A galectina-1 (Gal-1) pertence a uma família de lectinas endógenas que reconhecem ß-galactosídeos e atuam em vários processos biológicos. A Gal-1 pode modular a resposta imunológica por vários mecanismos incluindo o controle da liberação de citocinas pró e anti-inflamatórias e o direcionamento dessa resposta para um padrão do tipo TH2. Apesar da Gal-1 participar de vários processos fisiopatológicos, na literatura não existe relatos sobre o papel dessa lectina em infecções fúngicas. O objetivo deste trabalho foi investigar o impacto biológico da Gal-1 no modelo experimental de histoplasmose murina. Os camundongos (Gal-1-/- e Gal-1+/+) foram inoculados, por via intratraqueal, com uma carga fúngica sub-letal (5x105 leveduras) e a sobrevida desses animais foi avaliada até o 30o dia de infecção. Considerando que o início da mortalidade dos animais ocorreu após duas semanas de infecção, as demais análises foram realizadas em amostras obtidas no 15o dia. O grau de disseminação do H. capsulatum foi analisado pela contagem do número de unidades formadoras de colônia, em partes de pulmões ou baços dos animais infectados. Os cortes de pulmões foram corados por hematoxilina eosina ou por prata (GMS), para investigação histopatológica e quantificação de neutrófilos ou fungos, respectivamente. Nos fluídos bronco-alveolares (BAL) foram realizadas contagens globais e diferenciais de leucócitos. As dosagens de citocinas e de prostagladina E2 foram feitas por ELISA, em homogeneizados de pulmões. A coloração por tetróxido de ósmio foi usada na avaliação da capacidade da Gal-1 de induzir ou modular a formação de corpúsculos lipídicos, in vitro, por componentes do fungo. Nos soros dos animais de experimentação foi determinada a concentração total de nitrito, como indicador da produção de óxido nítrico. A análise dos resultados de sobrevivência indicou que 100% dos animais Gal-1+/+ resistiram à infecção por H. capsulatum; ao contrário, apenas 33% dos animais Gal-1-/- sobreviveram. Os números médios de unidades formadoras de colônias recuperadas no pulmão e no baço de camundongos Gal-1-/- foram de 2,7 e 3,8 vezes maiores do que os obtidos de animais Gal-1+/+, respectivamente. De modo semelhante, os números médios de neutrófilos e fungos no pulmão de animais Gal-1-/-, foram superiores aos valores encontrados nos pulmões de animais grupo Gal-1+/+. Curiosamente, nos homogeneizados pulmonares dos e o dobro da concentração de nitrito total sérico. Além disso, nos homogeneizados de pulmão dos animais Gal-1desafiados com o fungo, detectou-se elevadas concentrações de citocinas do tipo T1 e inflamatórias (IFN-, IL-1 e IL-12) em comparação com amostras de animais selvagens. Em ensaios in vitro, esta lectina não foi capaz de induzir corpúsculos em células do lavado peritoneal de camundongos Gal-1e Gal-1, entretanto inibiu parcialmente a formação induzida por F1 e -glucana. Finalmente, sugerimos que a Gal-1 pode participar da montagem de uma resposta imunológica protetora contra o Histoplasma capsulatum, por modular a liberação de citocinas inflamatórias, síntese de eicosanóides, geração de óxido nitrito; e por controlar a migração e/ou as funções de leucócitos. Além disso, os dados obtidos desse trabalho poderão auxiliar no melhor entendimento da fisiopatologia da histoplasmose e no desenvolvimento de novas estratégias terapêuticas envolvendo o reconhecimento de carboidratos na resposta imunológica. / Galectin-1 (Gal-1) belongs an endogenous lectins family that recognizes -galactoside and participates of various biological activities. This lectin can modulate the innate and adaptative immune responses. Although, Gal-1 participates of various pathophysiological processes, in literature we did not find reports related to the participation of Gal-1 in fungal infections. The aim of this work was to investigate the biological impact of Gal-1 in the experimental histoplasmosis. The mice (GAL-1-/- and GAL-1+/+) were injected (i.t.) with 5 x 105 yeast cell and at 15 days post-infection, BALF cells and lungs cytokine and PGE2 were measured by ELISA. The Recovery of H. capsulatum was made in lung and spleen and the fungal burden was assessed as the CFU per organ. The lung slices were stained by hematoxiline eosin or with Gomoris methanemine silver (GMS) and submitted to histopathological investigation and quantification of neutrophil or fungus, respectively. Total and differential cell counts of the bronchoalveolar lavage (BAL).were performed using diluting solution in Neubauer chamber and Rosenfeld-stained smear. The capacity of Gal-1 to induce or modulate the lipids bodies formation by fungus components was analyzed by staining treated cells with osmium tetroxide. The total nitrite (NO2) concentration in the animals serum was measured by Griess reaction. All H. capsulatum-infected wild type mice survived until 30 days post-infection, whereas only 33% of the Gal-1-/- infected mice died during of this period of observation. At 15 days post-infection, CFU were found to be higher in the spleens or lung from infected-Gal1-/- mice. The number of neutrophils in the lung of the infected-Gal-1-/- mice higher than infected Gal-1+/+ animals. Curiously, H. capsulatum infected Gal-1-/- mice, presented higher levels of PGE2 and TH1 inflammatory cytokines (IFN-, IL-1 e IL-12) in comparison with wild type infected-mice. Adherent peritoneal cells peritoneal derived from Gal-1+/+ and Gal-1-/- mice and treated with Gal-1 did not induce lipid bodies. However, the capacity of F1 e -glucan to induce lipid bodies on the peritoneal cells was inhibited by gal-1 treatment. We suggest that the Gal-1 could participate of the development of a protective immune response to H. capsulatum.

Submitted by DEBORA DE OLIVEIRA LOSNAK null (deboralosnak@hotmail.com) on 2017-03-08T18:48:25Z No. of bitstreams: 1 Dissertação Débora Losnak.pdf: 3093790 bytes, checksum: f1b838682d27c1345ac29cab3b2bfc9a (MD5) / Approved for entry into archive by LUIZA DE MENEZES ROMANETTO (luizamenezes@reitoria.unesp.br) on 2017-03-13T18:04:26Z (GMT) No. of bitstreams: 1 losnak_do_me_bot.pdf: 3093790 bytes, checksum: f1b838682d27c1345ac29cab3b2bfc9a (MD5) / Made available in DSpace on 2017-03-13T18:04:26Z (GMT). No. of bitstreams: 1 losnak_do_me_bot.pdf: 3093790 bytes, checksum: f1b838682d27c1345ac29cab3b2bfc9a (MD5) Previous issue date: 2017-02-21 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / A emergência e reemergência de doenças infecciosas é impulsionada por vários fatores e a busca de patógenos em amostras animais podem oferecer oportunidades para estudos eco-epidemiológicos e também dados sobre a evolução dos patógenos. O objetivo deste estudo foi avaliar a ocorrência de fungos patogênicos importantes em saúde pública, em exemplares de animais silvestres mortos por atropelamento no estado de Santa Catarina e identificar e mapear áreas de risco para a infecção humana. Grande parte destes fungos apresenta em comum dimorfismo, distribuição geográfica restrita e produção de conídios infectantes que são aspirados pelo hospedeiro por meio das vias respiratórias. Cães e tatus são apontados como transmissores de Paracoccidioides brasiliensis, os morcegos ao Histoplasma spp., assim como as fezes de pombos ao Cryptococcus spp.. No presente trabalho foram analisadas 1063 amostras de pulmão, fígado, baço, pele e coração de 297 animais silvestres, para detecção de Paracoccidioides brasiliensis, Histoplasma capsulatum e Cryptococcus spp. pela técnica de Reação em Cadeia de Polimerase (PCR). Utilizou-se primers universais para detecção de fungos em geral e obteve-se positividade em 102 amostras de 59 animais. Para a análise de P. brasiliensis, utilizou-se os primers específicos, obtendo oito amostras positivas em cinco animais (quatro Oxymycterus spp. e um Euryoryzomys russatus). Não houve a detecção molecular para Histoplasma spp.. Foi possível a identificação de três amostras para Cryptococcus spp.. O sequenciamento foi realizado, porém em 89 amostras de 49 animais foi possível somente a identificação em Fungal sp. (GenBank KT923226.1), duas amostras para Cryptococcus neoformans (GenBank KY107218.1) obtidas de Oxymycterus spp. e Akodon spp. e três amostras de Aspergillus penicillioides (GenBank KP131612.1 e KP997215.1) obtidas de Gracilinanus spp., Oxymycterus spp. e Philander spp. Importante salientar que houve coinfecção de P. brasiliensis e Cryptococcus neoformans em amostra de um Oxymycterus spp. Esta pesquisa mostra a importância dos animais silvestres na transmissão de doenças e auxilia no mapeamento dos locais de ocorrência de determinados patógenos e doenças em uma região ainda não avaliada. / The emergence and reemergence of infectious diseases is propelled by many diverse factors and the search for pathogens in animal samples may offer opportunity for eco-epidemiologic studies as well as data on the evolution of pathogens. The objective of this study was to evaluate in samples of road-killed wild animals the occurrence of pathogenic fungi of importance for public health. A great part of these fungi presented, in common, dimorphism, restricted geographic distribution and production of conidia infecting, which are aspirated by the host by means of their respiratory tract. Dogs and armadillos are normally related to the transmission of Paracoccidioides brasiliensis, bats to Histoplasma spp., as well as pigeons feces to Cryptococcus spp.. In this study we analyzed 1063 samples of organs of 297 wild animals for the detection of Paracoccidioides brasiliensis, Histoplasma capsulatum and Cryptococcus spp. by the technique of Polymerase Chain Reaction (PCR). Universal primers were employed for the detection of fungi in general and positivity was obtained in 102 samples from 59 animals. For the P. brasiliensis analysis was used specific primers, resulting in eight positive samples from five animals (four Oxymycterus spp. and one Euryoryzomys russatus). There was no molecular detection to Histoplasma spp.. Was possible the identification of three samples to Cryptococcus spp.. The sequencing was performed, however in 89 samples from 49 animals was possible to identify Fungal sp. (GenBank KT923226.1), two samples for Cryptococcus neoformans (GenBank KY107218.1) obtained from Oxymycterus spp. and Akodon spp. and three samples from Gracilinanus spp., Oxymycterus spp. and Philander spp. were positive for Aspergillus penicillioides (GenBank KP131612.1 e KP997215.1). Is important emphasize the coinfection with P. brasiliensis and Cryptococcus neoformans in a sample from Oxymycterus spp.. This research shows the importance of the wild animals in transmissions of diseases and assists in the mapping of pathogen and disease sites in a region that has not yet been evaluated. / FAPESP: 2015/17519-4

Introdução: A tuberculose e a histoplasmose são clínica-radiológica e histopatologicamente semelhantes, o que pode levar ao tratamento equivocado. Neste sentido, a importância do atual projeto é a confirmação de casos de histoplasmose em pacientes com suposta tuberculose, no Vale d Sinos – Rio Grande do Sul. Objetivo: Demonstrar a prevalência de histoplasmose a partir da detecção de anticorpos anti- Histoplasma capsulatum (H. capsulatum) em pacientes que possuíam diagnóstico inconclusivo e que receberam tratamento para tuberculose. Métodos e resultados: A primeira fase do estudo foi retrospectiva, com análise de prontuários para a seleção de pacientes cadastrados no Sistema Único de Saúde que receberam tratamento tuberculostático sem diagnóstico etiológico conclusivo para tuberculose. A segunda fase do estudo foi prospectiva, onde o soro dos pacientes que se enquadraram nos critérios de inclusão/exclusão foi analisado por imunodifusão radial dupla para a detecção da presença de anticorpos anti-H. capsulatum. Dos 42 soros testados, três (7,14%) tiveram resultado positivo para a presença de anticorpos anti-H. capsulatum. Conclusão: A ausência de achados etiológicos conclusivos para a tuberculose aliados à positivação da imunodifusão para H. capsulatum, demonstra que três pacientes apresentavam histoplasmose e não tuberculose, sugerindo a necessidade de pesquisa da micose nos casos com suspeita de tuberculose, mas sem confirmação diagnóstica. / Introduction: Tuberculosis and histoplasmosis are clinic-radiologic and hitopatologically similar, and so the treatment may be mistaken. In this sense, the importance of this project is to confirm histoplasmosis cases on patients who are being treated for supposed tuberculosis, in Vale do Sinos – Rio Grande do Sul. Aim: To demonstrate the prevalence of histoplasmosis by the presence of anti-Histoplasma capsulatum (H. capsulatum) antibodies in patients whose diagnosis is inconclusive and who have been treated for tuberculosis. Methods and Results: The first stage of the study was retrospective, by the analysis of medical records to select patients who are filed on Sistema Único de Saúde and who have received tuberculostatic treatment without conclusive etiologic diagnosis for tuberculosis. The second stage of the study was prospective, and the serum of patients who are integrated to inclusion/exclusion criteria was examined by double radial im munodiffusion to detect the presence of anti-H. capsulatum antibodies. From the 42 serum which were tested, three of them (7,14%) have had positive results for the presence of anti-H. capsulatum antibodies. Conclusion: The lack of conclusive etiologic find for tuberculosis associated to the positivation of immunodiffusion for H. capsulatum, proves that three patients have showed histoplasmosis and not tuberculosis, proposing then the necessity of a research of mycosis on the cases which there is the suspect of tuberculosis, but without diagnostic confirmation.

A Histoplasmose é uma infecção micótica causada pelo fungo dimórfico Histoplasma capsulatum var. capsulatum. Apresenta especial afinidade patogênica com o Sistema Retículo Endotelial (S.R.E) e é de gravidade variável. É uma das micoses oportunistas mais importantes em indivíduos com comprometimento imunológico. É endêmica em humanos nos Estados Unidos, principalmente nas regiões dos Grandes Lagos e nos vales dos Rios Mississipi e Ohio, América Latina, parte da Ásia e África. No Brasil, 26 microepidemias foram relatadas em oito Estados. O fungo habita solos úmidos, ricos em substâncias orgânicas de pH ácido, contendo alto teor de nitrogênio, especialmente os que contêm fezes de morcegos e aves. O contágio se dá pela inalação das células reprodutivas do fungo, desenvolvendo inicialmente a infecção no pulmão. É notável que o aumento na intensificação dos métodos de produção na suinocultura levou ao aparecimento de doenças relacionadas com as novas tecnologias introduzidas, que promoveram condições para que, agentes que antes se encontravam em equilíbrio com o hospedeiro, viessem exercer efeito patogênico. Após o aparecimento das doenças virais imunossupressoras nos plantéis suínos de todo o mundo, como a Síndrome Respiratória Reprodutiva Suína (SRRS), Síndrome da Dermatite e Nefropatia (SDN) e a Síndrome Multissistêmica do Definhamento dos Suínos (SMDS), as doenças fúngicas se tornaram mais freqüentes, participando com maior expressão nas perdas econômicas do setor. Nesse novo cenário, fungos passaram a expressar suas potencialidades patogênicas, pois com a imunidade comprometida, os animais não são capazes de se proteger mesmo em baixos níveis de infecção. A escassez de pesquisa sobre histoplasmose em suínos gerou a hipótese de que a falta de diagnóstico desta doença não está sendo colocada como possibilidade de casuística diferencial para outras doenças. Há necessidade de serem conduzidos estudos que possam auxiliar em um diagnóstico adequado e que possa, posteriormente, esclarecer possíveis implicações do agente sobre o desempenho animal. O trabalho desenvolvido propôs utilizar a técnica sorológica de Imunodifusão em gel de agar (IDGA) para detectar a infecção por H. capsulatum através da pesquisa de anticorpos em amostras de sangue de suínos provenientes de diferentes unidades produtoras de leitões, no estado do Rio Grande do Sul. A amostragem foi composta por 246 amostras de soro de suínos e dividida em três grupos caracterizados de acordo com a taxa de mortalidade apresentada na creche e um quarto grupo composto por animais de baixo desenvolvimento. A presença de reações de precipitação no teste de IDGA não foi verificada em nenhuma das 246 amostras testadas. Entretanto, não se exclui a possibilidade de resultados falso negativos na prova de imunodifusão, pois outra técnica comparativa não foi utilizada neste estudo. É plausível a suposição da ocorrência da infecção pelo H. capsulatum em suínos em regiões constantemente expostas ao risco. É uma linha de pesquisa que ainda carece de muitos estudos principalmente epidemiológicos que auxiliem em um diagnóstico adequado e confiável. / Histoplasmosis is a fungal infection caused by the dimorphic fungus Histoplasma capsulatum var. capsulatum. It shows strong pathogenic affinity with the Reticulo Endothelial System (S.R.E) and has variable severity. It is one of the most important opportunistic mycoses in individuals with compromised immune system. It is an endemic mycosis in humans in the United States, mainly in the Great Lakes and in the valleys of the Mississippi and Ohio rivers regions, Latin America and regions of Asia and Africa. In Brazil, 26 microepidemics were reported in eight states.The fungus inhabits moist soil, rich in organic substances with acid pH, containing high content of nitrogen, especially those containing feces of birds and bats. The infection occurs by inhalation of the reproductive cells of the fungus, initially developing the infection in the lungs. It is remarkable that growing application of intensive production methods in the swine industry has facilitated to the arisal of diseases. Some technologies may promote conditions for agents, which before were in harmony with the host, to become pathogenic. After the arisal of immunosuppressive viral diseases in swine herds around the world, such as Porcine Reproductive Respiratory Syndrome (PRRS), Porcine Dermatitis and Nephropathy Syndrome (PDNS) and Postweaning Multisystemic Wasting Syndrome (PMWS), the fungal diseases have been occuring more frequently, accounting for significative economic losses for the swine industry. In this new scenario, fungi began to express its pathogenic potential and animals with compromised immune system are not able to protect themselves, even under low levels of infection. The shortage of research on swine histoplasmosis has led to the hypothesis that the lack of diagnosis of this disease is due to the fact that it is not being considered as an alternative diagnostic for other diseases. There is a need for studies on more adequate diagnosis methods and also on alternatives that assess the implications of the agent on the subsequent animal performance. This study proposed the application of the serological technique - immunodiffusion agar-gel - to detect infection by H. capsulatum through the search for antibodies in blood samples from pigs from different swine herds in the Rio Grande do Sul state, Brazil. A total of 246 serum samples from pigs were harvested. Three groups were characterized according to the weaning mortality rate and the fourth group of animals was characterized by pigs with low performance. The presence of immunoprecipitation in the test was not found in any of the 246 samples tested. The possibility of false negative results may not be excluded, because no other comparative technique was used in this study. It is plausible to suppose the occurrence of infection by H. capsulatum in pigs in areas constantly exposed to risk. It is a new line of research that still requires more epidemiological studies to assist in an appropriate and reliable diagnosis.

O estudo trata de infecções fúngicas por Histoplasma, Cryptococcus gattii e Paracoccidioides e por Actinomyces e Nocardia que simularam neoplasia a partir de achados radiológicos. O objetivo deste trabalho é demonstrar, através de casos do banco de dados do Laboratório de Micologia da Irmandade Santa Casa de Misericórdia de Porto Alegre, a importância de um diagnóstico diferencial destas infecções com doenças neoplásicas. Identificamos os aspectos epidemiológicos e clínico-laboratoriais desses pacientes e revisamos criticamente a literatura. A casuística foi constituída por 83 casos, extraídos de uma população de 1.368 pacientes, de 1981 a 2012. As características clínicas e radiológicas de neoplasia foram observadas principalmente na histoplasmose, pela formação de histoplasmoma, na criptococose por C. gattii pela capacidade de formar criptococoma; na actinomicose e na nocardiose pela produção de massas. O que reforça o fato de que a síndrome clínica não é patognomônica da doença neoplásica e que as doenças infecciosas, especialmente granulomatosas devem ser consideradas no diagnóstico diferencial. / The study comes to infections by Histoplasma, Cryptococcus gattii, Paracoccidioides, and also Actinomyces and Nocardia simulating neoplasia from radiological findings. The objective of this study is to demonstrated, through case database of Mycology Laboratory of Irmandade Santa Casa de Misericordia de Porto Alegre, the importance of a differential diagnosis of these infections with neoplastic disease. We identified the epidemiological, clinical and laboratorial datas of these cases and review the literature critically. The casuistic consisted of 83 cases, drawn from a population of 1,368 patients, from 1981-2012. The clinical and radiological features of malignancy were observed mainly in histoplasmosis by manifestation as histoplasmoma, in cryptoccosis by C.gattii to the ability to form crytococcoma; actinomycosis and nocardiosis by the production of masses. This fact emphasizes that the clinical syndrome is not pathognomonic of neoplastic diseases and that infectious diseases, especially granulomatous, should be considered in the differential diagnosis.

A Histoplasmose é uma infecção micótica causada pelo fungo dimórfico Histoplasma capsulatum var. capsulatum. Apresenta especial afinidade patogênica com o Sistema Retículo Endotelial (S.R.E) e é de gravidade variável. É uma das micoses oportunistas mais importantes em indivíduos com comprometimento imunológico. É endêmica em humanos nos Estados Unidos, principalmente nas regiões dos Grandes Lagos e nos vales dos Rios Mississipi e Ohio, América Latina, parte da Ásia e África. No Brasil, 26 microepidemias foram relatadas em oito Estados. O fungo habita solos úmidos, ricos em substâncias orgânicas de pH ácido, contendo alto teor de nitrogênio, especialmente os que contêm fezes de morcegos e aves. O contágio se dá pela inalação das células reprodutivas do fungo, desenvolvendo inicialmente a infecção no pulmão. É notável que o aumento na intensificação dos métodos de produção na suinocultura levou ao aparecimento de doenças relacionadas com as novas tecnologias introduzidas, que promoveram condições para que, agentes que antes se encontravam em equilíbrio com o hospedeiro, viessem exercer efeito patogênico. Após o aparecimento das doenças virais imunossupressoras nos plantéis suínos de todo o mundo, como a Síndrome Respiratória Reprodutiva Suína (SRRS), Síndrome da Dermatite e Nefropatia (SDN) e a Síndrome Multissistêmica do Definhamento dos Suínos (SMDS), as doenças fúngicas se tornaram mais freqüentes, participando com maior expressão nas perdas econômicas do setor. Nesse novo cenário, fungos passaram a expressar suas potencialidades patogênicas, pois com a imunidade comprometida, os animais não são capazes de se proteger mesmo em baixos níveis de infecção. A escassez de pesquisa sobre histoplasmose em suínos gerou a hipótese de que a falta de diagnóstico desta doença não está sendo colocada como possibilidade de casuística diferencial para outras doenças. Há necessidade de serem conduzidos estudos que possam auxiliar em um diagnóstico adequado e que possa, posteriormente, esclarecer possíveis implicações do agente sobre o desempenho animal. O trabalho desenvolvido propôs utilizar a técnica sorológica de Imunodifusão em gel de agar (IDGA) para detectar a infecção por H. capsulatum através da pesquisa de anticorpos em amostras de sangue de suínos provenientes de diferentes unidades produtoras de leitões, no estado do Rio Grande do Sul. A amostragem foi composta por 246 amostras de soro de suínos e dividida em três grupos caracterizados de acordo com a taxa de mortalidade apresentada na creche e um quarto grupo composto por animais de baixo desenvolvimento. A presença de reações de precipitação no teste de IDGA não foi verificada em nenhuma das 246 amostras testadas. Entretanto, não se exclui a possibilidade de resultados falso negativos na prova de imunodifusão, pois outra técnica comparativa não foi utilizada neste estudo. É plausível a suposição da ocorrência da infecção pelo H. capsulatum em suínos em regiões constantemente expostas ao risco. É uma linha de pesquisa que ainda carece de muitos estudos principalmente epidemiológicos que auxiliem em um diagnóstico adequado e confiável. / Histoplasmosis is a fungal infection caused by the dimorphic fungus Histoplasma capsulatum var. capsulatum. It shows strong pathogenic affinity with the Reticulo Endothelial System (S.R.E) and has variable severity. It is one of the most important opportunistic mycoses in individuals with compromised immune system. It is an endemic mycosis in humans in the United States, mainly in the Great Lakes and in the valleys of the Mississippi and Ohio rivers regions, Latin America and regions of Asia and Africa. In Brazil, 26 microepidemics were reported in eight states.The fungus inhabits moist soil, rich in organic substances with acid pH, containing high content of nitrogen, especially those containing feces of birds and bats. The infection occurs by inhalation of the reproductive cells of the fungus, initially developing the infection in the lungs. It is remarkable that growing application of intensive production methods in the swine industry has facilitated to the arisal of diseases. Some technologies may promote conditions for agents, which before were in harmony with the host, to become pathogenic. After the arisal of immunosuppressive viral diseases in swine herds around the world, such as Porcine Reproductive Respiratory Syndrome (PRRS), Porcine Dermatitis and Nephropathy Syndrome (PDNS) and Postweaning Multisystemic Wasting Syndrome (PMWS), the fungal diseases have been occuring more frequently, accounting for significative economic losses for the swine industry. In this new scenario, fungi began to express its pathogenic potential and animals with compromised immune system are not able to protect themselves, even under low levels of infection. The shortage of research on swine histoplasmosis has led to the hypothesis that the lack of diagnosis of this disease is due to the fact that it is not being considered as an alternative diagnostic for other diseases. There is a need for studies on more adequate diagnosis methods and also on alternatives that assess the implications of the agent on the subsequent animal performance. This study proposed the application of the serological technique - immunodiffusion agar-gel - to detect infection by H. capsulatum through the search for antibodies in blood samples from pigs from different swine herds in the Rio Grande do Sul state, Brazil. A total of 246 serum samples from pigs were harvested. Three groups were characterized according to the weaning mortality rate and the fourth group of animals was characterized by pigs with low performance. The presence of immunoprecipitation in the test was not found in any of the 246 samples tested. The possibility of false negative results may not be excluded, because no other comparative technique was used in this study. It is plausible to suppose the occurrence of infection by H. capsulatum in pigs in areas constantly exposed to risk. It is a new line of research that still requires more epidemiological studies to assist in an appropriate and reliable diagnosis.

Orientador: Virgínia Bodelão Richini-Pereira / Resumo: A emergência e reemergência de doenças infecciosas é impulsionada por vários fatores e a busca de patógenos em amostras animais podem oferecer oportunidades para estudos eco-epidemiológicos e também dados sobre a evolução dos patógenos. O objetivo deste estudo foi avaliar a ocorrência de fungos patogênicos importantes em saúde pública, em exemplares de animais silvestres mortos por atropelamento no estado de Santa Catarina e identificar e mapear áreas de risco para a infecção humana. Grande parte destes fungos apresenta em comum dimorfismo, distribuição geográfica restrita e produção de conídios infectantes que são aspirados pelo hospedeiro por meio das vias respiratórias. Cães e tatus são apontados como transmissores de Paracoccidioides brasiliensis, os morcegos ao Histoplasma spp., assim como as fezes de pombos ao Cryptococcus spp.. No presente trabalho foram analisadas 1063 amostras de pulmão, fígado, baço, pele e coração de 297 animais silvestres, para detecção de Paracoccidioides brasiliensis, Histoplasma capsulatum e Cryptococcus spp. pela técnica de Reação em Cadeia de Polimerase (PCR). Utilizou-se primers universais para detecção de fungos em geral e obteve-se positividade em 102 amostras de 59 animais. Para a análise de P. brasiliensis, utilizou-se os primers específicos, obtendo oito amostras positivas em cinco animais (quatro Oxymycterus spp. e um Euryoryzomys russatus). Não houve a detecção molecular para Histoplasma spp.. Foi possível a identificação de três amos... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Mestre

Introdução: A tuberculose e a histoplasmose são clínica-radiológica e histopatologicamente semelhantes, o que pode levar ao tratamento equivocado. Neste sentido, a importância do atual projeto é a confirmação de casos de histoplasmose em pacientes com suposta tuberculose, no Vale d Sinos – Rio Grande do Sul. Objetivo: Demonstrar a prevalência de histoplasmose a partir da detecção de anticorpos anti- Histoplasma capsulatum (H. capsulatum) em pacientes que possuíam diagnóstico inconclusivo e que receberam tratamento para tuberculose. Métodos e resultados: A primeira fase do estudo foi retrospectiva, com análise de prontuários para a seleção de pacientes cadastrados no Sistema Único de Saúde que receberam tratamento tuberculostático sem diagnóstico etiológico conclusivo para tuberculose. A segunda fase do estudo foi prospectiva, onde o soro dos pacientes que se enquadraram nos critérios de inclusão/exclusão foi analisado por imunodifusão radial dupla para a detecção da presença de anticorpos anti-H. capsulatum. Dos 42 soros testados, três (7,14%) tiveram resultado positivo para a presença de anticorpos anti-H. capsulatum. Conclusão: A ausência de achados etiológicos conclusivos para a tuberculose aliados à positivação da imunodifusão para H. capsulatum, demonstra que três pacientes apresentavam histoplasmose e não tuberculose, sugerindo a necessidade de pesquisa da micose nos casos com suspeita de tuberculose, mas sem confirmação diagnóstica. / Introduction: Tuberculosis and histoplasmosis are clinic-radiologic and hitopatologically similar, and so the treatment may be mistaken. In this sense, the importance of this project is to confirm histoplasmosis cases on patients who are being treated for supposed tuberculosis, in Vale do Sinos – Rio Grande do Sul. Aim: To demonstrate the prevalence of histoplasmosis by the presence of anti-Histoplasma capsulatum (H. capsulatum) antibodies in patients whose diagnosis is inconclusive and who have been treated for tuberculosis. Methods and Results: The first stage of the study was retrospective, by the analysis of medical records to select patients who are filed on Sistema Único de Saúde and who have received tuberculostatic treatment without conclusive etiologic diagnosis for tuberculosis. The second stage of the study was prospective, and the serum of patients who are integrated to inclusion/exclusion criteria was examined by double radial im munodiffusion to detect the presence of anti-H. capsulatum antibodies. From the 42 serum which were tested, three of them (7,14%) have had positive results for the presence of anti-H. capsulatum antibodies. Conclusion: The lack of conclusive etiologic find for tuberculosis associated to the positivation of immunodiffusion for H. capsulatum, proves that three patients have showed histoplasmosis and not tuberculosis, proposing then the necessity of a research of mycosis on the cases which there is the suspect of tuberculosis, but without diagnostic confirmation.

O estudo trata de infecções fúngicas por Histoplasma, Cryptococcus gattii e Paracoccidioides e por Actinomyces e Nocardia que simularam neoplasia a partir de achados radiológicos. O objetivo deste trabalho é demonstrar, através de casos do banco de dados do Laboratório de Micologia da Irmandade Santa Casa de Misericórdia de Porto Alegre, a importância de um diagnóstico diferencial destas infecções com doenças neoplásicas. Identificamos os aspectos epidemiológicos e clínico-laboratoriais desses pacientes e revisamos criticamente a literatura. A casuística foi constituída por 83 casos, extraídos de uma população de 1.368 pacientes, de 1981 a 2012. As características clínicas e radiológicas de neoplasia foram observadas principalmente na histoplasmose, pela formação de histoplasmoma, na criptococose por C. gattii pela capacidade de formar criptococoma; na actinomicose e na nocardiose pela produção de massas. O que reforça o fato de que a síndrome clínica não é patognomônica da doença neoplásica e que as doenças infecciosas, especialmente granulomatosas devem ser consideradas no diagnóstico diferencial. / The study comes to infections by Histoplasma, Cryptococcus gattii, Paracoccidioides, and also Actinomyces and Nocardia simulating neoplasia from radiological findings. The objective of this study is to demonstrated, through case database of Mycology Laboratory of Irmandade Santa Casa de Misericordia de Porto Alegre, the importance of a differential diagnosis of these infections with neoplastic disease. We identified the epidemiological, clinical and laboratorial datas of these cases and review the literature critically. The casuistic consisted of 83 cases, drawn from a population of 1,368 patients, from 1981-2012. The clinical and radiological features of malignancy were observed mainly in histoplasmosis by manifestation as histoplasmoma, in cryptoccosis by C.gattii to the ability to form crytococcoma; actinomycosis and nocardiosis by the production of masses. This fact emphasizes that the clinical syndrome is not pathognomonic of neoplastic diseases and that infectious diseases, especially granulomatous, should be considered in the differential diagnosis.

Introdução: A tuberculose e a histoplasmose são clínica-radiológica e histopatologicamente semelhantes, o que pode levar ao tratamento equivocado. Neste sentido, a importância do atual projeto é a confirmação de casos de histoplasmose em pacientes com suposta tuberculose, no Vale d Sinos – Rio Grande do Sul. Objetivo: Demonstrar a prevalência de histoplasmose a partir da detecção de anticorpos anti- Histoplasma capsulatum (H. capsulatum) em pacientes que possuíam diagnóstico inconclusivo e que receberam tratamento para tuberculose. Métodos e resultados: A primeira fase do estudo foi retrospectiva, com análise de prontuários para a seleção de pacientes cadastrados no Sistema Único de Saúde que receberam tratamento tuberculostático sem diagnóstico etiológico conclusivo para tuberculose. A segunda fase do estudo foi prospectiva, onde o soro dos pacientes que se enquadraram nos critérios de inclusão/exclusão foi analisado por imunodifusão radial dupla para a detecção da presença de anticorpos anti-H. capsulatum. Dos 42 soros testados, três (7,14%) tiveram resultado positivo para a presença de anticorpos anti-H. capsulatum. Conclusão: A ausência de achados etiológicos conclusivos para a tuberculose aliados à positivação da imunodifusão para H. capsulatum, demonstra que três pacientes apresentavam histoplasmose e não tuberculose, sugerindo a necessidade de pesquisa da micose nos casos com suspeita de tuberculose, mas sem confirmação diagnóstica. / Introduction: Tuberculosis and histoplasmosis are clinic-radiologic and hitopatologically similar, and so the treatment may be mistaken. In this sense, the importance of this project is to confirm histoplasmosis cases on patients who are being treated for supposed tuberculosis, in Vale do Sinos – Rio Grande do Sul. Aim: To demonstrate the prevalence of histoplasmosis by the presence of anti-Histoplasma capsulatum (H. capsulatum) antibodies in patients whose diagnosis is inconclusive and who have been treated for tuberculosis. Methods and Results: The first stage of the study was retrospective, by the analysis of medical records to select patients who are filed on Sistema Único de Saúde and who have received tuberculostatic treatment without conclusive etiologic diagnosis for tuberculosis. The second stage of the study was prospective, and the serum of patients who are integrated to inclusion/exclusion criteria was examined by double radial im munodiffusion to detect the presence of anti-H. capsulatum antibodies. From the 42 serum which were tested, three of them (7,14%) have had positive results for the presence of anti-H. capsulatum antibodies. Conclusion: The lack of conclusive etiologic find for tuberculosis associated to the positivation of immunodiffusion for H. capsulatum, proves that three patients have showed histoplasmosis and not tuberculosis, proposing then the necessity of a research of mycosis on the cases which there is the suspect of tuberculosis, but without diagnostic confirmation.