Made available in DSpace on 2015-07-13T12:10:07Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2015-02-10. Added 1 bitstream(s) on 2015-07-13T12:25:45Z : No. of bitstreams: 1 000838217.pdf: 2068210 bytes, checksum: 7cc196b4afd9c4a009cb398bc82c6339 (MD5) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / O câncer de colo uterino (ou câncer cervical) é uma neoplasia maligna que tem a infecção pelo HPV como o principal fator de risco para o seu surgimento. As terapias atuais para o tratamento do câncer cervical têm como maior desvantagem a excisão substancial do estroma cervical e muitos efeitos adversos associados aos quimioterápicos, principalmente a cisplatina. Nesse cenário, a terapia fotodinâmica (TFD) vem se mostrando uma alternativa promissora, especialmente se combinada a tratamentos convencionais. A técnica é baseada na administração de um agente fotossensibilizador não tóxico ao paciente com posterior exposição a uma fonte de luz de comprimento de onda específico, resultando em resposta citotóxica via dano oxidativo. Diante disso, o presente estudo teve como objetivo avaliar, in vitro, a citotoxicidade, o tipo de morte induzido e os efeitos genotóxicos e mutagênicos da TFD em monoterapia e associada à cisplatina sobre as linhagens SiHa, C-33 A e HaCaT, utilizando os fotossensibilizadores Photogem e azul de metileno. Observou-se que tanto a terapia fotodinâmica mediada por azul de metileno (AMTFD) quanto a terapia mediada pelo Photogem (PGTFD) foram eficazes em reduzir o número de células viáveis, com a citotoxicidade sendo dependente da dose de luz. A cisplatina teve menor eficácia sobre as três linhagens quando comparada à TFD. Porém, a combinação cisplatina + TFD apresentou efeito sinérgico intenso e provocou maior morte celular em todas as condições testadas. A sequência de aplicação dos tratamentos (cisplatina + TFD ou TFD + cisplatina) demonstrou-se importante e dependente do fotossensibilizador. Com relação ao tipo de morte celular provocado, tanto a AMTFD quanto a PGTFD induziram morte independente de caspases, mas a AMTFD induziu morfologia típica de necrose, enquanto a PGTFD induziu morfologia mais similar à apoptose. A cisplatina induziu predominantemente apoptose e as terapias... / Cervical cancer is a malignant tumor that has HPV infection as the main risk factor for its emergence. Current therapies for the treatment of cervical cancer have as major disadvantage substantial excision of cervical stroma and many adverse effects associated with chemotherapy, especially cisplatin. In this scenario, photodynamic therapy (PDT) has proven to be a promising alternative, specially if combined with conventional treatments. The technique is based on the administration of a non-toxic photosensitizing agent to the patient with subsequent exposure to a light source of a specific wavelength, resulting in cytotoxic response by oxidative damage. Thus, the present study intended to evaluate in vitro cytotoxicity, the type of induced death and the genotoxic and mutagenic effects of PDT alone and associated with cisplatin on the cell lines SiHa, C-33 A and HaCaT, using the photosensitizers Photogem and methylene blue. It was observed that both the photodynamic therapy mediated by methylene blue (MBPDT) and Photogem mediated therapy (PGPDT) were effective in reducing cell viability with cytotoxicity being dependent on the light dose. Cisplatin was less effective over the three lines compared to PDT. However, the combination cisplatin + PDT had a greater synergistic effect and caused greater cell death in all conditions tested. The sequence of treatment application (PDT + cisplatin or cisplatin + PDT) was important and depended on the photosensitizer. Regarding the type of induced cell death, both AMPDT and PGPDT induced caspase-independent death, but AMPDT induced the typical morphology of necrosis, while PGPDT induced morphology was most similar to apoptosis. Cisplatin predominantly induced apoptosis; and combination therapy induced greater apoptosis- or necrosis-like rate according to the cell line, but always with a higher percentage of dead cells than monotherapies. MBPDT, either as monotherapy or in combination with cisplatin was ... / FAPESP: 12/25414-5

Made available in DSpace on 2015-08-20T17:10:09Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2015-04-14. Added 1 bitstream(s) on 2015-08-20T17:26:57Z : No. of bitstreams: 1 000840266_20160429.pdf: 112142 bytes, checksum: f753980f523bb8e5e7108026940280ab (MD5) Bitstreams deleted on 2016-05-04T13:08:27Z: 000840266_20160429.pdf,. Added 1 bitstream(s) on 2016-05-04T13:09:31Z : No. of bitstreams: 1 000840266.pdf: 2388303 bytes, checksum: 0cd278104ebd428e40cc96127a077555 (MD5) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / A ocorrência de uma variedade de agentes patogênicos resistentes aos antibióticos atuais continua a ser um problema, especialmente quando as infecções bacterianas estão crescendo em biofilme. Neste estudo, propomos o uso da terapia fotodinâmica (TFD) como monoterapia e também associada à antibioticoterapia como um tratamento alternativo. O objetivo deste estudo foi analisar os efeitos da TFD mediada pelo azul de metileno (AM) em Staphylococcus aureus (ATCC 25923) e Escherichia coli (ATCC 25922), como biofilme e em fase planctônica. Diferentes concentrações de fotossensibilizador (400; 200; 100; 50; 25; 12,5; 6,25 μg/mL) e fluência (2,8; 5,6; 11.2 22,4J/cm²) foram testadas. Também realizamos experimentos que avaliaram o efeito sinérgico da terapia fotodinâmica e o antibiótico ciprofloxacina. Os efeitos bactericidas da TFD como monoterapia não foram estatisticamente aumentados com a concentração de fotossensibilizador, e bactérias em biofilmes foram menos afetadas que as da fase planctônicas. Entretanto, o efeito sinérgico da terapia fotodinâmica seguida de ciprofloxacina no biofilme aumentou a redução bacteriana. Em biofilme para S. aureus, utilizando 50 ug/mL de AM, irradiação 22,4 J/cm² e a concentração de 15.625 ug/mL de antibiótico, tivemos uma redução de 61,80%. Para E. coli, houve uma erradicação bacteriana em todas as concentrações testadas na TFD combinada com antibiótico, tanto a irradiação de 11,2 J/cm², como a irradiação 22,4 J/cm². O crescimento bacteriano foi observado apenas na concentração mais baixa do antibiótico testada, de 0,125 ug/mL, em concentrações de 50 e 25 ug/mL de AM. / The occurrence of a variety of pathogens resistant to current antibiotics remains the major problem especially when bacterial infections are growing in biofilm. In this study, we propose the use of photodynamic therapy (PDT) as monotherapy and also associated with antibiotic therapy as an alternative treatment. The aim of this study was to analyze the effects of PDT mediated by methylene blue (MB) on Staphylococcus aureus (ATCC 25923) and Escherichia coli (ATCC 25922) as biofilm and planktonic phase. Different concentrations of photosensitizer (400; 200; 100; 50; 25; 12,5; 6,25g/mL), and fluency of 2.8; 5.6; 11.2 22,4J/cm2 were tested. We also carried out experiments that evaluated the synergistic effect of photodynamic therapy and antibiotic ciprofloxacin. The bactericidal effects with PDT as monotherapy were not statistically increased with the concentration of photosensitizer and bacteria in biofilms were less than affect in the planktonic phase. Although, the synergistic effect of photodynamic therapy on biofilms followed by ciprofloxacin amplified the bacterial reduction. In biofilm for S. aureus, using 50 μg/ml MB, irradiation 22,4 J/cm² and the concentration of 15,625 μg/mL of antibiotic, got a reduction of 61,80%. For E. coli, there was a bacterial eradication at all concentrations tested in PDT combined with antibiotic, both the irradiation 11,2 J/cm² as the irradiation 22,4 J/cm². Bacterial growth was observed only in the lowest tested concentration of the antibiotic, 0,125 μg/mL, at concentrations of 50 and 25 μg/mL MB.

Made available in DSpace on 2015-09-17T15:25:02Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2015-02-04. Added 1 bitstream(s) on 2015-09-17T15:46:48Z : No. of bitstreams: 1 000843792.pdf: 1140282 bytes, checksum: c02bd3dec85c769c085f21d4e6af2c4a (MD5) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / Vários estudos in vitro demonstraram que a terapia fotodinâmica (TFD) apresenta efeitos antimicrobianos sobre as leveduras do gênero Candida, podendo representar uma terapia alternativa e coadjuvante no tratamento da estomatite protética. Assim, este trabalho teve como objetivo avaliar o efeito antifúngico de múltiplas sessões de terapia fotodinâmica sobre biofilmes de Candida formados na superfície de resina acrílica. Para realização desse trabalho, biofilmes monotípicos de C. albicans, C. tropicalis e C. glabrata foram formados, durante 5 dias, em corpos de prova confeccionados com resina acrílica termicamente ativada. A seguir, foram realizadas 5 sessões de terapia fotodinâmica, em intervalos de 24 horas, sobre os biofilmes previamente formados. Foram avaliadas 2 modalidades de terapia fotodinâmica, incluindo aplicação de Laser de Arseneto de Gálio e Alumínio associado ao fotossensibilizador azul de metileno ou terapia com Diodo Emissor de Luz (LED) verde e fotossensibilizador eritrosina. Os grupos controles foram tratados apenas com solução fisiológica. Após a realização de cada aplicação da terapia fotodinâmica, os biofilmes aderidos aos corpos de prova foram submetidos à homogeneização ultra-sônica e as células dispersas foram semeadas em Ágar Sabouraud Dextrose (37 °C / 48 h) para contagem de unidades formadoras de colônias (UFC/corpo de prova). Os resultados obtidos foram submetidos à análise de Variância (ANOVA) e teste de Tukey considerando-se nível de significância de 5%. Para todos os micro-organismos os resultados da redução de UFC (log) foram comparados aos controles da primeira, segunda, terceira, quarta e quinta aplicações com o Laser e com o LED. Para C. glabrata as reduções para cada aplicação foram respectivamente de 3,22 e 4,83; 1,49 e 2,21; 1,6 e 2.05; 1,53 e 5,09 e 2,75 e 3,03. Para C. albicans foram 0,12 e 0,36; 0,54 e... / Several in vitro studies have demonstrated the antimicrobial effects of photodynamic therapy (PDT) against yeast of the genus Candida, representing an alternative or coadjuvant tool for the treatment of denture stomatitis. Therefore, the objective of this study was to evaluate the antifungal effect of multiple PDT sessions on Candida biofilms formed on the surface of acrylic resin. For this purpose, monotypic biofilms of C. albicans, C. tropicalis and C. glabrata were grown for 5 days on test specimens consisting of thermally activated acrylic resin. Next, the biofilms formed were submitted to five sessions of PDT at intervals of 24 hours. Two modalities of PDT were evaluated: a gallium-aluminum-arsenide laser combined with methylene blue as photosensitizer, and a green light-emitting diode (LED) and erythrosine as photosensitizer. The control groups were only treated with saline. After each application of PDT, the biofilms adhered to the test specimens were submitted to ultrasonic homogenization and the dispersed cells were seeded onto Sabouraud dextrose agar (37 oC, 48 h) for determination of colony-forming units (CFU/test specimen). Analysis of variance (ANOVA) and the Tukey test were used for analysis of the results, adopting a level of significance of 5%. For all microorganisms, the results of CFU(log) reduction were compared to controls of the first, second, third, fourth and fifth application of the laser and LED. For C. glabrata, the reductions in each application were, respectively, 3.22 and 4.83, 1.49 and 2.21, 1.6 and 2.05, 1.53 and 5.09, and 2.75 and 3.03. Reductions of 0.12 and 0.36, 0.54 and 0.93, 0.15 and 0.06, 0.96 and 0.75, and 0.89 and 1.82 were observed for C. albicans. Candida tropicalis showed the following reductions: 0.16 and 0.14, 1.52 and 2.84, 1.86 and 2.1, 1.81 and 2.39, and 0.86 and 1.36. In conclusion, laser- and LED-mediated PDT were effective in reducing...

Made available in DSpace on 2014-08-13T14:51:00Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2014-02-20Bitstream added on 2014-08-13T17:59:39Z : No. of bitstreams: 1 000776228.pdf: 5343697 bytes, checksum: 6c774fdc58dfbb1de52eb34f163ddc1b (MD5) / O câncer de pele é o tipo mais frequente de câncer no Brasil, correspondendo a 25% de todos os cânceres registrados no País. Queratoses actínicas (QAs) são lesões pré-malignas comuns, com uma incidência estimada em 60% dos pacientes com idade acima de 60 anos, as QAs podem evoluir para carcinoma espinocelular (CEC) que é um tipo de câncer de pele não melanoma agressivo, podendo ser responsável por 34% das mortes por câncer de pele em todo mundo. A terapia fotodinâmica (TFD) em QAs com o ácido 5- aminolevulínico (ALA) ou aminolevulinato de metila (Metil-ALA) é uma opção de tratamento aceita para esta doença, devido à sua eficácia e excelentes resultados estéticos. O objetivo deste trabalho foi Avaliar e comparar a dor referida pelos pacientes, durante o tratamento de TFD utilizando o medicamento ALA e Metil-ALA a15%. Foram selecionados 40 pacientes com QAs em membros superiores, e realizado a divisão de dois grupos de 20 pacientes, grupo I administrado o medicamento ALA e no grupo II administrado Metil-ALA, em seguida os membros foram ocluídos permanecendo por 3 horas, após o curativo foi removido e realizado a iluminação da área por 40 minutos, com fluência de 36 Jzcm, no protótipo Kerato PDT a base de emissores de LED. Durante a iluminação e a cada 5 minuto foi aplicada uma escala visual numérica (EVN) para mensurar a dor referida. As lesões foram quantificadas e fotografadas antes e 30 dias após o tratamento. Os valores obtidos foram submetidos a análise estatística pelo teste t de Student, teste t pareado, teste de Friedman e teste de Tukey. Os resultados mostraram que não houve diferença estatisticamente significativa entre os dois grupos, e que ambos os medicamentos utilizados mostraram-se eficazes no tratamento de QAs. Comparando a dor referida pelos pacientes durante o tratamento, não houve diferença estatística entre o sexo feminino e o masculino, e nem entre os dois grupos, porém para o ... / Skin cancer is the most common type of cancer in Brazil, accounting for 25 % of all cancers registered in actinic keratoses country (AKs) are common precancerous lesions , with an estimated 60% of patients over the age incidence 60 years, AKs can progress to squamous cell carcinoma (SCC ) is a type of aggressive skin cancer melanoma, may be responsible for 34 % of deaths from skin cancer in the world. Photodynamic therapy (PDT) for AK with 5 - aminolevulinic acid ( ALA ) or methyl aminolevulinate ( Methyl- ALA ) is an accepted treatment option for this disease , due to its effectiveness and excellent cosmetic results . The aim of this study was to evaluate and compare the pain reported by the patients during the treatment of PDT using the medicine Methyl- ALA and ALA a15 %. AK 40 patients were selected for the upper limbs, the division performed and two groups of 20 patients, the drug administered group I and group II ALA administered -ALA methyl , then the remaining members were occluded for 3 hours, after curative was removed and held the lighting in the area for 40 minutes with a fluence of 36 J / em 2 , the prototype Kerato PDT -based LED emitters . During the lighting and every 5 minutes a numerical visual scale (NVS) was applied to measure referred pain . The lesions were imaged and quantified before and 30 days after treatment. Data were statistically analyzed by Student's paired t-test, Friedman test and Tukey 's t testo The results showed no statistically significant difference between the two groups, and that both drugs used were effective in the treatment of AKs . Comparing the pain reported by the patients during treatment , there was no statistical difference between the female and the male , nor between the two groups, although for males the pain scale was statistically higher when used Methyl- ALA . We conclude that both drugs may be indicated for the treatment of AKs scattered in the upper limb, and more studies focused ...

As Ceratoses Actínicas (CA) são lesões hiperceratóticas, displásicas de pele. Estão comumente localizadas em áreas expostas ao sol como couro cabeludo, face e antebraços. Acredita-se que a radiação ultravioleta (RUV) cumulativa seja o maior fator etiológico, considerando-se, também, a imunossupressão e infecção pelo papilomavírus humano(HPV) fatores contribuintes importantes. Existe o potencial de uma CA se transformar em Carcinoma Espinocelular (CEC) e, dessa forma, indica-se tratamento para as referidas lesões. Terapias tradicionais como crioterapia, curetagem e eletrocoagulação, medicações tópicas como 5-fluorouracil (5-FU) são ainda habituais. Porém novas opções como terapia fotodinâmica, diclofenaco e imiquimod 5% creme apresentam boa eficácia e perfil menor de efeitos colaterais, embora possam representar custo maior. A Terapia Fotodinâmica (TFD) envolve o uso de um agente fotossensibilizante, oxigênio e luz de comprimento de onda específico para causar morte celular. O fotossensibilizante geralmente utilizado é o ALA (ácido aminodeltalevulínico) ou seu éster metilaminolevulinato (MAL). No tecido lesionado, esses são convertidos em porfirinas fotoativas (PFAs) por enzimas da via biossintética do heme. A ativação é realizada por meio de luzes de comprimentos de onda que variam de 405 nm a 635 nm. Células displásicas ou neoplásicas produzem maior quantidade de porfirinas que os queratinócitos normais, sendo destruídas durante a aplicação da luz. O imiquimod 5% creme é um imunomodulador que estimula a resposta imune inata através da indução, síntese e liberação de citocinas. Isso resulta em efeitos antitumorais e antivirais indiretos. Seu uso tópico é eficaz e liberado para o tratamento de CA, Carcinoma Basocelular (CBC) superficial, Doença de Bowen (DB) e verrugas vulgares. Este trabalho tem como objetivo comparar duas recentes opções de tratamento para CA, a Terapia Fotodinâmica com metilaminolevulinato e o imiquimod 5% creme, por não existirem, na literatura atual, estudos comparativos dessas duas opções de tratamento. Foram selecionadas 12 pacientes com CAs que foram submetidas primeiramente à 1 sessão de TFD com MAL num lado da face e, 1 mês após, iniciaram o tratamento com imiquimod 5% creme aplicado no lado contralateral, duas vezes na semana, durante 16 semanas. A randomização foi realizada para determinar a hemiface para cada tratamento. Na primeira semana após a realização da TFD e mensalmente durante o tratamento com imiquimod, as pacientes foram avaliadas em relação aos efeitos colaterais dos tratamentos. Seis meses após entrarem no estudo, ambos os tratamentos foram analisados por um investigador cego para sua eficácia, tolerabilidade e seu resultado cosmético. Previamente ao tratamento as pacientes apresentaram um total de 245 lesões de CAs, sendo 120 lesões no lado submetido à TFD e 125 no lado tratado com imiquimod. Após o tratamento o número total de lesões diminuiu para 34 no lado tratado com TFD e para 30 no lado tratado com imiquimod, respectivamente. Não foram observadas diferenças estatisticamente significativas na eficácia de ambos os tratamentos e na frequência de efeitos colaterais. Entretanto, os pacientes, significativamente preferiram o tratamento com a terapia fotodinâmica, talvez pela rapidez do método, comparado com a aplicação tópica do creme de imiquimod a 5%. / Background: Actinic keratosis (AK) represents an initial process that may lead to in situ or invasive squamous cell carcinoma. The importance of its early diagnosis and treatment is well-established. There are several effective options available for the treatment of actinic keratosis, including topical imiquimod 5% cream and photodynamic therapy (PDT). Objetive: To compare the efficacy and patient preference between topical MAL-PDT and imiquimod 5% cream for the treatment of AK. Methods: Twelve patients, with a total of 245 lesions, underwent treatment with MAL-PDT and imiquimod 5% cream. Randomization was performed to determine the hemiface (right or left) for each therapy. First, patients were submitted to MAL-PDT. After one month, they started to use imiquimod on the opposite side of the face, twice a week, for 16 weeks. Six months after entering the study, both treatments were analyzed by a blinded investigator for their effectiveness, tolerability and cosmetic result. Results: Both treatments showed a good therapeutic response. 72% of the lesions treated with MAL-PDT were completely cleared, and 76% of those treated with imiquimod. The mean size of the residual lesions after the treatments was similar. Ten patients (83%) preferred MAL-PDT rather than imiquimod. (p: 0.03). Conclusions: Both MAL-PDT and imiquimod are effective in clearing AKs. Our results showed similar efficacy and good cosmetic outcomes with both treatments. However, a significant percentage of the subjects preferred MAL – PDT.

Orientador: Ana Cláudia Pavarina / Banca: Juliana Campos Junqueira / Banca: Gilberto Leite Braga Ubida / Banca: Lívia Nordi Dovigo / Banca: Marlise Inêz Klein Furlan / Resumo: O presente estudo avaliou a eficácia da terapia fotodinâmica (PDT) na inativação de Candida albicans em modelos murino de candidíase oral. Adicionalmente, este estudo avaliou se a PDT causa danos ao núcleo da célula fúngica. Dessa forma, foram conduzidos três estudos: 1. Avaliou a eficácia da cloro-alumínio-ftalocianina encapsulado em nanoemulsão catiônica (ClAlP NE) na inativação de Candida albicans presente em modelo murino de candidíase oral; 2. Avaliou a eficácia da PDT mediada pelo Photodithazine®(PDZ) como tratamento para candidíase oral induzida; 3. Avaliou o potencial da inativação fotodinâmica (PDT) mediado pelo fotossensibilizador (PS) Curcumina (CUR) associado ao LED azul em causar danos no DNA de C albicans. No estudo 1, 75 camundongos fêmeas com 6 semanas foram imunossuprimidos e inoculados com C. albicans para induzir candidíase oral. A PDT foi realizada sobre a língua pela aplicação dos fotossensibilizadores ClAlP NE ou ClAlP DMSO e luz LED (100 J/cm2 - 660 nm). Em seguida, a avaliação microbiológica foi realizada por meio da recuperação de C. albicans da língua dos animais. Diluições seriadas foram realizadas, as colônias viáveis foram quantificado e o número de UFC mL determinado. Os animais foram sacrificados 24 horas após a PDT e as línguas foram removidas cirurgicamente para análise histológica e para análise de expressão de citocinas pró e antiinflamatórias (IL-1, TNF-α e IL-6) por ensaio de RT-qPCR. Os dados foram analisados por One-Way ANOVA. A PDT mediada por ClAIP-NE reduziu 2,26 log10 da viabilidade celular de C. albicans em comparação ao grupo controle (p <0,05). A PDT mediada por ClAlP DMSO não apresentou atividade antifúngica. A análise histológica revelou que a PDT não promoveu efeitos adversos sobre o tecido língual dos animais. A terapia mediada por ambos os fotossensibilizadores induziu a expressão... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: This study evaluated the efficacy of photodynamic therapy (PDT) in the inactivation of C. albicans in a murine models of oral candidosis. Additionally, this study evaluated the poetencial of PDT to promote DNA damage of fungal cell. For this purpose, three studies were conducted: 1. Evaluated the photodynamic effect of chloro-aluminum phthalocyanine encapsulated in cationic nanoemulsions (ClAlP NE) to inactivate Candida albicans in a murine model of oral candidiasis. 2. Evaluated the photoinactivation (PDT) of Candida albicans in a murine model of oral candidosis, mediated by Photodithazine® (PDZ). 3. Evaluated the potential of PDT mediated by Curcumin (CUR) associated with the blue LED in causing DNA damage of C. albicans. In the first study, 75 6-week-old female Swiss mice were immunosuppressed and inoculated with C. albicans to induce oral candidiasis. PDT was performed on the tongue by the application of the photosensitizers and LED light (100 J cm-² - 660 nm). Next, microbiological evaluation was carried out by recovering C. albicans from the tongue via colony forming units (CFU mL-1). Then, the animals were sacrificed and the tongues were surgically removed for histological analysis and analysis of inflammatory cytokines expression (IL-1, TNF-α and IL-6) by RT-qPCR. Data were analyzed by ANOVA test. ClAlP NE-mediated PDT was able to reduce C. albicans recovered from the tongue (2.26 log10) when compared with control (p<0.05). ClAlP DMSO-mediated PDT did not present antifungal activity. Histological analysis revealed that PDT did not promote adverse effects on the tongue tissue. PDT mediated by both photosensitizers induced the TNF-α expression when compared with control (P<0.05). ClAlP mediated by PDT induced the expression of inflammatory cytokines, TNF-α, irrespective of the drug system delivery used. In the second study, a new murine model of oral...(Complete abstract electronic access below) / Doutor

Orientador: Valdir Gouveia Garcia / Banca: Álvaro Francisco Bosco / Banca: Claudio Sergio Pannuti / Resumo: Este estudo avaliou histomorfometricamente e imunoistoquimicamente os efeitos da terapia fotodinâmica antimicrobiana (aPDT), usando dois fotossensibilizadores com diferentes concentrações, como coadjuvante no tratamento da periodontite induzida em ratos. A doença periodontal (DP) foi induzida por adaptação de uma ligadura ao redor do primeiro molar inferior esquerdo em 162 ratos. Os animais foram randomicamente divididos em 9 grupos: G1 - raspagem e alisamento radicular (RAR) e irrigação com soro fisiológico; G2 - RAR e irrigação com azul de metileno (MB) (100 μg / ml); G3 - RAR e irrigação com MB (10 mg / ml); G4 - RAR e irrigação com azul de toluidina- O (TBO) (100 μg / ml); G5 - RAR e irrigação com TBO (10 mg / ml); G6 - RAR, irrigação com MB (100 μg / ml) e Laser (InGaAlP; 660nm; 4,94J/cm2/ponto; 24 segundos); G7 - RAR, irrigação com MB (10 mg / ml) e Laser; G8 - RAR, irrigação com azul de TBO (100 μg / ml) e Laser; G9 - RAR, irrigação com TBO (10 mg/ml) e Laser. A área de perda óssea (PO) na região de furca (RF) foi analisada histomorfometricamente. A quantidade de osteoclastos e os reguladores locais da atividade osteoclástica foram avaliados qualitativamente na RF via detecção imunoistoquímica de TRAP e RANKL-OPG, respectivamente. Os dados da PO foram analisados estatisticamente (P<0,05). Os animais do G1 apresentaram maior PO (2,17±0,54) comparado ao G6 (0,55±0,14), G7 (0,77±0,17) e G8 (0,73±0,17) aos 7 dias... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: The aim of this study was to evaluate histomorphometric and immunohistochemical the effects of antimicrobial photodynamic therapy (aPDT), using two photosensitizers with different concentrations, as an adjunct in the treatment of induced periodontitis in rats. Periodontal disease was induced by placing a ligature around the left first mandibular molar in 162 rats. The animals were randomly divided into nine groups: G1- scaling and root planning (SRP) and irrigation with saline solution, G2- SRP and irrigation with methylene blue (MB) (100 μg/ml); G3- SRP and irrigation with MB (10 mg/ml); G4- SRP and irrigation with toluidine blue O (TBO) (100 μg/ml); G5- SRP and irrigation with TBO (10 mg/ml); G6- SRP, irrigation with MB (100 μg/ml) and Laser (InGaAlP; 660 nm; 4.94 J/cm2/point; 24 seconds); G7-SRP, irrigation with MB (10 mg/ml) and Laser; G8- SRP, irrigation with TBO (100 μg/ml) and Laser; G9- SRP, irrigation with TBO (10 mg/ml) and Laser. The area of bone loss (BL) in the furcation region (FR) was histometrically analyzed. The amount of osteoclasts and the local regulator of osteoclastic activity were evaluated qualitatively in the FR via immunohistochemical detection of TRAP and RANKL-OPG, respectively. Data were analyzed statistically (P<0.05). The animals of G1 presented more BL (2.17±0.54) compared to animals of G6 (0.55±0.14), G7 (0.77±0.17) and G8 (0.73±0.17) at 7 days. There was no statistically significant difference between the groups treated with photosensitizers or aPDT. The qualitative immunohistochemical analysis revealed that there was a tendency to decrease immunostaining of RANKL and TRAP, and a tendency to increase expression of OPG in the groups treated with aPDT/MB. The aPDT using the MB, as an adjunctive therapy to SRP was effetive to act as a downregulator in local molecular mechanisms... (Complete abstract click electronic access below) / Mestre

Orientador: Juliana Campos Junqueira / Banca: Antonio Olavo Cardoso Jorge / Banca: Silvia Maria Querido Matheus / Banca: José Chibebe Junior / Banca: Graziella Nuernberg Back Brito / Resumo: Vários estudos in vitro demonstraram que a terapia fotodinâmica (TFD) apresenta efeitos antimicrobianos sobre as leveduras do gênero Candida, podendo representar uma terapia alternativa e coadjuvante no tratamento da estomatite protética. Assim, este trabalho teve como objetivo avaliar o efeito antifúngico de múltiplas sessões de terapia fotodinâmica sobre biofilmes de Candida formados na superfície de resina acrílica. Para realização desse trabalho, biofilmes monotípicos de C. albicans, C. tropicalis e C. glabrata foram formados, durante 5 dias, em corpos de prova confeccionados com resina acrílica termicamente ativada. A seguir, foram realizadas 5 sessões de terapia fotodinâmica, em intervalos de 24 horas, sobre os biofilmes previamente formados. Foram avaliadas 2 modalidades de terapia fotodinâmica, incluindo aplicação de Laser de Arseneto de Gálio e Alumínio associado ao fotossensibilizador azul de metileno ou terapia com Diodo Emissor de Luz (LED) verde e fotossensibilizador eritrosina. Os grupos controles foram tratados apenas com solução fisiológica. Após a realização de cada aplicação da terapia fotodinâmica, os biofilmes aderidos aos corpos de prova foram submetidos à homogeneização ultra-sônica e as células dispersas foram semeadas em Ágar Sabouraud Dextrose (37 °C / 48 h) para contagem de unidades formadoras de colônias (UFC/corpo de prova). Os resultados obtidos foram submetidos à análise de Variância (ANOVA) e teste de Tukey considerando-se nível de significância de 5%. Para todos os micro-organismos os resultados da redução de UFC (log) foram comparados aos controles da primeira, segunda, terceira, quarta e quinta aplicações com o Laser e com o LED. Para C. glabrata as reduções para cada aplicação foram respectivamente de 3,22 e 4,83; 1,49 e 2,21; 1,6 e 2.05; 1,53 e 5,09 e 2,75 e 3,03. Para C. albicans foram 0,12 e 0,36; 0,54 e... / Abstract: Several in vitro studies have demonstrated the antimicrobial effects of photodynamic therapy (PDT) against yeast of the genus Candida, representing an alternative or coadjuvant tool for the treatment of denture stomatitis. Therefore, the objective of this study was to evaluate the antifungal effect of multiple PDT sessions on Candida biofilms formed on the surface of acrylic resin. For this purpose, monotypic biofilms of C. albicans, C. tropicalis and C. glabrata were grown for 5 days on test specimens consisting of thermally activated acrylic resin. Next, the biofilms formed were submitted to five sessions of PDT at intervals of 24 hours. Two modalities of PDT were evaluated: a gallium-aluminum-arsenide laser combined with methylene blue as photosensitizer, and a green light-emitting diode (LED) and erythrosine as photosensitizer. The control groups were only treated with saline. After each application of PDT, the biofilms adhered to the test specimens were submitted to ultrasonic homogenization and the dispersed cells were seeded onto Sabouraud dextrose agar (37 oC, 48 h) for determination of colony-forming units (CFU/test specimen). Analysis of variance (ANOVA) and the Tukey test were used for analysis of the results, adopting a level of significance of 5%. For all microorganisms, the results of CFU(log) reduction were compared to controls of the first, second, third, fourth and fifth application of the laser and LED. For C. glabrata, the reductions in each application were, respectively, 3.22 and 4.83, 1.49 and 2.21, 1.6 and 2.05, 1.53 and 5.09, and 2.75 and 3.03. Reductions of 0.12 and 0.36, 0.54 and 0.93, 0.15 and 0.06, 0.96 and 0.75, and 0.89 and 1.82 were observed for C. albicans. Candida tropicalis showed the following reductions: 0.16 and 0.14, 1.52 and 2.84, 1.86 and 2.1, 1.81 and 2.39, and 0.86 and 1.36. In conclusion, laser- and LED-mediated PDT were effective in reducing... / Doutor

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:27:25Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2009-06-09Bitstream added on 2014-06-13T18:31:37Z : No. of bitstreams: 1 martins_js_me_sjc.pdf: 608313 bytes, checksum: e32f819f13bdf398082ecb9e208a1b5a (MD5) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / O objetivo deste estudo foi avaliar os efeitos da terapia fotodinâmica sobre a patogenicidade de C. albicans e C. dubliniensis na candidose bucal em ratos. Foram utilizados 96 ratos (Rattus norvegicus, Albinus, Wistar), sendo que 80 animais foram submetidos à indução de candidose experimental no dorso da língua por C. albicans ou C. dubliniensis e 16 ratos não foram infectados por Candida. Após 5 dias da indução da candidose, foram realizados diferentes tratamentos: laser e azul de metileno como fotossensibilizador (Grupo L+F+), apenas laser (Grupo L+F-), apenas fotossensibilizador (Grupo L-F+) e grupo sem laser e fotossensibilizador (Grupo L-F-). Após 1 dia, amostras do dorso da língua foram coletadas e semeadas em ágar Sabouraud para contagem de UFC/mL recuperadas da cavidade bucal. Os animais foram submetidos à eutanásia para análise microscópica do dorso da língua. Foi avaliada também a capacidade de produção de fosfolipase e proteinase por C. albicans e C. dubliniensis. Os resultados demonstraram que a quantidade de C. albicans recuperadas da cavidade bucal dos ratos foram semelhantes entre os quatro grupos estudados. C. dubliniensis não foi recuperarada da cavidade bucal dos ratos estudados. Na análise microscópica do dorso da língua, observou-se a presença de várias lesões teciduais induzidas por C. albicans, sendo que no grupo L+F+ essas lesões foram menores em relação aos demais grupos estudados. C. dubliniensis exibiu lesões teciduais discretas sem diferença estatística entre os grupos. Em relação aos fatores de patogenicidade de C. albicans, o grupo L+F+ produziu menor quantidade de fosfolipase e proteinase em relação aos demais grupos. C. dubliniensis produziu menor quantidade de fosfolipase em relação à C. albicans, sem diferença entre os 4 grupos estudados. Entretanto, C. dubliniensis não foi capaz de produzir proteinase... / The objective was to evaluate the effects of photodynamic therapy on the pathogenicity of C. albicans and C. dubliniensis in oral rats candidosis. Were evaluated 96 rats, while 80 were subjected to candidosis experimental induction on the tongue dorsum by C. albicans or C. dubliniensis and 16 rats were not infected. After 5 days of induction candidosis, different treatments were performed: laser and methylene blue as photosensitizers (Group L+F+), laser only (Group L+F-), only photosensitizers (Group L-F+) and without laser neither photosensitizers group (Group L-F). After 1 day, samples of the tongue dorsum were collected and sown on Sabouraud agar for counts of UFC/mL recovered from the oral cavity. The animals were submitted to euthanasia for microscopic analysis. It also evaluated the production capacity of a proteinase and phospholipase C. albicans and C. dubliniensis. The results showed that the amount of C. albicans recovered from rats oral cavity were similar among the four groups. To recover C. dubliniensis of the oral cavity from studied rats was not possible. In microscopic examination of tongue dorsum, was seen the presence of multiple tissue lesions induced by C. albicans, whereas in group L+ F+ these lesions were smaller than in other groups. C. dubliniensis showed slight tissue lesions with no statistic difference between groups. Regarding the factors of pathogenicity of C. albicans, the group L+F+ produced smaller amounts of phospholipase and proteinase compared to other groups. C. dubliniensis produced fewer quantitiy of phospholipase related to C. albicans, without difference between the 4 (four) groups studied. However, C. dubliniensis was not able to produce proteinase. It was concluded that the development of experimental candidosis by C. dubliniensis was less than that induced by C. albicans. Photodynamic therapy was effective on treatment... (Complete abstract click electronic access below)

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:28:02Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2012-02-28Bitstream added on 2014-06-13T18:32:28Z : No. of bitstreams: 1 longo_m_me_araca.pdf: 527742 bytes, checksum: 9509864865c7af3c0ba3de31bbef652b (MD5) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / Este estudo avaliou histomorfometricamente e imunoistoquimicamente os efeitos da terapia fotodinâmica antimicrobiana (aPDT), usando dois fotossensibilizadores com diferentes concentrações, como coadjuvante no tratamento da periodontite induzida em ratos. A doença periodontal (DP) foi induzida por adaptação de uma ligadura ao redor do primeiro molar inferior esquerdo em 162 ratos. Os animais foram randomicamente divididos em 9 grupos: G1 - raspagem e alisamento radicular (RAR) e irrigação com soro fisiológico; G2 - RAR e irrigação com azul de metileno (MB) (100 μg / ml); G3 - RAR e irrigação com MB (10 mg / ml); G4 - RAR e irrigação com azul de toluidina- O (TBO) (100 μg / ml); G5 - RAR e irrigação com TBO (10 mg / ml); G6 – RAR, irrigação com MB (100 μg / ml) e Laser (InGaAlP; 660nm; 4,94J/cm2/ponto; 24 segundos); G7 – RAR, irrigação com MB (10 mg / ml) e Laser; G8 – RAR, irrigação com azul de TBO (100 μg / ml) e Laser; G9 – RAR, irrigação com TBO (10 mg/ml) e Laser. A área de perda óssea (PO) na região de furca (RF) foi analisada histomorfometricamente. A quantidade de osteoclastos e os reguladores locais da atividade osteoclástica foram avaliados qualitativamente na RF via detecção imunoistoquímica de TRAP e RANKL-OPG, respectivamente. Os dados da PO foram analisados estatisticamente (P<0,05). Os animais do G1 apresentaram maior PO (2,17±0,54) comparado ao G6 (0,55±0,14), G7 (0,77±0,17) e G8 (0,73±0,17) aos 7 dias... / The aim of this study was to evaluate histomorphometric and immunohistochemical the effects of antimicrobial photodynamic therapy (aPDT), using two photosensitizers with different concentrations, as an adjunct in the treatment of induced periodontitis in rats. Periodontal disease was induced by placing a ligature around the left first mandibular molar in 162 rats. The animals were randomly divided into nine groups: G1- scaling and root planning (SRP) and irrigation with saline solution, G2- SRP and irrigation with methylene blue (MB) (100 μg/ml); G3- SRP and irrigation with MB (10 mg/ml); G4- SRP and irrigation with toluidine blue O (TBO) (100 μg/ml); G5- SRP and irrigation with TBO (10 mg/ml); G6- SRP, irrigation with MB (100 μg/ml) and Laser (InGaAlP; 660 nm; 4.94 J/cm2/point; 24 seconds); G7-SRP, irrigation with MB (10 mg/ml) and Laser; G8- SRP, irrigation with TBO (100 μg/ml) and Laser; G9- SRP, irrigation with TBO (10 mg/ml) and Laser. The area of bone loss (BL) in the furcation region (FR) was histometrically analyzed. The amount of osteoclasts and the local regulator of osteoclastic activity were evaluated qualitatively in the FR via immunohistochemical detection of TRAP and RANKL-OPG, respectively. Data were analyzed statistically (P<0.05). The animals of G1 presented more BL (2.17±0.54) compared to animals of G6 (0.55±0.14), G7 (0.77±0.17) and G8 (0.73±0.17) at 7 days. There was no statistically significant difference between the groups treated with photosensitizers or aPDT. The qualitative immunohistochemical analysis revealed that there was a tendency to decrease immunostaining of RANKL and TRAP, and a tendency to increase expression of OPG in the groups treated with aPDT/MB. The aPDT using the MB, as an adjunctive therapy to SRP was effetive to act as a downregulator in local molecular mechanisms... (Complete abstract click electronic access below)