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Avaliação visceral da técnica sorológica para Leishmaniose visceral e doença de Chagas em animais silvestres e identificação molecularTenório, Michely da Silva [UNESP] 30 July 2015 (has links) (PDF)
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000863716.pdf: 3896142 bytes, checksum: 956d75511f2ff2d224cbafdf08facf84 (MD5) / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / Animais silvestres são importantes fontes de infecção de leishmanioses e doença de Chagas, para espécies domésticas e o homem. A PCR com emprego de iniciadores da região ITS1 associando-se clonagem e seqüenciamento de DNA alvo permite caracterizar espécies parasitas. Pelo uso de imunorreagentes específicos também possibilitam a investigação da infecção natural entre diferentes espécies de animais silvestres para ambas enfermidades. Foram avaliados isolados flagelares em meio LIT (hemocultura) de 103 animais procedentes do Centro de Conservação da Fauna Silvestre de Ilha Solteira/SP e 118 amostras de soros. Em ensaios imunoenzimáticos utilizaram-se as proteínas recombinantes CRA e FRA de Trypanosoma cruzi e rK39 de Leishmania infantum. Conjugados espécie-específicos foram produzidos para diferentes espécies e empregados no teste de ELISA indireto e a proteína A conjugada foi avaliada para testes sorológicos com emprego da rK39. Soros de cães reagentes para leishmaniose visceral e de humanos para doença de Chagas foram testados para verificar a reatividade contra estas proteínas. Observou-se na hemocultura, flagelados para as seguintes espécies de vida livre: cotia, gambá e tatu-galinha; espécie em cativeiro: bugio-preto. Produtos foram amplificados pela PCR (585 pb) a partir de hemocultura em animais de vida livre e de um animal em cativeiro (650 pb) em amostra de sangue total. Os amplificados foram inseridos em vetor de clonagem e sequenciados resultando-se em 97% de similaridade com T. cruzi para gambá e cotia (acesso nº: AF362825.1) e tatu-galinha (acesso nº: GQ258720.1) com 98%. No isolado de bugio-preto houve 90% de similaridade com T. minasense (acesso nº: AB362411.1). Estes resultados apresentam o primeiro relato destas espécies parasitárias de importância epidemiológica na área de estudo e demonstraram vantagem ao associar-se a hemocultura às técnicas moleculares para caracterização de... / Wild animals are important sources of infection of leishmaniasis and Chagas disease to domestic animals and humans. The employment of PCR with ITS1 primers plus cloning and sequencing target DNA allows to characterize parasitic species. By using specific immunoreagents also enable investigation of natural infection between different species of wild animals for both diseases. Flagellate isolates in LIT medium (blood culture) were assessed of 103 animals coming from the Wildlife Conservation Center of Ilha Solteira -SP and 118 serum samples. In immunoassays, recombinant proteins CRA and FRA fromTrypanosoma cruzi and rK39 from Leishmania infantum were used. Species -specific conjugates were produced for different animal species and used in indirect ELISA and the protein A conjugate was evaluated for serological tests with use of rK39. Sera from dogs reagents for visceral leishmaniasis and for humans reagents for Chagas disease were tested for reactivity against these proteins. Flagellate protozoa were observed in LIT culture medium, at the following free-living species: common agouti (D. agouti), white-eared opossum (D. albiventris) and nine-banded armadillo (D. novemcinctus); and from a captive black howler monkey (A. caraya). Products were amplified by PCR (585bp) from blood culture in wild animals and from an animal in captivity (650bp) in whole blood sample. The amplified products were inserted into cloning vector and sequenced resulting in 97% similarity with T. cruzi to white-eared opossum an common agouti (acess number: AF 362825.1) and 98% to nine-banded armadillo (acess number: GQ 258720.1). The isolated from black howler monkey was 90% similar to T. minasense (acess number: AB 362411.1). The results present the first report of these parasitic species of epidemiological importance in the studied area and demonstrated advantage in the association of blood culture to molecular techniques to characterize flagellates. For ...
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Distribuição espacial da Leishmaniose visceral no estado de São Paulo, Brasil, no período de 1970 a 2014 /Paula, Eric Mateus Nascimento de. January 2016 (has links)
Orientador: Adolorata Aparecida Bianco Carvalho / Coorientador: Raphaella Barbosa Meireles Bartoli / Banca: Cáris Maroni Nunes / Banca: luiz Augusto do Amaral / Resumo: Atualmente, no Brasil, a leishmaniose visceral (LV) é classificada como uma enfermidade reemergente, em processo de transição epidemiológica, juntamente com um aumento da incidência nas áreas endêmicas e presente em quatro das cinco regiões do território nacional. Assim, este trabalho objetiva analisar a evolução e a distribuição espacial da LV no Estado de São Paulo, desde o seu primeiro registro até o ano 2014, com vistas a fornecer subsídios para as autoridades de saúde pública para melhoria do programa de controle. Por meio de um estudo descritivo, dados secundários obtidos junto ao Centro de Vigilância Epidemiológica (CVE) e à Superintendência de Controle de Endemias (SUCEN) do Estado de São Paulo foram analisados e tratados em um sistema de informações geográficas (ArcGis 10.1), com confecção de mapas de distribuição. Observou-se que existem dois padrões distintos da distribuição da LV no estado: o da região oeste, definido pela ocorrência de casos humanos, alta prevalência de casos caninos e um maior número de municípios onde L. longipalpis está presente; e o da região leste, caracterizada pela ausência de notificação de casos humanos, até mesmo onde o flebotomíneo e casos caninos são presentes. Deduz-se que a expansão ocidental dos casos caninos e humanos seguindo a mesma rota de expansão do vetor não é coincidência, isso porque os registros do flebotomíneo precedem as notificações da doença no cão e, subsequentemente, no ser humano. A pesquisa ser... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Nowadays, in Brazil, visceral leishmaniasis (VL) is classified as a re-emerging disease, in a clear process of epidemiological transition, along with an increased incidence in endemic areas, and present in four of the five regions of the country. Therefore, this essay aims to analyze the evolution and spatial distribution of VL in São Paulo, since its first record until the year 2014, in order to provide information for public health authorities to improve the control program. By means of an ecological and descriptive study, secondary data obtained from the Centro de Vigilância Epidemológica (CVE) and the Superintendência de Controle de Endemias (SUCEN) of São Paulo were analyzed and treated in a geographic information system (ArcGIS 10.1), with confection distribution maps. It was observed that there are two distinct patterns of distribution of LV in São Paulo: one in the western region, defined by the occurrence of human cases, high prevalence of canine cases and a greater number of municipalities where sand fly is present; the other, represented by the eastern region, characterized by the absence of reporting human cases, even where the sand flies and canine cases are present. It follows that western expansion of canine and human cases following the same expansion route as the vector is not a coincidence, since the phlebotomine sandflies records precede the notifications of the disease in dogs and subsequently in humans. The research is the basis for fut... (Complete abstract click electronic access below) / Mestre
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Estudo do grau de conhecimento geral dos donos de cães sobre a leishmaniose visceral canina no município de Lençois Paulista-SP-2012 /Gouveia, Jéssica Cristina Melice. January 2014 (has links)
Orientador: José Rafael Modolo / Coorientador: Cassiano Vitória / Banca: Fábio Fernando Ribeiro Manhoso / Banca: Elma Pereira dos Santos Polegato / Acompanha anexo / Resumo: A leishmaniose é uma zoonose considerada um grande problema de saúde pública. A Organização Mundial da Saúde estima que 350 milhões de pessoas estejam expostas ao risco com registro aproximado de dois milhões de novos casos das diferentes formas clinicas ao ano. No Brasil, a importância da Leishmaniose Visceral Canina reside não somente na sua alta incidência e ampla distribuição, mas na possibilidade de assumir formas graves e letais quando associada ao quadro de má nutrição e infecções concomitantes. A crescente urbanização da doença ocorrida nos últimos 20 anos coloca em pauta a discussão das estratégias de controle empregadas. As medidas de controle da doença até agora implementadas foram incapazes de eliminar a transmissão e impedir a ocorrência de novas epidemias. Os conhecimentos sobre a circulação da LVC, assim como sua percepção pela população local, são de grande valia para o estabelecimento de campanhas de controle, pois mobiliza a comunidade em ações sanitárias. Busca avaliar comparativamente o conhecimento geral dos donos de cães sobre a LVC e obter informações para auxiliar na elaboração de uma proposta mais precisa e direcionada de educação continuada em saúde, no que se refere à LVC no Município de Lençóis Paulista - SP. Um inquérito foi desenvolvido para ser aplicado por 120 agentes comunitários de saúde, os quais receberam treinamento por uma equipe de profissionais da área e da UNESP de Botucatu - SP. O treinamento teve como base material especial de apoio apostilado desenvolvido de forma direcionada, contendo instruções gerais para orientar os entrevistadores no trabalho de campo, auxiliando-os na correta realização das entrevistas, de maneira a garantir a precisão das informações coletadas. Foram 390 participantes respondentes, distribuídos em cinco regiões do município, sendo: centro (46), Q1 (134), Q2 (60), Q3 (106), Q4 (38), abrangendo todos os 30km2 de área ... / Abstract: Leishmaniasis is a zoonosis considered a major public health issue. The World Health Organization estimates that 350 million people are exposed to it, with 2 million new infections, by the different forms of it, a year. In Brazil, the Visceral Canine Leishmaniasis (VL) is an important health issue not only because of its high incidence and transmission, but also because of the possibility of becoming life threatening when associated to poor nutrition and concomitant infections. There have been a growing number of urban outbreaks for 20 years. Rising up a discussion about the ways of control that have been used. These control measures have been incapable of both preventing and eliminating the transmission; they've also failed preventing new outbreaks. The knowledge about VL together with local population awareness is a key to establish control campaigns, mobilizing the whole community in sanitary campaigns. The present study evaluated the general knowledge of dog owners about VL and got information to help the establishment of a more accurate and better directed health education against VL in the city of Lençóis Paulista in São Paulo. The inquiry was made before the outbreak occurred in 2009 in the city and after it, by the 120 health agents that work for the city. These agents were trained by health experts both from the region and from UNESP in Botucatu/SP. Their training consisted on especially designed booklets developed to guide them during their fieldwork inquiry, helping them to make accurate interviews to guarantee precise information data collection. There were 390 interviews, divided in 5 city districts, as following: downtown (46), Q1 (134), Q2 (60), Q3 (106), Q4 (38), covering the whole 30km2 of urban area, each neighborhood keeping their actual proportion. The data collected was put in a database and was analyzed, with a frequency distribution, absolute and relative, and a percentage ... / Mestre
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Leishmaniose visceral canina : aspectos clínico-laboratoriais, histopatologia renal e testes específicos para diagnóstico /Soares, Maria de Jesus Veloso. January 2003 (has links)
Orientadora: Julieta Rodini Engrácia de Moraes / Banca: Marileda Bonafim Carvalho / Banca: Ana Maria Ferreira Roselino / Resumo: O cão é um importante reservatório do agente etiológico da leishmaniose visceral (LV). Este estudo compreendeu a avaliação de aspectos clínico-laboratoriais, histopatologia renal (cap. 2) e uso da PCR na identificação do agente infectante em baço, fígado, linfonodo e rins em cães com LV (cap. 3). No primeiro estudo, foram utilizados 34 cães soropositivos sintomáticos (caso), e 17 assintomáticos (controle), machos ou fêmeas, com raças e idades variadas, provenientes de Teresina-PI. Os cães foram submetidos a eutanásia. Após, foram coletados fragmentos de baço, fígado, linfonodo e rins. Fragmentos renais foram preparados por técnicas histológicas e corados com HE e PAS. Ao exame físico, foi freqüente hipertrofia de linfonodos (85,29%) e úlceras cutâneas (35,29%) no grupo caso. Verificou-se anemia em 55,88% dos cães no grupo caso e 11,76% no controle. A avaliação histopatológica renal no grupo caso, revelou que 61,76% dos cães apresentaram glomerulonefrite (GN) membranoproliferativa e, no controle, 17,65%. GN proliferativa mesangial ocorreu em 32,35% dos cães do grupo caso e em 64,70% do controle. Foram encontradas formas amastigotas de Leishmania em meio ao infiltrado inflamatório em um dos cães do grupo caso. No segundo estudo, utilizaram-se 25 cães soropositivos para LV sintomáticos (caso) e 15 assintomáticos (controle). As PCRs foram realizadas em termociclador automático, utilizando-se "primers" específicos para o gênero Leishmania. Os 25 cães do grupo caso, foram positivos nas PCRs de baço, ou fígado ou linfonodo, contra dois cães do grupo controle. Por meio das PCRs em rins, detectou-se DNA de Leishmania em oito animais (32%) do grupo caso. O estudo permitiu concluir que na LV canina, independentemente de haver sinais detectados ao exame físico, os rins freqüentemente estão acometidos e que a PCR é um exame mais preciso que a histopatologia convencional, na detecção da presença do parasita. / Abstract: The dog is an important reservoir of visceral leishmaniasis (VL) etiological agent. This study included clinical and laboratorial evaluation, renal histopathology (chapter 2) and the use of PCR in the identification of the infective agent on the spleen, liver, lynphonodes and kidney in dogs with VL (chapter 3). In the first study, it were used 34 symptomatic soropositives dogs (case), and 17 asymptomatic (control), male or female, with different breeds and ages, coming from Teresina-PI. The dogs were submitted to euthanasia. Right after, samples from spleen, liver, lymphonodes and kidneys were collected. Renal fragments were prepared using histological techniques and stained with HE and PAS. At physical exam, it was frequent lymphonodes hypertrophy (85.29%) and cutaneous ulcers (35,29%) in the case group. Anaemia was presented in 55.88% of the dogs from case group and 11.76% from control. The renal histopathology evaluation of the case group showed that 61.76% of the dogs presented membranoproliferative glomerulonephritis (GN) and, at the control group, 17.65%. Mesangial proliferative glomerulonephritis occurred in 32.35% of the dogs from case group and in 64.70% from control. In one of the dogs from case group, it was found amastigotes forms of Leishmania in the middle of the inflamatory infiltrated. In the second study, it were used 25 symptomatics soropositives dogs for VL (case) and 15 asymptomatic (control). PCRs were accomplished at an automatic termocycler using specific primers for Leishmania. All 25 dogs from case group were positives in PCRs of spleen, or liver or lymphonode, and only two from the control group. Through the PCRs of the kidneys, it was detected DNA of Leishmania in eight animals (32%) from case group... (complete abstract, access undermentioned eletronic address) / Mestre
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Avaliação visceral da técnica sorológica para Leishmaniose visceral e doença de Chagas em animais silvestres e identificação molecular /Tenório, Michely da Silva. January 2015 (has links)
Orientador: Simone Baldini Lucheis / Coorientador: João Pessoa Araújo Junior / Banca: Lúcia Helena O'Dwyer de Oliveira / Banca: Virgínia Bodelão Richini Pereira / Banca: José Eduardo Tolezano / Banca: Tricia Maria Ferreira de Sousa Oliveira / Resumo: Animais silvestres são importantes fontes de infecção de leishmanioses e doença de Chagas, para espécies domésticas e o homem. A PCR com emprego de iniciadores da região ITS1 associando-se clonagem e seqüenciamento de DNA alvo permite caracterizar espécies parasitas. Pelo uso de imunorreagentes específicos também possibilitam a investigação da infecção natural entre diferentes espécies de animais silvestres para ambas enfermidades. Foram avaliados isolados flagelares em meio LIT (hemocultura) de 103 animais procedentes do Centro de Conservação da Fauna Silvestre de Ilha Solteira/SP e 118 amostras de soros. Em ensaios imunoenzimáticos utilizaram-se as proteínas recombinantes CRA e FRA de Trypanosoma cruzi e rK39 de Leishmania infantum. Conjugados espécie-específicos foram produzidos para diferentes espécies e empregados no teste de ELISA indireto e a proteína A conjugada foi avaliada para testes sorológicos com emprego da rK39. Soros de cães reagentes para leishmaniose visceral e de humanos para doença de Chagas foram testados para verificar a reatividade contra estas proteínas. Observou-se na hemocultura, flagelados para as seguintes espécies de vida livre: cotia, gambá e tatu-galinha; espécie em cativeiro: bugio-preto. Produtos foram amplificados pela PCR (585 pb) a partir de hemocultura em animais de vida livre e de um animal em cativeiro (650 pb) em amostra de sangue total. Os amplificados foram inseridos em vetor de clonagem e sequenciados resultando-se em 97% de similaridade com T. cruzi para gambá e cotia (acesso nº: AF362825.1) e tatu-galinha (acesso nº: GQ258720.1) com 98%. No isolado de bugio-preto houve 90% de similaridade com T. minasense (acesso nº: AB362411.1). Estes resultados apresentam o primeiro relato destas espécies parasitárias de importância epidemiológica na área de estudo e demonstraram vantagem ao associar-se a hemocultura às técnicas moleculares para caracterização de... / Abstract: Wild animals are important sources of infection of leishmaniasis and Chagas disease to domestic animals and humans. The employment of PCR with ITS1 primers plus cloning and sequencing target DNA allows to characterize parasitic species. By using specific immunoreagents also enable investigation of natural infection between different species of wild animals for both diseases. Flagellate isolates in LIT medium (blood culture) were assessed of 103 animals coming from the Wildlife Conservation Center of Ilha Solteira -SP and 118 serum samples. In immunoassays, recombinant proteins CRA and FRA fromTrypanosoma cruzi and rK39 from Leishmania infantum were used. Species -specific conjugates were produced for different animal species and used in indirect ELISA and the protein A conjugate was evaluated for serological tests with use of rK39. Sera from dogs reagents for visceral leishmaniasis and for humans reagents for Chagas disease were tested for reactivity against these proteins. Flagellate protozoa were observed in LIT culture medium, at the following free-living species: common agouti (D. agouti), white-eared opossum (D. albiventris) and nine-banded armadillo (D. novemcinctus); and from a captive black howler monkey (A. caraya). Products were amplified by PCR (585bp) from blood culture in wild animals and from an animal in captivity (650bp) in whole blood sample. The amplified products were inserted into cloning vector and sequenced resulting in 97% similarity with T. cruzi to white-eared opossum an common agouti (acess number: AF 362825.1) and 98% to nine-banded armadillo (acess number: GQ 258720.1). The isolated from black howler monkey was 90% similar to T. minasense (acess number: AB 362411.1). The results present the first report of these parasitic species of epidemiological importance in the studied area and demonstrated advantage in the association of blood culture to molecular techniques to characterize flagellates. For ... / Doutor
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Leishmaniose visceral canina : estudo imagiológico em cães naturalmente infectados /Silva, Alexandre Redson Soares da. January 2014 (has links)
Orientador: Maria Jaqueline Mamprim / Banca: Sheila Canavese Rahal / Banca: Maria Lúcia Gomes Lourenço / Banca: Luciana Del Rio Pinoli Ciarlini / Banca: Priscilla Macedo de Souza / Resumo: Alterações locomotoras são incomuns em cães com leishmaniose visceral. Embora a origem dos sinais clínicos permaneça obscura, a poliartrite deve ser considerada como um potencial diagnóstico nestes casos. Muitos agentes etiológicos podem causar poliartropatias, sendo estas classificadas em não inflamatórias e inflamatórias. Acredita-se que a poliartrite induzida por Leishmania spp. seja decorrente de uma reação inflamatória granulomatosa, causada pela presença de parasitos ou por uma resposta celular e humoral. O diagnóstico clínico ainda é um desafio para os profissionais de saúde, devido à grande variedade de sinais inespecíficos em decorrência da leishmaniose visceral. Desta forma, o presente trabalho teve como objetivos avaliar radiotomograficamente as articulações umeroradioulnares, radiocarpicametacárpicas, femurotibiopatelares e tibiotarsicametatársicas, a fim de caracterizar as lesões osteoarticulares, fornecendo subsídios para os clínicos que atuam em áreas endêmicas. Para tanto, foram utilizados 46 cães, naturalmente infectados, com diagnóstico firmado por meio dos exames imunocromatográfico (95,65%), ELISA (97,82%) e/ou parasitológico direto (95,65%), provenientes do Centro de Controle de Zoonoses de Bauru. Não houve predileção quanto ao sexo (1:1). A maioria dos animais não apresentava precisa definição racial (78,26%). A idade variou entre um a 12 anos, com mediana igual a três anos. Sinais clínicos compatíveis com poliartrite foram observados em 32,60%. Alterações radiográficas e tomográficas importantes foram observadas em 77% e 91% dos caninos, respectivamente, sendo as articulações tibiotarsicametatársicas a mais afetada em ambos os testes, acomentendo cães sintomáticos e assintomáticos. Os sinais imaginológicos foram variados, não sendo possível determinar um padrão específico para a doença, porém a presença de trabeculado ósseo evidente, ... / Abstract: Locomotor alterations are uncommon in dogs with visceral leishmaniasis (VL). Although the origin of clinical signs remain unclear, polyarthritis should be considered as a potential diagnosis in these cases. Many etiological agents may cause polyarthropathies, which are classified into inflammatory and non-inflammatory. It is believed that the polyarthritis induced by Leishmania spp. may be due to a granulomatous inflammatory reaction caused by the presence of parasites or by cellular and humoral response. Clinical diagnosis is still a challenge for health professionals, due to the great variety of nonspecific clinical signs on VL. Thus, the aim of the present study were to evaluate radiographically and tomographically elbows, carpal, stifle and tarsal joints, in order to characterize the osteoarticular lesions, providing subsidies for veterinary practitioners in endemic areas. For this, 46 dogs were used, naturally infected, with diagnosis confirmed by immunochromatography (95.65%), ELISA (97.82%) and/or cytological (95.65%) methods, from the Zoonoses Control Center of Bauru. There was no preference to gender (1:1). The majority of animals were mixed breed (78.26%). Ages varied from 1 to 12 years, with a median of 3 years. Clinical signs consistent with polyarthritis were observed in 32.60%. Radiographic and tomographic alterations were observed in 77% and 91% of dogs, respectively, with tarsal joints the most affected on both methods, on asymptomatic and symptomatic dogs. Imaging signs varied, and it was not possible to establish a pattern for the disease, however the presence of apparent trabecular bone, bone sclerosis and osteolysis were the most frequently observed. Furthermore, we noticed a tendency for bilateral and symmetric involvement. It was observed a lack of significance when comparing the radiographic and tomographic lesions between symptomatic and asymptomatic ... / Doutor
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Papel dos receptores Toll-Like 2 e 4 do estado nutricional em pacientes com leishmaniose visceral /Gatto, Mariana. January 2014 (has links)
Orientador: Sueli Aparecida Calvi / Banca: Ana Paula Fávero Trombone Garlet / Banca: Rita Cristina Chaim / Resumo: A leishmaniose visceral (LV) é um problema emergente de saúde pública, sendo uma das principais doenças negligenciadas no Brasil e no mundo. É causada por L. donovanie L.chagasi/infantum. A resistência à infecção está associada à produção de citocinas de perfil Th1 e a suscetibilidade às citocinas do perfil Th2. Os receptores Toll-like (TLRs) da imunidade inata têm importante papel no reconhecimento microbiano e no desenvolvimento da resposta imune adaptativa. Além disso, o estado nutricional possui grande impacto na resposta imune. Desse modo, nosso objetivo foi avaliar o perfil bioquímico-nutricional, o envolvimento dos TLR2 e TLR4 na produção de citocinas e NO e relacionar as lipoproteínas com a resposta imune em pacientes com LV antes e após o tratamento. Foram estudados 13 pacientes com LV antes e após o tratamento e 16 indivíduos controles.A avaliação bioquímica-nutricional foi realizada através da impedância biolétrica e testes bioquímicos de colesterol total (CT), HDL, LDL, triglicerídeos (TG), glicose e proteínas totais e frações. A expressão de TLR2 e TLR4 em linfócitose monócitosfoi realizada através da citometria de fluxo. A produção das citocinas e NO em sobrenadantes de cultura de PBMCs estimuladas ou não com agonistas dos receptores TLR2 (PGN) e do TLR4 (LPS), foi avaliada através da técnica de CBA Flex e de kits comerciais. Pacientes prétratamento apresentaram menor ângulo de fase em relação aos controles, níveis diminuídos de CT, HDL, LDL e albumina e níveis aumentados de triglicerídeos em relação ao póstratamento e controles. Além disso, mostraram maior porcentagem de linfócitos expressando TLR2 e TLR4 e aumento da expressão destes receptores em monócitos. Quanto às citocinas, foi verificado aumento da produção de TNF-α, IL-10 e TGF-β enquanto os níveis de IFN-γ, IL-17 e NO foram menores. Os resultados também mostraram o envolvimento dos receptores TLR2 e TLR4 na ... / Abstract: Visceral leishmaniasis (VL) is an emerging public health problem, being of the major neglected diseases in Brazil and worldwide. It is caused by L. chagasi and L. donovani/infantum. Resistance to infection is associated to production of Th1 cytokines and susceptibility to Th2 cytokine profile. The toll-like receptors (TLRs) of the innate immunity plays an important role in microbial recognition and development of the adaptive immune response. In addition, nutritional status has a great impact on the immune response. Our objective was to evaluate the biochemical and nutritional profile, the involvement of TLR2 and TLR4 in the production of cytokines and NO and relate the lipoproteins to the immune response in VL patients, before and after the treatment. Were studied 13 patients with LV before and after the treatment and 16 control subjects. Biochemical and nutritional evaluation was performed by bioelectrical impedance and biochemical assays of total cholesterol (TC), HDL, LDL, triglycerides (TG), glucose, and total protein and fractions. Expression of TLR2 and TLR4 in lymphocytes and monocytes was performed by flowcytometry. The production of cytokines and NO in culture supernatants of PBMCs stimulated or not with agonists of TLR2 (PGN) and TLR4 (LPS) receptors was evaluated by CBA Flex technique and commercial kits. Patients on pre-treatment had lower phase angle compared to controls, reduced levels of TC, HDL, LDL and albumin and increased triglycerid elevels in relation to post-treatment and controls. In addition, pre-treatment patients presented a higher percentage of lymphocytes expressing TLR2 and TLR4 and increased expression of these receptors on monocytes. Regarding the cytokines, was observed increased of the production of TNF-α, IL-10 and TGF-β, while production of IFN- γ, IL-17 and NO were lower. The results also demonstrated the involvement of TLR2 and TLR4 receptors on TNF-α, IL-10 and NO production. With treatment ... / Mestre
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Alterações farmacocinéticas de drogas pelo citocromo P450 na leishmaniose visceral humanaSouza, Tânia Maria Vieira 12 June 2014 (has links)
Studies in humans and laboratory animals have shown that inflammation and infectious processes are associated with changes in expression and activity of cytochrome P450 (CYP), which are responsible for the metabolism of most drugs in clinical use. In this context, the objectives of this work were: observe pharmacokinetic changes of CYP450 during human visceral leishmaniasis, describe the epidemiological, clinical and laboratory characteristics of patients with visceral leishmaniasis and evaluate the activity of the isoenzymes CYP3A4, CYP2C9 and CYP2C19 in patients with visceral leishmaniasis before and after treatment. This is a cross-sectional study, developed into an inpatient unit of a school hospital linked to the Federal University of Sergipe, reference in the diagnosis and treatment of visceral leishmaniasis in the state, which involved 24 patients. The study was conducted in four phases: before treatment, immediately after treatment, ninety and one hundred and eighty days after the end of treatment. In each phase, patients ingested the medication omeprazole (CYP2C19 substrate), losartan (CYP2C9 substrate) and midazolam (CYP3A4 substrate), which were used as evidence of the enzymes for which are substrates. Collecting blood samples (5 mL) of the patients before the administration of these drugs and 15, 30, 45 minutes and 1, 2, 3, 4, 5 and 6 hours after administration of those drugs. It was also collected all urine produced in 8 hours after the ingestion of drugs and separate a aliquot of 20 mL for analysis. Liquid chromatography coupled to mass spectrometry high efficiency (LC-MS) was used for the quantification of drugs and metabolites in the samples. The reason omeprazol/5-hidróxi-omeprazol plasma concentrations obtained 4 h after drug administration was used to evaluate the activity of CYP2C19, and the CYP2C9 enzyme activity was estimated by the ratio of concentrations losartano/E-3174 in urine collected 8h after administration of the drug. To estimate the activity of CYP3A4 was calculated the apparent clearance (CL / F) of midazolam. The results showed a prevalence of the disease in males and that most cases occurred in patients residing in urban areas. In relation to the clinical findings were present weight loss, fever, malaise and hepatomegaly in 100% of participants, and 50% were diagnosed between 90 and 180 days the onset of symptoms. On laboratory changes, anemia, leukopenia, thrombocytopenia, hypoalbuminemia, normal or slightly altered transaminases were found. As the enzymatic activity, the apparent clearance of midazolam found himself reduced during illness and increased after treatment; the metabolic ratio of omeprazole plasma concentration of 5-hydroxy-omeprazole and the ratio of the concentration urine losartano/E-3174 were increased during illness, and reduced after treatment, indicating a reduction in the activity of CYP3A4, 2C9 and 2C19 during LV and increase after treatment. The knowledge that occur changes on the activity of the cytochromes P450 and, consequently, on the pharmacokinetics of drugs during visceral leishmaniasis, may contribute to better understanding of the response to drugs during the disease. / Estudos realizados em seres humanos e animais de laboratório têm demonstrado que a inflamação e os processos infecciosos estão associados a alterações na expressão e na atividade dos citocromos P450 (CYP), os quais são responsáveis pelo metabolismo da maioria dos fármacos de uso clínico. Nesse contexto, os objetivos deste trabalho foram: observar as alterações farmacocinéticas dos CYP450 durante a LV humana, descrever as características epidemiológicas, clínicas e laboratoriais dos pacientes com leishmaniose visceral e avaliar a atividade das isoenzimas CYP3A4, CYP2C9 e CYP2C19 em pacientes com leishmaniose visceral antes e após o tratamento. Trata-se de um estudo transversal, desenvolvido em uma unidade de internamento de um hospital escola vinculado à Universidade Federal de Sergipe, referência no diagnóstico e tratamento da leishmaniose visceral no Estado, do qual participaram 24 pacientes. O estudo foi realizado em quatro fases: antes do início do tratamento, imediatamente após o término do tratamento, noventa e cento e oitenta dias após o término do tratamento. Em cada fase, os pacientes ingeriram os medicamentos omeprazol (substrato do CYP2C19), losartano (substrato do CYP2C9) e midazolam (substrato do CYP3A4), os quais foram usados como prova da atividade das enzimas para as quais são substratos. Foi realizada coleta de amostras de sangue (5 mL) dos pacientes antes da administração desses medicamentos, e 15, 30, 45 minutos e 1, 2, 3, 4, 5 e 6 horas após a administração dessas drogas. Também foi coletada toda a urina produzida nas 8h seguintes à ingestão dos medicamentos e separada uma alíquota de 20 mL para análise. A cromatografia líquida de alta eficiência acoplada à espectrometria de massas (LC-MS-MS) foi utilizada para quantificação dos medicamentos e seus metabólitos nas amostras coletadas. A razão das concentrações plasmáticas omeprazol/5-hidróxi-omeprazol obtidas 4h após a administração do fármaco foi usada para avaliar a atividade do CYP2C19, e a atividade da enzima CYP2C9 foi estimada pela razão das concentrações losartano/E-3174 na urina coletada nas 8h seguintes à administração do fármaco. Para estimar a atividade do CYP3A4 foi calculado o clearence aparente (CL/F) do midazolam. Os resultados mostraram que houve predomínio da doença no sexo masculino e que a maioria dos casos ocorreu em pacientes residentes na zona urbana. Em relação ao quadro clínico, estiveram presentes emagrecimento, febre, hepatomegalia e mal estar em 100% dos participantes, e 50% deles foram diagnosticados entre 90 e 180 dias do início dos sintomas. Sobre as alterações laboratoriais, foram encontradas anemia, leucopenia, plaquetopenia, hipoalbuminemia, transaminases normais ou levemente alteradas. Quanto à atividade enzimática, o clearence aparente do midazolam encontrava-se reduzido durante a doença e aumentado após o tratamento; a razão metabólica da concentração plasmática de omeprazol-5-hidróxi-omeprazol e a razão da concentração losartano/E-3174 na urina encontravam-se aumentadas durante a doença e reduzidas após o tratamento, indicando uma redução da atividade dos CYP3A4, 2C9 e 2C19 durante a LV e um aumento após o tratamento. O conhecimento de que ocorrem alterações na atividade dos citocromos P450 e, consequentemente, na farmacocinética das drogas durante a LV, pode contribuir para um melhor entendimento da resposta aos medicamentos durante a doença.
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Visceral leishmaniasis. Kala-azar. Acute kidney injury. Mortality. Risk factors. RIFLE / ManifestaÃÃes clÃnicas e fatores de risco relacionados à lesÃo renal aguda na Leishmaniose visceral e aplicaÃÃo do critÃrio RifleMichelle Jacintha Cavalcante Oliveira 10 May 2010 (has links)
Background. There are few studies of renal function evaluation in visceral leishmaniasis (Kala-azar). The aim of this study was to investigate the clinical manifest and the risk factors associated with acute kidney injury (AKI) based on RIFLE criteria in patients with visceral leishmaniasis (VL). Methods. A retrospective study of medical records from patients over 14 years old, without previous kidney disease, with VL, treated at SÃo Josà Infectious Diseases Hospital, from 2002 to 2008. Clinical manifestations and risk factors for AKI (defined by using RIFLE criteria) were studied. A multivariate analysis was performed to analyze the risk factors for AKI. Results. A total of 224 patients were included. The mean age was 36Â15 years and 76.8% were males. AKI was observed in 76 patients (33.9% of cases) and % 52.6 (40) were class F on RIFLE criteria. The main clinical symptoms were dyspnea, edema and jaundice in patients with VL and AKI (p<0.05). Oliguria was observed in 6.5% of patients with AKI. Risk factors associated with AKI were male gender (OR=2.2, 95% CI= 1.0-4.7, p=0.03), age > 40 years (OR = 1.05, 95% CI= 1.02-1.08, p < 0.001) and jaundice (OR=2.9, 95% CI= 1.5-5.8 p=0.002). There was an strong association between amphotericin B use and AKI (OR=18.4, 95% CI=7.9-42.8, p<0.0001), whereas glucantime use was associated with a lower incidence of AKI when compared to amphotericin B users (OR=0.05, 95% CI=0.02-0.12, p<0.0001). Mortality was 13.3% and it was higher in AKI patients (30.2% vs. 4.7%, p<0.0001). RIFLE criteria presented mortality 40%, 20.8% e 35% in R, I and F respective class. Conclusions. The risk factors associated with AKI in patients with VL were male gender, advanced age, jaundice and amphotericin B. The last one was the most important factor of AKI in VL. / IntroduÃÃo. Hà poucos dados na literatura que relacionam a Leishmaniose visceral (LV) à lesÃo renal aguda (LRA). O objetivo deste estudo à avaliar as manifestaÃÃes clÃnicas e fatores de risco associados à LRA em pacientes com LV e aplicar o critÃrio RIFLE. MÃtodo. Estudo retrospectivo, incluindo pacientes acima de 14 anos, sem doenÃa renal prÃvia, com diagnÃstico de LV, internados no HSJ entre 2002 e 2008. Foram avaliadas manifestaÃÃes clÃnicas e os fatores de risco relacionados à LRA (avaliada atravÃs do critÃrio RIFLE) nesses pacientes, aplicando regressÃo logÃstica multivariada. Resultados. Foram incluÃdos 224 pacientes com idade mÃdia de 36Â15 anos sendo 76,8% do gÃnero masculino. LRA foi observada em 76 pacientes (33,9%) sendo que 52,6% (40) estavam na classe F do critÃrio RIFLE. Dispneia, edema e icterÃcia foram os principais sinais e sintomas associados à LRA (p<0,05). OligÃria foi observada em 6,5% dos pacientes com LRA. Os fatores de risco associados à LRA foram gÃnero masculino (OR=2,2, 95% IC=1,0-4,7, p=0,03), idade acima de 40 anos (OR = 1,05, 95% IC = 1,02-1,08, p<0,001) e icterÃcia (OR=2,9, 95% IC=1,5-5,8, p=0,002). Foi verificada considerÃvel associaÃÃo entre o emprego de anfotericina B e LRA (OR=18,4, 95% IC=7,9-42,8, p<0,0001), contudo o uso de glucantime foi associado a menor ocorrÃncia de LRA (OR=0,05, 95% IC=0,02-0,12, p<0,0001). A mortalidade geral foi 13,3% e foi mais alta nos pacientes que desenvolveram LRA (30,2% vs. 4,7%, p<0,0001). Os percentuais de mortalidade nas classes R, I e F foram respectivamente 40%, 20,8% e 35%. ConclusÃes. Os fatores de risco preditores de LRA em pacientes com LV foram sexo masculino, anfotericina B, idade acima de 40 anos e icterÃcia. Anfotericina B foi o fator mais importante de LRA na LV.
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Descrição de um novo foco de calazar canino autóctone no município da Serra, Região Metropolitana de Vitória, ESTonini, Marco André Loureiro 27 July 2010 (has links)
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Previous issue date: 2010-07-27 / Apesar da Região Metropolitana de Vitória (RMV) ser considerada indene para leishmaniose visceral (LV), um recente inquérito soroepidemiológico com cães errantes da RMV, detectou sorologia positiva (Kalazar Detect Canine) em sete de 158 (4,4%) animais, sugerindo a hipótese da existência da LV nesta região. Com o intuito de ratificar estes dados, 201 cães do município da Serra foram investigados para LV, utilizando testes sorológicos, parasitológicos e moleculares. Deste total, 13% (26/201) e 5,97% (12/201) apresentaram respectivamente resultados positivos no teste ELISA in house e Kalazar Detect. Nenhum animal foi soropositivo para os testes RIFI e ELISA (Biomanguinhos). Dois cães soropositivos apresentaram cultura positiva para Leishmania (Leishmania) chagasi e quatro animais apresentaram PCR positivo para o gênero Leishmania. Além disso, um óbito humano por LV foi registrado em associação a dois casos caninos da doença (ambos com Kalazar Detect positivo e um com cultura positiva). A investigação epidemiológica mostrou que ambos os cães foram nascidos e criados na Serra e não possuíam história de viagem para áreas endêmicas para LV. O outro cão com cultura positiva foi capturado pelo Centro de Controle de Zoonoses da Serra a 550 metros da residência da paciente. Apesar da espécie Lutzomyia longipalpis não ter sido encontrada, outras espécies de flebotomíneos foram capturadas: L. edwardsi, L. tupynambai, L. cortelezzii, L. sordellii e L. intermedia. Nossos resultados sugerem fortemente a existência da LV canina autóctone no município da Serra e o primeiro caso autóctone humano neste município, embora não confirmado devido a paciente ser natural de uma área endêmica para a doença / Although the Metropolitan Region of Vitória, Espírito Santo state, is considered a free visceral leishmaniasis (VL) area, a recent canine soroepidemiological inquiry revealed that 7 out of 158 (4,4%) stray dogs were seropositive (Kalazar Detect) for VL, suggesting the existence of autochthonous VL in this region. In order to clarify these findings, 201 dogs from Serra municipality were screened for VL, using serological, parasitological and molecular tests. Of this total, 13% (26/201) and 5,97% (12/201) were positive for ELISA in house and Kalazar Detect tests, respectively. None of the dogs was positive for RIFI and ELISA assays (Biomanguinhos). Two seropositive dogs presented positive culture for Leishmania (Leishmania) chagasi, and four were PCR positive for the Leishmania genus. Additionally, one human VL case was reported in association with 2 canine cases (both of them positive for Kalazar Detect and one had a positive culture). The epidemiological investigation showed that both dogs were born in Serra and never travelled to VL endemic areas. The other dog with a positive culture was captured by the Zoonosis Control Center 550 meters far from the patient s dwellings. Although the Lutzomyia longipalpis species was not detected, others phlebotomine sand fly species were found such as L. edwardsi, L. tupynambai, L. cortelezzii, L. sordellii, and L. intermedia. Our results strongly suggest the existence of autochthonous canine VL and the first autochthonous human case of the disease in Serra, though this cannot be confirmed because the patient was native from an endemic area for VL
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