C. glabrata est une levure commensale de l’Homme à l’origine d’infections opportunistes chez les patients immunodéprimés. Les neutrophiles sont les premières cellules recrutées sur le site de l’infection. La production de formes réactives de l’oxygène par ces cellules, initiée dans le phagosome par la NADPH oxydase 2 est un évènement majeur de la maturation du phagosome et fait l’objet de l’étude réalisée. L’objectif de ce travail était de développer des outils expérimentaux permettant l’évaluation du stress oxydant subi par C. glabrata lors de son internalisation par les phagocytes. La levure non pathogène S. cerevisiae, phylogénétiquement plus proche de C. glabrata, a été choisie comme organisme contrôle permettant une étude comparative entre les deux levures. C. glabrata est efficacement internalisée en absence d’opsonisation, par la lignée PLB-985-neutrophile contrairement à S. cerevisiae. L’utilisation de sondes organiques pour la mesure des FRO dans le phagosome est limitée puisque que le marquage des levures par ces sondes n’est pas spécifiquement localisé. Le développement de biosenseurs de FRO à partir de protéines fluorescentes, dont la localisation est maitrisée grâce à un système de marquage, est présenté. Les études réalisées suggèrent cependant que les protéines fluorescentes subissent des modifications dans le phagosome indépendantes de la production de FRO. Des tests de viabilité effectués sur les levures après phagocytose montrent que l’élimination des levures dépend fortement de facteurs indépendants de la production de FRO. Plusieurs méthodes indiquent néanmoins que les phagosomes avec C. glabrata contiennent moins de FRO que les phagosomes avec S. cerevisiae. C. glabrata semble éliminer les FRO plus efficacement que S. cerevisiae. / C. glabrata is a human commensal yeast responsible for opportunistic infections in immunocompromised patients. Neutrophils are the first cells to be recruited to the infection site. Production of reactive oxygen species (ROS) in the phagosome by the phagocyte NADPH oxidase 2 is a major event of the phagosome maturation and is the subject of the study. The aim of this work was to develop experimental tools allowing the evaluation of the oxidative stress endured by C. glabrata during its internalization by phagocytes. The non-pathogenic yeast S. cerevisiae, phylogenetically close to C. glabrata, was chosen as a control organism allowing a comparative study between the two yeasts. Unlike S. cerevisiae, non-opsonized C. glabrata is efficiently internalized by the PLB-985 cell line. The utilization of organic dyes for the detection of ROS in the phagosome lacks precision since the staining of the yeasts by those dyes is not specifically localized. The development of ROS biosensors based on fluorescent proteins, whose localization can be controlled due to a new staining procedure, is presented here. However the results suggest that fluorescent proteins undergo modifications in the phagosome independently from the ROS production. Viability tests performed on the yeasts after phagocytosis showed that yeast removal depends mainly on factors independent from ROS production. Several methods indicate nevertheless that the phagosomes of C. glabrata contain less ROS than the phagosome of S. cerevisiae. C. glabrata appears to suppress ROS more efficiently than S. cerevisiae.

Graduation date: 2001

Zugl.: München, Techn. Univ., Diss., 2007

Zugl.: München, Techn. Universiẗat, Diss., 2007.

Th. 3e cycle--Pharm.--Paris 5, 1983. N°: 54.

Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Programa de Pós-Graduação em Biotecnologia, Florianópolis, 2010 / Made available in DSpace on 2012-10-25T14:08:13Z (GMT). No. of bitstreams: 1 281335.pdf: 2427402 bytes, checksum: fcd04bec714a61e4eedf82f41ef096c9 (MD5) / Candida glabrata é considerado um importante patógeno fúngico emergente devido principalmente ao incremento de pacientes imunossuprimidos, e ao uso indiscriminado de compostos azólicos, resultando em altas taxas de mortalidade pela resistência inata desta levedura aos antifúngicos normalmente utilizados. Estratégias que objetivam a pronta identificação deste patógeno são extremamente importantes já que permitem a pronta implementação de um tratamento medicamentoso apropriado. A utilização de trealose por C. glabrata é apontada como importante metodologia diagnóstica na pratica laboratorial, já que é característica marcante desta levedura a utilização de apenas glicose e trealose como fontes de carbono. Resultados prévios indicavam que esta levedura cresce em trealose graças à secreção no meio de cultura de uma trealase ácida que prontamente hidrolisa o dissacarídeo, permitindo a rápida fermentação da glicose liberada. No genoma de C. glabrata encontramos a ORF CAGL0K05137g, similar ao gene (ATH1) que codifica para a trealase ácida de S. cerevisiae. No intuito de verificar a identidade do gene postulado no genoma de C. glabrata como sendo da trealase ácida, utilizamos tanto estratégias de deleção da ORF do genoma, como subclonagem e expressão heteróloga dessa sequência gênica em S. cerevisiae. A deleção em C. glabrata confirmou a identidade do gene, não só pela ausência de crescimento em meios de cultura contendo trealose como fonte de carbono, como também pela perda da atividade trealase ácida periplasmática e/ou secretada pelas células. Além disso, nossos resultados indicam o envolvimento deste gene na manutenção da homeostase celular durante o estresse salino. A seqüência de DNA correspondente foi também subclonada de forma a sobrexpressar este gene em S. cerevisiae, confirmando o gene CgATH1 como sendo o responsável pela síntese de uma trealase ácida. A ORF clonada foi seqüenciada e comparada à ORF CAGL0K05137g, mostrando uma identidade de 98% entre as sequências. Acreditamos que a caracterização molecular da trealase ácida em C. glabrata permitirá melhorias no diagnóstico laboratorial, bem como uma melhor compreensão do papel desta enzima, e do metabolismo de trealose, na fisiopatologia deste importante patógeno oportunista e de outros fungos de interesse médico. / Candida glabrata is considered an important and emergent fungal pathogen due mainly to an increase in immunosuppressive patients, and to the indiscriminate use of azolic compounds, resulting in high mortality rates by the innate resistance of this yeast towards the normally used antifungals. Strategies that objectify the fast identification of this pathogen are extremely important, because they will allow the immediate implementation of an appropriate medical treatment. The utilization of trehalose by C. glabrata is pointed out as an important diagnostic methodology in the laboratorial practice, since it is a striking feature of the yeast to use only glucose and trehalose as carbon sources. Previous results indicate that this yeast grows in trehalose thanks to the secretion of an acid trehalase in the culture media that promptly hydrolyses the disaccharide, allowing the fast fermentation of the released glucose. In the genome of C. glabrata we found the ORF CAGL0K05137g, similar to the gene (ATH1) encoding for the acid trehalase of S. cerevisiae. In order to verifying the identity of the postulated gene in the genome of C. glabrata as an acid trehalase, we thus utilized strategies for the deletion of the ORF from the genome, as well as cloning and heterologous expression of this genetic sequence in S. cerevisiae. The deletion in C. glabrata confirmed the identity of the gene, not only because of absence of growth in culture media containing trehalose as a carbon source, but also to the loss of periplasmic and/or secreted acid trehalase activity by the cells. Besides, our results indicate the involvement of this gene in the maintenance of cellular homeostasis during a saline stress. The corresponding DNA sequence was also subcloned so that the gene could be overexpressed in S. cerevisiae, confirming the CgATH1 gene as being responsible for the synthesis of an acid trehalase. The cloned ORF was sequenced and compared to the ORF CAGL0K05137g, showing 98% identity between the sequences. We believe that the molecular characterization of the acid trehalase in C. glabrata will allow improvements in the laboratorial diagnostic, as well as a better understanding of this enzyme#s role, and of trehalose metabolism, in the physiopathology of this important opportunistic pathogen and of other fungi of medical interest.

Submitted by Alice Araujo (alice.caraujo@ufpe.br) on 2018-06-01T16:59:19Z No. of bitstreams: 1 DISSERTAÇÃO Hallysson Douglas Andrade de Araújo.pdf: 2960301 bytes, checksum: 97baeea551ea35079bca0b1ab7a1123d (MD5) / Made available in DSpace on 2018-06-01T16:59:19Z (GMT). No. of bitstreams: 1 DISSERTAÇÃO Hallysson Douglas Andrade de Araújo.pdf: 2960301 bytes, checksum: 97baeea551ea35079bca0b1ab7a1123d (MD5) Previous issue date: 2016-02-16 / CNPQ / No Brasil, Pernambuco é um dos estados com maior prevalência em esquistossomose mansônica, doença cujo principal vetor é a Biomphalaria glabrata. Niclosamida é o principal produto usado de controle da B. glabrata, mas devido a sua toxicidade o seu uso compromete o ecossistema aquático, tornando importante a busca por moluscicidas alternativos e de menor toxicidade ambiental, como por exemplo o ácido úsnico (AU) purificado de Cladonia substellata e o seu derivado o usnato de potássio (USNP). Este trabalho objetivou avaliar a atividade moluscicida do UA e do USNP, sobre estádios embrionários de B. glabrata e moluscos adulto. O AU foi obtido a partir de talos de C. substellata extraído com éter dietílico e purificado em coluna de sílica Gel eluída com clorofórmio:hexano (80:20 v/v). O USNP foi obtido a partir de AU dissolvido em água, a 40°C, seguido por gotejamento KOH (10%) até a completa solubilização da amostra, e em seguida liofilizado e mantido a -80 °C. A estrutura das moléculas foi confirmada por análises de Infra Vermelho (IV) e Ressonância Magnética Nuclear de Prótons (RMN H+). Os embriões (n=100) foram expostos em soluções contendo 1 a 6 μg/mL de AU solubilizados em DMSO (0,5%), bem como USNP em água filtrada e declorada, por 24 h. Após a exposição os embriões foram lavados com água filtrada declorada e observados após 7 dias para verificação da viabilidade (eclosão) e inviabilidade (mortos e malformados). Os grupos controles continham água filtrada declorada, água com DMSO a 0,5% e água com niclosamida (1μg/mL). O teste de toxicidade do AU foi realizado sobre Artemia salina nas concentrações de 1 a 4 μg/mL, por 24 h de exposição. Os resultados mostraram que o AU para os estádios de blástula ocasionou 51% de inviabilidade na concentração de 1,5 μg/mL e em gástrula de 72% na concentração de 4 μg/mL. Para os estádios de trocófora e véliger na concentração de 5 μg/mL foram observados 29 e 93% de inviabilidades respectivamente. Todos os estádios mostraram 100% de inviabilidade para o AU nas concentrações 2, 4,5, 6 e 6 μg/mL respectivamente. Enquanto que para o USNP o estádio de blástula na concentração de 5 μg/ml ocasionou 48% de inviabilidade, sendo resultado semelhante no estádio de gástrula na concentração de 3 μg/mL. Os estádios de trocófora e véliger apresentaram 27 e 26% de inviabilidade para a concentração de 2,5 μg/mL respectivamente. Os seguintes estádios mostraram 100% de inviabilidades para o USNP nas concentrações 6, 4, 4.5 e 4.5 μg/mL respectivamente. Para moluscos adulto o AU apresentou 53 e 87% de mortalidade nas concentrações de 2 e 3 μg/mL após 24 h de exposição e 90 e 100% nas concentrações de 2,5 e 3 μg/mL observados após 7 dias. A toxicidade para A. salina o ácido úsnico apresentou a partir da concentração de 2,5 μg/mL. Portanto, o estudo mostrou que o AU e o USNP demonstraram ser moléculas promissoras no controle ou eliminação da B. glabrata. / In Brazil, Pernambuco is one of the states with the highest prevalence of schistosomiasis, a disease whose main vector is the Biomphalaria glabrata. Niclosamida is the main product used in Control B. glabrata, but due to toxicity its use compromises the aquatic ecosystem, making it important to search for alternative molluscicides and lower environmental toxicity such as usnic acid (UA) purified Cladonia substellata and its derivative potassium usnate (USNP). This study aimed to evaluate the embryotoxic activity UA and USNP on embryonic stages of B. glabrata. The UA was obtained from C. substellata extracted with diethyl ether and purified on silica gel column eluted with chloroform: hexane (80:20 v/v). The USNP was obtained from UA dissolved in water at 40 °C, followed by dropwise KOH (10%) until complete solubilization of the sample, and then lyophilized and kept at -80 °C. The structure of the molecules was confirmed by Infra-red (IR) and Proton Nuclear Magnetic Resonance (1H NMR). The embryos (n = 100) were exposed to solutions containing 1 to 6 μg/mL UA solubilised in DMSO (0.5%) and in USNP filtered and dechlorinated water for 24 h. After exposure the embryos were washed with filtered dechlorinated water and observed for 7 days to verify the viability (hatch) and unviable (death and malformed). The control groups contained filtered dechlorinated water, water with 0.5% DMSO and water with niclosamide (1μg/mL). The UA toxicity test was conducted on Artemia salina environmental bioindicator in concentrations from 1 to 4 (μg/mL) for 24 h of exposure. The results showed that the UA to the blastula stage resulted in the unviable of 51% concentration 1.5 μg/mL and the percentage of gastrula 72% at a concentration of 4 μg/mL. To trochophore and veliger stages in the concentration of 5 μg/mL were observed 29 and 93% unviable respectively. All stages showed 100% unviable for the UA in concentrations 2, 4.5, 6 and 6 μg/mL respectively. While the USNP to the blastula stage at a concentration of 5 μg/mL resulted in 48% of unviable, with similar result in the gastrula stage in the concentration of 3 μg/mL. To the trochophore and veliger stages 27 and 26% have unviable to concentration of 2.5 μg/mL respectively. The following stages showed 100% unviable USNP concentrations for 6, 4, 4.5 and 4.5 μg/mL respectively. For adult mollusks UA showed 53 and 87% mortality at concentrations of 2 and 3 μg/mL after 24 h exposure to 90 and 100% at concentrations of 2.5 and 3 μg/mL observed after 7 days. Regarding toxicity to A. salina UA showed significant toxicity values from the concentration of 2.5 μg/mL. Therefore, the study showed that the UA and USNP proved promising molecules in the control or elimination of B. glabrata.

Submitted by Pedro Barros (pedro.silvabarros@ufpe.br) on 2018-07-31T22:04:36Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 811 bytes, checksum: e39d27027a6cc9cb039ad269a5db8e34 (MD5) DISSERTAÇÃO Maíra de Vasconcelos Lima.pdf: 1560671 bytes, checksum: dcade0e37de4455cf684dc79c6f22009 (MD5) / Approved for entry into archive by Alice Araujo (alice.caraujo@ufpe.br) on 2018-08-02T17:20:34Z (GMT) No. of bitstreams: 2 license_rdf: 811 bytes, checksum: e39d27027a6cc9cb039ad269a5db8e34 (MD5) DISSERTAÇÃO Maíra de Vasconcelos Lima.pdf: 1560671 bytes, checksum: dcade0e37de4455cf684dc79c6f22009 (MD5) / Made available in DSpace on 2018-08-02T17:20:34Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 811 bytes, checksum: e39d27027a6cc9cb039ad269a5db8e34 (MD5) DISSERTAÇÃO Maíra de Vasconcelos Lima.pdf: 1560671 bytes, checksum: dcade0e37de4455cf684dc79c6f22009 (MD5) Previous issue date: 2017-02-03 / CAPES / A utilização de nanopartículas, de diferentes tipos e finalidades, vêm crescendo a cada ano. Provocando uma inevitável exposição ao meio ambiente e à saúde humana, o que tem motivado a realização de estudos direcionados aos impactos desses nanomateriais. Entre essas nanopartículas, estão os nanocristais fluorescentes de semicondutores, os pontos quânticos (PQs), que vêm sendo bastante aplicados nas áreas biomédica e eletrônica. Dentro deste contexto, estudos com bioindicadores ambientais sensíveis, tais como os moluscos Biomphalaria glabrata, se faz relevante. Este trabalho teve por objetivo avaliar o potencial impacto de suspensões de PQs de CdTe no meio aquático, através do molusco Biomphalaria glabrata. Foram utilizadas suspensões de PQs de CdTe, estabilizados com ácido mercaptossuccínico (AMS) - 3 nm de diâmetro e pH 7,0. Para os bioensaios, primeiramente retirou-se o excesso de precursores da síntese, utilizando-se colunas de ultrafiltração, 10 kDa. Para os estudos de toxicidade aguda, foram utilizados embriões na fase de blástula e caramujos adultos pigmentados. Os embriões foram expostos às concentrações de 1,2; 2,5; 5; 10 e 20 nM e os animais adultos à 50; 100; 200 e 400 nM de PQs de CdTe, ambos por 24 h. Com a finalidade de verificar a fonte dos efeitos tóxicos, os animais foram submetidos ao AMS (50%) e ao sobrenadante da suspensão (SBS), em volumes de 2,5; 5; 10; 20 e 40 μL para embriões e 200; 400 e 800 μL para adultos. O grupo controle negativo continha água filtrada e declorada e o grupo controle positivo, niclosamida (Bayluscide-Bayer) à 3 μM, submetidos às mesmas condições dos grupos testes. Os embriões foram observados por 8 dias consecutivos através de microscópio estereoscópico. Os parâmetros observados foram viabilidade (eclosão) e inviabilidade (mortos e malformados). Os moluscos adultos foram avaliados quanto a sobrevivência e a mortalidade. Os indivíduos que sobreviveram à exposição foram submetidos a análise mutagênica, por meio do ensaio do micronúcleo. Em cada grupo foram analisadas 1000 células, em triplicata. Os PQs apresentaram aproximadamente 60 e 80% de mortalidade de embriões, para as concentrações de 1,2 e 2,5 nM respectivamente, e 100% de letalidade para as demais concentrações. A mortalidade teve um comportamento dose-dependência, aproximadamente 20; 56 e 68% para as concentrações de 50; 100 e 200 nM respectivamente, e 100% para 400 nM. Testes com AMS e o SBS não apresentaram mortalidade dos moluscos adultos e nem diferença significativa nos embriões. O controle negativo apresentou 100% de sobrevivência, o controle positivo 100% de mortalidade em relação aos embriões e aos moluscos adultos. Os hemócitos dos moluscos adultos sobreviventes às exposições apresentaram micronúcleos (MN), binucleações (BN) e apoptose celular (AP), e a AP apresentou diferença significativa quando comparada ao grupo controle negativo e demais grupos testes. Portanto, os resultados demonstraram que quanto maior a concentração de PQ de CdTe maior a toxicidade aos moluscos B. glabrata. Sugere-se que estes eventos estejam relacionados ao tempo de exposição à suspensão e à concentração de Cd²⁺. Assim o B. glabrata mostrou ser um bioindicador sensível para avaliar a toxicidade de PQs de CdTe em ambientes aquáticos. / The use of nanoparticles, of different types and purposes, has been growing every year. It causes an unavoidable exposure to the environment and to human health, which has motivated the realization of studies directed to the impacts of these nanomaterials. Among these nanoparticles are semiconductor fluorescent nanocrystals, quantum dots (QDs), which have been widely applied in biomedical and electronic areas. Within this context, studies with sensitive environmental bioindicators, such as the mollusks Biomphalaria glabrata, become relevant. The objective of this work was to evaluate the potential impact of suspensions of CdTe QDs on the aquatic environment, through the mollusks Biomphalaria glabrata. CdTe QDs suspensions, stabilized with mercaptosuccinic acid (MSA) - 3 nm in diameter and pH 7.0, were used. For bioassays, first the excess precursors came from the synthesis were removed using 10 kDa ultrafiltration columns. For the acute toxicity studies, it was used embryos in the blastula phase and adult pigmented snails. Embryos were exposed to CdTe QDs concentrations of 1.2; 2.5; 5; 10 and 20 nM and the adult animals at 50; 100; 200 and 400 nM, both for 24 h. In order to verify the source of the toxic effects, animals were also submitted to MSA (50%) and to the supernatant of the suspension (SBS), in volumes of 2.5; 5; 10; 20 and 40 μL for embryos and 200; 400 and 800 μL for adults. The negative control group contained filtered and dechlorinated water and the positive control group, niclosamida (Bayluscide-Bayer) at 3 μM, submitted to the same conditions as the test groups. Embryos were observed for 8 consecutive days using a stereomicroscope. The parameters observed were viability (embryos that hatch) and non-viability (dead and malformed). Adult mollusks were evaluated for survival and mortality. The individuals who survived the exposure were submitted to mutagenic analysis, by means of the micronucleus assay. In each group, 1000 cells were analyzed in triplicate. The QDs presented approximately 60 and 80% of embryo mortality, for the concentrations of 1.2 and 2.5 nM respectively, and 100% of lethality for the other concentrations. Mortality had a dose-dependence behavior, approximately 20; 56 and 68% for the concentrations of 50; 100 and 200 nM respectively, and 100% for 400 nM. Tests with AMS and SBS showed no adult mollusks mortality and no significant difference in embryos. The negative control presented 100% survival, the positive control 100% mortality in relation to the adult embryos and mollusks. The hemocytes of adult mollusks which survive the exposures presented micronuclei (MN), binucleations (BN) and cellular apoptosis (AP), and AP presented a significant difference when compared to the negative control group and other test groups. Therefore, results demonstrated that the higher the CdTe QDs concentration, the greater the toxicity to B. glabrata mollusks. It is suggested that these events are related to the time of exposure to the suspension and the concentration of Cd²⁺. Thus, B. glabrata showed to be a sensitive bioindicator to evaluate the CdTe QDs toxicity on aquatic environments.

Submitted by Fernanda Rodrigues de Lima (fernanda.rlima@ufpe.br) on 2018-08-16T22:02:03Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 811 bytes, checksum: e39d27027a6cc9cb039ad269a5db8e34 (MD5) DISSERTAÇÃO José Luís Ferreira Sá.pdf: 1838209 bytes, checksum: 214e45a37adc68e30ab74a39e398cc2c (MD5) / Approved for entry into archive by Alice Araujo (alice.caraujo@ufpe.br) on 2018-08-21T21:06:01Z (GMT) No. of bitstreams: 2 license_rdf: 811 bytes, checksum: e39d27027a6cc9cb039ad269a5db8e34 (MD5) DISSERTAÇÃO José Luís Ferreira Sá.pdf: 1838209 bytes, checksum: 214e45a37adc68e30ab74a39e398cc2c (MD5) / Made available in DSpace on 2018-08-21T21:06:01Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 811 bytes, checksum: e39d27027a6cc9cb039ad269a5db8e34 (MD5) DISSERTAÇÃO José Luís Ferreira Sá.pdf: 1838209 bytes, checksum: 214e45a37adc68e30ab74a39e398cc2c (MD5) Previous issue date: 2016-02-23 / CNPq / A esquistossomose é uma doença endêmica que afeta mais de 200 milhões de pessoas no mundo. Uma das principais estratégias de combate à doença é por meio do combate aos moluscos B. glabrata, hospedeiro intermediário, desta enfermidade. Este controle é realizado utilizando o moluscicida sintético, a niclosamida, substância autorizada pela OMS. No entanto, este produto tem apresentado elevado custo e baixa seletividade, provocando danos ao ecossistema aquático. Portanto, a necessidade de moluscicidas eficientes e ecologicamente aceitáveis acompanhou a tendência das pesquisas com plantas, visando extrair substâncias ativas para o desenvolvimento de produtos com capacidade de atuar como moluscicidas. Extratos naturais com atividade moluscicida têm que apresentar baixo índice de toxicidade para o ambiente, pelo fato de serem naturais e, por isso, serem biodegradáveis. M. urundeuva e S. terebinthifolius são plantas da família Anacardiaceae, conhecidas popularmente como aroeira-do-sertão e aroeira-da-praia, sendo amplamente encontradas na Caatinga. Esse trabalho tem como objetivo avaliar a atividade moluscicida do extrato bruto e fração acetato de etila das folhas de M. urundeuva e casca de S. terebinthefolius. Os extratos foram obtidos a partir extração a frio. A prospecção fitoquímica foi realizada por meio de cromatografia em camada delgada e CLAE. Em seguida foram realizados os ensaios moluscicidas com embriões e moluscos adultos de B. glabrata, expostos por 24 horas a diferentes concentrações do extrato bruto e fração acetato de etila de ambas as espécies. Também foi feito ensaio ecotoxicológico com Artemia salina e atividade cercaricida. Como resultados das análises fitoquímica foram encontrados esteroides, saponinas, flavonoides, taninos, açucares, terpenoides, fenóis, catequinas, ácido elágico e gálico. O extrato bruto (EB) e fração acetato de etila (F. AE) da folha de M. urundeuva foram tóxicos para os moluscos adultos de B. glabrata, onde as concentrações 100, 150 e 200 μg/mL do EB apresentaram 80; 93,3 e 100% de mortalidade para os moluscos adultos. A concentração 100 μg/mL da FAE apresentou 93,3% de mortalidade para os moluscos adultos. O EB da casca de S. terebinthefolius foi letal para os moluscos adultos de B. glabrata, causando 100% de mortalidade para os moluscos adultos, nas concentrações de 100, 150 e 200 μg/mL, respectivamente. A FAE também foi tóxico para os moluscos adultos de B. glabrata, nas concentrações de 50, 75 e 100 μg/mL apresentando 100% de mortalidade para os moluscos adultos. E a concentração de 25 μg/mL apresentou 60% de mortalidade. O EB e FAE de ambas as espécies, não foram tóxicos para embriões do molusco de B. glabrata. O EB da folha e casca de ambas as espécies causaram 76,6 e 32,6% de mortalidade para as cercárias de S. mansoni na concentração de 200 μg/mL, respectivamente. O EB e FAE de ambas as espécies, não foram letais para A. salina. Portanto, pode-se concluir que o EB e FAE da folha M. urundeuva e casca de S. terebinthefolius mostraram-se viáveis como moluscicidas de origem vegetal nas concentrações de 150 (EB folha), 100 μg/mL (FAE folha) e 100 (EB casca), 50 μg/mL (FAE casca). / Schistosomiasis is an endemic disease that affects more than 200 million people worldwide. One of the main strategies to combat the disease is through combating molluscs B. glabrata, intermediate host of this disease. This control is performed using the synthetic molluscicide the niclosamida, substance authorized by the WHO. However, this product has presented high cost and low selectivity, causing damage to the aquatic ecosystem. Therefore, the need for efficient and ecologically acceptable molluscicides followed the trend of research with plants, aiming to extract active substances for the development of products with capacity to acting as molluscicides. Natural extracts with molluscicidal activity must present low index of toxicity to the environment, by the fact being natural and therefore are biodegradable. M. urundeuva and S. terebinthifolius are plants of the Anacardiaceae family, popularly known as aroeira-do-sertão and aroeira-da-praia, being widely found in the Caatinga Bioma. This work has as objective to evaluate the molluscicidal activity from the crude extract and ethyl acetate fraction of the leaves and bark of M. urundeuva and S. terebinthifolius. The extracts were obtained by cold extraction. The phytochemical screening was performed by thin-layer chromatography (TLC) and HPLC. Then were performed molluscicides trials with embryos and adult molluscs B. glabrata exposed for 24 hours to several concentrations of crude extract and fractions enriched for both species. It was also made ecotoxicological test with Artemia salina and cercaricide activity. As results of phytochemical analyzes were found steroids saponins flavonoids tannins sugars terpenoids phenols catechins ellagic and gallic acid. The crude extract (CE) and ethyl acetate fraction (EAF) of the leaves M. urundeuva were toxic to adults mollusc Biomphalaria glabrata, where the concentrations 100, 150 and 200 μg/mL of the CE presented 80; 93.3 and 100% mortality for adult molluscs. The 100 μg/mL concentration of the EAF presented 93.3% mortality for adult molluscs. The CE of the bark S. terebinthifolius was lethal for adult mollusc Biomphalaria glabrata, causing 100% mortality for adult molluscs at the concentrations of 100, 150 and 200 μg/mL, respectively. And EAF was also toxic to adults mollusc Biomphalaria glabrata, concentrations of 50, 75 and 100 μg/mL presenting 100% mortality for adult molluscs. And the concentration of 25 μg/mL presented 60% mortality. The CE and EAF of both species Aroeira were not toxic to mollusc embryos of B. glabrata. The CE of the leaf and bark of both species caused 76.6 and 32.6% mortality for the cercariae Schistosoma mansoni in the concentration of 200 μg/mL respectively. The CE and EAF of both species were not lethal to A. salina. Therefore it can be concluded that the CE and EAF of M. urundeuva leaf and S. terebinthefolius bark shown to be viable as a molluscicide of plant origin at concentrations of 150 (CE leaf), 100 μg/mL (EAF leaf), and 100 (CE bark), 50 μg/mL (EAF bark).

Orientador : Eliana Maria Zanotti-Magalhães / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-08-02T23:12:24Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Serrano_DeborahRegina_D.pdf: 15864393 bytes, checksum: 674a0a0f1b87888d3197973a12632cf6 (MD5) Previous issue date: 2002 / Resumo: Diversos autores vêm sugerindo que a patogenicidade dos esquistossomos sena influenciada pelo grau de suscetibilidade dos hospedeiros intermediários. Tendo anteriormente observado o aumento na suscetibilidade de moluscos provocado pela hidrocortisona, resolvemos verificar agora o comportamento do Schistosoma mansoni no hospedeiro definitivo e a patogenicidade por eles causada quando oriundos de tais moluscos. O tratamento dos moluscos com hidrocortisona não alterou a capacidade de penetração das cercárias em roedores Mus musculus nem o número total de vermes recuperados. No entanto, o número de vermes remeos, o número total de vermes acasalados, assim como o número de ovos nas fezes, apresentaram-se maiores nos camundongos submetidos à infecção por cercárias oriundas de moluscos tratados com hidrocortisona. Os roedores infectados por cercárias de moluscos tratados com hidrocortisona mostraram maior quantidade de granulomas no fígado, no baço e no intestino que os infectados por cercárias oriundas de moluscos não tratados. No pâncreas essa diferença foi fraca e nos pulmões a quantidade foi semelhante em ambos os grupos. O tamanho dos granulomas encontrados no baço, no pulmão e no intestino foi semelhante nos camundongos de ambos os grupos, enquanto que os granulomas do fígado e do pâncreas dos animais infectados por cercárias vindas de moluscos tratados com hidrocortisona apresentaram menor tamanho. O peso do baço foi menor quando os animais foram infectados por cercárias oriundas de moluscos tratados com hidrocortisona. Não houve diferença na sobrevivência dos roedores nem na variação de peso corporal / Abstract: The pathogenicity of schistosomes is suggested to be influenced by the susceptibility of the intennediary host. Since hydrocortisone increases the susceptibility of mollusks to infection, we examined the behavior of Schistosoma mansoni in the final host, as well as the pathogenicity of parasites derived ftom mollusks. The treatment of mollusks with hydrocortisone did not alter the ability of cercariae to penetrate mice (Mus musculus) or the total number of wonns. The number of eggs in the feces was greater in mice infected with cercariae ftom hydrocortisone treated mollusks. Mice infected with cercariae ftom hydrocortisone treated mollusks showed more granulomas in the tiver, spleen and intestine than did mice infected with cercariae ftom non treated mollusks. In the pancreas, this difference was not marked while in the lungs the ftequency of granulomas was similar in both groups. The size of the granulomas in the spleen, lung and intestine was similar in both groups, whereas those in the tiver and pancreas were smaller in mice infected with cercariae ftom hydrocortisone treated mollusks. The spleen weight was smallest in mice infected with cercariae ftom hydrocortisone treated mollusks but there was no difference in the survival or body weights of the two groups of mice / Doutorado / Doutor em Parasitologia