Made available in DSpace on 2014-06-12T18:32:28Z (GMT). No. of bitstreams: 2 arquivo8114_1.pdf: 1876927 bytes, checksum: 127c34212ad8cade97feef03b3ca788d (MD5) license.txt: 1748 bytes, checksum: 8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33 (MD5) Previous issue date: 2006 / A Organização Mundial de Saúde recomenda, em países endêmicos para hanseníase, a classificação operacional baseada no número de lesões para alocação do paciente na poliquimioterapia. Nessa classificação são considerados paucibacilares os pacientes com até cinco lesões cutâneas, e multibacilares, aqueles com mais de cinco. O objetivo desse estudo foi validar a classificação operacional admitindo-se como padrão-ouro a baciloscopia de esfregaços da pele. Por meio de estudo prospectivo, tipo validação de testes diagnósticos, foram analisados 154 casos novos de hanseníase, atendidos no Complexo Hospitalar Clementino Fraga, João Pessoa, Paraíba, Brasil, no período de junho a dezembro de 2005. Consideraram-se as características sócio-demográficas, contato prévio com portadores de hanseníase, tempo de início dos sintomas, número e características clínicas das lesões cutâneas, formas clínicas segundo a classificação de Ridley e Jopling e resultado da baciloscopia. Calcularam-se sensibilidade, especificidade, valores preditivo positivo e negativo da classificação operacional e coeficiente de concordância entre as classificações operacional e baciloscópica. Dos 154 casos, 42 pacientes apresentavam baciloscopia positiva e 112, negativa. Das positivas, 16 (38,1%) apresentavam até cinco lesões cutâneas e, das negativas, 12 (10,7%) apresentavam mais de cinco. A sensibilidade, a especificidade, o valor preditivo positivo e o valor preditivo negativo foram 61,9%, 89,3%, 68,4% e 86,2%, respectivamente. A concordância entre as classificações foi significantemente regular (Kappa=0,528 ± 0.080, p<0,001). Concluiu-se que a classificação operacional apresentou limitações que não invalidam sua operacionalidade. Todavia deve ser, sempre que possível, associada a exames complementares como a baciloscopia, visto a possibilidade de sub-tratamento das formas multibacilares infectantes

Made available in DSpace on 2014-08-20T13:33:00Z (GMT). No. of bitstreams: 1 tese_leonardo_garcia_monte.pdf: 839733 bytes, checksum: 46a2c729d1764535d017cab21dde7a45 (MD5) Previous issue date: 2011-12-16 / The development of reagents for infectious disease diagnosis and prevention is strategic for the scientific and technological advance of the country. Promising results have been obtained with the use of magnetic nanocomposites (MNC) in health for several purposes as separation, purification and detection of cells or biomolecules. In this work, an immunomagnetic separation (IMS) method using carbon and cobalt-based (MNCc), synthesized, and other polystyrene and iron-based (MNCp) commercially available was applied, for the isolation and detection of pathogenic leptospires. The MNCc were synthesized through polymeric precursor method and characterized by scanning electron microscopy/transmission (SEM/TEM), X-ray diffractometry (XRD), infrared spectrometry (FTIR), and immunofluorescence (IF). The MNCc surface was functionalized with carboxylic groups through the incorporation of acrylic acid. MNCc, adsorbed with monoclonal antibodies (MAbs) against pathogenic leptospires, were used in the IMS assays followed by PCR and cell culture was able to detect and isolate the organism. MNCp were used for detecting Leptospira spp. in biological fluids from dogs artificially contaminated with leptospires, and clinical samples from dogs positive for leptospirosis. The introduction of IMS, as a step prior to PCR using MNCp, detected a concentration of leptospires ten times smaller when compared to PCR performed directly on artificially contaminated urine and blood samples. Moreover, the IMS performed with MNCp increased PCR sensitivity in clinical samples from dogs positive for leptospirosis. Data from both studies suggest that MNCc and MNCp are important tools for the development of new diagnosis tests. / O desenvolvimento de insumos para o diagnóstico e prevenção de doenças infecciosas é estratégico para o avanço científico e tecnológico do país. Resultados promissores vêm sendo obtidos com o uso de nanocompósitos magnéticos (NCM) aplicados à área da saúde para as mais diversas finalidades, como na separação, purificação e detecção de células ou biomoléculas. Nesse trabalho, um método de imunoseparação magnética (IMS) utilizando NCM a base de carbono e cobalto (NCMc) sintetizados, e outro de poliestireno e ferro (NCMp) disponível comercialmente, foi utilizado para capturar e detectar leptospiras patogênicas. Os NCMc foram sintetizados através do método dos precursores poliméricos e caracterizados por microscopia eletrônica de varredura/transmissão (MEV/MET), difratometria de raio-X (DRX), espectrometria no infravermelho (FTIR) e imunofluorescência (IF). A superfície dos NCMc foi funcionalizada com grupos carboxílicos mediante incorporação de ácido acrílico. Os NCMc adsorvidos com anticorpos monoclonais (MAbs) contra leptospiras patogênicas, quando utilizados em ensaios de IMS seguidos por PCR e cultivo celular, foram capazes de detectar e isolar o organismo. Os NCMp foram utilizados para a detecção de Leptospira spp. em fluidos biológicos de cães artificialmente contaminados com leptospiras e em amostras clínicas de cães positivos para a leptospirose. A introdução da IMS como passo anterior a PCR utilizando os NCMp foi capaz de detectar uma concentração 10 vezes menor de leptospiras quando comparada a PCR realizada diretamente a partir de amostras de urina e sangue artificialmente contaminados. Além disso, a IMS realizada com os NCMp aumentou a sensibilidade da PCR em amostras clínicas de cães positivos para leptospirose. Os dados obtidos em ambos os estudos sugerem que os NCMc e NCMp constituem importantes ferramentas para o desenvolvimento de novos testes de diagnóstico.

Evalúa la efectividad del tratamiento antirretroviral en la transmisión vertical en embarazadas que asistieron al Hospital Martin Icaza en el año 2014. Tiene un enfoque cuantitativo, tipo observacional, de corte transversal y retro-prospectivo. Revisa sistemáticamente las historias clínicas de 40 gestantes con diagnóstico confirmativo de VIH con carga viral, recuento de CD4 atendidas. La seguridad del tratamiento se valora mediante las pruebas bioquímicas del perfil hepático y sanguíneo, la eficacia mediante las pruebas de determinación de carga viral para evidenciar la transmisión vertical. Para el análisis de datos demográficos se utiliza las estadísticas descriptivas y para determinar efectividad, seguridad y adherencia las pruebas no paramétrica de Rho Sperman, Kolmogorov-Smirnov, para el análisis se trabaja con un intervalo de confianza del 95%. Encuentra que 72% reportó valores de carga viral menor a 20 copias. El 63% de las gestantes presenta valores de CD4 mayor a 500. Todas recibieron TARGA en los dos esquemas; TENOFOVIR + ENTRACITAVINA + EFAVIRENZ en el 82.5%; mientras que con el esquema de inhibidores de proteasas son el 17.5%, durante el parto sólo una gestante no tuvo profilaxis con AZT. En la eficacia del TARGA no hubo transmisión vertical postparto. Los niños y niñas fueron normales física y clínicamente. La adherencia al TARGA categoriza a las gestantes en cumplidoras al 95% con una actitud positiva al medicamento. Concluye que la efectividad y seguridad del TARGA en la reducción del riesgo de transmisión vertical de las gestantes al producto fue del 100%, con una adherencia y cumplimiento del tratamiento del 95%, con una actitud positiva de beneficio para su bebe y para ellas. / Tesis

Evalúa el desempeño de la prueba rápida dual SD Bioline VIH/sífilis en población de alto riesgo en Lima, Perú y su factibilidad de uso por parte de los profesionales de salud. Un total de 415 participantes entre ellos hombres que tenían sexo con hombres, mujeres trans y trabajadoras sexuales fueron reclutados en dos centros de salud del Callao y Barranco entre julio del 2013 y marzo del 2014. Se utiliza una muestra de sangre total para la evaluación del desempeño de la prueba y suero para las pruebas de referencia para VIH y sífilis. Se entrevista a profesionales de salud sobre las características operacionales de la prueba, orientadas a su factibilidad de uso. La prueba rápida dual SD Bioline VIH/sífilis tiene una sensibilidad de 99.1% (95% IC:94.8, 100.0) y una especificidad de 99.4 % (95 % IC: 97.7, 99.9) para el serodiagnóstico del VIH y una sensibilidad de 89.2% (95% IC: 83.5, 93.5) y una especificidad de 98.78% (95% IC: 96.5, 99.8) para el serodiagnóstico de sífilis. La prueba rápida dual es bien aceptada, con instrucciones de la prueba excelentemente claras, y muy fáciles de usar. Entre los beneficios de la utilización de la prueba dual, destan el ahorro de tiempo y reducción de errores operacionales. / Tesis

Evalúa la efectividad del tratamiento antirretroviral en la transmisión vertical en embarazadas que asistieron al hospital Martin Icaza en el año 2014. Es una investigación de enfoque cuantitativo, tipo observacional, de corte transversal, retro-prospectivo. Revisa las historias clínicas de 40 gestantes con diagnóstico confirmativo de VIH con carga viral, recuento de CD4. La seguridad del tratamiento se valoró mediante las pruebas bioquímicas del perfil hepático y sanguíneo, la eficacia mediante las pruebas de determinación de carga viral para evidenciar la transmisión vertical. Determina la adherencia mediante una entrevista y el llenado de un cuestionario. Utiliza estadísticas descriptivas para el análisis de datos demográficos y las pruebas no paramétrica de Rho Sperman, Kolmogorov-Smirnov para determinar efectividad, seguridad y adherencia, trabaja con un intervalo de confianza del 95%. Encuentra que el 72% reporta valores de carga viral menor a 20 copias. El 63% de las gestantes presenta valores de CD4 mayor a 500. Todas recibieron TARGA en los 2 esquemas; TENOFOVIR + ENTRACITAVINA + EFAVIRENZ en el 82.5%; mientras que con el esquema de inhibidores de proteasas fueron el 17.5%, durante el parto sólo una gestante no tuvo profilaxis con AZT. En la eficacia del TARGA no hubo transmisión vertical postparto. Los niños y niñas son normales física y clínicamente. La adherencia al TARGA categoriza a las gestantes en cumplidoras al 95% con una actitud positiva al medicamento. Concluye que la efectividad y seguridad del TARGA en la reducción del riesgo de transmisión vertical de las gestantes al producto es del 100%, con una adherencia y cumplimiento del tratamiento del 95%, con una actitud positiva de beneficio para la madre y el bebe. / Tesis

Submitted by Amauri Alves (amauri.alves@ufv.br) on 2015-11-04T12:14:30Z No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 583903 bytes, checksum: 2502ab1ef4041967c288e1621742e282 (MD5) / Made available in DSpace on 2015-11-04T12:14:30Z (GMT). No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 583903 bytes, checksum: 2502ab1ef4041967c288e1621742e282 (MD5) Previous issue date: 2015-02-27 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / Neste estudo foram analisadas 100 amostras de sangue de cães com trombocitopenia importante (plaquetas < 100.000/μL), oriundas da rotina laboratorial de atendimento do Hospital Veterinário da Universidade Federal de Viçosa (UFV), Viçosa, Minas Gerais. Todas as amostras de sangue foram submetidas ao analisador hematológico automático, à confecção de esfregaços sanguíneos de sangue total, à capa de leucócitos e à técnica de centrifugação por gradiente de densidade. Além disto, as amostras foram submetidas à extração de DNA e posteriormente à reação em cadeia da polimerase (PCR), para o diagnóstico molecular de Ehrlichia spp., Hepatozoon sp., Babesia spp., Anaplasma spp. e Leishmania spp. Os resultados da PCR confirmaram amostras positivas para Ehrlichia spp. (69%), Hepatozoon sp. (25%), Babesia spp. (16%) e Anaplasma platys (4%), com alguns animais apresentando até três patógenos em coinfecção. Verificou-se ainda estreita relação entre a ocorrência da trombocitopenia e erliquiose e a alta frequência de coinfecções. A centrifugação por gradiente de densidade mostrou-se bastante sensível na identificação do Hepatozoon canis, com resultados superiores aos das técnicas tradicionais (esfregaço sanguíneo e capa de leucócitos) e concordância substancial com a PCR. Foram observadas diferenças significativas nos parâmetros sanguíneos entre os animais com e sem hematozoários, como a presença de desvio nuclear de neutrófilos à esquerda maior nos animais positivos para Babesia spp. e alterações no volume plaquetário médio e PDWc nos animais com erliquiose. No sequenciamento realizado, identificou-se a presença de várias espécies, incluindo Ehrlichia canis, Ehrlichia chaffeensis, Hepatozoon canis, Babesia canis vogeli, Anaplasma platys, Anaplasma phagocytophilum e Rangelia vitalii, sendo os patógenos Ehrlichia chaffeensis e Anaplasma phagocytophilum relacionados a infecções em humanos. / In this study we analyzed blood samples from 100 dogs with important thrombocytopenia (Platelets < 100.000/μL), of the routine care of the Veterinary Hospital from Universidade Federal de Viçosa (UFV). All Samples were processed on automated hematology analyzer and subjected to analysis of their blood smears, buffy coat, and the density gradient centrifugation technique. In addition, samples were subjected to procedure for DNA extraction and subsequent polymerase chain reaction (PCR) to Ehrlichia spp., Hepatozoon sp., Babesia spp., Anaplasma spp. and Leishmania spp. The PCR results confirmed positive samples to Ehrlichia spp. (69%), Hepatozoon sp. (25%), Babesia spp. (16%) and Anaplasma platys (4%), with some animals having up to three concomitant pathogens. We also found a close relationship between the occurrence of thrombocytopenia and ehrlichiosis and the high frequency of coinfection. The density gradient centrifugation showed to be more sensitive at detecting Hepatozoon canis than traditional tecniques (blood smears, buffy coat) and the results are in agreement to those by PCR. Significant differences were observed in blood parameters between animals with and without hemoparasite, such as presence of a nuclear deviation of neutrophils on the left bigger in positive animals for Babesia spp. and changes in mean platelet volume and PDWc in animals with ehrlichiosis. In the sequencing performed we identified the presence of several species, including Ehrlichia canis, Ehrlichia chaffeensis, Hepatozoon canis, Babesia canis vogeli, Anaplasma platys, Anaplasma phagocytophilum and Rangelia vitalii, being the Anaplasma phagocytophilum and Ehrlichia chaffeensis related pathogens infections in humans.

Streptococcus pneumoniae é a maior causa de doenças infecciosas invasivas. As vacinas conjugadas, ao contrário das vacinas polissacarídicas, se mostram eficazes na indução de uma resposta protetora em crianças menores de 2 anos de idade. Entretanto, apesar do sucesso na redução dos casos de doenças pneumocócicas, publicações recentes têm mostrado um aumento nos casos de doença por sorotipos de S. pneumoniae não inclusos nas vacinas conjugadas atualmente licenciadas. Com o objetivo de evitar a substituição dos sorotipos prevalentes e aumentar a cobertura vacinal, nosso projeto prevê a introdução de uma proteína de superfície do pneumococo como carreador em uma vacina conjugada. A Proteína de Superfície Pneumocócica A (PspA), por ser conservada entre diversos sorotipos e por sua alta imunogenicidade, foi escolhida para constituir o conjugado, juntamente com o Polissacarídeo Capsular de S. pneumoniae sorotipo 6B (PS6B), um sorotipo de elevada prevalência no Brasil. Também foi avaliada a influência de diferentes espaçadores entre a proteína carreadora e o PS sobre a resposta imune induzida. Estudos envolvendo diferentes condições reacionais tiveram como objetivo o estabelecimento de um protocolo de conjugação com elevado rendimento. A substituição do ativador EDAC (hidrocloreto de 1-[3-(dimetilamino)propil]-3-etilcarbodiimida), comumente empregado na ativação do grupo carboxila da proteína, pelo DMT-MM (cloreto de 4-(4,6-dimetoxi-1,3,5-triazin-2-il)-4-metilmorfolino) foi capaz de aumentar significativamente o rendimento reacional, o qual passou de menos de 10% para aproximadamente 50%. A proteção com formaldeído dos grupos lisinas da PspA aumentou a especificidade da reação de conjugação, com consequente aumento no rendimento reacional. A PspA modificada manteve a mesma estrutura secundária apresentada pela PspA nativa (análise por dicroísmo circular - CD) bem como sua imunogenicidade (título de anticorpos, capacidade de deposição de complemento e atividade opsonofagocítica). Apesar das análises por CD mostrarem que a conjugação alterou a estrutura secundária da PspA, ensaios imunológicos mostraram que essa desestruturação não afetou a sua capacidade de induzir uma resposta imune protetora. A resposta anti-PspA e anti-PS6B induzida pelo conjugado mostrou-se dose dependente, muito embora o PS6B tenha se comportado como um antígeno pouco imunogênico. / Streptococcus pneumoniae is the main cause of invasive infectious diseases. Unlike polysaccharide (PS) based vaccines, conjugate vaccines have shown to protect children less than 2 years old. However, regardless of the success in reducing pneumococcal disease, recent reports have shown an increase in the rate of disease caused by serotypes not included in licensed conjugate vaccines. In order to avoid serotype replacement, our project proposes to test a surface exposed pneumococcal protein as carrier. Pneumococcal Surface Protein A (PspA), a conserved protein among various serotypes, and highly immunogenic was chosen to take part in the conjugate together with the Polysaccharide Serotype B of Streptococcus pneumoniae (PS6B), a serotype of high incidence in Brazil. In this sense, studies involving different reactional conditions were aimed at stablishing a high yield conjugation protocol. Also, the influence of different spacer between carrier protein and polysaccharide were evaluated on immune response. The replacement of EDAC (1-ethyl-3-[3-dimethylaminopropyl] carbodiimide hydrochloride), usually used in the activation of protein carboxyl groups, to DMT-MM (4-[4,6-Dimethoxy-1,3,5-triazin-2-yl]-4-methylmorpholinium chloride), was able to significantly increase the reactional yield from less than 10% to approximately 50%. The protection of lysines groups of PspA with formaldehyde increased conjugation specificity, with subsequent increase in reactional yield. Modified PspA maintained the same secondary structure of native PspA (circular dichroism analyses - CD) as well as its immunogenicity (antibody titers, deposition of complement and opsonophaghocytic activity). Despite circular dichroism analyses have shown changes in PspA secondary structure, immunological tests proved that this alteration did not affect its ability in inducing a protective immune response. Anti-PspA and anti-PS6B responses proved to be dose dependent, although PS6B acted as a poor immunogenic antigen in mice.

Os objetivos deste trabalho foram: verificar a ocorrência de esquistossomose e a distribuição dos focos de transmissão em dois municípios, Aparecida e Roseira, com características sócioambientais distintas, localizados no Vale do Paraíba, Estado de São Paulo, e comparar os dados entre si e com os obtidos nos últimos dez anos. Fatores ambientais, climáticos, demográficos e sociais foram identificados e associados ao perfil da doença. Dados epidemiológicos relativos à esquistossomose foram obtidos a partir dos relatórios da Superintendência de Controle de Endemias (SUCEN) e índices pluviométricos e de temperatura foram organizados a partir da plataforma de coleta de dados da Escola de Especialistas de Aeronáutica. A análise dos coeficientes de prevalência, entre 1995 e 2004, mostrou queda do número de casos nos dois municípios. Intensa pressão de urbanização foi observada, tendo sido identificados como urbanos 100% dos casos de Aparecida, e 74% dos casos em Roseira. Os indivíduos na faixa etária de 21 a 25 anos foram os mais atingidos e quanto ao sexo, a predominância foi entre os do sexo masculino. Com relação ao contato com águas naturais, os locais mais citados foram: áreas de várzeas, rio Paraíba do Sul, valetas. Foram identificadas e comparadas, em dois momentos no decorrer do estudo, 1995 e 2004, as áreas consideradas de risco para transmissão da esquistossomose, analisando-as quanto às alterações ambientais ocorridas e verificando-se potenciais focos ainda existentes. Associação entre prevalência da doença e índices pluviométricos e de temperatura não foi significativa. A redução dos casos de esquistossomose podem estar associados a: mudança de hábitos da população, mecanização da cultura de arroz, mudança no tipo de lavoura e substituição da lavoura por pastagens. Apesar da melhoria das condições de saneamento básico, ambos os municípios continuam com potencial de transmissão da esquistossomose. / This study had as objectives: to verify the occurrence of schistosomiasis and the distribution of the transmission foci in two cities, with distinct social and environmental characteristics, Aparecida and Roseira, located in the Valley of the Paraíba river, Sao Paulo State, Brazil, and to compare the data between them and with the ones obtained in the last ten years. Environmental, climatic, demographic and social factors were identified and associated to the profile of the disease. Epidemiological data related to schistosomiasis were obtained from the reports of the Superintendence for the Control of Endemic Diseases (SUCEN) and the meteorological conditions, related to rain fall and temperature, were organized from the data collection platform of the of School for Aeronautic Specialists. The analysis of the prevalence coefficients, between 1995 and 2004, showed fall in the number of cases in both municipalities. Intense urbanization pressure is observed, having been identified as urban 100% of the cases from Aparecida, and 74% of the cases from Roseira. The male group was more infected than female, and the age group of 21 to 25 years old was the most infected one. With relation to the contact with natural waters, the most cited places were: holm and drains areas and the Paraíba do Sul river. Some risk areas were identified and compared at two moments during the study, 1995 and 2004, and than analyzed according to environmental alterations. The occurrence of schistosomiasis does not seem to be associated to the rain fall nor temperature variations. The reduction of schistosomiasis cases can be associated to: changing on population habits, mechanization of the rice culture, changing on the type of farming or substitution for pasture areas. Despite the improvement of the basic sanitation conditions, both cities continue to have potential for schistosomiasis transmission.

El documento digital no refiere asesor. / Determina los factores asociados que predicen RAFA hepático en pacientes del programa de control de TBC atendidos en el Hospital Nacional Dos de Mayo en el periodo 2009-2013. La investigación es de tipo observacional, de diseño analítico, retrospectivo y de corte transversal. Se estudió a 60 pacientes del Programa de control de TBC atendidos en el Hospital Nacional Dos de Mayo en el periodo 2009-2013, solo 20 de ellos con RAFA hepático. Se utilizó una significancia del 5%, para relacionar las variables se usó la prueba chi-cuadrado y para medir el riesgo se utilizó el Odds Ratio. La frecuencia de RAFA hepático en el programa de control de TBC durante el periodo 2009 a 2013 fue de 20 casos. Los grados de severidad de RAFA hepático más frecuentes fue el nivel leve (50%), mientras que el 40% fue modera y sólo un 10% fue severo. Las características sociodemográficas como la edad y el sexo no presentaron asociación significativa (p>0.05) al RAFA hepático. Los factores clínicos asociados al RAFA hepático fueron la infección por VIH (OR=6.3; 1.1-36.3) dado que se presenta en un 25% y 5% de los pacientes con y sin RAFA hepático respectivamente, otro factor de riesgo fue el consumo de alcohol (OR=3.16; 1.01– 9.9) donde se observó 70% y 42,5% de pacientes con y sin RAFA hepático respectivamente. Entre los factores bioquímicos se encontró a la albúmina (OR=3.1; 1.02-9.5) (p=0.042) dado que la mayoría (60%) de los que tenían albumina alterada fueron de pacientes con RAFA hepático y sólo una minoría (32.5%) no presentaban RAFA hepático. Respecto a los factores mínimos que predigan RAFA hepático en pacientes del Programa de control de TBC, se encontró a la edad mayor a 35 años, índice de masa corporal y la infección por VIH. Se concluye que los factores de riesgo del RAFA hepático fueron la infección por VIH, consumo de alcohol y la albumina alterada. Los factores predictivos fueron la edad mayor a 35 años, índice de masa corporal y la infección por VIH. / Trabajo de investigación

Los avances científicos permiten brindar una mejor calidad de vida a la población. El Perú ha crecido en las últimas décadas y cuenta con profesionales capacitados en investigación, por ello actualmente se ha comenzado a invertir en las ciencias, lo cual permite que investigadores peruanos trabajen por el bienestar de peruanos. A pesar de la buena intención, aún no se cuenta con laboratorios suficientes y adecuados surgiendo así la idea del proyecto de tesis de grado “Laboratorio de investigación de enfermedades infecciosas”. / Tesis