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Recherche de biomarqueurs protéiques dans le but de réaliser une classification moléculaire des gliomes : étude GLIOMIC / Determination of proteomic biomarkers in order to achieve a molecular classification : the GLIOMIC study

Le Rhun, Émilie 24 April 2017 (has links)
L’incidence des gliomes est estimée à 6.6 pour 100 000 habitants. Les survies varient selon le sous-type de gliomes, avec des taux de survie à 5 ans d’environ 48% pour les astrocytomes diffus selon la classification de l’Organisation Mondiale de la Santé (OMS), 28% pour les astrocytomes anaplasiques, 80% pour les oligodendrogliomes, 52% pour les oligodendrogliomes anaplasiques et 5% pour les glioblastomes, tumeurs cérébrales malignes les plus fréquentes.Une meilleure compréhension des mécanismes et de la biologie de ces tumeurs et de nouvelles pistes thérapeutiques sont essentielles afin d’identifier de nouvelles thérapies pouvant améliorer le pronostic des patients. La classification OMS 2016 des tumeurs du système nerveux central a, pour la première fois, intégré les données de biologie moléculaires aux données histopathologiques, afin d’améliorer la distinction des différents sous-groupes de tumeurs et d’orienter au mieux les choix thérapeutiques pour chaque sous-groupe.Nous nous sommes intéressés dans ce travail à l’apport de l’approche en protéomique par imagerie par matrix-assisted laser desorption/ionization spectrométrie de masse MALDI (MALDI-MSI) couplée à l’analyse en microprotéomique dans les gliomes dans le cadre de l’étude clinique GLIOMIC (NCT02473484) qui a pour but de réaliser une classification moléculaire des gliomes en intégrant les données cliniques et celles obtenues par ces nouvelles approches.La faisabilité de la technique a d’abord été validée sur une série de gliomes anaplasiques. Dans cette première analyse, nous avons pu démontrer que, bien que l’approche protéomique confirmait également l’hétérogénéité tumorale, les analyses histologiques et protéomiques divergent et apportent des informations complémentaires. L’imagerie moléculaire protéomique a mis en évidence trois différents groupes d’expression de protéines : un groupe de protéines associé au cancer, un groupe de protéines impliquées dans l’inflammation et un groupe de protéines impliquées dans la différentiation des cellules nerveuses et la croissance des neurites.Nous nous sommes ensuite intéressés aux glioblastomes. Les premiers résultats ont également confirmés l’existence des 3 régions d’intérêt définies sur le plan moléculaires, apportant de nouvelles informations par rapport aux données histopathologiques. Ces résultats doivent être confirmés dans une cohorte plus large de patients.En conclusion, l’intégration de ces biomarqueurs protéomiques, aux données cliniques, histopathologiques et de biologie moléculaire, pourrait permettre d’améliorer les connaissances sur les gliomes, leur classification et l’identification de nouvelles cibles thérapeutiques potentielles. / The annual incidence of gliomas is estimated at 6.6 per 100,000. Suvival varies profoundly by type of glioma, with 5-year survival rates of 48% for World Health Organization (WHO) grade II diffuse astrocytoma, 28% for WHO grade III anaplastic astrocytomas, 80% for WHO grade II oligodendroglioma, 52% for WHO grade III anaplastic oligodendroglioma and 5% for WHO grade IV glioblastoma, the most frequent primary malignant brain tumor. A better understanding of the molecular pathogenesis and the biology of these tumors is required to design better therapies which can ultimately improve the prognosis of patients. The WHO 2016 classification of central nervous system tumors has for the first time integrated molecular data with the histopathological data, in order to improve the classification of the different subgroups of central nervous system tumors and to allow to derive more specific therapeutic strategies for each of the different subgroups.In the present work, we aimed at evaluating the value of a proteomic approach using matrix-assisted laser desorption/ionization (MALDI) mass spectrometry coupled with microproteomic analysis in gliomas through the GLIOMIC clinical study (NCT02473484), we aimed at obtaining a molecular classification of glioblastomas by integrating clinical data to the ones obtained by such technologies. The feasibility of this approach was first demonstrated in a cohort of anaplastic gliomas. In this first analysis, we showed that although proteomic analysis confirmed the heterogeneity of brain tumors already observed with the histological analysis, the two approaches may lead to different and complementary information. Three different groups of proteins of interest were identified: one involved in neoplasia, one related to glioma with inflammation, and one involved neurogenesis. Then, analyses of glioblastomas confirmed the three proteomic patterns of interest already observed in the anaplastic gliomas, which represents new information as compared to histopathological analysis alone. These results have to be confirmed in a larger cohort of patients.We conclude that MALDI mass spectrometry coupled with microproteomic analysis may provide new diagnostic information and may aid in the identification of new biomarkers. The integration of these proteomic biomarkers into the clinical data, histopathological data and data from molecular biology may improve the knowledge on gliomas, their classification and development of new targeted therapies.
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Diabetes mellitus gestacional : alterações histopatológicas em placentas humanas / Gestational diabetes mellitus : histopathological changes in human placentas

Santos, José Ronaldo Alves dos 31 October 2016 (has links)
Diabetes Mellitus is a problem of global public health. It is estimated that there are over 171 million people with diabetes worldwide, and projections of the World Health Organization for 2030 suggest that the number could reach 366 million people. Thus, the aim of this study was to determine the histopathological changes in human placentas, and to describe the clinical conditions of parturien-tes diagnosed with or without Gestational Diabetes Mellitus and their newborns, there was therefore a histopathology and descriptive, pregnant women (n = 16 / group) met the authorized period from June 2015 to February 2016 at the Maternity Our Lady of Lourdes. Placentas of microscopy analysis was performed derived from pregnant women in normal placentas and conditions of pregnant women in hyperglycemic conditions, as well as analyzed the clinical conditions of these mothers. Among the maternal variables, the average weight of pregnant women showed different about the normoglycemic (73.0 kg ± 16.5) and gestational diabetes (79.0 kg ± 16.8). The mean gestational weeks showed different groups, (37,7 ± 3,37 weeks) for the group and normoglycemic (36,6 ± 1,62 weeks) for parturrientes gestational diabetes. When analyzing fetal variables, height of newborns showed different about the normoglycemic patients (49.0 cm ± 2.40) and gestational diabetes 45.8 cm ± 5.08), followed by thoracic perimeter , which was observed in normoglycemic (34.0 ± 1.69 cm) and the gestational diabetes (32.6 cm ± 1.16) respectively. It was found by assessing placental var-iables as the size of the placenta normoglycemic pregnant women was significantly higher (64.3 cm ± 9.53) when compared to gestational diabetic women (60.3 ± 11.3 cm). It was also observed as compared to the weight of the placentas of normoglycemic mothers (0.74 g ± 0.11) when compared to gestational diabetes (0.64 ± 0.16 g). The histopathological analysis showed that there was blades structural differences between the normoglycemic groups and gestational di-abetes. Having been observed that for the groups obtained in the period of 9 months were certain significant relationships between some variables, it suggests the continuity of research for a long time with more mothers to be able to relate more strikingly related factors placental changes influenced by hyperglycaemia and the pathogenesis of the disease and its relationship with maternal-fetal aggravating. / O Diabetes Mellitus é um problema de saúde pública mundial. Estima-se que existam mais de 171 milhões de pessoas com diabetes no mundo, sendo que projeções da Organização Mundial de Saúde para 2030 sugerem que esse número possa chegar a 366 milhões de pessoas. Pesquisas tem demonstrado que o Diabetes Mellitus Gestacional, pode propiciar ou agravar alterações patológicas, com possibilidades de interferir no equilíbrio sistêmico tanto da gestante quanto do feto e que os danos na placenta podem ser responsáveis por complicações materno-fetais. Sendo assim, o objetivo deste estudo foi determinar as alterações histopatológicas em placentas humanas, bem como descrever às condições clínicas de parturientes diagnosticadas com ou sem Diabetes Mellitus Gestacional e seus respectivos recém-nascidos, realizou-se, portanto, um estudo histopatológico e descritivo, de gestantes (n=16/grupo) atendidas no período autorizado de junho de 2015 a fevereiro de 2016 na Maternidade Nossa Senhora de Lourdes. Foi realizada analise microscópia de placentas oriundas de gestantes em condições normais e placentas de gestantes em condições hiperglicêmicas, bem como analisado as con-dições clínicas dessas parturientes. Entre as variáveis maternas, a média do peso das parturientes se mostrou diferente em relação as normoglicêmicas (73,0 kg ± 16,5) e as diabeticas gestacionais (79,0 kg ± 16,8). A média de semanas gestacionais mostrou-se diferentes em grupos, (37,7 semanas ± 3,37) para o grupo normoglicemicos e (36,6 semanas ± 1,62) para as parturrientes diabéticas gestacionais. Ao analisar-se as variáveis fetais, a estatura média dos recém-nascidos se mostrou diferente em relação as pacientes normoglicêmicas (49,0 cm ± 2,40) e as diabéticas gestacionais 45,8 cm ± 5,08), seguido da média do perímetro torácico, no qual observou-se nas normoglicêmicas (34,0 cm ± 1,69) e nas diabéticas gestacionais (32,6 cm ± 1,16) respectivamente. Constatou-se ao avaliar as variáveis placentárias que o tamanho da placenta das parturientes normoglicêmicas foi significativamente maior (64,3 cm ± 9,53) quando comparado a gestantes diabéticas gestacionais (60,3 cm ± 11,3). Observou-se ainda relação quanto á média do peso das placentas das parturientes normoglicêmicas (0,74 g ± 0,11) quando comparado as diabéticas gestacionais (0,64 g ± 0,16). As análises das lâminas histopatológicas demonstraram que houve diferenças estruturais entre os grupos normoglicêmicos e diabetes gestacional. Havendo-se observado que para os grupos obtidos no período de 9 meses, foram determinadas relações significativas entre algumas variáveis, sugere-se a continuidade da investigação por tempo prolongado com maior número de parturientes de modo a poder-se relacionar mais contundentemente os fatores relacionados ás alterações placentárias influenciadas pela hiperglicêmia e a patogênese da doença e a sua relação com os agravantes materno-fetais.
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Atuação de ácido \'beta\'-naftoxiacético, ácido indolbutírico e ácido giberélico na morfogênese de microplantas de abacaxizeiro \"Gomo-de-Mel\" / \'beta\'-Naftoxiacetic acid, indolbutyric acid and acid giberelic action in the pineapple microplants gomo de mel morphogenesis.

Maysa Carvalho Barbosa 26 February 2010 (has links)
Visando avaliar a atuação dos biorreguladores beta-NOA, AIB e GA3 na morfogênese de microplantas de abacaxi Ananas comosus L. (Merrill) cultivar IAC Gomo-de-Mel estabeleceu-se um experimento com a presença isolada e/ou combinada dos respectivos biorreguladores ao meio de cultura MS. As microplantas foram mantidas em condições de cultura in vitro, com temperatura, luminosidade e fotoperíodo controlados (25 ± 2 C, irradiância de 42 µmol.m-2s-1 e 16 horas, respectivamente) durante 3 meses. Os resultados obtidos com a análise de variância evidenciaram que houve interação do biorregulador de crescimento e o tempo de cultivo para a altura, número de raiz e número de folhas. O beta-NOA induziu a rizogênese foliar nas microplantas a partir de células da bainha do feixe vascular e não apresentou toxicidade nas concentrações utilizadas, ao passo que o AIB mostrou-se mais eficaz para a indução da rizogênese adventícia caulinar. Em relação ao crescimento das microplantas, a ação tanto isolada, como combinada em ambas as concentrações avaliadas de GA3 foram mais eficientes. As análises histológicas evidenciaram alterações no número de estratos da epiderme, hipoderme e mesofilo das folhas cultivadas nos tratamentos com biorreguladores, porém não se verificou alterações citológicas em nenhum dos tratamentos. Acredita-se que a utilização de pulsing seja uma alternativa eficaz para a rizogênese e crescimento em altura das microplantas de abacaxizeiro Gomo-de-mel. / In order to evaluate the action of bioregulators beta-NOA, IBA and GA3 in the pineapple Ananas comosus L. (Merril) cultivar IAC gomo-de-mel microplants morphogenesis an experiment was stablished in order to the presence of the bioregulator alone and in combinations. The microplants were kept in culture in vitro conditions, during 3 months under controlled temperature, light and photoperiod (25 ± 2 C, irradiance de 42 µmol.m- 2s-1 e 16 hours). The analysis of variance showed the interaction interaction between the use of bioregulator and the period of cultivation on hight, number of roots and leaves. The beta-NOA induced leaf rhizogensis in the microplants from the bundle sheath and there was no sign of toxicity with the used concentrations. The IBA showed to be more effective in the adventicious steam rhizogenesis. The isolated and combinated actions of GA3 were the most effective treatment to microplants growing. The histological analysis showed alterations on the epidermis, hypodermis and mesophyll number of layers of the cultivated leaves with this bioregulator, but neither of the treatments showed citological alterations. It is believed that the use of pulsing would be an effective alternative for the rhizogenesis and growing of the gomo de mel pineapple microplants.
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Uso de osso alógeno córtico-medular fresco congelado em bloco para aumento posterior de mandíbula atrófica: estudo clínico, histológico e histomorfométrico em humanos / Cortico-cancellous fresh frozen allografts bone blocks for augmentation of atrophic posterior mandible: clinical, histological and histomorfometric study in humans

Dias, Rafael Rodrigues 30 May 2014 (has links)
Rebordos residuais atróficos em região posterior da mandíbula são um desafio clínico para a instalação de implantes. Dentre as várias técnicas utilizadas para resolver este desafio, o enxerto onlay de osso autógeno - geralmente coletado da crista ilíaca -, enxertos interposicionais, distração óssea e lateralização do nervo alveolar inferior são os mais executados. Entretanto, referidas técnicas expuseram desvantagens, tais como a morbidade, aumento do tempo de cirurgia e custos. Como alternativa, o uso de enxerto alógeno pode ser considerado, uma vez que existem inúmeras vantagens, como na redução do tempo cirúrgico, grande disponibilidade óssea e diminuição significativa da morbidade. O presente estudo trata da avaliação de forma clínica, histológica e histomorfométrica de enxerto de osso alógeno fresco congelado no aumento ósseo da região posterior mandibular, permitindo, dessa forma, a instalação de implantes dentários. Dezesseis hemi-mandíbulas de 12 pacientes (4 pacientes tratados bilateralmente) demonstrando atrofia alveolar crítica eram tridimensionalmente reconstruídas por meio de enxertos alógenos de blocos ósseos frescos congelados córtico-medulares provenientes da epífise distal do fêmur. Um total de 30 blocos foram fixados com parafusos de titânio de 1,5mm, cobertos com osso bovino mineral e membrana de colágeno. Após seis meses, procedeu-se a instalação dos implantes e biópsias ósseas, colhidas através de trefinas e enviadas para análise histológica e histomorfométrica . Na sequência incluíram-se amostras de osso em parafina, preparadas com hematoxilina e eosina ou, em resina para usar uma técnica de corte de trefinas, com vermelho de alizarina e coloração com azul de Stevenel. Realizaram-se tomografias computadorizadas de feixe cônico logo após o procedimento de enxerto ósseo e no pós-operatório de 6 meses, anteriormente à colocação do implante (6 meses após a enxertia). Os implantes dentários foram observados até a reabilitação protética. Foram utilizados os testes estatísticos de Kruskal-Wallis e pós-teste Tukey. Distribuiram-se os blocos entre 9 pacientes do sexo feminino e três do sexo masculino, com idade entre 37 e 64 anos (média de 50,9 ± 8,3 anos). Cada hemi-mandíbula recebeu de 1 a 3 blocos (1,9 ± 0,7 blocos), sob anestesia local. O ganho ósseo em espessura pós operatória imediata foi de 6,3 ±1,4 mm e tardia de 4,5 ± 1,3mm, em altura o ganho pós operatório imediato foi de 4,8 ± 1.6mm e tardio de 2,6mm ± 2mm. Quatro blocos demonstraram pequena deiscência da ferida 15-21 dias após a cirurgia, tratados com a remoção de necrose dos tecidos moles seguido de terapia tópica com bochecho de clorexidina 0,12% e clorexidina gel 2% duas vezes ao dia, até o fechamento total. Um total de 30 implantes foi instalado com acompanhamento de 15 à 28 meses (19,8 ± 4 meses). No decorrer do primeiro ano perdeu-se apenas um implante. A taxa de sobrevivência dos implantes foi de 96,66%. Por sua vez, exames de histologia exibiram osso neoformado em contato com o osso residual do enxerto alógeno, e tecido conjuntivo. Não houveram evidências de infiltrado inflamatório. A análise histomorfométrica mostrou 18,9 ± 8,1 % de osso neoformado, 32,5 ± 14,8% de enxerto ósseo alógeno residual e 48,6 ± 14,9% de tecido conjuntivo. Os enxertos alógenos frescos congelados em blocos se comportaram como um arcabouço para osteocondução e permitiram neoformação óssea adequada. Ele pode ser considerado uma alternativa viável para a reconstrução de rebordos residuais mandíbulares atróficos na região posterior, permitindo a instalação de implantes e reabilitação protética funcional. / Residual bone ridge atrophy in the posterior mandible is a clinical challenge for dental implants placement. Among several techniques used to solve this situation, onlay autogenous bone graft usually harvested from the iliac crest, interposicional grafts, bone distraction and nerve lateralization are the most performed. However these techniques present some disadvantages such as morbidity, increased surgical time and costs. As an alternative, the use of allograft can be considered. There are advantages such as reduction of surgical time, lots quantity of bone and decreased morbidity. The aim of present the study was to evaluate clinical, histological an histomorphometrical aspects of fresh frozen bone allograft used to augment atrophic posterior mandible bone ridges to allow placement of dental implants. Sixteen hemi-mandibles of 12 patients (4 patients treated bilaterally) presenting critical alveolar atrophy were three-dimensionally reconstructed using cortico-cancellous fresh frozen allograft bone blocks deriving from distal femoral head. A total of 30 blocks were fixed with titanium 1.5mm screws and covered with particulate bovine bone mineral and collagen membrane. After six months, implants were inserted and bone biopsies were harvested and sent for histological and histomorphometric analysis. Bone samples were either embedded in paraffin, prepared for hematoxylin and eosin staining procedure or in resin to use a sawing and grinding technique, prepared for alizarin red and Stevenel\'s blue staining. Computed cone beam tomography scans were taken both at immediate postoperative bone grafting and previously to implant placement (6 months after grafting). Dental implants were observed after prosthetic rehabilitation. Kruskal-Wallis and post test Tukey statistical tests were used. Thirty blocks were distributed between 9 female and 3 male patients, aged between 37 and 64 years (mean 50.9 ± 8.3 years). Each hemi-mandibles received 1 to 3 blocks (1,9 ± 0,7 blocks) under local anesthesia. The immediate postoperative thickness bone gain s was 6.3 ± 1.4 mm and of 4.5 ± 1.3 mm 6 months after grafting. Post-operative bone height gain was 4.8 ± 1.6 mm and 2.6 ± 2 mm at 6 months. Four blocks presented small wound dehiscence 15 to 21 days after surgery, treated with necrotic soft tissue removal followed by chlorhexidine 0.12% irrigation, and local gel 2% twice a until total closure. A total of 30 implants were installed with follow-up from 15 to 28 months (mean 19,8 ± 4 months) . One implant was lost within the first year. Implant survival rate was 96.66%. Histology demonstrates newly formed vital bone in contact to residual acellular allograft bone, and connective tissue. There was no evidence of inflammatory infiltrate. The histomorphometric analysis showed 18,9 ± 8,1 % of newly formed bone, 32,5 ± 14,8 % allograft residual bone and 48,6 ± 14,9 % of connective tissue. The fresh frozen allografts behaved as a scaffold for osseoconductivity and allowed proper bone formation. It can be considered a viable alternative for reconstruction of atrophied mandible in the posterior region, allowing the installation of implants and functional loading
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Uso de osso alógeno córtico-medular fresco congelado em bloco para aumento posterior de mandíbula atrófica: estudo clínico, histológico e histomorfométrico em humanos / Cortico-cancellous fresh frozen allografts bone blocks for augmentation of atrophic posterior mandible: clinical, histological and histomorfometric study in humans

Rafael Rodrigues Dias 30 May 2014 (has links)
Rebordos residuais atróficos em região posterior da mandíbula são um desafio clínico para a instalação de implantes. Dentre as várias técnicas utilizadas para resolver este desafio, o enxerto onlay de osso autógeno - geralmente coletado da crista ilíaca -, enxertos interposicionais, distração óssea e lateralização do nervo alveolar inferior são os mais executados. Entretanto, referidas técnicas expuseram desvantagens, tais como a morbidade, aumento do tempo de cirurgia e custos. Como alternativa, o uso de enxerto alógeno pode ser considerado, uma vez que existem inúmeras vantagens, como na redução do tempo cirúrgico, grande disponibilidade óssea e diminuição significativa da morbidade. O presente estudo trata da avaliação de forma clínica, histológica e histomorfométrica de enxerto de osso alógeno fresco congelado no aumento ósseo da região posterior mandibular, permitindo, dessa forma, a instalação de implantes dentários. Dezesseis hemi-mandíbulas de 12 pacientes (4 pacientes tratados bilateralmente) demonstrando atrofia alveolar crítica eram tridimensionalmente reconstruídas por meio de enxertos alógenos de blocos ósseos frescos congelados córtico-medulares provenientes da epífise distal do fêmur. Um total de 30 blocos foram fixados com parafusos de titânio de 1,5mm, cobertos com osso bovino mineral e membrana de colágeno. Após seis meses, procedeu-se a instalação dos implantes e biópsias ósseas, colhidas através de trefinas e enviadas para análise histológica e histomorfométrica . Na sequência incluíram-se amostras de osso em parafina, preparadas com hematoxilina e eosina ou, em resina para usar uma técnica de corte de trefinas, com vermelho de alizarina e coloração com azul de Stevenel. Realizaram-se tomografias computadorizadas de feixe cônico logo após o procedimento de enxerto ósseo e no pós-operatório de 6 meses, anteriormente à colocação do implante (6 meses após a enxertia). Os implantes dentários foram observados até a reabilitação protética. Foram utilizados os testes estatísticos de Kruskal-Wallis e pós-teste Tukey. Distribuiram-se os blocos entre 9 pacientes do sexo feminino e três do sexo masculino, com idade entre 37 e 64 anos (média de 50,9 ± 8,3 anos). Cada hemi-mandíbula recebeu de 1 a 3 blocos (1,9 ± 0,7 blocos), sob anestesia local. O ganho ósseo em espessura pós operatória imediata foi de 6,3 ±1,4 mm e tardia de 4,5 ± 1,3mm, em altura o ganho pós operatório imediato foi de 4,8 ± 1.6mm e tardio de 2,6mm ± 2mm. Quatro blocos demonstraram pequena deiscência da ferida 15-21 dias após a cirurgia, tratados com a remoção de necrose dos tecidos moles seguido de terapia tópica com bochecho de clorexidina 0,12% e clorexidina gel 2% duas vezes ao dia, até o fechamento total. Um total de 30 implantes foi instalado com acompanhamento de 15 à 28 meses (19,8 ± 4 meses). No decorrer do primeiro ano perdeu-se apenas um implante. A taxa de sobrevivência dos implantes foi de 96,66%. Por sua vez, exames de histologia exibiram osso neoformado em contato com o osso residual do enxerto alógeno, e tecido conjuntivo. Não houveram evidências de infiltrado inflamatório. A análise histomorfométrica mostrou 18,9 ± 8,1 % de osso neoformado, 32,5 ± 14,8% de enxerto ósseo alógeno residual e 48,6 ± 14,9% de tecido conjuntivo. Os enxertos alógenos frescos congelados em blocos se comportaram como um arcabouço para osteocondução e permitiram neoformação óssea adequada. Ele pode ser considerado uma alternativa viável para a reconstrução de rebordos residuais mandíbulares atróficos na região posterior, permitindo a instalação de implantes e reabilitação protética funcional. / Residual bone ridge atrophy in the posterior mandible is a clinical challenge for dental implants placement. Among several techniques used to solve this situation, onlay autogenous bone graft usually harvested from the iliac crest, interposicional grafts, bone distraction and nerve lateralization are the most performed. However these techniques present some disadvantages such as morbidity, increased surgical time and costs. As an alternative, the use of allograft can be considered. There are advantages such as reduction of surgical time, lots quantity of bone and decreased morbidity. The aim of present the study was to evaluate clinical, histological an histomorphometrical aspects of fresh frozen bone allograft used to augment atrophic posterior mandible bone ridges to allow placement of dental implants. Sixteen hemi-mandibles of 12 patients (4 patients treated bilaterally) presenting critical alveolar atrophy were three-dimensionally reconstructed using cortico-cancellous fresh frozen allograft bone blocks deriving from distal femoral head. A total of 30 blocks were fixed with titanium 1.5mm screws and covered with particulate bovine bone mineral and collagen membrane. After six months, implants were inserted and bone biopsies were harvested and sent for histological and histomorphometric analysis. Bone samples were either embedded in paraffin, prepared for hematoxylin and eosin staining procedure or in resin to use a sawing and grinding technique, prepared for alizarin red and Stevenel\'s blue staining. Computed cone beam tomography scans were taken both at immediate postoperative bone grafting and previously to implant placement (6 months after grafting). Dental implants were observed after prosthetic rehabilitation. Kruskal-Wallis and post test Tukey statistical tests were used. Thirty blocks were distributed between 9 female and 3 male patients, aged between 37 and 64 years (mean 50.9 ± 8.3 years). Each hemi-mandibles received 1 to 3 blocks (1,9 ± 0,7 blocks) under local anesthesia. The immediate postoperative thickness bone gain s was 6.3 ± 1.4 mm and of 4.5 ± 1.3 mm 6 months after grafting. Post-operative bone height gain was 4.8 ± 1.6 mm and 2.6 ± 2 mm at 6 months. Four blocks presented small wound dehiscence 15 to 21 days after surgery, treated with necrotic soft tissue removal followed by chlorhexidine 0.12% irrigation, and local gel 2% twice a until total closure. A total of 30 implants were installed with follow-up from 15 to 28 months (mean 19,8 ± 4 months) . One implant was lost within the first year. Implant survival rate was 96.66%. Histology demonstrates newly formed vital bone in contact to residual acellular allograft bone, and connective tissue. There was no evidence of inflammatory infiltrate. The histomorphometric analysis showed 18,9 ± 8,1 % of newly formed bone, 32,5 ± 14,8 % allograft residual bone and 48,6 ± 14,9 % of connective tissue. The fresh frozen allografts behaved as a scaffold for osseoconductivity and allowed proper bone formation. It can be considered a viable alternative for reconstruction of atrophied mandible in the posterior region, allowing the installation of implants and functional loading
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Efeito da heparina de baixo peso molecular na perda óssea alveolar em ratos Wistar machos : análises morfométrica e histológica / Effects of low molecular weight heparin on alveolar bone loss in wistar rats: Morphometricand histological analyses

Rivera Oballe, Harry Juan January 2017 (has links)
O objetivo da presente tese foi avaliar os efeitos da heparina de baixo peso molecular (HBPM) na perda óssea alveolar em ratos Wistar. Para a melhor compreensão e entendimento dos efeitos da HBPM se elaborou um único artigo com 40 ratos machos da linhagem Wistar de 60 dias de nascidos, os quais foram dívidos em 4 grupos experimentais previamente randomizados: Grupo Controle (C), Grupos Doença Periodontal (DP), Grupo Heparina (Hp) e Grupo Heparina+Doença Periodontal (Hp+DP) com um período experimental de 60 dias. Um animal foi perdido no período de aclimação, dois animais foram perdidos na primeira de três coletas sanguíneas pré-programadas e um rato foi perdido na colocação da ligadura. Os resultados observados foram analisados são perda óssea alveolar induzida onde houve diferença significava entre os grupos (C) e (DP), entre o grupo (C) e (Hp+DP), entre o grupo (DP) e (Hp) e o grupo (Hp) e (Hp+DP). Foi avaliado perda óssea alveolar não induzida onde não existiu diferença entre os grupos. Foi avaliado o peso do início ao final do período experimental. Foram avaliados o consumo de ração e agua onde não houve diferença significativa entre os grupos. Foram avaliados o número de megacariócitos nos fémures, onde também não existiram diferenças estatísticas. Foram avaliados números de adipócitos no timo, não havendo diferença significativa entre os grupos. Foram avaliados as plaquetas e desvio padrão onde não existiu diferença significativa entre os grupos. Foram avaliados os leucócitos e desvio padrão onde não houve diferença significativa entre os grupos. Posteriormente foi avaliado a porcentagem de linfócitos onde se achou diferença estatisticamente significativa na segunda coleta sanguínea entre o grupo (C) e grupo (Hp+DP) e grupo (Hp) e grupo (Hp+DP). Foi assim que as conclusões deste trabalho foram que o presente estudo mostrou que a HBPM não foi capaz de produzir perda óssea alveolar nos ratos Wistar, mas foi capaz de aumentar a quantidade de leucócitos e linfócitos, indicando a presença de um processo inflamatório. / In order to better understand and understand the effects of (LMWH), a single article was elaborated with 40 male rats of the 60 day old Wistar line, which were divided into four previously randomized experimental groups: Control Group (C), Groups Periodontal Disease (PD), Heparin Group (Hp) and Heparin Group + Periodontal Disease (Hp + PD) with an experimental period of 60 days. One animal was lost in the acclimation period, two animals were lost in the first of three preprogrammed blood collections and one mouse was lost in the ligation placement. The observed results were analyzed for induced alveolar bone loss where there was significant difference between groups (C) and (PD), between group (C) and (Hp + PD), between (PD) and (Hp) group and Group (Hp) and (Hp + PD). Uninduced alveolar bone loss was assessed where there was no difference between the groups. The weight of the onset at the end of the experimental period was evaluated. The ration and water consumption were evaluated where there was no significant difference between the groups. The number of megakaryocytes in the femurs was evaluated, in which there were also no statistical differences. Adipocyte numbers were evaluated in the thymus, with no significant difference between the groups. Platelets and standard deviation were evaluated where there was no significant difference between the groups. Leukocytes and standard deviation were evaluated where there was no significant difference between the groups. Later, the percentage of lymphocytes where a statistically significant difference was found in the second blood collection between group (C) and group (Hp + PD) and group (Hp) and group (Hp + PD) was evaluated. Thus the conclusions of this study were that the present study showed that LMWH was not able to produce alveolar bone loss in Wistar rats, but was able to increase the amount of leukocytes and lymphocytes, indicating the presence of a process inflammatory.
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Efeito da heparina de baixo peso molecular na perda óssea alveolar em ratos Wistar machos : análises morfométrica e histológica / Effects of low molecular weight heparin on alveolar bone loss in wistar rats: Morphometricand histological analyses

Rivera Oballe, Harry Juan January 2017 (has links)
O objetivo da presente tese foi avaliar os efeitos da heparina de baixo peso molecular (HBPM) na perda óssea alveolar em ratos Wistar. Para a melhor compreensão e entendimento dos efeitos da HBPM se elaborou um único artigo com 40 ratos machos da linhagem Wistar de 60 dias de nascidos, os quais foram dívidos em 4 grupos experimentais previamente randomizados: Grupo Controle (C), Grupos Doença Periodontal (DP), Grupo Heparina (Hp) e Grupo Heparina+Doença Periodontal (Hp+DP) com um período experimental de 60 dias. Um animal foi perdido no período de aclimação, dois animais foram perdidos na primeira de três coletas sanguíneas pré-programadas e um rato foi perdido na colocação da ligadura. Os resultados observados foram analisados são perda óssea alveolar induzida onde houve diferença significava entre os grupos (C) e (DP), entre o grupo (C) e (Hp+DP), entre o grupo (DP) e (Hp) e o grupo (Hp) e (Hp+DP). Foi avaliado perda óssea alveolar não induzida onde não existiu diferença entre os grupos. Foi avaliado o peso do início ao final do período experimental. Foram avaliados o consumo de ração e agua onde não houve diferença significativa entre os grupos. Foram avaliados o número de megacariócitos nos fémures, onde também não existiram diferenças estatísticas. Foram avaliados números de adipócitos no timo, não havendo diferença significativa entre os grupos. Foram avaliados as plaquetas e desvio padrão onde não existiu diferença significativa entre os grupos. Foram avaliados os leucócitos e desvio padrão onde não houve diferença significativa entre os grupos. Posteriormente foi avaliado a porcentagem de linfócitos onde se achou diferença estatisticamente significativa na segunda coleta sanguínea entre o grupo (C) e grupo (Hp+DP) e grupo (Hp) e grupo (Hp+DP). Foi assim que as conclusões deste trabalho foram que o presente estudo mostrou que a HBPM não foi capaz de produzir perda óssea alveolar nos ratos Wistar, mas foi capaz de aumentar a quantidade de leucócitos e linfócitos, indicando a presença de um processo inflamatório. / In order to better understand and understand the effects of (LMWH), a single article was elaborated with 40 male rats of the 60 day old Wistar line, which were divided into four previously randomized experimental groups: Control Group (C), Groups Periodontal Disease (PD), Heparin Group (Hp) and Heparin Group + Periodontal Disease (Hp + PD) with an experimental period of 60 days. One animal was lost in the acclimation period, two animals were lost in the first of three preprogrammed blood collections and one mouse was lost in the ligation placement. The observed results were analyzed for induced alveolar bone loss where there was significant difference between groups (C) and (PD), between group (C) and (Hp + PD), between (PD) and (Hp) group and Group (Hp) and (Hp + PD). Uninduced alveolar bone loss was assessed where there was no difference between the groups. The weight of the onset at the end of the experimental period was evaluated. The ration and water consumption were evaluated where there was no significant difference between the groups. The number of megakaryocytes in the femurs was evaluated, in which there were also no statistical differences. Adipocyte numbers were evaluated in the thymus, with no significant difference between the groups. Platelets and standard deviation were evaluated where there was no significant difference between the groups. Leukocytes and standard deviation were evaluated where there was no significant difference between the groups. Later, the percentage of lymphocytes where a statistically significant difference was found in the second blood collection between group (C) and group (Hp + PD) and group (Hp) and group (Hp + PD) was evaluated. Thus the conclusions of this study were that the present study showed that LMWH was not able to produce alveolar bone loss in Wistar rats, but was able to increase the amount of leukocytes and lymphocytes, indicating the presence of a process inflammatory.
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Efeito da heparina de baixo peso molecular na perda óssea alveolar em ratos Wistar machos : análises morfométrica e histológica / Effects of low molecular weight heparin on alveolar bone loss in wistar rats: Morphometricand histological analyses

Rivera Oballe, Harry Juan January 2017 (has links)
O objetivo da presente tese foi avaliar os efeitos da heparina de baixo peso molecular (HBPM) na perda óssea alveolar em ratos Wistar. Para a melhor compreensão e entendimento dos efeitos da HBPM se elaborou um único artigo com 40 ratos machos da linhagem Wistar de 60 dias de nascidos, os quais foram dívidos em 4 grupos experimentais previamente randomizados: Grupo Controle (C), Grupos Doença Periodontal (DP), Grupo Heparina (Hp) e Grupo Heparina+Doença Periodontal (Hp+DP) com um período experimental de 60 dias. Um animal foi perdido no período de aclimação, dois animais foram perdidos na primeira de três coletas sanguíneas pré-programadas e um rato foi perdido na colocação da ligadura. Os resultados observados foram analisados são perda óssea alveolar induzida onde houve diferença significava entre os grupos (C) e (DP), entre o grupo (C) e (Hp+DP), entre o grupo (DP) e (Hp) e o grupo (Hp) e (Hp+DP). Foi avaliado perda óssea alveolar não induzida onde não existiu diferença entre os grupos. Foi avaliado o peso do início ao final do período experimental. Foram avaliados o consumo de ração e agua onde não houve diferença significativa entre os grupos. Foram avaliados o número de megacariócitos nos fémures, onde também não existiram diferenças estatísticas. Foram avaliados números de adipócitos no timo, não havendo diferença significativa entre os grupos. Foram avaliados as plaquetas e desvio padrão onde não existiu diferença significativa entre os grupos. Foram avaliados os leucócitos e desvio padrão onde não houve diferença significativa entre os grupos. Posteriormente foi avaliado a porcentagem de linfócitos onde se achou diferença estatisticamente significativa na segunda coleta sanguínea entre o grupo (C) e grupo (Hp+DP) e grupo (Hp) e grupo (Hp+DP). Foi assim que as conclusões deste trabalho foram que o presente estudo mostrou que a HBPM não foi capaz de produzir perda óssea alveolar nos ratos Wistar, mas foi capaz de aumentar a quantidade de leucócitos e linfócitos, indicando a presença de um processo inflamatório. / In order to better understand and understand the effects of (LMWH), a single article was elaborated with 40 male rats of the 60 day old Wistar line, which were divided into four previously randomized experimental groups: Control Group (C), Groups Periodontal Disease (PD), Heparin Group (Hp) and Heparin Group + Periodontal Disease (Hp + PD) with an experimental period of 60 days. One animal was lost in the acclimation period, two animals were lost in the first of three preprogrammed blood collections and one mouse was lost in the ligation placement. The observed results were analyzed for induced alveolar bone loss where there was significant difference between groups (C) and (PD), between group (C) and (Hp + PD), between (PD) and (Hp) group and Group (Hp) and (Hp + PD). Uninduced alveolar bone loss was assessed where there was no difference between the groups. The weight of the onset at the end of the experimental period was evaluated. The ration and water consumption were evaluated where there was no significant difference between the groups. The number of megakaryocytes in the femurs was evaluated, in which there were also no statistical differences. Adipocyte numbers were evaluated in the thymus, with no significant difference between the groups. Platelets and standard deviation were evaluated where there was no significant difference between the groups. Leukocytes and standard deviation were evaluated where there was no significant difference between the groups. Later, the percentage of lymphocytes where a statistically significant difference was found in the second blood collection between group (C) and group (Hp + PD) and group (Hp) and group (Hp + PD) was evaluated. Thus the conclusions of this study were that the present study showed that LMWH was not able to produce alveolar bone loss in Wistar rats, but was able to increase the amount of leukocytes and lymphocytes, indicating the presence of a process inflammatory.
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Influência da associação da sinvastatina à matriz de osso desmineralizado bovino na reparação de defeitos ósseos em calvária de ratos

Carlos Eugenio Villaboim de Castro Lima 30 June 2008 (has links)
A reparação de defeitos ósseos é uma preocupação constante em diversas áreas da odontologia. Vários materiais são usados com a finalidade de ajudar e acelerar esta reparação, tais como enxertos autógenos, xenógenos, membranas e alguns medicamentos, assim como a associação de alguns destes métodos. A sinvastatina, medicamento utilizado para redução de colesterol, em alguns estudos, tem demonstrado ação na estimulação de formação óssea. O objetivo do presente estudo foi avaliar a influência da associação da sinvastatina à matriz desmineralizada de osso bovino na reparação de defeitos ósseos em calvária de ratos. Foram confeccionados defeitos ósseos na calvária de 48 ratos, sendo um defeito 5mm de diâmetro em cada parietal do animal. Os ratos foram divididos em três grupos de acordo com o material utilizado: grupo controle, que não recebeu nenhum tipo de substância, grupo sinvastatina-matriz óssea desmineralizada, que recebeu uma associação de sinvastatina e matriz desmineralizada de osso bovino e grupo matriz óssea desmineralizada que recebeu somente matriz desmineralizada de osso bovino como material de enxertia. Os sacrifícios foram realizados após trinta e sessenta dias. Após o sacrifício as calvárias foram radiografadas em aparelho de raios-X digital para análise de densidade radiográfica em tons de cinza e foram submetidas à preparação histológica de rotina, para posterior análise histológica descritiva e histométrica da área de matriz óssea neoformada, utilizando-se programa computacional para análise de imagens. Os dados submetidos à analise estatística ANOVA a 5% demonstraram que os animais que receberam a associação de sinvastatina-MODB apresentaram, na análise histométrica a menor área de neoformação e na análise radiográfica a menor densidade óssea. Concluiu-se, de acordo com a metodologia utilizada, que a associação sinvastatina-MODB influenciou negativamente o reparo ósseo. / Bone defect healing is a constant concern to several areas of Dentistry. A great variety of materials is currently used to help in the healing process as well as to speed it up. Materials such as autografts, xenografts, membranes, some drugs, and the association of some of them are being used. Simvastatin, a substance used to reduce cholesterol levels, has shown, in some studies, a capacity to stimulate bone formation. The purpose of the present experimental study is to evaluate the influence of the association of sinmvastatin with bovine demineralized bone matrix on the healing of bone defects in rats calvariae. Bone defects were produced in the calvariae of 48 rats, thus each animal had a defect in each parietal bone measuring 5mm of diameter. The rats were grouped according to the graft material used: the control group which didnt receive any substance; the simvastatin-demineralized bone matrix group which received an association of simvastatin and bovine demineralized bone matrix; and the demineralized bone matrix group which received bovine demineralized bone matrix. The animals were sacrificed after thirty or sixty days. After the sacrifices, digital radiographies were taken of the calvariae in order to analyse the radiographic density in shades of gray. They were also submitted to routine histological preparation for future descriptive histological and histomorfometric analyses of the new formed bone matrix through the use of a software to analyse the images. The data submitted to statistical analysis ANOVA (5%) showed that the animals which received the association simvastatin-demineralized bone matrix presented the smallest density and area of new bone formation of the three groups. According to the methodology used, we concluded that the association simvastatin demineralized bone matrix influenced negatively the bone healing.
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Particules de silicone dans la capsule péri-prothétique des implants mammaires : élaboration d’une nouvelle méthode de quantification basée sur l’histologie

Dziubek, Melvin 12 1900 (has links)
La pose d’implants mammaires est l’une des interventions chirurgicales les plus courantes en chirurgie plastique. Elle permet de reconstruire un sein après une mastectomie ou d’augmenter son volume pour améliorer le décolleté et la forme du sein. Depuis leur introduction dans les années 1960, les implants mammaires siliconés ont fait l’objet de multiples controverses et leur innocuité a pendant longtemps été questionnée. Ces dispositifs médicaux sont considérés comme sûr par la FDA mais ne sont pas pour autant exempts de complications. L’une d’entre elles, le silicone bleeding, se traduit par la migration de particules de silicone depuis le gel de l’implant vers la capsule péri-prothétique. Ces particules de silicone représentent une source potentielle d’inflammation chronique autour des implants mammaires dont les conséquences à long terme sur la santé des patientes ne sont pas claires. Bien que cette complication soit objectivée depuis les années 1970, il existe à l’heure actuelle peu de données sur la quantité de silicone qui est susceptible de migrer des implants mammaires. L’objectif principal de notre étude a été de quantifier les particules de silicone dans les capsules péri-prothétiques des implants mammaires en décrivant une nouvelle méthode de quantification basée sur une analyse histologique approfondie des spécimens de capsule. Les résultats préliminaires de notre étude ont permis de démontrer que des millions de particules de silicone peuvent diffuser dans la capsule péri-prothétique des implants mammaires siliconés et que l’ampleur du phénomène à tendance à croître avec la durée d’implantation. / The placement of breast implants is one of the most common surgical procedures in the field of plastic surgery. Although these medical devices are considered safe by the FDA, their use is not free of complications. One of these complications is silicone particle bleeding, or the migration of silicone particles from the breast implant into the peri-prosthetic capsule. These particles represent a potential source of chronic inflammation around breast implants, with unclear long-term consequences for patient health. Although this complication has been observed since the 1970s, there is currently very little data on the amount of silicone that is likely to migrate from breast implants. The primary objective of this study was to quantify silicone particles in the peri-prosthetic capsules of breast implants by describing a new method of quantification based on a thorough histological analysis of capsule specimens. Preliminary results of our study have shown that millions of silicone particles can diffuse into the periprosthetic capsule of silicone breast implants and that the amount of silicone particles tends to increase with the duration of implantation.

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