En la década pasada, la Microsporidiosis humana era considerada como una enfermedad exclusivamente de personas VIH positivas o de otros pacientes también inmunocomprometidos. En la actualidad, se sabe que no solo afecta a estos pacientes sino que además se vienen reportando nuevos casos en pacientes inmunocompetentes, incrementándose cada día mas el número de casos en este grupo de personas. La especie de microsporidio que comúnmente se diagnostica es el Enterocytozoon bieneusi, que hasta el momento es el único microsporidio que no ha podido ser cultivado ya sea in vivo o in Vitro. El presente trabajo de tesis tiene como objetivo demostrar la infección experimental de cerdos de 1 mes de edad con esporas de Enterocytozoon bieneusi, para lo cual se utilizaron 9 lechones procedentes de una granja tecnificada con muy pocas probabilidades de infección a este parásito. Se realizó la inoculación de las esporas a los lechones por vía oral. Para el diagnóstico del parásito se realizaron 2 tipos de coloraciones: La Coloración Tricrómica, para colorear las muestras de heces y la Coloración de Plata, para colorear las diferentes porciones de tejidos intestinales de cada lechón. Se logró la observación de esporas de Enterocytozoon bieneusi en las heces y en los cortes de intestino de todos los lechones post inoculación, comprobando que una de las vías de infección de este parásito es la oral. Este trabajo demuestra que los cerdos de 1 mes de edad son susceptibles a la infección con esporas de Enterocytozoon bieneusi. y puede ser considerado como un posible animal que sirva de modelo experimental en el estudio de la Microsporidiosis humana causada por Enterocytozoon bieneusi. / In the last decade, the human Microsporidiosis was considered like a disease exclusively of positive people VIH or other patients also immunocompromised. At the present time, one knows that no single it affects these patients but who in addition they come reporting new cases in immunocompetent patients, being increased every day but the number of cases in this group of people. The species of microsporidia that commonly is diagnosed is the Enterocytozoon bieneusi, that until the moment is only microsporidia that could not have been cultivated or in alive or in vitro. The present thesis work must like objective demonstrate to the experimental infection of pigs of 1 moth of age with spores of Enterocytozoon bieneusi, for which 9 pigs coming from a farm technified with very few probabilities of infection to this parasite were used. The inoculation of the spores to the pigs was made orally. For the diagnosis of the parasite 2 types of colorations were made: The Tricrómic Blue Stain, to color the samples of heces and the Coloration of Silver, to color the different portions from intestinal weaves of each pig. The observation of spores of Enterocytozoon bieneusi was obtained in the feces and rhe cuts of intestine of all the pigs post inoculation, verifying that one of the routes of infection of this parasite is the oral one. This work demonstrates that the pigs of 1 month of age are susceptible to the infection with spores of Enterocytozoon bieneusi and it can be considered like a possible animal that serves as experimental model in the study of the human Microsporidiosis caused by Enterocytozoon bieneusi.

En la década pasada, la Microsporidiosis humana era considerada como una enfermedad exclusivamente de personas VIH positivas o de otros pacientes también inmunocomprometidos. En la actualidad, se sabe que no solo afecta a estos pacientes sino que además se vienen reportando nuevos casos en pacientes inmunocompetentes, incrementándose cada día mas el número de casos en este grupo de personas. La especie de microsporidio que comúnmente se diagnostica es el Enterocytozoon bieneusi, que hasta el momento es el único microsporidio que no ha podido ser cultivado ya sea in vivo o in Vitro. El presente trabajo de tesis tiene como objetivo demostrar la infección experimental de cerdos de 1 mes de edad con esporas de Enterocytozoon bieneusi, para lo cual se utilizaron 9 lechones procedentes de una granja tecnificada con muy pocas probabilidades de infección a este parásito. Se realizó la inoculación de las esporas a los lechones por vía oral. Para el diagnóstico del parásito se realizaron 2 tipos de coloraciones: La Coloración Tricrómica, para colorear las muestras de heces y la Coloración de Plata, para colorear las diferentes porciones de tejidos intestinales de cada lechón. Se logró la observación de esporas de Enterocytozoon bieneusi en las heces y en los cortes de intestino de todos los lechones post inoculación, comprobando que una de las vías de infección de este parásito es la oral. Este trabajo demuestra que los cerdos de 1 mes de edad son susceptibles a la infección con esporas de Enterocytozoon bieneusi. y puede ser considerado como un posible animal que sirva de modelo experimental en el estudio de la Microsporidiosis humana causada por Enterocytozoon bieneusi. / In the last decade, the human Microsporidiosis was considered like a disease exclusively of positive people VIH or other patients also immunocompromised. At the present time, one knows that no single it affects these patients but who in addition they come reporting new cases in immunocompetent patients, being increased every day but the number of cases in this group of people. The species of microsporidia that commonly is diagnosed is the Enterocytozoon bieneusi, that until the moment is only microsporidia that could not have been cultivated or in alive or in vitro. The present thesis work must like objective demonstrate to the experimental infection of pigs of 1 moth of age with spores of Enterocytozoon bieneusi, for which 9 pigs coming from a farm technified with very few probabilities of infection to this parasite were used. The inoculation of the spores to the pigs was made orally. For the diagnosis of the parasite 2 types of colorations were made: The Tricrómic Blue Stain, to color the samples of heces and the Coloration of Silver, to color the different portions from intestinal weaves of each pig. The observation of spores of Enterocytozoon bieneusi was obtained in the feces and rhe cuts of intestine of all the pigs post inoculation, verifying that one of the routes of infection of this parasite is the oral one. This work demonstrates that the pigs of 1 month of age are susceptible to the infection with spores of Enterocytozoon bieneusi and it can be considered like a possible animal that serves as experimental model in the study of the human Microsporidiosis caused by Enterocytozoon bieneusi.

La presente Tesis abarcó el estudio de las esporas de las familias Azollaceae, Salviniaceae y Marsileaceae que crecen en el Cono Sur de Sudamérica. El área de estudio comprende Bolivia, el sur de Brasil (estados de Paraná, Santa Catarina y Rio Grande do Sul), Chile, Paraguay, Uruguay y Argentina. Estas familias son únicas dentro de las Filicophyta por presentar heterosporía y estar adaptadas en diversos grados al ambiente acuático. En primer lugar se actualizó el número de taxa de estas familias y su distribución dentro de la región. La distribución fue determinada en base a la bibliografía existente y a la revisión de los datos de colección del material. Posteriormente, y como propósito fundamental de esta investigación, se llevó a cabo el análisis comparativo de la morfología y estructura de las esporas en todos los taxa. Con tal finalidad se reconocieron la organización y las características externas de ambos tipos de esporas y la estructura y ultraestructura de sus paredes. Se utilizó material seco proveniente de herbarios nacionales y extranjeros. Las esporas se estudiaron con distintos medios: microscopio óptico, electrónico de barrido y de transmisión. El material fue tratado con distintos protocolos, según el medio de observación empleado.

O presente trabalho constitui o primeiro registro musical detalhado dos fandangos de botinas e de esporas, bem como o primeiro olhar que identifica as idiossincrasias musicais destes fandangos caipiras. As principais ferramentas para a identificação destas características foram as transcrições das danças para partituras, detalhando cada som resultante, ou seja: esporas, palmas, estalos, pés e violas, bem como a análise deste material. Ao longo do trabalho apresentamos uma breve elucidação sobre o significado da palavra fandango, seus desdobramentos pelo Brasil e os possíveis motivos para a escassez bibliográfica sobre os fandangos caipiras, pois dos fandangos brasileiros estes são os únicos que não possuíam uma literatura razoável até então. Além disto, através da abordagem autoetnográfica, evidenciam-se as transformações que estes processos trouxeram ao pesquisador através da convivência com os fandangueiros de Itapetininga. O trabalho aborda questões sociológicas, mas sem pretender a profundidade de um sociólogo, pois o enfoque principal é a questão musicológica em torno desta manifestação. A análise de aspectos musicais possibilita, inclusive, chegar a conclusões sobre questões que comumente são respondidas por vias da sociologia, como a influência da mídia e as transformações destas manifestações no tempo. / This work constitutes the first detailed musical register of the fandangos of boots and spores, as well as the first look that identifies the musical idiosyncrasies of these countryside fandangos. The main tools to identify these characteristics were the transcription from the dances to music sheet, detailing each one of the resulting sounds, that are: spores, claps, finger snaps, feet and violas, as well as the analysis of this material. Along this work, it is presented a brief elucidation about the meaning of the word fandango, the different names and aspects along Brazil and the possible reasons to the bibliographic shortage it is faced about the countryside fandangos, because of all the fandangos that exists in Brazil, this one is the only kind that did not have a reasonable literature even since. Beyond these facts, it is possible, though the auto-ethnographic approach, to evidence the transformations that those process brought to the researcher though the coexistance with the fandangueiros from Itapetininga. The work presents sociological issues, but it does not intend to be as sociological as if a sociologist would have written it, because the main issue of this work is the musical one. The analysis of musical aspects makes possible to get conclusions about issues that usually are answered by sociological means, as the influence of the media and the transformations of these manifestations over time.

O presente trabalho constitui o primeiro registro musical detalhado dos fandangos de botinas e de esporas, bem como o primeiro olhar que identifica as idiossincrasias musicais destes fandangos caipiras. As principais ferramentas para a identificação destas características foram as transcrições das danças para partituras, detalhando cada som resultante, ou seja: esporas, palmas, estalos, pés e violas, bem como a análise deste material. Ao longo do trabalho apresentamos uma breve elucidação sobre o significado da palavra fandango, seus desdobramentos pelo Brasil e os possíveis motivos para a escassez bibliográfica sobre os fandangos caipiras, pois dos fandangos brasileiros estes são os únicos que não possuíam uma literatura razoável até então. Além disto, através da abordagem autoetnográfica, evidenciam-se as transformações que estes processos trouxeram ao pesquisador através da convivência com os fandangueiros de Itapetininga. O trabalho aborda questões sociológicas, mas sem pretender a profundidade de um sociólogo, pois o enfoque principal é a questão musicológica em torno desta manifestação. A análise de aspectos musicais possibilita, inclusive, chegar a conclusões sobre questões que comumente são respondidas por vias da sociologia, como a influência da mídia e as transformações destas manifestações no tempo. / This work constitutes the first detailed musical register of the fandangos of boots and spores, as well as the first look that identifies the musical idiosyncrasies of these countryside fandangos. The main tools to identify these characteristics were the transcription from the dances to music sheet, detailing each one of the resulting sounds, that are: spores, claps, finger snaps, feet and violas, as well as the analysis of this material. Along this work, it is presented a brief elucidation about the meaning of the word fandango, the different names and aspects along Brazil and the possible reasons to the bibliographic shortage it is faced about the countryside fandangos, because of all the fandangos that exists in Brazil, this one is the only kind that did not have a reasonable literature even since. Beyond these facts, it is possible, though the auto-ethnographic approach, to evidence the transformations that those process brought to the researcher though the coexistance with the fandangueiros from Itapetininga. The work presents sociological issues, but it does not intend to be as sociological as if a sociologist would have written it, because the main issue of this work is the musical one. The analysis of musical aspects makes possible to get conclusions about issues that usually are answered by sociological means, as the influence of the media and the transformations of these manifestations over time.

Tesis por compendio / [ES] Generalmente, se utilizan tratamientos térmicos para la esterilización de emulsiones. Sin embargo, el calentamiento ha demostrado inducir la hidrólisis de lípidos y lecitina. En este sentido, las tecnologías no térmicas están surgiendo en la industria para alcanzar la estabilidad microbiana evitando la pérdida de calidad relacionada con el calor. El CO2 supercrítico (SC-CO2) y los campos eléctricos pulsados (PEF) son tecnologías no térmicas para la inactivación microbiana. Sin embargo, estas técnicas en ocasiones requieren altas intensidades o tiempos de tratamiento largos para garantizar la seguridad del producto. La literatura ha demostrado la capacidad de los ultrasonidos de alta potencia (HPU) para intensificar fenómenos de transferencia de masa y calor. Por lo tanto, su aplicación a tecnologías no térmicas podría ser un enfoque interesante para mejorar la efectividad de la inactivación microbiana. En este contexto, el objetivo fue evaluar el efecto de los tratamientos SC-CO2, PEF y HPU, aplicados de forma individual y combinada, sobre la inactivación de diferentes microorganismos en emulsiones. Para ello, por un lado, se estudió el efecto de la aplicación de HPU a los tratamientos SC-CO2 sobre diferentes tipos de microorganismos y sobre medios con diferente contenido en aceite. Por otro lado, se evaluó el efecto de los tratamientos PEF y HPU individuales y combinados sobre diferentes microorganismos Los resultados mostraron que, en general, la aplicación de HPU intensificó la capacidad de inactivación de SC-CO2. Los HPU probablemente facilitaron la solubilidad del CO2 en el medio y provocaron daños en las células. En este sentido, el análisis microscópico de las células inactivadas reveló importantes cambios morfológicos, incluyendo paredes celulares dañadas y pérdida del contenido citoplasmático. En cambio, los HPU no mejoraron la inactivación de SC-CO2 de las esporas de A. niger en emulsión. El aumento de la presión llevó a una mayor inactivación, a excepción de E. coli en agua, donde no se encontró efecto de la presión. Sin embargo, las presiones por encima de 350 bar no parecen ejercer ninguna inactivación adicional. El aumento de temperatura tuvo un efecto significativo para todos los tratamientos y microorganismos. En cuanto al efecto del medio, se sabe que la presencia de aceite protege a los microorganismos, como se observó en la inactivación de bacterias SC-CO2 en agua y en emulsiones con diferente contenido en aceite. Sin embargo, la aplicación de HPU enmascaró el efecto protector que ejerce el aceite en las emulsiones. En cambio, para las esporas de A. niger no se encontró efecto del medio sobre la efectividad de los tratamientos. En relación al efecto de los tratamientos de SC-CO2 + HPU sobre la calidad de las emulsiones, se encontró un efecto leve de las condiciones del proceso y mediante la selección de condiciones adecuadas de SC-CO2 + HPU, se pudieron obtener cambios mínimos en la calidad de las emulsiones y una inactivación satisfactoria de todos los microorganismos, excepto para las esporas de G. stearothermophilus. Con respecto a los tratamientos de PEF y HPU, no se logró la inactivación completa de las emulsiones con los tratamientos individuales. Sin embargo, cuando el PEF (152,3-176,3 kJ / kg) fue seguido de HPU (3 min), se obtuvieron niveles de inactivación de 8,2, 6,6 y 1,0 ciclos-log para E. coli, A. niger y B. pumilus. Además, la inactivación lograda por el tratamiento con PEF-HPU fue mayor que la de la suma de los tratamientos individuales para todos los microorganismos. Por el contrario, la inactivación lograda por el tratamiento HPU-PEF fue menor que la de la suma de los tratamientos individuales. Por lo tanto, la secuencia más eficaz fue aquella en la que el PEF fue seguido de los HPU. Se puede concluir que, la combinación de HPU con SC-CO2 o PEF generalmente mejoró la inactivación microbiana. En consecuencia, se podrían utili / [CA] Generalment, s'utilitzen tractaments tèrmics per a l'esterilització d'emulsions. No obstant això, el calfament ha demostrat induir la hidròlisi de lípids i lecitina. En aquest sentit, les tecnologies no tèrmiques estan sorgint en la indústria per a aconseguir l'estabilitat microbiana evitant la pèrdua de qualitat relacionada amb la calor. El CO¿ supercrític (SC-CO¿) i els camps elèctrics premuts (PEF) són tecnologies no tèrmiques per a la inactivació microbiana. No obstant això, aquestes tècniques a vegades requereixen altes intensitats o temps de tractament llargs per a garantir la seguretat del producte. La literatura ha demostrat la capacitat dels ultrasons d'alta potència (HPU) per a intensificar fenòmens de transferència de massa i calor. Per tant, la seua aplicació a tecnologies no tèrmiques podria ser un enfocament interessant per a millorar l'efectivitat de la inactivació microbiana. En aquest context, l'objectiu va ser avaluar l'efecte dels tractaments SC-CO¿, PEF i HPU, aplicats de manera individual i combinada, sobre la inactivació de diferents microorganismes en emulsions. Per a això, d'una banda, es va estudiar l'efecte de l'aplicació de HPU als tractaments SC-CO¿ sobre diferents tipus de microorganismes i sobre mitjans amb diferent contingut en oli. D'altra banda, es va avaluar l'efecte dels tractaments PEF i HPU individuals i combinats sobre diferents microorganismes Els resultats van mostrar que, en general, l'aplicació de HPU va intensificar la capacitat d'inactivació de SC-CO2. Els HPU probablement van facilitar la solubilitat del CO¿ en el mitjà i van provocar danys en les cèl·lules. En aquest sentit, l'anàlisi microscòpica de les cèl·lules inactivades va revelar importants canvis morfològics, incloent parets cel·lulars danyades i pèrdua del contingut citoplasmàtic. En canvi, els HPU no van millorar la inactivació de SC-CO2 de les espores de A. niger en emulsió. L'augment de la pressió va portar a una major inactivació, a excepció d'E. coli en aigua, on no es va trobar efecte de la pressió. No obstant això, les pressions per damunt de 350 bar no semblen exercir cap inactivació addicional. L'augment de temperatura va tindre un efecte significatiu per a tots els tractaments i microorganismes. Quant a l'efecte del medi, se sap que la presència d'oli protegeix els microorganismes, com es va observar en la inactivació de bacteris SC-CO¿ en aigua i en emulsions amb diferent contingut en oli. No obstant això, l'aplicació de HPU va emmascarar l'efecte protector que exerceix l'oli en les emulsions. En canvi, per a les espores de A. niger no es va trobar efecte del medi sobre l'efectivitat dels tractaments. En relació a aquest efecte dels tractaments de SC-CO2 + HPU sobre la qualitat de les emulsions, es va trobar un efecte lleu de les condicions del procés i mitjançant la selecció de condicions adequades de SC-CO2 + HPU, es van poder obtindre canvis mínims en la qualitat de les emulsions i una inactivació satisfactòria de tots els microorganismes, excepte per a les espores de G. stearothermophilus. Respecte als tractaments de PEF i HPU, no es va aconseguir la inactivació completa de les emulsions amb els tractaments individuals. No obstant això, quan el PEF (152,3-176,3 kJ / kg) va ser seguit de HPU (3 min), es van obtindre nivells d'inactivació de 8,2, 6,6 i 1,0 cicles- log per a E. coli, A. niger i B. pumilus. A més, la inactivació reeixida pel tractament amb PEF- HPU va ser major que la de la suma dels tractaments individuals per a tots els microorganismes. Per contra, la inactivació reeixida pel tractament HPU- PEF va ser menor que la de la suma dels tractaments individuals. Per tant, la seqüència més eficaç va ser aquella en la qual el PEF va ser seguit dels HPU. Es pot concloure que, la combinació de HPU amb SC-CO¿ o PEF generalment va millorar la inactivació microbiana. En conseqüència, es podrien utilitzar temps de / [EN] Thermal treatments are generally used for the sterilization of emulsions. However, heating has demonstrated its ability to induce the hydrolysis of lipids and lecithin. In this sense, non-thermal technologies are emerging in the industry with the aim of achieving microbial stability while avoiding the loss of quality related to heat. Supercritical carbon dioxide (SC-CO2) and pulsed electric fields (PEF) are non-thermal technologies for microbial inactivation. However, these techniques have demonstrated to require high treatment intensities or long treatment times to guarantee the product's safety. Therefore, there is still room for the improvement in the use of these technologies. Literature has illustrated the capacity of high power ultrasound (HPU) for the intensification of mass and/or heat transfer phenomena. Therefore, its application to non-thermal technologies could be an interesting approach to enhance the microbial inactivation effectiveness. In this context, the objective was to evaluate the effect of SC-CO2, PEF and HPU treatments, applied in individual and combined form, on the inactivation of different microorganisms in emulsions. In order to achieve this goal, on the one hand, the influence of the implementation of HPU to the SC-CO2 treatments was studied on different types of microorganisms and on media with different oil content. On the other hand, the effect of the individual and combined PEF and HPU treatments was assessed on different microorganisms. Results showed that, generally, the application of HPU intensified the inactivation capacity of SC-CO2. HPU probably enhanced the solubilization of CO2 into the medium and provoked damages in the cells. In this regard, the microscopy analysis of the inactivated cells revealed important morphological changes, including damaged cell walls and an important loss of the cytoplasmic content. Nevertheless, HPU did not improved the SC-CO2 inactivation of A. niger spores in emulsion. The increase of the pressure led to a higher inactivation, except for E. coli in water, where no effect of pressure was found. However, pressures above 350 bar did not seem to exert any additional inactivation. The increase of the temperature had a significant effect for all treatments and microorganisms. Regarding the effect of the medium, the presence of oil is known to protect microorganisms, as was observed in the SC-CO2 inactivation of bacteria in water and in emulsions with different oil content. However, the application of HPU masked the protective effect exerted by the oil in the emulsions. On the contrary, for A. niger spores no effect of the media was found on the effectiveness of the treatments In relation to the effect of the SC-CO2 + HPU treatments on the quality of the treated emulsions, only a mild effect of the process conditions was found and by the selection of suitable SC-CO2 + HPU conditions, minimal changes on the quality of the emulsions and a satisfactory inactivation for all the microorganisms, except for G. stearothermophilus spores, can be obtained. Regarding PEF and HPU treatments, the complete inactivation in the emulsions was not achieved with the individual treatments. However, when PEF (152.3-176.3 kJ/kg) was followed by HPU (3 min), inactivation levels of 8.2, 6.6 and 1.0 log-cycles were obtained for E. coli, A. niger and B. pumilus, respectively. Moreover, the inactivation achieved by the PEF-HPU treatment was higher than the sum of the individual treatments for all microorganisms. On the contrary, the inactivation achieved by HPU-PEF treatment was lower than that of the sum of the individual treatments. Thus, the most effective sequence for the combined treatment was the one in which PEF was followed by HPU. It can be concluded that, the combination of HPU with SC-CO2 or PEF generally improved the microbial inactivation. Consequently, reasonable processing times and mild process conditions could be used. / Gómez Gómez, Á. (2021). Pasteurization of Lipid Emulsions with Supercritical CO2 and High Power Ultrasound [Tesis doctoral]. Universitat Politècnica de València. https://doi.org/10.4995/Thesis/10251/175486 / TESIS / Compendio