Orientadores: Jorge Humberto Nicola, Ester M. D. Nicola / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciencias Medicas / Made available in DSpace on 2018-08-03T20:13:46Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Reis_EdmyrRosados_D.pdf: 1208079 bytes, checksum: 154a60eab72e8c40d6ecca77018a4121 (MD5) Previous issue date: 2004 / Resumo: O presente trabalho mostra, experimentalmente, que é possível a utilização de glândulas harderianas de ratos Wistar para o estudo de fotodinâmica aplicada ao diagnóstico (PDD ¿ do inglês, Photo Dynamic Diagnosis) e tratamento médico (PDT ¿ do inglês, Photo Dynamic Therapy). No caso, a ação fotodinâmica tem como fotosensibilizador a protoporfirina IX (PpIX), abundantemente produzida na referida glândula, dispensando, portanto, a etapa de administração de substâncias exógenas, como nos estudos de PDD e PDT convencionais. No trabalho é mostrado que a fotodestruição tecidual (PDT) na glândula harderiana de tais ratos é acompanhada por alteração no padrão do espectro de fluorescência da mesma, indicando que as moléculas de PpIX não permanecem íntegras, caracterizando-se, portanto, como o processo fotodinâmico em que as células hospedeiras das moléculas de PpIX são destruídas em decorrência da transformação destas em fotoprodutos, conhecido como: Processo Tipo I. Adicionalmente mostra-se que, tal alteração no espectro de fluorescência original da PpIX é dependente da energia óptica utilizada (fluência), caracterizando-se pelo aparecimento de uma nova banda espectral e pela diminuição de intensidade do padrão fluorescente inicial. Em decorrência desta observação, propõe-se o acompanhamento de medidas de fluorescência em tempo real para o monitoramento da terapia propriamente dita, quando o processo for do Tipo I. O trabalho, portanto, propõe um modelo para estudos fotodinâmicos que é simples e de acesso fácil à maioria do laboratórios congêneres. Ressalta-se que foi utilizado, para o PDT, um laser de HeNe assim como uma fonte de luz de construção relativamente simples e, para o PDD, uma lâmpada de ultravioleta comercial. O espectrômetro utilizado, embora importado, também é de custo relativamente baixo / Abstract: The present work shows, experimentally, that the use of harderian glands of Wistar rats for the study of photodynamic applied to the diagnosis (PDD - of the English, Photo Dynamic Diagnosis) and medical treatment is possible (PDT - of the English, Photo Dynamic Therapy). In the case, the photodynamic action has as photo-sensitizer protoporphirin IX (PpIX), abundantly produced in the related gland, excusing, therefore, the stage of exogenous substance administration, as in the studies of conventional PDD and PDT. In the work it is shown that the tissue photodestruction (PDT) in the harderian gland of such rats is followed by alteration in the standard of the spectrum of fluorescence of the same one, indicating that the molecules of PpIX do not remain complete, characterizing itself, therefore, as the photodynamic process where the cells hostesses of molecules of PpIX are destroyed in result of the transformation of these in photoproducts, known as: Process Type I. Additionally we show that, such alteration in the spectrum of the original fluorescence of the PpIX is dependent on the optic energy (fluency) used, characterizing itself for the appearance of a new spectral band and for the reduction of intensity of the initial fluorescent standard. In result of this comment we consider the accompaniment of measures of fluorescence in real time for the monitoring of the therapy properly said, when the process will be of Type I. The work, therefore, considers a model for photodynamics studies that is simple and of easy access to the majority of the laboratories of same types. A laser of HeNe, as well as a source of light of relatively simple construction was used for the PDT, and for the PDD a commercial light bulb of ultraviolet. The used spectrometer, despite of imported is also of relatively low cost was used. / Doutorado / Ciencias Biomedicas / Doutor em Ciências Médicas

O tratamento da doença periodontal consiste na remoção mecânica do biofilme, sendo que terapias complementares como a terapia fotodinâmica antimicrobiana (aPDT) podem melhorar os resultados obtidos. Este trabalho avaliou in vitro o efeito dos corantes azul de toluidina e azul de metileno com distintos parâmetros de laser (70; 100mW) e LED em Aggregatibacter actinomycetemcomitans (A.a) em suspensão. O primeiro experimento avaliou efeito bactericida de diferentes concentrações dos dois corantes sozinhos (0,05; 0,1; 0,5, 1,0; 2,0; 5,0; 10 mg/ml). O segundo foi dividido nos seguintes grupos: controles positivo e negativo (gentamicina), grupos somente com luz aplicada, grupos com três concentrações (0,05; 0,1; 10 mg/ml) de corante sozinhos ou associados ao laser de baixa intensidade (660 nm; 2,91 e 4,16 W/cm2; 70 e 100mW; 45 J/cm2; 0,024 cm2; 12 e 18s) e LED (627 ± 10 nm; 150mW/cm2; 10,5 mW; 20 J/cm2; 0,07cm2; 123s). Os dados foram analisados pelo teste ANOVA complementado por Tukey (p<0,05). Os resultados demonstraram que ambos os corantes na concentração de 10 mg/ml sozinhos ou associados com laser (ambas as potências) ou LED causaram 100 % de morte bacteriana semelhante ao controle negativo (p>0,05). Com isso, pode-se concluir que aPDT pode eliminar o A.a. de forma dependente da concentração do corante. / The main treatment of periodontal disease is the mechanical removal of biofilm. Adjuvant therapies as antimicrobial photodynamic therapy (aPDT) may offer better results. The aim of this in vitro study was to evaluate the effect of toluidine and methylene blue dyes, associated to red laser (70; 100mW) and LED on elimination of a suspension of Aggregatibacter actinomycetemcomitans (A.a). A first test evaluated the bactericidal effect of various concentrations of both dyes (0.05; 0.1; 0.5, 1.0; 2.0; 5.0, 10 mg/ml) in absence of light. In the second test, the experimental groups consisted of positive and negative (gentamicin) controls, groups with three concentrations (0.05; 0.1,10 mg/ml) of dyes alone of associated to low level laser (660 nm; 2.91 and 4.16 W/cm2; 70 and 100mW; 45 J/cm2; 0.024 cm2; 12 and 18s) and LED (627 ± 10 nm; 150mW/cm2; 10.5 mW; 20 J/cm2; 0.07cm2; 123s). Data were analyzed by ANOVA complemented by Tukeys test (p<0.05). The results showed that both dyes, with 10 mg/ml, alone or associated to laser and LED caused 100% of death as the negative control (p>0.05). It can be concluded that aPDT is capable of eliminate A.a depending of the dye concentration.

O tratamento da Periodontite Agressiva (PA) representa um desafio para os clínicos, pois não existem protocolos padronizados para um controle eficiente da doença. Este estudo clínico controlado, aleatório e duplo-cego avaliou o efeito de múltiplas aplicações da Terapia Fotodinâmica antimicrobiana (TFDa) como adjuvante ao tratamento periodontal não cirúrgico (TPnc) em pacientes diagnosticados com PA. Utilizando um modelo de estudo do tipo boca dividida, 20 pacientes com diagnóstico clínico de PA foram tratados com TFDa (Grupo Teste) associada à raspagem e alisamento radicular (RAR) ou apenas RAR (Grupo Controle). As aplicações da TFDa foram realizadas em 4 episódios (dias 0, 2, 7 e 14). Todos os pacientes foram acompanhados por 90 dias. Os seguintes parâmetros clínicos, microbiológicos e imunológicos foram analisados: i) profundidade de bolsa à sondagem (PS) e nível de inserção clínico (NCI); ii) contagem de 40 espécies subgengivais em amostras de placa bacteriana (checkerboard DNA-DNA hybridization); iii) avaliação dos níveis de Interleucina (IL)-1&beta;, IL-10 e Fator de Necrose Tumoral alfa (TNF-&alpha;) no fluido crevicular gengival (Luminex). Os dados obtidos foram estatisticamente analisados. Na análise de bolsas periodontais profundas (PS inicial &ge; 7mm), o Grupo Teste apresentou, aos 90 dias, redução de PS (-3,96 mm ± 0,83) e ganho de inserção clínica (2,77 mm ± 1,05) significativamente maiores (p < 0,05) que aqueles do Grupo Controle (PS = - 2,56 ± 0,72; NCI = 1,75 ± 1,07). Foi constatado, também, um número significativamente menor de bolsas periodontais residuais (PS &ge; 5mm) no Grupo Teste quando comparado ao Grupo Controle aos 90 dias (p < 0,05). Na análise microbiológica, o Grupo Teste apresentou proporções significativamente menores de espécies microbianas dos complexos vermelho e laranja, bem como maiores proporções de espécies do complexo azul quando comparado ao Grupo Controle aos 90 dias (p < 0,05). Na análise imunológica, observou-se níveis de IL-1&beta; no Grupo Controle significativamente maiores que aqueles do Grupo Teste aos 14, 30 e 90 dias (p < 0,05). Em relação aos níveis de IL-10, apenas o Grupo Teste apresentou valores significativamente maiores (p < 0,05) que aqueles do baseline aos 30 dias. Para TNF-&alpha;, não foi possível observar diferenças significativas nas comparações inter e intragrupos em todos os períodos experimentais. O Grupo Teste apresentou razão IL-1&beta;/IL-10 significativamente menor que aquela do Grupo Controle aos 90 dias (p < 0,05). Pode-se concluir que a utilização de aplicações múltiplas da TFDa como recurso adjuvante à TPnc de pacientes com PA: i) melhora significativamente os parâmetros clínicos periodontais, reduzindo a necessidade de tratamentos periodontais adicionais aos 90 dias; ii) elimina de forma mais eficaz periodontopatógenos dos complexos vermelho e laranja; iii) melhora os parâmetros imunoinflamatórios, reduzindo a concentração de citocinas proinflamatórias e aumentando os níveis de citocinas anti-inflamatórias. / Treatment of Aggressive Periodontitis (AP) is challenging for clinicians because there are no standardized protocols for effective disease control. This double-blind randomized controlled clinical trial evaluated the effects of multiple applications of antimicrobial Photodynamic Therapy (aPDT) as an adjunct to scaling and root planning (SRP) on patients diagnosed with AP. Using a split-mouth model, 20 patients with clinical diagnosis of AP were treated with aPDT associated with SRP (Test Group) or SRP alone (Control Group). aPDT applications were performed along with SRP and 2, 7 and 14 days after SRP. All patients were monitored during 90 days. The following clinical, microbiological and immunological parameters were analyzed: i) probing pocket depth (PPD) and clinical attachment level (CAL), ii) counts of 40 subgingival species in plaque samples (checkerboard DNA-DNA hybridization) and iii) levels of interleukin (IL)-1&beta;, IL-10 and tumor necrosis factor (TNF)-&alpha; in gingival crevicular fluid (Luminex). Data were statistically analyzed. In deep periodontal pockets (initial PPD &ge; 7 mm), the Test Group presented a decrease in PPD (-3.96 ± 0.83 mm) and a clinical attachment gain (2.77 ± 1.05 mm) significantly higher than the Control Group (PPD = - 2.56 ± 0.72 mm; CAL = 1.75 ± 1.07 mm) at 90 days (p < 0.05). It was also observed significantly fewer residual periodontal pockets (PPD &ge; 5 mm) in the Test Group when compared to the Control Group at 90 days (p < 0.05). Regarding microbiological analysis, the Test Group presented proportions of red and orange complexes significantly lower and proportions of blue complex significantly higher than the Control Group at 90 days (p < 0.05). Immunological analysis demonstrated significantly lower levels of IL-1&beta; in the Control Group when compared to the Test Group at 14, 30 and 90 days (p < 0.05). Only the Test Group presented significantly higher IL-10 levels in relation to baseline values at 30 days (p < 0.05). Intra and inter-groups comparisons of the mean levels of TNF-&alpha; did not demonstrate significantly differences. IL-1&beta;/IL-10 ratio was significantly lower in the Test Group than in the Control Group at 90 days (p < 0.05). It can be concluded that repeated aPDT as an adjunct to SRP in the nonsurgical treatment of AP: i) significantly improves clinical periodontal parameters, reducing the need for further treatments at 90 days; ii) eliminates periodontal pathogens of red and orange complexes more effectively and iii) enhances the host immunoinflammatory response, decreasing the levels of proinflammatory cytokines and increasing the levels of anti-inflammatory cytokines.

O tratamento da Periodontite Agressiva (PA) representa um desafio para os clínicos, pois não existem protocolos padronizados para um controle eficiente da doença. Este estudo clínico controlado, aleatório e duplo-cego avaliou o efeito de múltiplas aplicações da Terapia Fotodinâmica antimicrobiana (TFDa) como adjuvante ao tratamento periodontal não cirúrgico (TPnc) em pacientes diagnosticados com PA. Utilizando um modelo de estudo do tipo boca dividida, 20 pacientes com diagnóstico clínico de PA foram tratados com TFDa (Grupo Teste) associada à raspagem e alisamento radicular (RAR) ou apenas RAR (Grupo Controle). As aplicações da TFDa foram realizadas em 4 episódios (dias 0, 2, 7 e 14). Todos os pacientes foram acompanhados por 90 dias. Os seguintes parâmetros clínicos, microbiológicos e imunológicos foram analisados: i) profundidade de bolsa à sondagem (PS) e nível de inserção clínico (NCI); ii) contagem de 40 espécies subgengivais em amostras de placa bacteriana (checkerboard DNA-DNA hybridization); iii) avaliação dos níveis de Interleucina (IL)-1&beta;, IL-10 e Fator de Necrose Tumoral alfa (TNF-&alpha;) no fluido crevicular gengival (Luminex). Os dados obtidos foram estatisticamente analisados. Na análise de bolsas periodontais profundas (PS inicial &ge; 7mm), o Grupo Teste apresentou, aos 90 dias, redução de PS (-3,96 mm ± 0,83) e ganho de inserção clínica (2,77 mm ± 1,05) significativamente maiores (p < 0,05) que aqueles do Grupo Controle (PS = - 2,56 ± 0,72; NCI = 1,75 ± 1,07). Foi constatado, também, um número significativamente menor de bolsas periodontais residuais (PS &ge; 5mm) no Grupo Teste quando comparado ao Grupo Controle aos 90 dias (p < 0,05). Na análise microbiológica, o Grupo Teste apresentou proporções significativamente menores de espécies microbianas dos complexos vermelho e laranja, bem como maiores proporções de espécies do complexo azul quando comparado ao Grupo Controle aos 90 dias (p < 0,05). Na análise imunológica, observou-se níveis de IL-1&beta; no Grupo Controle significativamente maiores que aqueles do Grupo Teste aos 14, 30 e 90 dias (p < 0,05). Em relação aos níveis de IL-10, apenas o Grupo Teste apresentou valores significativamente maiores (p < 0,05) que aqueles do baseline aos 30 dias. Para TNF-&alpha;, não foi possível observar diferenças significativas nas comparações inter e intragrupos em todos os períodos experimentais. O Grupo Teste apresentou razão IL-1&beta;/IL-10 significativamente menor que aquela do Grupo Controle aos 90 dias (p < 0,05). Pode-se concluir que a utilização de aplicações múltiplas da TFDa como recurso adjuvante à TPnc de pacientes com PA: i) melhora significativamente os parâmetros clínicos periodontais, reduzindo a necessidade de tratamentos periodontais adicionais aos 90 dias; ii) elimina de forma mais eficaz periodontopatógenos dos complexos vermelho e laranja; iii) melhora os parâmetros imunoinflamatórios, reduzindo a concentração de citocinas proinflamatórias e aumentando os níveis de citocinas anti-inflamatórias. / Treatment of Aggressive Periodontitis (AP) is challenging for clinicians because there are no standardized protocols for effective disease control. This double-blind randomized controlled clinical trial evaluated the effects of multiple applications of antimicrobial Photodynamic Therapy (aPDT) as an adjunct to scaling and root planning (SRP) on patients diagnosed with AP. Using a split-mouth model, 20 patients with clinical diagnosis of AP were treated with aPDT associated with SRP (Test Group) or SRP alone (Control Group). aPDT applications were performed along with SRP and 2, 7 and 14 days after SRP. All patients were monitored during 90 days. The following clinical, microbiological and immunological parameters were analyzed: i) probing pocket depth (PPD) and clinical attachment level (CAL), ii) counts of 40 subgingival species in plaque samples (checkerboard DNA-DNA hybridization) and iii) levels of interleukin (IL)-1&beta;, IL-10 and tumor necrosis factor (TNF)-&alpha; in gingival crevicular fluid (Luminex). Data were statistically analyzed. In deep periodontal pockets (initial PPD &ge; 7 mm), the Test Group presented a decrease in PPD (-3.96 ± 0.83 mm) and a clinical attachment gain (2.77 ± 1.05 mm) significantly higher than the Control Group (PPD = - 2.56 ± 0.72 mm; CAL = 1.75 ± 1.07 mm) at 90 days (p < 0.05). It was also observed significantly fewer residual periodontal pockets (PPD &ge; 5 mm) in the Test Group when compared to the Control Group at 90 days (p < 0.05). Regarding microbiological analysis, the Test Group presented proportions of red and orange complexes significantly lower and proportions of blue complex significantly higher than the Control Group at 90 days (p < 0.05). Immunological analysis demonstrated significantly lower levels of IL-1&beta; in the Control Group when compared to the Test Group at 14, 30 and 90 days (p < 0.05). Only the Test Group presented significantly higher IL-10 levels in relation to baseline values at 30 days (p < 0.05). Intra and inter-groups comparisons of the mean levels of TNF-&alpha; did not demonstrate significantly differences. IL-1&beta;/IL-10 ratio was significantly lower in the Test Group than in the Control Group at 90 days (p < 0.05). It can be concluded that repeated aPDT as an adjunct to SRP in the nonsurgical treatment of AP: i) significantly improves clinical periodontal parameters, reducing the need for further treatments at 90 days; ii) eliminates periodontal pathogens of red and orange complexes more effectively and iii) enhances the host immunoinflammatory response, decreasing the levels of proinflammatory cytokines and increasing the levels of anti-inflammatory cytokines.

Orientador: Carla Raquel Fontana / Coorientador: Marlus Chorilli / Banca: Ana Claudia Pavarina / Banca: Natalia Mayumi Inada / Resumo: A acne vulgar é uma das dermatoses mais frequentes em jovens e a infecção causada pela bactéria Cutibacterium acnes (antigo Propionibacterium acnes) tem importante papel na patogênese da acne. Existem várias opções de tratamento que variam de acordo com a gravidade da doença, porém são associados com reações indesejadas e resistência aos antimicrobianos. A terapia fotodinâmica antimicrobiana (TFDa) então é proposta como tratamento alternativo para inativar C. acnes juntamente com a incorporação do fotossensibilizador (FS) em uma formulação tópica para otimizar a terapia. Este trabalho objetivou avaliar a eficácia in vitro da TFDa mediada pelo azul de metileno (AM) incorporado em hidrogel de quitosana e poloxamer (HG-AM) contra C. acnes em fase planctônica e biofilme. A viabilidade celular após TFDa foi avaliada através da quantificação das colônias formadas por mililitro de amostra (UFC/mL). Para caracterizar estruturalmente os HGs foram realizadas as análises oscilatórias e de comportamento de fluxo em reômetro de estresse controlado com geometria placa-cone e a bioadesão em pele de orelha de porco utilizando um texturômetro. A análise estatística dos dados feita foi a Análise de Variância (one way ANOVA) com pós-teste de Tukey. Os resultados deste estudo mostrou que a TFDa contra C. acnes foi eficaz utilizando HG-AM em fase plactônica. A concentração bactericida mínima foi de 12,5 µg/mL associada a uma fluência de 90 J/cm2. O biofilme de C. acnes não foi totalmente eliminad... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Acne vulgaris is one of the most frequent dermatosis in young people and the infection caused by the bacteria Cutibacterium acnes (formerly Propionibacterium acnes) plays an important role in the pathogenesis of acne. There are several treatments options that vary according to the severity of the disease, but are associated with unwanted reactions and antimicrobial resistance. Antimicrobial photodynamic therapy (aPDT) is then proposed as an alternative treatment to inactivate C. acnes together with the incorporation of the photosensitizer (PS) into a topical formulation to optimize therapy. This work aimed to evaluate the in vitro efficacy of methylene blue (MB) mediated TFDa incorporated in chitosan and poloxamer (HG-MB) hydrogels against planktonic and biofilm C. acnes. Cell viability after aPDT was evaluated by quantifying the colonies formed per milliliter of sample (CFU / mL). To characterize structurally the HG were performed the oscillatory and behavior of flow in a controlled stress rheometer with cone-plate geometry and bioadhesion in pig ear skin using a texture analyser. The statistical analysis of the data was the Analysis of Variance (one way ANOVA) with post-test of Tukey. The results of this study showed that aPDT was effective using HG-MB in planktonic phase. The minimum bactericidal concentration was 12.5 μg/mL associated with a fluence of 90 J/cm2 . The C. acnes biofilm was not totally eliminated by the aPDT with HG-MB under the conditions tested. The maximum microbial reduction achieved with HG-MB was 1.9 log10 with 75 μg/mL of the PS using 150 J/cm2 and 30 minutes biofilm incubation with HG-MB. HG at 0.25% of chitosan (HG1) was adequate for application to the skin surface because higher concentrations... (Complete abstract click electronic access below) / Mestre

O tratamento da doença periodontal consiste na remoção mecânica do biofilme, sendo que terapias complementares como a terapia fotodinâmica antimicrobiana (aPDT) podem melhorar os resultados obtidos. Este trabalho avaliou in vitro o efeito dos corantes azul de toluidina e azul de metileno com distintos parâmetros de laser (70; 100mW) e LED em Aggregatibacter actinomycetemcomitans (A.a) em suspensão. O primeiro experimento avaliou efeito bactericida de diferentes concentrações dos dois corantes sozinhos (0,05; 0,1; 0,5, 1,0; 2,0; 5,0; 10 mg/ml). O segundo foi dividido nos seguintes grupos: controles positivo e negativo (gentamicina), grupos somente com luz aplicada, grupos com três concentrações (0,05; 0,1; 10 mg/ml) de corante sozinhos ou associados ao laser de baixa intensidade (660 nm; 2,91 e 4,16 W/cm2; 70 e 100mW; 45 J/cm2; 0,024 cm2; 12 e 18s) e LED (627 ± 10 nm; 150mW/cm2; 10,5 mW; 20 J/cm2; 0,07cm2; 123s). Os dados foram analisados pelo teste ANOVA complementado por Tukey (p<0,05). Os resultados demonstraram que ambos os corantes na concentração de 10 mg/ml sozinhos ou associados com laser (ambas as potências) ou LED causaram 100 % de morte bacteriana semelhante ao controle negativo (p>0,05). Com isso, pode-se concluir que aPDT pode eliminar o A.a. de forma dependente da concentração do corante. / The main treatment of periodontal disease is the mechanical removal of biofilm. Adjuvant therapies as antimicrobial photodynamic therapy (aPDT) may offer better results. The aim of this in vitro study was to evaluate the effect of toluidine and methylene blue dyes, associated to red laser (70; 100mW) and LED on elimination of a suspension of Aggregatibacter actinomycetemcomitans (A.a). A first test evaluated the bactericidal effect of various concentrations of both dyes (0.05; 0.1; 0.5, 1.0; 2.0; 5.0, 10 mg/ml) in absence of light. In the second test, the experimental groups consisted of positive and negative (gentamicin) controls, groups with three concentrations (0.05; 0.1,10 mg/ml) of dyes alone of associated to low level laser (660 nm; 2.91 and 4.16 W/cm2; 70 and 100mW; 45 J/cm2; 0.024 cm2; 12 and 18s) and LED (627 ± 10 nm; 150mW/cm2; 10.5 mW; 20 J/cm2; 0.07cm2; 123s). Data were analyzed by ANOVA complemented by Tukeys test (p<0.05). The results showed that both dyes, with 10 mg/ml, alone or associated to laser and LED caused 100% of death as the negative control (p>0.05). It can be concluded that aPDT is capable of eliminate A.a depending of the dye concentration.

Orientador: Daniela Leal Zandim-Barcelos / Resumo: A resistência bacteriana é uma ameaça real alertada pela OMS. A terapia fotodinâmica antimicrobiana (TFDA) pode ser uma das soluções para superar este desafio, uma vez que já demonstra ação antimicrobiana frente a inúmeros patógenos. A clorina-e6 (Ce6) provou ser um fotossensibilizador (FS) com potente efeito quando irradiada pela luz vermelha, contra diferentes biofilmes. No entanto, o principal pico de absorção deste FS está no espectro visível de luz azul, ainda insuficientemente investigado. Este estudo teve como objetivo avaliar o efeito da TFDA com utilização da Ce6 irradiada a 450 e 660 nm contra biofilmes relacionados à doença periodontal. Biofilmes monoespécie de Streptococcus oralis, Fusobacterium nucleatum, Porphyromonas gingivalis e Aggregatibacter actinomycetemcomitans foram desenvolvidos em condições adequadas por cinco dias. A TFDA foi realizada em diferentes concentrações de fotossensibilizador (100 e 200 µM) e comprimentos de onda de luz (450 e 660 nm), e comparada ao controle negativo (DMSO a 1%) e positivo (clorexidina a 0,2%) por análise de unidades formadoras de colônias (UFC) e microscopia confocal. O uso de luz e FS também foram testados individualmente. A maior redução bacteriana foi observada no grupo em que a TFDA foi realizada com utilização da Ce6 a 200 µM e aplicação de luz azul para todas as cepas (redução de 4,01 log10 para A. actinomycetemcomitans e redução total para P. gingivalis e S. oralis), exceto para F. nucleatum, onde o melhor resultado... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Mestre

Made available in DSpace on 2017-03-14T14:10:04Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2015-03-05 / O objetivo deste trabalho, dividido em dois estudos, foi avaliar: (1) a influência da terapia fotodinâmica antimicrobiana na alteração de cor da dentina utilizando azul de metileno e curcumina como fotossensibilizadores nas concentrações de 20, 40 e 60 µM e nos tempos de pré-irradiação de 2 e 5 minutos, irradiados com fonte de luz LED; e (2) a influência do mesmo tratamento antimicrobiano com os mesmos fotossensibilizadores, concentrações e tempos de pré-irradiação utilizados no estudo anterior, porém sobre alteração de cor em uma resina composta microhíbrida. No primeiro estudo foram confeccionados 130 espécimes a partir de dentes humanos extraídos, os quais foram seccionados em máquina de cortes Isomet. Após a imersão nos fotossensibilizadores, avaliou-se as alterações de cor através de um espectrofotômetro de colorimetria em quatro momentos: antes do início da imersão nas soluções dos fotossensibilizadores (L0), após imersão nos fotossensibilizadores (L1), após irradiação (L2), após 10 dias (L3), após 30 dias (L4) e após 60 dias (L5). Observou-se uma variação alta das médias de ∆E nos grupos com azul de metileno independentemente da concentração e do tempo de exposição, diminuindo a partir da leitura de 10 dias. Com os grupos com curcumina, houve uma variação inicial sem diferença significativa do controle, mantendo-se próxima a ele nas leituras seguintes. Ambos fotossensibilizadores apresentaram alterações significantes clinicamente em dentina segundo a classificação da ―National Bureau of Standards‖ (NBS), sendo a alteração com a curcumina menor que do azul de metileno. No segundo estudo foram confeccionados 130 espécimes de resina composta microhíbrida (Filtek Z250XT) utilizando uma matriz de aço (10x2mm). Após a confecção dos espécimes, estes foram imersos...(Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / This study, divided in two studies, was to evaluate: (1) the influence of antimicrobial photodynamic therapy in color change dentin using methylene blue and curcumin as photosensitizers in concentrations of 20, 40 and 60 uM and pre irradiation times 2 to 5 minutes, irradiated with a LED light source; and (2) the effect of the same antimicrobial treatment with the same photosensitizers, concentrations and pre-irradiation times used in the previous study, but on color change in a microhybrid composite. In the first study were produced 130 specimens from extracted human teeth, which were cut in Isomet cuts machine. After immersion in the photosensitizers, the color changes were evaluated using a spectrophotometer colorimeter in four stages: before the immersion in solutions of photosensitizers (L0) after immersion in photosensitizers (L1) after irradiation (L2), after 10 days (L3) after 30 days (L4) and 60 days (L5). There was a high variation of ΔE averages of the methylene blue groups independently of the concentration and exposure time, decreasing from a reading of 10 days. With curcumin groups, there was no significant difference initial variation control, remaining next to it in the subsequent readings. Both photosensitizers showed clinically significant changes in dentin according to the classification of ―National Bureau of Standards‖ (NBS), with a lowest change to curcumin that of methylene blue. In the second study were made 130 specimens microhybrid composite resin (Filtek Z250XT) using a steel matrix (10x2mm). After preparation of the specimens, they were immersed in solutions of photosensitizers and subsequently evaluated with a spectrophotometer Colorimetry in the same color reading moments performed in the previous study (initial, after immersion, after light irradiation, after 10, 30 and 60 days). In methylene blue groups was no statistically significant difference... (Complete abstract access below)

Orientador: Alessandra Nara de Souza Rastelli / Banca: Patrícia Petromilli Sasso Garcia / Banca: Clovis Wesley Oliveira de Souza / Resumo: O objetivo deste trabalho, dividido em dois estudos, foi avaliar: (1) a influência da terapia fotodinâmica antimicrobiana na alteração de cor da dentina utilizando azul de metileno e curcumina como fotossensibilizadores nas concentrações de 20, 40 e 60 µM e nos tempos de pré-irradiação de 2 e 5 minutos, irradiados com fonte de luz LED; e (2) a influência do mesmo tratamento antimicrobiano com os mesmos fotossensibilizadores, concentrações e tempos de pré-irradiação utilizados no estudo anterior, porém sobre alteração de cor em uma resina composta microhíbrida. No primeiro estudo foram confeccionados 130 espécimes a partir de dentes humanos extraídos, os quais foram seccionados em máquina de cortes Isomet. Após a imersão nos fotossensibilizadores, avaliou-se as alterações de cor através de um espectrofotômetro de colorimetria em quatro momentos: antes do início da imersão nas soluções dos fotossensibilizadores (L0), após imersão nos fotossensibilizadores (L1), após irradiação (L2), após 10 dias (L3), após 30 dias (L4) e após 60 dias (L5). Observou-se uma variação alta das médias de ∆E nos grupos com azul de metileno independentemente da concentração e do tempo de exposição, diminuindo a partir da leitura de 10 dias. Com os grupos com curcumina, houve uma variação inicial sem diferença significativa do controle, mantendo-se próxima a ele nas leituras seguintes. Ambos fotossensibilizadores apresentaram alterações significantes clinicamente em dentina segundo a classificação da ―National Bureau of Standards‖ (NBS), sendo a alteração com a curcumina menor que do azul de metileno. No segundo estudo foram confeccionados 130 espécimes de resina composta microhíbrida (Filtek Z250XT) utilizando uma matriz de aço (10x2mm). Após a confecção dos espécimes, estes foram imersos...(Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: This study, divided in two studies, was to evaluate: (1) the influence of antimicrobial photodynamic therapy in color change dentin using methylene blue and curcumin as photosensitizers in concentrations of 20, 40 and 60 uM and pre irradiation times 2 to 5 minutes, irradiated with a LED light source; and (2) the effect of the same antimicrobial treatment with the same photosensitizers, concentrations and pre-irradiation times used in the previous study, but on color change in a microhybrid composite. In the first study were produced 130 specimens from extracted human teeth, which were cut in Isomet cuts machine. After immersion in the photosensitizers, the color changes were evaluated using a spectrophotometer colorimeter in four stages: before the immersion in solutions of photosensitizers (L0) after immersion in photosensitizers (L1) after irradiation (L2), after 10 days (L3) after 30 days (L4) and 60 days (L5). There was a high variation of ΔE averages of the methylene blue groups independently of the concentration and exposure time, decreasing from a reading of 10 days. With curcumin groups, there was no significant difference initial variation control, remaining next to it in the subsequent readings. Both photosensitizers showed clinically significant changes in dentin according to the classification of ―National Bureau of Standards‖ (NBS), with a lowest change to curcumin that of methylene blue. In the second study were made 130 specimens microhybrid composite resin (Filtek Z250XT) using a steel matrix (10x2mm). After preparation of the specimens, they were immersed in solutions of photosensitizers and subsequently evaluated with a spectrophotometer Colorimetry in the same color reading moments performed in the previous study (initial, after immersion, after light irradiation, after 10, 30 and 60 days). In methylene blue groups was no statistically significant difference... (Complete abstract access below) / Mestre

Submitted by Automa??o e Estat?stica (sst@bczm.ufrn.br) on 2015-10-22T17:34:42Z No. of bitstreams: 1 MaiaraDeMoraes_TESE.pdf: 4430780 bytes, checksum: 1f816fb63ca894e21d7bb94602ef5210 (MD5) / Approved for entry into archive by Elisangela Moura (lilaalves@gmail.com) on 2015-10-22T21:22:44Z (GMT) No. of bitstreams: 1 MaiaraDeMoraes_TESE.pdf: 4430780 bytes, checksum: 1f816fb63ca894e21d7bb94602ef5210 (MD5) / Made available in DSpace on 2015-10-22T21:22:44Z (GMT). No. of bitstreams: 1 MaiaraDeMoraes_TESE.pdf: 4430780 bytes, checksum: 1f816fb63ca894e21d7bb94602ef5210 (MD5) Previous issue date: 2014-06-05 / Embora a terapia fotodin?mica venha sendo utilizada como uma ferramenta ?til nos ?ltimos 30 anos em oncologia, poucos estudos cl?nicos em odontologia t?m sido conduzidos. A terapia fotodin?mica (TFD) utiliza fotossensibilizantes at?xicos e seletivos que s?o administrados nas c?lulas alvo seguida de aplica??o local de luz vis?vel, produzindo esp?cies reativas de oxig?nio capazes de ocasionar morte celular por apoptose ou necrose, de afetar a vascularidade local, al?m de exercer importantes efeitos no sistema imune. Novas gera??es de f?rmacos fotossensibilizantes, como as ftalocianinas nanoparticuladas tem apresentado excelentes resultados na atividade antitumoral e antibacteriana. Neste contexto, o presente trabalho realizou o primeiro protocolo cl?nico de aplica??o local da nanoemuls?o de cloro-alum?nio ftalocianina (AlClFc) seguida de irradia??o em gengiva de humanos, e analisou descritiva e comparativamente, por meio de imunoistoqu?mica, a express?o de RANK, RANKL, OPG e VEGF em um modelo split-mouth. Oito volunt?rios saud?veis com indica??o cl?nica de exodontia foram inclu?dos no estudo. Sete dias antes da exodontia, foi aplicado na gengiva dos participantes, 5?M de nanoemuls?o de AlClFc seguida de irradia??o com laser diodo (660nm, 100J/cm2), o lado contralateral foi utilizado como controle. Os esp?cimes teciduais foram removidos sete dias ap?s a TFD e subdivididos em dois grupos (grupo teste e grupo controle) para an?lise histol?gica e imunoistoqu?mica. Os pacientes foram monitorados no dia aplica??o, 7, 14 e 30 dias ap?s a terapia para avalia??o de efeitos adversos da terapia. Altera??es vasculares foram observadas nas amostras gengivais que receberam a TFD. ?reas de edema e congest?o vascular, al?m de intensa vasculariza??o foram visualizadas. Adicionalmente, focos de calcifica??o distr?fica em regi?o subepitelial foram visualizados nos esp?cimes do grupo teste. Os resultados demonstraram um padr?o similar dos escores de imunomarca??o de RANK, RANKL e VEGF entre os grupos teste e controle, n?o havendo diferen?a estat?stica significante (p=0.317, p=0.777, p=.814, respectivamente). RANK e RANKL exibiram imunomarca??o fraca ou ausente em todos os esp?cimes analisados. N?o houve imunomarca??o para a OPG. O VEGF mostrou imunomarca??o moderada a forte nos esp?cimes do grupo teste. Adicionalmente, o estudo cl?nico mostrou que a terapia foi bem tolerada por todos os pacientes. Os efeitos adversos foram de curta dura??o e totalmente revers?veis. Tomados em conjunto, os resultados apresentados neste estudo mostraram que o protocolo da TFD mediada por nanoemuls?o contendo AlClFc ? segura para aplica??o cl?nica em tecido gengival e, sugerem uma forte imunomarca??o para o VEGF ap?s a terapia. / Although photodynamic therapy have been used as a useful tool over the past 30 years in oncology, few clinical trials have been conducted in dentistry. Photodynamic therapy (PDT) uses non - toxic photosensitizers and selective which are administered in target cells followed by local application of visible light, producing reactive oxygen species capable of causing cell death by apoptosis or necrosis, injured the local vasculature, and exert important effects on the im mune system. New generations of photosensitizing agents, such as nanoparticulate phthalocyanines, has shown excellent results in antitumor and antibacterial activity . In this context, the present work constitutes the first clinical protocol of local appli cation of nanoemulsion chloro - aluminum phthalocyanine (AlClFc) followed by irradiation in human gingiva, and analyzed descriptively and comparatively , by means of immunohistochemistry , the expression of RANK , RANKL , OPG and VEGF in a split - mouth model . Eight healthy volunteers with clinical indication for extraction were included in the study . Seven days before the extraction, was injected in the gingiva of participants, 5 ? M of nanoemulsion AlClFc followed by irra diation with diode laser (660nm , 7 J/cm2 ), the contralateral side was used as control. Tissue specimens were removed seven days after the TFD is performed. Tissues sample were divided into two groups (test and con trol groups) for histological and immunohistochemical analysis. Patients were monitored at days, 0, 7, 14 and 30 to assess adverse effects of the therapy. Vascular alterations were seen in gingival samples that received PDT. Areas of edema and vascular con gestion, and intense vascularization were viewed . Additionally, dystrophic calcification in subepithelial region were observed in the test group. The results showed a similar pattern of immunostaining scores of RANK, RANKL and VEGF between the test and co ntrol groups, with no statistically significant difference (p = 0.317, p = 0.777, p = 0 .814, respectively). RANK and RANKL exhibited weak or absent immunostaining in most specimens analyzed. There was n o immunostaining for OPG. VEGF showed moderate to stro ng immunostaining in specimens from the test group. In addition, the clinical study showed that therapy was well tolerated by all patients. Adverse effects were short - time and completely reversible. Taken together, the results presented in this study showe d that PDT mediated by nanoemulsion containing AlClPc is safe for clinical application in gingival tissue and suggests that a strong immunostaining for VEGF after therapy .