Orientador: Denise Vaz de Macedo / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-08-12T14:27:15Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Pimentel_CarlosAlberto_M.pdf: 2804322 bytes, checksum: f3240e0a8b8d538f11e513dc9dc2a3ad (MD5) Previous issue date: 2004 / Resumo: A prática do futebol requer que os atletas profissionais apresentem níveis ótimos de aptidão física. Para isso são aplicados, durante os treinamentos, estímulos específicos de esforço físico com diferenças na carga, intensidade e volume, garantindo assim, a obtenção das adaptações orgânicas necessárias. No entanto, para que ocorram as adaptações positivas, o treinamento não pode ultrapassar o limite individual de estresse que os atletas conseguem suportar. A técnica Limiar de Estresse propõe o monitoramento da intensidade do treino em atletas, através da análise de biomarcadores sanguíneos de estresse oxidativo e alteração muscular, com o objetivo de exercer uma função profilática, através da modulação da carga de treinamento quando necessário, otimizando, com isso a performance. Nosso objetivo nesse estudo foi aplicar e avaliar a Técnica de Limiar de Estresse em dois períodos preparatórios distintos de equipes de futebol. As sessões de treinos da competição-modelo Dallas Cup foram planejadas de acordo com os princípios metodológicos da concepção clássica, enquanto na competição Taça São Paulo utilizou-se a concepção contemporânea. Os biomarcadores sanguíneos analisados foram as concentrações plasmáticas de ácido úrico, grupamento sulfidrila e proteínas carboniladas e a atividade da enzima creatina quinase; as atividades no hemolisado das enzimas catalase e glutationa redutase, além da determinação do limiar do lactato sanguíneo como parâmetro de performance. Os resultados obtidos apontam aumento nas atividades das enzimas catalase e glutationa redutase em decorrência do treinamento baseado na concepção clássica. Os resultados dos mesmos biomarcadores em decorrência da concepção contemporânea de treinos mostraram aumento na atividade da enzima catalase e queda na atividade da enzima glutationa redutase. A atividade da enzima creatina quinase permitiu, independentemente da concepção adotada, seu uso como um índice de individualização dos treinamentos. O limiar do lactato apresentou valores mais elevados para o treinamento sob a concepção contemporânea. Os demais parâmetros não apresentaram alterações. Concluindo, a técnica Limiar de Estresse mostrou-se sensível e eficaz na modulação dos treinamentos. / Abstract: In order to perform professional football (Soccer), the athlete requires high levels of physical aptitude. To achieve this, it is necessary the application, at training time, of specific stimulus like strength with different degrees of intensity and volumes, to assure the organism reach the adaptations needed. To avoid harm for the athlete during the training process, the Stress Threshold technique proposes the use of biological markers to monitor the blood oxidation stress and anti-oxidation protection. The objective of this study is to monitor and regulate the levels of training, optimize the performance and develop a prophylactic foundation by utilising the Stress Threshold technique, during the teams (football, soccer) preparatory periods. The training sessions at the modelcompetition, Dallas Cup, were planed under the classic concepts, methodological principles, while in the Taça São Paulo were utilised the contemporary concepts. The blood stress markers analysed were: The activity levels of the enzymes creatine kinase; the activity levels of the enzymes catalase and glutathione reductase; the concentration levels of uric acid, sulfidrila groupings and carbolinads proteins; and the determination of the lactate threshold in the blood. The results obtained point towards the increase activity on the enzymes catalase and glutathione reductase as an occurrence of training, based on the classic concepts. The results on the analysis of the same blood markers while under the contemporary concepts training were showing an increase in the activity of the calatase enzyme and a decrease in the glutathione reductase's activity. The activity of the enzyme creatine kinase permitted, independently of known conceptions, to become an index of individualisation of the training disciplines. The threshold of the lactate in the blood was higher while training under the contemporary concepts. All the other parameters did not show any alterations. In conclusion, the Stress Threshold technique did show, itself, to be a sensible valid and accurate way of monitoring training in athletes. / Mestrado / Bioquimica / Mestre em Biologia Funcional e Molecular

Orientador: Laura Maria Mariscal Ottoboni / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-08-12T18:47:03Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Rodrigues_VivianeDrumond_M.pdf: 728061 bytes, checksum: 4bc4757d5fadae7450f0f4ff77e4ae1b (MD5) Previous issue date: 2009 / Resumo: Acidithiobacillus ferrooxidans é uma bactéria Gram negativa, anaeróbica facultativa, acidofílica, quimiolitotrófica e mesofílica. A. ferrooxidans é capaz de utilizar ferro e enxofre como fonte de energia e é um dos microrganismos mais utilizados no processo de biolixiviação. Durante este processo a bactéria pode estar sujeita a diversos tipos de estresse, entre eles, o estresse oxidativo. Entre os principais sensores relacionados à resposta antioxidante estão: a enzima SOD e as proteínas dos sistemas tiorredoxina e glutarredoxina. A SOD atua como defesa primária na remoção de espécies reativas do oxigênio. O sistema tiorredoxina é composto por NADPH, TrxR e Trx. O sistema glutarredoxina é formado por NADPH, GR, GSH e Grx. Os sistemas tiorredoxina e glutarredoxina desempenham um papel fundamental contra espécies reativas do oxigênio e na manutenção do ambiente redutor da célula. No primeiro capítulo, a linhagem brasileiraA. ferrooxidans LR foi utilizada para o estudo da expressão de genes dos sistemas tiorredoxina e glutarredoxina, por PCR em tempo real, em diferentes condições: (a) nas taxas de 50, 75 e 100% de oxidação de Fe2+, (b) em um e dois dias após a taxa de 100% de oxidação de Fe2+, (c) na presença de calcopirita e (d) após diferentes tempos de heat shock. Em geral, nas diferentes taxas de oxidação de Fe2+, os genes do sistema tiorredoxina foram mais expressos que os do sistema glutarredoxina. Em um dia após 100% de oxidação de Fe2+, a maioria dos genes teve expressão induzida. Em dois dias a partir desta taxa de oxidação de Fe2+, apenas os genes trxB e gor foram induzidos em relação ao controle, sugerindo que os produtos desses genes podem exercer a função de chaperona durante o estresse oxidativo. Na presença de calcopirita, apenas o gene gor foi induzido, indicando que GR pode estar envolvida no controle da homeostase celular. Esta enzima também pode ser necessária para a atividade de GSH, proteína envolvida no metabolismo de enxofre. Após o heat shock, os níveis de expressão do gene que codifica a proteína Grx3 aumentaram significativamente, possivelmente devido à propriedade de co-chaperona da proteína. No segundo capítulo foram feitas análises in silico das sequências de aminoácidos das proteínas GR, TrxR e SOD de A. ferrooxidans. A análise de in silico mostrou que existem muitas semelhanças entre as proteínas TrxR e GR, como por exemplo, estrutura secundária, peso molecular, sítio ativo, motivos funcionais e domínios. Foi realizada a quantificação de proteínas totais, a determinação da atividade em espectrofotômetro das enzimas GR e TrxR, a atividade em PAGE não desnaturante das proteínas GR e SOD e a caracterização de SOD durante o crescimento de A. ferrooxidans LR em ferro e em células mantidas em contato com a calcopirita por 1 e 10 dias. A concentração de proteínas totais foi menor em células mantidas por 10 dias em contato com a calcopirita, e uma das razões pode ser o maior estresse oxidativo. A atividade das enzimas GR, TrxR e SOD aumentou neste mesmo período de tempo, sugerindo a presença de estresse. A caracterização com KCN e H2O2 mostrou que a enzima SOD de A. ferrooxidans era do tipo FeSOD. / Abstract: Acidithiobacillus ferrooxidans is a Gram-negative, anaerobic facultative, acidophilic, chemolithoautotrophic and mesophilic bacterium. A. ferrooxidans is able to use iron and sulfur as energy source and is one of the microorganisms used in the bioleaching process. During this process, the bacterium may be subjected to several stressful situations including the oxidative stress. Among the proteins involved in the antioxidant response are the enzyme SOD and the proteins from the thioredoxin and the glutaredoxin systems. SOD removes the reactive oxygen species. The thioredoxin system is composed by NADPH, TrxR and Trx. The glutaredoxin system consists of NADPH, GR, GSH and Grx. The thioredoxin and the glutaredoxin systems play a key role against the reactive oxygen species and maintain the reducing environment of the cell. In the first chapter, the Brazilian strain A. ferrooxidans LR was used to study the expression of genes from the thioredoxin and the glutaredoxin systems, by real-time PCR, in different conditions: (a) at 50, 75 and 100% of Fe2+ oxidation, (b) in one a and in two days after 100% of Fe2+ oxidation, (c) in the presence of chalcopyrite and (d) after different periods of time of heat shock. In general, on the different rates of Fe2+ oxidation, the genes of the thioredoxin system showed a higher expression than the genes from the glutaredoxin system. In one day after 100% of oxidation of Fe2+, the majority of the genes had their expression induced. In two days after 100% of oxidation of Fe2+, only the genes trxB and gor were induced suggesting that the product of these genes may act as chaperones during the oxidative stress. In the presence of chalcopyrite, only the gene gor was induced, indicating that GR may be involved in the control of the cell homeostasis since it is necessary for GSH activity, a protein that participates in sulfur metabolism. After the heat shock, the expression of the gene that encodes the protein Grx3 increased, probably because this protein can act as a cochaperone. In the second chapter, an in silico analysis of the proteins GR, TrxR and SOD amino acids sequences from A. ferrooxidans was performed. This analysis showed that there are several similarities between TrxR and GR including, secondary structure, molecular weight, active site, functional motives and domains. Total protein content in cells grown until 80% of oxidation of Fe2+ and in cells kept for 1 and 10 days in the presence of chalcopyrite was determined. Also, in these conditions, the activities of GR and TrxR were determined in a spectrophotometer and the activities of GR and SOD were determined in gel. The total protein content was higher in control cells and in the contrary, enzyme activities were higher at 10 days of bacteria contact with chalcopyrite indicating the presence of oxidative stress. Assays with KCN and H2O2 showed that the A. ferrooxidans LR SOD was in fact a FeSOD. / Mestrado / Genetica de Microorganismos / Mestre em Genética e Biologia Molecular

CoordenaÃÃo de AperfeiÃoamento de Pessoal de NÃvel Superior / O amadurecimento de frutos à um processo complexo do desenvolvimento envolvendo inÃmeras mudanÃas nas caracterÃsticas bioquÃmicas, fisiolÃgicas e sensoriais, bem como no metabolismo oxidativo determinando seus atributos de qualidade e propriedade antioxidante. Desta forma, esse trabalho objetivou analisar as principais mudanÃas no sistema antioxidante e sua significÃncia durante o desenvolvimento da acerola (Malpighia emarginata D.C). Frutos de cinco clones de aceroleira selecionados a partir de melhoramento genÃtico realizados pela Embrapa AgroindÃstria Tropical: BRS 235 (Apodi), BRS 236 (Cereja), BRS 237 (Roxinha), BRS 238 (Frutacor) e II47/1, foram colhidos manualmente em diferentes estÃdios de maturaÃÃo com base na cor da casca e analisados quanto aos parÃmetros de qualidade pÃs-colheita, compostos antioxidantes, atividade antioxidante total, atividade das enzimas antioxidante e a integridade da membrana celular. Em acerola o amadurecimento promoveu mudanÃas sensoriais desejÃveis na sua qualidade. O conteÃdo de vitamina C e polifenÃis solÃveis totais (PST) diminuÃram durante o desenvolvimento, o que possivelmente resultou em um declÃnio da atividade antioxidante dos frutos. Apesar da reduÃÃo dos PST, o conteÃdo de flavonÃides amarelos e antocianinas totais mostraram um aumento evidente com o amadurecimento, o que pode estar associado à mudanÃa de cor.do fruto, sendo a antocianina cianidina 3-ramnosÃdeo e o flavonÃide quercetina 3-ramnosÃdeo os principais fenÃlicos identificados na acerola madura, assim, apesar da diminuiÃÃo da vitamina C outro eficiente antioxidante, a quercetina, à acumulado contribuindo para as propriedades antioxidantes nutricionais da acerola. A atividade das enzimas antioxidantes dismutase do superÃxido (SOD), catalase (CAT) e peroxidase do ascorbato (APX) diminuiu ao longo do amadurecimento, contribuindo para um aumento do estresse oxidativo evidenciado pelo aumento da peroxidaÃÃo de lipÃdeos (PL). Contudo, a vitamina C mostrou ser uma proteÃÃo antioxidante contra danos oxidativos. O amadurecimento da acerola foi acompanhado por um progressivo estresse oxidativo, o qual contribui para a qualidade pÃs-colheita dos frutos e seu potencial antioxidante atribuÃdo a vitamina C e polifenÃis, especialmente cianidina e quercetina.

O ácido indol-3-acético (AIA) é uma auxina natural, metabólito do triptofano, e é produzido em células animal, vegetal e em alguns microrganismos podendo atuar como antioxidante. O objetivo do presente estudo foi o de avaliar o poder antioxidante do AIA, frente a um estresse oxidativo hepático induzido pelo hepatocarcinógeno dietilnitrosoamina (DEN). Foram utilizados camundongos BALB/c com dois meses. Em uma primeira etapa do estudo foram utilizados machos e fêmeas com o propósito de se avaliar somente o efeito do AIA administrado diariamente por 15 dias nas doses de 100, 200 e 500 mg/Kg de peso vivo. Em uma segunda etapa foram utilizados somente machos submetidos ao AIA (50, 250 e 500 mg/Kg de peso vivo) por 15 dias e no 16o dia foram expostos ao DEN por 4 h ou por 24 h. Foram avaliados os seguintes parâmetros: 1) evolução do peso e porcentagem relativa do fígado; 2) alterações metabólicas hepáticas avaliadas pelas atividades de alanina aminotransferase (ALT) e aspartato aminotransferase (AST) no soro; 3) perfil oxidativo hepático nas atividades das enzimas antioxidantes superóxido dismutase (SOD), catalase (CAT), glutationa peroxidase (GPx) e glutationa redutase (GR) e dos níveis de glutationa reduzida e glutationa oxidada e 4) fragmentação de DNA hepático. Os resultados foram analisados pela análise de variância (ANOVA) com significância de 0,05 usando o teste de Tukey.O AIA não demonstrou efeito tóxico nas doses utilizadas tanto para machos quanto para fêmeas em nenhum dos parâmetros analisados, pois esses parâmetros não apresentaram diferença significativa em relação aos controles (apenas tampão fosfato salina, pH 7,4). A exposição dos animais ao DEN por 4 h demonstrou diminuição na atividade da CAT e GR em 30% e 23%, respectivamente em relação ao controle. O DEN induziu fragmentação de DNA, somente após 24 horas, correspondentes a 210, 410 e 610 pares de bases (pb). A atividade da CAT e GR nos animais que receberam AIA e expostos ao DEN por 4 h não apresentaram alteração significativa em relação aos controles. Porém, a administração de AIA protegeu, apenas parcialmente o DNA dos efeitos defragmentação causados pela exposição ao DEN por 24 horas, pois se observou uma redução dessa fragmentação em 42%, 51% e 48% para os fragmentos de 210 pb, em 54%, 56% e 55% para os fragmentos de 410 pb e em 51%, 57% e 53% para os fragmentos de 610 pb nos animais que receberam AIA nas respectivas doses de 50, 250 e 500 mg/Kg de peso vivo, em relação aos controles. Concluiu-se que o AIA nas doses administradas, não alterou a evolução do peso, massa relativa do fígado, atividade de ALT e AST e perfil oxidativo hepático dos animais, sugerindo que esta auxina, não é tóxica; e que o AIA promoveu a proteção do fígado dos animais frente aos efeitos deletérios causados pelo DEN, baseado na atividade das enzimas CAT e GR e fragmentação de DNA, demonstrando um efeito antioxidante dessa auxina. / The indol-3-acetic acid (IAA) is a natural auxin, metabolite of the tryptophane, is produced in animal cells, vegetable and in some microorganisms being to act like antioxidant. The objective of the present study was to evaluate the antioxidant effect of the IAA, facing a liver oxidative stress induced by the hepatocarcinogenic diethylnitrosoamine (DEN). Were utilized mice BALB/c with 2 months. In a first phase of the study were utilized males and females with the purpose of to evaluate only the effect of the IAA administered daily by 15 days in the doses of 100, 200 and 500 mg/Kg of body weight. In a second phase were utilized only males submitted to IAA (50, 250 and 500 mg/Kg of body weight) daily during 15 days and in the 16ht day the animals were exposed to the DEN for 4 h or for 24 h. They were evaluated the following parameters: 1) evolution of the weight of the animals and the relative percentage of the liver; 2) liver metabolic alterations evaluated by the activities of alanine aminotransferase (ALT) and aspartate aminotransferase (AST) in the serum; 3) liver oxidative stress available by antioxidant enzyme activity as superoxide dismutase (SOD), catalase (CAT), glutathione peroxidase (GPx) and glutathione reductase (GR) and by levels of the oxidized glutathione and reduced glutathione and 4) fragmentation of liver DNA. The results were analyzed by the analysis of variance (ANOVA) with significance at 0.05 using Tukey test. The IAA did not showed toxic effect in the doses utilized for both males and females for all analyzed parameters, those parameters did not shown significant difference to compare with the controls (only phosphate buffer saline, pH 7.4). The exposition of the animals to DEN for 4 h showed a reduction in the CAT and GR activity as 30% and 23%, respectively, compared with to the control. The DEN to induced DNA fragmentation, only after 24 hours of exposition, corresponding to 210, 410 and 610 pair of bases (pb). The activity of the CAT and GR in the animal treated with IAA and exposed to DEN for 4 h did not show significant alteration to compare with the controls. However, the IAA administration was shown a partially protection of the DNA fragmentation from DEN exposition for 24 hours such as 42%, 51% and 48% for the fragments of 210 pb, 54%, 56% and 55% for the fragments of 410 pb and in 51%, 57% and 53% for the fragments of 610 pb by respectively IAA doses 50, 250 and 500 mg/Kg of body weight, compared with the controls. Concluded that the IAA in the doses administered, did not alter the evolution of the body weight, relative percentage of the liver, activity of ALT and AST and liver oxidative stress in animals, suggesting that this auxin is not toxic; and that the IAA promoted the protection of the liver of the animal facing the harmful effects caused by the DEN based in the activity of the CAT and GR activity and DNA fragmentation, showing an antioxidant effect of this auxin.

O ácido indol-3-acético (AIA) é um produto do metabolismo do triptofano encontrado nos organismos animais, vegetais e em microrganismos. Destacam-se os trabalhos que atribuíram ao AIA efeitos tanto antioxidantes quanto proxidantes em diferentes sistemas biológicos. O objetivo do presente estudo foi o de avaliar os efeitos da administração do AIA no metabolismo muscular e cerebral e na atividade elétrica cerebral de ratos. Foram realizados dois grupos de experimentos. No primeiro grupo foram avaliados os seguintes parâmetros: taxa glicêmica e o ganho de peso corporal de animais tratados por 14 dias com AIA (40 mg/Kg de peso vivo, via intragástrica); atividade das enzimas antioxidantes glutationa redutase (GR), catalase (CAT) e superóxido dismutase (SOD) e das enzimas do metabolismo da glicose hexoquinase (HQ), lactato desidrogenase (LDH) e glicose-6-fosfato desidrogenase (G6PDH) nos músculos sóleo e gastrocnêmio e a atividade da enzimas antioxidantes GR, CAT e SOD e a quantificação dos produtos resultantes da peroxidação lipídica (TBARs) no cérebro de ratos tratados por 14 dias com diferentes doses de AIA (1, 18 e 40 mg/Kg de peso animal, via intragástrica). Os respectivos controles de todas essas análises foram obtidos de ratos que receberam 1 mL de tampão fosfato pH 7,4 via intragástrica sob as mesmas condições experimentais. No segundo grupo de experimentos foi obtido o eletroencefalograma (EEG) dos animais. O EEG obtido foi filtrado nas bandas de freqüências delta (0,3-4 Hz), teta (4-8 Hz), alfa (8-12 Hz) e beta (12-30 Hz) e em cada banda calculou-se a energia do sinal. Foram avaliados o EEG de animais tratados com AIA (40 mg/Kg de peso vivo) e tratados com triptofano (40 mg/Kg de peso animal), ambos por via intragástrica. Os controles para esses tratamentos foram o EEG coletado 1 hora antes e 1 hora depois da administração de 1mL de tampão fosfato por via intragástrica no mesmo animal que recebeu o tratamento. Os resultados foram analisados por ANOVA com significância de 0,05 usando o teste de Tuckey e os estimadores foram validados usando-se bootstrap. A adminitração de AIA (40mg/Kg de peso vivo) não alterou a taxa glicêmica e evolução de peso corporal dos animais, em relação ao controle. Não foram observadas diferenças significativas entre os resultados obtidos de amostras de animais tratados com AIA (todas as doses) em relação aos respectivos controles para: atividade das enzimas antioxidantes muscular e cerebral; enzimas envolvidas com o metabolismo da glicose muscular; conteúdo de peroxidação lipídica (TBARs) cerebral. O método não invasivo de aquisição de EEG desenvolvido para ratos permitiu adquirir e analisar o sinal elétrico cerebral. Não foram observadas alterações no padrão do EEG após a administração de tampão fosfato. No entanto, o AIA na dose de 40 mg/Kg de peso vivo alterou o padrão do EEG do animal, pois, a energia das freqüências de ondas alfa (8-12 Hz) e beta (12-30 Hz) foi maior em relação ao estado normal e após administração de tampão fosfato. Já o triptofano na dose de 40 mg/Kg de peso vivo aumentou a energia da onda delta (0,3-4 Hz) e diminuiu na energia da onda beta (12-30 Hz) em relação ao estado normal. O método não invasivo de EEG para rato desenvolvido neste trabalho foi sensível para detectar a atividade elétrica encefálica dos animais e o triptofano serviu como parâmetro de referência, pois promoveu diferentes alterações no padrão do EEG daquelas observadas nos animais tratados com AIA. Conclui-se que o AIA não interferiu nos parâmetros metabólicos oxidativos e energéticos dos músculos e do cérebro dos animais estudados, mas promoveu alterações fisiológicas que desencadearam as mudanças observadas na energia do sinal de EEG dos animais. / Indole-3-acetic acid (IAA) is a tryptophan metabolic found in animals organisms, microorganisms and vegetables. It is remarkable the work done to IAA antioxidants and proxidants effects in several biological systems. The main purpose of these studies was to evaluate the effects of intragastric IAA administration in brain and in muscle metabolism and electrical brain activities in rat. The experiments were done in two groups. The first one, were evaluated the following parameters: glycemic rate and corporal gain weight to those animals treated14 days with IAA (40 mg/Kg of body weight); activity of antioxidants enzymes as glutathione reductase (GR), catalase (CAT), superoxide dismutase (SOD); activities of hexokinase (HQ), lactate dehidrogenase (LDH) and glucose-6-phosphate dehidrogenase (G6PDH) on soleus and gastrocnemic muscle; antioxidants enzymes activities and level of tiobarbituric reactives subtances (TBARs) in brain from rats treated during 14 days with doses of IAA (1,18 and 40 Kg/kg body of weight). All those analyses controls were obtained from rat that was given 1 mL of phosphate buffered saline, pH 7 (PBS), under the same experiments conditions as the group treated with IAA. On the second group of experiments was evaluated EEG pattern obtained from fixed electrodes on the animal skin surface were not sedated, and shown at delta frequency (0.3-4 Hz), theta (4-8 Hz), alpha (8-12 Hz) and beta (12-30 Hz) and the energy of those band frequency was calculated using a developed algorithm software MATLAB®. EEG was evaluated from animals treated with IAA (40 mg/Kg body weight) and treated with tryptophan (40 mg/Kg body weight), both intragastric. The management control for those treatments were EEG collected 1 hour before and 1 hour after the intragstric administration of 1mL PBS at the same animal that received the treatment. The results were analysed by ANOVA with great significance of 0.05 using the Tukey test and were evaluated by bootstrap. The IAA administration (40 mg/Kg body weight) did not change the glycaemia rate and the animal weight evolution, to compare with the control. Were not observed any significant differences among results from animals treated with IAA (all doses) relating to respective controls to: a) brain and muscles antioxidants enzymes activity; b) activities of enzymes with muscular glucose metabolism; c) brain lipid peroxidation contents by TBARs level. No invasive EEG colleting methods developed for rat allowed to collect and analyse electric brain signal. After an administration of PBS, were not observed any changes at EEG pattern. IAA dose of 40 mg/Kg body weight did change the animal EEG standard, the frequency energy of alpha wave to (8-12 Hz) and beta (12-30 Hz) was higher then normal after administration of PBS. On the other side, tryptophan dose of 40 mg/Kg body weight increased the delta wave energy to (0,3-4 Hz) and decreased the beta wave energy to (12-30 Hz), to compare withfthe normal standard. Non invasion EEG colleting methods for rat developed in this studies was sensible in order to detect an animals electric encephalic activity and the tryptophan became as reference parameter, due to several changes on pattern EEG to those animals treated with IAA. Concluding that, IAA did not interfere on oxidative metabolic parameters, neither to the brain and muscles of the studied animals, but promoted physiological changes that was possible to observe on animals electroencephalogram.

Submitted by Neusa Fagundes (neusa.fagundes@unioeste.br) on 2017-09-25T20:01:17Z No. of bitstreams: 1 Thaís_Marcon2017.pdf: 1321093 bytes, checksum: deb59ddc497de55cd34d9a12affcf451 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-09-25T20:01:17Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Thaís_Marcon2017.pdf: 1321093 bytes, checksum: deb59ddc497de55cd34d9a12affcf451 (MD5) Previous issue date: 2017-02-08 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES / The Parapiptadenia rigida is a native-tree species with fast natural regeneration, so, it has been recommended to mixed reforestation in degraded areas. The seedlings’ availability of native species in nurseries is fundamental to their management in projects of environmental recovery. The quality of nursery seedlings depends on factors such as substrate application with good quality. Organic compounds have been tested as alternative substrates for a sustainable cropping yield, to reuse organic wastes and minimize the environmental impacts. Thus, the present study aimed at evaluating the substrate influence on antioxidant enzymatic activity, for both seedlings’ emergence and initial growth of angico-red seedlings (Parapiptadenia rigida). The substrates were formulated from the composting of agroindustrial wastes with different carbon sources, totaling six treatments: commercial substrate (control); Organic cotton-based substrate; Organic substrate based on sugarcane bagasse; Organic substrate based on Napier grass; Organic substrate based on pruning of trees and organic substrate based on sawdust. The chemical and physical determinations of the studied substrates were carried out under laboratory conditions. Two trials were carried out, the first one in the laboratory, completely randomized, whose following evaluated emergence parameters of angico-red seedlings were: relative emergence frequency, emergency synchronization, emergence speed index, mean emergence time and the activity of antioxidant enzymes of angico-red seedlings. The second experiment was carried out in a greenhouse, following a design of randomized blocks. The following data of initial growth were monthly evaluated: height, stalk diameter and number of leaflets in angico-red seedlings. Root dry mass, aerial part dry mass, Dickson quality index, nutrient content, enzymatic activity and membrane damage of angico-red seedlings were recorded by the end of 120 days. Finally, the commercial substrate presented the best results for angico-red seedlings’ emergence, but during their growth, the alternative organic substrates showed advantages over the commercial one in the final development of angico-red seedlings. The organic substrates based on cotton and Napier grass provided a low percentage of emergence of angico-red seedlings, as well as the lowest root and shoot length answers, and the highest activity of peroxidase enzyme. This result has shown that an oxidative stress had occurred and the activity of repair enzymes was not enough when compared to the damages caused by the substrates. On the other hand, the organic substrates based on cane bagasse and sawdust showed the best results in emergence and development of angico-red seedlings. They also provided the highest values of Dickson`s seedlings quality index. According to these results, it is possible to assert that the organic substrates formulated by the composting from different carbon sources affected in a different way antioxidative enzymes activity of angico-red seedlings. And that the best indicated substrates to produce angico-red are based on sawdust and sugarcane bagasse. / A Parapiptadenia rigida é uma espécie arbórea nativa que apresenta rápida regeneração natural, por isto é recomendada para reflorestamentos mistos em áreas degradadas. A disponibilidade de mudas de espécies nativas em viveiros é de fundamental importância para a utilização de tal espécie em projetos de recuperação ambiental. A qualidade das mudas em viveiros depende entre outros fatores do uso de um bom substrato. Compostos orgânicos vêm sendo testados como substratos alternativos na produção sustentável de mudas, para o reaproveitamento dos resíduos e minimização dos impactos ambientais. Desta maneira, o objetivo do presente trabalho foi avaliar a influência dos substratos na atividade enzimática antioxidante, na emergência de plântulas e no crescimento inicial de mudas de angico-vermelho (Parapiptadenia rigida). Os substratos foram formulados a partir de compostos orgânicos provenientes da compostagem de resíduos agroindustriais com diferentes fontes de carbono, totalizando seis tratamentos: substrato comercial (SC); substrato orgânico à base de algodão (SA); substrato orgânico à base de bagaço de cana-de-açúcar (SB); substrato orgânico à base de capim-napier (SN); substrato orgânico à base de poda de árvores (SP) e substrato orgânico à base de serragem (SS). Foram determinadas as características químicas e físicas dos substratos em condições de laboratório. Foram realizados dois experimentos: o primeiro em laboratório seguindo um delineamento inteiramente casualizado, no qual foram avaliados os seguintes parâmetros de emergência de plântulas de angico-vermelho: frequência relativa de emergência, sincronização de emergência, índice de velocidade de emergência, tempo médio de emergência e atividade das enzimas antioxidantes das plântulas de angico-vermelho. O segundo experimento foi realizado em casa de vegetação e seguiu um delineamento em blocos casualizados. Foram registrados o crescimento inicial pela avaliação mensal da altura, o diâmetro do caule e o número de folíolos das mudas de angico-vermelho. Ao final de 120 dias foram avaliados: a massa seca da raiz, a massa seca da parte aérea, o índice de qualidade de Dickson, o teor de nutrientes das mudas de angico-vermelho, a atividade enzimática e o dano de membrana das mudas de angico-vermelho. De maneira geral, o substrato comercial apresentou os melhores resultados na emergência das plântulas de angico-vermelho, porém, ao longo do crescimento, os substratos orgânicos alternativos apresentaram vantagens sobre o substrato comercial no desenvolvimento final das mudas de angico-vermelho. Os substratos orgânicos à base de algodão e capim-napier proporcionaram baixa porcentagem de emergência das plântulas de angico-vermelho, além dos menores valores de comprimento de raiz e parte aérea e maior atividade da enzima peroxidase nas mudas de angico-vermelho. Esse resultado demonstra que ocorreu estresse oxidativo e que a atividade das enzimas de reparo não foi eficiente contra os danos ocasionados pelos substratos. Já os substratos orgânicos à base de bagaço de cana e serragem apresentaram os melhores resultados na emergência de plântulas e no desenvolvimento de mudas de angico-vermelho e proporcionaram os melhores valores de índice de qualidade de mudas de Dickson. Diante dos resultados, é possível afirmar que os substratos orgânicos formulados pela compostagem com diferentes fontes de carbono afetaram de maneira diferenciada a atividade das enzimas antioxidativas das mudas de angico-vermelho. E substratos mais indicados para a produção de angico-vermelho são os substratos orgânicos à base de serragem e bagaço de cana-de-açúcar.

Submitted by Neusa Fagundes (neusa.fagundes@unioeste.br) on 2018-07-10T19:03:49Z No. of bitstreams: 2 Erly_Porto2018.pdf: 629278 bytes, checksum: 0e4cf8a84230328bfeaab2b5e568a733 (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) / Made available in DSpace on 2018-07-10T19:03:49Z (GMT). No. of bitstreams: 2 Erly_Porto2018.pdf: 629278 bytes, checksum: 0e4cf8a84230328bfeaab2b5e568a733 (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Previous issue date: 2018-03-06 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES / Plant species can interact with each other through the production and release of chemical compounds released into the environment, such an event is known as allelopathy. The objective of the present study was to investigate the allelopathic action and oxidative stress of the aqueous extract of Bauhinia forficata L. on seeds during the germination process and seedlings during the Phaseolus vulgaris development phase. The germination behavior, allelopathic activity index, initial growth and activity of antioxidant enzymes were studied at different times of seed imbibition, in the cotyledon (reserve tissue) and in the embryonic axis and seedlings, for aerial part and root target species. The results indicated that during the germination phase there was negative interference of B. forficata extracts on the seeds for germination, speed index and mean germination time, as well as the allelopathic activity index. In relation to the enzymatic activity, a high enzyme activity was observed at the beginning of seed imbibition, between 3 and 6 hours for the cotyledon and high activity in the embryonic axis at the end of the germination process, between 12 and 24 hours of imbibition. The increase of the extract proportions of the leaves of B. forficata affected the enzymatic activities in the germination process of the bean seeds, resulting in a delay of the germination. As for the development phase, there was reduction of the average length and dry mass of the root as the proportion of extract used increased. the levels of lipid peroxidation for both shoot and root were high, as well as the activity of the catalase enzyme for the roots was also elevated when submitted to the treatments with the presence of the extract. Thus, the increase in the proportion of B. forficata extract negatively affected the initial development, being the primary root elongation more sensitive, causing severe damage to the membranes of the bean seedlings roots. / As espécies vegetais podem interagir entre si por meio da produção e liberação de compostos químicos liberados no ambiente, tal evento é conhecido como alelopatia. Desta forma, o objetivo do presente estudo foi investigar a ação alelopática e o estresse oxidativo do extrato aquoso de Bauhinia forficata L. sobre sementes de Phaseolus vulgaris, durante o processo de germinação e desenvolvimento das plântulas. Para isso, foram avaliados o comportamento germinativo, o índice de atividade alelopática, o crescimento inicial e a atividade de enzimas antioxidantes em diferentes tempos de embebição das sementes, no cotilédone (tecido de reserva) e no eixo embrionário e plântulas, para a parte aérea e raiz da espécie alvo. Os resultados indicaram que durante a fase de germinação houve interferência negativa dos extratos de B. forficata sobre as sementes para as variáveis: germinação, índice de velocidade e tempo médio de germinação, como também para o índice de atividade alelopática. Em relação a atividade enzimática, foi verificado uma alta atividade das enzimas no início da embebição das sementes, entre 3 e 6 horas para o cotilédone e elevada atividade no eixo embrionário ao final do processo germinativo, entre 12 e 24 horas de embebição. O aumento das proporções de extrato das folhas de B. forficata afetaram as atividades enzimáticas no processo germinativo das sementes de feijão resultando um atraso da germinação. Já para a fase de desenvolvimento, houve redução do comprimento médio e massa seca da raiz conforme o aumento das proporções de extrato utilizados. Os níveis de peroxidação lipídica tanto para parte aérea e raiz foram elevados, assim como a atividade da enzima catalase para as raízes também foi elevado quando submetidos aos tratamentos com a presença do extrato. Desta forma, o aumento das proporções de extrato de B. forficata L. afetou negativamente o desenvolvimento inicial, sendo o alongamento da raiz primaria mais sensível, provocando danos acentuados as membranas das raízes de plântulas de feijão.

Uma das alternativas para reduzir os efeitos negativos das altas temperaturas nas plantas e, consequentemente a perda na produção e qualidade é a utilização de indutores de tolerância. Dentro deste contexto, a L-arginina, se apresenta como uma alternativa, por ser um dos aminoácidos mais funcionais e precursora de importantes compostos na regulação metabólica das plantas, com efeito na atenuação do estresse abiótico. O objetivo deste trabalho foi avaliar o efeito da aplicação foliar de diferentes doses de L-arginina (0; 0,15; 0,25; 0,5; 1,0 e 2,0 g L-1) na fisiologia, produção e qualidade do tomate cultivar Pizzadoro cultivado em ambiente protegido no período de verão. Para avaliação do efeito da L-arginina na fisiologia, foram feitas análises de indicadores de estresse dos compostos malonaldeído (MDA) e peróxido de hidrogênio (H2O2), das enzimas antioxidantes superóxido dismutase (SOD), catalase (CAT) e ascorbato peroxidase (APX), teores de aminoácidos livres e teores de nutrientes nas folhas de tomateiro. Na produção foram determinadas a produção total (PT), a produção com presença de defeitos (PRDEF), a produção não comercial (PRNC) e a produção comercial (PC) com a classificação de calibre pequeno (PROP), médio (PROM) e grande (PROG). Além disso, foram determinados o número de frutos totais (NFT), número de frutos com presença de defeitos (NDEF), número de frutos não comerciais (NFNC) e número de frutos comerciais (NFC) com classificação de calibre pequeno (NFP), médio (NFM) e grande (NFG). Amostras de frutos maduros foram colhidas para a determinação de sólidos solúveis (SST), pH da polpa, ácido ascórbico (AA) e acidez total titulável (ATT) para determinação da qualidade do tomate. A aplicação de 1,0 g L-1 de L-arginina diminuiu o teor de MDA, e aumentou a atividade das enzimas CAT e APX. Além disso, essa dose do aminoácido aumentou a PC, PT, NFC, NFT e diminuiu a produção de NFNC. / Tolerance inductor products are one of the alternatives to reduce the negative effects of abiotic factors in plants, for instance the decrease of crop yield and quality. In this context, L-arginine is one option of this products to mitigate abiotic plant stress, due to its importance as a functional amino acid and precursor of metabolic plant compounds. Hence, the project objective was to evaluate the exogenous foliar application of different rates of L-arginine (0; 0.15; 0.25; 0.5; 1.0 e 2.0 g L-1) on physiology, yield and quality of tomato cultivar Pizzadoro growth in protected enviroment during Summer. Physiological effect were analized by markers of oxidative stress, as malondialdehyde (MDA) and hydrogen peroxide; activities of superoxide dismutase (SOD), catalase (CAT) and ascorbate peroxidase (APX) enzymes; free amino acids and nutrient contents in tomato leaves. Yield was estimated by total production (TP), production of defective fruit (PDF), non-commercial fruit production (NCFP) and commercial fruit production (CP). CP was classified as small (SPRO), medium (MPRO) and large (LPRO) sizes. Number of total fruit (NTF), number of defective fruit (NDF), number of non-commercial fruit (NNCF) and number of commercial fruit (NCF) were classified as small (NSF), medium (NMF) and large (NLF) sizes. Sample of mature tomatoes were harvested to assess quality, by content of soluble solids (SST), pH of tomato pulp, ascorbic acid (AA) and titratable acidity (TA). Application of L-arginine at rate of 1.0 g L-1 reduced MDA and increased CAT and APX. Besides physiological aspects, this level of amino acid increased CP, TP, NCF, NTF and decreased NNCF.

Submitted by Maria Beatriz Vieira (mbeatriz.vieira@gmail.com) on 2016-08-10T16:49:19Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) tese_patricia_pereira_da_silva.pdf: 2226394 bytes, checksum: cfa3b9ec274a9cdfe86a09041d34d482 (MD5) / Approved for entry into archive by Aline Batista (alinehb.ufpel@gmail.com) on 2016-08-10T22:22:51Z (GMT) No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) tese_patricia_pereira_da_silva.pdf: 2226394 bytes, checksum: cfa3b9ec274a9cdfe86a09041d34d482 (MD5) / Approved for entry into archive by Aline Batista (alinehb.ufpel@gmail.com) on 2016-08-10T22:23:16Z (GMT) No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) tese_patricia_pereira_da_silva.pdf: 2226394 bytes, checksum: cfa3b9ec274a9cdfe86a09041d34d482 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-08-10T22:23:31Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) tese_patricia_pereira_da_silva.pdf: 2226394 bytes, checksum: cfa3b9ec274a9cdfe86a09041d34d482 (MD5) Previous issue date: 2013-12-19 / Conselho Nacional de Pesquisa e Desenvolvimento Científico e Tecnológico - CNPq / A partir da maturidade fisiológica... / From the beginning, of seed physiological....

Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico / The indiscriminate use of agricultural supplies can cause soil pollution, affecting the flora, fauna and ecological relationships. Among these chemical compounds used in agriculture, there is the Bordeaux mixture. The intense use of this fungicide results in a considerable copper addition in the soil, may cause damage to exposed organisms. This study aimed to evaluate the toxicological effects of different copper doses, (0, 35, 70, 105, 140 e 175 mg.Kg-1) applied in soil, at earthworms Eisenia andrei biomass and reproduction, through ecotoxicological tests as well as the effects of exposure to antioxidant enzyme activity, by the enzymes catalase and glutathione S-transferase (GST and CAT), on neurotransmission biomarkers such as acetylcholinesterase (AChE) and cell membrane lipid peroxidation through the levels of malondialdehyde (MDA). The ecotoxicological results showed that the largest copper doses tested, (140 e 175 mg.Kg-1) were toxic, because the worms had a mean biomass reduction and cocoons. In the enzyme assessments, an increase in the glutathione-S-transferase activity was observed as the antioxidant defense mechanism. The significant MDA levels increase and the acetylcholinesterase activity inhibition, indicating the cell membrane lipid peroxidation occurrence and neurotransmission changes as a result of oxidative stress caused by the metal. / O uso indiscriminado de insumos agrícolas pode causar a poluição dos solos, comprometendo a flora, fauna e as relações ecológicas. Dentre os insumos químicos utilizados na agricultura, destaca-se a calda bordalesa. Sua intensa utilização resulta em uma adição considerável de cobre ao solo, podendo causar danos aos organismos expostos. O presente estudo teve como objetivo determinar os efeitos toxicológicos de diferentes doses de cobre: 0, 35, 70, 105, 140 e 175 mg.Kg-1 aplicado ao solo, na biomassa e reprodução das minhocas Eisenia andrei, através dos testes ecotoxicológicos assim como os efeitos da exposição a nível enzimático antioxidante, através das enzimas catalase e glutationa S-transferase (CAT e GST), sobre biomarcadores de neurotransmissão como a acetil-colinesterase (AChE) e na peroxidação lipídica da membrana celular através dos níveis de malondialdeído (MDA). Os resultados ecotoxicológicos, evidenciaram que as maiores doses de cobre testadas, (140 e 175 mg.Kg-1) foram tóxicas, pois as minhocas apresentaram redução média na biomassa e no número de casulos. Em relação aos níveis enzimáticos, foi observado um incremento na atividade das enzimas glutationa-S-transferase, como mecanismo de defesa antioxidante. O aumento significativo nos níveis de MDA observados e a inibição da atividade da acetil-colinesterase, indicam a ocorrência da peroxidação lipídica da membrana celular e alterações na neurotransmissão em decorrência do estresse oxidativo ocasionado pela presença do metal.