Submitted by Helena Bejio (helena.bejio@unioeste.br) on 2019-03-23T00:12:41Z No. of bitstreams: 2 Dissertação EDER FINAL (2019).pdf: 778784 bytes, checksum: 5ae23ac0d1024f4f386fe5958b48a297 (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) / Made available in DSpace on 2019-03-23T00:12:41Z (GMT). No. of bitstreams: 2 Dissertação EDER FINAL (2019).pdf: 778784 bytes, checksum: 5ae23ac0d1024f4f386fe5958b48a297 (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Previous issue date: 2018-08-03 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES / The objective of this study was to evaluate the effects of the inclusion of crude glycerin on the diet of jundia (Rhamdia quelen) on growth, seminal and spermatic characteristics, blood parameters and tissue composition. The animals were distributed in completely randomized experimental design, consisting of five treatments and four replications. The treatments consisted of isoproteic and isoenergetic rations containing 30 % of digestible protein (PD) and 3.000 kcal of digestible energy (ED).kg-1 of ration and five levels of inclusion of crude glycerin in the proportions of 0, 4, 8, 12 and 16 %. 12 months after the beginning of the experiment, the reproductive parameters of the males were evaluated, as well as the integrity of the sperm DNA by the comet assay method. Eight males from each experimental unit were submitted to blood collection for quantification of levels of calcium, triglycerides, plasma glucose, total proteins, aspartate aminotransferase, alanine aminotransferase, alkaline phosphatase, total cholesterol erythrocyte DNA integrity. Afterwards, all males were submitted to euthanasia for dissection and individual measurement of weights of the liver, gonads and viscera to evaluate the zootechnical, somatic parameters and analysis of organ and tissue centesimal composition. There was an increase (p < 0,05) in the concentration of spermatozoa in the animals fed the rations containing the highest level of crude glycerin. The other seminal and sperm parameters were not influenced. Among the blood parameters, levels of total cholesterol, total protein and calcium were influenced (p < 0,05), total cholesterol and total protein presented higher values with 8 % inclusion of crude glycerin in the diet, whereas calcium decreased with 16 % inclusion of crude glycerin. Zootechnical performance was not influenced. In the evaluation of centesimal composition, there was influence (p < 0,05) on muscle dry matter, muscle ashes and crude protein of the muscle, viscera and gonads. Dry matter and muscle ashes, gross protein of the viscera and gonads increased the concentrations with the addition of crude glycerin in the rations, whereas the crude protein concentration of the muscle decreased with the presence of crude glycerin in the diets. Therefore, it is recommended to use this by-product as a substitute for maize in the diet of jundia breeders, since it does not present negative effects and still benefits their reproductive performance. / O objetivo deste trabalho foi avaliar os efeitos da inclusão da glicerina bruta nas rações de reprodutores de jundiá (Rhamdia quelen) sobre o crescimento, características seminais e espermáticas, parâmetros sanguíneos e composição centesimal de tecidos. Os animais foram distribuídos em um delineamento experimental inteiramente casualizado, composto por cinco tratamentos e quatro repetições. Os tratamentos foram constituídos por rações isoprotéicas e isoenergéticas contendo 30 % de proteína digestível (PD) e 3.000 kcal de energia digestível (ED).kg-1 de ração e cinco níveis de inclusão de glicerina bruta nas proporções de 0, 4, 8, 12 e 16 %. Após 12 meses do início do experimento, foram avaliados os parâmetros reprodutivos dos machos e a integridade do DNA de espermatozoides pelo método ensaio cometa. Oito machos de cada unidade experimental foram submetidos à coleta de sangue para quantificação dos níveis plasmáticos de cálcio, triglicerídeos, glicose, proteínas totais, aspartato aminotransferase, alanina aminotransferase, fosfatase alcalina e colesterol total. Também foi avaliada a integridade do DNA de eritrócitos. Em seguida, todos os machos foram submetidos à eutanásia para dissecação e mensuração individual dos pesos do fígado, gônadas e vísceras para avaliação dos parâmetros zootécnicos e avaliação da composição centesimal de órgão e tecidos. Houve aumento (p < 0,05) na concentração de espermatozoides nos animais alimentados com rações contendo o maior nível de glicerina bruta. Os demais parâmetros seminais e espermáticos não foram alterados (p > 0,05). Dentre os parâmetros sanguíneos, o colesterol total e a proteína total apresentaram maiores (p < 0,05) valores em animais alimenados com rações contendo 8 % de glicerina bruta, enquanto que o cálcio diminuiu (p < 0,05) nos animais alimentados com 16 %. O desempenho zootécnico não foi alterado (p > 0,05). A matéria seca e cinzas do músculo e a proteína bruta nos testículos aumentaram (p < 0,05) nos animais alimentados com rações contendo as maiores inclusões de glicerina, enquanto que os teores de proteína bruta do músculo diminuíram (p < 0,05). Conclui-se que reprodutores de jundiá alimentados com rações contendo maior nível de inclusão de glicerina bruta apresentaram alterações metabólicas que levaram ao aumento da deposição de proteína nos testículos e ao aumento da concentração espermática, e que as rações não apresentaram efeito negativo sobre a saúde dos animais.

Orientador: Maria Tercília Vilela de Azeredo Oliveira / Banca: Grasiela de Campos Dias Severi Aguiar / Banca: Patrícia Simone Leite Vilamaior / Resumo: Os triatomíneos, insetos hematófagos estritos em todas as fases da vida, conhecidos popularmente como "barbeiros" ou "chupanças", pertencem à subfamília Triatominae (Heteroptera - Reduviidae) e são importantes vetores da doença de Chagas. Os interesses nos estudos desses insetos não se limitam apenas a questão médico-sanitária, pois em termos citogenéticos, também são de grande importância. Além disso, a sistemática e relações filogenéticas dos triatomíneos têm sido pautadas em análises morfológicas formando um quadro de conflitos taxonômicos. Assim, por meio da descrição cariotípica de T. baratai sugerimos que dados citogenéticos sejam incorporados aos sistemas de classificação dos triatomíneos. Também foi analisada a diversidade de bandas produzidas com o uso de enzimas de restrição AluI (AG ↓ CT) e Hae III (GG ↓ CC) nas espécies de T. tibiamaculata, T. protacta e T. platensis, alojadas em três diferentes complexos. Os dados obtidos mostraram padrões semelhantes em cromossomos autossômicos e sexuais e comportamentos ora distintos ora semelhantes em núcleos interfásicos. O estudo da proteína nucleolar fibrilarina, por meio de técnicas de imunofluorescência, foi realizada para verificar sua presença no corpo cromatoide, estrutura citoplasmática próximo do envoltório nuclear, de T. platensis e T. rubrovaria. Os dados obtidos no presente estudos aliados com outras técnicas auxiliarão na compreensão da biologia desses vetores da doença de Chagas / Abstract: The triatomine hematophagous insects strict at all stages of life, popularly known as "kissing bugs" or "chupanças" belong to the subfamily Triatominae (Heteroptera - Reduviidae) and are important vectors of Chagas disease. The interests in the studies of these insects are not limited to medical and health issue, because in terms cytogenetic, are also of great importance. Moreover, the systematic and phylogenetic relationships of the insects have been guided by morphological analyzes forming a taxonomic framework of conflict. Thus, by describing karyotype of T. baratai suggest that cytogenetic data are incorporated into the rating systems of the insects. Also analyzed the diversity of bands produced with the use of restriction enzymes AluI (AG ↓ CT) and Hae III (GG ↓ CC) on the species T. tibiamaculata, T. protacta and T. platensis, housed in three different complexes. The information obtained showed similar patterns in autosomal chromosomes and sexual behavior and sometimes different now similar in interphase nuclei. The study of nucleolar protein fibrillarin, by means of immunofluorescence was performed to verify its presence in chromatoid body, cytoplasmic structure near the nuclear envelope, T. platensis and T. rubrovaria. The information obtained in this study combined with other techniques will help understand the biology of these vectors of Chagas disease / Mestre

Orientador: Classius de Oliveira / Banca: Rosicleire Verissimo Silveira / Banca: Sebastião Roberto Taboga / Resumo: O declínio das populações de anfíbios é um problema global com causas complexas. Atualmente há uma grande preocupação sobre os efeitos provocados por compostos que atuam como desreguladores endócrinos nos sistemas naturais. Os estrogênios são os principais contaminantes encontrados em corpos d'água e são responsáveis por causar uma série de distúrbios, principalmente ligados aos aspectos reprodutivos. O hormônio feminino 17β-estradiol é um potente contaminante que prevalece em águas superficiais, provenientes principalmente de efluentes municipais e industriais. É o hormônio responsável pela formação das características femininas, comportamento sexual e ovulação. Este estudo mostra o efeito do 17β-estradiol na gametogênese dos órgãos de Bidder e testículos e na resposta hepática de machos de Rhinella schneideri. Foram utilizados 40 machos adultos e analisada a gametogênese dos testículos e órgão de Bidder, além da avaliação da pigmentação hepática. Os animais foram tratados com 17β-estradiol durante 3, 7, (efeito de curto prazo) 15 e 30 (efeito de exposição prolongada) dias, utilizando injeções subcutâneas de 2mg/kg em dias alternados. Análises histoquímicas também foram realizadas para os três órgãos. Os resultados mostraram que o 17β-estradiol promoveu alterações tanto na espermatogênese, quanto na ovogênese bidderiana. Os tratamentos de curto prazo acarretaram em uma diminuição na quantidade de espermatozoides liberados no lume e um desequilíbrio na ocorrência de células iniciais da espermatogênese. Os tratamentos de exposição prolongada acarretaram principalmente na diminuição dos lóculos seminíferos e aumento na região intersticial, além da alteração de alguns tipos celulares como espermatogônias, espermatócitos e espermátides alongadas. Para o órgão de Bidder... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Amphibian's populations decline is a global problem with complex causes. Currently, it is known that this decline is related to endocrine disruptors compounds in natural systems. Estrogens are the main compounds found in water bodies and are responsible for causing a number of disturbances, mainly linked to reproductive aspects. The female hormone 17β-estradiol is a potent organic contaminant that prevails in surface waters, mainly disposed by municipal and industrial effluents. This hormone induces the formation of feminine characteristics, sexual behavior and ovulation. In this study, we describe the effect of 17β-estradiol in the gametogenesis of the Bidder's organ and testes, beyond the liver response in males of Rhinella schneideri. We collected 40 adult males and analyzed the testis and the Bidder's organ gametogenesis and the liver pigmentation. The animals were treated with 17β-estradiol for 3, 7, (short effect) 15 and 30 (extended effect) days, by subcutaneous injection of 2mg/kg on alternate days. Histochemical analyzes were also performed for the three organs. The results showed that 17β-estradiol promoted changes in spermatogenesis and in bidderian oogenesis. Short-treatments resulted in a decrease in the quantity of spermatozoa in the lume and an imbalance in the occurrence of initial cells of spermatogenesis. Long-treatments resulted in a decreased of the seminiferous locules and increased of the interstitial area, besides the alteration of some cell types, such as spermatogonias, spermatocytes and elongated spermatids. In the Bidder's organ, the short-treatment resulted in increased of the young follicles and degeneration oocytes, establishing a possible renewal of female cells. The treatment of 15 days decreased the amount of degenerating oocytes and increased late follicles. After 30 days of treatment were... (Complete abstract click electronic access below) / Mestre

Orientador: Maria Tercília Vilela de Azeredo Oliveira / Banca: Grasiela de Campos Dias Severi Aguiar / Banca: Hermione Elly Melara de Campos Bicudo / Resumo: As análises citogenéticas têm se mostrado como importantes ferramentas para o estudo da taxonomia dos triatomíneos. Dessa forma, a utilização de técnicas citogenéticas poderá esclarecer a problemática existente na classificação atual das espécies que compõem o subcomplexo Brasiliensis. Essas espécies foram agrupadas apenas por dados morfológicos e pela distribuição geográfica e diferem das espécies agrupadas no complexo Triatoma brasiliensis, com base em diferentes abordagens que levaram à indicação da monofilia. O presente trabalho descreve aspectos citogeneticos de T. lenti, T. sherlocki, T. melanocephala e T. vitticeps, com o intuito de avaliar a posição desses vetores no subcomplexo Brasiliensis e analisar uma possível relação de T. lenti, T. melanocephala e T. vitticeps com o complexo T. brasiliensis. Análises citogenéticas clássicas (Orceína Lacto-Acética, Impregnação por íons prata e Bandamento C) e moleculares (Hibridização in situ - FISH) foram realizadas em machos adultos. T. lenti e T. sherlocki, que apresentaram muitas características cromossômicas em comum, como o número de cromossomos (2n = 20A + XY), disposição da heterocromatina constitutiva nos autossomos (uma ou ambas as extremidades dos cromossomos) e na disposição das Regiões Organizadoras Nucleolares (RONs) (um par de autossomos). Esses insetos foram diferenciados por meio de marcações observadas nas espermátides, o que foi proposto como ferramenta citotaxonômica diagnóstica. T. melanocephala e T. vitticeps apresentaram o mesmo número de cromossomos (2n = 20A + X1X2X3Y) e as mesmas características durante a espermatogênese. No entanto, esses vetores puderam ser diferenciados pela disposição dos blocos heterocromáticos, pela disposição das RONs e pela análise da espermiogênese. Assim, com base nessas características, corroboramos a posição de T. lenti e T. sherlocki no subcomplexo Brasiliensis e propomos a ... / Abstract: Cytogenetic analyzes have shown to be important tools to study the taxonomy of the triatomines. Thus, the use of cytogenetic techniques may clarify the problems existing in the current classification of species that form the Brasiliensis subcomplex. The species in the subcomplex were grouped only by morphological data and geographical distribuition and differs from the species in the Triatoma brasiliensis complex, on the basis of on different approaches that indicate the monophyly. The present paper describes cytogenetically T. lenti, T. sherlocki, T. melanocephala and T. vitticeps, in order to evaluate the position of these vectors in the Brasiliensis subcomplex and analyze a possible relationship of T. lenti, T. melanocephala and T. vitticeps with the T. brasiliensis complex. Classical cytogenetic analysis (Lacto-acetic orcein, silver nitrate staining and C banding) and molecular (in situ hybridization - FISH) were performed in adult males. T. lenti and T. sherlocki showed several chromosomal characteristics in common, such as the number of chromosomes (2n = 20A + XY), disposition of constitutive heterochromatin in the autosomes (one or both ends of the autosomes) and the staining of nucleolar organizer regions (NORs) (a pair of autosomes). These insects were able to be differentiated by markings observed in spermatids, which were proposed as a diagnostic tool cytotaxonomic. T. melanocephala and T. vitticeps shared the chromosome number (2n = 20A + X1X2X3Y) and the same characteristics during spermatogenesis. However, these vectors were able to be differentiated by the disposition of heterochromatic blocks, by the arrangement of NORs and the examination of spermiogenesis. Thus, these characteristics corroborate the position of T. lenti and T. sherlocki on Brasiliensis subcomplex and and we propose the exclusion of T. melanocephala, T. vitticeps and T. tibiamaculata because they present fragmentation of the sex chromosome X and are ... / Mestre

Orientador: Eliana Morielle Versute / Banca:Wagner André Pedro / Banca: Sandra Regina de Carvalho Marchesin / Resumo: Chiroptera é a segunda maior ordem de mamíferos e possui distribuição mundial e, como consequência, apresenta uma grande diversidade de comportamento, hábito alimentar e estratégias reprodutivas. Entretanto, a maioria dos estudos relativos à reprodução é feita com espécies de morcegos de clima temperado, pouco se sabendo sobre a reprodução de morcegos de clima tropical. Vespertilionidae é a família que apresenta a maior distribuição dentro da Ordem. No Brasil, são referenciados cinco gêneros da família, entre eles, o gênero Eptesicus, com espécies exclusivamente insetívoras. São seis espécies brasileiras de Eptesicus, sendo essas simpátricas e com grande semelhança morfológica entre si, e para as quais há poucas informações sobre os aspectos reprodutivos e até mesmo sobre a variação morfológica, o que dificulta a identificação precisa de cada espécie. Eptesicus furinalis é a espécie que possui a maior distribuição entre as seis espécies brasileiras do gênero. Portanto, foram objetivos desse trabalho, analisar o processo da espermatogênese, o ciclo do epitélio seminífero e a ultraestrutura do espermatozoide, e analisar a variação morfológica do crânio, a morfologia do báculo e do cariótipo, contribuindo não só para o entendimento dos padrões reprodutivos das espécies de morcegos tropicais, mas também na taxonomia do gênero. O epitélio seminífero apresentou o padrão básico de mamíferos, e a espermiogênese pode ser dividida em sete estádios (na microscopia de luz) ou doze estádios (na microscopia eletrônica de transmissão), de acordo com os parâmetros da condensação e distribuição da cromatina e pelo método da formação do acrossomo, respectivamente. A espécie apresentou um processo de regressão testicular, similar ao observado em morcegos hibernantes de clima temperado, fato intrigante, uma vez que E. furinalis é uma espécie exclusivamente tropical e não hibernante ... / Abstract: Chiroptera is the second largest mammalian order with worldwide distribution and, as a result, present a great diversity of reproductive strategies. Indeed, most studies on reproduction are performed with bat species from temperate zones, and little is known about the tropical bats reproduction. Vespertilionidae is the family with the largest distribution within the Order. Five genera occur in Brazil and among them there are the genus Eptesicus, with exclusively insectivorous species. Six species of Eptesicus occur in Brazil, and these are sympatric and has great morphological resemblance to each other, and there is little information on the reproductive aspects of them and even of morphological variation, making it difficult to accurately identify each species. E. furinalis is the most disperse species of Eptesicus in Brazil. Thus, the aims of this work was to analyse the process of spermatogenesis, the seminiferous epithelium cycle and the ultrastructure of the spermatozoon, and analyse the morphological variation of the skull, baculum and karyotype, in order to increase informations about the reproductive patterns of tropical bat species and about the taxonomy of Eptesicus. The semineferous epithelium showed the basic mammalian pattern and the spermiogenesis could be divided into seven steps (light microscopy) or twelve steps (PAS method and transmission elctron microscopy), when analyzed by the parameters of the chromatin distribution and condensation and by the acrosome method, respectively. E. furinalis showed a process of testicular regression similar to testicular regression in hibernating bats of temperate zones, which is an intriguing fact, since E. furinalis is an exclusive tropical species and does not hibernates. The seminiferous epithelium cycle presented no fixed cell associations throughout the seminiferous tubule, as is expected in mammals, however, exhibited eight frequent stages when analyzed by the tubular morpholoy ... / Mestre

Orientador: Classius de Oliveira / Banca: Sebastião Roberto Taboga / Banca: Fernando Ribeiro Gomes / Resumo: Os anuros estão em declínio populacional no mundo todo, sendo que a contaminação aquática é um dos fatores que está influenciando neste processo. A Flutamida é um medicamento antiandrogênico utilizado contra o câncer de próstata, presente em corpos d'água como um contaminante. Este composto pode atuar como desregulador endócrino, afetando principalmente a reprodução. Assim, os anuros da família Bufonidae, que apresentam o órgão de Bidder, considerado um ovário rudimentar, são bons modelos para estudar a ação deste composto. Já o fígado é o principal órgão de detoxificação e está diretamente relacionado à metabolização de substâncias tóxicas. Dessa forma, nosso objetivo foi avaliar a ação da Flutamida na morfologia dos órgãos reprodutivos e do fígado de machos Rhinella schneideri, bem como nos níveis séricos dos hormônios sexuais. Foram utilizados 18 machos, os quais receberam, por 7 dias, doses diárias de 1 ou 5 mg/kg de Flutamida diluída em óleo mineral, enquanto o grupo controle recebeu apenas o óleo mineral. Em seguida os animais foram eutanasiados, o sangue foi coletado e foram retirados os testículos, órgãos de Bidder e fígado, que seguiram para a rotina histológica de acordo com a análise empregada. Nos testículos foram avaliadas as áreas das células germinativas e do lóculo seminífero. No órgão de Bidder as células germinativas foram quantificadas, bem como a área ocupada pelo pigmento lipofuscina. Já no fígado nós mensuramos as áreas dos pigmentos melanina, lipofuscina e hemosiderina. Os níveis séricos de testosterona e estradiol foram identificados por ELISA. No testículo, houve aumento das espermatogônias e redução dos espermatozoides em feixe e no lúmen em ambas as concentrações. Houve ainda aumento das espermátides secundárias na menor dosagem e dos espermatócitos primários na maior dosagem. A área locular variou apenas na concentração de 1 mg/kg... / Abstract: The anurans are in population decline worldwide, and water pollution is one of the factor influencing this process. The Flutamide is an antiandrogen medicine used against prostate cancer, and also is a contaminant. This compound can act as an endocrine disrupter that can affect mainly the reproduction. In Bufonidae family occurs a peculiar organ named Bidder's organ, considered a rudimentary ovary. The liver is the main organ with detoxification functions and is directly related to substances metabolism. Thus, our aim was to evaluate the effect of Flutamide on morphology of the reproductive organs and liver of males Rhinella schneideri, and on the serum levels of steroid hormones. We used 18 males of the specie, organized in 3 groups. The treatment groups received, for 7 days, daily doses of 1 or 5 mg/kg of Flutamide diluted in mineral oil, while the control group received only the mineral oil. After the experiments, the animals were euthanized, the blood was collected and testis, Bidder's organs and liver were removed and proceed to histological routine according to the analysis employed for each one. For testis we evaluated the area of the germ cells and seminiferous locule. For Bidder's organ we quantified the the germ cells and the pigmented area of lipofuscin. In the liver we measured the pigmented areas of melanin, lipofuscin and hemosiderin. Serum testosterone and estradiol were identified by ELISA. In testis there was an increase in spermatogonia and reduction of bundle and lumen sperm in both treatments. Also occurred an increase in secondary spermatids in lower dosage and in primary spermatocytes in higher dosage. The locular area varied only at the low dose. In Bidder's organ there was a decrease in degeneration and atresia oocytes and an increase in final diplotene oocytes in both concentrations of Flutamide, as well as a reduction in lipofuscin pigmented area. In the liver the 3 ... / Mestre

Orientador: Alexandre Ninhaus Silveira / Banca: George Shigueki Yasui / Banca: Maria Angélica Spadella / Banca: Rafael Henrique Nóbrega / Banca: Carlos Alberto Vicentini / Resumo: O transplante de células germinativas é uma recente abordagem experimental que envolve a remoção de células germinativas indiferenciadas das gônadas de um animal doador, e transplante nas gônadas de um receptor originando espermatozoides com características genéticas do doador. Apesar de ser promissora em estudos que envolvem a biologia das células germinativas iniciais, preservação de espécies ameaçadas, biologia da reprodução e muitas outras abordagens biotecnológicas, a aplicação desta metodologia em peixes ainda é limitada. Deste modo, o transplante de células espermatogoniais de duas espécies filogeneticamente relacionadas, a piracanjuba Brycon orbignyanus em lambaris Astyanax altiparanae foi estudada. Para isto, a espermatogênese e a papila urogenital (via do transplante) da espécie receptora foram histologicamente analisadas, evidenciando a presença de nove gerações espermatogoniais e que a cada célula de Sertoli suporta o desenvolvimento de cerca de 140 espermátides. Além disso, a papila urogenital difere entre os sexos. Para o transplante, os testículos das piracanjuba foram enzimaticamente digeridos e as espermatogônias foram purificadas por um gradiente de densidade (Percoll), marcadas com PKH26, e injetadas, via papila urogenital, nos testículos dos lambaris, cuja espermatogênese endógena foi previamente suprimida por administração de busulfan (Myleran) associado com água quente (35°C) ou por sua manutenção nesta temperatura por um período maior. Cerca de 66,7% e 84,6% dos receptores tratados com busulfan + temperatura e somente temperatura, respectivamente, apresentaram cistos de células germinativas doadoras em seu epitélio. O transplante espermatogonial envolvendo B. orbignyanus e A. altiparanae foi realizado com sucesso e pode ser aplicado em pisciculturas auxiliando no aumento da produção e preservação da piracanjuba (criticamente ameaçada... / Abstract: Germ cell transplantation is a recent approach which involves removal of undifferentiated germ cells from the donor gonads and transplantation into the gonads of a host, giving origin to sperm with genetic characteristics from the donor. Despite this methodology promising in studies involving initial germ cell biology, preservation of threatened species, reproductive biology and many other biotechnological approaches, the application of such a methodology in fish is still limited. Thus, the transplantation of spermatogonial cells from two phylogenetically related species "piracanjuba" Brycon orbignyanus into "lambaris" Astyanax altiparanae testis was histologically studied. Host spermatogenesis and urogenital papilla (transplantation via) were analyzed, highlighting nine spermatogonial generations and that each Sertoli cell supports the development of about 140 spermatids. Moreover, urogenital papilla is different between the sexes. For transplantation, piracanjuba's testes were enzymatic digested and spermatogonia were purified by a density gradient (Percoll), labeled with PKH26 and injected, through urogenital papilla, into "lambaris" testes, whose endogenous spermatogenesis had been previously suppressed by administration ofbusulfan (Myleran) associated with warm water (35°C) or by their maintenance at this temperature for longer time. About 66.67% and 84.6% of the host animals treated with busulfan + temperature and only temperature, respectively, presented cysts of donor germ cells into their epithelium. Spermatogonial transplantation involving B. orbignyanus and A. altiparanae was successfully performed and it can be applied in fish farms helping production increase and preservation of donor species "piracanjuba" (critically endangered), since donor spermatozoon can be obtained up to three weeks after transplantation process / Doutor

Orientador: Selma Maria de Almeida Santos / Banca: Henrique Bartolomeu Pereira Vaz / Banca: Ligia Pizzatto do Prado / Banca: Leonardo de Oliveira / Banca: Phelipe Oliveira Favaron / Resumo: A reprodução é essencial para a perpetuação das espécies e por esta razão este é um tema central no estudo da biologia de qualquer animal. Nesta tese apresento dados inéditos sobre diversos aspectos reprodutivos de algumas espécies de jararacas, incluindo B. cotiara, B. alternatus, B. pubescens, B. diporus, B. mattogrossensis, B. neuwiedi e B. pauloensis. Além da caracterização de eventos reprodutivos como produção de gametas, estocagem de esperma e formação de plugs copulatórios, também descrevo pela primeira vez em serpentes a presença de esperma no segmento sexual renal de B. pubescens e a intersexualidade em B. moojeni e B. erythromelas. A influência dos fatores ambientais e da inércia filogenética sobre a determinação dos padrões reprodutivos nestas serpentes foi avaliada por meio de (1) comparações entre a época de ocorrência dos eventos reprodutivos entre as diferentes espécies que indicaram a influência de ambos os fatores; (2) reconstruções de caráter ancestral que apontaram para um forte conservatismo filogenético em relação ao dimorfismo sexual e alta variabilidade em relação ao padrão de maturidade sexual; (3) análises estatísticas cujos resultados indicam que não há relação entre o aumento de parâmetros como temperatura e pluviosidade e o ciclo dos machos de B. pubescens, espécie utilizada como modelo. Embora a predominância de eventos de acasalamento durante o outono e nascimentos no verão indique um forte componente filogenético na determinação dos eventos... / Abstract: Reproduction is essential for the perpetuation of any species. That is why it is a central theme for studies on the biology of any organism. Here, I present new data on several aspects of reproduction for Bothrops species, including B. cotiara, B. alternatus, B. pubescens, B. diporus, B. mattogrossensis, B. neuwiedi and B. pauloensis. The characterization of reproductive events such as gametogenesis, sperm storage, formation of mating plugs and activity of the sexual segment of the kidneys (SSK) is provided. I also describe the presence of sperm inside the SSK for the first time in a snake species and intersexuality in B. moojeni and B. erythromelas. I evaluated the influence of environmental factors and phylogenetic inertia in the determination of reproductive events in these snakes by (1) a comparison of the timing of reproductive events between species which indicates that both factors may be important, (2) ancestral character state reconstructions showing a strong phylogenetic conservatism in sexual dimorphism with females being the larger sex and high variability in sexual maturity between species, (3) statistical analysis indicating that male reproductive variables do not vary according to temperature and rain in B. pubescens. Although there are many observations of reproductive events outside the expected periods for Bothrops species (mainly for timing of ovulation, pregnancy and sperm storage strategies), reports of mating and births are concentrated in autumn and summer, respectively, showing that although phylogenetic inertia has a high influence on the conserved timing of these reproductive events in Bothrops, environmental factors may also play a role in the plasticity observed in some species and individuals / Doutor

Orientador: Classius de Oliveira / Banca: Patrícia Simone Leite Vilamaior / Banca: Carlos Alberto Vicentini / Resumo: Poli(etilenoglicol) (PEG) é um polímero neutro hidrossolúvel, e brometo de dioctadecildimetilamônio (DODAB) e diododecildimetilamônio (DDAB) são surfactantes catiônicos dialquilados, C18 e C12, respectivamente, derivados da amônia quaternária, formadores de vesículas. As suas propriedades físicas, em solução aquosa, são bem conhecidas. No entanto, as propriedades de misturas desse polímero com esses surfactantes não o são. Investigamos a interação de PEG com DODAB e DDAB em solução aquosa, numa faixa de concentração total dos componentes até 1% em peso, e construímos diagramas de fases, com especial destaque para a fase vesicular. Utilizamos PEG com massa molecular entre 200 Da e 2 MDa e os diagramas de fases foram construídos a 25oC, isto é, acima da temperatura de transição gel-líquido cristal (Tm) de DDAB (Tm = 16oC) e abaixo da Tm de DODAB (Tm = 45oC). DODAB e DDAB têm a característica comum de formar vesículas unilamelares em baixas concentrações do surfactante e vesículas multilamelares em concentrações mais elevadas; em regiões intermediárias, vesículas uni e multilamelares coexistem em equilíbrio na solução. A fronteira entre essas regiões de vesículas não é muito bem definida e observamos, neste estudo, que o efeito de PEG na estrutura de agregados de DODAB e DDAB em água depende da massa molecular do polímero. Além disso, PEG favorece a formação de vesículas unilamelares em concentrações mais elevadas de DODAB e DDAB, quando predominam as vesículas multilamelares de DODAB puro (sem o polímero), possibilitando a formação de vesículas mistas de DODAB/PEG e DDAB/PEG em água e concentrações relativamente grandes desses surfactantes. Dentre os métodos experimentais empregados nesse estudo, destacamos, turbidimetria, fluorescência de estado estacionário, calorimetria diferencial... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Poly (ethyleneglycol) (PEG) is a water soluble neutral polymer, and dioctadecyldimethylammonium (DODAB) and diododecyldimethylammonium (DDAB) bromide are double chain cationic surfactants derived from the quaternary ammonium that have been widely investigated due to their high application potential in different areas of the science and technology. The physical properties of PEG, DODAB and DDAB in aqueous solution are well-known. However, the properties of mixtures of the polymer with those surfactants are not. We investigated the interaction of PEG with DODAB and DDAB in aqueous solution, within a range of total concentration of the components of 0-1 wt%, and the phase diagrams built up, with special interest for the vesicular phases. We used PEG with molecular mass between 200 Da and 2 MDa and the phase diagrams were built up at 25°C, that is, above the melting temperature (Tm) of DDAB (Tm = 16°C) and below Tm of DODAB (Tm = 45°C). DODAB and DDAB have the common characteristic of forming unilamellar vesicles at low surfactant concentrations and umultilamellar vesicles at higher concentrations; at intermediate concentrations, uni- and multilamellar vesicles coexist in solution. The borders of these different vesicle phases are not well defined. We observed in this Thesis that the effect of PEG on the structures of DODAB and DDAB aggregates in water depends on the molecular mass of the polymer. Besides, PEG stabilizes the unilamellar vesicles at high concentrations of DODAB, where the multilamellar vesicles are the dominant structures present in solution, thus allowing the formation of mixed DODAB/PEG and DDAB/PEG vesicles in water at relatively high concentrations of these surfactants. The experimental methods used in this investigation include turbidimetry, steady-state fluorescence, differential scanning calorimetry (DSC), isothermal titration... (Complete abstract click electronic access below) / Mestre

Orientador: Eliane Morielle Versute / Banca: Luciana Bolsoni Lourenço Morandini / Banca: Mary Massumi Itoyama / Resumo: A ordem Chiroptera constitui a segunda maior ordem de mamíferos e está classicamente dividida em duas subordens: Megachiroptera e Microchiroptera. A primeira é encontrada exclusivamente no Velho Mundo e compreende uma única família (Pteropodidae) com 42 gêneros e 185 espécies, enquanto que a segunda está amplamente distribuída por todo o globo, envolvendo 17 famílias, 157 gêneros e 928 espécies. Apesar dos morcegos serem extraordinariamente bem sucedidos, eles permanecem como um dos grupos menos conhecidos em relação a aspectos como: processos evolutivos, mecanismos reprodutivos e características nucleolares. Embora o processo de espermatogênese tenha sido objeto de estudo em muitos mamíferos, pouca atenção tem sido dada a esse estudo em morcegos, apesar dessa ser uma grande e diversa classe de organismos, que apresenta diferentes estratégias reprodutivas para ajustar esses animais às várias condições ecológicas e comportamentais as quais estão submetidos. Da mesma forma, em geral todas as observações sobre regiões organizadoras nucleolares (RONs) e nucléolos em morcegos foram feitas a partir da análise de células somáticas. Assim, devido à escassez de informações referentes à espermatogênese e a nucleologênese em Chiroptera e ao interessante e vasto campo de conhecimento que esses aspectos representam, o intuito do presente estudo foi analisar as células dos túbulos seminíferos das espécies de morcegos, Resumo 136 Artibeus lituratus, Artibeus planirostris, Carollia perspicillata, Platyrrhinus lineatus (Phyllostomidae) e Myotis nigricans (Vespertilionidae), por diferentes técnicas histológicas, citoquímicas e moleculares. Três tipos de espermatogônias foram reconhecidos baseado no grau de condensação da cromatina e morfologia nuclear, espermatogônias Ad, Ap e B. Essas ...(Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: The order Chiroptera is the second largest order of mammals and is classically divided into two suborders: Megachiroptera and Microchiroptera. The first is found exclusively in the Old World, and contains a single family (Pteropodidae) with 42 genera and 185 species, while the second is widely distributed around the world, concerning 17 families, 157 genera and 928 species. Despite of the bats are extraordinarily successful, they remain as one of the least recognized groups on aspects such as: evolutionary processes, reproductive patterns and nucleolar characteristics. Although the process of spermatogenesis has been the subject of study in many mammals, little attention has been given to this study in bats, a large and diverse class of organisms, which presents different reproductive strategies to adjust these animals to different ecological and behavioral conditions that they are submitted. In the same way, in general all studies concerning nucleolar organizer regions (NORs) and nucleoli in bats were made from the analysis of somatic cells. Thus, due to the scarcity of information regarding spermatogenesis and nucleologenesis in Chiroptera and the interesting and vast field of knowledge that these things represent, the purpose of this study was to analyze the cells of the seminiferous tubules of the species of bats, Artibeus lituratus, Artibeus planirostris, Carollia perspicillata, Platyrrhinus lineatus (Phyllostomidae) and Myotis nigricans (Vespertilionidae), by different histological, molecular and citochemical techniques. Three types of spermatogonia were recognized Abstract 140 based on the chromatin condensation and nuclear morphology, type Ad, type Ap and B. These, undergo meiosis, passing through the two cellular divisions and forming haploid spermatids, which undergo differentiation, condensing its DNA, elongating its nuclei and forming the flagellum and acrossomo,...(Complete abstract click electronic access below) / Mestre