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Avaliação da produção de citocinas inflamatórias apos estimulação por lipoproteína L32(LipL32), lipopolissacarídeo (LSP) e lipopeptídeo ativador de monócitos-2 (MALP-2) e expressão de receptores de superfície em monócitos de pacientes com leptospirose / Production of inflammatory cytokines after lipoprotein L32 (LipL32), lipopolysaccharide (LPS) and macrophage-activating lipopeptide-2 (MALP-2) stimulation and evaluation of superficial receptors expression on monocytes of infected patients with leptospirosisPavanelli, Tais Francisco [UNIFESP] January 2008 (has links) (PDF)
Made available in DSpace on 2015-12-06T23:47:53Z (GMT). No. of bitstreams: 0
Previous issue date: 2008 / A leptospirose constitui uma importante zoonose, encontrada em regiões de clima tropical, ocorrendo principalmente em épocas chuvosas. O controle da infecção depende do adequado reconhecimento do microorganismo pelos receptores de reconhecimento de padrão de patógenos, os TLRs, presentes nas células do sistema imune inato do hospedeiro. A ativação dos TLRs é fundamental para o desencadeamento da resposta inflamatória, mediadora da resposta de proteção e de lesão no processo infeccioso. Objetivos: Avaliar a expressão dos receptores TLR2,
TLR4 e CD14 na superfície de monócitos e a resposta in vitro aos estímulos LipL32
(extraído de Leptospira sp.), MALP-2 (antígeno sintético de Mycoplasma fermentans) e
LPS (antígeno extraído de Salmonella abortus equi) ligantes dos TLRs, medida pela
produção de citocinas, em pacientes com leptospirose. Métodos: Foram incluídos 07
pacientes com quadro clínico e laboratorial de leptospirose e 07 voluntários sadios,
utilizados como controle. As células mononucleares do sangue periférico (CMSP) foram
separadas utilizando ficoll-paque, congeladas e armazenadas em nitrogênio líquido.
Após descongelamento, verificação da viabilidade e acerto da concentração de células
para 1x106
células/mL foi mensurada a expressão de TLR2, TLR4 e CD14 na superfície
de monócitos. O restante da suspensão de células foi incubada por 6 horas com os
estímulos de 1000ng/mL de LipL32, 0,4U/mL de MALP-2 ou 100ng/mL de LPS. Após a
primeira hora de incubação foi adicionado monensina para bloqueio da secreção de
citocina. Em seguida, as CMSP foram marcadas com CD14, fixadas, permeabilizadas e
expostas aos anticorpos anti-IL-6 e anti-TNF-α para detecção intracelular da produção
destas citocinas inflamatórias nos monócitos. Foram adquiridos 10.000 eventos
combinado-se morfologia e positividade para CD14 em citometria de fluxo.
Resultados: Não foi observada diferença significativa na resposta inflamatória entre
pacientes com leptospirose e voluntários sadios quando CMSP foram estimuladas in
vitro com MALP-2 e LipL32 para indução da produção de citocinas inflamatórias (IL-6 e
TNF-α) em monócitos. Todavia, a produção de TNF-α foi menor após estímulo com
LPS (p=0,035), o que não ocorreu com a produção de IL-6. Em relação à expressão de
receptores de superfície, foi observado aumento da expressão de TLR2 (p=0,025) na
superfície de monócitos dos pacientes, porém não houve diferença na expressão de
TLR4 e CD14. Conclusões: Neste estudo demonstramos que a capacidade de
reconhecimento de antígenos pelos monócitos do sangue periférico de pacientes com
leptospirose está preservada ou aumentada. Além disso, observamos que a produção
de citocinas inflamatórias frente a antígeno da própria Leptospira (LipL32) e outro
antígeno agonista de TLR2 (MALP-2) está mantida. Entretanto, a produção de citocina
inflamatória frente ao LPS (agonista de TLR4) mostrou-se complexa podendo estar
influenciada pela tolerância cruzada. / The Leptospirosis is one of the world's most important zoonoses, found in regions of tropical climate, occurring mainly in rainy seasons. The control of infection depends on the proper recognition of the microorganism by receptors for recognition of patterns of pathogens, the TLRs present in the cells of the innate immune system of the host. The activation of TLRs is crucial for triggering the inflammatory response, mediator of the response of protection in case of injury and infection. Objectives: To evaluate the
expression of receptors TLR2, TLR4 and CD14 on the monocytes surface in vitro and
response to stimuli LipL32 (extracted from Lestospira sp.), MALP-2 (synthetic antigen of
Mycoplasma fermentans) and LPS (antigen extracted from bacteria-gram negative)
binders of TLRs, as measured by production of cytokines in patients with leptospirosis.
Methods: 07 patients with clinical and laboratory of leptospirosis were included and 07
healthy volunteers, used as controls. The peripheral blood mononuclear cells (PBMC)
were separated using ficoll-paque, frozen and stored in liquid nitrogen. After thawing,
checking the feasibility and wisdom of the concentration of cells to 1x106
células/mL was
measured the expression of TLR2, TLR4 and CD14 on the monocytes surface. The rest
of the cell suspension was incubated for 6 hours with the stimuli of 1000ng/mL of
LipL32, 0.4 U / mL of MALP-2 or 100ng/mL of LPS. After the first hour of incubation was
added monensin for blocking the secretion of cytokine. Then the PBMC were stained
with CD14, set, permeabilizaded and exposed to anti-IL-6 and anti-TNF-α for detection
of intracellular production of inflammatory cytokines in monocytes. They were acquired
10,000 events combined to morphology and positive for CD14 in flow cytometry.
Results: There was no significant difference in the inflammatory response among
patients with leptospirosis and healthy volunteers when PBMC were stimulated in vitro
with MALP-2 and LipL32 to induce the production of inflammatory cytokines (IL-6 and
TNF-α) in monocytes. However, the production of intracellular of TNF-α was lower after
stimulation with LPS (p = 0035), which did not occur to the production of IL-6.
Regarding the expression of surface receptors, it was observed increased expression of
TLR2 (p = 0025) on the monocytes surface of patients, but there was no difference in
the expression of TLR4 and CD14. Conclusions: This study demonstrated that the
ability of recognition of antigens by peripheral blood monocytes of patients with
leptospirosis is preserved or increased. Also, we observed that the production of
inflammatory cytokines in front of the Leptospira antigen (LipL32) and another antigen
agonist of TLR2 (MALP-2) is maintained. Meanwhile, the production of inflammatory
cytokine front of LPS (agonist of TLR4) proved to be complex may be influenced by
cross tolerance. / BV UNIFESP: Teses e dissertações
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Estudo das subpopulações linfocitárias em sangue periférico de pacientes com hanseníase / Study of lymphocyte subpopulations in peripheral blood of patients with leprosySolon, Vitória Régia Magalhães January 2012 (has links)
SOLON, Vitória Régia Magalhães. Estudo das subpopulações linfocitárias em sangue periférico de pacientes com hanseníase. 2012. 78 f. Dissertação (Mestrado em Patologia) - Universidade Federal do Ceará. Faculdade de Medicina, Fortaleza, 2012. / Submitted by denise santos (denise.santos@ufc.br) on 2013-12-05T12:08:54Z
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Previous issue date: 2012 / Leprosy is a chronic infectious disease caused by the Mycobacterium leprae, a resistant alcohol-acid bacillus. It has a high infectivity, although the pathogenicity is low. Clinical manifestations present a great diversity. Host immune response is an important determinant of this clinical diversity, whilst lymphocytes collaborate to it. Thus, the present study aimed to describe lymphocyte subpopulations: T lymphocytes (CD3+), T helper lymphocytes (CD4+), T cytotoxic (CD8+), T CD4+CD8+, B (CD19+), Natural killers-NK (CD3- CD16+ CD56+) and T Natural killers - NKT (CD3+CD16+ CD56+) in peripheral blood samples from patients with leprosy, before and after the treatment with multidrugtherapy. Patients were selected at the Dona Libania Dermatology Center, at Fortaleza-CE, Brazil. The determination in each subpopulation of lymphocytes was done by flow-cytometer and statistical analysis by GraphPad Prism 5.0 for Windows. Significance was established at p values of <0.05. A total of 133 samples were studied, while 79 (59,4%) were males and 54 (40,6%)females. Median age of patients was 43 years old for the group before treatment and 46 years old for the group after treatment. Nine patients presented with paucibacillary and 124 with multibacillary form. NK (CD3-CD16+ CD56+) lymphocytes medians cells/mm³) were 142.0 [15,0–463,0] and 189,5 [18,0 – 1037,0], respectively for the groups before and after treatment, with a p value of 0.0484. On the other hand, no differences were observed when pauci and multibacillary groups were compared. T lymphocytes (CD3+), T helper lymphocytes (CD4+), T cytotoxic lymphocytes (CD8+), T (CD4+CD8+), B lymphocytes (CD19+) and NKT lymphocytes (CD3+CD16+CD56+)were similar at the groups before and after treatment and also at pauci and multibacillary. In conclusion, data from this study shows a reduction at NK lymphocytes (CD3-CD16+CD56+) populations in leprosy before any therapeutical intervention. After leprosy treatment, a recovery of this cell population occurs. / A hanseníase é uma doença infecciosa crônica causada pelo Mycobacterium leprae, um bacilo álcool-ácido resistente. Tem alta infectividade, porém baixa patogenicidade, e quando se manifesta, apresenta-se sob uma grande diversidade de formas clínicas. Essa diversidade depende, em grande parte, da resposta imunológica do hospedeiro, sendo os linfócitos, em sua plasticidade, componentes essenciais no desenvolvimento da imunidade. Assim, este trabalho teve como objetivo descrever as subpopulações linfocitárias: linfócitos T totais (CD3+), T auxiliares (CD4+), T citotóxicos (CD8+), T CD4+CD8+, B (CD19+), Natural killers-NK (CD3- CD16+ CD56+) e T Natural killers - NKT (CD3+ CD16+ CD56+) no sangue periférico de pacientes portadores de hanseníase, antes e após uso da multidrogaterapia. Os pacientes foram selecionados no Centro de Dermatologia D. Libânia, Fortaleza-CE, Brasil. A determinação de linfócitos em cada subpopulação foi realizada por citômetria de fluxo e análise estatística pelo programa GraphPad Prism 5.0 para Windows. A significância foi estabelecida para valores de p<0,05. Um total de 133 amostras foram utilizadas para as comparações, sendo 79 (59,4%) do gênero masculino e 54 (40,6%) do gênero feminino. A mediana da idade dos pacientes foi de 43 anos no grupo pré-tratamento e de 46 anos no pós-tratamento. Nove pacientes foram incluídos na forma paucibacilar e 124, na multibacilar. As medianas das contagens (células/mm3) de linfócitos NK (CD3-CD16+ CD56+) nos grupos antes e após tratamento foram 142,0 [15,0–463,0] e 189,5 [18,0 – 1037,0], respectivamente (p=0,0484), enquanto não houve diferenças quando foram comparados os grupos pauci e multibacilar. As contagens de linfócitos T totais (CD3+), T auxiliares (CD4+), T citotóxicos (CD8+), T (CD4+CD8+), B (CD19+), e NKT(CD3+CD16+CD56+) mantiveram-se inalteradas nos grupos antes e pós-tratamento, assim como nos grupos pauci e multibacilar. Em conclusão, os resultados deste estudo apontam para uma redução na população de células NK (CD3-CD16+CD56+) em indivíduos com hanseníase antes de qualquer intervenção terapêutica. Após o tratamento, há uma recuperação na contagem desta população celular.
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Efeito de quatro semanas de treinamento sobre os índices de aptidão aeróbia e força muscularOliveira, Mariana Fernandes Mendes de January 2014 (has links)
Tese (doutorado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Desportos, Programa de Pós-Graduação em Educação Física, Florianópolis, 2014. / Made available in DSpace on 2015-02-05T20:23:09Z (GMT). No. of bitstreams: 1
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Previous issue date: 2014 / O objetivo deste estudo foi analisar e comparar os efeitos de quatro diferentes tipos de treinamento aeróbio sobre parâmetros relacionados à aptidão aeróbia e a força muscular. Trinta e quatro sujeitos fisicamente ativos, do sexo masculino e feminino, foram randomicamente divididos em quarto grupos de treinamento intervalado (TI): alta intensidade (AI, n = 9), baixa intensidade com restrição de fluxo sanguíneo (RFS, n = 9), baixa intensidade (BI, n = 6) ou combinado AI e RFS na mesma sessão de treinamento (AI + RFS, n = 10). Os sujeitos realizaram, antes e após quatro semanas de treinamento: 1) testes progressivos até a exaustão para a determinação do início do acúmulo de lactato sanguíneo (OBLA), do consumo máximo de oxigênio (VO2max) e da potência máxima (Pmax); 2) testes de carga constante até a exaustão voluntária (Tlim) nas intensidades de 95 e 110% da Pmax para determinação da Potência Crítica (PC); 3) Três testes de carga constante na intensidade de 30% da Pmax, para determinação da constante de tempo da cinética do consumo de oxigênio (?); 4) determinação da força isométrica máxima dos músculos extensores do joelho. Durante o período de 4 semanas todos os grupos realizaram 12 sessões de treino compostas por 2 séries de 5 repetições na primeira semana (com adição de 2 repetições a cada três sessões). Cada repetição teve duração de 2 min, intercaladas com 1 min de descanso passivo. O grupo BI e RFS realizaram o treinamento a 30% da Pmax, porém para o grupo RFS foi aplicada uma pressão externa (140-200mmHg) nos membros inferiores apenas durante o exercício. O grupo AI iniciou a repetição a 110% da Pmax e reduziu 5% a cada 30 seg. O grupo AI + RFS realizou uma séria semelhante ao grupo AI e a outra igual ao grupo RFS. Apesar do tempo (MCKENNA et al.) das sessões serem iguais para todos os grupos, o trabalho total e a frequência cardíaca foram diferentes entre os grupos AI (4424 kJ e 96 %FCmax), AI + RFS (2583 kJ e 84 %FCmax) e RFS (1300 kJ 70 %FCmax). Os resultados demonstram que os parâmetros aeróbios (VO2max, Pmax, PC, OBLA e cinética do VO2) obtiveram melhoras percentuais significantes e com magnitude semelhante após 4 semanas de treinamento para os grupos AI (10; 15; 20; 25 e 34%, respectivamente), AI + RFS (5; 11; 16; 22 e 28%, respectivamente) e RFS (5; 11; 15; 22 e 20%, respectivamente). Porém apenas o grupo RFS foi eficiente em melhorar (10%) concomitantemente a força isométrica máxima. Assim, podemos concluir que o treinamento com RFS foi superior aos demais treinospelo fato de melhorar concomitantemente as variáveis aeróbias e a força isométrica máxima.<br> / Abstract : The aim of this study was to analyze and compare the effects of four different aerobic training modes on parameters of aerobic fitness and muscular strength. Thirty-four active male and female subjects were randomly assigned to one of four interval training (IT) groups: high intensity (HI, n = 9), low-intensity blood flow restriction (BFR, n = 9), low-intensity (LOW, n = 6) or combined HI and BFR on the same training session (HI + RFS, n = 10). Before and after 4 weeks intervention period, all subjects completed: 1) incremental test until voluntary exhaustion to determine onset blood lactate accumulation (OBLA), maximal oxygen uptake (VO2max) and maximal power output (Pmax); 2) time to exhaustion (Tlim) at 95 e 100% of Pmax to determine Critical Power (CP); 3) three constant load at 30% of Pmax, to determine the time constant (t) of the VO2 kinetics; and 4) maximal isometric knee extension strength. During the four weeks intervention period all groups performed 12 training sessions consisted of 2 sets of 5-8 repetitions. Each repetition lasted 2-min, interspersed by 1-min passive rest. The training intensity was maintained at 30% Pmax for LOW and BFR, and at ~103% Pmax (starting at 110% Pmax and then, decreasing 5% Pmax at each 30s) for HIT. BFR+HIT performing one set of each training mode (BFR and HIT) in the same training session. During BFR training mode a cuff was inflated (140-200mmHg) during the exercise bouts and deflated during rest intervals. After completing three sessions, one repetition/set was added per week. Even though the similar session duration among all groups, total work and heart rate were significantly different among AI (4424 kJ e 96 %FCmax), AI + RFS (2583 kJ e 84 %FCmax) and RFS (1300 kJ 70 %FCmax). Our results showed that the magnitude of significant training-induced score changes percentages from aerobic parameters were similar among AI (10; 15; 20; 25 e 34%, respectively), AI + RFS (5; 11; 16; 22 e 28%, respectively) and RFS (5; 11; 15; 22 e 20%, respectively). However, the training-induced strength change score percentage (10%) was only significant in BFR. Therefore, it can be concluded that the training with BFR was better compared to all other training modes due to concomitantly improvements on both aerobic parameters and maximal isometric strength.
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Implantação da análise do conteúdo de DNA por citometria de fluxo para avaliação do prognóstico de hemopatias malignas nos pacientes atendidos pelo serviço de hematologia do Hospital Universitário da Universidade Federal de Santa CatarinaMengatto, Vanessa January 2014 (has links)
Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências da Saúde, Programa de Pós-graduação Multidisciplinar em Saúde, Florianópolis, 2014 / Made available in DSpace on 2015-02-05T20:26:36Z (GMT). No. of bitstreams: 1
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Previous issue date: 2014 / Os cânceres são doenças que apresentam expansão clonal descontrolada de células somáticas, promovendo a ruptura da organização tecidual. O genoma humano possui inúmeros mecanismos de proteção de sua integridade. Quando não ocorre a reparação dos danos no DNA, podem ocorrer desequilíbrios genéticos; entre esses, as aneuploidias, as quais são boas indicadoras da presença de neoplasia, assim como, podem sugerir o prognóstico em vários tumores. Segundo a Organização Mundial da Saúde (OMS), a classificação dos tumores dos tecidos hematopoético e linfoide deve ser baseada em uma abordagem diagnóstica com ênfase nos seguintes parâmetros: morfológico, fenotípico, genotípico e características clínicas. Diante disso, o objetivo deste trabalho foi implantar a análise do conteúdo de DNA, por citometria de fluxo, para avaliação do prognóstico de hemopatias malignas nos pacientes atendidos pelo Serviço de Hematologia do Hospital Universitário da Universidade Federal de Santa Catarina. Para atingir o objetivo, inicialmente a metodologia foi padronizada com células de sangue periférico de oito indivíduos sem neoplasias hematológicas. Após essa etapa, foram iniciados os testes com amostras de medula óssea, sangue periférico, e aspirados e biópsias de linfonodo de pacientes que apresentaram células patológicas no exame imunofenotípico, entre os meses de maio e dezembro de 2013. Na padronização da metodologia, foi estabelecida a utilização de anticorpos monoclonais (AcMo) conjugados ao fluorocromo FITC para não ocorrer interferência com a faixa de emissão da fluorescência do iodeto de propídeo (PI). Os AcMo padronizados para cada doença foram: CD20 e CD22, para Leucemia Linfoblástica Aguda do tipo B (LLA-B) e linfomas; CD 7 para Leucemia Linfoblástica Aguda do tipo T (LLA-T); e CD38, para Mieloma Múltiplo (MM) - todos conjugados ao fluorocromo FITC. No total, foram analisadas 25 amostras de pacientes que apresentaram células patológicas no exame imunofenotípico. A maior quantidade de amostras foi proveniente de pacientes com linfoma- principalmente Linfoma de Burkitt e Linfoma de Células do Manto -, os quais apresentaram 73,3% de presença de aneuploidias. Além disso, também foram analisadas amostras com células de LLA e MM. As LLAs exibiram 100% de presença de aneuploidias; enquanto o MM,25%. A partir deste estudo, foi possível padronizar a metodologia para análise do conteúdo de DNA de linfomas, LLA e MM. Os resultados encontrados indicam que a citometria de fluxo é um bom método para auxiliar na estimativa do prognóstico dos pacientes diagnosticados com neoplasias hematológicas.<br> / Abstract: Cancers are diseases with uncontrolled clonal expansion of somatic cells that promotes breakdown of tissue organization. The human genome has numerous mechanisms to protect its integrity. When the DNA damage repair does not occur, genetic imbalances can happen; among them, the aneuploidies, which are good indicators of malignancy, and may suggest a prognosis in several tumors. According to the World Health Organization (WHO), the classification of tumours of haematopoietic and lymphoid tissues should be based on a diagnostic approach with emphasis on the following parameters: morphological, phenotypic, genotypic and clinical characteristics. Therefore, the aim of this study was to implement the analysis of DNA content by flow cytometry in order to assess the prognosis of hematological malignancies in patients treated by the Hematology Service at University Hospital of Universidade Federal de Santa Catarina. Initially, the methodology was standardized with peripheral blood cells of individuals without hematologic malignancies. After, it was performed the tests with samples of bone marrow aspirates, peripheral blood, and lymph node aspirates and biopsies from patients with pathological cells inimmunophenotyping, between May and December 2013. During the development of standardized methodology, it was established the use of monoclonal antibodies (MoAb) conjugated to FITC fluorochrome to prevent the interference with the emission range of propidium iodide(PI) fluorescence. The MoAb standardized for each disease were: CD20 and CD22 for B- Acute Lymphoblastic Leukemia (B-ALL) and lymphomas; CD7 for T- Acute Lymphoblastic Leukemia (T-ALL), and CD38 for Multiple Myeloma (MM) - all conjugated to FITC fluorochrome. A total of 25 samples obtained from patients with pathological cells in immunophenotyping were analyzed. The largest number of samples came from patients with lymphomas, especially Burkitt Lymphoma and Mantle Cell Lymphoma, which showed 73.3% of aneuploidy. Moreover, samples with ALL cells and MM cells were also analyzed. ALL showed the presence of 100% aneuploidy, while the MM, 25%. By the present study, it was possible to standardize the methodology for analysis of DNA content of lymphoma, ALL and MM. The results indicate that flow cytometry is a good method to assist the estimation of prognosis of patients diagnosed with hematological malignancies.
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Avaliação da resposta inflamatória in vivo e in vitro na esporotricose felina em diferentes apresentações clínicasMiranda, Luisa Helena Monteiro de January 2013 (has links)
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Previous issue date: 2014-11-18 / Fundação Oswaldo Cruz. Instituto de Pesquisa Clínica Evandro Chagas, Rio de Janeiro, RJ, Brasil / A ocorrência de formas graves de esporotricose felina, aliada a lesões sem granulomas e ricas em estruturas leveduriformes, evidencia a suscetibilidade destes animais para a doença e enfatiza a importância do estudo da sua patogenia. O objetivo deste estudo foi descrever o processo inflamatório e a carga fúngica das lesões em diferentes apresentações clínicas, e sua relação com o perfil de leucócitos no sangue periférico de gatos com esporotricose por meio da técnica de citometria de fluxo (CF) e com a infecção pelo Vírus da Imunodeficiência Felina (FIV) e/ou pelo Vírus da Leucemia Felina (FeLV). Gatos com lesões cutâneas com isolamento de Sporothrix sp. foram incluídos no estudo, separados nos grupos L1, L2 e L3 (lesões em um, dois e três ou mais locais, respectivamente) e submetidos a coleta de sangue e de fragmentos de lesão. O estado geral dos animais foi classificado como bom, regular ou ruim. Ao exame histopatológico, as lesões foram agrupadas de acordo com o processo inflamatório (granulomatoso ou inespecífico), grau de ativação de fagócitos predominantes nos granulomas (macrófagos ou células epitelióides), organização do granuloma (bem formado ou mal formado) e intensidade dos tipos celulares no infiltrado
A carga fúngica foi verificada pelas técnicas de impregnação pela prata de Grocott (IPG) e imuno-histoquímica (IHQ). A CF foi aplicada no sangue periférico, utilizando anticorpos monoclonais para os marcadores CD4, CD8, CD21, CD14 e granulócitos. Cento e um animais foram incluídos no estudo: 20 do grupo L1, 22 do grupo L2 e 59 do grupo L3. O processo inflamatório granulomatoso supurativo (PIGS) foi observado em 99 casos. A maioria das lesões, sobretudo no grupo L3, apresentavam granulomas mal formados (pvalor= 0,032) e com predomínio de macrófagos (p-valor=0,010). A IPG e a IHQ evidenciaram estruturas leveduriformes (EL) em 94 casos cada uma, sendo a concordância entre as duas observada em 92 casos. As duas técnicas associadas apresentaram sensibilidade de 98,0%. A carga fúngica de mais de 400 EL/ campo (400x) ocorreu em 48,5% dos casos com PIGS e foi predominante nos animais do grupo L3. Houve correlação entre granulomas mal formados e com predomínio de macrófagos e a carga fúngica superior a 100 EL/ campo (p-valor<0,01). A CF foi realizada em 33 casos de esporotricose e cinco animais não infectados (Grupo controle). O percentual de linfócitos T CD8+ foi maior nos animais dos grupos L2 e L3 (p-valor=0,01)
O maior percentual de células CD4+ esteve associado ao grupo L1 e ao estado geral bom (pvalor= 0,04 e 0,03, respectivamente). A expressão CD8low ocorreu em 20 animais com esporotricose, sendo predominante no grupo L3 (p-valor=0,01), e não ocorreu no grupo controle. Esta expressão foi associada a granulomas com predomínio de macrófagos (p-valor=0,01) e ocorreu em 76,2% dos casos com carga fúngica acima de 100 EL/campo. Três animais foram positivos para FIV, quatorze para FeLV e dois para os dois testes. Não houve correlação entre estes testes e os demais achados. Estes resultados sugerem associação entre a resposta bem organizada, menor carga fúngica e aumento de linfócitos CD4+ com o controle da doença, manutenção do estado geral bom e lesões localizadas. No estado geral ruim, as lesões disseminadas e alta carga fúngica estavam relacionadas a existência de um padrão de resposta com aumento de células CD8+ e aumento da expressão de CD8low / The occurrence of severe forms of feline sporotrichosis, along with lesions without granulomas
and rich in yeast-like forms, demonstrate the su
sceptibility of these anim
als to the disease and
emphasizes the importance of the study of its pathogenesis. The aim of this study was to describe
the inflammatory changes and fungal load at different clinical presentations and its relationship
with the profile of leukocytes in peripheral blood of cats with sporotrichosis by means of flow
cytometry (FC) technique and with Feline Immunodeficiency Virus (FIV) and / or Feline
Leukemia Virus (FeLV). Cats presenting cutaneous lesions with isolation of
Sporothrix
sp. in
culture were included. They were separated in groups L1, L2 and L3 (lesions in one, two and
three or more sites, respectively) and were subjected to blood sample collection and to biopsy of
the lesion. The general condition of the animal
s was classified as good, fair or poor.
Histologically, the lesions were described according to the inflammatory process (granulomatous
or nonspecific), degree of activation of predominant phagocytes within the granulomas
(macrophages or epithelioid cells), granulomas organization (well-formed or poorly formed) and
intensity of cell types
within the inflammation. The fungal lo
ad was assessed by Grocott silver
stain (GSS) technique and immunohistochemistry (IHC). The FC was applied to peripheral blood
by means of monoclonal antibodies to target CD4, CD8, CD21, CD14 and granulocytes. One
hundred and one animals were included: 20 in group L1, 22 in group L2 and 59 in group L3.
Histologically, 99 lesions showed suppurative granulomatous inflammation (SGI). Most lesions,
specially in the group L3, showed poorly formed granulomas (p-value=0.032) and predominantly
macrophages (p-value=0.010). The GSS and IHC s
howed yeast-like forms (YF) in 94 cases each
one and their concordance was noted in 92 cases.
Together, the two techniques showed sensivity
of 98.0%. The fungal load of more than 400 YF/Field (400x) occurred in 48,5% of cases by GSS
and was predominant in group L3. There was a correlation between poorly formed granulomas
with macrophages predominance and the fungal load exceeding 100 YF/Field (p-value<0.01).
The CF was performed in 33 cases of sporotrichosis and five uninfected cats (control group).
The percentage of CD8
+
T cells was greater in the groups L2 and L3 (p-value=0.001). The higher
percentage of CD4
+
T cells was correlated to group L1 and to good general condition (p-
value=0.04 and 0.03, respectively). The reduced expression of the CD8 molecule (CD8low)
occurred in 20 animals with sporotrichosis, being predominat in group L3 (p-value=0.01), and
was not observed in control group. This expression was associated with granulomas with
macrophage predominance (p-value=0.01) and occurred in 76.2% of cases with fungal load
above 100 YF/field.
Three animals were positive to FIV, four
teen to FeLV and two to both tests.
There was no correlation between these tests and the other findings. These results suggest an
association of the well-organized response, the lower fungal load and increased CD4
+
T
lymphocytes with the control of the disease, al
ong with the good general condition and localized
lesions. At the poor general condition, the dissem
inated lesions and high fungal load were
related to a response patter
n with and increase of CD8
+
T lymphocytes and particulary of the
CD8
low
expression.
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Desenvolvimento de um sistema para gerenciar os processos regulatórios do Laboratório de Pesquisa Clínica em DST e Aids do Instituto de Pesquisa Clínica Evandro Chagas da Fundação Oswaldo CruzKrstic, Tânia January 2013 (has links)
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Previous issue date: 2015-10-29 / Fundação Oswaldo Cruz. Instituto de Comunicação e Informação Científica e Tecnológica em Saúde. Rio de Janeiro, RJ, Brasil / A atividade regulatória em pesquisa clínica visa o cumprimento de todas as etapas frente às autoridades regulatórias para a condução da pesquisa em conformidade com as Boas Práticas Clínicas. Segundo a International Conference on Harmonization (ICH \2013 Conferência Internacional de Harmonização), as autoridades regulatórias são instâncias dotadas de poder de regulamentação que, conforme as normas de Boas Práticas Clínicas, incluem as autoridades que revisam os dados clínicos e as autoridades que realizam a inspeção. Devido à complexidade do processo regulatório no Brasil é necessário estar atento às modificações na legislação e normas para submissão dos projetos de pesquisa às autoridades reguladoras em um curto prazo de tempo, para cumprir o planejamento dos períodos de duração dos estudos clínicos. O presente trabalho tem o objetivo de desenvolver e disponibilizar um sistema para gerenciar os processos regulatórios do Laboratório de Pesquisa Clínica em DST e Aids do Instituto de Pesquisa Clinica Evandro Chagas, da Fundação Oswaldo Cruz, atendendo à regulamentação nacional e internacional. Uma vez que processo é um conjunto de ações ordenadas e integradas para um fim produtivo específico, ao final do qual serão gerados produtos e/ou serviços e/ou informações, foi realizado o mapeamento das atividades desenvolvidas no dia a dia do setor de assuntos regulatórios do centro para obtenção das aprovações regulatórias das pesquisas em DST e Aids, bem como do processo administrativo para ingresso da equipe de trabalho nos protocolos
Para a representação gráfica dos processos foi usada a notação de modelagem de processos de negócios, Business Process Model Notation (BPMN), que é um padrão definido pelo Governo Federal e já utilizada pela Fundação Oswaldo Cruz. O software BizAgi® foi usado para modelagem dos processos regulatórios. Como resultado desse trabalho foi desenvolvido um sistema para armazenar em um único local todas as informações regulatórias das pesquisas, incluindo também um módulo com informações sobre a equipe de trabalho autorizada a participar das pesquisas. Foi desenvolvido um sistema para controle do fluxo dos documentos regulatórios e de pessoal do Laboratório de Pesquisa Clínica em DST e Aids que permite ainda à equipe o acesso para consulta aos documentos regulatórios. Espera-se que outros centros de pesquisa do IPEC e de outras unidades da Fiocruz possam utilizar este instrumento / Regulatory activity in Clinical Research aims
at the compliance of all the steps required by
the Regulatory Authorities for the conduction of
research in accordance with Good Clinical
Practices. According to the International
Conference on Harmonization (ICH), Regulatory
Authorities are instances endowed
with regulatory power that, a
ccording to the standards of
Good Clinical Practices, include
the authorities who review
the clinical data, and the
authorities conducting the inspec
tion. Due to the complexity of
the regulatory process in
Brazil is crucial to be aware of changes in le
gislation and regulations
for the submission of
research projects to regulatory authorities in a sh
ort period of time, to comply with the clinical
studies scheduled time periods.
This study aims to develop and
make available a database to
manage the regulatory processes of
Laboratório de Pesquisa Clínic
a em DST/Aids at Instituto
de Pesquisa Evandro Chagas (IPEC), Fundação Oswaldo Cruz (Fiocruz)
, according to
national and international regula
tions. As process is a set of
coordinated and integrated
actions to a specific productive result, which will eventually yield
products/services/information, a mapping of the da
ily activities of the Laboratory Regulatory
Affairs to obtain regulatory
approvals for research on STD and Aids, as well as the
administrative procedures for including the stu
dy team in the protocols. For the process’
graphical representation modeling business
processes’ notation wa
s used, the Business
Process Model Notation (BPMN), which is a st
andard defined by the Federal Government,
and already used by the Oswaldo Cruz Founda
tion. The BizAgi ® so
ftware was used for
modeling of the regulatory processes. As a result
of this work, we developed a system to store
in one place all the regulatory information
of the research, including a new module of
information about the study team
authorized to partic
ipate in the research. We developed a
system for controlling the flow of regul
atory documents and study personnel at the
Laboratory of Clinical Research
on Aids and STDs, which also
allows the study team’s access
to the regulatory documents. It is hoped that ot
her research laboratories at IPEC and other
Fiocruz units are able to use this instrument as well.
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Genômica comparativa em ambiente computacional distribuídoaplicabilidade e potencial no estudo de homologia entre protozoáriosKotowski Filho, Nelson Peixoto January 2015 (has links)
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Previous issue date: 2015 / Fundação Oswaldo Cruz. Instituto Oswaldo Cruz. Rio de Janeiro, RJ, Brasil / A inferência de homologia entre organismos é uma atividade da genômica comparativa que possibilita compreender melhor a relação entre os mesmos e, por conseguinte, sua distância evolutiva. Especificamente, a identificação de genes ortólogos, ou seja, aqueles que têm sua origem em um ancestral comum, permite oferecer melhorias na anotação funcional de genes, uma vez que genes ortólogos tendem a ter sua função conservada. Com a crescente disponibilidade de genomas através de técnicas de NGS, a construção e atualização de bases de dados de ortólogos representam um desafio constante, pois demandam o estudo e identificação das relações entre os genes de tais organismos, em um volume de dados cada vez mais extenso e a um custo computacional cada vez mais elevado. Nesta tese propomos a solução para nuvem computacional elastic-OrthoSearch, um workflow científico de genômica comparativa inspirado no OrthoSearch, responsável pela inferência de homologia entre organismos com o uso de abordagem baseada em melhores hits recíprocos e perfis de Markov. Também propomos uma metodologia para criação de bases de ortólogos construída através do reuso do OrthoSearch. Esta metodologia mostrou-se capaz de alavancar a oferta de grupos ortólogos e assim auxiliar, por exemplo, na identificação de alvos de protozoários / Homology inference among organisms is a comparative genomics tasks which allows for a better understanding on how such organisms are related to each other and on their evolutionary distance. Specifically, the identification of orthologous genes – those who share a common ancestor – allows for functional gene annotation improvements, as orthologous genes tend to preserve their functions.
The increasing amount of genomic data provided by the NGS techniques makes the orthologous databases’ building and update processes a challenging task. It requires the identification and study of the organisms’ genes relationships, in an extensive data volume and at an increasing computational cost.
In this thesis we propose elastic-OrthoSearch, a cloud-enabled comparative genomics scientific workflow, derived from OrthoSearch. It aims at providing homology inference among organisms, in a reciprocal best hits and Markov profiles approach.
We also propose an improved orthologous database creation methodology built on top of OrthoSearch. Such methodology has shown means to offer a broader orthologous groups dataset, which could in turn aid on Protozoa target identification.
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Dimensionamento, construção e realização de testes de desempenho de um tubo de vórtice que opere em baixas pressões para acionamento por energia solar / Sizing, constructions and realization of tests of performance of a vortex tube that operate at low pressures to drive by solar energySilva, George Miranda Alves de Moraes e 15 March 2012 (has links)
SILVA, G. M. A. M. Dimensionamento, construção e realização de testes de desempenho de um tubo de vórtice que opere em baixas pressões para acionamento por energia solar. 2012. 88 f. Dissertação (Mestrado em Engenharia Mecânica) – Centro de Tecnologia, Universidade Federal do Ceará, Fortaleza, 2012. / Submitted by Marlene Sousa (mmarlene@ufc.br) on 2015-03-05T11:30:12Z
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Previous issue date: 2012-03-15 / This paper aims to scale, build and test a new vortex tube, operating from the use of compressed air at pressures below the pressure ranges typical of this unconventional cooling device for the purpose of obtaining drafts cold for air conditioning. For that were originally studied theoretical and experimental aspects of flow processes through tests performed in the laboratory with a commercial vortex tube. Known influence of geometric parameters (such as the ratio between the length and internal diameter of the tube and the diameter of the diaphragm hole) and the thermophysical properties (such as inlet pressure gauge in the compressed air tube and the mass flow rate of the stream cold) air in the performance of the vortex tube, gave up the step of sizing the same. After engineered and designed parts of the tube, the final steps were the manufacture of pipe and conducting experimental tests, beyond the selection of a photovoltaic array to provide the power required to drive the compressor. The results of the laboratory tests with a vortex tube counter-current type, internal diameter D equal to 16.5 mm and a length equal to fifteen times this value, and configured diaphragm orifice diameter of 0.5D showed that temperatures of the cold air flow of 9.5 °C at a mass flow of 40% of the mass flow input are obtained when delivered by the compressor inlet gauge pressure of 3 bar and volumetric flow rate of 3.15 L/s compressed air. / O presente trabalho tem como objetivos dimensionar, construir e testar um novo tubo de vórtice, que opere a partir da utilização de ar comprimido em pressões abaixo das faixas de pressão típicas deste dispositivo de refrigeração não-convencional, com o propósito de obter correntes de ar frio para climatização. Para tanto, foram inicialmente estudados aspectos teórico-experimentais dos processos de escoamento, através de testes realizados em laboratório com um tubo de vórtice comercial. Conhecida a influência dos parâmetros geométricos (tais como a razão entre o comprimento e diâmetro interno do tubo e o diâmetro do orifício do diafragma) e das propriedades termofísicas (tais como a pressão manométrica de entrada no tubo do ar comprimido e o percentual de vazão mássica da corrente de ar frio) no desempenho do tubo de vórtice, deu-se a etapa de dimensionamento do mesmo. Depois de projetadas e desenhadas as peças do tubo, as etapas finais foram a fabricação do tubo e a realização de testes experimentais, além da seleção de um arranjo fotovoltaico que forneça a potência necessária para o acionamento do compressor. Os resultados dos testes em laboratório com um tubo de vórtice do tipo contra-corrente, de diâmetro interno D igual 16,5 mm e comprimento igual a quinze vezes esse valor, e configurado com diafragma de diâmetro do orifício de 0,5D, mostraram que são obtidas temperaturas da corrente de ar frio de 9,5 ºC a uma vazão mássica de 40% da vazão mássica de entrada, quando fornecido pelo compressor pressão manométrica de entrada de 3 bar e vazão volumétrica de 3,15 L/s de ar comprimido.
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Propostas de melhorias nos processos administrativos de uma empresa construtora a partir da aplicação do lean office / Proposals for improvements in administrative procedures of a construction company from the application of lean officeCruz, Lídyci Thatielle Gurgel 26 November 2012 (has links)
CRUZ, L. T. G. Propostas de melhorias nos processos administrativos de uma empresa construtora a partir da aplicação do lean office. 2012. 295 f. Dissertação (Mestrado em Engenharia Civil: Estruturas e Construção Civil) – Centro de Tecnologia, Universidade Federal do Ceará, Fortaleza, 2012. / Submitted by Marlene Sousa (mmarlene@ufc.br) on 2015-05-28T13:07:04Z
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2012_dis_ltgcruz.pdf: 9323467 bytes, checksum: 771bb645a3eeb707f3267600a47ec6af (MD5) / Made available in DSpace on 2015-05-28T18:05:25Z (GMT). No. of bitstreams: 1
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Previous issue date: 2012-11-26 / The insertion of lean in construction together with its benefits arises the corporate interest in adopting the lean philosophy in the office, which is called lean office. The extermination of the existing waste and defining improvements in office focused on flows of document, process and information related to customers are challenges to achieving these improvements. Furthermore, most companies have little knowledge regarding their administrative processes what makes it difficult to diagnose activities that do not add value, culminating in the questioning of "how to minimize the waste generated in the administrative area of construction companies?". Faced with this problem, this paper aims to propose improvements in administrative processes of a construction company in the light of lean thinking philosophy. Furthermore, it also aims to critically analyze these processes mapped streams in search of waste; elaborate Value Stream Mapping (VSM) for future state and analyze the interfaces between administrative sectors mapped. To obtain these goals, the methodology used was divided into three steps: choose the value stream, study case and data analysis. The choice of the value stream comprises the definition of the administrative sectors of the company that would be studied, namely supply, maintenance, finance, accounting and human resources. Since the study case was divided into five phases: formulation of Value Stream Mapping (VSM) in the current state of the chosen sectors, identifying lean metrics which would be able to demonstrate the impact of efforts to implement the improvements, study of the interface between these administrative sectors, validation of the proposals for improvements and drafts of VSMs in the future state. Data analysis consisted of VSMs in current state and sources of evidence used, the diagnosis of the waste in processes and their respective classifications and analysis of proposals suggested improvements that could optimize the flow of sectors. Furthermore, the interface of mapped sectors was also analyzed. The research findings point to the choice of five administrative departments, namely supplies, maintenance, finance, accounting and human resources. For each sector a VSM was prepared in current and future states identifying theirs losses and ratings and the proposed improvements can demonstrate effectiveness through estimation of Task Accomplishment Times (TATs) and Permanence length (PL). Finally, we designed a generalized VSM involving all sectors, which enabled to illustrate how interaction between departments and key information exchanged between them in one sketch / A inserção do lean na construção civil em conjunto com os benefícios advindos por ele vem impulsionando o interesse das empresas na adoção da filosofia lean no escritório, a qual é denominada de lean office. O extermínio dos desperdícios existentes e a definição de melhorias no escritório focada nos fluxos de documento, de processos e de informações vinculadas aos clientes são desafios impostos a concretização destas melhorias. Além disso, o pouco conhecimento das empresas a respeito de seus processos administrativos acaba dificultando o diagnostico destas atividades que não agregam valor, culminando no questionamento de “como minimizar os desperdícios gerados na área administrativa de empresas construtoras?”. Diante desta problemática, esta dissertação objetiva propor melhorias nos processos administrativos de uma empresa construtora à luz da filosofia do pensamento enxuto. Além disso, visa também analisar criticamente os fluxos mapeados destes processos na busca de desperdícios; elaborar os mapeamentos dos fluxos de valor (MFV) futuro e analisar as interfaces entre os setores administrativos mapeados. Para a obtenção destas metas, a metodologia utilizada foi dividida em três etapas: escolha do fluxo de valor, estudo de caso e análise de dados. A escolha do fluxo de valor compreendeu na definição de quais os setores administrativos da empresa que seriam estudados. Já o estudo de caso foi dividido em cinco fases: elaboração dos Mapeamentos de Fluxo de Valor (MFVs) no estado atual dos setores escolhidos, identificação de métricas leans capazes de demonstrar o impacto dos esforços de implementação das melhorias, estudo da interface entre estes setores administrativos, validação de propostas de melhorias e esboço dos MFVs no estado futuro. A análise de dados compreendeu os MFVs atuais e as fontes de evidências utilizadas, o diagnóstico de desperdícios dos processos e suas respectivas classificações e a análise de propostas de melhorias sugeridas que pudesse otimizar o fluxo dos setores. Além disso, foi analisada também a interface dos setores mapeados. Os resultados de pesquisa apontam a escolha de cinco departamentos administrativos, sendo eles suprimentos, manutenção, financeiro, contabilidade e recursos humanos. Para cada setor foi elaborado o MFV nos estados atuais e futuros, identificadas as perdas e suas classificações e validadas as propostas de melhorias capazes de demonstrar eficácia através da estimativa dos tempos de realização das atividades (TRAs) e dos tempos de permanências (TPs). E por fim, foi elaborado um MFV generalizado envolvendo todos os setores, o qual permitiu ilustrar o modo interação entre os departamentos e as principais informações permutadas entre eles em um só esboço
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Desenvolvimento de uma bancada gravimétrica automática para calibração de medidores de vazão com diferentes fluidosParra Sejas, Miriam Zareth January 2016 (has links)
Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro Tecnológico, Programa de Pós-Graduação em Engenharia de Automação e Sistemas, Florianópolis, 2016. / Made available in DSpace on 2017-06-27T04:07:12Z (GMT). No. of bitstreams: 1
346009.pdf: 9344378 bytes, checksum: 3270eb4a53087a9a2c7c72a9e4f53a57 (MD5)
Previous issue date: 2016 / Atualmente nos processos de produção tornou-se muito delicado o tema dos erros na medição de vazão, já que esses erros representam geralmente perdas econômicas para as empresas. Com a finalidade de minimizar esses erros deve-se ter o cuidado de que os dados de medição dos instrumentos se encontrem dentro das especificações de incerteza de medição e para isso é importante realizar calibrações periódicas. Uma forma de realizar a calibração nos medidores de vazão é através das comparações mássicas (método gravimétrico), já que a massa é uma propriedade fundamental da matéria e seu valor não é alterado sob diferentes condições de temperatura e pressão, o que faz com que o processo de calibração de vazões mássicas ocorra de forma mais fácil. Em vista disso, o presente trabalho apresenta a descrição de dois sistemas de calibração implementados, ambos para baixas vazões de líquidos, de até 6 kg/h, e baseados no método gravimétrico. Um primeiro protótipo de baixo custo foi construído para identificar os pontos mais críticos e permitir a construção mais acertada de um segundo protótipo, a versão melhorada do primeiro. Para ambos os protótipos, foi usado um medidor de vazão tipo Coriolis como transdutor em avaliação, que serviu como padrão para avaliação das bancadas. O primeiro protótipo apresentou desvios da ordem de 2% quando seus resultados foram comparados com as indicações do medidor Coriolis. No segundo protótipo, foram corrigidos os pontos fracos do primeiro protótipo, e com isso foi possível diminuir 42 vezes o erro do primeiro protótipo em relação ao transdutor empregado como padrão, atingindo valores da ordem de 0,03%. A construção do segundo protótipo foi realizada de forma a permitir sua operação com diferentes fluidos de trabalho, sendo assegurada através de projeto a compatibilidade com água, diferentes tipos de óleo mineral e gasolina. Uma avaliação da incerteza de medição dos ensaios realizados com o segundo protótipo indicou uma incerteza expandida de ±0,002 kg/min, sendo esse valor inferior à incerteza encontrada para o medidor Coriolis, o tipo com melhores especificações metrológicas do mercado.<br> / Abstract : Currently in production processes, flow measurement errors have become a serious issue, these errors generally represent economic losses. In order to minimize them, one must it ensure that the measurement data of the instruments are within the specifications of measurement uncertainty and, for this purpose, it is important to perform periodic calibrations. One way to perform flow meter calibrations is through mass comparisons (gravimetric method), since the mass is a fundamental property of matter and its value is not changed under different conditions of temperature and pressure, which allows the mass flow calibration process to occur more easily. In view of this, the present work presents the description of two calibration systems implemented for operating with low flow rates of liquids, up to 6 kg/h, and based on the gravimetric method. A first prototype of low cost was built to identify the most critical points and, thus, support the development of a second prototype, an improved version of the first. For both prototypes, a Coriolis flowmeter was used in the position of the transducer to be evaluated, but it, in fact, served as a standard for evaluating the responses of both systems. The first prototype presented errors around 2% when its measurements are compared with the indications of the Coriolis meter. The second prototype corrected the main weaknesses of the first prototype, achieving errors 42 times lower than the ones presented by the first prototype (absolute errors are of approximately 0.03%). The second prototype was designed to allow its operation with different working fluids, being ensured through project compatibility with water, different types of mineral oil, and gasoline. An evaluation of the measurement uncertainty of the second prototype indicated an expanded measurement uncertainty of ±0.002 kg/min, which is lower than the uncertainty value found for the Coriolis meter, the flowmeter principle with better metrological specifications in the market.
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