Orientador: Mary Anne Heidi Dolder / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-07-15T14:55:44Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Quagio-Grassiotto_Irani_M.pdf: 16334575 bytes, checksum: e4058da8ed47ebc42a124980f5affe08 (MD5) Previous issue date: 1983 / Resumo: Espermátides em diferentes fases de maturação e espermatozóide de Ceratitis capitata, provenientes dos testículos dos machos ou das espermatecas das fêmeas deste inseto, foram preparados segundo as técnicas usuais em microscopia eletrônica, contrastada positiva e negativamente e observados em microscópio eletrônico de transmissão. Algumas variações técnicas como a estocagem do mateiral sem prévia fixação, por 7 a 15 dias, a ¿10 GRAUS¿, em glutaraldeido a 0,25%; fixação em glutaraldeido a 3% adicionado de 2% de ácido tânico; pós-fixação em mistura de tetróxido de ósmio adicionado de 0,05M de ferricianeto de potássio ou de 0,5% de ácido- tânico; desidratação em etanol 95% contendo 2% de ácido fosfotúngstico (EPTA) sem e com contrastação por uranila e chumbo, também foram empregadas no preparo dos espécimes em estudo. As observações da espermiogênese em C. capitata mostraram que esta, como nos insetos em geral, caracteriza- se pela formação do "Nebenkern" ou complexo mitocondrial, formação do flagelo, alongamento celular, condensação do material nuclear e eliminação do citoplasma. As espermátides em fase inicial de diferenciação apresentam núcleo e cromatina com aspecto similar ao das células soma ticas e grande quantidade de mitocôndrias no citoplasma. ...Observação: O resumo, na íntegra, poderá ser visualizado no texto completo da tese digital / Abstract: Spermatids in various stages of maturation and spermatozoa of Ceratitis capitata) were obtained from the testis of males and the spermathecae of females. Routinely prepared for transmission electron microscopy) they were positively and negatively stained. A few variations of the basic techniques were also employed, namely: Maintaining spermatozoa w ithout previous fixation in a solution of 0,25% glutaraldehyde for 7 to 14 days, at ¿10 DEGREES¿; fixation in 3% glutaraldehyde to which 2% tannic acid was added; post-fixation in a mixture of 1% osmium tetroxide to which either 0,05M potassium ferricianide or 0,5% tannic acid was added; dehydration in 95%.ethanol) containing 2% phosphotungstic acid (EPTA), with or without staining of the sections. The observations on the spermatogenesis of C. capitata are quite similar to the description of this process for insects in general. It may be defined .by the following steps: .Formation of the "Nebenkern", development of the flagellum, celular elongation, nuclear condensation) and elimination of the excess cytoplasm. Spermatids iniciating their differention have a nucleus and chromatin very similar to somatic cells) as well as a large number of mitochondria dispersed in'the cytoplasm. In the next step) these mitochondria fuse to form the "Nebenkern". ...Note: The complete abstract is available with the full electronic digital thesis or dissertations / Mestrado / Biologia Celular / Mestre em Ciências Biológicas

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:23:00Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2012-02-01Bitstream added on 2014-06-13T18:09:05Z : No. of bitstreams: 1 macedo_cc_me_botib.pdf: 309387 bytes, checksum: d3d22be390ff194da4a9dcc4592288be (MD5) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / O estudo da espermatogênese e, consequentemente, das células-tronco espermatogoniais (SSC), podem acarretar descobertas de novos conhecimentos sobre a biologia dessas e de outros tipos de células-tronco (SC) adultas, bem como, futuramente, proporcionar tratamentos para infertilidade masculina, entendimento sobre a origem e formação de tumores testiculares, conservação de espécies em extinção e melhoramento genético de animais de produção, entre outros temas importantes em medicina reprodutiva. No entanto, os sistemas de cultivos e composição dos meios utilizados para induzir a espermatogênese in vitro, à partir de SSC, não são totalmente conhecidos. Desta forma, o objetivo geral deste experimento foi estudar a diferenciação celular e a indução da espermatogênese in vitro de SCC oriundas da digestão testicular de camundongos Swiss (entre 6-10 dias pós-parto, dpp) cultivadas em diferentes sistemas: o bidimensional (2D) ou convencional e o tridimensional (3D). Para tanto, após a digestão testicular, a suspensão celular foi transferida para placas cobertas por uma fina camada de ágar (sistema 2D). Enquanto, uma camada mais espessa de ágar (SACS - Soft Ágar Culture System) ou metilcelulose (MCS – Methylcellulose Culture System) foram confeccionadas para mimetizar a disposição celular in vivo (sistema 3D). Além disso, também foram avaliados o efeito da adição de gonadotrofinas ao meio de cultivo, em ambos os sistemas. A formação e manutenção de clusteres de espermatogônias foram mais visíveis nas placas contendo gonadotrofinas, independente do sistema de cultivo. Porém, o sistema de cultivo 3D-MCS-gonadotrofinas(+) mostrou-se mais vantajaso em relação ao sistema de cultivo 2D, uma vez que beneficiou a neoformação de estruturas císticas semelhante a luz dos túbulos seminíferos, além de resultar em suspensão... / The study of spermatogenesis and spermatogonial stem cells (SSC) may result in the discovery of new knowledge about the biology of these and other types of adults stem cells (SC). In the future, could be provided treatments for male infertility , understanding the origin and formation of testicular tumors, preservation of endangered species and genetic improvement of livestock and others importants issues in reproductive medicine. However, culture systems and composition of culture media used to induce spermatogenesis in vitro from the SSC are not fully understood. Thus, the goal of this experiment was to study the induction of those cells differentiation and spermatogenesis in vitro from the testicular digestion of Swiss mice 6-10dpp cultivated in different systems: the two-dimensional (2D) and three-dimensional (3D). After testicular digestion, the suspension cell was transferred to plates coated with a thin layer of agar (2D). While a thicker layer of agar (SACS - Soft Agar Culture System) or methylcellulose (MCS – Methylcellulose Culture System) were made to mimic the in vivo cell (3D). We also evaluated the effect of the addition of gonadotropins. The cluster formation and maintenance of spermatogonia was more visible on gonadotropins (+), in both systems. . However, the 3D-MCS(+) was more advantageous compared to 2D culture system because benefited the formation of clusters of spermatogonia and also the newly formed cystic structures similar to lumen of the tubules seminiferous tubules. We could concluded that the 3D-MCS(+) culture demonstrated better spatial organization found in vivo. However, the potential fertility of these... (Complete abstract click electronic access below)

Orientador: Mary Anne Heidi Dolder / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-07-21T09:40:36Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Cabral_FlaviaHelenaCosta_M.pdf: 7932022 bytes, checksum: 5df8caed27891d2ed2c74e69d6748a6b (MD5) Previous issue date: 1996 / Resumo: O cádmio é um elemento químico, reconhecido atualmente como perigoso devido sua alta toxicidade e os efeitos deletérios que provoca nos seres vivos. Recentemente também tem sido investigadas com maior interesse e atenção, algumas drogas vendidas sem prescrições médicas como por ex. o paracetamol, cujos efeitos tóxicos são pouco informados aos usuários. O presente trabalho tem por objetivos analisar e avaliar os efeitos do cádmio (sob forma de CdCI2.H20), do paracetamol (na forma de Tylenol @ - gotas) e destas substâncias administradas simultaneamente, sobre os testículos de ratos. Neste estudo foram utilizados 44 ratos, do sexo masculino (adultos-jovens) da linhagem Wistar. Realizaram-se estudos histológicos qualitativos e quantitativos à microscopia de luz. Os animais foram submetidos à diferentes dosagens do cádmio (2,5; 7,5; 10 e 15 IJmols I kg), do paracetamol (4,4 e 8,8 mmols I kg) e do cádmio associado ao paracetamol (2,5 IJmols I kg + 4,4 mmols I kg; 7,5 IJmols I kg + 8,8 mmols I kg; 15 IJmols I kg + 8,8 mmols I kg). As observações histológicas revelaram, para os animais submetidos ao cádmio nas doses de. 10 IJmols I kg (com duração de 83 dias) ou 15 IJmols I kg (duração de 06 dias), alterações morfológicas graves em todo o parênquima testicular. Estas alterações são caracterizadas por necrose coagulativa do epitélio seminífero, espessamento da túnica albugínea e degeneração do tecido intersticial. Para os animais tratados com 15 IJmols I kg, houve perda de peso corporal e os resultados quantitativos demonstram valores significativos pela redução dos diâmetros de túbulos seminíferos. Para. os animais tratados com 10 Jjmols I kg, os resultados qualitativos revelaram uma diminuição dos pesos testiculares. Nas doses do cádmio com 2,5 e 7,5 Jjmols I kg e do paracetamol com 4,4 e 8,8 mmols I kg respectivamente, não se observou efeitos lesivos graves nos testículos dos animais investigados. Entretanto quando estas duas substâncias foram administradas simultaneamente, observou-se o efeito aditivo que provocou alterações testiculàres, detectadas à microscopia de luz. A administração do cádmio (7,5 e 15 Jjmols I kg) com o paracetamol (8,8 mmols I kg), leva a uma potencialização dos efeitos deletérios, sendo evidenciada pela redução altamente significativa dos diâmetros dos túbulos seminíferos / Abstract: Cadmium is a chemical element recognized today as dangerous due to its high toxicity and harmful effects toward life. Also recently, drugs sold freely without prescription, such as paracetamol, are being investigated for their toxic effects, of which the public is frequently not aware. This study was undertaken to analyse and evaluate the effects on rat testicles of cadmuim (CdCI2.H20), of paracetamol (in the form of Tylenol @ ­drops) and of these two substances administered simultaneously. For this work, 44 male rats (young adults) of the Wistar lineage were used. Quantitative and qualitativ.e evaluations were made with light microscopy. The animais received various dosages of cadmium (2.5, 7.5,10 and 15 I-Imols I kg), of paracetamol (4.4 and 8.8 mmols I kg) and of cadmium associated with paracetamol (2.5 I-Imols I kg + 4.4 mmols I kg; 7.5 I-Imols I kg + 8.8 mmols I kg; 15 I-Imols I kg + 8.8 mmols I kg). Histological observations showed severe alterations of the testicles for animais that received cadmium in the dose of 10 I-Imols I kg (followed for a 83 day period) or 15 I-Imols I kg (for 06 days). These alterations were classified as coagulative necrosis of the seminal epithelium, tunica albuginea thickening and degeneration of the interstitial tissue. Animais treated with 15 I-Imols I kg lost body weight and the reduction in diameter of the seminal tubules was highly significant. Animais which received 10 I-Imols I kg had a reduction in weight of their testicles. In the cadmium doses of 2.5 and 7.5 I-Imols I kg and of paracetamol in doses of 4.4 and 8.8 mmols I kg no serious lesions were encountered in the animais studied. However, when these substances were administered simultaneously, an additive effect was shown to cause slight. testicular alterations, observed with the light microscope. Higher cadmium doses (7.5 and 15 I-Imols I kg) and the larger paracetamol dose (8.8 mmols I kg) resulted in a potentiation of the harmful effects, measured by the highly significant reduction _n diameter of the seminal tubules / Mestrado / Biologia Celular / Mestre em Ciências Biológicas

Orientador : Mary Anne Heidi Dolder / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-07-14T03:11:25Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Bao_SoniaNair_M.pdf: 22766969 bytes, checksum: ac63e41c730156b5f2503dbd72bcb71d (MD5) Previous issue date: 1987 / Resumo: No mutante "olho róseo" de Ceratitis capitata, o qual possui uma capacidade de inseminação bastante reduzida e tem alterações comportamentais, já conhecidas, o processo de diferenciação de grande parte das células éspermáticas conduz-se de forma similar ao observado e descrito para o tipo selvagem, tendo-se no final do processo a formação do espermatozóide maduro, célula altamente especializada, apta ao processo de fertilização. Em nosso estudo ultra-estrutural, utilizando o método rotineiro de preparação do material e com um estudo citoquímico para atividades fosfatásica ácida e arilsulfatásica, observamos pequenas alterações no processo da espermiogênese deste mutante que levam à malformação e à produção de uma menor quantidade de células germinativas viáveis. As alterações a nível das células germinativas, por nós encontradas no mutante, envolvem os derivados mitocondriais, o axonema, o núcleo e a membrana plasmática. São encontrados derivados mitocondriais extranumerários. No axonema todos os elementos tubulares estão presentes, porém estes não apresentam o padrão normal de organização, isto é, 9 + 9 + 2 microtúbulos interconectados por fibras eletrondensas. No núcleo frequentemente temos um padrão anormal de compactação do material cromatínico. A membrana plasmática, com frequência está ausente ou rompida, demonstrando ser bastante frágil. Com isto, temos a eliminação de inúmeras células espermáticas com alterações morfofuncionais e, consequentemente, uma redução no número destas células por cisto. Uma defasagem no processo de maturação da célula espermática é observada, pois freqüentemente temos no interior de um cisto organizado, grupos de células em diferentes estádios de maturação, levando a supor uma assincronia no mecanismo intrínseca que desencadeia a diferenciação destas células. Esta defasagem ocorre ainda em todo o processo da espermiogênese, pois em estudo comparativo com a linhagem selvagem, utilizando machos da mesma idade, verifica-se, nas diferentes zonas testiculares, um atraso de todo o processo da espermiogênese no mutante, o que nos leva a pensar em alguma alteração hormonal que, além da interferência no comportamento do animal, tem ação sobre o desenvolvimento das células germinativas. Estas alterações morfofuncionais nas células espermáticas podem também estar relacionadas com as alterações observadas nas células císticas. Com grande freqüência encontramos as células císticas em processo degenerativo levando à desorganização do cisto e conseqüente mistura de células espermáticas em diferentes estádios de maturação. Com isto, as células germinativas não terão as condições necessárias para a continuidade do processo de diferenciação, conseqüentemente sofrem degeneração e posterior eliminação. Entretanto, as células espermáticas do mutante que atingem a espermateca não apresentam alterações morfológicas em relação ao tipo selvagem. Portanto, os mecanismos intrínsicos das próprias células espermáticas e as alterações nas células císticas levam o processo da espermiogênese no mutante "olho róseo" de Ceratitis capitata a ter uma defasagem e culminar com uma provável diminuição no número de espermatozóides liberados do interior do testículo / Abstract: In the mutant calIed "pink eye" of Ceratitis capitata, which is known to be less fertile and has modified behavioral patterns, the differentiatíon of most of the germinal celIs folIows that described in the wild type, resulting finalIy in the formation of the mature spermatozoon, a highly specialized celI, ready to participate in the fertilization processo For our ultrastructural investigation, the customary preservation methods were employed, as welI as cytochemical methods for acid phosphatase and arylsulphatase. A smalI number of alterations of the spermatogenesis were found, leadíng to the production of a reduced number of viable celIs. hese alterations of the germinal celIs found in the mutant occur in mitochondríal derivatives, axoneme, nueleus and plasma membrane. Extranumerary mitochondrial derivatives were found. AlI the microtubular elements of the axonemes are present but appear disorganized, not forming the typical 9 + 9 + 2 arrangement, interconnected by dense fibers. Abnormal condensation of the chromatin has been found in numerous nucleic. The plasma membrane is frequently broken or missing, demonstrating a greater fragility in the mutant. ue to the elimination of morpho-functionalIy modified cells, a smalIer number of spermatids reach maturity within the cysts. Another irregularity in the maturation process gives rise o cysts with celIs in different stages of maturity, suggesting an assynchro nism of the intrinsic mechanism of maturation of the germinal cells. A general retardation affects the entire process of spermiogenesis, as seen in comparison of mutant and wild type males of the same age, in which the different zones of the testicles show a distinctly slower development of the mutant. This suggests a possible hormonal alteration which affects the development of the germinal cells, as well as the behavioral traits of the fly. orpho-functional modifications of the spermatic cells may aIs o be related to the changes observed in cyst cells. Very frequently, precociously degenerating cyst cells are seen, disrupting the cystic organization and mixing cells in different stages of maturation. These disarranged cells can no longer develop in a normal manner and therefore are enzymatically eliminated. However, the mutant sperm cells that are transferred to and stored in the spermathecae do not present alterations in relation to the wild type. It is, therefore, due to intrinsic mechanisms of the sperm cells and cyst cells that the spermiogenesis of the "pink eye" mutant of Ceratitis capitata is retarded and results in an appearantly smaller number of free-swimming spermatozoa in the testicles / Mestrado / Mestre em Ciências Biológicas

Orientador: Ernesto Jose Doltaviano / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-07-20T18:40:00Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Vignado_Jane_M.pdf: 11166364 bytes, checksum: 5c6e796cff729f35ed09f7fb5556d51f (MD5) Previous issue date: 1995 / Resumo: Embora seja do conhecimento geral que os hormônios tireoidianos estão envolvidos no desenvolvimento e manutenção de vários órgãos, ainda, existem aspectos contraditórios sobre seu papel na fisiologia testicular. Com a proposta de melhor compreender a influência dos hormônios tireoidianos na manutenção testicular, este estudo teve como objetivo avaliar parâmetros biométricos, morfológicos e hormonais em ratos de várias idades, que foram induzidos experimentalmente ao hipotireoidismo com doses diárias de 0,05 mg de Methimazole, confirmado pelas dosagens de Tiroxina (T4). Neste estudo utilizaram-se 68 ratos brancos (Rattus no veraicus, variedade albino), machos e 12 fetos. Estes animais foram sub divididos em 6 grupos experimentais, de acordo com o tempo de tratamento e a data do sacrifício e denominados: Hipotireoidismo materno-fetal (19º dia de vida fetal), 8 dias de idade, 21 dias de idade, 35 dias de idade, 50 dias de idade e 90 dias de idade. Os resultados mostraram que a indução do hipotireoidismo no oitavo dia de prenhez, que corresponde ao início da organogênese do rato, não resulta em aumento da incidência de reabsorção fetal ou de malformações congênitas e também não leva a alterações no comportamento dos animais com hipotireoidismo. Em todos os grupos experimentais analisados, os animais tratados apresentaram redução significativa (p<0,05) do peso corporal em relação aos animais controles da mesma idade. A avaliação biométrica dos testículos mostrou que os animais tratados apresentaram redução significativa (p<0,05) do peso testicular, do diâmetro dos túbulos seminíferos e do volume nuclear das células de Sertoli. Apenas os fetos com 19 dias de vida intra-uterina não mostraram diferenças nos parâmetros acima citados. A morfologia dos testículos dos animais tratados mostrou atraso no início do estadiamento do ciclo do epitélio seminífero, com redução da quantidade de células germinativas e aumento do número de células degeneradas. Nos grupos experimentais 50 dias e 90 dias de idade, os animais tratados apresentaram estadiamento completo do epitélio seminífero, mas a frequência dos estádios I, VII/VIII e XIV foi menor do que a dos animais controles da mesma idade. As dosagens em duplicata da testosterona plasmática, pelo método de fluoroimunoensaio de fase sólida, não mostraram diferenças significativas entre os valores encontrados nos animais controles e tratados. Conclui-se que o hipotireoidismo prejudica acentuadamente a espermatogênese dos ratos jovens, prejuízo detectável através da redução do peso testicular, da diminuição do diâmetro dos túbulos seminíferos, do aumento de células germinativas degeneradas, do atraso da espermatogênese e da redução do volume nuclear das células de Sertoli. Nos animais tratados com 90 dias de idade, ocorre ganho consideravelmente maior do peso testicular, do diâmetro dos túbulos seminíferos em relação aos animais controles da mesma idade e aparente estabilização no volume nuclear das células de Sertoli, sugerindo ausência da participação dos hormônios tireoidianos sobre o testículo do rato adulto / Abstract: Although it is well known that thyroidal hormones are involved in the development and maintenance of many organs, there remain several open questions as to their role in testicular physiology. The present work proposes to contribute to a better understanding of the role of thyroidal hormones in testicular maintenance. The evaluation was based on the biometric, morphologic and hormonal parameters of groups of data of different ages in which a previous experimental hypothyroidism was induced by treating them with daily 0,05mg Methimazole, and confirmed by measuring thyroxine levels. Our study involved an experimental of 68 white male rats and 12 foetuses (albino Rattus novergicus). These animals were subdivided into 6 experimental groups according to the period of treatment and their death date and will here be designated as mother-foetal ( 190 days of intrauterine life), 8 day old, 21 day old, 35 day old, 50 day old and 90 day old hypothyroidism, respectively. Our results showed that induction to hypothyroidism in the eighth day of pregnancy, which corresponds to the beginning of organogenesis in rats, did not result in any increase in the incidence of either foetal reabsorption nor congenital malformations, as well not causing behavioral alteration of animals with hypothyroidism. In all of the experimental groups considered, the treated animals have a significant reduction (p<0,05) in body weight as related to the control animals of same age. Biometric evaluation of testicles has shown that treated animals had significant reduction (p<0,05) in both the testicular weight and the diameter of seminiferous tubules as well as a reduction in the nuclear volume of Sertoli cells. Only the foetuses having 19 days of intrauterine life had no differences in such parameters, while in the treated 90 day old animals testicular recuperation was observed. As to the morphology, the testicular development of treated animals was delayed in the beginning of the seminiferous epithelium cycle, with a reduction in the quantity of germinative cells and an increase in the number of degenerated cells. In both the 50 and 90 day old experimental groups, the treated animals completed staging of the seminiferous epithelium, but the frequency of stages I, VII/VIII and XIV was reduced as compared to the control animals of the same age. Duplicated dosages of plasmic testosterone by means of solid phase fluoroimunoassays showed no significant differences in the values found for both treated and control animals. We conclude that hypothyroidism severely impairs espermatogenesis in young rats as indicated by the reduced testicular weight, the diminished seminiferous tubule diameter, the increased degeneration of germinative cells, the delayed staging in the seminiferous epithelium cycle and the reduced nuclear volume in Sertoli cell. This did not occur in adults rats. In treated animals belonging to the 90 day old experimental group we have observed the occurence of significantly larger gain in both the testicular weight and the seminiferous tubule diameter, as compared to the control animals of the same age, as well as the occurrence an apparent stabilization of the nuclear volume of Sertoli cells, which thereby suggest that there is no influence of the thyroidal hormones upon adult rats testicles / Mestrado / Fisiologia / Mestre em Ciências Biológicas

Orientador: Mary Anne Heidi Dolder / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-07-13T22:48:58Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Taboga_SebastiaoRoberto_M.pdf: 15013802 bytes, checksum: b60f1a57a50d1feb49f1b12b7690ab2c (MD5) Previous issue date: 1990 / Resumo: O objetivo do presente estudo foi determinar morfológica, citoquímica e ultra-estruturalmente oprocesso de maturação dos espermatozóides de Hyla Ranki. Para tal utilizou-se técnicas histológicas e citoquímicas de cortes em parafina e técnicas de cortes semi e ultra finos dos testículos incluídos em Epon. A análise dos resultados revelou que durante a espermiogênese de Hyla ranki, as espermatogônias primárias originam, através de mitoses, espermatocistos cujas células germinativas entram em meiose e, após alongamento celular, organizam-se em feixes, ocorrendo a substituição de proteínas nucleares à medida que estas células se alongam. Tal substituição leva a uma alta compactação cromatínica na forma final dos espermatozóides. O acrossomo se forma a partir da fusão de vesículas golgianas originando uma ampla vesícula acrossômica que se reduzirá consideravelmente à medida que a espermátide se alonga. As caudas apresentam estruturas acessórias constituídas de proteínas básicas, as quais assumem a forma de bastão axial separado por uma membrana ondulante do filamento marginal que está adjacente ao axonema na altura do 89 par de micrDtúbulos deste. Os processos citoplasmáticos que envolvem amaturação dos espermatozóides no interior dos testículos estão intimamente ligados à atividade das células de Sertoli, as quais são observadas desde a forma mais imatura das espermatogônias até entremeando com seu citoplasma, os amplos feixes de espermatozóides. Embora as características morfológicas ecitoquímicas de espermatozóides tenham sido utilizadas " como caráter" sistemático de exclusão para dis_riminação de espécies, como Hyla ranki e outras de seu grupo, que apresentam posicionamento filogenético duvidoso, nossos achados são altamente sugestivos de que não devam ser assim considerados, mas em realidade um caráter adicional / Abstract: The present study was undertaken to determine morphologically, cytochemically and ultrastructurally the maturation process of spermatozoa Of Hyla rank. Histological and cytochemical.techniques where used with sections of material included in paraffin, as .well as observation of semi-thin and ultra-thin sections of testicles included 1n epan. Analysis of the results shawed that primary spermatogonia,through mitosis, originate spermatocysts were the germinative cells enter meiosis. As the resulting cells elangate, they organize themselves into sheths. Nuclear prateins are substituted as this elangatian praceeds and the substitution permits a strang crhamatin campactation in mature spermatazoa. The acrasame is ariginated.b_ fusian of Galgi vesicles a large acrasamal vesicle, which is considerably campacted as the spermatid elangates. The sperm tail presents an accessory structure consisting of basic prateins, in the shape of an . axial rad and cannected to the marginal filament and axaneme by an undulating membrane. The marginal filament, also made up of basic protein, follows the axoneme next to the 8th doublet of microtubules. The cytoplasmic processes involved in sperm maturation are intimately related with the activity of Sertoli cells1 which are observed from the earliest stage of spermatogonia until the formation of sperm sheathsl wyre the Sertoli cel1s surrounds each of sperm heads in the sheath. Slthough the morphological and cytochemical characterlstics of spermato2oa have been used as excluding systematic features to separate species, in the case of Hyla ranki and others of this group which have doubtful hylogenetical positions, our studysuggests that sperm chat-acterist ics should not be considered alone but rather together with other features of systematicvalue / Mestrado / Biologia Celular / Mestre em Ciências Biológicas

Orientador : Mary Anne Heidi Dolder / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-07-18T21:47:34Z (GMT). No. of bitstreams: 1 LinoNeto_Jose_M.pdf: 17281121 bytes, checksum: 5b6add5bfa0534b63e47cd1d8f179939 (MD5) Previous issue date: 1993 / Resumo: O estudo da espermiogênese foi desenvolvido a partir de cortes ultrafmos de testículos e preparações como coloração negativa e microscopia eletrônica de varredura de espermatozóides obtidos de espermatecas e testículos, respectivamente. A espermiogênese em Cosmopolites sordidus, como nos insetos em geral, caracteriza-se pela formação do flagelo e acrossomo, condensação da cromatina, alongamento nuclear e eliminação do citoplasma. As espermátides jovens apresentam características de células somáticas: núcleo esférico cromatina predominantemente frouxa, complexo de Golgi típico e muitas mitocôndrias espalhadas pelo citoplasma. Estas mitocôndrias fundem-se, a seguir, originando um complexo mitocondrial formado por duas estruturas bem distintas e enroladas uma na outra. Nas primeiras fases da espermiogênese a cromatina, a partir da periferia nuclear, toma-se condensada e, a seguir, assume a forma de filamentos. Estes filamentos, por associações, são convertidos em cordões espessos, os quais, novamente por associações, resultam, inicialmente, em uma cromatina semi-compactada com muitos espaços pequenos e elétron transparentes em arranjo hexagonal e, finalmente, em uma cromatina homogeneamente compactada característica dos espermatozóides. Simultaneamente a compactação da cromatina o núcleo passa de redondo para alongado e, durante este processo, inúmeros microtúbulos citoplasmáticos formam uma camada simples em tomo do núcleo. O acrossomo começa a ser formado já no início da espermiogênese a partir do complexo de Golgi e, nos espermatozóides, é formado por três estruturas, o perforatorium, a vesícula acrossomal e uma camada de material extra-acrossomal. O complexo mitocondrial diferencia-se em dois derivados mitocondriais. No espermatozóide estes derivados são desiguais, onde o maior tem aproximadamente o dobro do menor, em diâmetro, e é quase totalmente preenchido por material paracristalino. O menor é basicamente ocupado por cristas mitocondriais regularmente dispostas em ângulo reto relativo ao seu maior eixo. O axonema do flagelo origina-se do único centríolo observado na espermátide e, inicialmente, possui o arranjo básico de dois microtúbulos centrais e nove duplas de microtúbulos periféricos, formando-se a seguir, os nove microtúbulos acessórios. Durante a alteração donúcleo de esférico para alongado, observa-se o adjunto do centríolo, uma estrutura eletrondensa em forma de anel que circunda a extremidade anterior do corpúsculo basal. Antes da espermiogênese completar-se, este adjunto centriolar já não é mais observado. Em fases bem adiantadas da espermiogênese os dois corpos acessórios começam a ser formados, um de cada lado do axonema. No espermatozóide, estes corpos acessórios são aproximadamente triangulares, em secção transversal, e envolvem parcialmente o axonema. Cada corpo acessório possui uma expansão constituida de material menos compacto, sendo esta bem mais desenvolvida em um deles. Durante este processo de diferenciação da espermátide, grande parte do citoplasma juntamente com os microtúbulos e demais organelas tais como complexo de Golgi, retículo endoplasmático e polissomos livres são eliminados, resultando em um espermatozóide muito longo e fIno, medindo aproximadamente 160llm de comprimento / Abstract: The spermiogenesis of Cosmopolites sordidus was investigated with the use of thin sections, negative staining preparations, and scanning electron microsoopy of spermatic cells obtained from the testicles or spermathecae.1n this species as with insects in general, this process is characterized by the following events: flagellar formation, chromatin condensation, nuclear elongation and sheading of excess cytoplasm. Early spermatids are similar to somatic cells in that they have spherica1 nuclei with predominantly loosechromatin, a typical GoIgi complex and many scattered mitochondria. These mitochondria fuse to form a mitochondrial complex made up of two distinct mitochondrial structures which curl around each other. In the first stages of spermiogenesis, chromatin begins to condense at the nuclear perifery and from this dense mass, regular filaments are formed. These filaments fuse into thick cords which, in turn, associate latera1ly, resulting in semi-compact chromatin with hexagonally arranged clear spaces. Fina1ly, with the disappearance of these spaces, an homogeneously compact nUcleus is obtained, typical of spermatozoa. The nuclear shape changes, simultaneously with chromatin condensation, from spherica1 to cilindrical, and is surrounded by a single layer of microtubules. The proacrosomic vesicle appears already at early stages of spermiogenesis, through Golgi vesicle fusion and developes into a triple structure, consisting in the perforatorium, the acrosomic vesicle and a layer of extra-acrosomic material. The mitochondrial complex divides into two elongated mitochondrial derivatives. In the spermatozoa, these derivatives are not equal; the larger reaches twice the diameter of the smaller and is almost totally filled with material in a paracrystalline arrangement The smaller derivative is mostly taken up by regularly spaced cristae, arranged perpendicularly to its greater axis. The flagellar axoneme originates from a single centriole observed in the early spermatid. The axoneme, typical for insects, consists in two central microtubules surrounded by nine doublets, from which nine acessory microtubules are later formed. During nuclear elongation, the centriolar adjunct appears, consisting in an electron dense fÍ!lg which surrounds the centriole. This centriolar adjunct disappears before spermiogenesis is completed. In later stages, the acessory bodies are formed on each side of the axoneme. In the mature flagellum, these structures, observed in transverse section, are triangular and partially surround the axoneme. Each dense, acessory body has a less compact extension which is considerably larger for one of them. During spermatid differentiation, most of the cytoplasm, together with the microtubules, GoIgi complex, endoplasmic reticulum and free polisomes are eliminated, resulting in a long, thin spermatozoon, about 160l-lm in length / Mestrado / Biologia Celular / Mestre em Ciências Biológicas

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:26:05Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2009-02-18Bitstream added on 2014-06-13T20:33:43Z : No. of bitstreams: 1 souza_hv_me_sjrp.pdf: 20206757 bytes, checksum: ccc84d80c08f05c61bf3bcc4a56db8f8 (MD5) / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / Os Heteroptera constituem um dos mais importantes grupos de insetos do ponto de vista econômico, pois a maioria, durante os estádios de ninfa e adulto, alimenta-se de plantações ou grãos armazenados para o consumo humano. As análises citogenéticas permitiram verificar que Antiteuchus tripterus possui um lobo composto (5/6), o qual pode estar envolvido na nutrição do lobo harlequin, evidência que pressões evolutivas ocorreram para a manutenção deste lobo, nesta espécie, o que demonstra a importância, desse lobo, para algumas espécies. Permitiram, ainda, verificar que todas as espécies apresentam sistema cromossômico do sexo XY e complemento cromossômico de 2n= 14 cromossomos. Além disso, as análises do comportamento nucleolar evidenciaram que há atividade metabólica diferenciada para os lobos 4, 5 e 6 em Antiteuchus tripterus e também em espécies não possuidoras do lobo harlequin, como Platycarenus umbractulatus, que apresentou marcações diferenciadas no lobo 5, a qual pode indicar a formação de espermatozóides não fecundantes. A espécie Euschistus heros não apresenta lobo harlequin, porém as análises da espermatogênese demonstraram que há diferenças significativas no tamanho das células dos lobos 4 e 6, os quais podem estar relacionados com a formação de espermátides não-fecundantes. Foi verificada a presença de corpos nucleolares na forma de “mushroom” nas espécies do gênero Oebalus, característica, ainda não descrita na literatura, além disso, foi observada, em P. umbractulatus, a presença de dois corpos escuros e dois mais claros, que podem demonstrar a participação dos cromossomos sexuais na formação e organização do nucléolo desta espécie. Assim, verifica-se a importância dessas análises para compreensão do cenário evolutivo da família Pentatomidae. / The Heteroptera are the most important group of insect related with economic importance, because the most of them, during ninfal stage and adult stage, feed in plantations or stored grains to the human consumption. The cytogenetical analyses permitted verify that Antiteuchus tripterus has a compound lobe (5/6), which should be involved in the nutrition of harlequin lobe, evidences that evolutionary pressures occurred for the maintenance of this lobe in this species, which shows the importance of this lobe for some species. The analyses also permitted to evidence that all species analyzed have XY sexual chromossomic systems and a chromossomic complement 2n= 14 chromosomes. Furthermore, the analyses of the nucleolar behavior showed there are different metabolic activities in the lobes 4, 5 and 6 in Antiteuchus tripterus and in the species without the harlequin lobe, as Platycarenus umbractulatus, also had different marcation in lobe 5, which can indicate the formation of non-fertilizing sperm. The species Euschistus heros do not have harlequin lobe, but the analyses of spermatogenesis showed that there are significant differences in cell size in the lobes 4 and 6, which may be related to the formation of non-fertilizing spermatids. It was verified the presence of nucleolar bodies with morphology like mushroom in the species of the genus Oebalus, feature not yet observed. Moreover was observed in P. umbractulatus, the presence of two dark bodies and two lighter, which may demonstrate the participation of sex chromosomes in the formation and organization of the nucleolus in these species. Thus, this present work shows the importance of such analyses for understanding the evolutionary scenario of the family Pentatomidae.

Made available in DSpace on 2015-08-20T17:09:25Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2014-02-20. Added 1 bitstream(s) on 2015-08-20T17:27:12Z : No. of bitstreams: 1 000843900.pdf: 4080411 bytes, checksum: cf0232eb08a31cb185e163f6ba5a3998 (MD5) / Em teleósteos, a utilização de transplante de espermatogônias tronco está criando um cenário novo e promissor na área de biotecnologia e produção em aquicultura, possibilitando a preservação de espécies em perigo de extinção. Esta técnica consiste na remoção de células tronco espermatogoniais do testículo de um animal doador e a sua transferência para o testículo de um receptor. Para garantir a eficiência desta técnica o receptor deve ter sua espermatogênese endógena suprimida, pois a eficiência do transplante depende do sucesso na competição entre células germinativas transplantadas e células germinativas endógenas nos túbulos seminíferos. Este estudo teve por objetivo promover experimentalmente a depleção da espermatogênese endógena de Devario aequipinnatus, por meio da droga quimioterápica Myleran (Busulfan) e sua associação com a temperatura de 30°C. Foram definidas quatro fases de maturação gonadal para o ciclo testicular de D. aequipinnatus: Maturação Inicial, Maturação Intermediária, Maturação Final e Regressão, essas definições tiveram como base as alterações do epitélio germinativo testicular associado aos estágios das células germinativas presentes. Para depleção foram testadas duas dosagens, no T15/18 foram aplicadas duas injeções, via intracelomática, com intervalo de 10 dias entre as mesmas, sendo a primeira dose de 15 mg kg -1 Myleran (Busulfan) e a segunda com 18 mg kg -1 de Myleran. No T40 foi aplicado somente uma injeção contendo 40 mg kg -1 de Myleran (Busulfan). Como grupo controle foi utilizado uma unidade experimental sem a inclusão de qualquer tipo de droga, em que os animais permaneceram sob as mesmas condições de temperatura, alimentação e fotoperíodo oferecidas para os animais utilizados dos tratamentos. O T15/18 e o T40 apresentaram uma redução significativa na quantidade de Espermatócitos e consequentemente um aumento na quantidade de lúmen... / In teleosts, the use of spermatogonial stem transplant is creating a new and promising scenario in the area of biotechnology and aquaculture production, enabling the preservation of species in danger of extinction. This technique involves the removal of spermatogonial stem cells of the testis of a donor animal and its transfer to the testicle of a receiver. To ensure the efficiency of this technique the receiver shall have its endogenous spermatogenesis deleted because the transplant efficiency depends on the success in the competition between transplanted germ cells and endogenous germ cells in the seminiferous tubules. This study aimed to experimentally promote depletion of endogenous spermatogenesis Devario aequipinnatus through the chemotherapy drug Myleran (Busulfan) and its association with the temperature 30 ° C. Maturation of four phases have been defined for testicular cycle D. aequipinnatus: Maturation Home, Intermediate maturation, maturation and Final Regression, these definitions were based on the changes of the testicular germinal epithelium associated with the stages of germ cells present. For depletion two doses were tested in the T15 / 18 were applied two injections via intracelomic with an interval of 10 days between them, the first dose of 15 mg kg-1 Myleran (Busulfan) and second with 18 mg kg- 1 Myleran. T40 was applied only in an injection containing 40 mg kg-1 Myleran (Busulfan). The control group was used an experimental unit without the inclusion of any type of drug, where the animals were kept under the same conditions of temperature, photoperiod and food offered to the animals used treatments. The T15 / 18 and T40 showed a significant reduction in the number of spermatocytes and consequently an increase in the amount tubular lumen in the testes of the animals examined. Three days after application of Busulfan for both single dose and double dose of Busulfan for an increase in pyknosis in spermatogonia ...

Made available in DSpace on 2015-09-17T15:24:54Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2015. Added 1 bitstream(s) on 2015-09-17T15:47:01Z : No. of bitstreams: 1 000844080.pdf: 1835153 bytes, checksum: 63d573db683f27943deeb8883f18ad05 (MD5) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / Os anuros estão em declínio populacional no mundo todo, sendo que a contaminação aquática é um dos fatores que está influenciando neste processo. A Flutamida é um medicamento antiandrogênico utilizado contra o câncer de próstata, presente em corpos d'água como um contaminante. Este composto pode atuar como desregulador endócrino, afetando principalmente a reprodução. Assim, os anuros da família Bufonidae, que apresentam o órgão de Bidder, considerado um ovário rudimentar, são bons modelos para estudar a ação deste composto. Já o fígado é o principal órgão de detoxificação e está diretamente relacionado à metabolização de substâncias tóxicas. Dessa forma, nosso objetivo foi avaliar a ação da Flutamida na morfologia dos órgãos reprodutivos e do fígado de machos Rhinella schneideri, bem como nos níveis séricos dos hormônios sexuais. Foram utilizados 18 machos, os quais receberam, por 7 dias, doses diárias de 1 ou 5 mg/kg de Flutamida diluída em óleo mineral, enquanto o grupo controle recebeu apenas o óleo mineral. Em seguida os animais foram eutanasiados, o sangue foi coletado e foram retirados os testículos, órgãos de Bidder e fígado, que seguiram para a rotina histológica de acordo com a análise empregada. Nos testículos foram avaliadas as áreas das células germinativas e do lóculo seminífero. No órgão de Bidder as células germinativas foram quantificadas, bem como a área ocupada pelo pigmento lipofuscina. Já no fígado nós mensuramos as áreas dos pigmentos melanina, lipofuscina e hemosiderina. Os níveis séricos de testosterona e estradiol foram identificados por ELISA. No testículo, houve aumento das espermatogônias e redução dos espermatozoides em feixe e no lúmen em ambas as concentrações. Houve ainda aumento das espermátides secundárias na menor dosagem e dos espermatócitos primários na maior dosagem. A área locular variou apenas na concentração de 1 mg/kg... / The anurans are in population decline worldwide, and water pollution is one of the factor influencing this process. The Flutamide is an antiandrogen medicine used against prostate cancer, and also is a contaminant. This compound can act as an endocrine disrupter that can affect mainly the reproduction. In Bufonidae family occurs a peculiar organ named Bidder's organ, considered a rudimentary ovary. The liver is the main organ with detoxification functions and is directly related to substances metabolism. Thus, our aim was to evaluate the effect of Flutamide on morphology of the reproductive organs and liver of males Rhinella schneideri, and on the serum levels of steroid hormones. We used 18 males of the specie, organized in 3 groups. The treatment groups received, for 7 days, daily doses of 1 or 5 mg/kg of Flutamide diluted in mineral oil, while the control group received only the mineral oil. After the experiments, the animals were euthanized, the blood was collected and testis, Bidder's organs and liver were removed and proceed to histological routine according to the analysis employed for each one. For testis we evaluated the area of the germ cells and seminiferous locule. For Bidder's organ we quantified the the germ cells and the pigmented area of lipofuscin. In the liver we measured the pigmented areas of melanin, lipofuscin and hemosiderin. Serum testosterone and estradiol were identified by ELISA. In testis there was an increase in spermatogonia and reduction of bundle and lumen sperm in both treatments. Also occurred an increase in secondary spermatids in lower dosage and in primary spermatocytes in higher dosage. The locular area varied only at the low dose. In Bidder's organ there was a decrease in degeneration and atresia oocytes and an increase in final diplotene oocytes in both concentrations of Flutamide, as well as a reduction in lipofuscin pigmented area. In the liver the 3 ...