Tese (catedra) - Universidade de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-07-18T01:20:07Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Rangel_HumbertodeAraujo.pdf: 5947699 bytes, checksum: 032fadfb0cf70f403ecc0a8966bb1b06 (MD5) Previous issue date: 1968 / Resumo: : As relações antigênicas entre as soro-albuminas humana, bovina e eqüina (SAH, SAB e SAE) foram estudadas, utilizando-se vários métodos imunoquímicos. Os resultados obtidos indicam que: 1) Existe um motivo antigênico comum à SAH, SAB e SAE. 2) As representações (C(H), C(B) e C(E)) desse motivo antigênico comum não são idênticas nas diferentes soro-albuminas em estudo. 3) A maioria dos anticorpos que reagem cruzadamente com C(H), C(B) e C(E) são mais ávidos do antígeno homólogo do que do heterólogo. 4) Nas reações de precipitação em gel de Agar ocorrem interações entre o antígeno homólogo e o complexo solúvel formado entre o antígeno heterólogo e os anticorpos responsáveis pelas reações cruzadas. 5) Em virtude dessas interações, nas experiências de imuno-difisão, o aspecto das reações entre os anticorpos que reagem cruzadamente (especificamente isolados) e os antígenos homólogo e heterólogo, assemelha-se ao de uma reação cruzada (identidade parcial). 6) o motivo antigênico comum à SAH, SAB e SAE é constituído por vários determinantes diferentes entre si. 7) Pode ser isolado, dos digestos da SAH submetida à ação de catepsina D de coelho, um fragmento ? designado fragmento IH ? que contém pelo menos dois dos determinantes que compõem o motivo antigênico comum a SAH, SAB e SAE... Observação: O resumo, na íntegra, poderá ser visualizado no texto completo da tese digital / Abstract: Not informed. / Tese (catedra) - Universidade / Doutor em Ciências Biológicas

Orientador: Edson Bittencourt / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Engenharia de Campinas / Made available in DSpace on 2018-07-19T05:44:58Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Peres_Leila_M.pdf: 5935580 bytes, checksum: b3fd03d86640e1a6ac732272511a954d (MD5) Previous issue date: 1986 / Resumo: Neste trabalho iniciou-se a caracterização de um novo tipo de suporte para imobilização de antígenos e anticorpos que foi descrito pela primeira vez por Bittencourt et al em 1983. Este suporte é constituído por tecidos sintéticos recobertos com resinas reticuláveis que apresentam grupos N-metilol capazes de reagir covalentemente com grupos funcionais característicos de proteínas, como grupos amino e hidroxila. Imunosorventes preparados com antígenos de diversas patologias, como Doença de Chagas e Toxoplasmose (doenças parasitarias) e Rubéola (virose), mostraram excelente desempenho no diagnóstico sorológico, em testes imunoenzimático do tipo ELISA (Enzyme-Linked Immunosorbent Assay). Os estudos realizados, sugerem que a reação de imobilização é controlada pela área superficial disponível, associada a geometria da molécula. Os resultados indicam que a ligação da proteína se da superficialmente sobre a resina, em uma primeira camada, por ligação covalente com grupos N-metilol, presentes em excesso, ou por adsorção química. Segue¬-se, então, a formação de multicamadas de proteína, ligadas por forças mais fracas. A Isoterma de Adsorção obtida para a imobilização do anticorpo humano, IgG, apresentou um formato sigmoidal, correspondente a modelos como o B.E.T., e outros, que assumem adsorção em multicamadas. Para superfícies de poliestireno, que são atualmente os suportes mais utilizados na preparação de imunosorventes, para Testes ELISA, as isotermas obtidas foram consistentes com a de Langmuir. O mesmo ocorreu para as isotermas de captação, do anticorpo humano IgG em solução, por imunosorventes preparados com Suporte-Resina e Anti-IgG imobilizado, demonstrando o caráter de adsorção em monocamada. Variáveis relevantes na reação de imobilização, tais como: pH, concentração de eletrólitos, temperatura, tempo de reação e concentração da imunoproteina, foram estudadas para se estabelecer às condições de reação mais adequadas. Um estudo sistemático do desempenho do imunosorvente desenvolvido, em Teste ELISA para Doença de Chagas, mostrou os mesmos níveis de sensibilidade, especificidade e reprodutibilidade, obtidos com placas de poliestireno, com a vantagem de estabilidade superior / Abstract: In this work the characterization of a new type of support for the immobilization of antigens and antibodies was initiated. This support that was firstly described by Bittencourt et al in 1983, consists of synthetic fabrics coated with crosslinked resins containing N-methylol groups able to form covalent bonds, with functional groups such as hydroxil and amino, which are characteristic of proteins. Immunosorbents prepared with characteristic antigens of different pathologies, such as Chagas' Disease and Toxoplasmosis (parasitic diseases) and Rubella (viruse), presented excellent performance in sorologic diagnosis, when utilized in ELISA tests (Enzyme-Linked lmmunosorbent Assays). The studies conducted suggest that the immobilization reaction, is controlled by the surface area available, associated to the area occupied by the molecule. The results indicate, covalent bonding of chemical adsorption, of the immunoproteins with N-methylol groups, which are present in excess at the surface of the crosslinked resin. This first layer seems to be followed by multilayers sorbed by weaker forces. The Adsorption Isotherm obtained for the immobilization of human antibody, IgG, presented a sigmoidal form corresponding to models, such as B.E.T. and others, which assume the formation of multilayers. With respect to polystirene surfaces, which are presently the most utilized type of support in ELISA tests, the isotherms obtained were fitted by the Langmuir Model. This same model was consistent, with the isotherms obtained from the capture of the human antibody IgG in solution, by Anti-IgG, previously immobilized on the supports, demonstrating monolayer adsorption. Relevant variables for the immobilization reaction, such as: pH, temperature, time of reaction, and concentrations of immunoproteins and electrolytes were studied, with the objective of determining the most adequated reaction conditions. A systematic study of the performance of the immunosorbent developed in this work, was conducted with ELISA tests for Chagas' Disease, showing the same levels of sensitivity, specificity and reproductibility of polystirene plates, with the advantage of superior stability / Mestrado / Mestre em Engenharia Química

Orientador: Maria Silvia Viccari Gatti / Dissertação (Mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-07-24T16:42:22Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Haga_IsmarRocha_M.pdf: 5409533 bytes, checksum: e14ff0f2cbe7ea6708538c1ae851ad5b (MD5) Previous issue date: 1998 / Resumo: O picobirnavírus (PBV) é um novo vírus, descritos em fezes de humanos, ratos, suínos, cobaias, aves e coelhos. No presente trabalho, é relatada a primeira identificação, através de eletroforese em gel de poliacrilamida (EGP A), de picobirnavírus em fezes de um animal silvestre mantido em cativeiro, o tamanduá-bandeira (Myrmecophaga tridactyla). Este fato sugere a existência de possíveis novos hospedeiros para o PBV na natureza. Também foram implementados e comparados diferentes métodos de concentração e purificação virais a partir de suspensões fecais de diferentes origens, buscando a obtenção de partículas virais purificadas para posteriores estudos de sua estrutura. Quanto aos métodos de concentração, foram usadas a adição de cloreto de cálcio (CaCI2), a adição de polietilenoglicol (PEG) e cloreto de sódio (NaCl) e a ultracentrifugação em colchão de sacarose, método este que apresentou os melhores resultados. Em relação aos processos de purificação, foram testadas soluções de sacarose, tartarato (ácido tartárico, sal dipotássico), cloreto de césio (CsCI) e cloreto de rubídio (RbCI). A utilização do cloreto de rubídio (RbCI) mostrou-se uma alternativa viável à utilização do cloreto de césio (CsCI), amplamente difundido como protocolo de purificação viral, indicando que soluções de RbCI podem ser usadas como protocolos alternativos de purificação do PBV. Foi ainda implementado o primeiro teste imunoenzimático para detecção de picobirnavírus em amostras fecais de diferentes origens, usando membranas de nitrocelulose como fase sólida. Foram observados resultados positivos nas amostras fecais das três espécies (ratos, suínos e tamanduásbandeira), o que pode indicar que os picobirnavírus que infectam estes animais podem possuir antígenos comuns. O teste pode ser utilizado como triagem de amostras em rotina diagnóstica, ao lado da eletroforese em gel de poliacrilamida (EGPA) como teste confirmatório. Esta é a primeira descrição de um ensaio imunoenzimático para detecção do PBV em amostras fecais / Abstract: A novel virus tentatively named picobirnavirus (PBV) has been described in faeces of several species of vertebrates (humans, rats, guinea pigs, pigs, rabbits and chickens). Examination by polyacrylamide gel electrophoresis (PAGE) of faecal specimens of giant anteaters (Myrmecophaga tridactyla) kept in captivity revealed the presence of the two equimolar bands resembling those of the picobirnaviruses. This is the first report of picobirnaviruses in faeces of a wild animal in captivity, suggesting that there might be other natural PBV hosts. Different methods for virus concentration were tested: addition of calcium chloride (CaCI2), addition of polyethylene glycol (PEG) and sodium chloride (NaCl) and centrifugation through sucrose cushion, the method that provided the most reliable results. Cesium chloride (CsCI) solutions have been widely used for PBV purification protocols. Alternative protocols for density gradient centrifugation (rubidium chloride, sucrose and potassium tartrate) were tested. The results obtained by using rubidium chloride (RbCI) were compatible with those previously reported for CsCI solutions, indicating that RbCI solutions may be used as an alternative protocol for virus purification, not only for picobirnaviruses but for other viruses as well. An enzyme immunoassay using nitrocellulose membranes is described for the detection of picobirnaviruses in faeces from different origins. In this study, positive results were detected in faecal samples from three different animaIs (rats, pigs and giant anteaters), suggesting that viruses identified in these animaIs might share common antigens. The test characteristics indicate that it can be used as a screening test in routine diagnosis, along with a confirmatory polyacrylamide gel electrophoresis (PAGE) test. This is the first report of such an assay used to detect this new, and yet little known, virus in faecal specimens / Mestrado / Microbiologia / Mestre em Ciências Biológicas

Orientador : Humberto de Araujo Rangel / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-07-14T03:13:14Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Araujo_AlbetizaLobode_M.pdf: 2145081 bytes, checksum: f8411276f6b9c1ce6a2dd0cc5ed1728a (MD5) Previous issue date: 1978 / Resumo: O presente trabalho foi realizado com o objetivo de se verificar a influência da IgS anti-IgG de coelho na liberação de Cl do complexo EACl. Os resultados obtidos permitiram as seguintes conclusões: 1 - A adição de IgS-anticorpo à complexos EACl, contendo diferentes quantidades de unidades de Cl, sempre provocou a liberação de Cl, ao passo que a adição de IgS normal não produziu o mesmo efeito. 2 - o emprego de tampão com baixa força iônica não reduziu a quantidade de Cl liberada pela ação do anticorpo, sugerindo que a afinidade da IgS pela IgG é maior do que a afinidade de Cl pelo imune complexo. 3 - o conjunto de dados sugere que a inibição da imuno hemólise pela IgS deve-se provavelmente ao impedimento estérico do sítio de combinação / Abstract: Not informed. / Mestrado / Mestre em Ciências Biológicas

Orientador: Benedito de Oliveira / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-07-14T19:05:56Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Marangoni_Sergio_D.pdf: 3995575 bytes, checksum: 388ae640ac8a953933cbb8c0647c8dae (MD5) Previous issue date: 1983 / Resumo: De paciente (JJO) da Faculdade de Medicina da Unicamp com quadro clínico característico de mieloma múltiplo foi obtido plasma com alta concentração de paraproteina M. A presença uma banda compacta indicativa de homogeneidade molecular característica de plasma patológico mielomatoso e de mobilidade eletroforetica tipo gamaglobulina lenta, foi detectada através de análise eletroforetica seguida de densitometria. O fracionamento do plasma JJO em DEAE celulose, levou a obtenção da fração A, cujo controle eletroforético evidenciou a purificação do componente M mielomatoso, livre de contaminações de outras proteinas plasmáticas. A fração A foi tipificada sorologicamente como uma imunoglobulina IgG do tipo IgGl com cadeias leves do isotipo lambda. O grau de pureza da proteina (JJO) (fração A) foi confirmado em eletroforese em gel de poliacrilamida na presença de SDS. A amostra, analisada na forma reduzida, mostrou a presença de bandas eletroforéticas com peso molecular em torno de 50000 e 25000 daltons em relação aos marcadores e que correspondem as cadeias pesada (H) e leve (L) respectivamente. A proteina M(JJO) foi caracterizada quimicamente como uma imunoglobulina IgGl com cadeias leves do isotipo lambda,através de autoradiografia da eletroforese em pH 3.5 do digesto péptico-tríptico da proteina JJO,reduzida e carboximetilada.Deste tratamento químico foram obtidas as bandas radioativas Jl, J2 e J3 de mobilidade eletroforética dos peptideos H-L, H-H e L respectivamente, e que caracterizam o padrão IgGl lambda / Abstract: Plasma from a patient (JJO) with multiple myeloma showing high levels of M paraprotein was obtained from the faculdade de Medicina, Universidade Estadual de Campinas.The results of electrophoretic analysis followed by densitometry showed a compact band indicative of molecular homogeneity characteristic of patient presenting monoclonal gamopathy. Fraction A containing myeloma protein was isolated from the pathologyc serum JJO by ion exchange chomatografy in DEAE celulose. Electrophoretic control of this fraction indicates the purification of the M component, without contamination with other plasma proteins. Fraction A was typed serologicaly as an IgGl immunoglobulin with lambda light chains. The purity of JJO protein (fraction A) was confirmed in SDS-polyacrylamide gel electroforesis. The reduced JJO protein showed two bands of 50 and 25K corresponding to heavy and light chains respectively. The M (JJO) paraprotein in was chemically typed as an IgGl protein with lambda light chains by autoradiography of high voltage electrophoresis of a pepsin-trypsin digests of myeloma protein partially reduced and alkylated with iodoacetate-C14. This material produces a consistent autoradiographic pattern. Which shows radioactives bands Jl, J2 andJ3 of electrophoretic mobility characteristic the H-L, H-H and L. peptides respectively / Doutorado / Biologia Celular / Doutor em Ciências Biológicas

Orientador : H. A. Rangel / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-07-15T14:22:47Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Pinho_RosaTeixeirade_M.pdf: 2090363 bytes, checksum: dc057b20380a3ed70891833bf10cf606 (MD5) Previous issue date: 1977 / Resumo: Experiências foram realizadas com o sentido de verificar a possibilidade de obtenção de albumina humana imunoquimicamente pura, utilizando-se uma metodologia disponível em laboratório medianamente equipados. Foram utilizados soros humanos obtidos a partir de sangue rejeitado para serviços de transfusão por ser impróprio para uso humano por apresentar reações sorológicas positivas para sífilis ou Doença de Chagas. Estes soros foram fracionados por ¿salting-out¿ e por cromatografia e a pureza das frações foi testada por eletroforese em acetato de celulose, imunoeletroforese e imunoeletroforese cruzada. Os resultados obtidos mostraram que: 1. O fracionamento com sulfato de amoneo permitiu a obtenção de uma fração enriquecida em albumina (80%) com um rendimento médio de 70%. 2. Por cromatografia em CM-celulose em condições controladas pode-se obter uma fração que de acordo com os resultados dos testes de pureza utilizados, contem apenas albumina com um rendimento global da ordem de aproximadamente 30%. 3. Experimentos de digestão da albumina obtida com a catepsina D de coelho, mostraram resultados similares aos obtidos com albuminas humanas purificadas, obtidas comercialmente / Abstract: Not informed. / Mestrado / Mestre em Ciências Biológicas

Orientador: Ladaslav Sodek / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-07-19T13:06:07Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Vitoria_AngelaPierre_M.pdf: 3937638 bytes, checksum: b7de6cc8f7438dee3dbc531ecc102f3c (MD5) Previous issue date: 1994 / Resumo: O aminoácido asparagina (ASN) é um dos principais compostos nitrogenados transportado pelos vasos condutores das plantas, principalmente nas leguminosas. O nitrogênio (N) que constitui este aminoácido é reutilizado nos órgãos em formação da planta (órgãos dreno) para a síntese de proteínas e compostos nitrogenados em geral. No entanto, existe a necessidade de metabolização da ASN para que este N apresentese na forma livre e portanto possa ser reutilizado. São conhecidas duas enzimas capazes de metabolizar a ASN: Asparagina Transaminase e Asparaginase (ASNase). A presença da enzima ASNase é de extrema importância, pois apresenta um papel regulatório na metabolização da ASN, como por exemplo neste trabalho, em que se estudou sementes imaturas, onde este aminoácido é degradado no início do desenvolvimento, quando a necessidade de nutrientes é maior e a atividade desta enzima é alta. Existem duas formas de ASNase, uma dependente e outra independente do íon potássio (K+), porém as duas formas nunca foram encontradas juntas numa mesma espécie. Deste modo, investigou-se treze espécies do gênero Crotalaria, uma leguminosa tropical, para a determinação das formas enzimáticas de cada espécie. Com base nos estudos sobre as formas enzimáticas e observações morfológicas, sugerimos que exista uma relação entre a forma enzimática e a morfologia foliar para as espécies deste gênero, pois as cinco espécies que apresentaram ASNase dependente de K+ eram unifolioladas, e as independentes, sempre trifolioladas. A partir do anticorpo produzido para a enzima ASNase independente de K+ purificada de Lupinus polyphyllus pôde-se fazer um estudo imunoquímico para tentar estabelecer similaridades entre as moléculas das duas formas enzimáticas. Neste estudo constatamos que o reconhecimento por parte do anticorpo não se dá em função da dependência do cofator K+ pela enzima. Por isto sugerimos que a porção da molécula da enzima onde se liga o anticorpo não seja a mesma porção que determina a dependência ao K+. Foi determinado também quais compostos nitrogenados compunham a seiva xilemática destas plantas a partir de dois tratamentos que permitiam ou não a formação de nódulos. Para isto foram dosados ureídeos e aminoácidos, que são normalmente os principais compostos nitrogenados do exsudato do xilema de leguminosas. Pelos dados obtidos observamos que os ureídeos não são utilizados pelas espécies de Crolalaria como transp0rtadores de N mesmo nas plantas do tratamento com nodulação, onde esta classe de composto é mais frequentemente encontrada. Constatamos também que os aminoácidos são os compostos nitrogenados transportados preferencialmente na seiva das espécies estudadas de Croralarza. A ASN representou mais de 50% dos aminoácidos detectados na seiva, sendo o principal produto composto transportador de N nestas plantas. O ASP (ácido aspartico) foi o segundo aminoácido encontrado em maior quantidade. A partir desta afirmação ressaltamos a crucial importância da enzima ASNase na metabolização de ASN, uma vez que sua utilização é fundamental para o crescimento da planta / Abstract: The amino acids Asparagine (ASN) is one of the principal fonns of nitrogen found in the vascular transportsystem of plants, principally of legumes. The nitrogen (N) contained is this amino acids is reutilized in developing organs of the plant (sinks) for the synthesis of proteins and nitrogenous compounds in general. However, the liberation and consequent reutilization of this nitrogen depends upon the metabolism of ASN. Two enzymes capable of metabolizing ASN are known: Asparagine Transaminase and Asparaginase (ASNase). The presence of ASNase is of extreme importance, in view of its regulatory role in ASN metabolismo such as in this study with immature seeds where the amino acids is degraded in the early stages of development when the demand for nutrients is greater and ativity of the enzyme higher. Two forms of ASNase are know, one depedent and the other independent of potassium. However, the two forms have never been found together in the same tissue. Thirteen species of the genus Crolalaria, a tropical legume, were investigated to determine the form of ASNase present in each species. Based on this study coupled with morphological observations, we found a relationship between the enzyme form and leaf morphology, since the five species that contain the KT dependent ASNase were unifoliate and the remaing K+ independent species were all trifoliate. Using the antibory specific for the K+ independent ASNase of Lupinus pollyphylus, an immunochemical study was carried out in an attempt to establish homologies among the two enzyme forms. This study showed that the antibory reaction was not related to K+ dependence this leads us to suggest that the molecular-binding site for the antibory is not involved in the determination of potassium dependence. We also determined which nitrogenous compouds were present in the xylem juice of these plants, using two treatments that produced nodulated and non-nodulated plants. The levels of ureides and amino acids, nonnally the main fonns of nitrogen found in xylem exudates, were detennined here. The data show that only traces ofureides are found in the transport stream of Crotalaria species, even in nodulated plants where this class of compound is usually found. The data also show that ammo acids are the main forms of nitrogen transport in the Crotalaria species under study. ASN represented more than 50 % of the xylem amino acids. and therefore the main transport compound for nitrogen in these plants. ASP (aspanic acid) was the second most abundant amino acid. This finding reforces the importance of the enzyme ASNase in the metabolism of nitrogen in the developing seed. / Mestrado / Biologia Vegetal / Mestre em Ciências Biológicas

Orientador: Stephen Hyslo / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciências Médicas / Made available in DSpace on 2018-08-03T23:02:24Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Panunto_PatriciaCosta_M.pdf: 4217443 bytes, checksum: db024bfe05cc36116e7a4504728fe778 (MD5) Previous issue date: 2002 / Resumo: O contato com lagartas de mariposas do gênero Lonomia pode resultar em envenenamento grave, com distúrbios da coagulação e hemorragia. Em casos fatais, têm sido associado à falência renal e hemorragia intracerebral. Atualmente a soroterapia com o anti-soro eqüino produzido contra o extrato de cerdas da Lonomia oblíqua é o tratamento mais eficaz para o envenenamento por esta espécie. Neste trabalho, foram produzidos anti-soros em coelhos contra o extrato de cerdas e a hemolinfa e examinou-se sua imunorreatividade usando as técnicas de ELISA ("enzyme-linked immunosorbent assay"), immunoblot e imunoeletroforese. No ELISA, ambos os anti-soros reagiram igualmente com o extrato de cerdas e com a hemolinfa. Esta imunorreatividade era igual a do antisoro comercial. Os três anti-soros também mostraram reatividade semelhante no imunoblot. O fracionamento, por gel filtração, do extrato de cerdas e da hemolinfa, demonstrou que possuem perfis de eluição qualitativa muito semelhantes e que as imunorreatividades das frações com os três anti-soros eram muito parececidas. Todos os anti-soros neutralizaram a atividade coagulante do extrato de cerdas em plasma humano citratado. Estes resultados indicam que o extrato de cerdas da L. oblíqua e hemolinfa compartilham antígenos comuns e que o anti-soro produzido em coelhos e em cavalos reagem igualmente com as amostras biológicas. Os resultados também sugerem que a hemolinfa poderá servir como fonte de antígenos na produção de anti-soro comercial / Abstract: Caterpillars of saturnid moths belonging to the genus Lonomia can cause severe and sometimes fatal envenoming, the main symptoms of which are coagulation disturbances, hemorrhaging, renal failure and intracranial hemorrhaging. The administration of antiserum raised against a spicule extract from Lonomia oblíqua is the only effective treatment for systemic envenomations. In this work, we raised antisera in rabbits against a spicule extract and hemolymph and examined their cross-reactivity by enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA), immunoblotting and immunoelectrophoresis. In ELISA, the rabbit antisera and the commercial antiserum showed similar dilution curves and cross-reactivities with the spicule extract and hemolymph. Considerable similarity was also seen in the immunoblot patterns with ali three antisera. The immunoelectrophoretic profiles were also alike. Fractionation of the spicule extract and hemolymph by gel filtration yielded qualitatively similar elution profiles which cross-reacted extensively with the three antisera. Ali antisera neutralized the coagulant activity of the spicule extract in human citrated plasma. These results indicate that L. oblíqua spicule extracts and hemolymph share many antigens and that antisera raised in rabbits and horses show similar cross-reactivities with these biological samples / Mestrado / Mestre em Farmacologia

Orientador: Ladaslav Sodek / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-07-20T11:51:02Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Aguiar_LeandroFerreirade_M.pdf: 5034669 bytes, checksum: 77a800b524da0fda8c3478ce2fb7fb5c (MD5) Previous issue date: 1995 / Resumo: Não informado. / Abstract: Not informed. / Mestrado / Doutor em Ciências

Made available in DSpace on 2015-07-08T12:28:16Z (GMT). No. of bitstreams: 2 19.pdf: 1524743 bytes, checksum: 66dc844de2718056cd28be5f99663786 (MD5) license.txt: 1748 bytes, checksum: 8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33 (MD5) Previous issue date: 2013 / Fundação Oswaldo Cruz. Instituto Nacional de Controle de Qualidade em Saúde / O glúten é a fração protéica do trigo, cevada, centeio e aveia, a que algumas pessoas são intolerantes. Tal intolerância é conhecida como Doença Celíaca e é caracterizada por atrofia total ou subtotal das vilosidades do intestino delgado proximal e consequentemente, levando à má absorção da grande maioria dos nutrientes em indivíduos geneticamente susceptíveis. O tratamento consiste em dieta isenta de glúten com supressão total e permanente da ingestão desses cereais e seus derivados. O objetivo do estudo foi avaliar a presença de glúten em biscoitos comercializados em estabelecimentos comerciais do município do Rio de Janeiro utilizando duas técnicas: ELISA R5 e PCR; e comparar os resultados encontrados por meio destes métodos com as informações contidas nos rótulos desses alimentos, a fim de verificar a veracidade da rotulagem. Através da técnica de PCR observou-se que das quinze amostras que possuíam a inscrição não contém glúten no rótulo, todas foram positivas para o cereal trigo e que dos quinze biscoitos aqui estudados, todos amplificaram para pelo menos um dos cereais, fato que demonstra uma possível contaminação no processamento de todas as amostras avaliadas com algum dos cereais. Já as amostras rotuladas como contém glúten , as quinze foram positivas para os cereais trigo e cevada. Para o cereal centeio, apenas uma amostra obteve resultado negativo e para a aveia oito amostras obtiveram resultado positivo e sete negativos. Pela técnica ELISA, para biscoitos rotulados com a inscrição não contém glúten , apenas uma amostra (6,67%) obteve resultado distinto a descrição presente no rótulo. Em biscoitos rotulados com a inscrição contém glúten , todos obtiveram resultados positivo para a técnica ELISA. / Gluten is the protein fraction of wheat, barley, rye and oats, some people are intolerant. Such intolerance is known as Celiac Disease and is characterized by total or subtotal atrophy of the villi of the proximal small intestine and consequently leading to bad absorption of most nutrients in genetically susceptible individuals. The treatment consists of a gluten-free diet with total and permanent suppression of ingestion of these cereals. The objective of the study was to evaluate the presence of gluten in snacks sold in commercial establishments in the city of Rio de Janeiro using two techniques: R5 ELISA and PCR, and compare the results using these methods with the information on the labels of these foods, to verify the accuracy of labeling. Through PCR, the fifteen samples that had the inscription "do not contains gluten" on the label, all were positive for wheat, and the fifteen snacks studied here all amplified to at least one of the cereals, which demonstrates a possible contamination in the processing of all samples with some cereals. The samples labeled "gluten-free", all the fifteen were positive for the cereals wheat and barley. For the cereal rye, only one sample had negative results and for oats eight samples had positive results and seven negative. By R5 ELISA for snacks labeled with the inscription "do not contains gluten", only one sample (6.67%) obtained a different result this description on the label. In snacks labeled with the inscription "gluten free", all showed positive results for the ELISA technique. Thus the study found that gluten contamination persists in foods intended specifically for celiac population. Further demonstrated that the presence of gluten, particularly in food labeled as “gluten free” can be evaluated using R5ELISA and still points to the importance of using techniques, such as PCR, to confirm infection and identify which were the contaminants cereals.