En la presente Tesis Doctoral se han estudiado los mecanismos implicados en la degradación de glutatión reducido (GSH) en los modelos in vivo de pancreatitis aguda (PA) necrótica inducida por infusión retrógrada de taurocolato sódico al 3,5% y de PA edematosa inducida por una dosis supramáxima de ceruleína. Se ha confirmado que en la PA necrótica se produce la depleción mantenida de GSH. El mecanismo de síntesis de la glutamato citeína ligasa (GCL), mediado por ERK 1/2 y el factor de transcripción C-MYC, aparece activado tanto en la PA edematosa como en la necrótica, sin embargo en la necrótica se produce un fallo del mecanismo originado por la activación de la ribonucleasa (RNasa) pancreática en el citosol de las células acinares responsable de la degradación del ARNm de la GCL. Además se ha profundizado en el mecanismo implicado en la degradación de GSH en las etapas tempranas de la PA, caracterizando la tasa de degradación de GSH y de formación de glutamato y cisteína en extractos citosólicos de páncreas de rata con PA necrótica. La degradación de GSH y la formación de cisteína y glutamato son prevenidas en presencia del inhibidor de serín peptidasas amino etil bencenil sulfonil fluoruro (AEBSF). También se ha realizado cromatografía de afinidad con columnas de retención de GSH (1) y de AEBSF-biotinilado (2) en extractos citosólicos de áncreas de ratas con PA necrótica identificando proteínas GSH transferasas (1) y Glutarredoxina (1) o Htra 3ª (2), RNasa pancreática (2), Tripsina (2), ARID 4D (Rbpl 1) (2) y Arginina: glicina amidino transferasa (2) como posibles enzimas implicadas en la degradación de GSH. Por otro lado, se han descartado la Tripsina, gamma-Glutamil transpeptidasa y Carboxipeptidasa B pancreática como posibles responsables de la hidrólisis del GSH. En cuanto a la cascada inflamatoria, se ha determinado que durante la PA se produce la disminución de las serín treonín fosfatasas PP2A, PP2B (calcineurina) y PP2C, 1 hora después de la inducción de la PA necrótica y de las tirosín fosfatasas citosólicas que podría favorecer el aumento de la fosforilación de las MAPK en la PA. En estudios in vitro, se ha estudiado la actividad de la PP2A en células AR42J incubadas con taurocolato al 0,3%. El taurocolato produce una disminución transitoria de la actividad PP2A indicando la implicación de la misma en fenómenos de señalización celular. Además la PTX es capaz de prevenir esa perdida de la actividad PP2A mediado por el AMPc. Por inmunoprecipitación de la cromatina (ChIP) se ha comprobado que durante la PA se produce el reclutamiento de acetiltransferasas a los promotores de genes inflamatorios como egr-1, Inos-2, Icam-1 y TNF-alpha y que la PTX es capaz de bloquear la unión de las acetiltransferasas CBP y PCAF a dichos promotores. Además en algunos casosla PTX también promueve la unión del complejo deacetilasa mSIN3A/HDCA 1 a los promotores. / It has been studied the mechanisms involved in the degradation of GSH in vivo, using the model of necrotic acute pancretitis (AP) induced by infusion of sodium taurocholate (3,5%) and the model of aedematous AP induced by a supramaximal dose of caerulein, confirming that sustained depletion of GSH favours the development of necrotic AP. Despite the induction of glutamate citeine ligase (GCL) synthesis, mediated by ERK 1/2/C-MYC pathway in both models, in the necrotic AP the mechanism fails due to the activation of the ribonuclease (RNase) in the cytosol of pancreatic cells, which could be responsible for the mRNA degradation of the GCL. Furthermore, it has been characterized the rates of GSH depletion and glutamate and cysteine formation in cytosolic extracts of rat pancreas and the inhibition of these rates by the serine peptidases inhibitor bencenil amino ethyl sulfonyl fluoride (AEBSF) in the model of necrotic AP. It has also been carried out affinity chromatography for purification of GSH (1) and AEBSF-biotinylated (2) binding proteins from pancreatic cytosol of rats with necrotic AP, identifying proteins such as GSH transferases Glutaredoxin (1) or Htra 3A, pancreatic RNase, trypsin, ARID 4D and arginine: glycine Amidine transferase (2). Trypsin, Gamma-Glutamyl transpeptidase and pancreatic Carboxipeptide B, has been discarded as potential direct effector of the GSH depletion. As for the inflammatory cascade, it has been found the loss of activity of the serine threonine phosphatases PP2A, calcineurin and PP2C and of cytosolic tyrosine phosphatases during AP, wihch could favour the increased phosphorylation of the MAPK in the AP. In vitro, it has been studied the activity of PP2A in AR42J cells incubated with taurocholate 0.3%, which produced a transient decrease in the activity indicating the involvement of PP2A in cellular signaling events. Furthermore, the PTX is able to prevent the loss of PP2A activity mediated by cAMP. By chromatin immunoprecipitation (ChIP) it has been also demonstrated the recruitment of acetyltransferase to the promoters of inflammatory genes such as egr-1, inos-2 and tnf-alpha during AP and its prevention by PTX treatment, which in some cases also promoted the mSIN3A/HDCA-1 deacetylase complex binding to their promoters.

INTRODUCCIÓNLa cirugía de columna es un procedimiento reconocido en la literatura como de alta variabilidad geográfica. La variabilidad viene determinada, entre otros factores, por la incertidumbre sobre el manejo terapéutico de la patología degenerativa y por tanto las decisiones médicas pueden ser más sensibles a la oferta.OBJETIVOSDescribir las variaciones en las tasas de cirugía vertebral de 156 áreas de salud. Comparar las tasas obtenidas en las personas mayores con las de la población asegurada por Medicare en Estados Unidos. Valorar si hay diferencias en las tasas quirúrgicas por el género. Analizar las asociaciones entre las tasas y los recursos sanitarios disponibles y diferentes variables socioeconómicas.HIPÓTESISNo se formulan hipótesis sobre el componente descriptivo. Se ha adoptado la hipótesis nula de no diferencias entre las tasas de intervenciones por áreas de salud, según el género y de no asociación entre las tasas y los recursos hospitalarios ni con variables sociodemográficas.MATERIAL Y MÉTODOSEstudio transversal, de las tasas estandarizadas por edad y sexo de las intervenciones de raquis realizadas en 2004 en las 15 Comunidades Autónomas (CCAA) participantes en el Proyecto Atlas de Variaciones en la Práctica Médica en el Sistema Nacional de Salud (excepto Castilla-León y Madrid). La población incluye 34.796.246 de habitantes. Casos incluidos: códigos de procedimiento 81.0x (artrodesis vertebral), 80.5x (escisión del disco intervertebral) y 03.0x (descompresión de canal vertebral) de la CIE-9MC. Casos excluidos: diagnósticos asociados a patología tumoral, obstétrica, inflamatoria, infecciosa y traumática. Para el análisis se utilizaron los estadísticos propios del Análisis de Áreas Pequeñas calculando las tasas de cirugía y su variabilidad y otros no específicos de variabilidad. RESULTADOSEn el año 2004 y en las 156 áreas de las 15 Comunidades autónomas se realizaron unas 13759 intervenciones. Casi la mitad conllevaron una cirugía de fijación, el 44% fueron laminectomías- discectomías y menos del 10% se identificaron con los otros casos cirugía descompresiva.Los coeficientes de variación sitúan a la artrodesis y a la cirugía discal en el rango de variabilidad moderada y de variabilidad baja al considerar el total de la cirugía. En la población de 65 y más años, las laminectomías descienden a expensas de la cirugía de fijación y de la otra cirugía descompresiva, con una variabilidad en las tasas más elevada que para la población general. Al comparar las tasas de los mayores del SNS con las de Medicare, a pesar de su gran superioridad en términos absolutos, su variabilidad es menor.La distribución de las tasas de cirugía de columna por género no presenta desigualdades constatables.La asociación de las tasas de cirugía vertebral con las variables de la oferta de recursos, con los indicadores poblacionales y con las variables socioeconómicas fue en general discreta, con baja capacidad explicativa excepto para unas pocas variables. Hay que asumir, entre otras limitaciones (codificación, información de la población) una posible variación aleatoria por la inestabilidad de los estadísticos.CONCLUSIONESLos resultados de este estudio han mostrado para las tasas de cirugía vertebral una variabilidad de moderada a baja, ser menores en los ancianos y con mayor variabilidad que en la población general, ser similares en hombres y mujeres, y no se han detectado asociaciones importantes de las tasas de cirugía entre la oferta ( excepto la tasa de médicos residentes), ni entre los factores demográficos ni los socioeconómicos ( a excepción del nivel de renta y del índice de actividades económicas en los mayores). En general, las tasas son menores que las de otros países como constata la literatura. / INTRODUCTION. Wide geographic variations in the spinal surgery have been recognized. Variability reflects, among other factors, uncertainty about the therapeutic management of spinal disorders.OBJECTIVES. Describe geographic variations in rates of spinal surgery of 156 health areas. Compare the elderly rates with those of Medicare enrollees in the United States. Assess if there are differences in the surgical rates by gender. Analyze associations between the rates and the local resources and different socio-economic variables.HYPOTHESIS. It has taken the null hypothesis no differences between the surgical rates by variables.MATERIAL AND METHODS. Description of standardized rates of spinal procedures performed in 2004 in the 15 Autonomous Communities. The population includes 34.796.246 inhabitants with codes of procedure: 81.0x (arthrodesis), 80.5x (excision of the intervertebral disc) and 03.0x (decompression of spinal canal) of the ICD-9CM. Its excluded diagnoses associated with tumoral pathology, obstetric, inflammatory, infectious and traumatic. For the analysis rates were used the method of Small Area Analysis and other non-specific statisticians.RESULTS. In 2004 and in the 156 areas were performed 13.759 interventions, 47 percent involved fusion, 43,63 percent were laminectomy- discectomy and 9,29 percent identified with the other decompressive surgery. Arthrodesis and surgery disk fall in the range of moderate and low variability regarding overall surgery. In the elderly population, the laminectomy descend at the expense of the fusion surgery and the other decompression surgery, with higher variability than for the general population. The Medicare rates, despite its vast superiority in terms absolute, shows lower geographic variation.The distribution of the rates of spinal surgery by gender does not present inequalities it. The association of the rates of spinal surgery with the supply variables, with the socio-economic variables was generally quiet, with low capacity explanatory except for a few variables. CONCLUSIONS. The geographic variation for the rates of spinal surgery has shown moderate to low , be higher the elderly, be similar by gender, and have not been detected important partnerships in the rates of surgery between the offer, nor among the demographic and socioeconomic factors.

La acumulación de sales biliares hidrofóbicas en el hígado promueve el desarrollo de la cirrosisbiliar. Ésta patología está asociada con alteraciones de la función mitocondrial, promoción dela fibrosis y remodelamiento del parénquima hepático. Objetivos: Estudiar la biogénesismitocondrial y la biogénesis ribosomal en el hígado cirrótico. Métodos: Se utilizó el modeloexperimental de cirrosis inducida por ligadura del ducto biliar común (BDL) en ratas.Resultados y discusión: a) Estudio de la biogénesis mitocondrial. El hígado cirrótico muestrauna alteración de la regulación a nivel nuclear, con incremento de la fosforilación de NRF-1 y ladisminución de GABP-a. El coactivador PGC-1a, regulador positivo de la función de NRF-1 estádisminuido en el hígado cirrótico. TFAM, importante proteína implicada en el mantenimiento ytrascripción del ADN mitocondrial está disminuida en el hígado cirrótico. Se propone unaalteración del mecanismo de import de proteínas hacia la mitocondria, ya que disminuyen losniveles de TOMM70, que tiene función de receptor de membrana mitocondrial. Se observatambién una disminución de la chaperona mtHSP70 en la mitocondria. Sin embargo, VDAC,proteína con localización membranaria está incrementada en extractos mitocondriales dehígado BDL. Este resultado en coherente con el incremento de TOMM40, importante proteínacon función de canal de membrana, responsable del import de VDAC. Esta alteración en losmecanismos de import son la probable causa del decremento del ADN mitocondrial en elhígado cirrótico. b) Estudio de la biogénesis ribosomal. En el hígado cirrótico se observa unincremento marcado de PCNA, marcador de proliferación, y de la cantidad de ADN. Losmecanismos de señalización citosólica están activados en el hígado cirrótico. Un incremento enlos niveles de fosforilación de ERK1/2 están asociados con un incremento de la fosforilación dec-MYC, regulador de la proliferación desde las tres polimerasas. Se observa también un mayornivel del ARNm y de proteína de UBF, factor de regulación de la trascripción desde la ARN-POLI. En el hígado cirrótico se observa un incremento en los niveles de ARNm de varias proteínasribosomales (rplp0, rpl30, rpl32, rps16), además del ARNm de proteínas responsables delprocesamiento y transporte del ARN ribosomal. Conclusiones: a) La cirrosis biliar está asociadacon una disminución del ADN mitocondrial, debido a una marcada disminución de TFAM. Estefenómeno está relacionado con una alteración de los niveles de las proteínas responsables delimport de proteínas hacia la mitocondria. b) La proliferación celular es activa en el hígadocirrótico. La activación ERK1/2 y la fosforilación de c-MYC son señales implicadas en elincremento de la biogénesis ribosomal. Este mecanismo incluye el incremento de los nivelesde ARNm de genes implicados en la síntesis de ribosomas. / BACKGROUND: Biliary cirrhosis is characterized by hydrophobic bile acids accumulation in theliver. This is associated with mitochondrial electron transport chain dysfunction and increasedhydrogen peroxide production. Mitochondrial density (mitochondrial mass per gram of livertissue) decreases but no explanation has been put forward. Cirrhotic liver is also characterizedby hepatomegaly and regenerative nodules, sometimes considered as a pre-neoplastic lesion.AIM: to study mitochondrial biogenesis and ribosome biogenesis in the rat liver with secondarybiliary cirrhosis. RESULTS AND DISCUSSION: In the cirrhotic liver there is an alteration of mRNAand protein level of the master regulators of mitochondrial biogenesis. GABP-α and PGC-1-αare decrease but NRF-1 is phosphorylated and found in nuclei of cirrhotic livers. TFAM, adownstream target and regulator of mtDNA maintenance in decreased at protein level.Surprisingly, the mature form of TFAM was absent from mitochondria of cirrhotic livers. Weobserved an alteration of mitochondrial and cytosolic proteins that regulate mitochondrialimport. This can explain why mtHSP70, a matrix directed mitochondrial protein was alsoabsent from mitochondria. We also found that proliferative stimuli are active in the cirrhoticliver. ERK1/2 and c-MYC were phosphorylated and CDK-4 was increased. Importantly, weobserved a complete degradation of pRB, a cell cycle regulator, in the cirrhotic liver. This wasmirrored by an overexpression of several genes encoding ribosomal proteins and rRNAprocessing factors. All this findings support an increased DNA content in BDL liver.CONCLUSIONS: Liver cirrhosis is characterized by a decreased liver mitochondrial density andmtDNA/nDNA ratio. 1) A decreased mitochondrial TFAM content is the main responsible forthis phenotype. 2) Liver proliferation is active during cirrhosis. Proliferative stimuli promoteDNA replication and liver growth.

La Insuficiencia respiratoria aguda (IRA) constituye una de las principales causas de ingreso en las UCIPs. La ventilación no invasiva (VNI), es decir, sin intubación endotraqueal ni traqueostomía, supone una alternativa a considerar en el tratamiento de estos pacientes.Existen numerosos estudios publicados sobre su eficacia en pacientes adultos con IRA para evitar la intubación y reducir la mortalidad. Sin embargo, su papel en la IRA pediátrica todavía no está bien definido.Uno de los principales inconvenientes en la infancia surge a la hora de escoger el material adecuado para aplicarla. En pediatría se utilizan casi exclusivamente los ventiladores específicos de VNI. Sin embargo, por su alto coste y su todavía escasa aplicación, estos equipos no están disponibles en todas las Unidades o lo están en número insuficiente, lo que termina limitando su aplicación.Los últimos modelos de ventiladores convencionales ofrecen modos de VNI específicos, que compensan automáticamente las fugas y disponen de sistemas de trigger más sensibles, por lo que la adaptación del paciente mejora considerablemente. Por ello, es posible que estos equipos sean una alternativa eficiente y fácilmente disponible para la aplicación de la VNI en la IRA pediátrica.Aunque la VNI puede evitar la intubación, no es aceptable que su uso retrase la intubación cuando esta es necesaria. Por esto, es fundamental disponer de indicadores precoces de fracaso de la técnica.Para tratar de dar respuesta a estos interrogantes, realizamos un estudio clínico prospectivo, no controlado, en 47 episodios de IRA moderada-grave de 37 niños (1 mes-16 años) ingresados en la UCIP del Hospital Clínico de Valencia desde Enero de 2004 hasta Junio del 2008. Se aplicó a los pacientes VNI mediante un ventilador volumétrico convencional con módulo de VNI (Evita 2 Dura, Dräger).La causa más frecuente de IRA fue neumonía (42.5%). El riesgo de mortalidad PELOD fue de 8.5%±20.4 % (rango, 0-84%). En 14 casos se utilizó inicialmente CPAP+PS, necesitando cambiar a BIPAP+PS en 7 y en 33 casos BIPAP+PS. Los parámetros de máxima asistencia fueron: PIP 19±2.7 cmH2O (15-25), PEEP 6±1.2 cmH2O (4-9), PS 10.6±2.5 cmH2O (5-18), FiO2 0.5±0.2 (0.3-1) y PM 102.2 cmH2O (6-15).Se observó mejoría significativa en las primeras 2-4 horas del inicio de la VNI de: frecuencia respiratoria, frecuencia cardiaca, pH, pCO2 y SatO2. También se alcanzó una mejoría progresiva del score clínico en las primeras 6 horas. La duración de la VNI fue 72.3 ± 60.1 horas (2-216 h). Las complicaciones fueron menores y relacionadas con la interfase y el tiempo de VNI. En nueve pacientes (19.1%) la técnica fracasó y los pacientes precisaron intubación, entre las 3 y 87 horas (33.6±29.6 horas). El fracaso se asoció con menor edad de los pacientes, diagnóstico de SDRA, y empeoramiento de la Rx de tórax a las 24 y/o 48-72 horas. En el grupo de éxito se observó una reducción significativa en la frecuencia cardiaca y en la pCO2 entre las 2-4 horas del inicio de la VNI. La asistencia respiratoria fue mayor en el grupo de fracaso, tanto la asistencia inicial como máxima. En el análisis multivariante, sólo lapresión media (PM) y la FiO2 formaron parte de la función discriminante éxito/fracaso con un punto de corte de 11.5 cmH2O y 0.57 respectivamente.En conclusión, creemos que la VNI aplicada con este equipo es una alternativa eficiente en el tratamiento de la IRA pediátrica. Además, ofrece parámetros, como la PM, que pueden actuar como predictores de éxito/fracaso. La valoración conjunta de la PM y la FiO2 pueden actuar, en cualquier momento de la evolución de la IRA, como indicadores directos de fracaso de la VNI. / Non-invasive ventilation (NIV) constitutes an alternative in the treatment of pediatric Acute Respiratory Failure (ARF). However it shouldn't delay endotraqueal intubation (ETI) when it's necessary. A major objection to NIV in pediatric ARF arises when selecting the right device to apply it.The aim of this study is to evaluate the feasibility and outcome of NIV by volumetric ventilator with specific NIV and to identify success and failure prognostic signs of NIV in pediatric ARF.We performed a prospective non controled clinical study in children, aged 1 month to 16 years, with moderate to severe ARF who received NIV through the use of an Evita 2 Dura fitted with an NIV module (Dräger), in a period of 4-yr time.We apply NIV to 37 episodes of ARF in 47 patients. Pneumonia was the most frequent diagnosis. PELOD mortality risk was 8.5%±20.4 % (range, 0-84%). Initially, BIPAP+PS was applied in 33 cases and CPAP+PS in 14. The highest parameters set were: PIP 19±2.7 cmH2O (15-25); PEEP 6±1.2 cmH2O (4-9), PS 10.6±2.5 cmH2O (5-18), FiO2 0.5±0.2 (0.3-1) and MAP 102.2 cmH2O (6-15). Significant improvement was observed within the first 2-4 hours of NIV for: respiratory rate, heart rate, pH, pCO2, and arterial oxygen saturation. There was a progressive clinical score improvement in the first 6 hours. The duration of NIV was 72.3 ± 60.1 hours (2-216 h). Complications were minor, related to the time of NIV. Nine cases (19.1%) needed ETI (33.6±29.6 hours). Failure was associated with the youngest age group (4±3.3 vs 7.7±5 years, p < 0.04), ARDS (failure/ARDS: 5/10 vs failure/non ARDS: 4/37, p=0.013) and worsening radiographic images taken at 24 and/or 48-72h (p=0.001 and p<0.001 respectively). A significant reduction in heart rate was observed between the 2nd and 4th hours after the start of NIV and pCO2 only in the success group. Breathing assistance was higher in the failure group, both initial and maximum assistance. In the multi-variant analysis only maximum mean pressure (MAP) and FiO2 formed part of the discriminant success/failure function with a cut-off point of 11.5 cmH2O and 0.57 respectively.

En el presente trabajo se ha estudiado la relación entre el núcleo y la mitocondria y la importancia de la compartimentación del GSH durante la resistencia a la apoptosis inducida por el tratamiento con cisplatino. Así mismo, se ha evaluado la implicancia de la proteína bcl-2 en la compartimentación del GSH como mecanismo de resistencia a la muerte por apoptosis. Para ello se ha utilizado la cepa celular MCF7 wild type y un homólogo que sobre-expresa la proteína bcl-2.Los resultados muestran que el tratamiento con cisplatino detiene las células en la fase de proliferación, lo que provocaría la detención del ciclo celular y la muerte celular por apoptosis. La proliferación celular se desarrolla dentro de un determinado rango de niveles de ROS, la detención de las células en la fase de proliferación llevaría al incremento de los niveles de ROS. A su vez, el calcio también se incrementan a causa del tratamiento y se dispone en forma de agregados posiblemente dentro de la mitocondria. Las mitocondrias cumplirían una función de protección al disminuir el calcio libre en el citoplasma. La disposición perinuclear de las mitocondrias permitiría proteger al núcleo, aislándolo de las posibles señalizaciones causadas por el incremento desmedido del ión. El aumento de los niveles de ROS y de calcio provocarían la permeabilización de la membrana mitocondrial interna, lo que induciría la apertura de los poros de permeabilidad transitoria y así se produciría la disminución del potencial de membrana mitocondrial. La alteración de la permeabilidad mitocondrial llevaría la liberación del citocromo-c al citoplasma, lo que eventualmente promovería la muerte celular por apoptosis.En respuesta al tratamiento, se modificaría la distribución de las mitocondrias y posteriormente se inducirían cambios en la morfología mitocondrial. Las mitocondrias perderían su forma tubular alargada por una puntiforme. Estos eventos constituirían estrategias de resistencia a la apoptosis. Los cambios en la distribución mitocondrial no parecen ser ocasionados por alteraciones en los microtúbulos del citoesqueleto. Por su parte, los cambios morfológicos detectados podrían relacionarse con la segregación de las mitocondrias disfuncionales. Los procesos de fusión y fisión cumplirían una función como mecanismo de control de calidad capaz de gobernar el recambio mitocondrial, esto permitiría la remoción de las mitocondrias potencialmente disfuncionales. De esta manera, las mitocondrias afectadas por el tratamiento, con un potencial de membrana despolarizado no intervendrían en eventos de fusión pero si sufrirían eventos de fisión. Se originarían mitocondrias pequeñas y despolarizadas, que podrían ser eliminadas por autofagia.Las células supervivientes presentan un mayor nivel de GSH y una clara compartimentación nuclear y mitocondrial. Mientras que en las células apoptóticas el nivel de GSH es bajo y homogéneo. Los resultados muestran que la compartimentación de GSH en el núcleo y las mitocondrias podrían ser eventos clave en la resistencia celular a la apoptosis. Es posible que el GSH pueda pasar de la mitocondria al núcleo, a través del retículo endoplasmático, dependiendo de las necesidades celulares al momento de resistir a un estímulo apoptótico. Así mismo, la sobre-expresión de la proteína bcl-2 se relaciona con la mejor resistencia al tratamiento con cisplatino. La proteína bcl-2 cumpliría un papel anti-apoptótico relacionado con la señalización y regulación de las vías de muerte celular y también podría desempeñar un papel protector ante el estrés oxidativo inducido por el cisplatino e influir en el incremento del nivel de GSH celular y su compartimentación. / The alterations of cellular redox state and calcium homeostasis during apoptosis induce the orchestrated response of nucleus and mitochondria. The mitochondrial morphology and distribution (mitochondrial fusion and fission) could represent a key factor in the nucleus-mitochondrial cross talk. Bcl-2 overexpression was demonstrated to increase nuclear glutathione concentration and thus could provide the apoptosis resistance at nuclear level, apart from its well documented effect on mitochondria. In order to elucidate the sequence of events that takes place in the cytoplasm, mitochondria and nucleus and the importance of bcl2, during apoptosis, a time course analysis of the effect of cisplatin at [10&#61549;M] and [50&#61549;M] on MCF7 cells WT and MCF7 that overexpress bcl-2 was performed. The cell cycle, ROS level and the mitochondrial transmembrane potential was studied by flow cytometry; the cellular level of reduced glutathione (GSH) by spectrophotometry, and the confocal microscopy was used to study compartmentation of GSH, mitochondrial distribution, apoptosis and calcium.Bcl-2 overexpression conferred increased apoptosis resistance. Effect on the cell cycle was doses dependent: the growth arrest occurred in G2/M phase with the [10&#61549;M] and in G0/G1 with the [50&#61549;M] cisplatin. Mitochondrial perinuclear arrangement was an early event, followed by the decrease in mitochondrial transmembrane potential. The early and doses dependent increase in calcium level was followed by its perinuclear distribution, and release to the cytoplasm. The GSH level and nuclear compartmentation were increased in the cells that showed no signs of apoptosis. All this events were delayed or less significant in MCF7 bcl-2 cells.This thesis showed that the nuclear and mitochondrial GSH compartimentation, together with the processes of mitochondrial fusion and fission represent key events in the apoptosis resistance of cancer cells. The overexpresion of the BCL-2 confers the protection from the oxidative stress induced by the cisplatin, possibly through the increase in the level of GSH and changes in its compartimentation pattern. It is possible that the GSH could translocate from the aggregated perinuclear mitochondria, through the endoplasmic reticulum to the nucleus, as a part of the successful antiapoptotic strategy.

The present thesis offers an insight in the importance of nuclear GSH in cell proliferation. The research was performed in three different cellular models of diverse proliferating activity: immortalized mouse embryonic fibroblasts 3T3, mammary adenocarcinoma cell line MCF7 and primary embryonic neuralonal culture. The results presented here provide evidence that suggest that the relationship between GSH level and telomerase activity, previously described by our group for 3T3 fibroblasts is a common phenomenon in mammalian cells. Reduced glutathione emerged as a driving force of cell cycle progression; high level of GSH coincided with the peak of telomerase activity and preceded the exponential phase of cell growth in all three cell types analyzed. Moreover, the comparative studies of three distinct proliferating models revealed that the level of GSH corresponded to the intensity of the proliferation and clearly correlated with the level of DNA synthesis. This finding inspired the focus on the nuclear compartmentalization of GSH. Interestingly, nuclear localization of GSH was observed before the exponential phase of cell growth in all three cell types, while the GSH distribution within the cell was uniform when the cells stopped proliferating. Comprehensive analysis of the nuclear GSH levels along the cell cycle, and the experiments with the depletion of nuclear GSH conducted in 3T3 fibroblasts, provided further evidence on crucial importance of nuclear GSH for the onset of cell proliferation. In the attempt to elucidate the possible mechanism of nuclear GSH compartmentalization, we have found no evidence either of active GSH transport or of its de novo synthesis in the nucleus. The implication of bcl2 in nuclear transport of GSH was evaluated in the study of MCF7 cells over-expressing this protein. In this model, bcl2 caused an early and striking increase of total cellular glutathione, nuclear GSH and telomerase activity; unexpectedly, these alterations induced no significant effect on cell proliferation.Based on these findings we have been able to draw a series of conclusions: The level of cellular glutathione in the particular cell line could define its proliferating capacity. Its variations along the cell culture dictate the rhythm of cell proliferation, possibly by the modulation of redox sensitive cell cycle regulatory proteins.The telomerase activity is highly sensible to the cellular redox state, regardless of the cell type, its inherent proliferation capacity or the origin of the cells. The dependence of the cell cycle progression on the level of glutathione could be attributed, at least in part, to its modulation of telomerase activity The nuclear compartmentalization of glutathione is a prerequisite for the onset of the exponential phase of the cell growth. The redox state of nuclear proteins, defined by the glutathiolation and oxidation, varies significantly with the cell proliferation activity.The depletion of nuclear glutathione severely impairs the cell cycle progressionDuring the changes in the nuclear membrane that precede the cell division, nuclear Bcl-2 could facilitate the translocation of glutathione to the cell nucleus. The overexpression of bcl-2 induced an early increase of the total glutathione level, telomerase activity and nuclear GSH compartmentalization.In summary, our results reveal the importance of nuclear GSH compartmentalization in early phases of cell proliferation. This study suggests that the control of the cell cycle progression from G1 to S phase is dependent on elevated nuclear GSH levels and originates from its influence on telomerase activity and DNA synthesis. / Integridad celular se defiende en el núcleo, en su "software" - el acido desoxiribonucleico (ADN) que controla los procesos celulares atreves de la regulación de la expresión génica. El papel protector del glutatión (GSH) sobre el ADN, en su síntesis de ADN y en el mantenimiento de organización del matriz nuclear ha sido claramente demostrado. La gran diversidad de procesos vitales dependientes del glutatión y realizados en diferentes orgánulos de la célula implica la existencia de mecanismos que controlarían su concentración y garantizarían el ambiente adecuado en cada compartimiento. El núcleo cambia dramáticamente durante las diferentes fases del ciclo celular, por lo tanto los estudios de la compartimentación nuclear del GSH tienen que tener en cuenta esta dinámica celular. El objetivo de la presente tesis era investigar la importancia del nivel de GSH y su distribución celular, especialmente la compartimentación nuclear, en la proliferación celular y posibles mecanismos involucrados en el control del dicho fenómeno. Los resultados obtenidos nos han permitido sacar una serie de conclusiones: El nivel de glutation celular puede determinar la capacidad proliferativa de una línea celular, posiblemente vía la modulación de las proteínas reguladoras del ciclo celular sensibles al estado redox. La actividad de la telomerasa, altamente sensible al estado redox, independientemente del tipo celular, su inherente capacidad proliferativa o la especie de la que procede el cultivo celular puede ser vínculo entre la progresión del ciclo celular y el nivel de glutation. La compartimentación nuclear del glutation es imprescindible en el principio de la fase exponencial del crecimiento celular. El estado redox de las proteínas nucleares, definido por su glutationilacion y oxidación, varía significativamente con la actividad proliferativa de las células. La depleción del glutation nuclear interfiere gravemente con la progresión del ciclo celular. La sobre expresión del Bcl-2 induce el incremento del nivel del glutation celular, de la actividad telomerasa y de la compartimentación nuclear del GSH. El nivel de GSH y su compartimentación nuclear son de crucial importancia para el inicio de la proliferación celular. El fenómeno parece universal, confirmado en cultivos celulares provenientes de diferentes especies y con distintos niveles de proliferación.

El taekwondo es un deporte de lucha con golpeo donde se pueden utilizar tanto puños (para golpear al pecho) como piernas (para golpear al pecho y a la cara). Sin embargo, las piernas se utilizan en mayor medida que los puños.Durante el combate, los deportistas mantienen una distancia, denominada distancia de combate o de ejecución, que es clave para el éxito deportivo.Entre las acciones a realizar, el Dolio Chagui o patada circular a la cara, ofrece una mayor posibilidad de puntuar que las patadas dirigidas al pecho.En el presente estudio se analizan diversos parámetros mecánicos en la patada Dolio Chagui de taekwondo. Por otro lado, hemos comenzado a estudiar un parámetro psicológico como es la autoeficacia percibida en taekwondistas. Y además, relacionando las variables psicológicas y las mecánicas, hemos pretendido analizar si la percepción de eficacia física del atleta puede predecir el rendimiento objetivo de los mismos.En el estudio participaron 52 deportistas con un mínimo de 4 años de experiencia en la práctica del taekwondo y una frecuencia de entrenamiento de al menos 3 veces por semana. La muestra se dividió en cuatro grupos según el nivel (expertos y promesas) y según el género (varones y mujeres).En el análisis mecánico se valoraron, desde tres distancias de ejecución, las siguientes variables: fuerza máxima de golpeo, fuerza relativa de golpeo, tiempo de reacción, tiempo de ejecución, tiempo total de respuesta y velocidad media de ejecución. Para ello se utilizó un sistema de adquisición de datos compuesto por una plataforma de fuerzas, una plataforma de contacto, una cinta de leds, un microcontrolador y un PC. En el análisis psicológico se valoró la autoeficacia física percibida utilizando la escala PSE (Ryckman et al., 1982) formada por dos subescalas: la habilidad física percibida y la autopresentación física.Los resultados muestran que la distancia de ejecución condiciona los datos mecánicos de las patadas. En esa línea, independientemente del nivel de los deportistas, los varones golpean con una fuerza máxima mayor que la de las mujeres. Además, la fuerza de golpeo se considera un parámetro mecánico susceptible de mejora por medio del entrenamiento. Asimismo, los deportistas varones considerados expertos, generan mayor fuerza por kilogramo de masa corporal (fuerza relativa de golpeo) que el resto de taekwondistas. Por otro lado, se considera que los deportistas expertos varones, realizan la patada Dolio Chagui con mayor eficacia que el resto de deportistas.En cuanto a los sistemas de valoración utilizados, el sistema de adquisición de datos mecánicos nos permite obtener información cuantificable, comparable y fiable. Por su parte, la utilización de cuestionarios validados como por ejemplo la escala de autoeficacia física percibida, nos permite comparar los resultados con otros deportes, y avanzar en el estudio de taekwondo. En este sentido, los taekwondistas varones se perciben más eficaces físicamente que las mujeres. Sin embargo, a nivel expertos, la percepción de eficacia y habilidad física de varones y mujeres, es similar.Finalmente, el PSE predice algunos parámetros mecánicos como por ejemplo, la velocidad media de ejecución y la fuerza máxima de golpeo, permitiendo relacionar la eficacia percibida con el rendimiento del deportista. / Taekwondo is a combat sport well known for its kicks. The most frequently used kicks in competition are roundhouse kicks. This study analyses one of the most common roundhouse techniques, the Dolio Chagui (roundhouse kick to the head).During the combat, one of the major factors that regulate the kick is the execution distance (ED), or combat distance, which may be defined as the horizontal distance between the competitor´s front foot and the objective to be hit.In our study maximum impact force (Fmax), relative impact force (Frel) execution time (TE), reaction time (TR), total time (TT) and execution mean velocity (Vm) in relation to execution distance were measured using a mechanical data acquisition system. On the other side, the physical self-efficacy scale (PSE) by Ryckman et al. (1982) has been used to measure individual perception of self-efficacy in participants.52 taekwondo players participated in the study; they were divided into four groups in function of the level (experts and promises) and the gender (male and female). All the athletes have competition experience of at least 4 years and train for at least 3 hours per week.The results showed that execution distance is influential in mechanical data of the Dolio Chagui. Following this viewpoint, male taekwondo players executed the Dolio Chagui with greater Fmax than female. Therefore, Fmax could be improved by the training. On the base of some mechanical results, expert male taekwondo players executed Dolio Chagui with more efficiency than any other group.Psychological results indicate that males rated higher physical self-efficacy than females. However, similar results were obtained for expert level between males and females.Finally, some mechanical parameters (execution mean velocity and maximum impact force) have been predicted by the PSE. Therefore, it allows establish a relationship between the self-efficacy and the taekwondo players' performance.

La planificació del territori com a ciència i com a pràctica legal i jurídica es troba encara a Espanya en procés de consolidació. Hi ha diversos treballs que parlen de la teoria i la pràctica de la planificació territorial des d'un punt de vista general, a un determinat país o Comunitat Autònoma però no hi ha tants de síntesi que comparen diversos casos. Aquest és en primer lloc un treball de síntesi que analitza no només els diferents sistemes i pràctiques d'ordenació del territori a les Comunitats Autònomes del Mediterrani sinó que també estudia de quina manera s'està governant el territori, però no descrivint i comparant sistemes legislatius sinó arribant a un grau de concreció màxima analitzant instruments i experiències de govern concretes i reals des de l'escala local fins la supranacional. Per a aquesta tasca es seleccionen al llarg de la tesi 4 casos d'estudi que s'analitzen en profunditat, tant les seues dinàmiques territorials com la seua pràctica planificadora i de govern del territori.El present treball per tant tracta sobre el govern del territori a l'Arc Mediterrani Espanyol. Es tracta sobretot d'un treball entre l'anàlisi regional i l'avaluació de polítiques públiques, entre la reflexió teòrica i l'estudi comparatiu on tractem d'abordar la següent qüestió:Amb el nou escenari de la globalització i l'era de la informació, què hi ha de nou en la planificació i el govern del territori a l'Arc Mediterrani Espanyol?Cal concretar i aclarir més el tema en el qual ens centrarem. La finalitat principal és analitzar quines noves respostes s'estan donant des de les distintes administracions del territori per afrontar velles dinàmiques territorials crítiques com el despoblament rural, la dispersió i especialització urbana, la crisi industrial i del sector primari, l'esgotament del recurs aigua i la pèrdua de paisatges, entre d'altres a diferents àrees d'estudi que es podrien considerar com a representatives del que passa a les Comunitats Autònomes del Mediterrani Espanyol (Parc natural del Cadí - Moixeró, regió metropolitana de Barcelona, regió metropolitana de València y litoral d'Almeria - Águilas) i al mateix temps pegant una ullada a un altre context que pot aportar molt al debat: Alemanya. Cal remarcar la consideració de nou no com a quelcom inèdit, sinó més bé com a un conjunt de modes de parlar i actuar sobre el territori que en el context en el qual ens movem ha estat poc explorat fins al moment.Aquest propòsit general es pot desdoblar en dos grans objectius:- Fer una anàlisi d'algunes de les grans dinàmiques territorials que són crítiques per al futur de l'arc mediterrani, les quals incideixen sobre els tres grans objectius de la sostenibilitat: la cohesió social, la competitivitat econòmica i la protecció del patrimoni i el medi ambient.- Avaluar comparativament si noves i velles estructures de govern, instruments de planificació i eines conceptuals per explicar i gestionar el territori són hui en dia efectives per gestionar satisfactòriament les dinàmiques territorials analitzades.Al llarg del treball pretenem traslladar la idea que Europa està experimentant una transició cap a la societat de la informació, dins de la lògica capitalista, la qual cosa comporta el reforçament i l'evolució d'antigues dinàmiques territorials que semblaven superades, una transició que afecta profundament la manera de gestionar el territori, el seu govern, i que davant això, es donen noves respostes, els efectes de les quals, en línies generals i en comparació amb altres àmbits territorials, han estat fins al moment limitades. Volem saber què hi ha de nou en l'ordenació i govern del territori a l'Arc Mediterrani, i quin paper hi està jugant aquesta ordenació. / This is first of all a research that analyses not only different Spatial Planning frameworks in different Spanish regions, but also it tries to answer the question about how the territory is being planned and governed. In order to answer this question the research handle with different spatial planning instruments from a local to an European scale. The whole area studied has been called the "Mediterranean Spanish core regions". The main topics of the research are; regional analysis, spatial planning policies and instruments assessment, theoretical review on the Castell's theory on the transition to a new informational's era and the comparison between different Spatial Planning frameworks. All these topics try to answer this question:In a new context of globalisation and a transition to a new era of information, which new paradigms within spatial planning and spatial policies can be found within the Spanish Mediterranean core regions?The main purpose of the research is, therefore, to analyse those new paradigms and policies implemented or developed from the different Spanish /European administrations in order to tackle or face different old spatial dynamics such as rural depopulation, the new urban model of edge-cities, industrial and agricultural crisis, water shortage problems, destruction of natural landscapes etc. in different areas of the Spanish Mediterranean coast. The four different study cases are: the Cadí - Moixeró natural park in the catalan Pyrenees, the metropolitan region of Barcelona, the urban region of Valencia and the Almería - Águilas coast in SE Spain. In order to establish a suitable comparison on an European scale, a fifth case of study is added: the Rin- Ruhr metropolitan region in Germany.Throughout this research it is described how Europe is walking towards a new era of information and globalisation, but always within the logics and rules of a capitalist society. This kind of transition is not only reinforcing new and old spatial dynamics of different territories, but also the way how these territories are planned and governed. These new paradigms in spatial planning are having till this moment very limited effects on the territory.

El proyecto de tesis doctoral "El paisaje como patrimonio rural. Propuesta de una sistemática integrada para el análisis de los paisajes valencianos" se plantea como un ejercicio de análisis de los paisajes regionales valencianos y el estudio en profundidad de uno de ellos, a partir del diseño de una metodología genérica para el estudio del paisaje.El tratamiento territorial del concepto paisaje, que emana del Convenio Europeo del Paisaje y que recoge la Ley 4/2004 de la Generalitat Valenciana de Ordenación del Territorio y Protección del Paisaje, nos ha instado a plantear una sistemática fundamentada en la identificación, clasificación, caracterización, evaluación y diseño de medidas de actuación, que utilizando una Infraestructura de Datos Espaciales gestionada por un SIG, permite su aplicación en ejercicios de planificación a diferentes escalas territoriales.Asimismo, la tesis efectúa un ejercicio de clasificación jerárquica del paisaje, a partir de los elementos estructurantes y de los procesos tanto naturales como patrimoniales, distinguiendo cinco niveles territoriales: áreas funcionales, ámbitos paisajísticos, paisajes tipo, áreas paisajísticas y unidades de inventario.El ámbito paisajístico seleccionado como área piloto para la aplicación de la sistemática, se presenta como un paisaje de relieves tabulares, fosas interiores y muelas ibéricas. Éste ha sido denominado Valle de Cofrentes-Ayora y Bajo Cabriel, el cual forma parte del Área Funcional de Requena. La elección del área de estudio guarda relación con su carácter eminentemente rural y por su localización limítrofe con otra comunidad autónoma, condición esencial para reforzar que el estudio y las políticas de planificación y gestión del paisaje deben superar los límites administrativos.La sistemática de análisis nos ha permitido identificar en el área piloto un total de 92 unidades de inventario, consideradas como la unidad mínima de paisaje en trabajos de planificación a escala supralocal, que se integran en 20 áreas paisajísticas, a una escala comarcal. Se ha efectuado la caracterización de cada una de las unidades de inventario y de las áreas paisajísticas, que se plasma en el documento mediante una relación de fichas de inventario o caracterización. Además la aplicación de la sistemática se completa con la implementación de un método de evaluación del paisaje de tipo mixto, en el que se evalúa la calidad y la fragilidad paisajístico-patrimonial de las unidades de inventario, y con un mapa de propuestas de acción paisajística para el Valle de Cofrentes-Ayora y Bajo Cabriel.En definitiva, la tesis defiende que, por su carácter y por su esencia el paisaje es un patrimonio geográfico de todos los valencianos, que necesita potenciar su conocimiento científico y reconocimiento social, en el objetivo de preservarlo, ordenarlo y gestionarlo para salvaguardar el equilibrio ambiental y cultural, garantizar la calidad de vida de los ciudadanos e incluso incorporarlo como un nuevo recurso intrínseco de los lugares. / The thesis, "El paisaje como patrimonio rural. Propuesta de una sistemática integrada para el análisis de los paisajes valencianos" considers as an exercise of analysis of the Valencian regional landscapes and the study in depth of one of them, from the design of a generic methodology for the study of the landscape.The territorial treatment of the concept landscape, that emanates of the European Landscape Convention and that picks up Law 4/2004 of the Valencian Autonomous Government of Territorial Planning and Protection of the Landscape, has insisted to us to raise a systematics based on the identification, classification, characterization, evaluation and design of action measures, that using a Spatial Data Infrastructure managed by a SIG, allow its application in exercises of planning on different territorial scales. Also, the thesis carries out an exercise of hierarchic classification of the landscape, from the organizers elements and the natural-patrimonial processes, distinguishing five territorial levels: functional areas, landscaping scopes, landscapes type, landscaping areas and units of inventory.The zone selected like pilot area for the application of systematics, appears like a landscape of tabular reliefs, inner graves and Iberian plateaus. This one has been denominated Valle de Cofrentes-Ayora y Bajo Cabriel, which comprises of the Functional Area of Requena. The analysis systematics has allowed us to identify in the pilot area a total of 92 units of inventory to a supralocal scale, that are integrated in 20 landscaping areas, to a local scale. The characterization of each one of the units of inventory and the landscaping areas has taken place, that shapes in the document, by means of a template of inventory or characterization. Moreover the systematics is completed with a method of evaluation of the landscape of mixed type, in which it evaluates the quality and the fragility of the landscape and the heritage of the inventory units, and with a map of proposals of landscaping action for pilot area.Really, the thesis defends that, by their character and by its essence the landscape is a geographic heritage of all the Valencians, that needs to harness its scientific knowledge and social recognition.

El estudio realiza una panorámica de cómo se fue perfilando la política española en relación al Sultanato de Marruecos durante el último cuarto del siglo XIX para luego analizar los cambios acaecidos en dicho Imperio a medida que el país experimentaba la presión creciente de las potencias colonialistas. La diplomacia española, tras el fin del conflicto de Melilla intenta ajustar sus actuaciones en Marruecos a las de los gobiernos británico y francés. Los desplantes del Reino Unido y la agresiva actitud gala frustrarán esa iniciativa. A partir de 1897, los gobiernos restauracionistas ven su política en el Norte de África alterada de forma vívidamente dramática, en una secuela de trágicos acontecimientos que terminarán con el desastre del 98. La desorientación es la característica más relevante en la actuación española en la cuestión marroquí, al encresparse la relación francobritánica, y viene a coincidir con la ruptura de los lazos que habían unido a España con la Triple Alianza y con el aislamiento internacional, en vísperas del enfrentamiento militar con los Estados Unidos. El régimen de la Restauración se ha de enfrentar a una trama de problemas y a un auténtico nudo de contradicciones en su política marroquista: la necesidad de conservar Cuba impulsa a un acercamiento a Francia, mientras que la presión imperialista gala en el Tuat y en el Rif fuerza al gabinete Sagasta a intentar una concertación con el Reino Unido. Y esto ocurre en un contexto en el que Marruecos se va a convertir en un nudo de tensiones entre las potencias, derivado tanto de la situación estratégica del Sultanato como de, primero, la disputa franco-británica por intentar situar al Imperio jerifiano en la órbita de sus intereses, y luego de la creciente rivalidad comercial entre Francia y Alemania en el noroeste de África. Además la derrota en la guerra hispano-norteamericana deja al descubierto la falta de preparación militar española para defender el pequeño y disperso Imperio colonial que le restaba; en consecuencia, sufrirá los embates del gobierno marroquí que desea liquidar la presencia hispana en los enclaves que ocupa en el septentrión del Sultanato. Esta dinámica conduce al bloqueo de Alhucemas y Vélez de la Gomera por parte de las fuerzas imperiales del Sultán Abd al- Aziz. La invasión militar del sureste del Imperio jerifiano por el Ejército francés concentra la atención del gobierno marroquí y contribuye a hacer disminuir la presión sobre las posesiones hispanas. A partir de 1899, el gabinete conservador de Silvela emprenderá una ofensiva diplomática tendente a aprovechar la debilidad del Sultanato para arrancar la concesión de los vastos territorios de Tarfaya y la Sakia al- Hamra. Su intención es crear un hinterland defensivo del archipiélago canario en la costa atlántica marroquí. En un claro bandazo táctico, a los pocos meses de haber expresado sus deseos de que España ingresase en la Dúplice franco-rusa, Silvela busca el abierto apoyo del Foreign Office para edificar este imperio colonial sahariano. El fracaso de esta iniciativa conducirá al gabinete liberal de Sagasta durante el bienio 1901-1902 a emprender un proceso negociador hispano-francés en el que en secreto se discute el reparto de Marruecos. Frustrado temporalmente, a partir de 1903 los gabinetes conservadores de Silvela, Villaverde y A. Maura inician, con el nuevo marco de fondo en el que Londres y París han resuelto sus litigios coloniales decimonónicos, un proceso de acercamiento de manera simultánea a las órbitas de estos dos países, de donde España se beneficiará finalmente de una plaza en el reparto de Marruecos. / Spain's action as a power with claims to the Moroccan Sultanate was fairly relevant until 1896. It was nevertheless forced right into a background position as a result of the 98 disaster. The Restoration regime then had to face up to a complicated web of problems: the need to keep Cuba made a diplomatic rapprochement with France necessary while the imperialist pressure seen in Tuat and the Rif forced the Sagasta cabinet to attempt to reach an agreement with the United Kingdom. From 1900 the Silvela government undertook a diplomatic offensive attempting to take advantage of the Sultanate's weakness to wrench the vast territories of Tarfaya and Sakia al-Hamra from it. The failure of this attempt would lead Sagasta's liberal cabinet during the two years 1901-1902 to getting a Spanish-French negotiating process under way in which the distribution of Morocco was secretly discussed. After this agreement came to nothing, from 1903 the conservative cabinets of Silvela, Villaverde and A. Maura began a process of simultaneous rapprochement with the United Kingdom and France, in the new setting in which London and Paris settled their nineteenth century colonial differences. An enclave in the distribution of Morocco would finally be obtained as a result of this rapprochement.