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Propagação da caramboleira por estacas caulinares e caracterização anatômica e histológica da formação de raizes adventícias / Star fruit trees propagation by cuttings and anatomical and histological characterization of the formation of adventitious rootsBastos, Débora Costa 03 February 2006 (has links)
A produção de mudas de caramboleira é um dos fatores limitantes à expansão comercial da cultura, devido ao tempo que estas levam para serem formadas e iniciarem a produção. Esta pesquisa teve como objetivo estudar os processos mais adequados para aumentar a eficiência da propagação por estaquia em caramboleira, utilizando-se diferentes tipos de estacas, técnicas de estiolamento e ferimento na base combinadas ao uso de reguladores de crescimento (AIB), e também estudar a estrutura anatômica e histológica dos diferentes tipos de estacas com relação à formação de raízes adventícias. O trabalho foi realizado com a instalação e condução de 3 (três) experimentos. Nos dois primeiros experimentos (I e II) foram testadas técnicas para maximizar a propagação por estacas da caramboleira. Foram utilizadas estacas da variedade Malásia, padronizadas com um par de folhas inteiras, com 12 (doze) cm de comprimento e 3 (três) gemas. O delineamento estatístico utilizado foi o inteiramente casualizado, em arranjo fatorial 3 x 4, onde os fatores estudados foram técnicas aplicadas nas estacas (estiolamento, ferimento na base e controle) e diferentes concentrações de AIB (0, 3000, 6000 e 9000 mg L-1) para estacas lenhosas (experimento I) e (0, 2000, 4000 e 6000 mg L-1) para estacas herbáceas (experimento II). As estacas foram mantidas em câmara de nebulização intermitente e após 75 dias, avaliaram-se as porcentagens de enraizamento, sobrevivência, formação de calos e número de raízes por estaca. Concluiu-se, para os dois experimentos, que as técnicas de estiolamento e ferimento na base da estaca foram prejudiciais à formação de raízes adventícias e a aplicação de AIB não mostrou diferença significativa para o enraizamento dos dois tipos de estacas estudados. No terceiro experimento foram feitos estudos anatômicos e histológicos que envolvem o processo de formação de raízes nas estacas. Estacas herbáceas, semilenhosas e lenhosas tratadas por imersão rápida em 0 e 3000 mg L-1 de ácido indolbutírico (AIB) foram mantidas em câmara de nebulização sob condições controladas por até 70 dias. Periodicamente as estacas foram cortadas, fixadas, desidratadas e preparadas para os cortes histológicos seriados e análise por microscopia óptica. Como conclusão, verificou-se que os diferentes tipos de estacas caulinares de caramboleira apresentaram estruturas anatômicas e histológicas distintas e a formação endógena de primórdios de raízes em estacas herbáceas ocorreu a partir do câmbio vascular. / The star fruit seedling production is one of the limiting factors to the commercial expansion of this culture, due to the time that they take to be formed and begin the production. The aim of this paper is to study the most adapted processes to increase the efficiency of stem propagation for star fruit using different types of cuttings, etiolating techniques and wound in the base combined to the use of growth regulators (IBA), and also to study the anatomical and histological structure of the different types of cuttings with related to the formation of adventitious roots. The work was accomplished with the installation and conduction of 3 (three) experiments. In the first two experiments (I and II) techniques were tested in order to improve the propagation by cuttings of the star fruit. Cuttings of the variety Malaysia were used and standardized with a pair of whole leaves, with 12 (twelve) cm of length and 3 (three) gems. The statistical design used was entirely randomized in arrangement to factorial 3 x 4, where the studied factors were the techniques applied in the cuttings (etiolating, wound in the base and control) and different concentrations of IBA (0, 3000, 6000 and 9000 mg L-1) for hardwood cuttings (experiment I) and (0, 2000, 4000 and 6000 mg L-1) for herbaceous cuttings (experiment II). The cuttings were maintained in chamber of intermittent mist and after 75 days, the percentages of root formation, survival, formation of calluses and number of roots per cuttings were evaluated. It is concluded for both experiments, that the etiolating techniques and wound in the base of the cuttings were harmful to the formation of adventitious roots and the application of IBA did not show significant difference for root formation of both types of cuttings studied. The third experiment carried out anatomical and histological studies that involve the process of formation of roots in the cuttings. Herbaceous, softwood and hardwood cuttings treated in fast immersion at 0 and 3000 mg L-1 of indolbutyric acid (IBA) were maintained in mist chamber under controlled conditions for up to 70 days. Periodically the cuttings were cut, fastened, dehydrated and prepared for the serial histological cuts and analysis through optical microscopy. As conclusion, it was verified that the herbaceous, softwood and hardwood cuttings of star fruit present different anatomical and histological structures and the endogenous formation of roots primordium in herbaceous cuttings occurred from the cambium.
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Avaliação histomorfométrica do endométrio na fase lútea de mulheres férteis e inférteis / Evaluation the endometrial histomorphometry of fertile and infertile women during their luteal periodEjzenberg, Dani 06 September 2012 (has links)
OBJETIVO: avaliar a histomorfometria do endométrio na fase lútea de mulheres férteis e inférteis. MÉTODOS: foram triadas 40 pacientes, 30 inférteis e 10 férteis, em seguimento na Clínica Ginecológica do HC-FMUSP, que concordaram em participar deste estudo. Foi realizada avaliação ultrassonográfica seriada a partir da menstruação, para determinação da ovulação. Na fase lútea as pacientes eram submetidas à histeroscopia. Foram excluídas 14 pacientes sendo 12 por falta durante a avaliação ultrassonográfica e 2 pela presença de pólipos. A casuística foi composta por 6 controles férteis, que foram comparadas a 20 casos inférteis (endometriose-8, causa tubo-peritoneal-5, causa masculina-5, sem causa aparente-2). Na histeroscopia foram coletadas duas biópsias dirigidas (sistema de Bettocchi) da parede posterior (terço distal), e da parede anterior (terço médio), e uma biópsia aspirativa com Pipelle. Foram avaliados parâmetros histomorfométricos endometriais. RESULTADOS: as duas formas de biópsia foram apropriadas para análise endometrial; a dirigida coletou menor área tecidual, porém sem sangue. Nenhum paciente fértil apresentou heterogeneidade endometrial (atraso de fase em algum sítio); isto ocorreu em 7 (35%) das inférteis (p=0,11). Foi diagnosticada endometrite em 2 (10%) casos. CONCLUSÃO: não foram observadas diferenças histomorfométricas entre o endométrio de mulheres férteis e inférteis na fase lútea. Parte das pacientes inférteis mostrou heterogeneidade endometrial e endometrite. A biópsia dirigida, assim como a aspirativa, foi adequada ao estudo endometrial na fase lútea / Objective: to evaluate the endometrial histomorphometry of fertile and infertile women during their luteal period. Methods: 40 female patients- 30 infertile and 10 fertile- who were being followed-up at the Gynecological Clinic at the Hospital das Clinicas (HC),-Faculdade de Medicina da Universidade de Sao Paulo (FMUSP), agreed to participate in the study. Serial ultra sonograms, starting from their menstrual period, were performed to identify their ovulation. In the luteal phase the patients underwent hysteroscopy. From the initial sample, 14 patients were excluded from the study, 12 of whom for being absent during scheduled ultra sonograms and 2 for presenting polyps. The final sample thus consisted of 6 fertile females (control subjects) who were compared to 20 patients with infertility, categorized as follows: 8 due to endometriosis, 5 due to peritoneal tube conditions, 5 due to male infertility, and 2 with no apparent cause. During the hysteroscopy 2 directed biopsies (Bettocchis System) of the posterior wall (distal third section) and of the anterior wall (medial third) were performed, as well as Pipelle sampling. Endometrial histomorpholometric parameters were evaluated. Results: the two forms of endometrial sampling performed were appropriate for the endometrial analysis. The directed biopsy collected tissue from a smaller area, but it had no blood. None of the fertile patients presented endometrial heterogeneity, i.e., phase delay in any site. In contrast, this occurred in 7(35%) of the infertile females (p=0.11). Endometritis was diagnosed in 2 (10%) of the cases. Conclusions: no histomorphometric differences were observed in the endometrium of the fertile and infertile female patients during their luteal phase. About a third of infertile cases (35%) displayed endometrial heterogeneity and a small percentage of which (10%) had endometritis. Both the directed biopsy and Pipelle sampling were found satisfactory for studies of endometrium during the luteal phase
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Efeito da terapia de longa duração com ácido zoledrônico no osso esponjoso da mandíbula e fêmur de ratos Wistar / Effect of long-term zoledronic acid treatment on cancellous bone in the mandible and femur of Wistar ratsSoares, Mariana Quirino Silveira 09 October 2017 (has links)
Os bisfosfonatos (BF) são amplamente utilizados no tratamento de doenças osteolíticas como metástases ósseas e osteoporose. A osteonecrose dos maxilares associada ao uso de BF (OMAB) é caracterizada pela presença de osso exposto ou que pode ser sondado através de uma fístula que persiste por mais de oito semanas em pacientes com história de terapia de BF e sem história de radioterapia na região de cabeça e pescoço e/ou sem doença metastática nos maxilares. A incidência de OMAB aumenta com a potência, duração do tratamento e dose de BF recebida. Até o presente momento, a fisiopatologia da OMAB não está clara, dificultando a prevenção e o tratamento. O objetivo deste estudo foi avaliar o efeito da administração de altas doses Ácido Zoledrônico (AZ) por período prolongado no osso esponjoso da mandíbula e da metáfise proximal do fêmur de ratos Wistar. Para relacionar as descobertas à fisiopatologia da OMAB, o regime de administração de BF de um modelo animal relevante desta lesão foi reproduzido. Seis animais receberam AZ (0,6 mg / kg) e seis receberam solução salina no mesmo volume (Controles). Os compostos foram administrados por via intraperitoneal em cinco doses a cada 28 dias. A eutanásia dos animais ocorreu após 150 dias de início da terapia. As hemimandíbulas e fêmures direitos foram escaneados usando Micro-tomografia computadorizada (Micro-CT) de alta resolução (14 m). Para a primeira análise realizada neste estudo, os dados morfométricos do osso esponjoso foram calculados na região do segundo e primeiro molar na mandíbula e na metáfise do fêmur usando CTAnalyzer (Bruker, Bélgica). Para a segunda análise, cinco amostras de hemimandíbulas de cada grupo foram cortadas em lâminas histológicas (5 m) e coradas com Hematoxilina e Eosina. Para comparar os parâmetros morfométricos na Micro-CT e histologia, as imagens de Micro-CT foram espacialmente alinhadas à histologia. Os dados morfométricos do osso alveolar foram calculados usando o software CTAnalyzer (Bruker, Bélgica) na região entre as raízes mesial e distal do primeiro molar. A densidade da área vascular (área vascular/área total; VA/TA) e os dados histomorfométricos ósseos foram estimados usando Axiovision na mesma região (entre as raízes mesial e distal do primeiro molar). Foi adotada significância estatística de 5% ( = 0,05). Os animais tratados com AZ apresentaram aumento significativo na porcentagem de volume ósseo (p <0,05) com trabéculas mais espessas, osso mais compacto com menor separação trabecular na mandíbula e no fêmur. Na mandíbula, o aumento da densidade óssea e diminuição da separação trabecular foram fortemente correlacionados com a diminuição da área vascular observada no grupo AZ (p <0,05). Em conclusão, o tratamento de longa duração com altas doses de AZ foi significativamente associado ao aumento na densidade óssea e à diminuição dos espaços medulares, canais nutritivos e vasculatura do osso alveolar. A análise com Micro-CT revelou alterações semelhantes na estrutura óssea tanto na mandíbula quanto no fêmur do grupo AZ. / Bisphosphonates (BFs) are widely used in the treatment of osteolytic diseases such as bone metastases and osteoporosis. The osteonecrosis of the jaws related to BF (ONB) is characterized by the presence of exposed bone or bone that can be probed through a fistula that persists for more than eight weeks in patients with a history of BF therapy and without history of head and neck radiotherapy and / or without metastatic disease in the jaws. The incidence of ONB increases with potency, duration of treatment and dose of BF received. Thus far, the pathophysiology of ONB is unclear, hampering prevention and treatment. The aim of this study was to objectively assess the effect of long-term high-dose Zoledronic Acid (ZA) on cancellous bone in the jaw and femur of Wistar rats. In order to link our findings to the physiopathology of ONB, the therapeutic regiment of a relevant ONB animal model was reproduced. Twelve Wistar rats were randomly divided in two groups: six received Zoledronic acid (ZA; 0.6 mg / kg) and six (Controls) received saline solution in the same volume. The compounds were administrated intraperitoneally in five doses each 28 days. The rats were killed after 150 days of the therapy onset. Mandibles and femurs were scanned using a high-resolution (14m) micro-computerized tomography (Micro-CT). For the first analysis carried in this study, cancellous bone morphometric data were calculates in the region of the second and first molar in the mandible and in the proximal femur using CTAnalyzer (Bruker, Belgium). For the second analysis five samples were cut into histological slices (5m) and stained with Hematoxylin and Eosin. In order to compare the same morphological structures in Micro-CT and histology, the Micro-CT images were aligned to histology. Alveolar bone morphometric data (Micro-CT) was calculated using CTAnalyzer (Bruker, Belgium) in the region between the mesial and distal roots of the first molar. Blood vessels density and bone histomorphometric data were calculated using Axiovision (Carl Zeiss, Germany) in the same region used for Micro-CT evaluation. Statistical significance of 5% (=0.05) was adopted. ZA treated rats presented significant increase in the percentage of bone volume (p<0.05) with thicker trabeculae and more compact bone with smaller marrow spaces in the mandible and femur. In the mandible, the increase in bone density and decrease of marrow spaces size was strongly correlated with the decrease in the vascular area noticed in the ZA group (p<0.05). In conclusion, long-term high-dose ZA treatment was significant associated with the increase of bone density and the diminution of medullary spaces and nutritive canals size as well as decrease in vascularity of the alveolar bone. Micro-CT investigation showed similar changes in bone structure in the mandible and femur in the ZA group.
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Estudio molecular y citogenético del carcinoma urotelial: Detección temprana de la enfermedad y de su diseminaciónMarín Aguilera, Mercedes 09 December 2008 (has links)
En España se diagnostican cada año unos 12.000 nuevos casos de carcinoma urotelial (CU). Más concretamente, en Cataluña este tumor representa entre un 9,9 y un 11,7% del total de tumores malignos, dando lugar a una mortalidad cáncer específica del 5,2% en el sexo masculino. Aunque en la mayoría de casos la enfermedad se acaba detectando en su fase más inicial, la alta frecuencia de recidivas y la posibilidad de progresión y diseminación debido a la agresividad de algunas formas limitarán la supervivencia del paciente.El método estándar para la detección y seguimiento del CU se basa en la combinación de la citología urinaria y la cistoscopia. Sin embargo, la primera de estas técnicas presenta baja sensibilidad en la detección de tumores de estadio inical y bajo grado, mientras que la segunda es una técnica invasiva que además no es lo suficientemente sensible para detectar todas las lesiones de crecimiento plano.Por otro lado, las técnicas histológicas convencionales para el diagnóstico de la diseminación linfática del CU no son lo suficientemente sensibles ya que alrededor del 50% de pacientes sometidos a cirugía radical con linfadenectomía N0, fallecen antes de los 5 años post-cirugía. Estos datos sugieren que existe una diseminación tumoral antes de la cirugía que no es detectada mediante estas técnicas histológicas.Debido a la elevada prevalencia y gravedad de la enfermedad, a la invasividad de las pautas utilizadas en su diagnóstico y a la falta de métodos de estadiaje refinados, el desarrollo de nuevos sistemas diagnósticos que permitan una detección temprana tanto del CU inicial como de sus recidivas y de su diseminación es esencial para mejorar la calidad de vida y el pronóstico de los pacientes con esta enfermedad.En el presente trabajo se ha evaluado la utilidad de la técnica "fluorescence in situ hibridization" (FISH) en el diagnóstico no invasivo del Cu de bajo estadio, en el diagnóstico no invasivo del CU localizado en el tracto urnario superior (TUS) y en el pronóstico de pacientes con CU de alto riesgo de recurrencia y progresión, tratados mediante inmunoterapia con el bacilo de Calmette Guérin (BCG). Por otro lado se ha intentado detectar la presencia de micrometástasis linfáticas así como de diseminación sanguínea del CU, mediante marcadores moleculares en pacientes sometidos a cistectomía y linfadenectomía radical.Los resultados obtenidos indican que la técnica FISH basada en los cromosomas 3, 7, 9 y 17 presenta mayor sensibilidad que la citología urinaria, y una similar especificidad equivalente en la detección del CU no músculo-infiltrante, así como en la detección del CU localizado en el TUS. La naturaleza no invasiva de este ensayo así como su elevada sensibilidad y especificidad podrían contribuir a mejorar el actual diagnóstico/seguimiento del CU en estas localizaciones. Otro resultado interesante fue que los pacientes con un resultado positivo de FISH tras la terapia BCG tienen mayor probabilidad de presentar una recurrencia del tumor. Así, la técnica FISH parece ser útil en el seguimiento de los pacientes con un tumor no músculo-infiltrante de alto riesgo de recurrencia y progresión sometidos a terapia BCG. Finalmente, se observó que la utilización de marcadores moleculares permite mejorar la sensibilidad del análisis histopatológico en la detección de la diseminación linfática tumoral y que la linfadenectomía juega un importante papel curativo eliminando la enfermedad microdiseminada. Sin embargo, el análisis de la expresión génica en muestras de sangre periférica no es adecuado para seleccionar a aquellos pacientes que desarrollarán metástasis detectables clínicamente, aunque sí permite distinguir entre pacientes con CU de controles sanos. / Cystoscopy and cytology are the standard methods to detect and monitor urothelial carcinoma (UC). Cystoscopy is an invasive technique (especially to visualize the upper urinary tract or UUT) that has a high sensitivity, except in flat malignancies. Cytology has the advantage of being non-invasive with a high specificity, but it lacks sensitivity and produces high rates of suspicious cases, especially for low-stage and low-grade tumors. Another weak point in the clinical management of UC is the fact that current methodologies to detect disseminated UC lack sensitivity.The aims of this study were: (1) to evaluate the performance of a multiprobe FISH (fluorescence in situ hybridization) assay for non-invasive detection of superficial UC in the bladder, in comparison to urinary cytology, (2) to assess the clinical utility of FISH as a non-invasive method for diagnosing and monitoring UC in UUT, (3) to evaluate the use of FISH for determining the response of patients with high-risk superficial bladder tumour (HRSBT) to bacillus Calmette-Guérin (BCG) therapy, (4) to identify and test potential mRNA markers of UC dissemination in lymph nodes, and to compare the performance of selected markers with patients' clinical outcome, and (5) to test the efficiency of such mRNA markers in detecting and monitoring UC haematogenous dissemination.According to our results, FISH assay for chromosomes 3, 7, 9, and 17 has higher sensitivity than cytology and a similar specificity in the detection of superficial UC and UC at UUT, which could be useful for reducing some cystoscopies in the follow-up of these patients. Moreover, a high percentage of positive pre-BCG FISH results were obtained, suggesting the need for adjuvant therapy in patients with HRSBT after the transurethral resection. In addition, patients with a positive post-BCG FISH result were more likely to relapse after therapy. Thus, FISH appears to be useful for the surveillance of patients with HRSBT following BCG therapy.Finally, using molecular markers it was possible to improve the sensitivity of LN histologic analysis. Also this methodology allowed distinguishing between UC patients and controls. However, despite its high sensitivity, it was not possible to monitor UC haematogenous dissemination.
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Ciclo ovogenético e estudo morfológico comparativo do sistema reprodutivo de espécies da ordem Polydesmida (Diplopoda)Pinheiro, Tamaris Gimenez [UNESP] 22 February 2013 (has links) (PDF)
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000713035.pdf: 1097521 bytes, checksum: 53a1914b1b9f91f15512a5389e0621f1 (MD5) / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / Pouco se sabe sobre a dinâmica reprodutiva dos diplópodos em seu habitat natural. Em áreas inundáveis como o Pantanal matogrossense, estes organismos desenvolvem estratégias de sobrevivência para suportar as alterações cíclicas do regime hídrico. Diante disso, este estudo visou descrever a estrutura ovariana e o ciclo ovogenético de três espécies de diplópodos da ordem Polydesmida: Poratia salvator e Myrmecodesmus hastatus, encontradas em áreas inundáveis e não inundáveis do Pantanal matogrossense, e Telonychopus klossae, que ocorre no município de Cuiabá, Mato Grosso. Além disso, visou fazer um estudo comparativo da morfologia ovariana dessas espécies, a fim de contribuir para discussões sobre a evolução morfológica deste sistema no grupo. Os indivíduos foram coletados trimestralmente, de dezembro de 2009 a janeiro de 2012, por meio de busca ativa. Parte das fêmeas amostradas foi dissecada, fixada, emblocada e processada para estudos histológicos e histoquímicos e outra foi destinada ao estudo ultramorfológico. Poratia salvator e M. hastatus (Pyrgodesmidae) apresentaram ovário como um órgão tubular único. Telonychopus klossae (Chelodesmidae) possui ovário pareado com presença de ovissacos. O ovário não pareado parece ser uma apomorfia, aparentemente, associada ao tamanho diminuto destas espécies e suas curtas histórias de vida; a condição pareada seria simplesiomórfica e mais comum para as famílias de Polydesmida. Os ovócitos apresentam três estágios de desenvolvimento, diferenciados por caracteres como tamanho, aspecto do ovoplasma e deposição do cório. Com relação aos componentes das células germinativas, a deposição de lípidos foi primeiramente observada, seguida pela deposição de proteínas, carboidratos e cálcio. Estes elementos são derivados tanto de... / Little is known about the reproductive dynamics of the diplopods in their natural habitat. In wetlands, these organisms develop survival strategies to withstand the cyclical changes of the water regime. Thus, this study aims to describe the ovarian structure and the oogenetic cycle of three diplopods species in the order Polydesmida: Poratia salvator and Myrmecodesmus hastatus, found in flooded and non-flooded areas of the Pantanal of Mato Grosso, and Telonychopus klossae, that occurs in the Cuiabá city, Mato Grosso. Moreover, it aims to make a comparative study of the ovarian morphology of these species for to contribute with discussions about the morphological evolution of this system in the group. The animals were collected quarterly from December 2009 to January 2012 through active search. Part of the sampled females was processed for histological and histochemical investigation and other part was intended for ultrastructural study. Poratia salvator and M. hastatus (Pyrgodesmidae) had an unpaired ovary that formed a tubular organ containing oocytes. Telonychopus klossae (Chelodesmidae) had a paired ovary with ovisacs. The unpaired ovary appeared to be apomorphic and was associated with the small size of these species and their short life cycle; the paired condition was symplesiomorphic, commonest to Polydesmida families. The oocytes in these species have three stages of development, which were differentiated by size, aspect of ooplasma and deposition of the chorion. With respect to the components of germ cells, the lipid deposition was noted first, followed by the deposition of proteins, carbohydrates and calcium. These elements are derived either from endogenous sources as exogenous. In all Pantanal seasons occurred females of P. salvator e M. hastatus with oocytes in stage III... (Complete abstract click electronic access below)
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Avaliação mecânica e histológica de pericárdio bovino descelularizado submetido à pressãoPeruzzo, Angela Maria 25 October 2013 (has links)
O pericárdio bovino é um tecido biológico utilizado na fabricação de vários produtos para a saúde e também em válvulas cardíacas desde o início da década de setenta, porém, ainda requer estudos mais aprofundados no que diz respeito às mudanças que os tratamentos químicos utilizados para confecção das válvulas ocasionam. Atualmente a engenharia de tecidos estuda a descelularização do pericárdio bovino como um processo para retirar os componentes celulares, mantendo intacta a matriz extracelular (MEC), preservando a integridade do colágeno e também pode atuar como anticalcificante. Porém, é necessário saber qual o impacto que o tratamento químico trará nas propriedades mecânicas do tecido, como tensão máxima, deformação específica e alongamento. Nos trabalhos observados, os testes mecânicos realizados nos pericárdios bovinos descelularizados foram feitos no tecido sem serem submetidos a uma pré-tensão, a qual é necessária na maioria das vezes, para formação das cúspides durante a confecção das válvulas cardíacas ou outro dispositivo médico. Por essa razão, foi realizado um estudo do efeito na propriedade mecânica que uma determinada pressão exerce sobre o pericárdio bovino, que passou pelo processo de descelularização. Em paralelo também foi feito uma avaliação histológica do tecido para verificar a ausência de células e a preservação das fibras de colágeno no tecido descelularizado. Foram preparados quatro grupos diferentes para a realização dos testes. O grupo I chamado de grupo controle. O grupo II, onde os pericárdios foram descelularizados com o método PUC I. O grupo III foi tratado como o grupo I, porém sob pressão de 240 mmHg. Já o grupo IV, os pericárdios foram descelularizados e em seguida submetidos à mesma pressão utilizando solução de glutaraldeído 0,2% e 0,5%. Após os tratamentos dos grupos, todas as amostras foram tingidas em solução de azul de metileno 0,03% para melhor visualização das fibras do tecido. Em seguida os tecidos foram cortados a laser para obtenção dos corpos de prova e submetidos ao ensaio de tração. Obteve-se a partir do ensaio, a tensão máxima das amostras, a deformação específica e o alongamento na ruptura. Foi observado que nos grupos onde foram submetidos à pressão tiveram uma tensão máxima menor do que os grupos sem pressão e um maior alongamento. Verificou-se que o efeito da pressão diminuiu a espessura dos tecidos. O processo de descelularização se mostrou eficaz uma vez que foi demonstrada a ausência de células e a preservação das fibras de colágeno após técnica utilizada. / The pericardium is a biological tissue used in the manufacture of various products for medical advices and manufacture of heart valves since the early seventies, however, it still requires further study with regard to the changes that the chemical treatments used to manufacture the valves cause. Several studies show that the tissue often undergoes a process of calcification generated by mechanical stress of opening and closing of the leaflets, damaging the hydrodynamics making valvular replacement necessary. Currently tissue engineering study decellularization process of the bovine pericardium to remove cellular components while preserving the extracellular the matrix (ECM), preserving the integrity of collagen it and can also act as anti-calcification. However, one must know the impact that chemical treatment will bring on the mechanical properties of the tissue, such as tensile strength, strain and elongation percentage. In examined studies, the mechanical tests performed on bovine pericardium decellularized tissue was made without being subjected to a pre-tension which is necessary in most cases for formation of the leaflets during the manufacturing of heart valves. For this reason, a study of the effect on mechanical property that a certain pressure exerts on the pericardium, which passed the decellularization process was made. In parallel it was also made a histological evaluation of the tissue to verify the absence of cells and preservation of collagen fibers in decellularized tissue. Four different groups were prepared for test. The group I was called a control group. In group II, the pericardia were decellularized with the PUC method I. Group III was treated as group I, but under pressure of 240 mmHg. The group IV, the pericardia were decellularized and then subjected to pressure using glutaraldehyde 0.2% and 0.5%. After treatment of the groups, all samples were stained in a solution of blue methylene 0.03% for better visualization of the fibers of the tissue. Then the tissues were cut by laser to obtain the specimens and subjected to tensile test. It was obtained from the test, the tensile strength of the samples, the strain and elongation percentage at break. It is observed that the groups which underwent pressure had a lower tensile strength than those without pressure and on the other hand showed a greater elongation percentage. Thus, it can be verified that the effect of the pressure decreased the thickness of the tissues. The decellularization process has show efficient since it has demonstrated the absence of cells and preservation of collagen fibers after technique.
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Controle genético e histogênese na regeneração de progênies de Eucalyptus grandis in vitro / Genetic control and histological analysis of in vitro regeneration of Eucalyptus grandis progeniesCarlos David Vera Bravo 30 September 2005 (has links)
Com o objetivo de conhecer meios, explantes, tecidos envolvidos e controle genético da regeneração in vitro a partir de plântulas de Eucalyptus grandis, dez progênies de polinização aberta da população base, origem Atherton localizada em Anhembi, estado de São Paulo foram utilizadas. Sementes de sete progênies foram germinadas in vitro. Após vinte dias de cultivo, cotilédones, segmentos proximais e distais dos hipocótilos foram inoculados em nove meios de cultura usando o meio basal de JADS em combinação com dois reguladores de crescimento (ANA e BAP). Após 14 semanas de cultivo, foram feitas avaliações da regeneração e histologia. Células do córtex estavam envolvidos na regeneração dos hipocótilos e as células subepidérmicas originaram calos e estes deram origem a brotos nos cotilédones. Todos os brotos formados tiveram conexão com o sistema vascular do tecido original. Foi verificado que o melhor tratamento, onde 41% dos hipocótilos distais regeneraram, na combinação de ANA e BAP 0,5 mg L-1. Posteriormente, os segmentos distais dos hipocótilos das dez progênies foram inoculados naquele meio, houve diferenças significativas de regeneração entre as progênies (P<0,0001) com extremos de regeneração de 11% a 60% e com uma média de 37%. A herdabilidade quanto ao caráter foi alta (h 2 m =0,94), indicando que houve um forte controle genético na regeneração in vitro dentro da população. Houve também alta variabilidade dentro da amostra estudada assim como um forte efeito materno sobre a regeneração. / Aiming at better knowledge on tissue culture media, axplants, tissues involved and genetic control of in vitro regeneration of Eucalyptus grandis from seedlings, seeds from ten open pollinated progenies from the basic population, origin Atherton, located in Anhembi, São Paulo State (BR) were used. Initially, seeds from seven progenies were germinated in vitro. Twenty days after culture, cotyledons and, distal and proximal hypocotyls segments were inoculated in culture media using JADS basic medium with varius NAA + BAP combinations. After 14 weeks of culture, evaluations bud induction, regeneration, and histological analysis were done. Cortex cells were involved in hypocotyls direct regeneration and cotyledon epidermic cells gave rise to callus which in turn produced shoots. All shoots developed had connection to the original vascular system. It was verified that NAA + BAP at 0,5 mgL-1 concentration each was the best treatment, where 41% of the distal hypocotyls regenerated. Distal hypocotyl segments from of seedlings of ten progenies were inoculated showing significant differences regeneration among progenies. Regeneration varied from 11% to 60% with a mean of 37%; the heritability in relation to the character was ( 94 , 0 2 = m h ), indicating that there was a strong genetic control of the in vitro regeneration within the population. Also, there was a high variability within the samples studied as well as a strong maternal effect on the regeneration.
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Análise quantitativa da infiltração de quinolina em lesões cariosas naturais proximais de esmalteBrito, Camila Santos de Mattos 28 February 2014 (has links)
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Previous issue date: 2014-02-28 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / Immersion of natural enamel caries (NEC) in quinoline has been important for determining lesion size and mapping areas with different pore sizes, but quantitative volumetric data of the infiltration are not available. Here we provide first quantitative volumetric data of the volume infiltrated by quinoline (mostly < 50% of pore volume were infiltrated) in histological layers (including dark zone) of ground sections of NEC lesions (n = 20) and report that a parameter related to permeability predicted 60% of the variance of the volumetric infiltration. Distance from the original enamel surface was inversely related to the infiltrated volume. In most lesions the translucent zone was not the lesion front. Real-time 2D mapping of transport processes after immersion in quinoline revealed an early outward water flow and a late inward quinoline penetration, both following prisms paths parallel to the main axis of ground sections. New events of the nature of transport processes in ground sections of NEC lesions reported here can be explored to improve efficiency of both remineralizing agents and resin infiltrants for treatment of NEC. / A imersão em quinolina de lesões naturais de cárie em esmalte tem sido importante para determinar o tamanho da lesão e áreas com diferentes tamanhos de poros. No entanto, dados volumétricos quantitativos resultantes da infiltração desta substância não estão disponíveis na literatura. Sendo assim, o presente trabalho objetivou apresentar os primeiros dados quantitativos volumétricos do infiltrado por quinolina (na maioria das amostras < 50 % do volume de poros foram infiltrados) em camadas histológicas (incluindo zona escura) de cortes por desgaste de lesões cariosas naturais em esmalte (n = 20). Além disto, verificou-se que um parâmetro relacionado à permeabilidade previu 60 % da variância da infiltração volumétrica. A distância da superfície do esmalte original foi inversamente relacionada com o volume infiltrado. Na maioria das lesões, a zona translúcida não foi o front da lesão. Mapeamento em 2D em tempo real de processos de transporte após a imersão em quinolina, através de microscopia de luz polarizada, revelou primeiramente um fluxo de água para o exterior e uma conseguinte penetração por quinolina, ambos seguindo a trajetória dos prismas paralelamente ao eixo principal dos cortes por desgaste. Novos eventos da natureza dos processos de transporte em cortes por desgaste aqui relatados podem ser explorados para melhorar a eficiência de ambos os agentes remineralizantes e infiltrantes de resina para tratamento de lesões cariosas.
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Propriedades morfológicas e tensiométricas do peritônio de paca (Agouti paca, Linnaeus, 1766) a fresco, e conservados em glicerina /Camargo, Angela Daniele de. January 2009 (has links)
Orientador: Marcia Rita Fernandes Machado / Banca: Maria Aparecida de Alcântara / Banca: Hélio Takachi Okuda / Banca: Gilson Hélio Toniollo / Banca: Marcos Lania de Araújo / Resumo: O objetivo desta investigação foi descrever o comportamento mecânico e as características histológicas de peritônio da paca (Agouti paca) a fresco e conservado em glicerina a 98%. Amostras frescas e conservadas em glicerina por períodos de 30, 60 e 90 dias foram submetidas a testes mecânicos de tração, e também caracterizadas pelos seus aspectos histológicos e microscópicos , utilizando-se microscopias de luz e eletrônica de varredura. Quatro animais adultos, machos e fêmeas, com peso corporal médio de 8 quilogramas, foram utilizadas para colheita de amostras de peritônio. Não foram observadas diferenças significativas na integridade estrutural e ultraestrutural dos elementos que constituem as amostras a fresco e conservadas em glicerina. Evidenciou-se, portanto, células mesoteliais e tecido conjuntivo (ou conectivo) sem grandes alterações. Todos os tecidos conservados em glicerina a 98% apresentaram diminuição na rigidez e aumento na ductibilidade e tenacidade, similarmente às amostra de bovinos. Pode-se concluir que a glicerina é uma substância eficiente para a conservação de membranas biológicas, melhorando as propriedades mecânicas e permitindo que as membranas suportem maiores forças de deformação / Abstract: The purpose of this investigation is to describe the mechanical behavior and histological characteristics of fresh and 98% glycerin conserved Agouti paca peritoneum. Fresh samples and those conserved in glycerin for periods of 30, 60 and 90 days were submitted to mechanical traction tests, as well as characterized by its histological and microscopic aspects by optical and scanning electron microscopy. Four adult animals, males and females, about eight kilograms each, were used to collect peritoneum samples. There was no significant difference in structural and ultrastructural integrity of the elements that constitutes the samples of fresh and 98% glycerin conserved material, evidencing mesothelial cells and connecting tissue without large alterations. All the evaluated tissues conserved in 98% glycerin showed a decrease in their rigidness and also an increase in the ductility and tenacity similar to bovine. It can be concluded, that glycerin is efficient for the conservation of biological membranes.improving the mechanical properties allowing the membranes to handle larger forces and deformation / Doutor
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Fitofagia do predador Brontocoris tabidus (Heteroptera : Pentatomidae) no campo : aspectos morfo-fisiológicos e populacionais / Phytophagy of the predator Brontocoris tabidus (Heteroptera: Pentatomidae) in the field: morfo-physiological and population aspectsLemos, Walkymário de Paulo 24 June 2005 (has links)
Submitted by Reginaldo Soares de Freitas (reginaldo.freitas@ufv.br) on 2017-04-18T12:31:52Z
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Previous issue date: 2005-06-24 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / Esta pesquisa estudou o efeito de diferentes dietas [pupas de Tenebrio molitor L. (Coleoptera: Tenebrionidae) sem planta; pupas de T. molitor e plantas de Eucalyptus cloeziana; pupas de T. molitor e plantas de Eucalyptus urophylla e; pupas de T. molitor e plantas de goiabeira (Psidium guajava)], no campo, sobre aspectos morfo-fisiológicos do corpo gorduroso e do sistema reprodutor de femeas e machos de Brontocoris tabidus (Signoret) (Heteroptera: Pentatomidae) e avaliou a fecundidade e os parâmetros das tabelas de vida e de fertilidade desse predador em plantas de Eucalyptus grandis, em campo. A genitalia interna de fêmeas desse predador apresentou coloração amarelada, com ovário do tipo meroístico telotrófico e com sete ovaríolos. 0 total de proteína na hemolinfa (25,89 ug/uL) de fêmeas de B. tabidus independe da idade e da dieta, mas aquelas alimentadas com pupas de T molitor sem planta tiveram ovaríolos menores. O número de ovócitos/ovário foi maior para fêmeas desse predador com E. urophylla e pupas de T molitor e menor sem planta. Fêmeas de B. tabidus com 21 dias de idade apresentaram maior número de ovócitos/ovaríolo (5,13 ovócitos) que aos 15 dias (4,54 ovócitos) com todas as dietas. Fêmeas desse predador, com 15 dias de idade, tiveram ovócitos mais desenvolvidos com E. cloeziana (1,58 mm) 6 E. urophylla (1,62 mm) 6 menores com goiabeira (1,35 mm) 6 pupas (16 T. molitor sem plantas (1,23 mm). Com 21 dias de idade, fémeas (16 B. tabidus sem planta apresentaram ovócitos menores que aquelas com plantas. O comprimento do ovócito não foi afetado pela idade de fêmeas desse predador com plantas de eucalipto. Os ovários (16 B. tabidus tiveram características histológicas semelhantes com todas as dietas. A genitália intema de machos desse predador apresentou coloração vermelha e testículos com seis folículos. Machos (16 B. tabidus, com 15 dias de idade, foram mais pesados que com 21 dias em todos os tratamentos, exceto quando receberam, apenas, pupas (16 T. molitor. 0 total de proteína na hemolinfa (15,58 ug/uL) de machos não foi afetado pela idade desse predador e pela dieta. Machos, com 15 dias de idade, tiveram testículos maiores com E. cloeziana (0,94 mmz), E. urophylla (0,98 mmz) ou, apenas, pupas (16 T. molitor (0,99 mmz) que com goiabeira (0,76 mmz). No entanto, com 21 dias de idade, B. tabidus apresentou testículos com tamanho semelhante com todas as dietas. Os foliculos (16 B. tabidus exibiram grande quantidade de espermatozóides com todas as dietas e idades comprovando que o processo de espermatogênese foi completado. Os testículos desse predador mostraram características histológicas semelhantes com todas as dietas. Fêmeas e machos adultos (16 B. tabidus apresentaram trofócitos duas vezes maiores com E. urophylla e T. molitor que nas demais dietas. Esses trofócitos, em cada sexo, foram morfologicamente semelhantes em todas as dietas e idades. Os testes histoquímicos com mercúrio bromofenol e PAS, para evidenciar proteínas totais e carboidratos, respectivamente, no corpo gorduroso de fêmeas e machos (16 B. tabidus mostraram pouca coloração dos materiais biológicos com todas as dietas e idades. Isto indica quantidade reduzida de proteína e carboidratos no corpo gorduroso de ambos os sexos (16 B. tabidus. Fêmeas (16 B. tabidus, criadas em E. grandis no campo, apresentaram longevidade de 160, 20 dias e média de 601,10 ovos cada uma. A taxa bruta (TBR) e líquida (Ro) de reprodução foram de 216,72 6 75,81 fêmeas por fêmea, respectivamente; a duração de uma geração (DG) de 146,05 dias e o tempo para a população dobrar de tamanho (DT) de 23,39 dias; A taxa intrinseca de aumento populacional (rm) foi de 0,030 e o incremento populacional (k) de 1,030 progênies fêmeas por fêmea. A população de B. tabidus aumentou em 33,36 fêmeas por fêmea por geração. Esse predador apresenta potencial para ser utilizado em programas de manejo de pragas desfolhadoras no Brasil e deve ser criado em plantas de eucalipto no campo. / This research studied the effect of different diets [Tenebrio molitor L. (Coleoptera: Tenebrionidae) pupae without plants; T. molitor pupae and plants of Eucalyptus cloeziana; T. molitor pupae and plants of Eucalyptus urophylla and; T. molitor pupae and guava plants (Psiclium guajava)], in the field on morpho-physiological aspects of the fat body and the reproductive system of females and males of Brontocoris tabidus (Signoret) (Heteroptera: Pentatomidae). The fecundity and the parameters of life and fertility tables of this predator were also studied on Eucalyptus grandis plants in the field. The internal parts of the genitalia of females of this predator present yellowish color with ovary of the meroistic telotrofic type with seven ovariolos. The total protein in the hemolymph (25.89 ug/uL) of females of B. tabidus does not depend on the age and diet. Females of this predator fed with T molitor pupae without plants presented smaller ovariolos. The number of oocytes/ovary was higher for females of this predator fed with E. urophylla and T molitor pupae and smaller without plant. Twenty-one days old females of B. tabidus showed higher number of oocytes/ovariole (5.13 oocytes) than those with 15 days (4.54 oocytes) with all diets. Females of this predator, with 15 days old, presented more developed oocytes with E. cloeziana (1.58 mm) and E. urophylla (1.62 mm) than with guava plant (1.35 mm) or T. molitor pupae without plants (1.23 mm). B. tabidus females with 21 days old had smaller oocytes without plants. The length of ovocytes was not affected by the age of females of this predator with eucalyptus plants. The ovaries of B. tabidus presented similar histological characteristics with all diets. The internal genitalia of males of this predator showed red color and testicles with six follicles. Males of B. tabidus, with 15 days old, were heavier than those with 21 days in all treatments except when they received only T. molitor pupae. The total protein in the hemolymph (15.58 ug/uL) of males of this predator was not affected by the age and diet. Fifteen days old males presented larger testicles with E. cloeziana (0.94 mm2), E. urophylla (0.98 mmz) or, only, T. molitor pupae (0.99 mm2) than with guava plants (0.76 mmz). Males of B. tabidus with 21 days old showed testicles with similar size with all diets. The follicles of B. tabidus presented large quantity of spermatozoids with all diets and ages what shows that the spermatogenesis process was completed. The testicles of this predator showed similar histological characteristics with all diets. Female and male adults of B. tabidus had trophocytes twice larger with E. urophylla and T. molitor than with the other diets. These trophocytes presented similar morphological aspects in the same sex with all diets and ages. The histochemical tests bromofenol mercury and PAS evidenced the total proteins and carbohydrates, respectively, in the fat body of females and males of B. tabidus with low coloration of the biological materials with all diets and age. This indicates a reduced quantity of protein and carbohydrates in the fat body of both sexes of B. tabidus. Females of B. tabidus reared with E. grandis in the field presented longevity of 160.20 days and 601.10 eggs each one. The gross (GRR) and net (Ro) reproductive rates were 216.72 and 75.81 females perfemale, respectively; the duration of a generation (T) was 146.05 days and the time for the population to double in size (DT) 23.39 days; the intrinsic rate of population increase (rm) was 0.030 and the population increment (X) 1030 female progenies per female. The population of B. tabidus increased in 33.36 females per female per generation. This predator presents potential to be used in programs of integrated pest management of eucalyptus defoliators in Brazil and it should be reared in these plants on field conditions.
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