Submitted by ANGEL ANDRÉS ARIAS VIGOYA null (lakotah1@gmail.com) on 2017-01-25T17:53:42Z No. of bitstreams: 1 TESE VERSAO DEFINITIVA.pdf: 6803879 bytes, checksum: 2803b2bfb33863aee3dc638d6b31456b (MD5) / Approved for entry into archive by LUIZA DE MENEZES ROMANETTO (luizamenezes@reitoria.unesp.br) on 2017-01-27T13:30:27Z (GMT) No. of bitstreams: 1 ariasvigoya_aa_dr_jabo.pdf: 6803879 bytes, checksum: 2803b2bfb33863aee3dc638d6b31456b (MD5) / Made available in DSpace on 2017-01-27T13:30:27Z (GMT). No. of bitstreams: 1 ariasvigoya_aa_dr_jabo.pdf: 6803879 bytes, checksum: 2803b2bfb33863aee3dc638d6b31456b (MD5) Previous issue date: 2016-12-08 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / Nos vertebrados, a espermatogênese é um processo de desenvolvimento celular altamente conservado e organizado, no qual uma pequena população de espermatogônias tronco produz continuamente milhões de espermatozóides, os quais são os responsáveis pela propagação do genótipo dos machos. Este processo é sustentado pelas espermatogônias tronco através da sua capacidade de auto-renovação e diferenciação. Vários aspectos relacionados com a regulação da atividade e fisiologia das espermatogônias tronco são ainda desconhecidos nos peixes teleósteos. Portanto, a técnica de transplante de células germinativas torna-se uma poderosa abordagem para melhorar o conhecimento da biologia das espermatogônias tronco e da espermatogênese. Resumidamente, a técnica envolve a transferência de células germinativas isoladas de um doador fértil para os testículos de um receptor estéril, e as células transplantadas são capazes de restaurar a gametogênese do receptor. Neste contexto, realizamos uma caracterização morfológica e estereológica dos diferentes tipos de células encontradas na espermatogênese da carpa comum (Cyprinus carpio). Também caracterizamos fenotipicamente as potenciais espermatogônias tronco. Portanto, descrevemos cinco tipos espermatogôniais na carpa comum: espermatogônias indiferenciadas do tipo A (Aund* - Aund), espermatogônias diferenciadas do tipo A (Adiff) e espermatogônias do tipo B (inicial e final). Nesta espécie, o processo espermatogênico durou aproximadamente uma semana. Nossos resultados demonstraram que a população espermatogonial expressa as proteínas c-Kit, Gfrα-1 e POU2. Neste estudo, também foi padronizada a técnica de transplante de espermatogônias na carpa comum. Assim, células germinativas isoladas de kinguios sexualmente maduros foram transplantadas através da papila urogenital de carpas macho quimicamente esterilizadas. As células germinativas derivadas dos doadores foram capazes de colonizar e se desenvolver nos testículos dos receptores. Em geral, nossos resultados reforçam a compreensão da biologia das células germinativas, em especial das potenciais células tronco. Além disso, o transplante, padronizado aqui, é uma abordagem com implicações significativas para a conservação e manejo das espécies valiosas e/ou ameaçadas de extinção. / In vertebrates, spermatogenesis is a highly conserved and organized developmental process, in which a small population of spermatogonial stem cells (SSC) continuosly produce millions of spermatozoa, which are responsible for spreading the male genotype. Likewise other stem cells, SSC are capable of either self-renew or differentiate. Several aspects related to the regulation of SSC activity and physiology are still unknown in teleost fish. Thus, the germ cell transplantation technique becomes a powerful approach to improve the knowledge of SSC biology and spermatogenesis. Briefly, the technique involves the transfer of germ cells isolated from a fertile donor into the testes of a sterile recipient, and transplanted donor germ cells are able to restore the recipient gametogenesis. Taking advantage of this background, we performed morphological and stereological characterization of the different cell types found in the common carp (Cyprinus carpio) spermatogenesis. We also characterized the putative SSC candidates by morphology. Therefore, we described five spermatogonial types in common carp: type A undifferentiated spermatogonia (Aund* - Aund), type A differentiated spermatogonia (Adiff) and type B spermatogonia (early and late). In this species, the spermatogenic process lasted approximately one week. Our findings demonstrated that the spermatogonial population expressed the c-Kit, Gfrα1 and POU2 proteins. Donor germ cells isolated from goldfish were transplanted non-surgically through urogenital papilla into the sexually mature cytoablated common carp recipients. Donor transplanted germ cells were able to colonize and develop in recipients’ testes. Overall, our results strengthens the knowledge of germ cell biology, focusing on stem cells. Finally, transplantation, standardized here, is an approach with significant implications for the conservation and management of endangered and valuable fish species. / CAPES: 15213-12-9

O objetivo, deste estudo foi investigar o comportamento dos hormônios esteróides 17β-Estradiol (E2), 17α-hidroxiprogesterona (17α-OHP), Testosterona (T) e 11-Ketotestosterona (11-KT), em piracanjuba Brycon orbignyanus de diferentes sexos e idades, na estação reprodutiva, e nas fêmeas submetidas à reprodução induzida. Os animais utilizados no trabalho, eram criados em piscicultura comercial, mantidos em 3 viveiros, separados por lotes de diferentes idades. A coleta dos animais, consistiu de quatro machos e cinco fêmeas (48 meses), identificados através do dimorfismo sexual da espécie, e as demais idades, (12 e 24 meses), coletaram-se, 20 peixes de cada idade, para identificação do sexo através de histologia. Já o experimento de caracterização dos esteróides sexuais na reprodução induzida, foram coletadas cinco fêmeas, selecionadas através das características com: abdome abaulado, papila urogenital, saliente e avermelhada. Após captura, os peixes foram transportados ao laboratório, onde houve coleta de sangue, para quantificação do perfil plasmático de E2, 17α-OHP, T e 11-KT. Posteriormente, os animais foram abatidos e suas gônadas coletadas e fixadas, a fim de que fosse realizada análise histológica para identificação do sexo. Na reprodução induzida, foi coletado sangue em dois momentos: pré-indução (PI) e pós-extrusão (PE). O nível plasmático de E2 nos machos de 12 meses destaca sua ação no processo de proliferação e renovação das espermatogônia observado em machos imaturos. Nas fêmeas o E2 apresentou os maiores níveis (P<0,05) nos animais de 48 meses, confirmando assim, sua principal função na estimulação do processo de vitelogênese, e maturação final do oócito. Quanto aos andrógenos T e 11-KT, os maiores níveis (p<0,05) foram observados nos peixes adultos (48 meses), permitindo afirmar que estes atuam como feedback negativo, do FSH e feedback positivo do LH, fundamental no processo de maturação final e liberação dos gametas, além de regular o comportamento reprodutivo. O resultado da 17α-OHP, sugere que, nas idades estudadas, é indispensável por participar como precursor dos principais esteróides (T, E2 e 11-KT), além da 17α,20β dihydroxy-4-pregnen-3-one (17α,20β-DHP), essencial no estágio final de maturação, e desova na reprodução induzida. / The objective of this study was to investigate the physiological behavior of steroid hormones 17β-Estradiol (E2), 17α-hydroxyprogesterone (17α-OHP), testosterone (T) and 11-Ketotestosterone (11-KT) in Brycon orbignyanus with different sex and ages on the reproductive season and in females submitted to induced reproduction. The animals used in the study were kept in three ponds on a commercial fish farming, separated by lots with different ages. The sampling of animals consisted of the collection of four males and five females (48 months) identified by the sexual dimorphism of the specie. In the other groups (12 and 24 months), 20 fish of each age were collected for identification of sex through histology. In the experiment with characterization of the sexual steroids in the induced reproduction, were collected five females selected through the following characteristics: bulging abdomen and prominent reddish genital papilla. After capture, the fish were transported to the laboratory, where blood was collected for quantification of the plasma profile of E2, 17α-OHP, T and 11-KT Subsequently, the animals were slaughtered and their gonads were collected and fixed for histological analysis. In the induced females, blood was collected at two moments: pre-induction (PI) and post-extrusion (PE). The plasma profile of E2 is fundamental in immature males, highlighting its action in the process of proliferation and renewal of spermatogonia, observed in males of 12 months. In females E2 presented the highest levels (P <0.05) in animals at 48 months, thus confirming its main function in the stimulation of the vitellogenesis process and final oocyte maturation. The highest levels (p <0.05) of T and 11-KT androgens were observed in adult fish (48 months), allowing to affirm that they are acting as FSH negative feedback and LH positive feedback, fundamental in the final maturation and release of the gametes, besides regulating the reproductive behavior of the fish. The results of 17α-OHP suggest this hormon is fundamental in the studied ages because it is a precursor of the main steroids (T, E2 and 11-KT) and 17α, 20β-dihydroxy-4-pregnen-3-one (17α, 20β-DHP), essential in the final stage of maturation and spawning in induced reproduction.

A espécie em estudo (Brycon orbignyanus) vem apresentando um declínio populacional importante nos últimos anos em função de interferências antrópicas. Por este motivo, populações naturais na bacia do rio Uruguai são praticamente inexistentes, e os estoques mantidos em cativeiro apresentam razões sexuais desproporcionais e perdas importantes de variabilidade genética, o que prejudica o uso desta espécie em programas de conservação. Esta tese tem como objetivo principal avaliar parâmetros populacionais e reprodutivos de Brycon orbignyanus sob condições de cativeiro visando a aplicabilidade deste conhecimento em programas de conservação. Com isso, objetivou-se no primeiro experimento avaliar as flutuações na razão sexual ao longo do desenvolvimento ontogenético e os diferentes padrões morfológicos de crescimento entre os sexos. Quinhentos exemplares foram amostrados de uma piscicultura comercial e os dados biométricos foram registrados para a realização de uma regressão linear entre peso e comprimento. A partir do teste Qui-Quadrado (χ²) foi possível observar que a razão sexual apresentou desproporções nas classes de comprimento superiores. Os machos e fêmeas apresentaram crescimento alométrico positivo (b=3,35 e b=3,44), enquanto indivíduos sexualmente indiferenciados apresentaram alometria negativa (b=2,96) O objetivo do segundo estudo foi descrever os processos de diferenciação sexual, afim de definir o período termossensível. Após eutanásia dos animais, as gônadas foram coletadas e fixadas em solução formaldeído tamponado 4%. Os cortes seriados (3μm) foram corados com Azul de Toluidina e analisados por microscopia de luz. Os primeiros sinais de diferenciação sexual foram observados apenas aos 323 dias após a fertilização (DAF) e, aos 730 DAF todos os indivíduos já estavam diferenciados sexualmente. O objetivo do terceiro estudo foi descrever o ciclo reprodutivo de machos de B. orbignyanus, a fim de se estabelecer uma escala de maturação para machos desta espécie. Para isto, exemplares da espécie foram coletados periodicamente em uma estação de piscicultura comercial. Assim como no experimento anterior, as gônadas foram coletadas e fixadas para análise histológica. As análises das imagens foram obtidas através de microscópio óptico e a descrição das fases reprodutivas seguiu recomendações de Brown-Peterson et al. (2011). Foram estabelecidas 5 fases reprodutivas de acordo com as características macroscópicas dos testículos, presença e distribuição das células espermatogênicas e variações no índice gonadossomático. Os primeiros indivíduos aptos à reprodução foram observados aos 435 DAF. / The species under study (Brycon orbignyanus) has undergone a important population decline in the last years due to anthropic interferences. For this reason, natural populations in the Uruguay River basin are practically non-existent, and stocks kept in captivity suffer from disproportionate sex ratios, and significant losses of genetic variability, impairing the use of this species in conservation programs. The main objective of this thesis is to evaluate the population and reproductive parameters of Brycon orbignyanus under captive conditions aiming the applicability of this knowledge in conservation programs. Thus, the objective of the first experiment was to evaluate the fluctuations in sexual ratio along the ontogenetic development and the different morphological patterns of growth between the sexes. Five hundred specimens were sampled from commercial fish farming and biometric data were recorded for a linear regression between weight and length. From the chi-square test (χ²) it was possible to observe that the sex ratio showed disproportions in the upper length classes. Males and females showed positive allometric growth (b = 3.35 and b = 3.44), while sexually undifferentiated individuals showed negative allometry (b = 2.96). The objective of the second experiment was describe the processes of sexual differentiation, in order to define the thermosensitive period After euthanasia of the animals, the gonads were collected and fixed in 4% buffered formaldehyde solution. Serial sections (3 μm) were stained with Toluidine Blue and analyzed by light microscopy. The first signs of sexual differentiation were observed only at 323 days after fertilization (DAF), and at 730 DAF all individuals were already sexually differentiated. The objective of the third experiment was to describe the reproductive cycle of B. orbignyanus males, in order to establish a maturation scale for males of this species. For this, specimens were collected periodically in a commercial fish farm. As in the previous experiment, the gonads were collected and fixed for histological analysis. The images were obtained through an optical microscope and analyzed according to the description of the reproductive phases suggested by Brown-Peterson et al. (2011). Five reproductive phases were established according to macroscopic characteristics of the testes, presence and distribution of spermatogenic cells and variations in the gonadosomatic index. The first individuals able to reproduce were observed at 435 DAF.

Orientadores: Mary Anne Heidi Dolder, Karina Carvalho Mancini / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-08-10T15:52:17Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Moya_JulianaSiqueira_M.pdf: 6061809 bytes, checksum: 3498b49d3b5da2af4c020b2cec6420ed (MD5) Previous issue date: 2008 / Resumo: Iporangaia pustulosa (Arachnida: Opiliones) é uma espécie de opilião pertencente à subordem Laniatores. Machos adultos desta espécie tiveram seus aparelhos reprodutores dissecados, e seus testículos e vesículas seminais processados para microscopias de luz e eletrônicas de transmissão (convencional e citoquímica - E-PTA) e varredura. O aparelho reprodutor de I. pustulosa é composto por um testículo tubular, dois ductos deferentes que se unem em uma grande vesícula seminal. O testículo apresenta cistos com células germinativas em diferentes fases de desenvolvimento. A espermiogênese é centrípeta e caracterizada por: (1) ausência de formação de flagelo; (2) centro cinético reduzido a dois centríolos do tipo 9+0; (3) formação de manchete de microtúbulos, que auxiliam na compactação nuclear e na determinação da forma celular; (4) gradual compactação cromatínica nas diferentes fases das espermátides até a total compactação nos espermatozóides; (5) desenvolvimento de uma invaginação citoplasmática em direção ao núcleo, desprovida de organelas; (6) acrossomo formado a partir de vesículas do Golgi, composto por uma vesícula acrossomal, um material denso sub-acrossomal, mitocôndrias e pequenas vesículas associadas; (7) espermatozóides ovais, aflagelados, com membrana plasmática ondulada. Pelo método de E-PTA foram detectadas proteínas básicas em diferentes estruturas ao longo do desenvolvimento da espermiogênese. Os espermatozóides formados são liberados dos cistos no centro do testículo e são armazenados na vesícula seminal. Dispersos pela luz da vesícula, os espermatozóides apresentam os mesmos componentes observados no testículo, porém adquirem projeções extracelulares aderidas às ondulações da membrana recobrindo a superfície celular, exceto na região do acrossomo. Essas projeções são adquiridas gradualmente ao longo da extensão da vesícula seminal e são recobertas por um material amorfo na extremidade semelhante a um glicocálice. A espermiogênese de I. pustulosa e a morfologia dos espermatozóides testiculares e vesiculares são semelhantes ao descrito para a espécie Vonones sayi, também pertencente à sub-ordem Laniatores. Por não ocorrer formação de axonema durante a espermiogênese, os espermatozóides de I. pustulosa são aflagelados e tais projeções podem estar envolvidas no transporte do espermatozóide, sua ancoragem no interior da fêmea ou ainda no reconhecimento do óvulo / Abstract: Iporangaia pustulosa (Arachnida: Opiliones) is a harvestman species belonging to the Laniatores suborder. Adult males of this species had their reproductive tracts dissected and their testis and seminal vesicles were processed for light, transmission (routine preparations and cytochemistry: E-PTA) and scanning electron microscopy. The reproductive tract of I. pustulosa is composed of a tubular testis and two deferent ducts that connect to a large seminal vesicle. The testis presents cysts of germ cells in different developmental stages. Spermiogenesis in I. pustulosa is centripetal and characterized by (1) the lack of flagellum formation; (2) the kinetic center reduced to two centrioles of the 9+0 type; (3) the microtubule manchette formation; (4) the gradual chromatin condensation from spermatids to spermatozoa; (5) the cytoplasmic invagination development, without organelles, that extends into the nucleus; (6) the acrosome formed by Golgi vesicles, composed of acrossomal vesicles, a subacrosomic dense material, associated mitochondria and small vesicles; (7) the oval aflagellated spermatozoa, with a wavy plasma membrane. With the E-PTA method, basic proteins were detected in different structures throughout spermiogenesis. The spermatozoa are released from the cysts in the center of the testis and are kept in the seminal vesicle lumen. There, the spermatozoa present the same components observed in the testis, however they acquire extracellular projections, which adhere to the wavy membrane covering the cell surface, except in the acrosome area. These projections are acquired gradually along the seminal vesicle length and are covered by an amorphous material on their tips, resembling a glycocalix. The spermiogenesis of I. pustulosa as well as the morphology of testicular and seminal vesicle spermatozoa are similar to that described for Vonones sayi, also belonging to the Laniatores suborder. As axoneme formation does not occur during the spermiogenesis, I. pustulosa spermatozoa are aflagellated and their projections could help to transport sperm along the male and female reproductive tracts, anchor the spermatozoa inside the female and/or play a role in oocyte recognition / Mestrado / Biologia Celular / Mestre em Biologia Celular e Estrutural

No Estado do Maranhão, na região da Baixada Maranhense, presenta na fauna silvestre o réptil Kinosternon scorpioides, um quelônio de água doce popularmente conhecido como jurará e que possui valor social, econômico e ambiental para os ribeirinhos da cidade de São Bento. Este estudo contempla suas características biológicas reprodutivas baseadas em seu ambiente natural, com o intuito de permitir a preservação e o estabelecimento de planos de manejo reprodutivo e de uso sustentável da espécie. Recentemente poucos estudos em todo o mundo tratam sobre os aspectos do ciclo reprodutivo de tartarugas em face das características endócrinas, na América do Sul estudos desse tipo são recentes e escassos, sendo assim este é o primeiro estudo, que se tem conhecimento, que elucida um padrão sazonal reprodutivo da espécie K. scorpioides, associando hormônios gonadais com aspectos comportamentais. Trinta e oito animais adultos tiveram seus órgãos reprodutivos caracterizados para as enzimas esteroidogênicas P450 aromatase, P450c17 e PNADPH redutase através de imunomarcação e blotting, além de índice gonadossomático, morfometria e concentração de testosterona, corticosterona e estradiol pela técnica de radioimunoensaio. As mudanças biométricas, morfometria celular e a esteroidogênese testicular entre os períodos chuvoso e seco sugerem que o estrógeno produzido pelas células de leydig podem afetar a produção e a apoptose de células germinais durante o processo de espermatogênese, e a presença das enzimas P450aromatase e P450c17 em células de leydig acompanhados com a recrudescência testicular também reforça a ideia, de que elas podem desempenhar um papel na quiescência testicular. Esse trabalho evidenciou que as enzimas citocromo P450, citocromo P450c17 e NADPH-citocromo P450-redutase estão presentes no testículo e epidídimo nos diferentes períodos climáticos e podem estar relacionados à síntese de testosterona em tartarugas concordando com os diferentes achados para biometria e espermiogênese nos períodos chuvoso e seco, o que, nos leva a sugerir um estado de quiescência durante o período seco e atividade espermatogênica no período chuvoso, semelhante ao que ocorre com as espécies que apresentam comportamento reprodutivo sazonal / In the state of Maranhão, in the lowland region, the reptile Kinosternon scorpioides, a freshwater chelonian, popularly known as swear has social, economic and environmental value to the riparian of the city of São Bento. This study includes reproductive biological characteristics based on their natural environment in order to enable the preservation and the establishment of reproductive management plans and sustainable use of the species. To date, few studies around the world address the aspects of the reproductive cycle of the turtles in the face of the endocrine features. In South America, these studies are recent and scarce. So this is the first study that elucidates a reproductive seasonal pattern of the species K. scorpioides, by associating gonadal hormones with behavioral aspects. Thirty-eight adult animals had their reproductive organs characterized for P450 steroidogenic enzyme aromatase, P450c17 and NADPH reductase by immunostaining and immunoblotting, and gonadossomatic index, morphology and concentration of testosterone, corticosterone and estradiol by radioimmunoassay. Biometric changes, cell morphology and testicular steroidogenesis between the rainy and dry seasons suggests that the estrogen produced by the leydig cells can affect the production and apoptosis of germ cells during spermatogenesis process; and the presence of P450aromatase and P450c17 enzymes in the leydig cells accompanied with testicular recrudescence also reinforces the idea that they may play a role in testicular quiescence. This work showed that the cytochrome P450 enzymes, P450c17 and NADPH-cytochrome P450 reductase are present in the testis and epididymis at different climatic periods and may be related to testosterone synthesis in turtles agreeing to the different findings for biometrics and spermiogenesis in and dry rainy periods. These findings suggest a state of quiescence during the dry season and spermatogenic activity during the rainy season, similar to those found in species with seasonal reproductive behavior

Submitted by Mario BC (mario@bc.ufrpe.br) on 2016-05-18T14:02:23Z No. of bitstreams: 1 Luiz Andre Rodrigues de Lima.pdf: 2120469 bytes, checksum: 547b856a4a41c79b0e6825587dbb6569 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-05-18T14:02:23Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Luiz Andre Rodrigues de Lima.pdf: 2120469 bytes, checksum: 547b856a4a41c79b0e6825587dbb6569 (MD5) Previous issue date: 2011-02-10 / The directly heat applied on the testis has given new information about the mechanisms triggers of spermatogenesis damages. Pecan nut shell [Carya illinoensis (Wangenh) K. Koch], is a vegetal by-product with low cost and elevated antioxidant potential and therefore can be considered a promissory substance, because it is rich in polifenols, condensed tannins, flavonoids substances and proanthocyanidis. The aim of this study was to verify whether the pecan nut tea has been protective effects against deleterious actions, produced by heat in the testicular parenchyma and its capacity to accelerate the spermatogenesis recovery process. Forty-five male Wistar rats (Rattus norvegicus, var. albinus) were used and divided in three groups. The testicular heat shock (HS) were been applied in all animals. The first one group G1 hadn’t received pecan nut tea on its diet; the second G2, only received the cited tea before (HS) and the third group G3 received the pecan nut tea before and after HS. The animals were evaluated on 15, 30 and 60 days after heat shock according to histopathological and histometrical testis alterations as well plasmatic testosterone. The occurrence of oxidative stress (OS) was observed through the determination of lipid peroxidation (LP), measured by the thiobarbituric acid reactive substances (TBARS). Carbonil group, reduced glutathione (GSH), vitamin C levels, catalase activity and protein content in testis were evaluated. In this work was observed a recover of testis weight recover in animals belong to G1 and G2 groups at 30 and 60 days. The epididymal weight of G3, at 15 and 30 days showed an improvement when related with G1 and G2 groups. The prostate and seminal gland weight in G2 and G3 had an improvement in weight when compared with G1 group, at 30 day. The pecan nut tea prevented a total Leydig cell volume reduction at 30 day post thermal injury. The total volume of seminiferous tubules was quickly recovered on G2 and G3 groups at 30 days than G1 group. The seminiferous tubule volume followed the same pattern of seminiferous tubule. Regarding to tunica propria and blood vessel, animals treated with pecan nut tea had a reduction of this parameter at 60 days. The total length of seminiferous tubules was maintained in animals that took continuously pecan nut tea. The plasmatic levels of testosterone were maintained at 15 days in G2 and G3 groups, and after that was noted a lower testosterone levels tendency at 30 and 60 days. By the other side, testosterone levels in animals of G1 group become higher gradually at 15 until 60 days. According to histopathological findings was noted that prior administration of pecan nut tea, before heat shock had better effect on recovery of spermatogenic process at 30 and 60 days. The treatment with pecan nut tea was able to prevent the TBARS increase and GSH depletion in testis. There weren’t significative changes on the plasmatic vitamin C levels, carbonil groups, catalase activity and protein content in the testis of animals. / O calor aplicado diretamente sobre o testículo tem fornecido novas informações sobre os mecanismos desencadeadores dos danos à espermatogênese. A casca da noz pecã [Carya illinoensis (Wangenh) K. Koch] é um sub-produto de origem vegetal de baixo custo e com elevado potencial antioxidante, constituída por polifenóis, taninos condensados, substâncias flavonóides e proantocianinas. O objetivo deste trabalho foi verificar se o chá de noz-pecã apresenta efeito preventivo e/ou restaurador contra as ações deletérias produzidas pelo calor no parênquima testicular, assim como avaliar a capacidade deste em acelerar a recuperação do processo espermatogênico. Foram utilizados 45 ratos Wistar machos (Rattus norvegicus, var. albinus) divididos em três grupos: G1- choque térmico, G2 - chá de noz-pecã pré-choque térmico e G3 - chá de noz-pecã pré e pós-choque térmico. Os animais foram avaliados aos 15, 30 e 60 dias pós-choque térmico quanto às alterações histopatológicas e histomorfométricas dos testículos, assim como, determinou-se níveis plasmáticos de testosterona. Parâmetros de estresse oxidativo (EO) foram avaliados no homogenato de testículo através da peroxidação lipídica (LPO), medida por meio da formação de espécies reativas ao ácido tiobarbitúrico (TBARS). Grupo carbonil, glutationa reduzida (GSH), níveis de vitamina C (VIT C), atividade da catalase e conteúdo protéico também foram determinados. Neste trabalho foi constatada tendência de recuperação do peso testicular dos animais dos grupos G2 e G3 aos 30 e 60 dias. O peso epididimário dos animais do grupo G3, aos 15 e 30 dias apresentou uma melhora significativa em relação aos grupos G1 e G2. Os pesos da próstata e vesícula seminal em G2 e G3 aumentaram em relação ao grupo G1, aos 30 dias. A administração do chá da casca de noz-pecã preveniu a redução do volume total de células de Leydig no período de 30 dias pós-injúria. O volume total de túbulos seminíferos foi recuperado mais rapidamente nos grupos G2 e G3 aos 30 dias do que o grupo G1. O volume de epitélio seminífero seguiu o mesmo padrão do túbulo seminífero, porém aos 60 dias. No tocante à túnica própria e vasos sanguíneos, os animais tratados com chá tiveram redução volumétrica neste parâmetro aos 60 dias. O comprimento total dos túbulos seminíferos foi preservado nos animais que fizeram uso contínuo do chá de noz-pecã. Os níveis plasmáticos de testosterona foram mantidos aos 15 dias nos grupos G2 e G3, e posteriormente notou-se tendência de diminuição destes níveis aos 30 e 60 dias. Por outro lado, os níveis plasmáticos de testosterona nos animais do grupo G1 aumentaram gradativamente dos 15 aos 60 dias. De acordo com os achados histopatológicos, constatou-se que a administração prévia de chá de noz-pecã ao insulto térmico proporcionou uma melhor qualidade na recuperação do processo espermatogênico aos 30 e 60 dias. O tratamento com chá de noz-pecã foi capaz de prevenir o aumento do TBARS e diminuição do GHS nos testículos. Não houve diferença significativa nos níveis de VIT C, grupos carbonil, atividade da catalase e no conteúdo protéico dos testículos dos animais. Os resultados obtidos demonstraram que o tratamento com chá da casca de noz-pecã, tanto administrado previamente aos animais como depois da injúria térmica testicular apresentaram efeitos preventivos e restauradores da espermatogênese.

Submitted by Mario BC (mario@bc.ufrpe.br) on 2016-05-20T12:31:27Z No. of bitstreams: 1 Marcio Botelho Pedrosa.pdf: 1800527 bytes, checksum: 11a367f2109b6bdb35c4c412d6888313 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-05-20T12:31:27Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Marcio Botelho Pedrosa.pdf: 1800527 bytes, checksum: 11a367f2109b6bdb35c4c412d6888313 (MD5) Previous issue date: 2015-08-06 / The advancement of technology and the significant increase in radio networks and telecommunications, causes, increasingly, people are exposed and immersed in electromagnetic fields, the effects appear to be controversial and parameter-dependent, and short-term can not represent an imminent risk when applied in a controlled manner, however, as these will behave with the immersion chronic forms in our daily lives is inconclusive and without sufficient studies. On the other hand, the short-wave electromagnetic fields (27.12 MHz) represent an alternative in treatment with electrotherapies for pains and inflammatory processes that affect millions of people worldwide. This work conducted application of short wave field into three groups of Wistar rats divided by daily exposure times of 15, 30 and 60 consecutive days and controls was studied the effects of electromagnetic fields may generate the testes and on spermatogenesis. With such irradiation observed changes primarily on Leydig cells and a variation in testosterone dose between groups, as well as a reduction in long-term prostate weight. Although no alterations in testicular weights and no indication of lesions histopathology with optical microscopy. / O avanço da tecnologia e o aumento significativo das redes de radiofrequências e telecomunicações, faz com que, cada vez mais, as pessoas fiquem expostas e imersas em campos eletromagnéticos, cujos efeitos aparentam ser controversos e parâmetro-dependentes, e a curto prazo podem não representar um risco iminente quando aplicados de forma controlada, no entanto, como estes comportar-se-ão com a imersão de formas crônicas em nosso cotidiano é inconclusivo e sem estudos suficientes. Por outro lado, os campos eletromagnéticos de ondas curtas (27,12 MHz) representam uma alternativa nos tratamentos com eletroterapias para algias e processos inflamatórios, que atingem milhares de pessoas pelo mundo. Este trabalho realizou aplicação do campo de ondas curtas em três grupos de ratos wistar divididos pelos tempos de exposição diário em 15, 30 e 60 dias consecutivos e seus controles, foi estudado os efeitos que os campos eletromagnéticos podem gerar nos testículos e sobre a espermatogênese. Com esta irradiação observou-se mudanças principalmente sobre as células de Leydig e uma variação na dosagem de testosterona entre os grupos, bem como uma diminuição do peso da próstata a longo prazo. Embora não tenham ocorridas alterações nos pesos testiculares e nenhum indicativo de lesões na análise histopatológica com a microscopia óptica.

Submitted by (lucia.rodrigues@ufrpe.br) on 2016-06-09T15:06:51Z No. of bitstreams: 1 Simone Regina Barros de Macedo.pdf: 2548752 bytes, checksum: 90acee3c721461fe6680346a6a39a92a (MD5) / Made available in DSpace on 2016-06-09T15:06:51Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Simone Regina Barros de Macedo.pdf: 2548752 bytes, checksum: 90acee3c721461fe6680346a6a39a92a (MD5) Previous issue date: 2013-02-28 / Chemical sterilization is an efficient, inexpensive and suitable for sterilization programs on a large scale domestic animals. It is believed that the injection of intratesticular zinc-based solution promotes an inflammatory reaction, and this reaction may affect spermatogenesis, taking the animal sterility. By virtue of this inflammatory reaction cause discomfort to animals, it is recommended the use of analgesics and anti-inflammatories to minimize undesirable side effects. However, the use of these drugs may inhibit the desired sterilizing agent. Therefore, the present study aimed to investigate whether the administration of anti-inflammatory steroidal, non-steroidal inhibit the effect of sterilizing solution based zinc gluconate on testicular function of rats. Therefore, 72 animals at 90 days of age were kept in vivarium conditions at Department of Morphology and Physiology, Federal Rural University of Pernambuco. These animals were divided into six groups: control / saline (G1), control / DMSO + dipyrone (G2), dipyrone (G3); Celecoxib + dipyrone (G4), dipyrone, meloxicam + + (G5); dipyrone + dexamethasone + (G6). The animals were anesthetized and injected intratesticular solution based on zinc gluconate (Infertile®). Treatment with anti-inflammatories and anti pain were conducted using a single dose per day for 7 consecutive days. After 7, 15 and 30 days the animals were heparinized, anesthetized and perfused testis and epididymis were collected for qualitative analysis of the lesions and blood plasma for testosterone measurement using the method of enzyme linked immunosorbent assay (ELISA). Regarding the histopathological lesions, the most frequent in the testes were the presence of inflammation, tubular necrosis, dystrophic calcification, congestion, edema and subcapsular tubular degeneration and atrophy of the epididymis duct, collagen deposition, and neovascularization and inflammatory infiltrate. As for the animals that underwent intratesticular injection of zinc gluconate, we found an average reduction of 74, 66 and 53% of testosterone levels in the respective experimental periods 7, 15 and 30 days. In this sense, found that intratesticular injection of Infertile® was effective on sterilization even after use of anti-inflammatory therapy. Thus anti-inflammatory steroidal and non-steroidal administered in this experiment for 7 days post-testicular infiltration can be used in chemical sterilization protocol to reduce nociceptive effects in animals infiltrate. However, the anti-inflammatory effect of dexamethasone interfered in action desired Infertile® in the first 15 days. Associations meloxicam / dipyrone and celecoxib / dipyrone may be therapy and anti-inflammatory analgesic of choice among the studied chemical sterilization protocols. / A esterilização química constitui uma alternativa eficiente, de baixo custo e adequada para programas de esterilização em grande escala de animais domésticos. Acredita-se que a injeção intratesticular da solução à base de zinco promove uma reação inflamatória e, esta reação pode comprometer a espermatogênese, levando o animal à esterilidade. Em virtude de essa reação inflamatória gerar desconforto aos animais, preconiza-se o uso de analgésicos e anti-inflamatórios para minimizar efeitos colaterais indesejáveis. Contudo, a utilização desses fármacos poderia inibir o efeito desejado do agente esterilizante. Portanto, o presente trabalho teve por objetivo investigar se a administração de anti-inflamatórios esteroidais, não-esteroidais inibem o efeito esterilizante da solução à base de gluconato de zinco sobre a função testicular de ratos Wistar. Para tanto, 72 animais com 90 dias de idade foram mantidos em condições de biotério no Departamento de Morfologia e Fisiologia da Universidade Federal Rural de Pernambuco. Esses animais foram divididos em seis grupos experimentais: controle/ solução salina (G1); controle/ DMSO + dipirona sódica (G2); dipirona sódica (G3); Celecoxibe + dipirona sódica (G4); meloxicam + dipirona sódica + (G5); dexametasona + dipirona sódica + (G6). Os animais foram anestesiados e submetidos à injeção intratesticular de solução à base de gluconato de zinco (Infertile®). Os tratamentos com anti-inflamatórios e antiálgico foram realizados através de uma dose única por dia, durante 7 dias consecutivos. Após 7, 15 e 30 dias os animais foram heparinizados, anestesiados e perfundidos, sendo coletados testículos e epidídimos para análise qualitativa das lesões e plasma sanguíneo para dosagem de testosterona utilizando o método de ensaio imunoenzimático (ELISA). Com relação às lesões histopatológicas, as mais frequentes nos testículos foram à presença de processo inflamatório, necrose tubular, calcificação distrófica, congestão, degeneração tubular e edema subcapsular e nos epidídimos atrofia de ducto, deposição de colágeno, neovascularização e infiltrado inflamatório. Quanto aos animais que foram submetidos à injeção intratesticular de gluconato de zinco, constatou-se redução média de 74, 66 e 53 % dos níveis de testosterona nos respectivos períodos experimentais 7, 15 e 30 dias. Neste sentido, Constatou-se que a injeção intratesticular de Infertile® foi eficiente em promover esterilização mesmo após utilização de terapia anti-inflamatória. Assim anti-inflamatórios esteroidais e não-esteroidais administrados, neste experimento, durante 7 dias pós-infiltração testicular podem ser utilizados no protocolo de esterilização química para reduzir os efeitos álgicos nos animais infiltrados. Contudo, o efeito anti-inflamatório da dexametasona interferiu na ação desejada do Infertile® nos 15 primeiros dias. As associações meloxicam/dipirona ou celecoxibe/dipirona podem ser a terapia antiálgica e anti-inflamatória de eleição dentre os protocolos de esterilização química estudados.

Submitted by Reginaldo Soares de Freitas (reginaldo.freitas@ufv.br) on 2018-05-24T13:16:05Z No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 1295210 bytes, checksum: 4ce6920b272a35167656916056179c03 (MD5) / Made available in DSpace on 2018-05-24T13:16:05Z (GMT). No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 1295210 bytes, checksum: 4ce6920b272a35167656916056179c03 (MD5) Previous issue date: 2018-02-28 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / Plantas medicinais dominam a farmacologia por proverem várias fontes de remédios e assim, a mesma espécie de planta pode ter compostos que melhoram e compostos que prejudicam a espermatogênese. Dianthus caryophyllus apresenta ação antibiótica, antifúngica, antiviral, antioxidativa, sedativa e tranquilizante. Teve ação no controle da pressão arterial em ratos e possível efeito antiurolítico, porém nenhum estudo foi feito para avaliar seus efeitos na reprodução. Assim, esse estudo visou avaliar o efeito do extrato aquoso da flor de Dianthus caryophyllus (EADC) nos testículos de camundongos Balb/c, além da resposta de enzimas antioxidante à planta. Quarenta e oito animais foram distribuídos aleatoriamente em seis grupos experimentais (n=8): G1 (Controle), G2 (Viagra), G3, G4, G5 receberam diariamente 10, 20, 40 mg/kg de EADC, respectivamente, e o G6 recebeu EADC 40mg/kg em dias alternados. Foram realizadas análises morfométricas e estereológicas do parênquima testicular, avaliação de alterações estruturais do tecido, atividade das enzimas catalase (CAT), superóxido dismutase (SOD) e glutationa S-transferase (GST), além da concentração de malondialdeido (MDA) e de óxido nítrico (ON) nos testículos. Houve redução do diâmetro, proporção, volume e área do lúmem tubular, aumento da proporção e área de epitélio seminífero em todos os grupos tratados com a planta, sendo que o diâmetro tubular reduziu apenas em G5. Houve redução da proporção de túbulos seminíferos normais e aumento de vacúolos em todos os grupos. No intertúbulo houve aumento de tecido conjuntivo em G5. A proporção de células de Leydig aumentou apenas em G6, assim como o volume das células de Leydig por grama de testículo no mesmo grupo. O número de células de Leydig por testículo aumentou apenas em G6, enquanto por grama de testículo houve aumento em G5 e G6. Quanto à volumetria dos componentes, houve aumento do volume de tecido conjuntivo em G4, G5 e G6. Houve aumento de CAT em G5 e G6 e de MDA em todos os grupos tratados. Pode-se inferir que houve aumento da produção espermática em todos os grupos, no intertúbulo nota-se mais efeitos em Leydig e tecido conjuntivo principalmente nos grupos G5 e G6 e que a planta gera estresse oxidativo. / Medicinal plants dominate pharmacology by providing various sources of medicines and thus, the same plant species may have components that improve and impair spermatogenesis. Dianthus caryophyllus has antibiotic, antifungal, antiviral, antioxidative, sedative and tranquilizing actions. It had action in controlling blood pressure in rats and possible antiurolithic effects, but no study was done to evaluate its effects on reproduction. The aim of this study was evaluate the effect of the aqueous extract of the Dianthus caryophyllus flowers (AEDC) on the testis of Balb/c mice and the antioxidant enzyme response to the plant. 48 animals were randomly distributed in six experimental groups (n = 8): G1 (Control), G2 (Viagra), G3, G4, G5 received daily 10, 20, 40 mg / kg AEDC respectively and G6 40 G / AEDC 40mg / kg every other day. Morphometric and stereological analyzes of the testicular parenchyma, evaluation of tissue structural alterations, activity of catalase (CAT), superoxide dismutase (SOD) and glutathione S-transferase (GST), and malondialdehyde (MDA) and oxide nitric oxide (ON) in the testicles. There was a reduction in the diameter, proportion, volume and area of the tubular lumen, increase in the proportion and area of seminiferous epithelium in all groups treated with the plant, and reduction of tubular diameter only in G5. There was a reduction in the proportion of normal seminiferous tubules and increase of vacuoles in all groups. In the intertubular compartment there was reduction in the proportion of lymphatic space as well as increase of connective tissue in all the treated groups. The proportion of Leydig cells increased only in G6, as did the volume of Leydig cells per gram of testis in the same group. The number of Leydig cells per testis increased only in G5, while per gram of testis there was increase in G5 and G6. In the volumetry of the components, there was an increase of only connective tissue in G4, G5 and G6. There was an increase in CAT in G5 and G6 and in MDA in all treated groups. It can be concluded that there was an increase in sperm production in all groups, in the intertubular compartment there were more effects in Leydig and connective tissue, especially in the G5 and G6 groups, and that the plant generates oxidative stress.

Orientadores: Irani Quagio Grassiotto, Daniela Calcagnotto / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-08-25T14:34:56Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Santana_JulioCesardeOliveira_D.pdf: 22975611 bytes, checksum: d02baacf927c5c48bc5cc9f97db90deb (MD5) Previous issue date: 2014 / Resumo: A superfamília Erythrinoidea é uma das oito famílias que compõem a ordem Characiformes e foi proposta como um grupo monofilético para abrigar as famílias neotropicais Ctenoluciidae, Erythrinidae e Lebiasinidae, e a família africana Hepsetidae. Após a proposição da superfamília, estudos filogenéticos recentes com base em caracteres morfológicos, como osteologia e morfologia de partes moles, e caracteres moleculares tem refutado a ideia de monofiletismo do grupo. Além disso, diferentes autores divergem quanto às relações suprafamiliares de Erythrinoidea. Além dos caracteres tradicionais, o emprego dos caracteres oriundos da análise da ultraestrutura da ontogenia dos espermatozoides e sua forma final tem sido uma importante fonte na complementação dos estudos filogenéticos. O estudo apresentado teve como objetivo realizar uma análise filogenética para testar a monofiletismo de Erythrinoidea e verificar os padrões de relacionamento suprafamiliares em Characiformes, e testar o posicionamento filogenético da família Crenuchidae, supostamente relacionada à superfamília. As análises filogenéticas foram realizadas com base em dados moleculares e dados morfológicos independentemente, e de maneira conjunta (evidência total) através do método de Parcimônia. A ultraestrutura da espermiogênese e dos espermatozoides dos gêneros incluídos em Erythrinoidea, mais a família Crenuchidae e outras possivelmente relacionadas, foram descritos e codificados em uma matriz de dados. Nas três análises realizadas a superfamília Erythrinoidea não é recuperada como monofilética. A família Crenuchidae posiciona-se na base da subordem Characoidei e não está estreitamente relacionada à Erythrinoidea. As análises com dados moleculares e de evidência total apresentaram uma topologia muito semelhante ao nível mais inclusivo e os valores de suporte dos principais clados apresentaram-se maiores na evidência total, mostrando a influência positiva da inserção dos caracteres da morfologia das células espermáticas nas análises filogenéticas / Abstract: The superfamily Erythrinoidea is one of eight superfamilies within the order Characiformes and was proposed to include a monophyletic group composed of the Neotropical fish families Ctenoluciidae, Erythrinidae and Lebiasinidae, and African family Hepsetidae. Current phylogenetic studies based on morphological data, such as osteology and morphology of soft structures, and molecular data have refuted the hypothesis of monophyly of this group. In addition, the suprafamilial relationships in Erythrinoidea have diverged among the authors. In combination with more traditional characters, the analyses of the ultrastructure of sperm ontogeny and its final shape have become an interesting source of characters to complement phylogenetic studies. The goal of this study was to perform a phylogenetic analysis to test the monophyly of the Erythrinoidea and to assess the phylogenetic position of the family Crenuchidae, a group supposed to be closely related to the superfamily. The phylogenetic analyses were performed using molecular and morphological data separately, and in a combined approach (total evidence) through the Parsimony method. The ultrastructure of the spermiogenesis and the sperm shape of Erythrinoidea genera, plus the family Crenuchidae and other species possibly related to the superfamily were described and coded in a matrix data. In all three analyses Erythrinoidea was not recovered as monophyletic. The family Crenuchidae was placed in a basal position within the suborder Characoidei in molecular and total evidence analysis, and was not closely related to the Erythrinoidea. The analyses using only molecular data and total evidence showed a very similar topology for the more inclusive relationship levels. The support values were higher for the total evidence tree when compared to the one resulting of only molecular data possibly pointing to a positive influence of the combination of the spermatic cell data in phylogenetic analyses / Doutorado / Biologia Celular / Doutor em Biologia Celular e Estrutural