolates. Although the data presented here were obtained from in vitro tests, we can infer that the vanC genes are being transferred to other species and that vancomycin may be contributing to the increase in the expression of virulence factors in vivo, leading to worseres clinical outcomes.

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:27:45Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2010-03-22Bitstream added on 2014-06-13T19:35:52Z : No. of bitstreams: 1 oliveira_acm_me_arafo.pdf: 2119980 bytes, checksum: 32c2bd96c21560f4239f25df80cee784 (MD5) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / Este estudo teve como objetivo a avaliação da capacidade seladora bacteriana pela via coronária proporcionada por diferentes cimentos endodônticos: Endofill, AH Plus, Sealer 26, Epiphany SE (Self-Etch), Activ GP, Sealapex, Endo CPM Sealer e Cimento Experimental à base de MTA (CE-MTA). Cento e trinta dentes humanos, unirradiculares e extraídos foram divididos em oito grupos experimentais (n=15) e dois grupos controle (n=5). O preparo biomecânico dos canais radiculares foi realizado pela técnica escalonada sob irrigação com solução de hipoclorito de sódio a 1% e ao final solução de EDTA 17%. A obturação foi realizada pela técnica de condensação lateral ativa com cones de guta-percha e um dos cimentos endodônticos ou com cones Resilon e cimento Epiphany SE. Os canais radiculares de um grupo controle foram obturados sem cimento endodôntico e em outro toda superfície externa foi impermeabilizada. Após sete dias mantidos em estufa a 37°C e umidade, o material obturador foi removido parcialmente do canal radicular, sendo mantida uma extensão de 13 mm. Os dentes foram esterilizados em gás óxido de etileno e montados em dispositivo de avaliação da infiltração bacteriana, deixando 5 mm da sua porção apical imerso em caldo BHI. Enterococcus faecalis foi inoculado na porção coronária e sua viabilidade testada a cada 48 horas. As amostras foram observadas diariamente durante 16 semanas para constatação ou não da turvação no meio de cultura posicionado na porção periapical. Os dados foram submetidos aos testes estatísticos de Kaplan-Meier, Kruskal-Wallis e Dunn em nível de significância de 5%. AH Plus e Sealapex apresentaram maior resistência à infiltração coronária, com diferença estatística significante em relação aos cimentos... / The aim of this study was to evaluate the bacterial sealing ability of different endodontic sealers: Endofill (EDF), AH Plus (AHP), Sealer 26 (S26), Epiphany SE (ESE), Activ GP (AGP), Sealapex (SEL), Endo CPM Sealer (CPM) and an experimental MTA-based cement (E-MTA). A hundred and thirty extracted single-rooted human teeth were randomly divided into eight experimental groups (n=15) and two control groups (n=5). Canals were prepared by a step-back technique, irrigated with 1% sodium hypochlorite and EDTA 17%, then filled with gutta-percha and one of the root canal sealers or Resilon and Epiphany SE. Teeth in one of the control groups were filled without sealer and those in the other control group were made impermeable. Teeth were kept at 37°C for 7 days. The coronal portion of the obturating material was removed, leaving 13mm intact. Teeth were sterilized with ethylene oxide gas prior to bacterial leakage assessment. The apical 5 mm of the roots was immersed in BHI broth, which was renewed every 48 hours and Enterococcus faecalis viability was tested at those periods. Leakage was monitored every 24 hours for 16 weeks. Data were analyzed by the Kaplan-Meier, Kruskal-Wallis and Dunn tests at 5% significance. AHP and SEL demonstrated better resistance to bacterial leakage than the other sealers (p<0.05). EDF, ESE and S26 presented intermediate bacterial leakage. AGP, CPM and E-MTA showed more bacterial leakage among all materials tested. All sealers allowed bacterial leakage. The best sealing ability was observed for AH Plus and Sealapex. The glass ionomer and MTA-based materials allowed the most bacterial leakage

Orientador: Juliane Maria Guerreiro Tanomaru / Banca: Denise M Spolidorio / Banca: Flaviana Bombarda de Andrade / Resumo: Medicações intracanal (MIC) são utilizadas para complementar a desinfecção do sistema de canais radiculares. A associação de antimicrobianos ao hidróxido de cálcio visa aumentar sua ação. As MIC (Capítulo 1) hidróxido de cálcio (HC)/óleo de melaleuca (OM) 4,5%/polietilenoglicol 400 (PL), HC/OM 9%/PL, HC/CLX 0,4%/PL e HC/PL (Capítulo 2) HC/farnesol (FAR) 4,5%/PL, HC/FAR 9%/PL e HC/PL foram analisadas. O teste de contato direto sobre células planctônicas (Capítulos 1 e 2) foi realizado utilizando suspensões das MIC. O teste de contato direto das MIC sobre briofilme (Capítulo 2) foi realizado em blocos de dentina bovina (5mm x 5mm x 0,7mm) com biofilme de Enterococcus faecalis induzidos por 15 dias e contato com as suspensões das MIC por 6 horas. A efetividade antibacteriana (Capítulos 1 e 2) foi avaliada em canais radiculares de dentes de humanos extraídos. Canais radiculares de dentes unirradiculares padronizados em 15mm foram preparados até MTwo #40/.04 e contaminados com E. faecalis por 21 dias. As MIC foram mantidas no canal durante 7 dias. A primeira coleta (C1) foi realizada após período de contaminação, a segunda coleta (C2), imediatamente após a remoção das MIC e terceira coleta (C3), realizada 7 dias após a remoção das MIC. Foi realizada contagem de UFCmL-1. O pH foi avaliado após preenchimento de tubos de polietileno (Capítulos 1 e 2) com as pastas por 12 horas, 1, 3, 7, 14, 21 e 28 dias. A difusão de íons hidroxila por meio de dentina bovina (Capítulos 1 e 2) foi ava... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Intracanal medications (ICM) are used to complement desinfection of the root canal system. The association of antimicrobials to calcium hydroxide aims to improve its action. The ICM (Chapter 1) calcium hydroxide (CH)/tea tree oil (TTO) 4.5%/polyethylene glycol 400 (PL), CH/TTO 9%/PL, CH/chlorhexidine (CHX) 0.4%/PL e CH/PL (Chapter 2) CH/farnesol (FAR) 4.5%/PL, CH/FAR 9%/PL and HC/PL were analysed. Direct contact test against E. faecalis planktonic cells (Chapters 1 and 2) was performed by using suspension of ICM. Direct contact test on biofilm (Chapter 2) was performed on bovine dentin blocks (5mm x 5mm x 0.7mm) with E. faecalis biofilms induced by 15 days and contact with the suspensions of ICM for 6 hours. Antibacterial effectiveness was evaluated in root canals of extracted human teeth (Chapters 1 e 2). Standardized single-rooted teeth with 15mm were prepared up to #40/.04 MTwo and contaminated with E. faecalis for 21 days. As ICM were kept within the root canals for 7 days. The first sample (S1) was performed after contamination, S2 immediately after the ICM removal and S3 7 days after the ICM removal.It was performed UFCmL-1 count. pH was evaluated after filling the polyethylene tubes (Chapter 1 and 2) with the ICM for 12 hours, 1, 3, 7, 14, 21 and 28 days. The diffusion of hydroxyl ions through the bovine dentin (Chapters 1 and 2) was evaluated after filling root canals of bovine teeth after 1, 3, 7, 14, 21, 28 and 60 days. Data was statistically analyzed using ANOVA an... (Complete abstract click electronic access below) / Mestre

Orientador: Juliane Maria Guerreiro Tanomaru / Banca: Evandro Watanabe / Banca: Milton Carlos Kuga / Resumo: Este estudo objetivou avaliar o pH, o teor de cloro disponível e a atividade antibacteriana de soluções irrigadoras endodônticas isoladas e associadas frente ao Enterococcus faecalis pelo teste de contato direto (in vitro) e em canais radiculares contaminados (ex vivo). A análise de pH foi realizada por meio de pHmetro digital e o teor de cloro pelo método da iodometria. Na metodologia de contato direto, uma suspensão de E. faecalis foi exposta aos seguintes irrigantes: GI- Solução de hipoclorito de sódio (NaOCl) a 2,5%; GII- NaOCl a 2,5% + ácido cítrico a 10% 7:3 (em volume); GIII- NaOCl a 2,5% + vinagre de maça 5:5 (em volume); GIV- Ácido cítrico a 10%; GV- Vinagre de maça. Os períodos de contato foram 30 segundos, 1, 3 e 10 minutos. O número de unidades formadoras de colônia por mililitro de solução (UFC/mL) foi determinado após diluições decimais seriadas e semeadura em placas de Tryptic Soy Agar (TSa). Como controle negativo foi utilizado solução fisiológica esterilizada. Em outro experimento, 110 dentes humanos unirradiculados tiveram seus canais radiculares contaminados com E. faecalis e incubados a 37°C por 21 dias. As substâncias analisadas foram: GI- NaOCl a 2,5%; GII- NaOCl a 2,5% + ácido cítrico a 10% 7:3 (em volume); GIII- NaOCl a 2,5% + vinagre de maça 5:5 (em volume); GIV- Vinagre de maçã; GV- Solução de clorexidina a 2%; GVIÁcido peracético a 1%; GVII- Solução salina fisiológica. Coletas microbiológicas foram realizadas imediatamente após preparo biomecânico e decorrido o período de sete dias. Após diluições decimais seriadas, alíquotas foram semeadas em placas de TSa e a contagem de UFC/mL determinada. Os resultados foram submetidos aos testes ANOVA, Tukey e Bonferroni, com nível de significância de 0,05. A associação do NaOCl a 2,5% com ácido cítrico ou vinagre de maça promoveu redução de pH e teor de... (Resumo completo, clicar acesso / Abstract: This study aimed to evaluate the pH, the available chlorine content and the antibacterial activity of endodontic irrigants and associations against Enterococcus faecalis by direct exposure test (in vitro) and within infected root canals (ex vivo). The pH was recorded using a digital pH meter and the chlorine content was measured by a standard iodine/thiosulfate titration method. In the direct exposure test, a bacterial suspension was mixed with the following irrigants: GI- 2,5% sodium hypochlorite solution (NaOCl); GII- 2,5% NaOCl + 10% citric acid 7:3 (at volume); GIII- 2,5% NaOCl + apple vinegar 5:5 (at volume); GIV- 10% citric acid; GV- apple vinegar. The contact times were 30 seconds, 1, 3 and 10 minutes. The number of colony-forming units per millilitre (UFC/mL) was calculated after serial 10-fold dilutions and culture in Tryptic Soy Agar (TSa) plates. Sterilized physiologic solution was used as negative control. In another experiment, the root canals of 110 human single-rooted teeth were infected with E. faecalis and incubated at 37°C for 21 days. The analysed substances were: GI- 2,5% NaOCl; GII- 2,5% NaOCl + 10% citric acid 7:3 (at volume); GIII- 2,5% NaOCl + apple vinegar 5:5 (at volume); GIV- apple vinegar; GV- 2% chlorhexidine solution; GVI- 1% peracetic acid; GVIIphysiologic saline solution. Microbiological samples were collected immediately after the biomechanical preparation and after 7 days. After serial 10-fold dilutions and culture in TSa plates, UFC/mL counts were determined. The results were submitted to ANOVA, Tukey and Bonferroni test, with a level of significance established at 0.05. The pH and the chlorine content reduced at associations of 2,5% NaOCl with citric acid or apple vinegar. In the direct exposure test, pure and associated NaOCl were capable of killing E. faecalis after 30 seconds. Citric acid did the same... (Complete abstract, click electronic access below) / Mestre

Orientador: Antonio Olavo Cardoso Jorge / Banca: Sandra Marcia Habitante / Banca: Mariella Vieira Pereira Leão / Banca: Juliana Campos Junqueira / Banca: Claudio Antonio Talge Carvalho / Resumo: Primeiramente foi avaliada no estudo a ação antimicrobiana da água ozonizada frente suspensão composta por Candida albicans e Enterococcus faecalis, verificando o tempo necessário de ozonização da água para eliminação destes microrganismos. Nas próximas etapas, foi avaliada a eficiência da água ozonizada como agente irrigante, durante o preparo biomecânico, tanto na eliminação de Candida albicans e Enterococcus faecalis, assim como na neutralização de LPS de Escherichia coli inoculados no interior de canais radiculares. Foram utilizados 48 dentes humanos unirradiculados, sendo que nos canais radiculares de 24 espécimes, foram inoculados 20 mL de uma suspensão contendo C. albicans e E. faecalis, e nos outros 24 espécimes, foram inoculados 10 mL LPS de E. coli, verificando-se a ação da água ozonizada como agente irrigante durante o preparo biomecânico. Foram realizadas coletas das amostras (imediata e após sete dias da instrumentação), e os dados foram submetidos à análise estatística. Como resultados, pode-se observar que a ação antimicrobiana da água ozonizada por dez minutos foi efetiva frente à suspensão microbiana. Como agente irrigante durante o preparo biomecânico, a água ozonizada apresentou efetividade frente à suspensão de C. albicans e E. faecalis inoculada no interior dos canais radiculares na coleta imediata, porém, na segunda coleta apresentou pouco efeito residual. Na verificação da neutralização de endotoxina, a ação da água ozonizada como agente irrigante não apresentou efetividade na neutralização de LPS de E. coli inoculada nos canais radiculares, sendo que quantidades restantes de LPS apresentaram efeitos biológicos. Como conclusão, a água ozonizada foi eficiente na redução de C. albicans e E. faecalis inoculada no interior dos canais radiculares, mas não apresentou efeito sobre LPS de E. coli. / Abstract: At first, the study was to evaluated the antimicrobial action of the ozonized water before the suspension composed of Candida albicans and Enterococcus faecalis, checking the necessary time of ozonization of the water in order to eliminate these microorganisms. In the next stages, the efficiency of ozonized water as an irrigant agent was evaluated, during the biomechanical preparation, as in the elimination of C. albicans and E. faecalis, as well as in the neutralization of Escherichia coli LPS inoculated into the root canals. Were used 48 single-rooted human teeth, seeing that in the root canals of 24 specimens, it were inoculated 20 mL of a suspension containing C. albicans and E. faecalis, and on the other 24 specimens, it were inoculated 10 mL of Escherichia coli LPS, having been checked the action of the ozonized water as an irrigant agent during the biomechanical preparation. Collections of samples (immediately and after seven days of the instrumentation) were carried out, and the data was submitted to statistical analysis. As a result, one could observe that the antimicrobial action of the ozonized water for ten minutes was effective before the microbial solution. As an irrigant agent during the biomechanical preparation, the ozonized water presented effectiveness before the suspension of C. albicans and E. faecalis inoculated into the root canals in the immediate collection, however, in the second collection it presented little residual effect. When verifying the endotoxin neutralization, the action of the ozonized water as an irrigant agent did not present effectiveness in the neutralization of E. coli LPS inoculated in the root canals, seeing that the remaining quantities of LPS presented biological effects. It was concluded that, the ozonized water was efficient in the reduction of C. albicans and E. faecalis inoculated inside the root canals, but it did not present any effect over E. coli LPS. / Doutor

Resumo: Este estudo teve como objetivo a avaliação da capacidade seladora bacteriana pela via coronária proporcionada por diferentes cimentos endodônticos: Endofill, AH Plus, Sealer 26, Epiphany SE (Self-Etch), Activ GP, Sealapex, Endo CPM Sealer e Cimento Experimental à base de MTA (CE-MTA). Cento e trinta dentes humanos, unirradiculares e extraídos foram divididos em oito grupos experimentais (n=15) e dois grupos controle (n=5). O preparo biomecânico dos canais radiculares foi realizado pela técnica escalonada sob irrigação com solução de hipoclorito de sódio a 1% e ao final solução de EDTA 17%. A obturação foi realizada pela técnica de condensação lateral ativa com cones de guta-percha e um dos cimentos endodônticos ou com cones Resilon e cimento Epiphany SE. Os canais radiculares de um grupo controle foram obturados sem cimento endodôntico e em outro toda superfície externa foi impermeabilizada. Após sete dias mantidos em estufa a 37°C e umidade, o material obturador foi removido parcialmente do canal radicular, sendo mantida uma extensão de 13 mm. Os dentes foram esterilizados em gás óxido de etileno e montados em dispositivo de avaliação da infiltração bacteriana, deixando 5 mm da sua porção apical imerso em caldo BHI. Enterococcus faecalis foi inoculado na porção coronária e sua viabilidade testada a cada 48 horas. As amostras foram observadas diariamente durante 16 semanas para constatação ou não da turvação no meio de cultura posicionado na porção periapical. Os dados foram submetidos aos testes estatísticos de Kaplan-Meier, Kruskal-Wallis e Dunn em nível de significância de 5%. AH Plus e Sealapex apresentaram maior resistência à infiltração coronária, com diferença estatística significante em relação aos cimentos... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: The aim of this study was to evaluate the bacterial sealing ability of different endodontic sealers: Endofill (EDF), AH Plus (AHP), Sealer 26 (S26), Epiphany SE (ESE), Activ GP (AGP), Sealapex (SEL), Endo CPM Sealer (CPM) and an experimental MTA-based cement (E-MTA). A hundred and thirty extracted single-rooted human teeth were randomly divided into eight experimental groups (n=15) and two control groups (n=5). Canals were prepared by a step-back technique, irrigated with 1% sodium hypochlorite and EDTA 17%, then filled with gutta-percha and one of the root canal sealers or Resilon and Epiphany SE. Teeth in one of the control groups were filled without sealer and those in the other control group were made impermeable. Teeth were kept at 37°C for 7 days. The coronal portion of the obturating material was removed, leaving 13mm intact. Teeth were sterilized with ethylene oxide gas prior to bacterial leakage assessment. The apical 5 mm of the roots was immersed in BHI broth, which was renewed every 48 hours and Enterococcus faecalis viability was tested at those periods. Leakage was monitored every 24 hours for 16 weeks. Data were analyzed by the Kaplan-Meier, Kruskal-Wallis and Dunn tests at 5% significance. AHP and SEL demonstrated better resistance to bacterial leakage than the other sealers (p<0.05). EDF, ESE and S26 presented intermediate bacterial leakage. AGP, CPM and E-MTA showed more bacterial leakage among all materials tested. All sealers allowed bacterial leakage. The best sealing ability was observed for AH Plus and Sealapex. The glass ionomer and MTA-based materials allowed the most bacterial leakage / Orientador: Juliane Maria Guerreiro Tanomaru / Coorientador: Mário Tanomaru-Filho / Banca: Fábio Luiz Camargo Villela Berbert / Banca: Evandro Watanabe / Mestre