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Características fisico-químicas e celulares na secreção láctea de caprinos da raça Saanen durante o processo de secagem da glândula mamária / Physico-chemical and cellular characteristics on milk secretion of Saanen goats during the mammary gland drying off

Brandespim, Flavio Bracale 30 August 2007 (has links)
Para avaliar a influência do processo de secagem da glândula mamária sobre as características físico-químicas e celulares da secreção láctea foram avaliadas 216 amostras provenientes de 27 glândulas mamárias de 15 cabras da raça Saanen consideradas sadias, sendo que essas mamas foram separadas de acordo com o resultado do exame microbiológico da secreção láctea, caracterizando dois grupos: com e sem isolamento bacteriano, composto por 17 e 10 mamas, respectivamente. A partir do dia da interrupção da ordenha e em mais sete momentos (1, 3, 5, 7, 10, 15 e 30 dias após o início da secagem) foi feita a inspeção e a palpação das glândulas mamárias e posterior avaliação do aspecto da secreção láctea. Imediatamente após o exame clínico foram colhidas amostras de leite para a realização do exame microbiológico e das determinações das características físico-químicas e celulares (pH, eletrocondutividade, cloreto, lactose, proteínas, gordura, sólidos totais, índice cloreto/lactose, California Mastitis Test (CMT) e contagem de células somáticas). As glândulas mamárias apresentaram sua maior distensão no terceiro dia após a interrupção da ordenha, mesmo período em que foi possível observar o aparecimento de edema na base dos tetos e em toda a glândula, desaparecendo após o quinto dia, quando teve início a involução do úbere e a freqüência de mamas distendidas começou a declinar, sendo que ao final do processo 37,04% das mamas observadas eram classificadas como não distendidas. A secreção láctea inicial com aspecto de leite foi substituída a princípio por uma de coloração creme clara e mais tardiamente por uma de aspecto aquoso, sendo que ao final do processo as duas últimas eram mais observadas que a com aspecto de leite. Apenas o pH, a eletrocondutividade, os teores de cloretos, lactose, proteínas e índice cloreto/lactose sofreram uma significativa influência do processo de secagem, sendo que os valores do pH, eletrocondutividade, cloretos, proteínas e índice cloreto/lactose aumentaram e os valores de lactose declinaram. O CMT também sofreu uma influência do processo de secagem, mais especificamente as respostas \"traços\" e \"duas cruzes\". Estas, de maneira geral, aumentaram no decorrer da secagem, sendo que no último momento de colheita ocorreu uma queda na freqüência da resposta \"traços\" e a freqüência da resposta \"duas cruzes\" teve uma pequena diminuição no meio do processo. Ainda foi observado que, apesar de existirem diferenças estatísticas significativas entre valores das características físico-químicas e celulares das amostras de secreção láctea com e sem isolamento bacteriano, as diferenças são isoladas e limitadas a algumas características estudadas, impossibilitando afirmar que o processo de secagem dos dois grupos difere de maneira significativa. / To evaluate the influence of the mammary gland drying off on the physiochemical and cellular characteristics in the milk secretion they were appraised 216 coming samples of 27 mammary glands of 15 Saanen goats considered healthy, those mammas were separate in agreement with the result of the microbiological test of the milky secretion characterizing two groups: one with 17 mammas without bacterial isolation and other with 10 mammas that presented positive bacterial isolation. Starting from the day of the interruption of the milking and in more seven moments (1, 3, 5, 7, 10, 15 and 30 days after the beginning of the drying off) it was made the inspection and palpation of the mammary glands with subsequent evaluation of the aspect of the milky secretion. Immediately after the exam they were picked samples of milk for the accomplishment of the microbiological test and of the determinations of the physiochemical and cellular characteristics (pH, electrical conductance, chloride, lactose, proteins, fat, total solids, chloride/lactose ratio, California Mastitis Test (CMT) and somatic cell count). The mammary glands presented its largest distention in the third day after the milking interruption, same period in that was possible to observe the edema emergence in the teats base and in the whole gland, that disappeared after the fifth day, when involution of the udder begins and the frequency of distended mammas began to refuse, and at the end of the process 37,04% of the observed mammas they were classified as no distended. The initial milky secretion with aspect of milk was substituted at first for one of coloration cream clear and, so late, for one of aqueous aspect, and in the end of the process those two last they were more observed that the secretion with aspect of milk. Just the pH, electrical conductance, chloride, lactose, proteins and chloride/lactose ratio suffered a significant influence of the drying off, and the values of the pH, electrical conductance, chloride, proteins and chloride/lactose ratio increased and the lactose values refused. CMT also suffered an influence of the drying off, more specifically the answers \"lines\" and \"two crosses.\" These, in a general way, increased in elapsing of the drying off, and in the last moment studied it happened a fall in the frequency of the answer \"lines\" and the frequency of the answer \"two crosses\" had a small decrease in the middle of the process. It was still observed that in spite of significant statistical differences exist among values of the physiochemical and cellular characteristics of the samples of milky secretion with isolation and without bacterial isolation, the differences are punctual and limited to some studied characteristics, disabling to affirm that the process of drying of the two groups differs in a significant way.
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Paternal nutrition and cancer programming: the influence of selenium deficiency   or supplementation on the susceptibility of female offspring to chemically-induced mammary carcinogenesis / Nutrição paterna e programação do câncer: influência da deficiência ou suplementação com selênio na susceptibilidade da prole feminina à carcinogênese mamária quimicamente induzida.

Guido, Luiza Nicolosi 14 October 2016 (has links)
Breast cancer is an important public health problem. As mammary gland development is a dynamic process that initiates in embryonic life, recent evidence show that in-utero life exposure to maternal nutritional factors can alter mammary gland development and program breast cancer risk in adult life. Even tough studies focus on maternal nutrition, recent evidence show that paternal nutritional factors in-utero and during preconception also affects their female offspring mammary gland development and breast cancer susceptibility in adult life. Studies highlight epigenetic modulation of gene expression in the mammary gland as possible breast cancer programming underlying mechanisms. Selenium is a micronutrient with essential role in central aspects of embryogenesis, male fertility and that has been extensively studied as a chemopreventive agent in several breast cancer models. Among selenium possible mechanisms of action, modulation of cell proliferation, apoptosis, DNA damage, gene expression and epigenetic marks are highlighted. Thus, a rat experiment was conducted to evaluate whether paternal selenium deficiency or supplementation during preconception could affect mammary gland development and breast cancer risk, as well as possible molecular mechanisms involved. Four-week old male Sprague-Dawley rats were exposed to experimental diets (AIN93G) containing 0.15 (control), 0.05 (deficient) and 1ppm (supplemented) of selenium as sodium selenate for 9 weeks and mated with control females. At 7-week old, mammary carcinogenesis was induced in their female offspring by oral administration of 7,12 dymethylbenz[a] anthracene and mammary neoplasia development was evaluated. Paternal selenium deficiency during preconception altered mammary gland development as increased terminal end buds (TEBs) number, epithelial elongation and cell proliferation and decreased apoptosis that were associated with increased breast cancer risk (higher incidence and grade tumors). In addition, paternal selenium deficiency during preconception induced molecular alterations in the mammary gland of the female offspring such as global DNA hypomethylation, increased global levels of H3K27me3 and altered expression of genes related to early life and mammary gland development, apoptosis, cell cycle control, and DNA damage repair. Paternal selenium supplementation during preconception on the other hand did not influence breast cancer programing. Our data show that breast cancer risk can be determined in early-life stages trough the male germline molecular modulation and preconception as an important window of opportunity to start breast cancer prevention strategies. Assuring and adequate selenium intake by men could be a possible starting point. / O câncer de mama é um importante problema de saúde pública. O desenvolvimento da glândula mamária é um processo dinâmico que se inicia na vida intrauterina e evidências recentes mostram que a exposição do feto a fatores nutricionais maternos altera o desenvolvimento da glândula mamária e a susceptibilidade ao câncer de mama na vida adulta. Mesmo com um maior foco na nutrição materna, evidências recentes apontam que a nutrição paterna no período intrauterino e de preconcepção também afetam o desenvolvimento da glândula mamária e o risco de câncer de mama da sua prole feminina na vida adulta. Estudos apontam a modulação epigenética da expressão de genes na glândula mamária como possíveis mecanismos envolvidos na programação do câncer de mama. O selênio é um micronutriente com papel essencial em aspectos centrais da embriogênese, fertilidade masculina e que tem sido extensivamente estudado como um agente quimiopreventivo em diferentes modelos de câncer de mama. Dentre os possíveis mecanismos de ação do selênio, destacam-se a capacidade de modulação da proliferação celular, apoptose, danos do DNA e da expressão de genes e mecanismos epigenéticos. Dessa forma, foi conduzido um experimento em ratos para avaliar se a deficiência ou suplementação paterna com selênio durante o período de preconcepção poderia afetar na prole feminina o desenvolvimento da glândula mamária e o risco ao câncer de mama na vida adulta, assim como possíveis mecanismos moleculares envolvidos. Ratos machos da linhagem Sprague-Dawley com 4 semanas de vida foram submetidos à dieta experimental AIN93G contendo 0,15 (controle); 0,05 (deficiente) e 1ppm (suplementada) com selênio na forma de selenato de sódio por 9 semanas e acasalados com fêmeas controle. Com 7 semanas de vida, a carcinogênese mamária foi iniciada na prole feminina através da administração oral do carcinógeno químico 7,12 dimetilbenz[a] antraceno e o desenvolvimento das neoplasias mamárias foi avaliado. A deficiência paterna de selênio causou alterações no desenvolvimento da glândula mamária da prole feminina como aumento no número de terminal end buds (TEBs), aumento da elongação do epitélio mamário, aumento da proliferação celular e diminuição da apoptose que foram associados ao aumento do risco do câncer de mama (maior incidência e agressividade das lesões). Além disso, a deficiência paterna de selênio causou alterações de nível molecular na glândula mamária da prole feminina como hipometilação global, aumento dos níveis globais de H3K27me3 e alteração na expressão de genes relacionados ao desenvolvimento no início da vida e da glândula mamária, apoptose, controle de ciclo celular e reparo de danos no DNA. A suplementação paterna com selênio não foi influenciou o desenvolvimento da glândula mamária e o risco ao câncer de mama na vida adulta. Nossos resultados mostram que o risco do câncer de mama pode ser determinado no início da vida através de influências paternas por meio da modulação de mecanismos moleculares e que o período de preconcepção se caracteriza como uma importante janela de susceptibilidade para iniciar estratégias de diminuição do risco do câncer de mama. Assegurar uma ingestão adequada de selênio por homens pode ser um possível ponto de partida.
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Parâmetros produtivos, perfil de ácidos graxos do leite e balanço energético de cabras alimentadas com dieta contendo fonte não protegida de ácido linoleico conjugado (CLA) / Productive parameters, milk fatty acid profile and energy balance in goats receiving diet with an unprotected conjugated linoleic acid (CLA)

Dresch, Ricardo 25 June 2012 (has links)
Made available in DSpace on 2016-12-08T16:24:04Z (GMT). No. of bitstreams: 1 PGCA12MA037.pdf: 918485 bytes, checksum: 8954d3d831facc72cc305f43c58a9a17 (MD5) Previous issue date: 2012-06-25 / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico / The supplementation with rumen protected conjugated linoleic acid (CLA) has demonstrated to change milk composition and also milk fatty acid profile. However, few studies have fed this supplement in a rumen unprotected form. The objective of this study was to evaluate the effects of a rumen unprotected CLA supplement (29.8% of cis-9, trans-11 CLA and 29.9% of trans-10, cis-12 CLA) on productive parameters, milk fatty acid profile and energy balance of lactating goats. Twenty Toggenburg lactating goats were used in a cross-over design and received the following treatments: a) Control: 30 g/d of Megalac-E®; b) CLA: 30 g/d of a CLA supplement. Treatments were mixed into a concentrate (1 kg/d) which was fed in two equal meals after the morning and afternoon milking. Experimental periods lasted 14 d and were separated by a 6 d interval. There was a 13.9 and 13.3% reduction in milk fat content and yield, respectively, in CLA-fed goats. Moreover, the CLA treatment induced a 6.6% reduction in the forage intake, a 4.8 and 4.6% reduction in the concentration and yield of total solids in milk, respectively. Milk yield and body weight were unaffected by the CLA treatment and averaged 2.6 ± 0.1 kg/d and 39.9 ± 0.5 kg (mean ± SE), respectively. When fatty acids were grouped according to origin, there was a 13% decrease in de novo synthesized fatty acids (<C16), a 15.5% increase in preformed fatty acids taken up from blood circulation (>C16), and a 9.5% decrease in those fatty acids (C16) derived from both sources. Furthermore, on desaturase indexes, supplementation with CLA reduced by 31.76% the C14:1/14:0 ratio, by 5.9% the C16:1/C16: ratio, by 25.2% the C17:1/C17:0 ratio, by 25.56% the C18:1/C18:0 and by 5.22% the CLA cis-9, trans-11/ C18:1 trans-11 ratio. The inclusion of CLA also increased the concentration of cis-9, trans-11 CLA and trans-10, cis-12 CLA by 29.2 and 1376%, respectively, which resulted in a 993.4% increase in the trans-10, cis-12 CLA secretion in milk fat. Likewise, the concentration of trans-10 C18:1 and trans-11 C18:1 was 134.1 and 39.9% higher in CLA-fed goats, respectively. The non-esterified fatty acids (NEFA) were reduced in 22.4% in CLA-fed goats. The energy balance improved in 123.8% of CLA-treatment when compared to control treatment / O fornecimento de ácido linoleico conjugado (CLA) em uma forma inerte no rúmen tem demonstrado efeitos consistentes sobre o teor de gordura e perfil de ácidos graxos do leite. Contudo, poucos estudos utilizaram esse suplemento na forma desprotegida da biohidrogenação ruminal. Os objetivos deste estudo foram avaliar os efeitos do fornecimento de um suplemento de CLA desprotegido da bio-hidrogenação ruminal (29,8% de cis-9, trans-11 e 29,9% de trans-10, cis-12) sobre parâmetros produtivos, perfil de ácidos graxos do leite e no balanço energético de cabras leiteiras. Vinte cabras Toggenburg foram utilizadas em um delineamento cross-over e receberam os seguintes tratamentos: a) Controle: 30 g/d de Megalac-E® e; B) CLA: 30 g/d de um suplemento de CLA. Os suplementos lipídicos foram misturados a um concentrado à base de milho (1 kg/d) fornecidos duas vezes ao dia em porções iguais, logo após as ordenhas da manhã e da tarde. Cada período experimental consistiu de 14 dias, separados por um período de seis dias para minimizar efeitos residuais. O tratamento CLA reduziu a concentração e a produção da gordura do leite em 13,9 e 13,3%, respectivamente.O tratamento reduziu ainda a concentração e produção de sólidos totais em 4,8 e 4,6%, respectivamente. O tratamento CLA reduziu o consumo de forragem em 6,6%.O peso vivo e a produção de leite não diferiram entre tratamentos, com médias de 39,9 ± 0,5 kg e 2,6 ± 0,1 kg/dia, respectivamente. Quando os ácidos graxos foram agrupados conforme a origem, houve uma redução de 13% naqueles derivados da síntese de novo (<C16), um aumento de 15,5% nos pré-formados oriundos da circulação (>C16) e uma redução de 9,45% para os originários de ambas a fontes (C16:0 e C16:1). A suplementação com CLA reduziu os índices de dessaturase do C14:1/C14:0 em 31,7%, do C16:1/C16:0 em 5,9%, do C17:1/C17:0 em 25,2%, do C18:1/C18:0 em 25,5% e do CLA cis-9, trans-11/trans-11 C18:1 em 5,2%. As concentrações de CLA trans-10, cis-12 e CLA cis-9, trans-11 foram 1376 e 29,2%maiores nas cabras que receberam CLA, respectivamente. As concentrações de C18:1 trans-10 e C18:1 trans-11 foram elevadas em 134,1 e 39,9%, respectivamente. A secreção de CLA trans-10, cis-12 aumentou 993,42% no tratamento CLA. O tratamento CLA reduziu a concentração de ácidos graxos não esterificados (AGNE) no plasma sanguíneo em 22,4%. O balanço energético dos animais melhorou no tratamento CLA em 123,8% quando comparado ao tratamento controle
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Regulação gênica de isoformas da acetil-coa carboxilase alfa em ovelhas suplementadas com ácido linoleico conjugado / Transcriptional Regulation of Acetyl-CoA carboxylase Alpha isoforms in dairy ewes supplemented with conjugated linoleic acid

Ticiani, Elvis 07 July 2014 (has links)
Made available in DSpace on 2016-12-08T16:24:18Z (GMT). No. of bitstreams: 1 PGCA14MA138.pdf: 701716 bytes, checksum: ae5be4aae0f8d732a1c72c1f572ee5fa (MD5) Previous issue date: 2014-07-07 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / Feeding trans-10, cis-12 conjugated linoleic acid (CLA) to lactating ewes reduces milk fat by down-regulating gene expression of enzymes involved in lipid synthesis in mammary gland. An example is acetyl-CoA carboxylase alpha (ACC&#945;), a key enzyme in the de novo fatty acid synthesis pathway. ACC&#945; is encoded by mRNAs transcribed from three promoters, PI, PII and PIII, characterized as tissue-specific in the ovine genome. This study evaluated the effects of a rumen-unprotected trans-10, cis-12 CLA supplement fed to crossbred Lacaune/Texel lactating ewes, on gene expression of different mRNA transcripts of ACC&#945;. Twelve ewes arranged in a completely randomized design received for 14 days one of the following treatments, at 15 (early), 70 (mid) and 120 (late) days of lactation: Control (forage + 0.9 kg of concentrate-DM) and CLA [forage + 0.9 kg of concentrate + 28g/d of CLA (29.9% trans-10, cis-12)]. The CLA supplement was orally dosed. Mammary gland and adipose tissue biopsies were taken on day 14. Subsequently RNA was extracted, cDNA synthesized and real time PCR analysis conducted. Data were analyzed by MIXED procedure. Milk fat content was reduced by CLA supplementation in all stages of lactation. Compared to Control, in the mammary gland CLA reduced (P<0.05) transcript from PIII in early and mid lactation, increasing transcript from PI in adipose tissue. In the late lactation there was a higher milk fat depression and transcripts PII-derived were downregulated. Overall, our results suggest that trans-10, cis-12 CLA down-regulates ACC&#945; gene expression by decreasing expression from promoter II and III in mammary tissue and increases ACC&#945; gene expression by increasing expression promoter I in adipose tissue, having influences of stage of lactation on the behavior of mRNA isoforms of ACC&#945; / A Suplementação com ácido linoleico conjugado (CLA trans-10, cis-12) para ovelhas em lactação reduz a gordura do leite regulando a expressão dos genes de enzimas envolvidas na síntese lipídica na glândula mamária. Um exemplo é a acetil-CoA carboxilase alfa (ACC&#945;), uma enzima chave na síntese de novo de ácidos graxos. A ACC&#945; é codificada por mRNAs transcritos a partir dos promotores PI, PII, PIII, caracterizados como tecido-específico no genoma ovino. Este estudo avaliou os efeitos da suplementação com CLA trans-10, cis-12 desprotegido da bio-hidrogenação ruminal para ovelhas em lactação cruzadas Lacaune/Texel, sobre a expressão gênica de diferentes transcritos de mRNA da ACC&#945;. Doze ovelhas arranjadas em um delineamento experimental inteiramente casualizado receberam por 14 dias um dos seguintes tratamentos, durante o início, meio e fim de lactação: Controle (forragem + 1 kg de concentrado) e CLA [forragem + 1kg de concentrado + 30mL/d de CLA (29,9% trans-10, cis-12)]. A suplementação com CLA foi administrada oralmente. Foram feitas biópsias de glândula mamária e tecido adiposo no 14º dia de cada período experimental. O RNA foi extraído, o cDNA sintetizado para posterior análise por PCR real time. Os dados foram analisados pelo procedimento MIXED. Teor de gordura do leite foi reduzido pela suplementação de CLA em todos os períodos de lactação. Comparado ao controle, o CLA reduziu (P<0,05) os transcritos oriundos do PIII na glândula mamária no início e meio da lactação, aumentando transcritos oriundos PI no tecido adiposo. No final da lactação houve uma maior depressão da gordura do leite e transcritos derivados do PII foram reduzidos. Em suma, nossos resultados sugerem que o CLA trans-10, cis-12, regula a expressão gênica da ACC&#945;, diminuindo a expressão a partir do promotor II e III, no tecido mamário e aumentando a expressão gênica ACC&#945; através do PI no tecido adiposo, apresentando influências da fase de lactação sobre o comportamento das isoformas de mRNA da ACC&#945;
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Estudo de neoplasias mamárias de cadelas em Uberlândia e imunomarcação para ciclooxigenase 2 / Research of mammary tumors in female dogs in Uberlândia and cyclooxygenase 2 immunostaining

Soares, Nicolle Pereira 22 May 2015 (has links)
Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / The cyclooxygenase 2 (Cox 2) is a molecular indicator of prognosis marker and its expression is associated with progression of mammary tumors in dogs. The purpose of this study was to investigate breast tumors of bitches Cox 2 expression by immunohistochemistry and correlated with the clinical stage, tumor size, lymph node involvement, the classification and the histological grade of carcinomas. We included in this study, 100 female dogs with mammary tumors and 131 samples were analyzed. Histological and COX 2 immunostaining evaluation were conducted. The streptavidin-biotinaperoxidase technique was used in order to do the immunohistochemistry (IHC). The IHC analysis was performaced counting the number of positive-staining cells in ten fields and the staining intensity. The COX 2 staining index was obtained by multiplying the COX 2 staining distribution and intensity scores. This gave a range of COX 2 staining indices of 0 12.Carcinoma complex was the most common histological type that we were diagnosed. The COX 2 expression was observed in the benign and malignant tumors. The weak score is more frequent, and strong score was observed in carcinomas. Simple carcinomas demonstraded a higher number of positive staining cells. There was no positive correlation between the histological type, size and lymph node involvement and the Cox 2 immunostaining. Therefore, COX 2 immunostaining is not a good prognostic factor. / A ciclooxigenase 2 (Cox 2) é um marcador molecular indicador de prognóstico e sua expressão está relacionada com a progressão do tumor mamário na cadela. Tendo isso em vista, o objetivo deste trabalho foi investigar tumores mamários de cadelas a expressão de Cox 2 por meio de imunohistoquímica e correlacionar com o estadiamento clínico, o tamanho tumoral, o envolvimento linfonodal, a classificação e o grau histológico dos carcinomas. Foram incluídas neste estudo, 100 cadelas com neoplasia mamária e dessas, 131 amostras foram analisadas. A avaliação histológica e da imunomarcação de Cox 2 foram conduzidas. Para a imunohistoquímica (IHQ), utilizou-se a técnica de estreptoavidina-biotinaperoxidase. Para análise das lâminas de IHQ contou-se o número de células marcadas em dez campos e verificou-se a intensidade de marcação. O escore de marcação foi obtido pelo produto do número de células marcadas e a intensidade de marcação. O tipo histológico mais frequente diagnosticado foi o carcinoma complexo mamário. A expressão de Cox 2 foi observada nos tumores benignos e malignos. A marcação fraca é mais frequente, sendo a marcação forte observada nos carcinomas. Os carcinomas simples apresentaram maior número de células marcadas. Não houve correlação positiva entre o tipo histológico, tamanho e o envolvimento linfonodal e a imunomarcação de Cox 2. Sendo assim, a imunomarcação de Cox 2 não demonstrou ser um bom fator de prognóstico. / Mestre em Ciências Veterinárias
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Características fisico-químicas e celulares na secreção láctea de caprinos da raça Saanen durante o processo de secagem da glândula mamária / Physico-chemical and cellular characteristics on milk secretion of Saanen goats during the mammary gland drying off

Flavio Bracale Brandespim 30 August 2007 (has links)
Para avaliar a influência do processo de secagem da glândula mamária sobre as características físico-químicas e celulares da secreção láctea foram avaliadas 216 amostras provenientes de 27 glândulas mamárias de 15 cabras da raça Saanen consideradas sadias, sendo que essas mamas foram separadas de acordo com o resultado do exame microbiológico da secreção láctea, caracterizando dois grupos: com e sem isolamento bacteriano, composto por 17 e 10 mamas, respectivamente. A partir do dia da interrupção da ordenha e em mais sete momentos (1, 3, 5, 7, 10, 15 e 30 dias após o início da secagem) foi feita a inspeção e a palpação das glândulas mamárias e posterior avaliação do aspecto da secreção láctea. Imediatamente após o exame clínico foram colhidas amostras de leite para a realização do exame microbiológico e das determinações das características físico-químicas e celulares (pH, eletrocondutividade, cloreto, lactose, proteínas, gordura, sólidos totais, índice cloreto/lactose, California Mastitis Test (CMT) e contagem de células somáticas). As glândulas mamárias apresentaram sua maior distensão no terceiro dia após a interrupção da ordenha, mesmo período em que foi possível observar o aparecimento de edema na base dos tetos e em toda a glândula, desaparecendo após o quinto dia, quando teve início a involução do úbere e a freqüência de mamas distendidas começou a declinar, sendo que ao final do processo 37,04% das mamas observadas eram classificadas como não distendidas. A secreção láctea inicial com aspecto de leite foi substituída a princípio por uma de coloração creme clara e mais tardiamente por uma de aspecto aquoso, sendo que ao final do processo as duas últimas eram mais observadas que a com aspecto de leite. Apenas o pH, a eletrocondutividade, os teores de cloretos, lactose, proteínas e índice cloreto/lactose sofreram uma significativa influência do processo de secagem, sendo que os valores do pH, eletrocondutividade, cloretos, proteínas e índice cloreto/lactose aumentaram e os valores de lactose declinaram. O CMT também sofreu uma influência do processo de secagem, mais especificamente as respostas \"traços\" e \"duas cruzes\". Estas, de maneira geral, aumentaram no decorrer da secagem, sendo que no último momento de colheita ocorreu uma queda na freqüência da resposta \"traços\" e a freqüência da resposta \"duas cruzes\" teve uma pequena diminuição no meio do processo. Ainda foi observado que, apesar de existirem diferenças estatísticas significativas entre valores das características físico-químicas e celulares das amostras de secreção láctea com e sem isolamento bacteriano, as diferenças são isoladas e limitadas a algumas características estudadas, impossibilitando afirmar que o processo de secagem dos dois grupos difere de maneira significativa. / To evaluate the influence of the mammary gland drying off on the physiochemical and cellular characteristics in the milk secretion they were appraised 216 coming samples of 27 mammary glands of 15 Saanen goats considered healthy, those mammas were separate in agreement with the result of the microbiological test of the milky secretion characterizing two groups: one with 17 mammas without bacterial isolation and other with 10 mammas that presented positive bacterial isolation. Starting from the day of the interruption of the milking and in more seven moments (1, 3, 5, 7, 10, 15 and 30 days after the beginning of the drying off) it was made the inspection and palpation of the mammary glands with subsequent evaluation of the aspect of the milky secretion. Immediately after the exam they were picked samples of milk for the accomplishment of the microbiological test and of the determinations of the physiochemical and cellular characteristics (pH, electrical conductance, chloride, lactose, proteins, fat, total solids, chloride/lactose ratio, California Mastitis Test (CMT) and somatic cell count). The mammary glands presented its largest distention in the third day after the milking interruption, same period in that was possible to observe the edema emergence in the teats base and in the whole gland, that disappeared after the fifth day, when involution of the udder begins and the frequency of distended mammas began to refuse, and at the end of the process 37,04% of the observed mammas they were classified as no distended. The initial milky secretion with aspect of milk was substituted at first for one of coloration cream clear and, so late, for one of aqueous aspect, and in the end of the process those two last they were more observed that the secretion with aspect of milk. Just the pH, electrical conductance, chloride, lactose, proteins and chloride/lactose ratio suffered a significant influence of the drying off, and the values of the pH, electrical conductance, chloride, proteins and chloride/lactose ratio increased and the lactose values refused. CMT also suffered an influence of the drying off, more specifically the answers \"lines\" and \"two crosses.\" These, in a general way, increased in elapsing of the drying off, and in the last moment studied it happened a fall in the frequency of the answer \"lines\" and the frequency of the answer \"two crosses\" had a small decrease in the middle of the process. It was still observed that in spite of significant statistical differences exist among values of the physiochemical and cellular characteristics of the samples of milky secretion with isolation and without bacterial isolation, the differences are punctual and limited to some studied characteristics, disabling to affirm that the process of drying of the two groups differs in a significant way.
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Paternal nutrition and cancer programming: the influence of selenium deficiency   or supplementation on the susceptibility of female offspring to chemically-induced mammary carcinogenesis / Nutrição paterna e programação do câncer: influência da deficiência ou suplementação com selênio na susceptibilidade da prole feminina à carcinogênese mamária quimicamente induzida.

Luiza Nicolosi Guido 14 October 2016 (has links)
Breast cancer is an important public health problem. As mammary gland development is a dynamic process that initiates in embryonic life, recent evidence show that in-utero life exposure to maternal nutritional factors can alter mammary gland development and program breast cancer risk in adult life. Even tough studies focus on maternal nutrition, recent evidence show that paternal nutritional factors in-utero and during preconception also affects their female offspring mammary gland development and breast cancer susceptibility in adult life. Studies highlight epigenetic modulation of gene expression in the mammary gland as possible breast cancer programming underlying mechanisms. Selenium is a micronutrient with essential role in central aspects of embryogenesis, male fertility and that has been extensively studied as a chemopreventive agent in several breast cancer models. Among selenium possible mechanisms of action, modulation of cell proliferation, apoptosis, DNA damage, gene expression and epigenetic marks are highlighted. Thus, a rat experiment was conducted to evaluate whether paternal selenium deficiency or supplementation during preconception could affect mammary gland development and breast cancer risk, as well as possible molecular mechanisms involved. Four-week old male Sprague-Dawley rats were exposed to experimental diets (AIN93G) containing 0.15 (control), 0.05 (deficient) and 1ppm (supplemented) of selenium as sodium selenate for 9 weeks and mated with control females. At 7-week old, mammary carcinogenesis was induced in their female offspring by oral administration of 7,12 dymethylbenz[a] anthracene and mammary neoplasia development was evaluated. Paternal selenium deficiency during preconception altered mammary gland development as increased terminal end buds (TEBs) number, epithelial elongation and cell proliferation and decreased apoptosis that were associated with increased breast cancer risk (higher incidence and grade tumors). In addition, paternal selenium deficiency during preconception induced molecular alterations in the mammary gland of the female offspring such as global DNA hypomethylation, increased global levels of H3K27me3 and altered expression of genes related to early life and mammary gland development, apoptosis, cell cycle control, and DNA damage repair. Paternal selenium supplementation during preconception on the other hand did not influence breast cancer programing. Our data show that breast cancer risk can be determined in early-life stages trough the male germline molecular modulation and preconception as an important window of opportunity to start breast cancer prevention strategies. Assuring and adequate selenium intake by men could be a possible starting point. / O câncer de mama é um importante problema de saúde pública. O desenvolvimento da glândula mamária é um processo dinâmico que se inicia na vida intrauterina e evidências recentes mostram que a exposição do feto a fatores nutricionais maternos altera o desenvolvimento da glândula mamária e a susceptibilidade ao câncer de mama na vida adulta. Mesmo com um maior foco na nutrição materna, evidências recentes apontam que a nutrição paterna no período intrauterino e de preconcepção também afetam o desenvolvimento da glândula mamária e o risco de câncer de mama da sua prole feminina na vida adulta. Estudos apontam a modulação epigenética da expressão de genes na glândula mamária como possíveis mecanismos envolvidos na programação do câncer de mama. O selênio é um micronutriente com papel essencial em aspectos centrais da embriogênese, fertilidade masculina e que tem sido extensivamente estudado como um agente quimiopreventivo em diferentes modelos de câncer de mama. Dentre os possíveis mecanismos de ação do selênio, destacam-se a capacidade de modulação da proliferação celular, apoptose, danos do DNA e da expressão de genes e mecanismos epigenéticos. Dessa forma, foi conduzido um experimento em ratos para avaliar se a deficiência ou suplementação paterna com selênio durante o período de preconcepção poderia afetar na prole feminina o desenvolvimento da glândula mamária e o risco ao câncer de mama na vida adulta, assim como possíveis mecanismos moleculares envolvidos. Ratos machos da linhagem Sprague-Dawley com 4 semanas de vida foram submetidos à dieta experimental AIN93G contendo 0,15 (controle); 0,05 (deficiente) e 1ppm (suplementada) com selênio na forma de selenato de sódio por 9 semanas e acasalados com fêmeas controle. Com 7 semanas de vida, a carcinogênese mamária foi iniciada na prole feminina através da administração oral do carcinógeno químico 7,12 dimetilbenz[a] antraceno e o desenvolvimento das neoplasias mamárias foi avaliado. A deficiência paterna de selênio causou alterações no desenvolvimento da glândula mamária da prole feminina como aumento no número de terminal end buds (TEBs), aumento da elongação do epitélio mamário, aumento da proliferação celular e diminuição da apoptose que foram associados ao aumento do risco do câncer de mama (maior incidência e agressividade das lesões). Além disso, a deficiência paterna de selênio causou alterações de nível molecular na glândula mamária da prole feminina como hipometilação global, aumento dos níveis globais de H3K27me3 e alteração na expressão de genes relacionados ao desenvolvimento no início da vida e da glândula mamária, apoptose, controle de ciclo celular e reparo de danos no DNA. A suplementação paterna com selênio não foi influenciou o desenvolvimento da glândula mamária e o risco ao câncer de mama na vida adulta. Nossos resultados mostram que o risco do câncer de mama pode ser determinado no início da vida através de influências paternas por meio da modulação de mecanismos moleculares e que o período de preconcepção se caracteriza como uma importante janela de susceptibilidade para iniciar estratégias de diminuição do risco do câncer de mama. Assegurar uma ingestão adequada de selênio por homens pode ser um possível ponto de partida.
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Isolamento, caracterização e diferenciação de células-tronco do tecido adiposo de glândula mamária bovina

Rettore, João Vitor Paes 09 September 2013 (has links)
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Entre essas técnicas, uma que tem merecido destaque é a Clonagem por Transferência Nuclear (NT) pelo seu uso em técnicas de transgênese, entre outros, tornando-se uma alternativa viável frente aos métodos convencionais, como a microinjeção pró-nuclear. Porém, um problema frequentemente associado à NT é a baixa eficiência do processo, sendo pequena a proporção de embriões viáveis que são reconstruídos a partir de células somáticas como doadoras de núcleo. Muitos fatores podem influenciar nessa baixa taxa de sucesso, entre eles a incompleta reprogramação do núcleo da célula somática doadora, podendo levar a uma expressão anormal de importantes genes relacionados ao desenvolvimento do embrião. Isso significa que, para a clonagem funcionar, o núcleo da célula doadora precisa ser totalmente reprogramado após sua transferência, cessando sua programação própria de expressão gênica. O grau de diferenciação celular e comprometimento epigenético da célula doadora pode comprometer esse processo, levando-se a pensar na utilização de células menos comprometidas a fim de obter-se uma maior eficiência, tais como as células-tronco adultas. No presente trabalho isolamos, caracterizamos e testamos o potencial de diferenciação de células-tronco isoladas a partir do tecido adiposo da glândula mamária bovina (CTGMB), e sua caracterização semelhante a células-tronco mesenquimais torna interessante o potencial dessas células para terapia celular em bovinos, ou mesmo para clonagem por transferência nuclear, já que sua aplicação na técnica pode contribuir para aumentar sua eficiência, por se tratarem de células mais progenitoras. Além disso, por não terem comprometimento com um dado tipo celular, talvez possam contornar problemas epigenéticos. O know-how e os dados aqui apresentados são inéditos e inovadores, pois na literatura não há registro de algum grupo de pesquisa que tenha chegado a tal caracterização com riqueza de detalhes em células bovinas, e tais protocolos para obtenção das CTGMB podem ser patenteados. / Animal cloning represents a major technological breakthrough, but.it is still an experimental technique and needs some improvement so it can truly be diffused in the agricultural and social environment. Among these techniques, one that has been highlighted is Cloning by nuclear transfer (NT) because of its use in transgenesis techniques, among others, becoming one viable alternative compared to the conventional methods such as pro-nuclear microinjection. However, the low efficiency of the process is a common problem associated with NT, being small the proportion of viable embryos that are reconstructed using somatic cells as nuclear donors. There are many factors playing roles on this low success rate, one of them being the incomplete reprogramming of donor’s somatic cell nucleus, leading to an abnormal expression of important genes related to embryo development. So, for the cloning to work properly, the donor cell nucleus must be completely reprogrammed after its transfer, ceasing its own gene expression programme. The actual stage of cell differentiation and epigenetic commitment of the donor cell may compromise the process, leading to think of using less committed cells in order to obtain a higher efficiency, such as adult stem cells. In the present work we isolate, characterize and test the differentiation potential of stem cells isolated from the adipose tissue of bovine mammary gland (CTGMB), and their characterization as similar to mesenchymal stem cells make interesting their potential use on cattle cell therapy, or even nuclear transfer cloning, once their application in such technique could help increasing its efficiency because CTGMB are more progenitor cells. Furthermore, since they are not committed to a specific cell type, they may be able to bypass epigenetic issues. The know-how and data presented here are novel and innovative, since in literature there is no record of any research group that has come to reach such a detailed characterization in bovine cells, and such protocols for obtaining CTGMB are patentable.

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