La pancreatitis aguda es el proceso inflamatorio agudo del páncreas con afectación variable de otros tejidos regionales y sistemas orgánicos alejados. Es una enfermedad con una incidencia relativamente elevada en España y en el resto del mundo y con una mortalidad entre el 10 y el 45% de los casos graves de la enfermedad. Los mecanismos moleculares por los que una pancreatitis aguda se desarrolla, así como aquellos que conducen a una pancreatitis grave, aún no están del todo esclarecidos.Se ha descrito que el glutatión, que es el antioxidante intracelular más abundante de la célula, sufre una depleción en modelos de pancreatitis experimental. Esta depleción está relacionada con mayor gravedad de la enfermedad, así como mayor mortalidad de las células acinares por necrosis.El objetivo de la presente tesis ha sido determinar los mecanismos responsables de la depleción de glutatión en el páncreas en la pancreatitis aguda experimental.Utilizando dos modelos experimentales de pancreatitis aguda se han obtenido las siguientes conclusiones: En la pancreatitis aguda necrótica inducida con taurocolato en ratas se produce una depleción severa y precoz de glutatión reducido en el tejido pancreático. Esta depleción se mantiene durante al menos nueve horas tras la inducción de la pancreatitis.Se observa una inducción ineficaz de la -glutamil cisteína sintetasa en páncreas durante la pancreatitis aguda severa que podría contribuir a la depleción mantenida de glutatión. En la pancreatitis aguda necrótica inducida con taurocolato no aumenta la expresión de las subunidades de la -glutamil cisteína sintetasa durante las primeras horas, a pesar de la unión de la ARN polimerasa II tanto a los promotores como a los exones de los genes que codifican las subunidades de esta enzima. Sin embargo, en la pancreatitis aguda edematosa inducida en ratas con ceruleína se produce de forma precoz un gran aumento en la expresión de la subunidad catalítica de la -glutamil cisteína sintetasa. Esta marcada inducción se debe principalmente a la unión de los factores de transcripción NF-B, SP-1 y c-Myc al promotor. En la pancreatitis aguda experimental inducida con taurocolato se produce de forma temprana un aumento en la fosforilación de las quinasas ERK 1/2, JNK y p38 en el páncreas. Posteriormente, desciende progresivamente la fosforilación de las mismas hasta alcanzar niveles semejantes al control a las seis horas tras la inducción. El tratamiento con pentoxifilina previene la fosforilación de ERK 1/2 y de JNK, mientras que el oxipurinol previene la fosforilación de p38. El tratamiento combinado con pentoxifilina y oxipurinol previene simultáneamente la fosforilación de las tres principales familias de MAP quinasas.El TNF- no tiene un papel significativo en la depleción de glutatión en la pancreatitis aguda dado que la depleción de glutatión asociada a la pancreatitis aguda inducida por ceruleína se produce tanto en ratones control wild type como en ratones knockout de TNF- o de los receptores de TNF-.La inhibición de la vía de ERK previene la depleción de glutatión inducida con taurocolato in vitro tanto en células acinares como en células AR42J. No obstante, JNK y p38 no influyen significativamente en esta depleción de glutatión.El inhibidor de proteasas AEBSF previene la depleción de glutatión inducida por taurocolato en células AR42J. Sin embargo, las proteasas lisosomales, el proteasoma, el calcio y la -glutamil transpeptidasa no juegan un papel significativo en la depleción de glutatión.El AEBSF, inhibidor de la depleción de glutatión, disminuye la necrosis inducida por taurocolato en células AR42J, aumentando la muerte celular por apoptosis. Por tanto, nuestros resultados sugieren que la depleción de glutatión en páncreas en la pancreatitis aguda se debe a una proteasa o peptidasa no lisosomal dependiente de MAP quinasas, no dependiente de calcio e inhibible por AEBSF. / Acute pancreatitis is an inflammation initially localized in the pancreatic gland which may lead to local and systemic complications. The development of severe acute pancreatitis is mediated by pathophysiological mechanisms involved in the systemic inflammatory response, cytokines and oxidative stress being their components of major importance. Nevertheless, it is still unknown why an episode of acute pancreatitis remains mild or progresses to a severe form. Glutathione depletion occurs in pancreas during acute pancreatitis and it has been related to necrosis cell death and severity of the disease. The aim of this study is to clarify the mechanism involved in glutathione depletion in experimental acute pancreatitis.Taurocholate-induced acute pancreatitis was used as a severe experimental model of the disease whereas caerulein-induced acute pancreatitis was used as a mild experimental model.Results showed that ineffective induction of -glutamil cistein synthetase occurs after taurocholate-induced acute pancreatitis. However, caerulein induced pancreatitis produced high expresion of this enzyme.Taurocholate-induced acute pancreatitis showed early activation of the three major families of mitogen-activated protein kinases. In this model, pentoxifylline prevented JNK and ERK activation while oxypurinol prevented p38 activation. Combined treatment of pentoxifylline and oxypurinol almost abolished MAPK phosphorylation in the pancreas.TNF- did not play an important role in glutathione depletion because this depletion associated with caerulein-induced pancreatitis occurred similarly in wild type mice, TNF- knockout mice and TNF- receptor knockout mice.ERK inhibition prevented taurocholate-induced glutathione depletion in acinar cells and AR42J cells. However, JNK and p38 were not implicated in glutathione depletion produced by taurocholate in this cell line.AEBSF, a serin protease inhibitor, prevented glutathione depletion in AR42J cells. In addition, AEBSF diminished taurocholate-induced necrosis increasing apoptosis cell death. Conversely, lysosomal proteases, proteasome, calcium and -GT did not play a significant role in glutathione depletion in AR42J. Therefore, our results suggest that glutathione depletion occurs not by lysosomal but MAP kinase-dependent, calcium-independent protease or peptidase which is inhibited with AEBSF.

Durante el ejercicio físico se producen radicales libres en el interior de la célulamuscular. Éstos pueden actuar como señales reguladoras en diversasfunciones fisiológicas del músculo, como por ejemplo su fuerza contráctil, sucapacidad para generar ATP, etc. Se sabe que el entrenamiento aeróbicoempleando una determinada frecuencia, intensidad y duración, puedeaumentar el contenido mitocondrial entre un 50% y un 100% en un períodoaproximado de seis semanas. El mayor contenido mitocondrial hace que seproduzca un aumento en la resistencia independientemente de los pequeñoscambios que se producen a nivel de consumo máximo de oxígeno. El procesode biogénesis mitocondrial implica directamente a las proteínas: PGC-1, NRF-1, tfam, citrato sintasa y citocromo c. Además se ha demostrado que elentrenamiento aeróbico induce la expresión enzimas antioxidantes como lasuperóxido dismutasa y glutatión peroxidasa. Durante muchos años se haespeculado que la toma de antioxidantes durante el período de entrenamientopodía influir en el rendimiento del mismo. Se ha probado que la administraciónde antioxidantes mientras se realiza ejercicio físico agotador tiene efectosbeneficiosos, ya que se evita el daño muscular y el estrés oxidativo asociado aejercicio físico agotador. Cuando se realiza ejercicio físico hasta elagotamiento, la generación de especies reactivas del oxígeno excede lacapacidad antioxidante de la célula, y por tanto la prevención de estaformación, es clave para revertir el daño muscular asociado al estrés oxidativo.Nuestra hipótesis de trabajo se basó en que los radicales libres producidosdurante el ejercicio físico actúan como señales para que se produzca elproceso de biogénesis mitocondrial, y que la toma de antioxidantes oralescomo el alopurinol, y la vitamina C frena esta adaptación. Nuestros resultadosmuestran como la cascada que conduce a la biogénesis mitocondrial se vebloqueada debido a la suplementación con antioxidantes orales. Del mismomodo, el rendimiento tras el entrenamiento de las ratas y humanossuplementados con los antioxidantes, fue menor que el del grupo placebo. Lainducción de enzimas antioxidantes que se produjo con el entrenamiento, sevio bloqueada en los grupos suplementados con antioxidantes. Por tantopodemos concluir que los radicales libres producidos durante el ejercicio jueganun papel clave en las adaptaciones al entrenamiento aeróbico y que laadministración de antioxidantes durante este periodo no es recomendable,mientras que sí lo es durante el ejercicio físico agotador. / Exercise practitioners often take supplements with antioxidant vitamins, we wantedto test their effect on training efficiency in both rats and humans.The human study was double blind and randomized. We trained 14 subjects for 8weeks. Five subjects took 1g of vitamin C daily. In the animal study, 36 maleWistar rats were exercised for 3 or 6 weeks. Twelve animals were treated dailywith vitamin C (0,24 mg/cm2 of body surface). Training was estimated measuringrunning capacity to exhaustion (in rats) or increases in VO2max (in persons). Theeffect of training on muscle mitochondrial biogenesis and antioxidant enzymeexpression was also measured.We found that in persons, 8 weeks of training increased VO2max by 22% (p<0.05).However, in the group that took vitamin C the increase was non significant.Untrained rats ran for 100 minutes and after 6 weeks of training they ran for 300minutes, but the group of rats treated with vitamin C ran for 120 minutes only. Weoffer a molecular explanation for this, that vitamin C decreases exercise-inducedexpression of transcription factors involved in mitochondrial biogenesis andof markers of mitochondrial content. It also prevents the increase in the expressionof antioxidant enzymes such as manganese superoxide dismutase (Mn-SOD) orglutathione peroxidase (GPx) which occurs after training. Vitamin Csupplementation decreases training efficiency in humans and in animals because itprevents cellular adaptations to exercise.

El dolor es el síntoma más frecuente en los pacientes de Atención Primaria (AP) y constituye un problema de salud pública por su coste sanitario, económico y social. A pesar de la existencia de numerosos fármacos analgésicos, los pacientes siguen experimentando dolor que podría evitarse con un manejo más eficiente de la terapéutica. La mejor forma de conocer cómo se usan los medicamentos son los estudios de utilización. Dado que existen pocos estudios de este tipo en AP en España, hemos planteado uno que tiene como objetivos: obtener un patrón de utilización de analgésicos y AINE para el tratamiento del dolor en una población rural (municipios de Navarrés, Bicorp y Quesa (Valencia)) y datos de efectividad de los tratamientos utilizados.Participan 265 de los 800 pacientes que acuden a la consulta de AP para repetir recetas de algún analgésico o AINE (95 días elegidos al azar a lo largo de 12 meses). Registramos: motivo de uso del fármaco, pauta de administración, duración del tratamiento, origen de la prescripción (AP, Especialista, Farmacia, Urgencias), uso concomitante de otros fármacos y se interroga al paciente sobre la existencia de dolor en ese momento. Si la respuesta es afirmativa se valora la intensidad con Escala Visual Analógica (EVA, línea de 100mm sin marcas intermedias y extremos señalados con trazos verticales y etiqueta "no dolor" y "dolor insoportable"). En algunos casos se utiliza Escala Verbal Numérica (EVN 0-10). Estadística descriptiva, t de Student para comparar medias y Ji2 o cálculo de Odds Ratio para comparar proporciones (p<0,05).Resultados: 202 mujeres y 63 hombres (66,0+14,0 años (20-93)), sin diferencias entre hombres y mujeres. 151 pacientes recibían al menos otro AAP/AINE además del objeto de estudio. 131 pacientes manifestaron tener dolor actual. 98 fueron evaluados mediante EVA. La intensidad media del dolor fue de 36,3+19,6mm (2-100) que corresponde a dolor moderado-intenso (>30mm). En 24 casos, por falta de colaboración, se empleó EVN con un valor medio de 3,35+1,97 (1-9) y en 9 no fue posible evaluar el grado de dolor. 60 pacientes (48 mujeres y 12 hombres) señalaron valores que representan dolor moderado o intenso (49,08+14,24mm en mujeres y 46,25+11,77mm en hombres). 8 pacientes valorados con EVN indicaron valores superiores a 3. No hay diferencias significativas entre los fármacos, las pautas de administración y las indicaciones de los pacientes con dolor moderado o intenso y los que no tienen dolor.Conclusiones: Uno de cada cuatro pacientes que acuden a repetir recetas lo hace para solicitar un AAP/AINE. El perfil del paciente que solicita recetas de AAP/AINE es mujer, mayor de 65 años, con diagnóstico de artrosis, lumbalgia o cefalea, que trata con paracetamol, ibuprofeno o metamizol, y cuyo tratamiento se ha iniciado en AP. El uso de paracetamol e ibuprofeno se realiza de acuerdo con las indicaciones de la ficha técnica y puede considerarse correcto, mientras que el de metamizol, no se ajusta a la ficha y por tanto es incorrecto. Un 40% de los pacientes reciben gastroprotectores, cuyo uso en muchos casos es injustificado. Casi la mitad de los pacientes usuarios de AAP/AINE reciben simultáneamente al menos otro fármaco de este grupo. Casi la mitad de los pacientes usuarios de AAP/AINE manifiestan sentir dolor en el momento de la entrevista. Más de la mitad de los pacientes tratados con analgésicos o antiinflamatorios que refieren dolor, presentan un dolor moderado o intenso. La mayor parte de los pacientes usan pautas inadecuadas, lo que podría explicar la falta de efectividad del tratamiento con analgésicos o antiinflamatorios. En población rural usuaria de servicios sanitarios hay una elevada prevalencia de dolor que es tratado de forma inadecuada. / Objectives: The goal of the study is to analyze the pattern of utilization and efficacy in patients treated with analgesic or non steroidal antiinflammatory drugs (A/NSAID) attended in Primary CareThe study was carried out in a basic health area in Navarrés (Valencia, Spain) with an approximate population of 4400 inhabitants. Methods: Descriptive, cross-sectional, dug utilization study. Eligible patients were those that had sought a prescription of a drug of ATC groups M01A, N02A and N02B for their own use. Data collection was carried out between the months of November 2004 and November 2005. Patients were asked about the reason to use A/NSAID drugs, the therapeutic schedule and if they experienced any pain complaint in the moment of the visit. If the answer was affirmative pain was evaluated by means of a standard horizontal visual analogue scale (VAS) of 100 mm or a verbal numerical scale (VNS). The data are presented as descriptive statistics; mean comparisons were calculated with the Student's t test (p<0,05).Results: 265 patients were included (76,2% women; 66,1±13,9 years old (20-93)). Paracetamol, metamizol and ibuprofen were the most commonly drugs used. 15,1% of patients were taken fixed analgesic combinations. Osteoarthritis, low back pain and headache were the most frequent causes for A/NSAID utilization. 131 patients (49,4%; CI95% 43,3-55,4%) described suffering pain in the moment of the visit. In 98 the pain was evaluated by means of VAS (median value: woman 48 mm; men 45 mm) and in 24 with VNS (median value 2,5). 60 patients evaluated with VAS put the mark on the scale in values upper 30 mm which is considered moderate-severe pain. The analgesic regime vary widely and only 45,3% of patients used the drugs continuously at regular intervals.Conclusions: Approximately half of the patient users of A/NSAID suffered pain and many of them had a clinically relevant pain probably related with both incorrect analgesic election and schedule. The profile of the patient who asks for A/NSAID prescription is woman, higher than 65 years, with diagnosis of osteoarthritis, low back pain and headache, treated with paracetamol, ibuprofen or metamizol initially prescribed in Primary Care.

Un previo trabajo de nuestro grupo demostró que la expresión y la actividad de laxantina oxidasa (XO), generan súper oxido en hígado y plasma de animales diabéticos yque esto aumenta el stress oxidativo en esta enfermedad.El objetivo de esta tesis doctoral fue el estudio del "role" de los radicales libres (ERON)generados por la XO en la activación de la cascada de señalización del factor nuclear-&#954;B (NF-&#954;B) a corto plazo y de la inflamación a largo plazo asociado al daño de ladiabetes.En el citoplasma p-IKK&#914; y p-I&#954;B&#945; están incrementadas en los animales diabéticos.Estos acompañan en el estrato nuclear de hígado de los animales diabéticos de unincremento de NF-&#954;B (la proteina p65).Medimos la expresión hepática de iNOS y COX-2 que están reguladas por elincremento por el factor de trascripción -&#954;BLa diabetes induce la activación de NF-kB, la cascada de señalización y porconsecuencia la sobra expresión de enzimas inflamatorios. Estos incrementos fueroneliminados con la administración de alopurinol.Hemos visto también un aumento de infiltración de neutrofilos en hígado de animalesdiabéticos y de presencia en el órgano de muerte celular. En plasma también hemoscomprobado un aumento de ALT en los animales diabeticos. A la luz de los resultadosobtenidos, podemos extraer las conclusiones que se enumeran a continuación:- El mecanismo de formación de radicales libres en un modelo de diabetes experimentala corto plazoimplica la activación de la xantina oxidasa. La inhibición de la enzima conalopurinol tiene un efecto protector frente al incremento en la oxidación del glutatiónsanguíneo y hepático, frente a los niveles de lipoperóxidos y frente al incremento en losoxisteroles en el hígado de los animales diabéticos.- El mecanismo de formación de radicales libres en un modelo de diabetes experimentala largo plazo (28 días) no sólo implica la activación de la enzima xantina oxidasa.Otros mecanismos deben estar implicados.- La diabetes inducida con estreptozotocina provoca un aumento en el marcador dedaño hepático alanina aminotransferasa en plasma, y en las áreas de necrosisdeterminadas mediante tinción con hematoxilina-eosina. La administración dealopurinol previene ambas alteraciones.- La administración de alopurinol no modifica los criterios diagnósticos de laenfermedad: glucosuria o hemoglobina glicosilada, en ninguno de los modelosutilizados (corto y largo plazo).- La vía de señalización de NF-&#954;B se activa en la diabetes experimental. Laadministración de alopurinol previene la activación de la cascada de señalización deNF-&#954;B.- La administración de alopurinol previene la expresión génica asociada a la activacióndel factor de transcripción NF-&#954;B. Los niveles citosólicos de iNOS y COX-2 aumentande forma significativa en el hígado de los animales diabéticos. La administración dealopurinol previene dicho incremento de forma significativa.- La diabetes inducida con estreptozotocina provoca un aumento significativo de lainfiltración de neutrófilos y en los niveles de las citocinas pro-inflamatorias IL-6 y IL-1&#946; en el tejido hepático. Estas modificaciones se previenen de forma significativa conla administración de alopurinol únicamente en el modelo a corto plazo.- La administración de alopurinol puede tener un efecto positivo en la prevención de lascomplicaciones relacionadas con el estrés oxidativo en la diabetes experimentalinducida con estreptozotocina, especialmente en las fases iniciales de la enfermedad.Esta tisis abre la posibilidad de tratar la inflamación a largo plazo y las complicacionesdiabéticas con alopurinol / Previous work from our laboratory showed that theexpression and activity of xanthine oxidase, a superoxidegenerating enzyme, increases in the liver and plasma ofdiabetic animals and that this is a significant cause ofthe oxidative stress which occurs in the disease. The aimof this work was to study the role of ROS generated by XOin the activation of cell signalling pathways leading toinflammation and to long term damage associated todiabetes. Cytosolic phospho-IKK&#946; and phospho-I&#954;B&#945; contentswere increased in the diabetic animals. This wasaccompanied with increased levels of NF-&#954;B (p65 proteincontent) in liver nuclear extracts. Subsequently thehepatic expression of two inflammatory enzymes, iNOS andCOX 2, that are regulated by NF-&#954;B was increased. Thediabetes-induced activation of NF-&#954;B signaling cascade andsubsequent overexpression of inflammatory enzymes wasabolished by administration of allopurinol. Moreover wefound an increase in neutrophil infiltration in the liverof diabetic animals and even some level of hepatic necrosis(evidenced by histological examination as well as by anincrease in the plasma activity of alanine aminotransferase). This was also prevented by administration ofallopurinol. These studies open up the possibility oftreating inflammatory long term complications of diabeteswith allopurinol.

Introducción:La causa de muerte de la mayoría de los enfermos de cáncer es la metástasis de células tumorales.El melanoma es un modelo muy utilizado para el estudio de la progresión del tumor. La supervivencia y crecimiento de células de MB16 metastáticas está directamente relacionado con el aumento de su contenido en glutatión (GSH). Además dichas células sobreexpresan Bcl-2, mostrando un incremento de GSH sin mostrar un aumento en su síntesis pero sí una disminución en la salida de GSH. Otro punto importante es el GSH mitocondrial (mtGSH), ya que la mitocondria no puede sintetizar GSH. Se ha visto que la depleción de mtGSH facilita la liberación de señales moleculares implicadas en la apoptosis. En trabajos previos de nuestro grupo se demostró en células de tumor ascítico de Ehrlich que L-glutamato (L-Glu) derivado de L-Gln competía con el GSH inhibiendo su transporte al interior de la mitocondria.ObjetivosEstudiar los mecanismos de salida de GSH de la célula tumoral para potenciarlos.Disminuir los niveles de mtGSH mediante la utilización de una dieta enriquecida en glutamina (GED).Utilizar dichos mecanismos de depleción de GSH junto con la disminución de la expresión de Bcl-2 para sensibilizar las células tumorales al estrés oxidativo que genera el endotelio y a una posible quimioterapia.ResultadosVimos que la liberación de GSH por las células B16M-F10 se lleva a cabo por dos sistemas complejos: uno dependiente de Bcl-2 y sensible a L-metionina, y otro correspondiente a MRP1. Nos planteamos identificar el mecanismo molecular Bcl-2-dependiente. Se estudió un canal que también está implicado en el flujo de GSH y que en los últimos años se ha visto que se expresa en muchos tipos de células tumorales, investigando su posible relación con los mecanismos ya estudiados. Esta proteína era el regulador transmembrana de la fibrosis quística (CFTR). Se observó que CFTR estaba directamente involucrado en el transporte de GSH desde el citosol al espacio extracelular y correspondía a un canal sensible a Bcl-2.Para potenciar la salida de GSH de las células se probó una combinación de verapamil (VRP, aumenta el transporte de GSH vía MRP1) con un antisentido contra bcl-2 (bcl-2-AS). bcl-2-AS y VRP incrementaron las velocidades de flujo de GSH. El contenido de GSH intracelular disminuyó significativamente en el caso de tratamiento con bcl-2-AS y VRP. Pero, a las 12 horas los niveles de GSH fueron un 70% mayores que los controles en el tratamiento con bcl-2-AS y VRP. Estos resultados mostraban que la pérdida de GSH aceleraba su síntesis intracelular. Vimos que podríamos limitar la síntesis de GSH si conseguíamos inhibir la actividad de la enzima &#61543;-GT. Con esta idea realizamos experimentos donde inhibíamos dicha enzima mediante la utilización de acivicina (ACV), un inhibidor de la &#61543;-GT. Con bcl-2-AS, VRP y ACV, la velocidad de síntesis de GSH fue similar a la condición control y la salida de GSH fue tres veces superior al control. la terapia de depleción selectiva de GSH y Bcl-2 presentada aquí, puede potenciarse al combinarla con dosis no tóxicas de TNF-&#61537; y con GED. Investigamos los efectos de una depleción de mtGSH y un tratamiento con TNF&#61537; sobre las células B16. El estudio se realizó con células adaptadas a glutamina (B16M-Gln+).Una combinación de GED, TNF-&#61537; y bcl-2-AS podría teóricamente disminuir la supervivencia de células B16M con alto poder metastático. Se vio que, en células adaptadas a Gln y tratadas con bcl-2-AS, la viabilidad disminuyó un 88%. Con lo que el bcl-2-AS, en células metastáticas adaptadas a la Gln, facilita la citotoxicidad inducida por TNF-&#61537;. El aumento en la producción de ROS inducido por TNF-&#61537;, junto con el tratamiento con bcl-2-AS, afectó a la actividad de la superóxido dismutasa (SOD). Al combinar dos oligonucleótidos antisentido (bcl-2-AS y SOD2-AS) para prevenir la resistencia de las células al estrés oxidativo/nitrosativo inducido por el rmTNF-&#61537;, aumentó la citotoxicidad. Con esta estrategia experimental disminuimos el número de células malignas viables aproximadamente a un 1% de los valores control. Mediante quimioterápicos clásicos conseguimos eliminar in vitro este 1% de células. / Introduction:The main cause of death from cancer is due to metastases. Malignant melanoma cell subsets show different degrees of multidrug and radiation resistance. Analysis of a Bcl-2 family of genes revealed that B16 melanoma (B16M)-F10 cells (high metastatic potential) have overexpressed preferentially Bcl-2 ( 5.7-fold). B16M-F10 cells show high GSH content and a decrease in GSH efflux.Mitochondria do not synthesize GSH. Mitochondrial GSH (mtGSH) depletion facilitates permeability transition pore complex (PTPC) opening, and the release of apoptosis-inducing molecular signals. In previous studies in Ehrlich ascites tumor cells was found that L-glutamate (L-Glu) derived from L-Gln competitively inhibited GSH transport into mitochondria, depleting selectively tumor mtGSH. Results:We found that GSH release from B16M-F10 cells is channeled through the multidrug resistance protein 1 (MRP1) and the cystic fibrosis transmembrane conductance regulator (CFTR). Bcl-2 inhibits the release of GSH through CFTR facilitating accumulation of GSH within the metastatic cells.Parallel to the Bcl-2-sensitive CFTR, the transport of GSH by MRP1 can carry out by means of a verapamil (VRP)-dependent active transport. We investigate the combination of VRP with a Bcl-2 antisense phosphorothioate-derivatized oligodeoxynucleotides (bcl-2-AS). bcl-2-AS and VRP increased the GSH efflux. Intracellular GSH content decreased in bcl-2-AS- and VRP-treated B16M-F10 cells. However, at 12 h of perifusion time, GSH levels were ~70% higher. These results showed that the loss of GSH content acelerated its intracellular synthesis. tumor &#61543;-GT activity and an intertissue flow of GSH increase GSH content in B16M-F10 cells. We tested if adding an irreversible &#61543;-GT inhibitor (acivicin, ACV) we could decrease GSH synthesis. With bcl-2-AS, VRP and ACV treatment, GSH synthesis was similar to control values whereas the GSH efflux increased. We can combinate this selective GSH depletion therapy with non toxic dosis of TNF-&#61537; and L-Gln enriched diets (GED). So, we investigated a combination of GED, TNF-&#61537; and bcl-2-AS and found that viability of B16M decreased up to 88% respect control values. The increased of TNF-&#61537;-induced ROS and bcl-2-AS treatment afected superoxide dismutase (SOD) activity. Treating B16Mcells with a double anti- antisense therapy (Bcl-2- and SOD2-AS) and TNF- , metastatic cell survival decreased to 1%. Chemotherapy easily removed this minimum percentage of highly resistant metastatic survivors.

Todos los seres vivos como condición natural tienen un instinto de supervivencia que les obliga a preservar la especie. Ya desde que el hombre es consciente de su evolución ha intentado prolongar su vida e incluso inmortalizarla. Una vez desechado el sueño de la inmortalidad, el hombre se ha centrado en el objetivo de incrementar su supervivencia con mejores condiciones físicas y mentales. Los hábitos saludables, la adecuada nutrición, la higiene, el diagnóstico precoz de enfermedades y el avance en los tratamientos de enfermedades, han logrado en los últimos 100 años, duplicar la expectativa de vida de la especie. De este modo la longevidad o supervivencia de la especie humana ha conseguido una mejora espectacular en la vida media aunque no en la vida máxima, La supervivencia es un parámetro específico de cada especie, en el que claramente existe una implicación genética que explicaría las diferentes tasas de supervivencia entre las especies. La longevidad de las especies viene determinada por su longevidad media y máxima. La longevidad máxima corresponde a la edad del individuo más longevo de la especie y la media corresponde a un dato estadístico en el cual el 50 % de la población sigue aún viva. Existen factores intrínsecos y extrínsecos que pueden afectar a las diferentes longevidades entre individuos. De este modo los factores extrínsecos afectarían principalmente a la vida media, por ejemplo un hábito de vida saludable está correlacionado con una mayor probabilidad de supervivencia. Existen numerosos datos estadísticos que muestran diferencias de longevidades entre países, hecho que se puede atribuir a los diferentes hábitos de vida. Respecto a la vida máxima de las especies, son los factores intrínsecos los que mas implicados están, de modo que el material genético es el que determinaría las diferentes longevidades (figura 5.2). En los estudios de modificaciones genéticas relacionadas con la longevidad, cabe destacar la creación de una mosca transgénica que sobreexpresa dos enzimas antioxidantes, la catalasa y la superóxido dismutasa (Orr and Sohal, 1994). Estas moscas presentan un incremento tanto en la vida media como en la máxima respecto de sus controles, este hecho demuestra en parte la teoría del estrés oxidativo y la longevidad, ya que individuos que presentan una mayor defensa frente al estrés oxidativo son significativamente más longevos. Además a lo largo de estos años se han identificado en Drosophila otros genes que al ser sobreexpresados o silenciados modifican la longevidad de la especie.Esta tesis trata de mostrar como podemos modificar genes que están directamente relacionados con la longevidad, simplemente cambiando nuestros hábitos alimenticios. De este modo, podemos cuidar nuestro envejecimiento comiendo sano hoy para encontrarnos mejor mañana. / Females live longer than males in many mammalian species, including humans. This natural phenomenon can be explained on the basis of the mitochondrial theory of aging. Mitochondria are a major source of free radicals in cells. Mitochondria from female rats generate half the amount of hydrogen peroxide than those of males and have higher levels of mitochondrial reduced glutathione. The latter is due to females behaving as double transgenic in over-expressing antioxidant enzymes. Estrogens bind to the estrogen receptors and subsequently activate the mitogen activated protein (MAP) kinase and nuclear factor kappa B (NFkappaB) signalling pathways, resulting in an up-regulation of antioxidant enzymes. Moreover, the 16S rRNA expression, which decreases significantly with aging, is four times higher in mitochondria from females than in those from males of the same chronological age. On the contrary, the oxidative damage of mitochondrial DNA is fourfold higher in males than in females. Ovariectomy abolishes the gender differences between males and females and estrogen replacement rescues the effect of ovariectomy. The challenge for the future is to find molecules that have the beneficial effects of estradiol, but without its feminizing effects. Phytoestrogens or phytoestrogen-related molecules may be good candidates to meet thischallenge.

Introducci¨®n: Dada la escasa informaci¨®n acerca de los efectos del ejercicio f¨ªsico cr¨®nico sobre lospar¨¢metros que determinan la longitud de onda del proceso de activaci¨®n mioc¨¢rdico ventricular y de lafrecuencia dominante de la fibrilaci¨®n ventricular (FV) inducida, y la importancia que estos par¨¢metros tienena nivel de protecci¨®n mioc¨¢rdica sobre la aparici¨®n de arritmias por reentrada, y sobre la estabilizaci¨®n de lasmismas, nos ha parecido de inter¨¦s investigar en conejos sometidos a un protocolo de ejercicio f¨ªsico cr¨®nico,los efectos del mismo sobre los siguientes par¨¢metros: 1) la conducci¨®n ventricular intr¨ªnseca; 2) larefractariedad intr¨ªnseca auricular, ventricular, del sistema de conducci¨®n auriculoventricular yventriculoauricular; 3) la longitud de onda del proceso de activaci¨®n mioc¨¢rdica; 4) la frecuencia de la FVinducida y sin interrumpir la perfusi¨®n. Por otra parte, dados los efectos del ejercicio f¨ªsico cr¨®nico sobre elautomatismo intr¨ªnseco y sobre la conducci¨®n AV intr¨ªnseca, hipotetizamos que el ejercicio f¨ªsico cr¨®nicoaumenta la refractariedad intr¨ªnseca auricular, ventricular, del sistema de conducci¨®n auriculoventricular yventriculoauricular y la longitud de onda del proceso de activaci¨®n mioc¨¢rdica, y disminuye la frecuencia dela FV.M¨¦todos: 12 conejos fueron sometidos a un programa de entrenamiento (GE) durante 6 semanas y 11 conejospermanecieron estabulados el mismo tiempo (GC). Finalizado el periodo de entrenamiento y/o estabulaci¨®n,se aislaron los corazones y se conectaron a un sistema de Langendorff. Se situaron electrodos de estimulaci¨®ny registro en aur¨ªcula izquierda y en ventr¨ªculo izquierdo. Se determin¨®: el periodo refractario efectivoauricular (PREA) y el periodo refractario funcional auricular (PRFA); el periodo refractario efectivo yfuncional del sistema de conducci¨®n auriculoventricular (PRESCAV y PRFSCAV, respectivamente); elperiodo refractario efectivo ventricular (PREV) y funcional ventricular (PRFV) y el periodo refractarioefectivo y funcional del sistema de conducci¨®n ventriculoauricular (PRESCVA y PRFSCVA,respectivamente); la velocidad de conducci¨®n (VC); la longitud de onda (LO) y la frecuencia dominante (FD)media, m¨¢xima y m¨ªnima de la FV.Resultados: Los intervalos V-V in vivo e in vitro fueron mayores en el GE que en el GC (p¡Ü0.05). En cuanto ala refractariedad auricular, no hubo diferencias estad¨ªsticamente significativas entre los animales de ambosgrupos. Tampoco encontramos diferencias entre los periodos refractarios funcionales del SCAV. LosPRESCAV no se pudieron determinar, debido al escaso n¨²mero de valores hallados ya que durante larealizaci¨®n del test del extraest¨ªmulo auricular, se alcanz¨® antes el PREA. Tampoco se pudo realizar laestad¨ªstica respecto al PRESCVA y PRFSCVA. En referencia a los valores del PREV, no hubo diferenciasestad¨ªsticamente significativas entre los grupos. En cuanto a los PRFV, fueron mayores en el GE que en elGC (p¡Ü0.05), al estimular con los trenes: un 10% menor que la longitud del ciclo sinusal b¨¢sico, 250 ms, 200ms y 150 ms. En cuanto a la VC, no hubo diferencias. Respecto a los valores de la LO, no encontramosdiferencias entre GE y GC, aunque la p fue igual a 0.06. Respecto a la FD durante la FV, fue menor la FDm¨¢xima en el GE. No encontramos diferencias entre grupos en la FD media y m¨ªnima.Conclusiones: El ejercicio f¨ªsico cr¨®nico: 1. Alarga la refractariedad ventricular. 2. La modificaci¨®n de larefractariedad ventricular es de car¨¢cter intr¨ªnseco. 3. Se ha observado una tendencia al aumento de lalongitud de onda del proceso de activaci¨®n mioc¨¢rdica ventricular. 4. Planteamos la posibilidad que elejercicio f¨ªsico regular exhiba efectos protectores contra la instauraci¨®n de arritmias re-entrantes. 5.Contribuimos a asentar el principio de que el entrenamiento f¨ªsico produce una depresi¨®n del automatismosinusal intr¨ªnseco. / Introduction: We investigated in trained rabbits, the effects of the physical exercise on: 1) theintrinsic ventricular conduction; 2) the intrinsic auricular refractoriness, intrinsic ventricularrefractoriness, the auricle-ventricular and the ventricle- auricular systems of conduction; 3) thewavelength of the myocardial activation process; 4) the frequency of the VF.Methods: 12 rabbits (TG) were submitted to a training program and 11 rabbits were not trained(CG). On having finished the period of training and/or stabling, their hearts were isolated andconnected to a Langendorff system. The following parameters were recorded: the auriculareffective refractory period (AERP) and the auricular refractory functional period (AFRP); theauricle-ventricular system of conduction¡¯s effective and functional refractory period(AVSCERP) and AVSCFRP, respectively); the ventricular effective refractory period (VERP)and functional ventricular (VFRP) and the ventricle-auricular system of conduction¡¯s effectiveand functional refractory period (VASCERP and VASCFRP, respectively); the speed ofconduction (SC); the wavelength (WL) and the dominant frequency (DF) average, maximumand minimal of the VF.Results: V-V intervals in live and in vitro were major in the TG than in the CG (p¡Ü0.05).In relation to the auricular refractoriness, there were no differences. We neither founddifferences between the refractory functional periods of the AVS. In reference to the AERP,there were no differences. As for the VFRP, they were major in the TG than in the CG (p¡Ü0.05),on having stimulated the trains: 10 % minor that the length of the sinusal basic cycle, 250 ms,200 ms and 150 ms. As for the SC and WL, there were no differences. With regard to the FDduring the FV, the maximum DF was minor in the TG.Conclusions: The physical chronic exercise: 1.It prolongs the ventricular refractoriness. 2. Themodification of the ventricular refractoriness is of intrinsic character. 3. We can raise thepossibility that the physical regular exercise exhibits protective effects against the establishmentof re-entry arrhythmias. 5. We contribute to consolidate the principle of which the physicaltraining produces a depression of the intrinsic sinusal automatism.

La inhibición del crecimiento tumoral sobre el melanoma B16-F10, trans-resveratrol (t-RESV), un estilbeno natural, está limitada por su baja biodisponibilidad (Asensi y cols.,2002). La biodispoponibilidad de cualquier sustancia depende entre otros factores, de suestructura química. El t-RESV en su estructura química posee tres grupos hidroxilo,susceptibles de sufrir reacciones de conjugación y por tanto, de sufrir una rápida eliminación.Modificamos su estructura química para aumentar su concentración plasmática a lo largo deltiempo. Ello se ha de realizar teniendo en cuenta que el grupo hidroxilo en posición 4' y suconfiguración trans son condiciones indispensables para ejercer sus actividades enconcreto, la actividad anticancerosa. Por tanto, nos quedan dos grupos hidroxilo en posición3 y 5 que cambiamos por grupos metoxilo pudiendo disminuir así el grado de metabolizaciónhepática. Con estas modificaciones llegamos hasta una estructura polifenólica que coincidecon un estilbeno natural, el trans-pterostilbeno (t-PTER). Este compuesto presentabaactividad anticancerosa y antidiabética entre otras.La quercetina (QUER) es un flavonoide que se introdujo en nuestros ensayos porque podíaaumentar la biodisponibilidad de t-PTER ya que se había demostrado que competía con el t-RESV por el metabolismo hepático y porque podía ejercer una sinergia antitumoral, ya quepresentaba propiedades anticancerosas.Sintetizamos en el laboratorio, el t-PTER y realizamos los ensayos oportunos junto con laQUER.Primero se realizaron estudios de biodisponibilidad. Las concentraciones plasmáticas deambos polifenoles tras la administración de 20mg de t-PTER y QUER /kg de peso de ratónvía oral fueron bajas, lo que no ocurrió tras la administración i.v., con las que obtuvimos lasconcentraciones plasmáticas medias de los obtenidas tras su administración. Estas fueron40 y 20 uM para el t-PTER y la QUER, respectivamente. Concentraciones que se utilizaronen los ensayos in vitro aplicados durante una hora, cada día. Además la semivida biológicadel t-PTER fue 78 min muy superior de la del t-RESV (14 min).En segundo lugar, se estudió la actividad antitumoral de estos polifenoles a concentracionesbiodisponibles. Tras los ensayos de actividad antitumoral in vitro e in vivo, se demostró queel t-PTER actuaba impidiendo la adhesión de las células tumorales (B16M-F10) al endoteliosinusoidal hepático (HSE) por inhibición de la expresión de VCAM-1 en el endotelio. El t-PTER y la QUER principalmente, actuaban aumentando la toxicidad de las células B16MF10adheridas por aumento de la expresión de genes proapoptóticos (BAX, BAD, BAK yBID) y disminución de la expresión de genes antiapoptóticos (bcl-2, bcl-xL, bcl-w). Ambosdisminuyeron la metástasis tumoral in vivo en un 73% y duplicaron los días de supervivenciade los animales enfermos. Tratando a los ratones con 20mg de t-PTER y QUER/ kg de peso,por vía i.v cada día.En tercer lugar, estudiamos el mecanismo por el cual, ambos polifenoles aumentaban lacitotoxicidad de las células tumorales. Para ello, nos centramos en la producción de óxidonítrico (NO) por parte de las B16M-F10 y el HSE (durante su interacción con las célulastumorales). Comprobamos que t-PTER y QUER, actuaban sobre las células tumorales, ensituación previa a su interacción con el endotelio, inhibiendo la expresión de iNOS,reduciendo el nivel de NO por la células tumorales, ello provocó la disminución de laexpresión del gen bcl-2 vía inhibición de la fosforilación de el factor de transcripción CREBconduciendo de esta manera a la apoptosis celular. Por otro lado, t-PTER y QUER, actúandurante la interacción de las células B16M-F10 al HSE, aumentando la expresión de eNOS,de esta forma el endotelio produce más NO que provoca un daño celular directo y laapoptosis de la célula tumoral vía activación de la esfingomielinasa neutra dependiente deMg y aumento de ceramida. / Intravenous administration to mice of trans-pterostilbene (t-PTER; 3,5-dimethoxy-4-hydroxystilbene) and quercetin (QUER; 3,3,4,5,6-pentahydroxyflavone), two structurally related and naturally occurring smallpolyphenols decreases the adhesion of highly malignant B16 melanoma F10(B16M-F10) cells to vascular endothelium and inhibits metastatic growthinhibiting bcl-2 expression in metastatic cells, which sensitizes them to vascularendothelium-induced cytotoxicity. The molecular mechanism linking polyphenolsignaling and bcl-2 expression is known. NO is a potential bioregulator ofapoptosis with controversial effects on Bcl-2 regulation. Polyphenols may affectNO generation. Short-term exposure (60 min/day) to t-PTER (40 µM) andQUER (20 µM) (approximate mean values of the plasma concentrationsmeasured within the first hour after intravenous administration of 20mg of eachpolyphenol/kg) down-regulated inducible NO synthetase in B16M-F10 cells andup-regulated endothelial NO synthetase in the vascular endothelium andthereby facilitated endothelium-induced tumor cytotoxicity. Very low and highNO levels down-regulated bcl-2 expression in B16M-F10 cells. t-PTER andQUER induced a NO shortage-dependent decrease in cAMP-responseelement-binding protein phosphorylation, a positive regulator of bcl-2expression, in B16M-F10 cells. On the other hand, during cancer andendothelial cell interaction, t-PTER- and QUER-induced NO release from thevascular endothelium up-regulated neutral sphingomyelinase activity andceramide generation in B16MF10 cells. Direct NO-induced cytotoxicity andceramide-induced mitochondrial permeability transition and apoptosis activationcan explain the increased endothelium-induced death of Bcl-2-depleted B16MF10cells.

El ejercicio físico intenso y prolongado es uno de los principales factores de estrés físico alos que puede verse sometido el organismo, siendo por ello causa de importantes alteraciones de lahomeostasis. En tales circunstancias, los diferentes aparatos y sistemas del organismo sufren laspertinentes modificaciones funcionales con el fin de mantener la constancia del medio interno. Elriñón, ante los cambios producidos responde con la formación de un orina por lo general escasa,concentrada, ácida, y con una composición de solutos y un sedimento urinarios bastante diferentes alos encontrados en condiciones de reposo. La cuestión es si una orina con estas característicasfavorece el proceso de la litogénesis y a la vez, si este proceso está o no aumentado durante las horasy días siguientes a la finalización del ejercicio físico.El presente estudio ha sido realizado sobre una muestra total de 35 sujetos varones, todosellos deportistas entrenados, sin antecedentes clínicos personales o familiares de nefrolitiasis y queno presentan antecedentes clínicos personales de insuficiencia renal crónica y/o enfermedadesmetabólicas relacionadas directa o indirectamente con la nefrolitiasis. A cada uno de ellos se les harealizado una prueba de esfuerzo con análisis de gases expirados para obtener sus umbralesanaeróbicos (VT2). A su vez, a partir de los datos personales y antropométricos, se les ha instauradouna dieta personalizada, normocalórica y con igual distribución de nutrientes para todos ellos. Cadasujeto ha seguido la dieta como mínimo desde 4 días antes hasta 4 días después de la realización de laprueba de campo, siendo libre en todo momento la ingesta de agua.Dichos sujetos han realizado un ejercicio físico de larga duración (90 minutos), a unaintensidad correspondiente con el VT2 de cada uno de ellos y durante el cual sólo han ingerido aguacorriente "ad libitum". Antes y después del ejercicio han sido pesados y se han obtenido muestras desangre venosa para la determinación de: calcio, fosfato, ácido úrico, citrato, magnesio, zinc, urea,creatinina, sodio, potasio y cloro y de orina para la determinación de: pH, densidad, oxalato, calcio,fosfato, ácido úrico, citrato, magnesio, zinc, creatinina, sodio, potasio y cloro. Asimismo, durante loscuatro días siguientes a su finalización se les ha tomado muestras de orina y datos de su peso corporala las 8 horas y a las 20 horas y también durante los primeros dos días post-esfuerzo se les ha tomadomuestra de sangre venosa a las mismas horas para analizar los parámetros expuestos anteriormente.Para la valoración del riesgo litógeno hemos considerado si el valor de las concentracionesde los parámetros medidos y de los INRILI estaban dentro o fuera del rango de normalidad, si secumplían los criterios de Conte y cols (1999), y/o el valor del criterio escalar.Los resultados obtenidos en este trabajo sugieren que durante el ejercicio físico de altaintensidad y larga duración, y con un grado de deshidratación no superior al 1,6% del peso corporal,no hay un aumento del riesgo litógeno ni de la cristaluria, tanto de forma inmediata como en loscuatro días siguientes a su realización. También parece haber un cierto margen de deshidratación, nosuperior a ese 1,6%, durante el cual las concentraciones séricas de los parámetros analizados ennuestro estudio se mantienen dentro del rango de normalidad. A la vez, los cambios inducidos sobrelas concentraciones urinarias de cualquiera de los parámetros de estudio, ya han revertido a las 24horas después de la finalización del ejercicio. / Long term intense physical exercise is one of the principle factors of physical stress to whichour body can be subjected, causing important alterations of homeostasis. Under suchcircumstances the kidneys respond with changes in the formation of urine which havetraditionally been connected with the appearance of kidney calculus. The question is whetherurine with these characteristics favours the process of lithogenesis and also if this processincreases during the hours or days that follow the cessation of the physical exercise.The present study was carried out on a total of 35 healthy male volunteers. Each one of themwas subjected to a stress test including an analysis of exhaled gases in order to obtain theiranaerobic thresholds (VT2). They were also given a personalised normocaloric diet with anequal distribution of nutrients for each one of them.These individuals performed physical exercise over an extended period (90 minutes), at arate of intensity in accordance with their personal VT2, during which they drank plain water "adlibitum". They were weighed both before and after the exercise and venous blood samples weretaken in order to measure the following: calcium, phosphates, uric acid, citrate, magnesium,zinc, urea, creatinine, sodium, potassium and chlorine. In addition to this, during the two (1)and four (2) days following the exercise, samples of (1) venous blood and (2) urine were takenfrom each person, together with details of their body weight, at 08.00 hours and at 20:00 hours.The results which were obtained from this experiment suggest that during intense exerciseover an extended period and with a degree of dehydration not above 1.6% of the body weight,an increased risk of lithogenesis or of crystalluria does not exist immediately after the exercisenor in the four subsequent days.

INTRODUCCIÓÉs conegut que la fibril·lació ventricular és la responsable de més del 70% de lamort sobtada d'origen cardíac i que aquesta és una de les principals causes de mort en elmón occidental industrialitzat. Per tant, es interessant l'estudi dels factors que podenmodificar els mecanismes d'instauració, perpetuació i cessament d'aquesta arítmia.En aquest sentit, diferents autors han estudiat l'efecte beneficiós de l'exercici físic.Així, els resultats dels estudis realitzats en humans per Billman en 2002 indiquenl'existència de l'efecte protector de l'entrenament aeròbic front a aquesta arítmia. A nivellintrínsec, Such i col·laboradors realitzaren estudis experimentals sobre les modificacionselectrofisiològiques que es produeixen amb l'entrenament i que podrien contribuir enaquest efecte beneficiós.Per tant, els objectius foren investigar en cors aïllats de conill l'efecte del'entrenament sobre:A) L'automatisme sinusal, la conducció auriculoventricular i la velocitat de conduccióventricular.B) La refractarietat auricular, ventricular i del sistema de conducció auriculoventricular iventriculoauricular.C) La freqüència dominant de la fibril·lació ventricular induïda.D) La longitud d'ona del procés d'activació.Com a objectiu complementari es proposà la tipificació de l'esmentat entrenament.MATERIAL I MÈTODESL'estudi ha estat realitzat en cors aïllats de conills mascles, de raça Nova Zelanda,que es dividiren en 2 grups, control (n=12) i entrenat (n=15). Els conills entrenats van sersotmesos a un protocol d'entrenament en cinta rodant durant 6 setmanes, més unaaddicional de familiarització, el mateix temps que van romandre estabulats els conills delgrup control. El protocol d'entrenament va consistir en 30 sessions, és a dir, 5 dies a lasetmana durant les 6 setmanes. Cada sessió es va compondre de 6 sèries de carreracontínua sobre tapís rodant, a 0,33 m/s, durant 4 minuts. L'interval de descans entre cadauna de les 6 sèries va ser d'1 minut.El sistema de perfusió de Langendorff que permet l'arribada al cor de l'oxigen i elsnutrients necessaris a través de l'aorta ascendent. Es tracta d'una perfusió retrògrada capal sistema de vasos coronaris. El protocol experimental fou el següent:A) Mesura de flux coronari.B) Registre electrogràfic basal.C)Test de l'extraestímul auricular amb diferents cicles d'estimulació: al 10% de lafreqüència basal, a 250 ms, a 200 ms i a 150 ms.D) Registre electrogràfic.E) Test de l'extraestímul ventricular amb cicles d'estimulació anteriorment citats.F) Inducció de la fibril·lació ventricular amb freqüències creixents.G) Mesura del pes dels cors.CONCLUSIONSLes conclusions que es poden extraure són que l'entrenament en aquest modelexperimental:1) Disminueix el cronotropisme sinusal i la conducció auriculoventricular i no modifica lavelocitat de conducció ventricular.2) Augmenta la refractarietat ventricular i la del sistema de conducció auriculoventricular,mentre que no modifica la refractarietat auricular, ni la refractarietat del sistema deconducció ventriculoauricular.3) Disminueix la freqüència dominant mitjana de la fibril·lació ventricular induïda encaraque no modifica la freqüència dominant màxima ni la freqüència dominant mínima de lafibril·lació ventricular induïda.4) Augmenta la longitud d'ona del procés d'activació ventricular.5) Les dades de laboratori obtingudes són indicatives que el protocol d'entrenamentutilitzat ha estat efectiu en el desenvolupament de modificacions tant electrofisiològiquescom bioquímiques i a més, aquest entrenament s'ha desenvolupat en condicionsaeròbiques.6) Com a conclusió final, es planteja la possibilitat que l'entrenament aeròbic produïscaefectes beneficiosos, a través de la modificació d'algunes propietats electrofisiològiquesde caràcter intrínsec, per tant, no dependents de factors nerviosos extrínsecs i/ohumorals, que probablement dificulten la instauració d'arítmies per reentrada. El presenttreball apunta cap a una possible ferramenta terapèutica no farmacològica i de prevencióde patologia miocàrdica, i planteja la necessitat de prosseguir amb aquestesinvestigacions. / Aim: To study the intrinsic electrophysiological myocardium modifications produced bychronic exercise in isolated rabbit heart.Methods: Two groups of New Zealand rabbits were studied. One group of rabbits(trained group, n=15) was trained on a motor-driven treadmill following a protocol(running velocity 0.33 m·s-1) and another group of rabbits (control group, n=12) washoused in the animal quarters for the same number of days as the training protocolduration. The electrophysiological parameters investigated in an isolated perfusedrabbit heart were: a) basic sinus cycle length, atrioventricular conduction andventricular conduction velocity; b) atrial, ventricular, atrioventricular and ventriculoatrialeffective and functional refractory periods were obtained using the extrastimulustechnique at four different pacing cycle lengths; c) mean, maximum, and minimumdominant frequencies of the induced ventricular fibrillation were also investigated usinga spectral method; d) wave length. In vivo heart rate, myocardial heat shock proteins(HSP60), inducible nitric oxide synthetase (iNOS) and lactate concentration were alsodetermined as electrophysiological and biochemical markers of training.Results: The following parameters were larger (p< 0.05) in trained group vs controlgroup: atrioventricular conduction, wave length, atrioventricular functional refractoryperiods, ventricle effective and functional refractory periods, basic sinus cycle length,HSP60 and iNOS expression values. The mean dominant frequency of the ventricularfibrillation was lesser in trained group than control group and the rest of parameters didnot change.Conclusion: Training seems to increase the electrical stability of ventricularmyocardium. As the electrophysiological modifications were exhibited in hearts notsubmitted to extrinsic nervous system or humoral influences, they are, at least in part,intrinsic modifications. These electrophysiological data also suggest that aerobictraining could protect against reentrant ventricular arrhythmias.