La prévalence de l’obésité et du diabète de type 1 (DT1) s’accroit dans le monde à une vitesse alarmante. L’augmentation du poids corporel, de la quantité d’acides gras libres (AGL) circulant et de la résistance à l’insuline peut induire un stress du réticulum endoplasmique (RE) dans les cellules beta du pancréas, ce qui pourrait favoriser l’inflammation. Afin de tester cette hypothèse, nous avons exposé des cellules beta à un léger stress chronique du RE induit par de l’acide ciclopiazonique (ACP) ou l’AGL palmitate et les avons ensuite traitées avec une faible dose d’interleukine 1β (IL-1β) ou de facteur de nécrose tumorale (TNF-α). L’addition d’IL- 1β, mais pas de TNF-α, a conduit à l’augmentation de la production de marqueurs pro-inflammatoires et de chimiokines. Cette différence de résultat en fonction de l’exposition à l’IL-1β ou au TNF-α peut-être au moins partiellement expliquée par un usage différentiel du complexe de la kinase IκB (IKK) et de la voie du facteur nucléaire κ-B (NF-κB), menant à terme à une activation plus élevée par l’IL-1β en comparaison à TNF-α. L’analyse des branches de la réponse de la protéine dépliée impliquées a révélé que la voie de l’Inositol-requiring enzyme 1 (IRE1) / X-box binding protein 1 spliced (XBP1s) est le médiateur clé dans le couplage avec la réponse inflammatoire déclenchée par l’IL-1β. En effet, le knockdown d’IRE1 ou de XBP1 a permis d’éviter l’exacerbation de l’activité du promoteur NF-κB et l’expression des gènes cibles de NF-κB. Les mécanismes impliqués dans la régulation XBP1-dépendante de la réponse pro-inflammatoire sont partiellement dépendant de la modulation de la Forkhead box O1 (FoxO1). Le stress du RE et l’IL-1β participent aussi à un autre évènement crucial dans le développement du DT1, à savoir la mort progressive des cellules beta, qui est également exacerbée par la combinaison ACP + IL-1β. Contrairement à l’inflammation, la voie IRE1/XBP1 n’est pas impliquée dans l’apoptose cellulaire induite par la combinaison d’ACP et d’IL-1β. Dans ce contexte, nous suggérons que le devenir de la cellule est décidé par la balance entre les protéines Bcl-2 anti-apoptotiques et pro-apoptotiques. Ainsi, nous avons montré que le gène A1 associé à Bcl-2 (A1) est négativement régulé par le stress du RE tandis que l’IL-1β active la protéine BH3-only Bim, aboutissant à une apoptose accrue des cellules beta. En conclusion, nos données suggèrent que le stress du RE est un facteur sensibilisation pour l’induction de l’inflammation des ilots pancréatiques et de l’apoptose des cellules beta. Ceci pourrait fournir une explication mécanistique à l’augmentation parallèle observée de l’obésité infantile et de la fréquence du DT1.\ / Doctorat en Sciences biomédicales et pharmaceutiques / info:eu-repo/semantics/nonPublished

Le diabète de type I est la maladie chronique la plus grave de l'enfance. L'alimentation saine et équilibrée constitue la pierre angulaire du traitement de cette maladie (Delamater, 2000). Or, au quotidien, plus de 60 % des adolescents diabétiques ne parviennent pas à suivre leur plan alimentaire (Rapoff & Barnard, 1991). Devant la gravité des conséquences physiques et psychologiques qu'entraîne la mauvaise gestion alimentaire, la présente thèse a pour objectif général de décrire et de comprendre les facteurs contextuels et motivationnels qui contribuent à l'observance. S'appuyant sur un cadre théorique reconnu, la théorie de l'autodétermination (Deci & Ryan, 1985, 2002), cette thèse vise la validation d'un modèle motivationnel de l'observance chez les adolescents diabétiques. Le modèle propose que le soutien des parents et des professionnels de la santé favorise chez les adolescents des facteurs motivationnels optimaux, c'est-à-dire une motivation autonome et une perception d'efficacité personnelle élevée, lesquels facilitent leur observance du plan alimentaire. Trois articles découlent de cette thèse. Un premier présente les statistiques descriptives de l'ensemble des variables proposées dans le modèle, et ce, en accordant une attention particulière à la description des recommandations médicales reçues et observées par les adolescents, de même qu'à la qualité de leur motivation et de leur équilibre glycémique. Un deuxième article teste l'ensemble des liens postulés dans le modèle à l'aide d'un devis transversal. Précisément, il examine dans quelle mesure les facteurs contextuels (soutien à l'autonomie de la part des parents et des professionnels de la santé) et motivationnels (qualité de la motivation et perception d'efficacité personnelle) expliquent les relations observées entre les facteurs immuables (genre, âge, durée de vie avec le diabète) et l'observance. Un troisième article examine, sur une période de 24 mois, la direction des liens postulés dans le modèle motivationnel. Les résultats découlant de ces articles offrent un soutien satisfaisant au modèle proposé. La discussion générale de la thèse se centre sur les apports méthodologiques, pratiques et théoriques de ces résultats. Des pistes de recherches futures y sont également proposées, et ce, afin d'améliorer l'avancement des connaissances sur l'observance du plan alimentaire chez les adolescents diabétiques de type I.

Cette étude visait à déterminer le risque de fracture associé aux thiazolidinédiones (TZD) et à explorer le risque de fracture associé aux autres antidiabétiques oraux (ADO) chez des personnes âgées de 66 ans ou plus. Une étude cas-témoins imbriquée dans une cohorte a été menée en utilisant les données de la Régie d'assurance maladie du Québec (RAMQ). La population à l'étude était constituée des bénéficiaires de la RAMQ de 66 ans et plus ayant débuté un traitement ADO entre le 1/1/1998 et le 31/12/2003. Le risque de fracture selon les classes d'ADO a été mesuré par régression logistique conditionnelle multivariée. Parmi les 59 345 personnes de la cohorte, 3 914 ont eu une fracture et 19 434 témoins leur ont été appariés. L'exposition à une TZD a été associée à une augmentation du risque de fracture ostéoporotique [Re ajusté = 1,38 (IC 95%, l, Il - 1,72)]. L'exposition à aucun autre ADO n'a été associée à une telle augmentation. Lors du traitement pharmacologique du diabète de type 2 chez les aînés, le risque de fracture associé à une exposition aux TZD devrait être pris en considération.

La pierre angulaire du traitement pour le diabète de type 2 est le suivi d'un plan alimentaire. Ceux qui ne le suivent pas parviennent difficilement à contrôler leur glycémie et sont donc plus à risque de développer des complications de santé. Cette composante du traitement est très exigeante et elle représente une source de stress importante pour les diabétiques. Des résultats d'études montrent que des facteurs comme le soutien à l'autonomie de la part des professionnels de la santé, la motivation à suivre le plan alimentaire et les stratégies d'adaptation utilisées par la personne diabétique pour faire face au stress sont d'importants déterminants du degré d'observance de son plan alimentaire. Or, à ce jour, aucune recherche n'a tenté de comprendre comment la motivation des personnes atteintes du diabète est reliée aux stratégies d'adaptation qu'elles utilisent pour faire face au stress, et vice versa. Aussi, aucune étude n'a évalué la possibilité que le soutien fourni par des professionnels de la santé ainsi que la motivation et les stratégies d'adaptation des personnes souffrant du diabète ont une influence l'un sur l'autre. Enfin, bien qu'à ce jour les résultats de recherche montrent que plus la personne diabétique est motivée de manière autodéterminée, plus elle observe son plan alimentaire, aucune étude n'a vérifié si ce n'est pas plutôt le fait d'observer son plan alimentaire qui amène la personne qui souffre du diabète à être motivée de manière autodéterminée. L'objectif général de la thèse est d'évaluer s'il existe des relations réciproques entre la motivation, les stratégies d'adaptation, les perceptions de soutien à l'autonomie des professionnels de la santé et l'observance au plan alimentaire. Au total, 365 adultes atteints du diabète de type 2 ont participé à l'étude longitudinale. Les résultats des analyses par équations structurelles montrent une relation réciproque entre la motivation autodéterminée envers le plan alimentaire et le recours aux stratégies de résolution de problèmes. Ils montrent aussi que plus l'individu est motivé de manière autodéterminée, plus grand est son degré d'observance un an plus tard. Les implications théoriques et pratiques des résultats sont discutées à la lumière de la théorie de l'autodétermination et de la perspective des stratégies d'adaptation (coping).

L'objectif principal de cette étude était de mieux connaître les caractéristiques aussi bien anthropométriques que métaboliques et le profil alimentaire des personnes diabétiques de type 2 au Mali, afin de contribuer à l'amélioration de leur prise en charge alimentaire. La collecte des données s'est déroulée à Bamako de mai à octobre 2005. Nous avons effectué une enquête nutritionncllc et alimentaire en mettant l'emphase sur les apports en protéines. L'analyse des données a permis de mettre en évidence les disparités entre les apports alimentaires de ces femmes et de ces hommes diabétiques et l'importance des facteurs nutritionnels en tant que déterminants du contrôle métabolique des personnes diabétiques de type 2 au Mali. Aussi, l'étude de consommation des sources protéiques de ces sujets diabétiques a permis de montrer que le questionnaire de fréquence alimentaire quantitatif développé dans cette étude était un outil valide pour la quantification et la caractérisation des apports en protéines. Cette étude a aussi mis en évidence les faibles apports en protéines des hommes et des femmes diabétiques et les différences dans les choix et les quantités des aliments sources de protéines selon le sexe. Par ailleurs, cette étude a permis également le développement et la validation d'une méthode, le système Malien d'échanges des aliments, qui pourra servir soit d'outil d'éducation ou d'évaluation nutritionnelle rapide. Enfin, les analyses sur les croyances et les pratiques des participants ont permis de montrer les perceptions et pratiques alimentaires de ces personnes atteintes de diabète de type 2 et la nécessité d'améliorer leur prise en charge sur le plan nutritionnel.

The endoplasmic reticulum (ER) is the organelle responsible for synthesis and folding of secreted and membranous protein and lipid biosynthesis. It also functions as one of the main cellular calcium stores. Pancreatic beta-cells evolved to produce and secrete insulin upon demand in order to regulate blood glucose homeostasis. In response to increases in serum glucose, insulin synthesis represents nearly 50% of the total protein biosynthesis by beta-cells. This poses an enormous burden on the ER, rendering beta-cells vulnerable to agents that perturb ER function. Alterations of ER homeostasis lead to accumulation of misfolded proteins and activation of an adaptive response named the unfolded protein response (UPR). The UPR is transduced via 3 ER transmembrane proteins, namely PERK, IRE-1 and ATF6. The signaling cascades activated downstream of these proteins: a) induce expression of ER resident chaperones and protein foldases. Increasing the protein folding capacity of the ER; b) attenuate general protein translations which avoids overloading the stressed ER with new proteins; c) upregulate ER-associated degradation (ERAD) genes, which decreases the unfolded protein load of the ER. In severe cases, failure by the UPR to solve the ER stress leads to apoptosis. The mechanisms linking ER stress to apoptosis are still poorly understood, but potential mediators include the transcription factors Chop and ATF3, pro-apoptotic members of the Bcl-2 familly, the caspase 12 and the kinase JNK. <p>Accumulating evidence suggest that ER stress contributes to beta-cell apoptosis in both type 1 and type 2 diabetes. Type 1 diabetes is characterized by a severe insulin deficiency resulting from chronic and progressive destruction of pancreatic beta-cells by the immune system. During this autoimmune assault, beta-cells are exposed to cytokines secreted by the immune cells infiltrating the pancreatic islets. Our group has previously shown that the pro-inflamatory cytokines interleukin-1beta (IL1-beta and interferon-gamma (IFN-gamma), via nitric oxide (NO) formation, downregulate expression and function of the ER Ca2+ pump SERCA2. This depletes beta-cell ER Ca2+ stores, leading to ER stress and apoptosis. Of note, IL1-beta alone triggers ER stress but does not induce beta-cell death, while IFN-gamma neither causes ER stress nor induces beta-cell death. Together, these cytokines cause beta-cell apoptosis but the mechanisms behind this synergistic effect were unknown.<p>Type 2 diabetes is characterized by both peripheral resistance to insulin, usually as a result of obesity, and deficient insulin secretion secondary to beta cell failure. Obese patients have high levels of circulating free fatty acids (FFA) and several studies have shown that the FFA palmitate induces ER stress and beta-cell apoptosis.<p>In the present work we initially established an experimental model to specifically activate the ER stress response in pancreatic beta-cells. For this purpose, insulinoma cells (INS-1E) or primary rat beta-cells were exposed to the reversible chemical SERCA pump blocker cyclopiazonic acid (CPA). Dose-response and time course experiments determined the best conditions to induce a marked ER stress without excessive cell death (<25%).<p>The first goal of the work was to understand the synergistic effects of IL1-beta and IFN-gamma leading to pancreatic beta-cell apoptosis. Our group previously observed, by microarray analysis of primary beta-cells, that IFN-gamma down-regulates mRNAs encoding for some ER chaperones. Against this background, our hypothesis was that IFN-gamma aggravates beta-cell ER stress by decreasing the ability of these cells to mount an adequate UPR. To test this hypothesis, we investigated whether IFN-gamma pre-treatment augments CPA-induced ER stress and beta cell death. The results obtained indicated that IFN-gamma pre-treatment potentiates CPA-induced apoptosis in INS-1E and primary beta-cells. This effect was specific for IFN-gamma since neither IL1-beta nor a low dose CPA pre-treatment potentiated CPA-induced apoptosis in INS-1E cells. These effects of IFN-gamma were mediated via the down regulation of genes involved in beta cell defense against ER stress, including the ER chaperones BiP, Orp150 and Grp94 as well as Sec61, a component of the ERAD pathway. This had functional consequences as evidenced by a decreased basal and CPA-induced activity of a reporter construct for the unfolded protein response element (UPRE) and augmented expression of the pro-apoptotic transcription factor Chop. <p>We next investigated the molecular regulation of the Chop gene in INS-1E cells in response to several pro-apoptotic and ER stress inducing agents, namely cytokines (IL1-beta and IFN-gamma), palmitate, or CPA. Detailed mutagenesis studies of the Chop promoter showed differential regulation of Chop transcription by these compounds. While cytokines (via NO production)- and palmitate-induced Chop expression was mediated via a C/EBP-ATF composite and AP-1 binding sites, CPA induction required the C/EBP-ATF site and the ER stress response element (ERSE). Cytokines, palmitate and CPA induced ATF4 protein expression and further binding to the C/EBP-ATF composite site, as shown by Western blot and EMSA experiments. There was also formation of distinct AP-1 dimers and binding to the AP-1 site after exposure to cytokines or palmitate. <p>\ / Doctorat en Sciences biomédicales et pharmaceutiques / info:eu-repo/semantics/nonPublished