Os mercados internacionais de capital cresceram dramaticamente desde meados da década de 60. Embora reflitam parcialmente as economias em expansão, o aumento do comércio mundial e a globalização da produção, os movimentos internacionais de capital envolvem também fatores puramente financeiros que se propagam com velocidade perceptivelmente maior. Assim, ainda que tenham permitido o alívio das restrições financeiras impostas pela crise da dívida dos anos 80, e melhorado os índices de eficiência e alocação de capital para o conjunto das economias da América Latina, os volumosos influxos financeiros também suscitaram preocupação em razão de seus efeitos sobre a estabilidade macroeconômica, a competitividade do setor exportador e as políticas de crescimento e desenvolvimento sustentado dessas economias. Neste contexto, aos policymakers, através do adequado gerenciamento das políticas micro e macroeconômicas, recai, em última instância, a responsabilidade em minimizar eventuais condições de desajuste estrutural e conseqüente incerteza, visto que ingressos elevados e repentinos de capital podem causar instabilidade mediante crescimento rápido do consumo, inflação crescente, valorização da taxa de câmbio real e déficits cada vez maiores de conta corrente.

Submitted by Ana Hilda Fonseca (anahilda@ufba.br) on 2016-09-14T18:22:42Z No. of bitstreams: 1 Dissertação Fábio Santos de Oliveira.pdf: 3601269 bytes, checksum: 07e73169ed910aa3e4ad8c2fe0de74e4 (MD5) / Approved for entry into archive by NUBIA OLIVEIRA (nubia.marilia@ufba.br) on 2016-09-14T20:45:46Z (GMT) No. of bitstreams: 1 Dissertação Fábio Santos de Oliveira.pdf: 3601269 bytes, checksum: 07e73169ed910aa3e4ad8c2fe0de74e4 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-09-14T20:45:46Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Dissertação Fábio Santos de Oliveira.pdf: 3601269 bytes, checksum: 07e73169ed910aa3e4ad8c2fe0de74e4 (MD5) / CAPES / A espectrofotometria em fase sólida (EFS) acoplada a sistemas de injeção em fluxo tem sido bastante explorada na determinação de várias espécies químicas em baixas concentrações. Em EFS, um suporte sólido contendo o analito imobilizado é colocado numa cela posicionada no caminho ótico, sendo as medidas realizadas in situ, integrando as etapas de imobilização, concentração e detecção. Dentre os trabalhos realizados empregado EFS em sistemas de análise por injeção em fluxo, algumas técnicas de modelagens matemáticas foram aplicadas com sucesso, podendo- se destacar as técnicas derivativas, a calibração multivariada e sistemas de equações lineares. Todavia, certas propriedades inerentes aos sistemas FI- EFS ainda não tinham sido suficientemente exploradas de forma a criar modelos matemáticos aplicados nas determinações. O trabalho desenvolvido objetivou a exploração de modelos matemáticos aplicados às determinações por espectrofotometria em fase sólida em sistemas de análise por injeção em fluxo. Este foi dividido em três etapas distintas: (1) avaliação e modelagem da dispersão em sistema FI-EFS empregando multicomutação (2) desenvolvimento de algoritmos e metodologias analíticas para a determinação de zinco utilizando padrão único (3) aplicação de regressão multivariada para a determinação de zinco e misturas de zinco e níquel As metodologias de análise desenvolvidas apresentaram boa precisão e exatidão, para um nível de 95% de confiabilidade, além de baixos limites de detecção e determinação. / Solid phase spectrophotometry (SPS) coupled with flow injection systems have been explored for determination of several chemical species at low concentration levels. In SPS analysis a solid support with an immobilized species is placed into a cell which is positioned at the optic path. Measurements are performed in situ, integrating immobilization, concentration and detection analytical steps. Some mathematical models were developed to be employed on flow injection systems coupled with solid phase spectrophotometry detection. On the other hand, certain inherent proprieties to FI-SPS systems still not explored to develop algorithms applied for chemical species determinations. In this work mathematical models were applied to determine chemical species and to evaluate the sample zone dispersion by FI-SPS system. This work was divided in three different stages: (1) evaluation and modelling of dispersion in FI-SPS system applying multicommutation concept (2) development of algorithms and analytical methodologies for zinc determination employing single standard solution (3) application of multivariate calibration models for determination of chemical species in FI-SPS systems. The developed analysis methodologies presented good precision and accuracy at 95% confidence level, besides low detection limits and determination.

Submitted by Souza Tanajura Augusto (cast@ufba.br) on 2012-12-17T17:41:43Z No. of bitstreams: 1 Reyes.pdf: 10414777 bytes, checksum: 2ad33cd09c1818e0aed5030559a31a7b (MD5) / Made available in DSpace on 2012-12-17T17:41:44Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Reyes.pdf: 10414777 bytes, checksum: 2ad33cd09c1818e0aed5030559a31a7b (MD5) / Centro de Pesquisa em Geofísica e Geologia da UFBA, CNPq, FAPESB e CAPES / Neste trabalho, construímos um modelo de distribuição vertical de produção de calor radiogênico numa região do Cráton do São Francisco utilizando uma seção vertical da crosta exposta na superfície por tectonismo. Para isso, identificamos o alinhamento, na superfície, correspondente à seção vertical da crosta exposta na borda oeste do Bloco Jequié e coletamos 151 amostras de rochas em 136 afloramentos referentes às diferentes profundidades. Nos afloramentos, identificamos as litologias presentes, coletamos amostras e realizamos a localização por GPS. No laboratório, efetuamos análises químicas e petrográficas, identificamos as facies metamórficas em que se formaram as rochas, determinamos os teores dos elementos K, U e Th por espectrometria gama, a densidade, a condutividade térmica, a difusividade térmica, o calor específico e a taxa volumétrica de produção de calor radiogênico. Com base em evidências geológicas, construímos um modelo geológico por camadas no qual sugerimos ter existido uma crosta de 51 km de espessura nessa região, onde os primeiros 16 km, de sedimentos e xistos-verdes, já foram erodidos, restando 7,2 km de crosta na facies anfibolito superposta a 27,8 km na facies granulito. Nesse modelo, as unidades geológicas charnoquitos ("A"), enderbitos ("B"), granitos ("C") e tonalitos ("D") estão presentes no alinhamento, as duas primeiras na facies granulito e as duas últimas na facies anfibolito, constituindo duas seções verticais expostas da crosta "C"-"A"-"B" e "C"-"D"-"B". Mostramos, ainda, que as rochas nessas seções foram afetadas por um segundo episódio de deformação isoclinal com planos axiais mergulhando 30º E e que as regiões centrais das unidades enderbíticas e tonalíticas correspondem a antiformes desse segundo episódio. Assim, à medida que percorremos as seções "C"-"A"-"B" e "C"-"D"-"B", estamos caminhando na vertical da crosta. Elaboramos um modelo de decrescimento exponencial da taxa de produção de calor radiogênico com o aumento da profundidade que considera um comportamento diferente em cada facies metamórfica. Nesse modelo, constatamos que essa grandeza é influenciada tanto pela litologia quanto pela profundidade crustal, sendo aquele o mais determinante. Para cada facies, em cada seção, definimos uma função exponencial de decaimento da taxa de produção de calor o que nos permitiu calcular a contribuição do calor gerado na crosta para o fluxo de calor na superfície. Na região "C"-"A"-"B" essa contribuição é de 51,9 mWm-2, enquanto na região "C"-"D"-"B" de 49,4 mWm-2. Aplicamos as equações obtidas para avaliar a contribuição do calor radiogênico para o fluxo de calor total na crosta das bacias de Camamu e Almada. Essas bacias também pertencem ao Cráton do São Francisco e possuem uma crosta na facies granulito com espessura estimada em 30 km. A contribuição encontrada foi de 30,6 mWm-2 e o fluxo térmico na base da crosta de 19,9 mWm^{-2}. / Pós Graduação em Geofísica da UFBA

Submitted by Mendes Eduardo (dasilva@ufba.br) on 2013-07-18T09:58:11Z No. of bitstreams: 1 Dissertação_Alice Loyola_2011.pdf: 758044 bytes, checksum: c8d867a7e5e5e475c4e37ee3636c8e72 (MD5) / Approved for entry into archive by Vilma Conceição (vilmagc@ufba.br) on 2014-02-05T14:59:35Z (GMT) No. of bitstreams: 1 Dissertação_Alice Loyola_2011.pdf: 758044 bytes, checksum: c8d867a7e5e5e475c4e37ee3636c8e72 (MD5) / Made available in DSpace on 2014-02-05T14:59:35Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Dissertação_Alice Loyola_2011.pdf: 758044 bytes, checksum: c8d867a7e5e5e475c4e37ee3636c8e72 (MD5) / Cnpq / Os estuários são áreas importantes de reprodução, alimentação e refúgios de diversas espécies, assim estão entre um dos ambientes mais importantes da zona costeira. Existem diversas definições para estes sistemas e diversos tipos de classificações, mas em uma definição simplista geralmente os estuários são considerados como uma zona de transição intermediária entre os sistemas marinho e de água doce ou simplesmente como sistemas onde a água do rio se mistura com água do mar. Apesar de serem ambientes com grande variabilidade natural, possuem uma alta concentração de matéria orgânica, e abrigam uma alta abundância e biomassa de invertebrados bentônicos, que são aqueles organismos que vivem associados ao sedimento. Existem diversos fatores que podem influenciar os organismos bentônicos (por exemplo, a salinidade e a composição do sedimento), e um desses fatores é a intensidade do fluxo de água, que varia com a maré e o influxo do rio. A intensidade do fluxo de água nos organismos bentônicos pode atuar de maneira direta, por exemplo, deslocando os organismos de uma região para outra, ou ainda de maneira indireta, por exemplo, determinando a composição granulométrica do local que, por sua vez, irá afetar os organismos. Assim, essas interações entre o fluxo circundante e os organismos bentônicos, seja diretamente ou indiretamente, podem influenciar na dispersão e no assentamento larval, no crescimento e na reprodução de indivíduos bentônicos adultos, no suprimento de nutrientes e na dispersão dos seus dejetos. Com isso, a finalidade desse trabalho foi testar se a variável intensidade do fluxo de água causaria uma influência maior nos organismos bentônicos do que a salinidade, o sedimento e a profundidade no estuário do Rio Jaguaripe, Baía de Todos os Santos, Bahia. Para medir a intensidade do fluxo foi empregada uma metodologia alternativa, já empregada por diversos autores, que é a técnica de dissolução de objetos de gesso, que ficam submersos na água durante determinado período, e através da taxa de perda de massa fornece uma medida relativa de fluxo: esferas que perderam mais massa, teoricamente, estão sujeitas a um fluxo maior e vice-versa. Os resultados demonstraram que não houveram diferenças marcantes de intensidade de fluxo dentro das diferentes faixas de salinidade e que aparentemente as principais variáveis exercendo influência nos organismos bentônicos foram a salinidade e a composição do sedimento. Contudo, não significa que o fluxo de água não é uma variável importante para os organismos bentônicos. Talvez, o fluxo seja importante para os organismos bentônicos, mas atue mais intensamente de maneira indireta através da relação com outras variáveis, por exemplo, influenciando na composição do sedimento e na distribuição de partículas alimentares. / Salvador

Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro Sócio-Econômico. Programa de Pós-Graduação em Economia / Made available in DSpace on 2013-07-16T02:44:43Z (GMT). No. of bitstreams: 1 223475.pdf: 1030684 bytes, checksum: 899bf1a17cfca624faaf342477a0e4ca (MD5) / Esta dissertação compara modelos de avaliação de empresas teoricamente equivalentes, utilizando dados do período de 1995 a 2004 de firmas brasileiras, com o objetivo de identificar o poder de explicação das previsões obtidas em cada enfoque. Coloca-se em perspectiva três abordagens: desconto de dividendos, fluxos de caixa descontados e avaliação pelo lucro residual. O estudo foi conduzido por quatro hipóteses: (i) o fluxo de caixa apresenta maior acurácia - definida como o menor afastamento em relação ao valor real de mercado - e poder explanatório entre as alternativas concorrentes, (ii) o aumento do horizonte de previsão explícita aumenta o erro das estimativas de avaliação, independente do enfoque adotado, (iii) o fluxo de caixa é a abordagem que apresenta, relativamente, maior número de estimativas consideradas razoáveis e (iv) todos os modelos de avaliação apresentam poder incremental para explicar os preços de mercado das empresas. Os dados necessários ao desenvolvimento do trabalho foram obtidos na Economática e a estruturação da pesquisa envolveu, entre outros procedimentos, a aplicação dos modelos de avaliação, especificação e realização das regressões, e identificação de algumas características peculiares às empresas brasileiras. O estudo conclui que o modelo de fluxo de caixa apresenta a maior acurácia e poder explanatório em relação aos outros modelos (dividendos e lucro residual), assim como o maior número de estimativas consideradas razoáveis. A constatação segue uma direção divergente à conclusão de que o lucro residual é o modelo dominante, verificada em alguns estudos estrangeiros (FRANCIS et al., 2000; PENMAN e SOUGIANNIS, 1998; COURTEAU et al., 2000, entre outros). Constatou-se também que as variações no tamanho do horizonte de previsão explícita não têm uma relação direta ou inversa com as variações nos erros das estimativas. Observou-se, por fim, que a suposição de que todos os modelos de avaliação têm poder incremental para explicar o preço de ações não tem correspondência nos dados testados.

Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro Tecnológico, Programa de Pós-Graduação em Engenharia de Automação e Sistemas, Florianópolis, 2016. / Made available in DSpace on 2017-05-23T04:11:30Z (GMT). No. of bitstreams: 1 345516.pdf: 5111522 bytes, checksum: 945f0bfef4b564945494e8d2fb5d1e4e (MD5) Previous issue date: 2016 / Esta dissertação aborda o problema de melhorar o processo de resposta a uma emergência em um sistema de trânsito urbano. A abordagem de Sistemas Multi Agentes, dotado de uma técnica de cooperação, é adotada para implementar uma estratégia que controla os semáforos e conduz os veículos de emergências de modo a melhorar seus tempos de deslocamento, além de minimizar o impacto das prioridades atribuídas a tais veículos no fluxo do tráfego. A proposta é avaliada definindo como métricas: o tempo total necessário para resolver a emergência, como também, a velocidade média, o tempo médio e a densidade média de todos os veículos no trânsito. Os resultados mostram que nossa proposta consegue reduzir o tempo de deslocamento dos veículos de emergência, além de minimizar o impacto das prioridades atribuídas a tais veículos no fluxo do tráfego.<br> / Abstract : This dissertation approaches the problem of improving an emergency response process on an urban traffic system. The use of Multi Agent Systems approach, endowed with an explicit cooperation technique is proposed to implement a strategy that controls the traffic signals and route emergency vehicles in order to improve their travel time and minimize the impact of priorities given to these emergency vehicles on the traffic flow. The time needed to perform all the emergency response process, as well as, the average speed, travel time and density are defined as metrics for the assessment. The assessment results show that our proposal is able to reduce the travel time of emergency vehicles as well as to minimize the impact of priorities given to emergency vehicles on the traffic flow.

MONTEIRO, L. S. Redução das emissões gasosas através da camada de cobertura de aterros sanitários utilizando diversos tipos de materiais. 2016. 155 f. Tese (Doutorado em Engenharia Civil: Saneamento Ambiental) – Centro de Tecnologia, Universidade Federal do Ceará, Fortaleza, 2016. / Submitted by Hohana Sanders (hohanasanders@hotmail.com) on 2017-04-18T18:47:28Z No. of bitstreams: 1 2016_tese_lsmonteiro.pdf: 13372194 bytes, checksum: d77f15c74d786880cd8174f93da13a13 (MD5) / Approved for entry into archive by Marlene Sousa (mmarlene@ufc.br) on 2017-04-24T13:16:40Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2016_tese_lsmonteiro.pdf: 13372194 bytes, checksum: d77f15c74d786880cd8174f93da13a13 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-04-24T13:16:40Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2016_tese_lsmonteiro.pdf: 13372194 bytes, checksum: d77f15c74d786880cd8174f93da13a13 (MD5) Previous issue date: 2016-08-10 / Population growth is responsible for the increase in solid waste generation, And the necessity of the correct destination, processing and reduction of this waste. This one The objective of this study was to evaluate the performance of landfill gas trapping by Different materials used as a cover layer in an Experimental Cell (CE) and in the Central Cell (CC) of the Western Metropolitan Sanitary Landfill of Caucaia (ASMOC). Estimates of the gas emissions were carried out by means of With static flow plate in the conventional cover and in the alternative covers, Besides the measurements made in the drains. The gases generated in the EC and released by the drain Contained, on average, 16.48% CH 4, 13.23% CO 2 and 11.10%; Already in the CC, Average CH4 emissions ranged from 48.20% to 62%, with varying CO2 volumes From 28.45% to 40.43%, and very low O2 concentrations, ranging from 0.02% to 6.4%. THE CC allowed the escape of an average of 0.5% of CH4 and 0.3% of CO2 in the EC, while CC differed only in the average of CO2 with 0.8%. The EC presented average values ​​of Mass flux of CH4 in the cover layer of 0.78 g / m².s.10-2 and 1.2x10-2 g / m².s, For CO2. On the other hand, the CC presented a mean CH4 mass flow of 0.77 g / m².s.10-2 and 1.54x10-2 g / m².s for CO2. Regarding emissions by alternative layers in the EC, the Layer vegetated with grass Esmeralda had better result among the others, but Still allowed the emission of 1.1% more than CH4, allowing 4.3 times more CO2 to escape When compared to conventional coverage. The DC module covered with grass Esmerada was able to retain 50.8% more CH4 and 24.6% more CO2 than the Conventional coverage; The Mombaça grass emitted 13.4% less CH4 than the layer conventional. The dry weed, although emitting 12.4% more of CH4 than the Has improved its performance over almost three times Previous experiment. The overlapping layer of dry weed-Cx emitted 17.2% less CH4 and 85.5% less CO2 than the conventional layer. The RCC was the material with the worst Between all the analyzed modules, 1820.9% more than CH4 emission and 1205.8% CO2 emission to the atmosphere, when compared to the conventional layer of roof. If the overlapped layer of RCC-Cx is considered, the decrease in Emission of CH4 compared to the conventional coverage layer is 12.9% and 59.0% Less CO2. The mass fluxes in both experiments presented a wide Range of CH4 and CO2, which indicates that several factors external to the cell are Responsible for this variation, but follow a behavior consistent with CH4 and CO2 emissions strongly influenced by the rainfall regime. The data Showed that the Esmeralda grass, in both experiments, Loss of gases into the atmosphere, in addition to making the high vulnerability. / O crescimento populacional é responsável pelo aumento na geração de resíduos sólidos, e pela necessidade da correta destinação, processamento e redução destes resíduos. Este trabalho objetivou avaliar o desempenho no aprisionamento dos gases de aterro por diferentes materiais usados como camada de cobertura em uma Célula Experimental (CE) e na Célula Central (CC) do Aterro Sanitário Metropolitano Oeste de Caucaia (ASMOC). As estimativas das emissões de gases foram realizadas por meio de ensaios com placa de fluxo estático na cobertura convencional e nas coberturas alternativas, além das medições feitas nos drenos. Os gases gerados na CE e lançados pelo dreno continham, em média, 16,48% de CH4, 13,23% de CO2 e 11,10% de; já na CC, as médias de emissão de CH4 variaram de 48,20% a 62%, com volumes de CO2 variando de 28,45% a 40,43%, e concentrações de O2 bem baixas, variando de 0,02% a 6,4%. A CC permitiu o escape de, em média, 0,5% de CH4 e 0,3% de CO2 na CE, enquanto que a CC diferiu apenas na média de CO2 com 0,8%. A CE apresentou valores médios de fluxo mássico de CH4 na camada de cobertura de 0,78 g/m².s.10-2 e de 1,2x10-2 g/m².s, para CO2. Já a CC apresentou média de fluxo mássico de CH4 de 0,77 g/m².s.10-2 e de 1,54x10-2 g/m².s para CO2. No tocante às emissões pelas camadas alternativas na CE, a camada vegetada com grama Esmeralda teve melhor resultado entre as demais, mas ainda permitiu a emissão de 1,1% a mais de CH4, deixando escapar 4,3 vezes mais CO2 quando comparada à da cobertura convencional. O módulo da CC coberto com grama Esmerada conseguiu reter 50,8% mais CH4 e 24,6% mais CO2 que a camada de cobertura convencional; o capim Mombaça emitiu 13,4% menos CH4 que a camada convencional. A capina seca, apesar de emitir 12,4% a mais de CH4 que a camada convencional, melhorou em quase três vezes seu desempenho com relação ao experimento anterior. Já a camada sobreposta de capina seca-Cx emitiu 17,2% menos CH4 e 85,5% menos CO2 que a camada convencional. O RCC foi o material com o pior resultado entre todos os módulos analisados, 1820,9% a mais de emissão de CH4 e 1205,8% de emissão de CO2 para a atmosfera, se comparada à camada convencional de cobertura. Já se for considerada a camada sobreposta de RCC-Cx, a diminuição na emissão de CH4 comparada à camada convencional de cobertura é de 12,9% e de 59,0% menos CO2. Os fluxos mássicos em ambos os experimentos apresentaram uma ampla faixa de variação do CH4 e CO2, o que indica que vários fatores externos à célula são responsáveis por esta variação, porém seguem um comportamento congruente às emissões de CH4 e CO2 fortemente influenciadas pelo regime de chuvas. Os dados coletados mostraram que a grama Esmeralda, em ambos os experimentos, minimizam a perda dos gases para atmosfera, além de tornar mais agradável o ambiente de alta vulnerabilidade.

Submitted by Marco Antônio de Ramos Chagas (mchagas@ufv.br) on 2017-06-05T17:41:51Z No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 388353 bytes, checksum: 897cb0cd725d5dc562e4412ef8f785fc (MD5) / Made available in DSpace on 2017-06-05T17:41:51Z (GMT). No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 388353 bytes, checksum: 897cb0cd725d5dc562e4412ef8f785fc (MD5) Previous issue date: 2005-12-16 / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico / O gênero Eucalyptus, da família Myrtaceae, apresenta cerca de 800 espécies e vários híbridos naturais. Além da importância biológica, é de múltiplo interesse comercial, destacando-se na indústria farmacêutica e na produção de biomassa lenhosa. A quantificação do conteúdo de DNA nuclear é útil em estudos de relações filogenéticas. Também é uma informação importante no mapeamento de genomas. Para a determinação do conteúdo de DNA nuclear em plantas, a citometria de fluxo é considerada a metodologia mais utilizada. No entanto, os estudos com Eucalyptus apresentam diferenças entre os valores encontrados. Outra técnica cujos resultados permitem a determinação da quantidade de DNA nuclear é a citometria de imagem. O objetivo deste trabalho é reavaliar as divergências nas quantificações de DNA nuclear em Eucalyptus, pela aplicação das citometrias de fluxo e de imagem. As quantificações foram realizadas com o uso do citômetro de fluxo, associado à coloração com iodeto de propídeo, dos núcleos isolados. Os padrões de referência foram folhas de Raphanus sativus Saxa (1,11 pg), Lycopersicon esculentum Stupicke (1,96 pg) e hemácias de Gallus gallus Leghorn fêmea (2,33 pg). Histogramas da intensidade de fluorescência relativa foram obtidos após a análise dos núcleos isolados dos padrões internos combinados com E. globulus, E. grandis e E. urophylla. Os valores em pg de DNA nuclear encontrados para E. globulus e E. grandis foram de 1,39 e 1,41 (padrão R. sativus), 1,20 e 1,22 (padrão L. esculentum), e 1,05 e 1,09 (padrão G. gallus). A quantificação para E. urophylla foi de 1,01 pg (padrão G. gallus). As espécies de Eucalyptus analisadas não apresentaram diferenças entre si maiores que 5,4% no conteúdo de DNA do genoma em pg. Todavia, variações em uma única planta, resultantes dos diferentes padrões, apresentaram divergências de até 32%. A citometria de imagem, dos núcleos corados pela reação de Feulgen, foi realizada para analisar o conteúdo de DNA de E. globulus, cujos valores foram de 1,16 (padrão R. sativus) e 1,02 pg (padrão L. esculentum). O uso de fluorocromos (intercalantes ou base específicos) e a interferência de compostos secundários na coloração foram considerados pontos críticos na análise pela citometria de fluxo; além dos padrões de referência e dos coeficientes de variação para ambas as citometrias. Em todas as análises os maiores coeficientes de variação foram 3,80 (citometria de fluxo) e 4,83% (citometria de imagem). Pela comparação entre as metodologias aplicadas, demonstrou-se o valor mais elevado da estimativa do conteúdo de DNA nuclear em E. globulus via citometria de fluxo, cerca de 16% maior do que na citometria de imagem. As proporções entre os padrões vegetais continuaram as mesmas em ambas as citometrias. Embora a quantificação mais precisa de DNA nuclear em picogramas para E. globulus seja proveniente da citometria de fluxo das folhas, pelo valor do CV, a mais acurada foi considerada a média dos dados obtidos via citometria de imagem dos meristemas, cujo valor foi 1,09 pg DNA/2C. / The Eucalyptus genus of Myrtaceae family has about 800 species and some natural hybrids. Beyond the biological importance, it is of multiple commercial interests, being distinguished in the pharmaceutical industry and the production of pulp biomass. The quantification of the nuclear DNA content is useful in studies of phylogenetics. Also it is important information for genome mapping. For nuclear DNA content determination, flow cytometry is considered the most appropriate methodology. However, Eucalyptus studies present differences between values. Another technique whose results allow the determination of the nuclear DNA amount is the image cytometry. The objective of this work was to reevaluate the divergences in the measures of nuclear DNA in Eucalyptus, for the application of flow and image cytometries. The measures had been carried through with the use of flow cytometer and stain with propidium iodide, of the isolated nuclei. The reference standards were leaves of Raphanus sativus cv. Saxa (1.11 pg), Lycopersicon esculentum cv. Stupicke (1.96 pg) and Gallus gallus female Leghorn erythrocytes (2.33 pg). Histograms of relative fluorescence intensity have generated after analysis of the isolated nuclei of combined internal standards with E. globulus, E. grandis and E. urophylla. The values in pg of nuclear DNA found for E. globulus and E. grandis xhad been of 1.39 and 1.41 (standard R. sativus), 1.20 and 1.22 (standard L. esculentum), and 1,05 and 1,09 (standard G. gallus). The quantification for E. urophylla pg was of 1.01 (standard G. gallus). The Eucalyptus species analyzed did not present differences among themselves greater than 5.4% in genomic DNA content in pg. However, intraspecific variations in only one plant, resultant of the different standards, presented divergences of up to 32%. The image cytometry analyses, with Feulgen reaction stain nuclei, were carried out to analyze the E. globulus DNA content, whose values were of 1.16 (standard R. sativus) and 1.02 pg (standard L. esculentum). The fluorochrome use (DNA- intercalating or base specific) and the secondary compounds interference in the staining were considered critical points in the analysis for the flow cytometry; besides the standards of reference and the coefficients of variation for both the cytometries. In all the analyses the bigger variation coefficients were 3.80 (flow cytometry) and 4.83 (image cytometry). For the comparison between the applied methodologies, the increase of the estimate of the nuclear DNA content was confirmed in E. globulus by flow cytometry, about 16% greater as compared to image cytometry. The ratios between plant standards remained the same ones in both techniques. Although the most precise nuclear DNA quantification in picogramas for E. globulus was proceeding from flow cytometry of leaves, by CV value, the most accurate was considered the average of meristem image cytometry data, whose value was 1.09 pg DNA/2C.

Made available in DSpace on 2015-12-06T23:47:41Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2008 / A tolerância ao lipopolissacarídeo (LPS) ocorre quando animais e células expostas ao LPS tornam-se hiporesponsivas a uma subseqüente dose de LPS. Acredita-se que esse mecanismo esteja envolvido na diminuição da resposta celular observada em pacientes com sepse grave e choque séptico. O objetivo do estudo foi avaliar a indução da tolerância em monócitos de voluntários sadios, em sangue total, após a exposição in vitro ao LPS, medido pela detecção de citocina intracelular e espécies reativas de oxigênio (EROs). Material e métodos: As células do sangue periférico foram condicionadas com pequenas dses de LPS por 18h e desafiadas com diferentes agonistas dos Toll-like receptors (lipopeptídeo ativador de macrófagos (MALP-2), flagelina e LPS) e bactérias gram-negativa (Pseudomonas aeruginosa) e gram-positiva (Staphylococcus aureus) mortas por calor ou condicionadas com pequenas doses de MALP-2 por 18h e desafiadas com MALP-2 ou LPS. Para detecção da interleucina-6 (IL-6) intracelular, amostras de sangue total foram estimuladas por 6h. Os monócitos foram identificados pelos parâmetros de dispersão frontal e dispersão lateral e positividade para CD14. As amostras foram marcadas para a verificação da produção de IL-6 intracelular nos monócitos por citometria de fluxo. Para indução de EROs, o sangue total foi estimulado por 30 minutos com LPS, P. aeruginosa, S. aureus. A produção de espécies reativas de oxigênio foi medida por citometria de fluxo pela detecção do 2’,7’ diclorofluoresceína-diacetato. Resultados: O condicionamento com doses crescentes de LPS resultou em menor detecção de IL-6 intracelular nos monócitos após desafio com LPS. Efeito similar foi observado com MALP-2, P. aerugionosa, S. aureus, mas não com a flagelina. O condicionamento com MALP-2 e desafio com MALP-2 ou LPS não resultou em menor detecção de IL- 6 intracelular nos monócitos. O condicionamento com 15ng/mL de LPS, por outro lado, resultou numa produção de EROs preservada ou aumentada nos monócitos após o desafio com LPS, P. aeruginosa, S. aureus. Conclusão: O fenômeno da tolerância envolve uma regulação complexa, na qual a produção de citocinas pró-inflamatórias, como a IL-6, está diminuída, enquanto a produção de EROS está preservada ou até aumentada. / Tolerance to lipopolyssacharide (LPS) occurs when animals or cells exposed to LPS become hyporesponsive to a subsequent challenge of LPS. This mechanism is believed to be involved in the down-regulation of cellular responses observed in patients with severe sepsis and septic shock. The aim of this investigation was to evaluate the induction of tolerance in monocytes of healthy volunteers, in whole blood, after LPS-exposition in vitro, assessed by intracellular cytokine detection and reactive oxygen species (ROS) generation. Material and Methods: Peripheral blood cells were conditioned with small doses of LPS for 18h and challenged with different agonists of Toll like receptors (Macrophage-activating lipopeptide-2 (MALP-2), Flagellin and LPS) and whole gram-negative (Pseudomonas aeruginosa) and gram-positive (Staphylococcus aureus) killed bacteria or conditioned with small doses of MALP-2 for 18h and challenged with MALP-2 or LPS. For detection of intracellular interleukin-6 (IL-6) samples of whole blood were stimulated for 6h. Monocytes were identified by forward scatter and side scatter parameters and CD14 positive staining. The samples were stained to verify the intracellular production of IL-6 on monocytes by flow cytometry. For induction of ROS, whole blood was stimulated for 30 minutes with LPS, P. aeruginosa and S. aureus. ROS production was measured by flow cytometry, using 2’,7’- dichlorfluorescein-diacetate detection. Results: The conditioning with increasing doses of LPS resulted in lower intracellular detection of IL-6 in monocytes after the challenge with LPS. Similar effect was observed with MALP-2, P. aeruginosa, and S. aureus, but not with Flagellin. The conditioning with MALP-2 and challenge with MALP-2 or LPS did not result in lower intracellular detection of IL-6 in monocytes. LPS conditioning with 15ng/mL of LPS, on the other hand, resulted in preserved or increased production of ROS in monocytes after challenge with LPS, P. aeruginosa and S. aureus. Conclusion: The phenomenon of tolerance involves a complex regulation, in which the production of pro-inflammatory cytokines such as IL-6 is diminished, whereas the production of ROS is preserved or even increased. / BV UNIFESP: Teses e dissertações

Made available in DSpace on 2015-12-06T23:47:42Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2008 / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq) / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / A tuberculose é considerada um problema de saúde pública mundial. Estima-se que um terço da população mundial está infectada pelo Mycobacterium tuberculosis. Trabalhos avaliando a interação patógeno vs. hospedeiro tem incentivado o estudo dos mecanismos envolvidos na resposta imunológica inicial nos indivíduos infectados e doentes. A participação dos linfócitos T na resposta contra a micobactéria tem destacado a importância dessas células na imunopatogênese. Uma subpopulação de linfócitos T, as células T γδ têm sido investigada quanto à sua participação na resposta imunológica, principalmente frente a processos infecciosos e inflamatórios. Essas células carregam cadeia TCR γδ, atuam tanto na resposta inata como na adaptativa e são encontradas em epitélios de alguns órgãos e no sangue periférico. Duas subpopulações são predominantes no sangue periférico, aquelas expressando TCR Vγ2Vδ2 e outras expressando TCR VγnVδ1. A subpopulação Vδ2 tem demonstrado reatividade a produtos micobacterianos, enquanto que os mecanismos específicos das células T Vδ1 permanecem desconhecidos. Este trabalho propôs investigar através da citometria de fluxo a distribuição dos linfócitos T γδ, Vδ1 e Vδ2 na infecção pelo M. tuberculosis. Este trabalho foi realizado com amostras de pacientes com tuberculose pulmonar na fase aguda e durante terapia específica, indivíduos expostos ao M. tuberculosis e controles saudáveis. Nós encontramos uma diminuição na freqüência de células T Vδ2 nos pacientes com tuberculose, permanecendo estável durante terapia. Ao contrário as células T Vδ1 revelaram tanto uma freqüência aumentada na fase aguda, como também aumento contínuo ao longo da terapia específica. Com base no impacto da doença na freqüência desses linfócitos T γδ, acreditamos que essas células estejam envolvidas na resposta imunológica inicial contra a micobactéria, e que exista uma provável função complementar dessas células com as xi células T αβ. Nós recomendamos futuros estudos para explorar e avaliar a funcionalidade das células T Vδ1 e Vδ2, esses dados serão de grande valia para melhor compreender a contribuição dessas células na resposta imune durante a tuberculose. / Tuberculosis is an enormous challenge to global health. One third of the world’s population is estimated to be infected by the Mycobacterium tuberculosis. Previous reports assessing the interaction between the pathogen and the host have promoted further studies on the mechanisms involved during the innate immune response of infected individuals. The participation of T lymphocytes in the response against the mycobacterium has revealed the importance of these cells in immunopathogenesis of the disease. The γδ T cells, a subset of T lymphocytes, have been investigated with regard to their participation in the immune response, mainly against infectious and inflammatory processes. These cells express TCR γδ chains, participating in innate as well as adaptive responses, and are found in the epithelium of some organs and in the peripheral blood. There are two predominant subsets of cells in the peripheral blood: those expressing TCR Vγ2Vδ2 chains and those expressing TCR VγnVδ1 chains. The Vδ2 subset has demonstrated reactivity to compounds produced by M. tuberculosis, while the specific mechanisms of Vδ1 T cells remain unknown. Using flow cytometry, this study aims were to investigate the frequency of both Vδ1 and Vδ2 subsets of γδ T cells in Mycobacterium tuberculosis infection. This study was performed with samples that include acute tuberculosis patients, those receiving specific therapy, exposed individuals, and healthy controls. We found that the frequency of Vδ2 T cells was diminished in tuberculosis patients, and remained steadily low during specific therapy. In contrast, the Vδ1 T cells subset displayed not only increased frequency at acute phase, but also continued to rise throughout the course of specific therapy. Based on the impact of the disease on the γδ T cells frequency, we believe that these cells may be involved in an innate immune response xiii against the mycobacterium. Additionally, it is likely that they play a complementary role to αβ T cells during infectious processes. We recommend future studies to explore and evaluate the funcionality of Vδ1 and Vδ2 T cells in order to better understand the contribution of these subsets in the immune response during tuberculosis infection. / BV UNIFESP: Teses e dissertações