A hipertensão portal é uma complicação da cirrose com alterações hemodinâmicas, que se caracterizam pelo aumento do fluxo sangüíneo e/ou aumento da resistência vascular no sistema porta. É uma das principais causas da mortalidade entre pacientes cirróticos, devido à hemorragia digestiva alta, provocada pelo surgimento de colaterais portossistêmicos, ou seja, o surgimento de varizes gastro-esofágicas. A glutamina é um aminoácido abundante encontrado no músculo, plasma e tecidos. Ela atua em resposta à ação celular, no sistema imune e serve como substrato para a síntese da glutationa. O objetivo deste trabalho foi avaliar a ação da glutamina, por via intraperitonial, em estômagos de ratos, com ligadura parcial de veia porta (LPVP), avaliando a pressão portal e o estresse oxidativo. Foram utilizados 24 ratos machos Wistar, pesando em média 300g, divididos em 4 grupos: 1. SO (controle); 2. SO + G: (controle tratado com glutamina), a partir do 8º dia, administração de glutamina (25mg/Kg); 3. LPVP: ligadura parcial da veia porta; 4. LPVP + G: ligadura parcial da veia porta e, a partir do 8º dia, administração de glutamina (25mg/Kg). No 15° dia, foi verificada a pressão portal por punção da veia mesentérica dos ratos, através de um polígrafo de pressão Lettica e após a retirada de sangue para as provas de integridade hepática e dos estômagos para as medidas de estresse oxidativo. Foram quantificados os valores de proteínas (Lowry et al, 1951), os níveis de substâncias que reagem ao ácido tiobarbitúrico (TBA-RS) (Bueges e Aust, 1978) e das enzimas antioxidantes superóxido dismutase (Mirsa e Fridovich, 1983), catalase (Boveris e Chance, 1973) e, glutationa peroxidase (Flohé et al., 1974) e avaliação de nitritos e nitratos pelo reagente de Griess (Granger, 1999) em homogeneizado dos estômagos desses animais. A histologia de estômago foi avaliada pela coloração de hematoxilina e eosina (HE). Foi observado um aumento da pressão portal no grupo LPVP quando comparado ao grupo controle (P<0,05) e uma redução significativa da pressão portal no grupo LPVP+G quando comparado ao grupo LPVP (P<0,05). Houve também um aumento dos níveis de TBARS e QL e uma redução dos níveis de SOD no grupo LPVP, quando comparado aos grupos controles (P<0,05), bem como uma melhora significativa destes valores no grupo tratado com glutamina (P<0,05). Não houve diferença entre nenhum dos grupos em relação aos níveis séricos das enzimas hepáticas e dos níveis de catalase. Os níveis de glutationa peroxidase no grupo SO+G aumentaram significativamente em relação aos demais (P<0,05). Na avaliação dos metabólitos do NO, observou-se um aumento dos níveis de NO no grupo LPVP em comparação ao grupo LPVP+G (P<0,05). Na análise histológica do estômago observou-se edema e pontos de vasodilatação nos animais LPVP, enquanto no grupo LPVP+G houve redução do edema e da angiogênese. Para análise estatística, foi utilizado análise de variância (ANOVA) seguida de teste Tukey-Kramer para múltiplas comparações, sendo o nível de significância adotado de 5% (P<0,05). Este estudo sugere que a administração de glutamina, através da inibição do estresse oxidativo, reduz a pressão portal em animais com ligadura parcial de veia porta. / Portal hypertension is a complication of the cirrhosis that is characterized by the increase of the blood flow and/or of the vascular resistance in the portal system. It is one of the principal causes of mortality between cirrhotic patients due to the situation of high digestive hemorrhage in function of the appearance of portosystemic collaterals, characteristic of the gastropathy of portal hypertension. Glutamine is an abundant aminoacid found in the muscle, plasma and tissues. It acts in reply to cellular action, immune system and serves as substrate for glutationa. The objective of this study was to evaluate the action of glutamine, by intraperitonial way in stomachs of animals with partial ligature of the portal vein (LPVP), evaluating the regulation of the portal pressure and the oxidative stress. 24 male Wistar rats were used, weighing on average of 300g, divided in 4 groups: 1. Sham Operated (SO); 2. LPVP: partial ligature of the portal vein; 3. SO+Glu: from the 8th day administration of glutamine (25mg/Kg); 4. LPVP+Glu: from the 8th day administration of glutamine (25mg/Kg). In 15th day was checked the pressure in the mesenteric vein of the rats through a polygraph of pressure Lettica. Blood samples was used to evaluated the hepatic function. The stomach was used to evaluated the oxidative stress. We quantified the values of proteins, the levels of substances that react to the tiobarbituric acid (TBARS) the antioxidant enzymes superoxide dismutase and catalase and nitrites and nitrates levels by the Griess reaction in homogenized of the animals stomachs. We observed an increase of the portal pressure in the group LPVP when compared to the control group (P<0,05) and a significant reduction of the portal pressure in the group LPVP+Glu comparing to the group LPVP (P<0,05). There was also an increase of TBARS and chemiluminescense levels and a reduction of SOD levels in the group LPVP when compared to the control groups (P<0,05). The glutamine, when administered, reduced the values of TBARS in the group LPVP+Glu and increased the antioxidant enzymes. There was no difference between the groups regarding the plasmatic levels of hepatic function enzymes and catalase. The glutathione peroxidase levels in the group SO + G significantly increased compared to the other groups (P <0.05). In the assessment of the NO metabolites, there was an increase in NO levels in the group LPVP compared to the group LPVP + G (P <0.05). In histological analysis there was edema and points of vasodilation in animals LPVP, while in Group G + LPVP a reduction of edema and in the vessels growth. For statistical analysis we used analysis of variance (ANOVA) followed by Tukey-Kramer test for multiple comparisons, and the level of significance of 5% (P <0.05). This study suggests that the administration of glutamine, inhibiting the oxidative stress, reduces portal pressure in animals with partial ligature of the portal vein.

Orientador : Ladaslav Sodek / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-08-01T23:52:21Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Amarante_Lucianodo_D.pdf: 6847848 bytes, checksum: 6fae28c31334396bbd398e6813a4350e (MD5) Previous issue date: 2002 / Resumo: Plantas de soja noduladas fixando plenamente o N2, cultivadas na ausência de N-combinado, contêm níveis relativamente altos de GLN como forma de transporte de N no xilema (cerca de 20-25 em mol % do total de aminoácidos) comparadas a plantas não noduladas nutridas com NO3- (cerca de 1-2 em mol % do total de aminoácidos). Experimentos que levaram à redução da fixação de N2, avaliados pela redução do teor de URE na seiva do xilema, como a aplicação de NO3 -, transferência das plantas para sistema hidropônico com aeração, inundação do sistema radicular, substituição do ar da rizosfera com N2 ou mistura argônio:oxigênio (80:20), conduziram a uma redução severa e específica dos níveis de GLN. A remoção manual dos nódulos do sistema radicular produziu o mesmo efeito. Além disso, durante o crescimento das plantas foi observado um aumento substancial dos níveis de GLN correspondentes à fase de formação dos nódulos e o início da fixação plena de N2 em soja, em paralelo ao aumento de ureídeos e atividade da GS. Aumentos concomitantes dos níveis de GLN e de URE também foram observados quando plantas noduladas de soja, cultivadas em vermiculita sem N e transferidas para hidroponia, na presença ou ausência de N, ou inundadas, foram replantadas em vermiculita ou tiveram a inundação suprimida através da drenagem. A NADH-GOGAT nos nódulos parece ter uma relação direta com níveis de GLN transportados no xilema, partindo da observação da queda e posterior elevação da atividade da enzima em paralelo aos níveis de GLN nos tratamentos de hidroponia na presença e ausência de NO3 ¿ e posterior replantio em vermiculita sem N, respectivamente. As mudanças de atividade da GS em nódulos foram muito menos pronunciadas, sugerindo elevada estabilidade da enzima sob os tratamentos com hidroponia. A composição nitrogenada da seiva do xilema das plantas inundadas de soja mostrou uma queda considerável dos níveis de GLN, 10 minutos após início do tratamento, alcançando valores muito baixos dentro de 30 min. Uma inibição concomitante do teor de URE foi obtida nesses tratamentos. Apesar da evidência de que a atividade dos nódulos esteja relacionada às flutuações dos níveis de GLN, foram encontrados teores mínimos desse aminoácido nos nódulos, não sofrendo variações detectáveis com a aplicação dos tratamentos. As reduções de GLN no xilema também não mostraram uma correspondência com os níveis de GLN do floema, raízes e folhas. Os tratamentos inibitórios à fixação de N2 como a aplicação de NO3 - e inundação também causaram uma redução dos níveis de GLN em espécies de leguminosas exportadoras de amidas e em ambos os teores de GLN e de URE em outras espécies de leguminosas que exportam preferencialmente URE, sugerindo ser este um efeito comum em leguminosas que transportam GLN. Coletivamente, as mudanças da composição aminoacídica do xilema frente aos diferentes tratamentos utilizados indicam que o nível de GLN transportado no xilema está fortemente associado com a atividade dos nódulos / Abstract: Nodulated soybean plants, fully dependent on N2 fixation, cultivated with N deficient nutrient solution, contain relatively high levels of GLN in N transport of the xylem (around 20-25 mol % of total amino acids) compared to non-nodulated plants grown on nitrate (around 1-2 mol % of total amino acids). Experiments that lead to reduced N2 fixation, judged by xylem sap ureide levels, such as NO3 - application, transfer of plants to aerated hydroponic culture, waterlogging of the root system, substitution of air in the rhizosphere with nitrogen or a mixture of argon:oxygen (80:20), lead to severe and specific reduced GLN levels. Manual removal of the nodules from the root system produced the same effect. Furthermore, during the growth cycle of the plants, a substantial increase in GLN levels was observed corresponding to the phase of nodule formation and beggining of N2 fixation, in parallel with increases in ureide levels and GS activity. Concomitant increases in GLN and ureide levels were observed, when nodulated soybean plants cultivated in vermiculite without N and transfered to hydroponic culture with or without N or waterlogging, were returned to vermiculite or the waterlogging treatment was suppressed by drainage. In nodules, NADH-GOGAT activity seems to be directly correlated with GLN levels transported in the xylem, judging by the decline and posterior elevation of enzyme activity in parallel with GLN levels in the hydroponic treatments with or without N and when plants were returned to vermiculite without N, respectively. Changes in GS activity in nodules were much less pronounced suggesting high enzyme stability under hydroponic treatment. The xylem sap nitrogen composition of waterlogged plants showed a considerable fall in glutamine levels, ten minutes after the treatment had initiated, reaching very low levels within 30 minutes. A concomitant inhibition in ureide contents was observed. Despite the evidence that nodule activity underlies the flutuations of GLN levels in the xylem, very low levels in the nodule were found, which suffered no detectable variation after the treatments applied. Decreases in xylem GLN were not associated with GLN levels in phloem, roots or leaves. Inhibitory effects on nitrogen fixation such as NO3 - application and waterlogging caused a reduction in GLN in amide exporting legumes and in both GLN and ureide levels in other URE exporting legume species, suggesting a common effect in GLN exporting legumes. Collectively, changes in amino acid xylem composition under the several treatments tested indicated that GLN levels transported in xylem are largely associated with nodule activity / Doutorado / Doutor em Biologia Vegetal

Orientador: Ladaslav Sodek / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-08-03T19:27:26Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Thomas_AndreLuis_D.pdf: 1056106 bytes, checksum: b178d3f991fb0d5e761810242c1bf317 (MD5) Previous issue date: 2004 / Doutorado

Orientador: Quivo S. Tahin / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-07-14T19:34:30Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Mello_RomariodeAraujo_M.pdf: 2906257 bytes, checksum: b9607450b799ee7ecbb7202ad9e08805 (MD5) Previous issue date: 1978 / Resumo: A glutamina [L-glutamato: amônia ligase (ADP) E.C.6.3.1.2.], enzima regulatória do metabolismo do glutamato e da amônia, é amplamente encontrada em vegetais, animais e microorganismos. Todavia não pudemos identificar a presença da GS em coração de rato ou em fígado e coração de vários anfíbios. Estudo foram efetuados sobre alguns fatores que afetam a atividade da GS como trasnsferase na formação do gama-glutamilhidroxamato, a partir da reação catalisada pela GS entre a glutamina e hidroxilamina na presença de 'MN POT. 2+¿ e arsenato. Foi demonstrado para essa reação enzimática que o ADP não é requerido quando se ensaiou a atividade da GS de fígado, rim e baço de rato; fígado e coração de pomba e fígado de cobre, ao contrário do estabelecido por vários autores que utilizam o ADP para determinar essa atividade da GS de microorganismos. Nossos dados sugerem que, as GS dos órgãos animais estudados as melhores condições para a determinação da atividade enzimática são as seguintes: glutamina 75 mM, hidroxilamina 40 mM, arsenato 50 mM, 'MN POT. 2+¿ 50 mM, Tris-acetato 0,1 M pH 7,5. A hidroxilamina em concentração acima de 40 mM e 'MN POT. 2+¿ em concentração acima de 50 mM inibem a enzima, enquanto que concentrações de Asi acima de 40 mM (até 100 mM foram estudadas) mantém o mesmo efeito sobre a reação enzimática... Observação: O resumo, na íntegra, poderá ser visualizado no texto completo da tese digital / Abstract: The glutamine sinthetase [L-glutamate: ammonia ligase (ADP) E.C.6.3.1.2.] (GS), regulatory enzyme of glutamate and ammonia metabolism, is extensively found in plants, animals and microorganism. However we could not found GS in rat heart or in liver and heart of several amphibians. We studied some factors that affect the formation of gama-glutamylhidroxamate from the transfer reaction between glutamine and hydroxamine catalysed by GS, in the presence of 'MN POT. 2+¿ and arsenate. Several authors use ADP in this enzyme reaction of microorganism GS, but we demonstrated that ADP is not required for the activity of GS from liver, kidney and spleen of rat; liver and heart of dove and liver of snake. Our data suggest the best reagent concentration for obtaing the highest GS activity, in our experimental conditions, are the following: glutamine 75 mM, hydroxamine 40 mM, sodium arsenate 50 mM, 'MN¿¿cl IND. 2¿ 50 mM, Tris-acetate 0,1 M, pH 7,5. Larger concentrations of hydroxamine than 40 mM and 'MN POT. 2+¿ than 50 mM cause an inhibition on enzyme activity, but larger concentrations of arsenate than 50 mM do not. We determined the values of apparent 'K IND. M¿ and 'V IND. MAX¿ for glutamine of GS from the studied animals organs in the presence of 'MN IND. +2¿ at concentrations of 5, 20, 50 or 80 mM... Note: The complete abstract is available with the full electronic digital thesis or dissertations / Mestrado / Biologia Celular e Molecular / Mestre em Ciências Biológicas

ALMEIDA, E. B. Pós-condicionamento com L-alanil-glutamina na isquemia e reperfusão cerebral em ratos. 2016. 72 f. Dissertação (Mestrado em Ciências Médico-Cirúrgicas) - Faculdade de Medicina, Universidade Federal do Ceará, Fortaleza, 2016 / Submitted by Luciene Oliveira (luciene@ufc.br) on 2017-08-28T14:39:20Z No. of bitstreams: 1 2016_dis_edalmeida.pdf: 2886265 bytes, checksum: e73742de384cab29d3b2f283c384e368 (MD5) / Approved for entry into archive by Erika Fernandes (erikaleitefernandes@gmail.com) on 2017-08-28T15:59:28Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2016_dis_edalmeida.pdf: 2886265 bytes, checksum: e73742de384cab29d3b2f283c384e368 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-08-28T15:59:29Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2016_dis_edalmeida.pdf: 2886265 bytes, checksum: e73742de384cab29d3b2f283c384e368 (MD5) Previous issue date: 2016-10-31 / INTRODUCTION AND OBJECTIVE: Recent studies have shown the effectiveness of L-alanyl-glutamine (Aln-Gln) in protection of ischemia and reperfusion states in various organs. The aim of this study was to evaluate Aln-Gln post conditioning effects in brain ischemia and reperfusion injury in an experimental model of brain ischemia and reperfusion in rats. METHODS: A sample of 72 rats (Wistar) was divided into 06 groups. Each group had 12 animals, 6 animals provided hippocampal samples for mass spectrometry analysis and 6 animals samples for histological analysis. 02 groups carried cervicotomy (Sham 1h and 24h); 02 groups received saline and ischemia/ reperfusion injury (SS + I/R 1h and 24h), and 02 groups received L-Alanyl-Glutamine and ischemia/reperfusion injury (GLUT + I/R 1h and 24h). RESULTS: The histology (H & E) of hippocampal CA1 area revealed a significant increase (p <0.05) of eosinophilic neurons in saline + ischemia and reperfusion group (SS + I/R) compared to the control group (SHAM) after 1 hour (p = 0.002) and 24h (p = 0.01). When compared (SS + I/R) and (GLUT + I/R) groups a significant decrease (p <0.05) of percentage of eosinophilic neurons was observed in GLUT + I / R, with 1h (p = 0.01) and 24 hours of reperfusion (p = 0.001). In the hippocampal spectrometry’s analysis there was a statistically significant difference between the groups lipid profile (p <0.05). A significant difference in relative intensity of lipids and lipid profile from Sham groups when compared to SS + I/R group (p <0.05) and GLUT+ I/R when compared to SS+ I/R group (p <0.05). CONCLUSION: The postconditioning with L-alanyl-glutamine had neuroprotective effect in the hippocampus of this experimental model, indicated by the number of red neurons. The relative intensity of the hippocampus lipids in the analysis by mass spectrometry is altered in ischemic and reperfusion injury, and is different from postconditioned animals with L-alanyl-glutamine / Estudos recentes têm mostrado a eficácia da l-alanil-glutamina (Aln-Gln) na proteção de estados de isquemia e reperfusão em diversos órgãos. O objetivo deste estudo foi avaliar a ação da Aln-Gln no pós condicionamento em lesão de isquemia e reperfusão cerebral em em ratos. MÉTODO: Amostra de 72 ratos da linhagem Wistar distribuídos em 06 grupos. Cada grupo possuía 12 animais dos quais 6 animais foram coletados os hipocampos para análise de espectrometria de massas e 6 animais amostras para estudo histológico. Destes, 02 grupos realizaram apenas a cervicotomia (Sham 1h e 24h); 02 grupos receberam solução salina e a lesão de isquemia e reperfusão (SS + I/R 1h e 24h) e 02 grupos receberam L-Alanil-Glutamina e a lesão de isquemia e reperfusão (GLUT +I/R 1h e 24h). RESULTADOS: O exame histológico (H & E) da região CA1 do hipocampo evidenciou um aumento significante (p < 0,05) de neurônios eosinofílicos no grupo solução salina + isquemia e reperfusão (SS+I/R) quando comparado com o grupo controle (SHAM), após 1h (p = 0,002) e 24h (p= 0,01). Quanto aos grupos SS+I/R e GLUT +I/R, houve uma diminuição significante (p<0.05) da porcentagem de neurônios eosinofílicos nos grupos GLUT + I/R, com 1h (p = 0,01) e 24h de reperfusão (p = 0,001). Na análise por espectrometrias de massa do hipocampo foi encontrada uma diferença estatisticamente significante no perfil de lipídios dos grupos (p < 0,05). Foi encontrada diferença significante na intensidade relativa dos lipídios dos grupos Sham quando comparado ao grupo SS + I/R ( p< 0,05) e GLUT+I/R comparado ao SS+I/R (p<0,05). CONCLUSÃO: O pós-condicionamento com l-lanil-glutamina teve efeito neuroprotetor no hipocampo de ratos, indicado pela contagem de neurônios vermelhos. A intensidade relativa e o perfil dos lipídios do hipocampo na análise por espectrometria de massas está alterada em lesões de isquemia e reperfusão e é diversa dos animais pós-condicionados com l-alanil-glutamina.

ARAÚJO JÚNIOR, Raimundo José Cunha. Isquemia hepática experimental e a ação pré-condicionante da l-alanil-glutamina. 2010. 74 f. Dissertação (Mestrado em Cirurgia) - Universidade Federal do Ceará. Faculdade de Medicina, Fortaleza, 2010. / Submitted by denise santos (denise.santos@ufc.br) on 2014-03-12T12:35:51Z No. of bitstreams: 1 2010_dis_rjcaraújojúnior.pdf: 1044593 bytes, checksum: ad627a92fb202334ee33e95afbc69c55 (MD5) / Approved for entry into archive by denise santos(denise.santos@ufc.br) on 2014-03-12T12:36:25Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2010_dis_rjcaraújojúnior.pdf: 1044593 bytes, checksum: ad627a92fb202334ee33e95afbc69c55 (MD5) / Made available in DSpace on 2014-03-12T12:36:25Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2010_dis_rjcaraújojúnior.pdf: 1044593 bytes, checksum: ad627a92fb202334ee33e95afbc69c55 (MD5) Previous issue date: 2010 / The strategies to prevent the hepatic ischemia/reperfusion injury after hepatic resections or transplantation include intermittent control of blood influx to the liver or the use of a substance that could cause a protective effect or increase of the resistance of the hepatic tissue to ischemia. The present study had the objective to evaluate the effect of the use of the L-Alanil-Glutamina in Ratus novergicus submitted the normothermic hepatic ischemia on liver biochemists and imunohistochemistry, as well as evaluating apoptosis present in this experimental model. 30 male rats, with average weight of 300 grams, divided in three groups of 10 rats: Control group, Ischemia Reperfusion group and Glutamine group. Ischemia Reperfusion group received saline solution 0.9% intra-peritoneal (IP), 2 hours before being submitted to laparotomy, and total ischemia by clampping of portal triad for 30 minutes followed of reperfusion for 60 minutes; The Glutamine group received 0,75mg/Kg IP 2 hours before total ischemia for 30 minutes, followed by reperfusion for 60 minutes. Control group was submitted the peritoneal punction 2 hours before the laparotomy, and only manipulation of the biliary tree, without carrying through any clamping. The procedure was carried through under anesthesia (IP) with a solution of Ketamin chloridate , 80 mg/Kg + xilazin chloridate, 10 mg/Kg. To the end of the period of reperfusion the animals had been relaparotomized and blood collected for evaluation of the levels of ALT and DHL, and hepatic tissue samples for imunohistochemistry study with antibody for Caspase-3. The statistics significance was calculated by ANOVA and the post test of multiple comparison of Tukey, using the software GraphPad Prism, version 5.00. The average and error standard of the dosage of ALT, DHL, and of the index of cells marked with Caspase-3 was respectively for the Ischemia Reperfusion group: 270,6+40,8; 2079,0+262,4 and 66,3+13,5; for the Glutamine group: 127,9+31,17; 1019,0+187,9 and 36,6+12,0; for the Control group: 83,3+5,5; 206,6+16,2 and 21,9+111,4. The preconditioning with intraperitoneal L-alanil-glutamine significantly reduces the values of the biochemists markers, in Ratus novergicus submitted to the hepatic ischemia-reperfusion injury, suggesting hepatic protection. / As estratégias para prevenir a lesão de isquemia reperfusão durante as cirurgias hepáticas incluem a oclusão intermitente do fluxo de sangue ao fígado ou a utilização de substâncias que poderiam causar um efeito protetor ou aumento da resistência do tecido hepático à isquemia. O presente estudo teve o objetivo de avaliar o efeito do uso da L-Alanil-Glutamina (GLN) em Ratus novergicus submetidos à isquemia hepática normotérmica, através de provas bioquímicas e imunohistoquímicas. Utilizou-se 30 ratos machos, da variedade Wistar, com peso médio de 300 gramas, distribuídos em três grupos de 10 ratos cada: grupo Controle, Grupo Isquemia Reperfusão (IR) e grupo Glutamina + Isquemia Reperfusão (GLN+IR). O grupo IR recebeu solução salina 0,9% intra-peritoneal (IP), 2 horas antes de ser submetido laparotomia, e isquemia total por pinçamento da tríade portal por 30 minutos seguidos de reperfusão por 60 minutos; O grupo GLN + IR recebeu 0,75mg/Kg de glutamina IP 2 horas antes de isquemia total por 30 minutos, seguidos de reperfusão por 60 minutos. O grupo Controle foi submetido à punção peritoneal 2 horas antes da laparotomia, e de apenas manipulação da tríade portal, sem realizar pinçamento algum. O procedimento foi realizado sob anestesia (IP) com uma solução de cloridrato de ketamina, 80 mg/Kg + cloridrato xilazina, 10 mg/Kg. Ao final do período de reperfusão os animais foram relaparotomizados e colhido amostras de sangue para avaliação dos níveis de ALT e DHL, e amostras de tecido hepático para estudo imunohistoquímico com anticorpo para Caspase-3. A significância estatística foi calculada pelo teste ANOVA e pelo pós-teste de comparação de múltiplas médias de Tukey utilizando-se o software GraphPad Prism, versão 5.00. A média e erro padrão da dosagem de ALT, DHL, e do índice de células marcadas com Caspase-3 foi respectivamente para o grupo IR: 270,6+40,8; 2079,0+262,4 e 66,3+13,5; para o grupo GLN +IR: 127,9+31,17; 1019,0+187,9 e 36,6+12,0; para o grupo Controle: 83,3+5,5; 206,6+16,2 e 21,9+111,4. O pré-condicionamento com L-alanil-GLN IP reduziu significativamente os valores de ALT e DHL em Ratus novergicus, submetidos à lesão de IR hepática, sugerindo hepatoproteção.

VIANA, Soraya Maria do Nascimento Rebouças. Efeitos da L-glutamina nas respostas metabólicas e hemodinâmicas em indivíduos sedentários submetidos ao esforço físico. 2009. 68 f. Dissertação (Mestrado em Cirurgia) - Universidade Federal do Ceará. Faculdade de Medicina, Fortaleza, 2009. / Submitted by denise santos (denise.santos@ufc.br) on 2014-03-13T14:07:03Z No. of bitstreams: 1 2009_dis_smnrviana.pdf: 281236 bytes, checksum: 33d99e3f7b54dd13402edd6232563da9 (MD5) / Approved for entry into archive by denise santos(denise.santos@ufc.br) on 2014-03-13T14:07:58Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2009_dis_smnrviana.pdf: 281236 bytes, checksum: 33d99e3f7b54dd13402edd6232563da9 (MD5) / Made available in DSpace on 2014-03-13T14:07:58Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2009_dis_smnrviana.pdf: 281236 bytes, checksum: 33d99e3f7b54dd13402edd6232563da9 (MD5) Previous issue date: 2009 / The aim of this study was to evaluate the hemodynamic and metabolic responses of L-Glutamine in sedentary subjected to physical exertion. The sample consisted of 11 sedentary volunteers (05 men and 06 women between 30 - 45 years). We conducted a clinical study, crossover, randomized, double-blind. The protocol was divided into two stages. The protocols used participant (0.5 g / kg) of L-glutamine or calcium caseinate added to a milk drink Nescau Light (200ml) for seven consecutive days, with an interval of one week of completion of a protocol and early other. The volunteers were evaluated for cardiopulmonary and metabolic response during cardiopulmonary exercise testing on a treadmill. Were determined in each individual oxygen consumption (VO2 Max), respiratory quotient (RQ), the workload performed, heart rate (HR), systolic and diastolic blood pressure (SBP / DBP) in phases: pre - effort, the anaerobic threshold, maximal effort and during the recovery effort. Were also evaluated serum concentrations of glucose and lactate in four stages: fast (at least 8 hours), immediately before the effort at the end of exercise and 30 minutes after exercise. The prior offer of L-glutamine (0.5 g / kg in sedentary individuals, orally for seven days did not cause hemodynamic changes during physical exertion. On the other hand modified the metabolic response by reducing the lactacemia before the physical activity (3, 68 ± 0.8 versus 2.2 ± 0.9, p = 0.01) in the presence of maximal (12.4 ± 5.1 versus 10.3 ± 3.2, p = 0.04), and at the end of the exercise stress test (6.9 ± 3.6 versus 5.02 ± 1.77, p = 0.01). L-glutamine in nutraceutical doses is recommended for use to practitioners of physical activity and not hemodynamic features.

CAVALCANTE, Ana Augusta Monteiro. Nutrição enteral suplementada com l-glutamina e sua ação sobre o processo inflamatório, o metabolismo glicolítico, o sistema imune e o estresse oxidativo de pacientes com síndrome da resposta inflamatória sistêmica. 2010. 185 f. Tese (Doutorado em Cirurgia) - Universidade Federal do Ceará. Faculdade de Medicina, Fortaleza, 2010. / Submitted by denise santos (denise.santos@ufc.br) on 2014-03-14T15:13:17Z No. of bitstreams: 1 2010_tese_aamcavalcante.pdf: 4464195 bytes, checksum: 62b0b650bd551dea2155f0a930b8920e (MD5) / Approved for entry into archive by denise santos(denise.santos@ufc.br) on 2014-03-14T15:42:24Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2010_tese_aamcavalcante.pdf: 4464195 bytes, checksum: 62b0b650bd551dea2155f0a930b8920e (MD5) / Made available in DSpace on 2014-03-14T15:42:24Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2010_tese_aamcavalcante.pdf: 4464195 bytes, checksum: 62b0b650bd551dea2155f0a930b8920e (MD5) Previous issue date: 2010 / A Síndrome da Resposta Inflamatória Sistêmica (SRIS) caracteriza-se por uma liberação excessiva de mediadores inflamatórios a uma série de situações clínicas graves. A utilização da glutamina em doses nutracêuticas tem sido estudada como uma estratégia de proteção tecidual e metabólica em situações de estresse, melhorando a resposta imune de pacientes. Os efeitos da nutrição enteral suplementada com 30g/dia de glutamina sobre os marcadores inflamatórios, do metabolismo glicolítico, da função imune e do estresse oxidativo foram estudados em pacientes adultos e idosos com SRIS. Foi realizado estudo clínico prospectivo, randomizado, controlado, duplo-cego, cruzado. Trinta e seis pacientes internados em Unidade de Terapia Intensiva foram selecionados pelos critérios do estudo, diagnóstico da SRIS e score APACHE II (>10<20), distribuídos em dois grupos e submetidos à suplementação com 1 litro de dieta enteral suplementada com 30g de L-glutamina ou caseinato de cálcio ou 1 litro de dieta enteral suplementada com 30g de caseinato de cálcio ou L-glutamina por dois dias, intervalo de um dia somente com dieta, perfazendo quatro dias de dieta com suplementação. Amostras de sangue foram coletadas antes (T0) e após (T1) cada suplementação. Foram realizadas análises do hematócrito, leucócitos, linfócitos, monócitos, pré-albumina, uréia, creatinina, glicose, lactato, peptídeo-C e insulina, das IL-1, IL-6, IL-10, TNFα, glutationa, TBARS e dos aminoácidos glutamina e glutamato. Seis pacientes foram a óbito durante o estudo e trinta pacientes concluíram o estudo, sendo 16(53%) homens e 14(47%) mulheres, mediana de idade 74,4 anos (30-92 anos), moderadamente graves, mediana de APACHE II 13,1 (10-19) e mediana de ingestão calórica de 1464kcal/dia (792-1914kcal/dia). O uso L-glutamina em dose nutracêutica de 30g/dia não mostrou alterações nos parâmetros hematológicos. Houve aumento da uréia [Caseinato T1=47,000mg/dL (34,000-69,000mg/dL) versus Glutamina T1=50,000mg/dL (36,750-75,000mg/dL); p=0,030] na comparação intergrupos, mas não houve diferença estatisticamente significante de creatinina em nenhum dos grupos. Não houve alteração estatisticamente significante nos parâmetros inflamatórios (IL-1, IL-6, IL-10 e TNFα). A contagem de leucócitos diminuiu significantemente em ambos os grupos [Caseinato T0=13.650 1/mm3 (10.148-18.250 1/mm3) versus T1=11.500 1/mm3 (8.050-29.100 1/mm3); p=0,019] e [Glutamina T0=12.850 1/mm3 (11.155-15.550 1/mm3) versus T1=11.000 1/mm3 (9.200-16.325 1/mm3); p=0,046]. Houve aumento estatisticamente significante na contagem de linfócitos na comparação intergrupos [Caseinato T1=1.085 1/mm3 (805-1.363 1/mm3) versus Glutamina T1=1.916 1/mm3 (1.301-2.517 l/mm3); p<0,0001], uma diminuição estatisticamente significante no grupo Caseinato [T0=1.288 1/mm3 (834-2.209 1/mm3) versus T1=1.085 1/mm3 (805-1.363 1/mm3); p=0,0324] e aumento no grupo Glutamina [T0=954 1/mm3 (785-1.442 1/mm3) versus T1=1.916 1/mm3 (1.301-2.517 l/mm3); p<0,0001]. Observou-se redução estatisticamente significante na dosagem do TBARS na comparação intragrupos [Caseinato T0=20,56mol MDA/ml (13,64-20,56mol MDA/ml) versus T1=15,08 mol MDA/ml (13,64-20,56 mol MDA/ml); p=0,001] e [Glutamina T0=17,67 mol MDA/ml (8,11-34,98 mol MDA/ml) versus T1=16,52 mol MDA/ml (5,41-21,86 mol MDA/ml); p=0,020], mas não houve diferenças intergrupos. A concentração sanguínea de glutationa apresentou uma redução estatisticamente significante no grupo Caseinato (T0=486,00mol/ml±165,80mol/ml) versus T1=451,00±167,40mol/ml; p=0,047) e não houve diferença no grupo Glutamina, tampouco entre os grupos. Glutamina e glutamato não demonstraram diferenças estatisticamente significantes. Conclui-se que a nutrição enteral suplementada com glutamina em dose nutracêutica de 30g/dia em pacientes moderadamente graves promove um aumento dos linfócitos, contribui para reduzir a peroxidação lipídica e mantém a capacidade antioxidante da glutationa, interferindo de forma benéfica na modulação da resposta inflamatória e do estresse, mas não apresenta nenhum efeito sobre a concentração de citocinas ou parâmetros glicolíticos. / The Systemic Inflammatory Response Syndrome (SIRS) is characterized by an excessive release of inflammatory mediators as a systemic inflammatory response to a serious clinical injuries. The use of glutamine in nutraceutical doses has been studied as a strategy in tissue protection and preservative of tissue metabolic function in stressful situations, helping to improve the immune response of patients. The effects of enteral glutamine supplementation in nutraceutical doses on the inflammatory markers, of glycolytic metabolism, of immune system and of oxidative stress were studied in adult and elderly patients with SIRS in a prospective, clinical, randomized, controlled, double-blind crossover study. Thirty six moderately severe patients admitted to the Intensive Care Unit were selected according to pre-defined criteria, diagnosis of SIRS and the APACHE II score (>10<20), distributed into two groups and submitted to the supplementation with 1 litre of enteral nutrition with addition of 30g of L-glutamine or calcium caseinate or 1 litre of enteral nutrition with addition of 30g of calcium caseinate or L-glutamine for two days, pause for one day only with diet, followed by four days of supplementation. Blood samples were collected before (T0) and after (T1) each supplementation. For evaluation blood parameters (hematocrit, leukocytes, lymphocytes, monocytes, prealbumin, blood urea nitrogen, creatinine, glucose, lactate, C-peptide and insulin), IL-1, IL-6, IL-10 and TNFα were also assayed. Glutathione, TBARS, and glutamine and glutamate amino acids were measured. Six patients died during the study. Thirty patients finished the study, 16 men (53%) and 14 (47%) women, median age 74.4 years (30-92 years) in moderately severe state of health (APACHE II 13.1 - range 10-19). All patients developed SIRS and were given enteral nutrition supplemented with L-glutamine or calcium caseinate, 1464kcal/day (range 792-1914kcal/day). The use of L-glutamine in nutraceutical dose of 30g/day showed no changes in blood parameters. All laboratory parameters remained within normal values except the blood urea [Calcium Caseinate T1=47.0mg/dL (range 34.0-69.0 mg/dL) versus Glutamine T1=50.0mg/dL (36.75-75.0mg/dL); p=0.030]. Creatinine concentrations were not statistically different. There was no statistically significant difference in assessment of inflammatory parameters (IL-1, IL-6, IL-10 E TNFα). Leukocytes count decreased significantly in both groups [Calcium Caseinate T0=13.650 1/mm3 (10.148-18.250 1/mm3) versus T1=11.500 1/mm3 (8.050-29.100 1/mm3); p=0,019] and [Glutamine T0=12.850 1/mm3 (11.155-15.550 1/mm3) versus T1=11.000 1/mm3 (9.200-16.325 1/mm3); p=0.046]. There was increase statistically significant difference in lymphocytes count between groups [Calcium Caseinate T1=1085 1/mm3 (range 805-1363 1/mm3) versus Glutamine T1=1916 1/mm3 (1301-2517 l/mm3); p<0.0001] and Calcium Caseinate group decreases [T0=1288 1/mm3 (range 834-2209 1/mm3) versus T1=1085 1/mm3 (range 805-1363 1/mm3); p=0.0324] and Glutamine group increases [T0=954 1/mm3 (range 785-1442 1/mm3) versus T1=1916 1/mm3 (range 1301-2517 l/mm3); p<0.0001]. Blood concentration of TBARS decreased significantly in both groups [Calcium Caseinate T0=20.56mol MDA/ml (range 13.64-20.56mol MDA/ml); p=0.001] and [Glutamine T0=17.67 mol MDA/ml (range 8.11-34.98 mol MDA/ml) versus T1=16.52 mol MDA/ml (range 5.41-21.86 mol MDA/ml); p=0.020]. The blood concentrations of Gluthatione showed a statistically significant reduction in caseinate group (T0=486.0mol/ml (range 486.0±165.8mol/ml versus T1=451.0±167.4mol/ml; p=0.047) and no statistically significant difference in the glutamine group, nor between groups. However, there were no differences between groups. Glutamine and glutamate were not statistically different. Enteral nutrition supplemented with glutamine in nutraceutical doses of 30g/day increase lymphocyte count, helps to reduce lipid peroxidation and maintains the antioxidant glutathione capacity, interfering beneficially modulating the inflammatory response and stress, but present no effect upon cytokines concentrations or glycolytic parameters.

COSTA, Tie Bezerra. Efeito da privação da glutamina sobre as células secretoras do epitélio intestinal em um modelo in vitro de enteroide. 2014. 73 f. Dissertação (Mestrado em Ciências Médicas) - Universidade Federal do Ceará. Faculdade de Medicina, Fortaleza, 2014. / Submitted by denise santos (denise.santos@ufc.br) on 2015-02-13T11:59:15Z No. of bitstreams: 1 2014_dis_tbcosta.pdf: 1905458 bytes, checksum: 3bfbf27d06a97ecac348168074140446 (MD5) / Approved for entry into archive by denise santos(denise.santos@ufc.br) on 2015-02-13T12:00:14Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2014_dis_tbcosta.pdf: 1905458 bytes, checksum: 3bfbf27d06a97ecac348168074140446 (MD5) / Made available in DSpace on 2015-02-13T12:00:14Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2014_dis_tbcosta.pdf: 1905458 bytes, checksum: 3bfbf27d06a97ecac348168074140446 (MD5) Previous issue date: 2012 / The intestinal epithelium is formed and sustained by a population of stem cells capable of generating different cell lines while maintaining pluripotent and self-renewal capacity. Glutamine is a conditional essential amino acid important for the maintenance of the intestinal epithelium. However, few studies to date have explored the role of glutamine in the fine regulation of the intestinal crypt cell turnover. In order to evaluate the role of glutamine in the crypt cell turnover, an in vitro enteroid model was used, where stem cells are capable of generating an epithelium containing the main intestinal secretory cell lines (Paneth, goblet, and enteroendocrine cells) and absorptive enterocytes as well, while forming a villus-crypt like structure. This model was used to test the effect of 24h of glutamine deprivation (standard media with 2mM glutamine vs glutamine-free media) on epithelial turnover by counting EdU- labeled cells/total number per section and cell apoptosis by counting cleavage-caspase 3- labeled cells/total number per section. In order to assess crypt secretory function, Paneth and goblet crypt cell ratios (target secretory cell/total cell number per crypt) were measured. The number of Paneth and goblet cells was measured with the aid of confocal microscopy and lysozyme and mucin-2 immunostainning. In addition, Paneth and globet cell product transcripts (lysozyme and mucin, respectively) were measured using quantitative Real-time PCR. In order to assess the potential immunomodulatory role of glutamine, innate immune element transcripts, Toll like receptor and their accessory protein MD-2, and cytokines, as follows: TNF-α, IL-1β and CXCL-1, were measured. Glutamine deprivation reduced the number of EdU positive cell ratio as compared with the enteroid under the standard media (p=0.006). No significant differences regarding Paneth and goblet cell ratios were seen between groups following glutamine deprivation. Glutamine deprivation significantly decreased lysozyme transcripts as compared with the enteroid under the standard media (p=0.007), but not for mucin-2 transcripts, related to goblet cell function. Decreased TNF-α and MD-2 transcription (p=0.005 and p=0.016, respectively) were found following glutamine deprivation. Altogether, our findings reinforce the glutamine positive role on the intestinal epithelial turnover and furthermore suggest an important glutamine regulatory effect over Paneth cells and the innate immune system. The enteroid model provides an important tool the dissect the mechanisms of glutamine protection and shed light for future studies. / O epitélio intestinal é formado e mantido por uma população de células-tronco capaz de gerar diferentes linhagens celulares, mantendo a pluripotência e a capacidade de auto-renovação. A glutamina é um aminoácido essencial condicional importante para a manutenção do epitélio do intestino. No entanto, poucos estudos têm explorado o papel da glutamina na regulação fina do turnover celular da cripta intestinal. Com o propósito de avaliar o papel da glutamina n o turnover de células da cripta, foi utilizado um modelo in vitro de enteroide, onde as células-tronco são capazes de gerar um epitélio contendo as principais linhagens de células secretoras intestinais (célula de Paneth, célula caliciforme e célula enteroendócrina), além dos enterócitos absortivos, com a formação de uma estrutura tipo vilosidade-cripta. Este modelo foi usado para testar o efeito de 24 horas de privação de glutamina (meio padrão com glutamina a 2 mM vs meio livre de glutamina) no turnover epitelial através da contagem de células marcadas por Edu/número total por secção e ainda na apoptose celular, através da contagem de células marcadas para caspase 3-clivada/número total por secção. A fim de avaliar a função secretora das criptas, as razões das células de Paneth e caliciformes por cripta (célula alvo/número total de células secretoras por cripta) foram medidas. O número de células de Paneth e caliciformes foi obtido com o auxílio da microscopia confocal e imunomarcação para lisozima e mucina-2. Além disso, os transcritos dos produtos das células de Paneth e caliciformes (lisozima e mucina, respectivamente) foram analisados utilizando o método de PCR quantitativo em tempo real. Com intuito de avaliar o potencial papel imunomodulador da glutamina, transcritos de elementos da imunidade inata, receptor de tipo Toll e sua proteína acessória MD-2, e citocinas, a saber: TNF-α, IL-1β e CXCL-1, foram medidos. A privação de glutamina reduziu o número de células Edu positivas, em comparação com o enteroide sob meio padrão (p=0,006). Não houve diferença significativa em relação às razões das células de Paneth e células caliciformes entre os grupos após privação de glutamina. A privação da glutamina diminuiu significativamente os transcritos de lisozima, em comparação com o enteroide sob meio padrão (p = 0,007), mas não para mucina-2, transcrição relacionada com a função das células caliciformes. Uma transcrição reduzida para TNF- α e MD-2 (p=0,005 e p=0,016, respectivamente) foi observada após a privação de glutamina. Ao todo, nossos achados reforçam o papel positivo da glutamina sobre o turnover do epitélio intestinal e, além disso, sugerem um importante efeito regulador da glutamina sobre as células de Paneth e resposta imune inata. O modelo enteroide fornece uma ferramenta importante para dissecar os mecanismos de proteção pela glutamina e guiar estudos futuros.

Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências da Saúde. Programa de Pós-Graduação em Farmácia / Made available in DSpace on 2013-07-16T01:25:58Z (GMT). No. of bitstreams: 1 221615.pdf: 1153264 bytes, checksum: 76630da8416a7fca95cb42457f8a1d12 (MD5)