Made available in DSpace on 2014-06-11T19:22:22Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2012-03-29Bitstream added on 2014-06-13T18:08:09Z : No. of bitstreams: 1 farias_thv_me_jabo.pdf: 422760 bytes, checksum: f8aee5bfbf9efbd029bc37e488240d6c (MD5) / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq) / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / Dentre as espécies nativas criadas no Brasil, o pacu, Piaractus mesopotomicus, tem apresentado aumento em produção, impulsionado pela sua rusticidade, rápido crescimento e carne de boa qualidade. Neste contexto, os estudos sobre a aplicação de probióticos na aqüicultura intensificaram-se, visando à diminuição dos problemas sanitários encontrados nas pisciculturas e a substituição do uso de antibióticos, que têm se tornado uma barreira ao comércio internacional. A eficácia dos probíóticos na aqüicultura pode ser afetada por fatores como o tipo de probiótico e níveis de inclusão na dieta, espécie do hospedeiro e manejo. Diante disso, o objetivo desse trabalho foi avaliar a influência de diferentes níveis de inclusão do probiótico B.subtilis e B.cereus em dietas experimentais para pacu. Neste experimento foram utilizados 660 juvenis de pacus, com peso médio inicial de 67,0 ± 7,0 g, distribuídos em 20 tanques (500 L) e alimentados com probiótico durante 60 dias com quatro níveis de inclusão de Bacillus subtilis e Bacillus cereus (2,0; 4,0; 8,0 e 16,0 g) na ração experimental. Estes foram adicionados à ração experimental por meio de veículo oleoso. Foram avaliados: taxa de sobrevivência (TS), ganho em peso (GP), consumo alimentar diário (CAD), conversão alimentar aparente (CAA), taxa de crescimento específico (TCE), índices hepatossomático (IH), contagem e quantificação do número de probióticos na ração e no intestino dos peixes, número de eritrócitos, taxa de hemoglobina, hematócrito, índices hematimétricos, contagem total e diferencial de leucócitos, contagem de trombócitos, migração... / Among the native farming species in Brazil, pacu Piaractus mesopotomicus, has showed increase in the production, because your rusticity, growing fast and good quality meat. In this context, studies about the application of probiotics in the aquaculture have increase, with the aim of decrease of the sanitary problems found in the fish farms and the replacement of the antibiotics use that has become a barrier to international trade. The probiotics effectiveness in the aquaculture can be affected by factors how the kind of the probiotic and levels inclusion in the diet, host specie and management. At this, the aim of the research was to evaluate the influence of different levels of inclusion of the probiotic B.subtillis and B.cereus in assay diets for pacu. In this experiment was used 660 juvenile pacu, with average initial weight 67,0 ± 7 g, distributed in 20 tanks (500 L) and fed with probiotic during 60 days with four inclusion levels (2.0 g, 4.0 g, 8.0 g e 16.0 g) in the assay ration. The probiotic were added at ration por by oil vehicle. It were evaluated: survival rate (ST), weight gain (WG), daily food intake (DFI), feed conversion (FC), specific growing rate (SGR), hepatossomatic indices (HI), counting and quantification of the bacteria number in the ration and in gut the of the fish, erythrocytes number, hemoglobin rate, hematocrit, RBC indice, total count and differential of leucocytes, count of trombocytes, in vivo phagocytes migration, respiratory activity of the leucocytes (burst), plasmatic analyses of cortisol, glucose and total proteins. The animals didn’t show improve in the production parameters and there wasn’t difference in the hematological parameters evaluated in the animals fed with probiotic, too. In the evaluation of burst oxidative there wasn’t difference between the treatments, but the... (Complete abstract click electronic access below)

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:30:56Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2009-12-18Bitstream added on 2014-06-13T19:01:04Z : No. of bitstreams: 1 bannwart_cf_dr_botib.pdf: 1094046 bytes, checksum: 3e5c01fb3fd618a497a73f357427ec4d (MD5) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / Silibinin is the major active component of silymarin (Silybum marianum), a polyphenolic plant flavonoid that has anti-inflammatory, cytoprotective and anticarcinogenic effects. The modulatory effect of silibinin on monocyte function against Paracoccidioides brasiliensis (Pb18) has not yet been demonstrated. The present study investigated whether the effect of silibinin on NF-kB pathways may affects the production of tumor necrosis factor-alpha (TNF-α), interleukin-10 (IL-10), Transforming growth factor beta (TGF-β1), prostaglandin E2 (PGE2) and nitric oxide (NO), as well as the fungicidal activity of human monocytes challenged in vitro with Pb18. Peripheral blood monocytes from healthy individuals were treated with or without 5 uM and 50 uM silibinin and challenged with Pb18 or were stimulated with lipopolissaccharide (LPS). After 18 h of culture TNF-α, IL-10, TGF-β1 and PGE2 were determined by ELISA, while NO release was quantified by the accumulation of nitrite in the supernatants using the standard Griess assay. Fungicidal activity of monocytes against Pb18 was assessed after cell incubation with interferon-gamma, culture with or without silibinin for 18 h and challenge with Pb18 for 4h. NF-kB activation in the cultures was evaluated by flow cytometry and ELISA after monocyte stimulation with Pb18 or LPS for 30 min. Silibinin at 50uM concentration partially inhibited p65NF-kB activation as observed by reduction in the number of cells expressing this factor, that was confirmed by low concentration detection of p65NF-kB in the nucleus. This silibinin effects resulted in suppression of TNF-α, IL-10, TGF-β1 and PGE2 and NO production, but did not affect fungicidal activity of monocytes against Pb18. The modulatory effect of silibinin on the monocytes inflammatory response against P. brasiliensis might be important to establish an efficient and beneficial immune response of the host against the fungus

Orientador: Alexandrina Sartori / Banca: Angela Maria Victoriano de Campos Soares / Banca: Maria Terezinha Serrão Peraçoli / Banca: Virmondes Rodrigues Júnior / Banca: Gustavo Pompermaier Garlet / Resumo: A esclerose múltipla (EM) é uma doença inflamatória, crônica e desmielinizante do sistema nervoso central (SNC). A caracterização de uma estratégia profilática e/ou terapêutica na EM é necessária, já que não há cura para essa doença. No contexto da hipótese da higiene, a exposição diminuída a certos agentes infecciosos como os helmintos, os lactobacilos e as micobactérias saprófitas estaria relacionada com o aumento na incidência de doenças alérgicas e autoimunes. Assim, o objetivo deste trabalho foi caracterizar a infecção por Strongyloides venezuelensis em ratos Lewis e avaliar se a mesma modula as características clínicas, imunológicas e histopatológicas da encefalite autoimune experimental (EAE) nestes animais. Na primeira etapa, caracterizamos as fases aguda e de recuperação da infecção e avaliamos os padrões de resposta imune nestas duas fases. Na segunda etapa, avaliamos o efeito de uma ou várias infecções com S. venezuelensis na evolução da EAE. Os animais foram avaliados diariamente quanto ao peso e escore clínico da doença e a eutanásia foi realizada na fase de recuperação da EAE para avaliação da resposta imune (produção de citocinas e anticorpos) e do processo inflamatório no SNC. A frequência de células T CD4+CD25+Foxp3+ no baço e nos linfonodos (inguinais e poplíteos) também foi determinada após infecção única (fase aguda e de recuperação) ou múltipla com este helminto. De acordo com os diversos parâmetros avaliados, os resultados demonstraram que a infecção com S. venezuelensis não modificou a progressão da EAE em ratos Lewis e também não alterou a frequência de células T CD4+CD25+Foxp3+ nos órgãos linfóides secundários. Considerando a hipótese da higiene, estes resultados sugerem a necessidade de um estudo comparativo entre as diferentes espécies de helmintos para avaliar seu potencial imunorregulatório / Abstract: Multiple sclerosis (MS) is a chronic immune-mediated demyelinating disease of the central nervous systems (CNS). This and other immunemediated diseases are clearly increasing in more developed countries. According to the hygiene hypothesis this is due to a decreased contact between the human population and certain organisms as helminths, mycobacteria and lactobacillus. In this context, the main objective of this investigation was to evaluate if one or multiple infections with S. venezuelensis was able to modify the development of experimental autoimmune encephalomyelitis (EAE) in Lewis rats. Based on the hygiene hypothesis, an at least partial protective effect was expected. Initial assays indicated that recovery from S. venezuelensis in Lewis rats was associated with a strong Th2 response. Rats infected one or multiple times with this helminth were then submitted to EAE induction by immunization with myelin associated with complete Freund adjuvant. Differently from what was supposed, previous infection with S. venezuelensis was not able to modify body weight, clinical score and inflammation at the CNS. In addition, this infection was not associated with alteration in the frequency of CD4+CD25+Foxp3+ T cells in the spleen and lymph nodes (inguinal + popliteal). Considering the hygiene hypothesis, our data and literature reports, we believe that a comparative study employing different helminth species will be necessary to elucidate this subject / Doutor

Resumo: Não disponível / Abstract: Acute chorioamnionitis is a response to microbial infection of the amniotic fluid. The innate immune system constitutes the host's first line of defense against pathogens and, in this regard, Toll-like receptors (TLRs) are important regulators of such nonspecific response. However, the expression of these receptors in chorioamniotic membranes in pregnancies complicated by chorioamnionitis has not been well established. Objective:The purpose of this study was to examine the localization of TLR-1, TLR-2, TLR-4 and TLR-6 in fetal membranes and determine whether histologic chorioamnionitis is associated with changes in gene expression of these receptors. One hundred and fifteen chorioamniotic membranes were included in the study. They were collected at the Obstetrics Service of the Botucatu Medical School, São Paulo State University, UNESP, from pregnant women with preterm delivery or term delivery with or without labor. Both groups were stratified on the basis of the presence of histologic chorioamnionitis. Fragments of the chorioamniotic membranes were sent for histopathologic analysis in order to confirm histologic chorioamnionitis. Other membranes fragments measuring 1cm2 were placed into RNA later and submitted to total RNA extraction. After RNA extraction, the samples with concentration between 0.02 and 0.2 g/L of RNA were submitted to cDNA collection for later use in quantifying the expression of TLR-1, TLR-2, TLR-4 and TLR-6 by the real-time PCR technique using the TaqMan® Gene Expression Assays System. All membranes analyzed expressed TLR-1 and TLR-4, whereas 99.1% expressed TLR-2 and 77.4% expressed TLR-6. TLR-1 and TLR-2 expression were statistically higher in the membranes of preterm pregnancies in the presence of chorioamnionitis as compared with preterm membranes in the absence of the inflammatory infiltrate. Among the membranes of term pregnancies, there was... (Complete abstract click electronic access below) / Orientador: Márcia Guimarães da Silva / Coorientador: José Carlos Peraçoli / Banca: Angela Maria Victoriano de Campos Soares / Banca: Rosiane Mattar / Mestre

Resumo: A resposta imune na leishmaniose pode resultar em uma polarização da subpopulação dos linfócitos T, levando a um fenótipo celular distinto, que resultam em proteção imune ou exacerbação da doença. As leishmânias persistem no organismo tanto em infecções assintomáticas como após o tratamento, representando risco em condições de imunossupressão. O objetivo deste trabalho foi avaliar o efeito da infecção e da imunossupressão com dexametasona associada à pentoxifilina, sobre o peso dos animais, peso do baço, carga parasitária do baço e do fígado, e da imunopatologia quanto à produção de IFN-γ, IL-10, IL-4 e IL-2 em cultura de células esplênicas de camundongos Balb/c infectados com Leishmania chagasi. A infecção não alterou o ganho de peso dos animais, mas sim o peso e o tamanho do baço. A imunossupressão utilizando a dexametasona associada à pentoxifilina afetou tanto ganho de peso, quanto o peso e o tamanho do baço, de animais infectados e não infectados. A imunossupressão não alterou significativamente o curso da carga parasitária, tanto do baço, como do fígado. A dexametasona e a pentoxifilina afetaram a produção das citocinas estudadas, mas não direcionaram o perfil de resposta Th1/Th2 nos animais infectados. / Abstract: The immune response in leishmaniasis can result in a polarization of a subpopulation of T lymphocytes, leading to a different cell phenotype, resulting in immune protection or exacerbation of the disease. Leishmanias persist in the body both in asymptomatic infections and after the treatment, representing risk in terms of immunosuppression. The objective of this study was to evaluate the effect of infection and immunosuppression with dexamethasone associated with pentoxifylline on the weight of the animals, weight of the spleen, the parasitic load in the spleen and liver, and immunopathology on the production of IFN-γ, IL - 10, IL-4, and IL-2 in spleen cell culture of Balb/c mice infected with Leishmania chagasi. The infection did not alter the animals' weight gain, but the weight and size of the spleen increased. The immunosuppression using dexamethasone associated with pentoxifylline affected both weight gains, as the weight and size of the spleen of infected and not infected animals. The immunosuppression did not alter significantly the course of the parasite burden of the spleen and the liver. Dexamethasone and pentoxifylline affected the studied cytokines production, but not influenced the profile of Th1/Th2 response in infected animals. / Orientador: Helio Langoni / Coorientador: Luciane Alarcão Dias-Melício / Banca: Angela Maria Victoriano de Campos / Banca: Lisiane de Almeida Martins / Mestre

Made available in DSpace on 2016-04-28T20:17:28Z (GMT). No. of bitstreams: 1 1998 - Jose Luis de Carvalho.pdf: 155465 bytes, checksum: 7d8adfe2d500eb89d6de012ebb6c3718 (MD5) Previous issue date: 1998-09-22 / The present thesis was concerned to imnunoassays, carried out in order to evaluate the aflatoxin interference on the inflammatory mechanisms. Experiments were done by in vivo procedures. In the in vivo experiments, chickens (Hubard x Hubard) received 100 μg / g de aflatoxin, 2 hours before infection with Escherichia coli. The blood clearance of Escherichia coli, was determined by haemoculture and quantification of the bacteria colonies in tryptose agar medium at different intervals ( 5, 10, 15, 30, 45, 60, 120 minutes). A significant decrease of the number of colonies recovering was observed at the 15 minutes period, of aflatoxin-trated chikens. From there on, animals intoxicated with aflatoxin were not able to eliminate the circulating bacterias. Aflatoxin-trated chikens, there were detectable a significant decrease of number of bacteria colonies on the organ, than in the control group. The per cent of bacterias were found in the spleen and liver, with the rate of 91.9 % and 7.6 %, respectively. The results have been shown, aflatoxin to be a micotoxin hepatotoxic and nephrotoxic. / O presente trabalho foi realizado com o intuito de determinar a extens?o dos preju?zos causados ao sistema imunit?rio pela aflatoxina. A modula??o inflamat?ria foi avaliada atrav?s de ensaios in vivo, realizados em aves Hubard x Hubard, previamente expostos ? aflatoxina (100 μg / g de peso vivo - 2 horas antes da infec??o). Os experimentos in vivo basearam-se na elimina??o ( clearance ) de Escherichia coli (amostra k-12 - FIOCRUZ), apartir de infec??es experimentais, seguidas de sangria, hemocultivo e contagem do n?mero de bact?rias circulantes em diferentes intervalos de tempo. Observou-se uma acentuada diminui??o do n?mero de bact?rias circulantes durante os 15 minutos de avalia??o no grupo tratado. Apartir de ent?o, os animais intoxicados mostraram-se incapazes de eliminar bact?rias circulantes, evidenciando ter havido uma supress?o da resposta inflamat?ria. Nos animais intoxicados, foi dectado uma acentuada diminui??o do n?mero de bact?rias nos ?rg?os em compara??o com os n?o tratados . O percentual de bact?rias foi maior no ba?o e f?gado, com uma taxa de 91,9% e 7,6% respectivamente. Os resultados mostraram a hepatoxicidade e nefrotoxicidade das aflatoxinas.

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Made available in DSpace on 2013-08-07T18:41:56Z (GMT). No. of bitstreams: 1 000449167-Texto+Completo-0.pdf: 7073688 bytes, checksum: 13ee832fb2876ff096e89bb359eef9f8 (MD5) Previous issue date: 2013 / Psychosocial stress has important role in activating endocrine, immune and central nervous systems. Stress exacerbates many chronic inflammatory conditions and is an important risk factor for several mood disorders. Early exposure to stress can be even more detrimental as it may lead to alterations in stress reactivity/responsivity later in life. Several studies have shown important neuroimmune changes associated with the pathophysiology of mood disorders. Previous studies from our group and others reported a pro‐inflammatory profile and increased cellular activation in patients with bipolar disorder (BD). The objectives of the thesis are: 1) to analyze the stress effects on development using animal model of early life stress (maternal separation); 2) to analyze the neuroimmunendocrine responses to acute stress exposure (Trier Social Stress Test) in BD patients. Data presented here suggests that early life stress results in immune activation, characterized by increased pro‐inflammatory serum levels (specifically IL1‐β). As a consequence of this inflammation, a reduction of parvalbumin containing interneurons, substantial for serotonergic branches development, was also observed. Peripheral inflammation is a biological marker of neuronal damage observed, as interleukin‐10 (IL‐10, main anti‐inflammatory cytokine) central administration overturned the neuronal damages as well as peripheral inflammation per se. In the second study, patients with BD showed blunted sympathetic and neuroendocrine (cortisol) stress responses following acute stress compared to healthy controls. Basal data corroborates the presence of increased cellular activation in BD patients as observed by reduced T regulatory (Treg) cells, increased activated T cells (CD4+CD25+) as well as increased intracellular signaling through increased ERK1/2 and NF‐κB phosphorylation. Furthermore, an inability in reducing immune activation in response to stress was observed as increased percentage of activated T cells and concomitantly reduction in regulatory T cells in BD patients. Such inability in controlling immune response after stress exposure may be explained not only by reduced cortisol levels but also by reduced glucocorticoid sensitivity observed in BD patients. Given that, we conclude that BD patients have important HPA axis alterations that may lead to reduced endocrine reactivity to stress as well as inability to duly modulate immune responses. / O estresse psicossocial é um importante mecanismo de ativação dos sistemas nervoso, endócrino e imune muitas vezes levando à exacerbação de diversas doenças inflamatórias crônicas, assim como é um fator de risco importante para diversos transtornos de humor. A exposição ao estresse pode ser mais danosa quando esta ocorre cedo no desenvolvimento e pode resultar em alterações na reatividade/responsividade ao estresse na vida adulta. Diversos estudos vêm demonstrando alterações neuroimunoendócrinas importantes na patofisiologia dos transtornos de humor. Estudos prévios do nosso grupo e outros têm observado um perfil pró‐inflamatório periférico e uma maior ativação linfocitária em pacientes com transtorno bipolar (TB). Os objetivos da tese são: 1) analisar os efeitos do estresse no desenvolvimento através do protocolo de separação materna em modelo animal; 2) analisar parâmetros neuroimunoendócrinos em resposta ao estresse em pacientes com TB tipo 1 eutímicos, utilizando‐se um protocolo de estresse laboratorial, o Trier Social Stress Test (TSST). Dados do presente trabalho demonstram que a exposição ao estresse na infância (em modelo animal) resulta em ativação imune, caracterizada por aumento nos níveis plasmáticos de citocinas pró‐inflamatórias (interleucina 1‐β) perifericamente. Uma possível consequência dessa ativação imune é a perda de neurônios contendo parvalbumina, importantes para o desenvolvimento de comunicação serotoninérgica.A inflamação periférica serviu como marcador para os danos neuronais observados, pois quando houve a administração de interleucina‐10 (IL‐10, principal citocina anti‐inflamatória) foi possível reverter os danos neuronais e a inflamação periférica. Neste trabalho, os pacientes com TB apresentaram respostas simpáticas e neuroendócrinas (cortisol) muito reduzidas após o estresse agudo quando comparados aos controles saudáveis. Ao nível basal, os pacientes com TB apresentaram uma redução na porcentagem de células T regulatórias (Treg), aumento na porcentagem das células T ativadas (CD4+CD25+) e aumento na sinalização celular através de uma maior fosforilação de ERK1/2 e NF‐κB – corroborando para um estado de ativação celular. Além disso, observamos uma incapacidade em reduzir a ativação imune em resposta ao estresse, caracterizada pelo aumento ainda maior na porcentagem de células T ativadas e concomitante redução nas células Treg em pacientes TB. Tal incapacidade em controlar a resposta imune ao estresse pode ser explicada não apenas pelos baixos níveis de cortisol secretado, mas também a uma maior insensibilidade aos glicocorticoides no TB. Concluímos que os indivíduos com TB possuem alterações no eixo HPA que resultam em reduzida reatividade endócrina ao estresse assim como incapacidade de modular corretamente as respostas imunes.