[EN] During the rippening of ham and dry sausages, biochemical changes are produced, the main changes are proteólisys, lipolisys, and glucolisys, that are going to define the quality that is normal in this type of products. The evaluation of certain components that are derivates of this reactions, can be used as markers of the process. This is the case of free amino acids like lysine, that is a marker of proteólisys, another example lactic acid, a product of glycogen fermentation, like a marker of correct fermentation carried out by lactic acid bacteria. Another way to assure the food quality is the addition of some ingredients like salt or additives like nitrate. Thus, nitrate after its trasformation in nitrite during the process has the capacity of inhibition of Clostridium botulinum, and its a helpers in the development of sensorial characteristcs like flavor, color and texture, specially in ferment meat. Although the nitrate is an necessary ingredient for assure food safety, must be according allowed levels, because can be potencially harmeful for health. There are different techniques for the analysis of those market of the process, being High Performance Liquid Chromatography (HPLC) the most used. However, this technique is expensive and not accesible for a food laboratory. The development of biosensors that use enzyme like and element of birecognition has achieved a great expansión in farmaceutical and sanitary industries. Those sensors combined the selectivity of enzymes with the selectivity of electrochemical detection. In addition are economic, easy to use and the measurement are fast and do not require specialized people. In this thesis our main objective is the possibility to use amperometric biosensors, comformed by an oximeter and an oxide reductase enzyme selected in function of the interest component that is going to be analyzed for monitoring the process. Thus, by the determination of lisine it has been choose the L-lisine alpha oxidase, for the determination of lactic acid, the lactate oxidase have been chosen and for the determination of nitrate, the nitrate reductase have been selected. Sensors have been optimized, for been used in a soluble and immobilized form. (For acid lactic sensor, just a soluble form has been developed) in all cases, the results of biosensor was compared with HPLC like reference method. Those sensors have been applied in real samples of ham and dry sausages allowing reliable determination of lysine, nitrate and lactic acid, with their respective enzymes. / [ES] Durante el proceso de curado del jamón y de los embutidos fermentados se producen cambios a nivel bioquímico entre los que destacan la proteólisis, la lipolisis y la glucolisis, y que van a definir la calidad que se espera en este tipo de productos. La evaluación de ciertos compuestos derivados de dichas reacciones, pueden servir como marcadores del proceso. Es el caso de los aminoácidos libres y en concreto la lisina como marcador de proteólisis, o el ácido láctico, producto de la fermentación de los carbohidratos como marcador de una fermentación adecuada de embutidos por bacterias acidolácticas. Por otro lado, la adición de algún ingrediente como la sal o aditivos como son los nitratos, van a asegurar la higiene del producto. Así, los nitratos tras su transformación en nitritos durante el proceso, tienen la capacidad de inhibir al Clostridium botulinum pero también colaboran en el desarrollo de las características sensoriales, aroma y color fundamentalmente, de los productos curados. Sin embargo, en este caso concreto, y a pesar de ser un ingrediente indispensable para asegurar sanitariamente el producto, debe mantenerse en niveles permitidos por ser potencialmente perjudicial para la salud. Existen diversas técnicas para el análisis de estos compuestos marcadores del proceso, siendo la más utilizada la cromatografía líquida de alta resolución (HPLC). Sin embargo, esta técnica es cara, conlleva tiempo y no siempre resulta accesible para un laboratorio de una industria alimentaria. El desarrollo de biosensores en los que se utilizan enzimas como elemento de bioreconocimiento, ha alcanzado una gran expansión en algunos sectores como son la industria sanitaria y farmacéutica. Estos sensores combinan la selectividad de las enzimas con la sensibilidad de la detección electroquímica. Además, son de manejo sencillo, los análisis son rápidos, no requiere personal especializado, y es económico. En esta tesis nos planteamos pues la posibilidad de utilizar un biosensor amperométrico simple compuesto por un oxímetro y una enzima, que se seleccionará en función del compuesto clave que se quiera analizar para monitorizar los procesos. Así, para la determinación de lisina se ha elegido la lisina-¿-oxidasa, para la determinación de nitrato la nitrato reductasa, y para la determinación de ácido láctico la lactato oxidasa. Los sensores se han optimizado tanto para su uso con la enzima libre como inmovilizada en una membrana (en el caso del sensor de ácido láctico se desarrolló únicamente para la enzima libre) y en todos los casos se compararon los resultados de los biosensores con la cromatografía líquida de alta resolución como método de referencia. Estos sensores han sido aplicados a muestras reales de jamón y embutido curados permitiendo una determinación fiable de lisina, nitrato y ácido láctico con las respectivas enzimas. / [CA] Durant el procés de curat del pernil i dels embotits fermentats es produïxen canvis a nivell bioquímic entre els que destaquen la proteólisi, la lipolisi i glucòlisi, i que definiran la qualitat que s'espera en este tipus de productes. L'avaluació de certs compostos derivats de les dites reaccions, poden servir com a marcadors del procés. És el cas dels aminoàcids lliures i en concret la lisina com a marcador de proteólisi, o l'àcid làctic, producte de la fermentació dels carbohidrats com a marcador d'una fermentació adequada d'embotits per bacteris acidolácticas. D'altra banda, l'adició d'algun ingredient com la sal o aditius com són els nitrats, asseguraran la higiene del producte. Així, els nitrats després de la seua transformació en nitrits durant el procés, tenen la capacitat d'inhibir al Clostridium botulinum però també col·labora en el desenvolupament de les característiques sensorials, aroma i color fonamentalment, dels productes curats. No obstant això, en este cas concret, i a pesar de ser un ingredient indispensable per a assegurar sanitàriament el producte, ha de mantindre's en nivells permesos per ser potencialment perjudicial per a la salut. Hi ha diverses tècniques per a l'anàlisi d'estos compostos marcadors del procés, sent la més utilitzada la cromatografia líquida d'alta resolució (HPLC) . No obstant això, esta tècnica és cara, comporta temps i no sempre accessible per a un laboratori d'una indústria alimentària. El desenvolupament de biosensors en què s'utilitzen enzims com a element de biorecoeixement, ha aconseguit una gran expansió en alguns sectors com són la indústria sanitària i farmacèutica. Estos sensors combinen la selectivitat dels enzims amb la sensibilitat de la detecció electroquímica. A més, són de maneig senzill, les anàlisis són ràpides, no requerix personal especialitzat, i és econòmic. En esta tesi ens plantegem la possibilitat d'utilitzar un biosensor amperométrico simple compost per un oxímetre i un enzim, que se seleccionarà en funció del compost clau que es vullga analitzar per a monitoritzar els procesos. Així, per a la determinació de lisina s'ha triat la lisina-oxidasa, per a la determinació de nitrat la nitrat reductasa, i per a la determinació d'àcid làctic la lactat oxidasa. Els sensors s'han optimitzat tant per al seu ús amb l'enzim lliure com immobilitzada en una membrana (en el cas del sensor d'àcid làctic es va desevolupar únicament per a l'enzim lliure) i en tots els casos es van comparar els resultats dels biosensors amb la cromatografia líquida d'alta resolució com a mètode de referència. Estos sensors han sigut aplicats a mostres reals de pernil i embotit curats permetent una determinació fiable de lisina, nitrat i àcid làctic amb els respectius enzims. / Jadán Piedra, FA. (2015). SENSORES ENZIMATICOS COMO HERRAMIENTAS PARA EL CONTROL RAPIDO DE LA CALIDAD DE LA CARNE Y PRODUCTOS CARNICOS [Tesis doctoral]. Universitat Politècnica de València. https://doi.org/10.4995/Thesis/10251/58992

El Umbral Anaerobio (UAn) viene siendo un tema de permanente actualidad desde que Wasserman y McIlroy acuñaron el término en 1964, debido a su indudable importancia en el ámbito de las ciencias de la educación física y el deporte y de la medicina clínica, y a la controversia existente en relación con el concepto, la terminología utilizada y los métodos empleados para su determinación.Partiendo de la hipótesis de que la mayoría de definiciones dadas hasta ahora del UAn son operacionales y no conceptuales, y de que los diferentes umbrales propuestos no son sino diferentes efectos producidos por una misma causa, hemos planteado el presente trabajo con los principales objetivos de: 1) separar y diferenciar en el tiempo a través de un trabajo incremental (ergoforesis) la mayor parte de los umbrales lácticos, ventilatorios y cardiovasculares propuestos en la literatura científica; 2) intentar determinar su origen común; 3) ajustar la terminología; y 4) comprobar el grado de relación existente entre los umbrales y la percepción del esfuerzo realizado.Los resultados de nuestro trabajo han mostrado que: 1) los diferentes UAn no tienen ninguna relación causa efecto entre ellos y que, por tanto, son diferentes manifestaciones procedentes de un origen común; 2) el origen de dichas manifestaciones reside en el aumento de la tasa glucolítica; 3) el término umbral anaerobio probablemente no refleja lo acontecido durante un ejercicio incremental; y 4) no existe una buena relación entre los umbrales ventilatorios 1 y 2 y la sensación percibida del esfuerzo realizado.

Introdução: A aplicação clínica de biomateriais está se expandindo para diversas especialidades médicas. Dentre os diversos tipos de biomateriais, os classificados como temporários merecem atenção especial, pois são assimilados pelo organismo após exercerem sua função, evitando, assim, procedimento cirúrgico para sua retirada. O copolímero de poli (ácido láctico-co-glicólico) (PLGA) é um tipo de biomaterial temporário, rotineiramente utilizado na medicina na forma de fios de sutura e implantes ortopédicos. A mistura do PLGA com o poli (isopreno) resulta em uma blenda (PLGA / PI), de alta resistência e tenacidade, que foi desenvolvida pelo Laboratório de Biomateriais do Instituto de Engenharia da UFRGS. Entretanto, não existem estudos “in vivo” testando a reação óssea desta blenda. Objetivo: Testar a histotoxicidade da blenda de PLGA / PI em relação ao biopolímero já consagrado PLGA. Método: Foram utilizados 46 ratos machos wistar (Rattusnorvegicus - linhagem albina), divididos em 2 grupos conforme o material implantado (PLGA ou PLGA / PI) na calota craniana, e subdivididos em tempos de morte (15, 30, 60 e 90 dias). Os procedimentos foram realizados na Unidade de Experimentação Animal (UEA) do Hospital de Clínicas de Porto Alegre (HCPA). Após a morte, a calota craniana foi retirada, submetida ao exame histopatológico e aplicado o escore de Dadas e cols (14) modificado. Resultados: A diferença da histotoxicidade dos dois materiais não foi significativa nos períodos 15, 30 e 90 dias, porém foi significativa no período 60 dias. Conclusão: A histotoxicidade do PLGA / PI, ao final do estudo (90 dias), foi semelhante ao PLGA, demonstrando equivalência em longo prazo. O período de 60 dias pós-cirúrgico (grupo da blenda) foi o único em que a histotoxicidade mostrou-se significativamente maior. Mais estudos devem ser feitos para melhorar o entendimento desta variação. / Introduction: Clinical application of biomaterials is expanding to various medical specialties. Among the different types of biomaterials, those classified as temporary deserve special attention because they are assimilated by the body after exercising their function, thereby avoiding surgical procedure for their removal. Co-polymer poly (lactic-co-glycolic acid) (PLGA) is a type of temporary biomaterial, routinely used in medicine as suture threads and orthopedic implants. The mixture of PLGA with poly (isoprene) results in a high-strength and thoughness blend (PLGA / PI), developed by the Biomaterials Laboratory of the Engineering Institute/ UFRGS. However, there are no studies “in vivo” testing the bone reaction of that blend. Objective: To Test histotoxicity of PLGA / PI blend over the already established biopolymer, PLGA. Method: Forty six male Wistar rats (Rattus norvegicus – albino strain), divided into 2 groups according to the material (PLGA or PLGA / PI) implanted in the skull and sub divided into periods of death (15, 30, 60 and 90 days). The procedures were developed in the Animal Experiment Unit (AEU) of Hospital de Clínicas de Porto Alegre (HCPA). After death, the skull was removed, submitted to histopathologic examination and the modified Dadas’ et all score was used (14). Results: The histotoxicity difference of the two materials was not significant in the periods of 15, 30 and 90 days, but it was significant in the period of 60 days. Conclusion: At the end of the study (90 days), the PLGA / PI histotoxicity was similar to PLGA, showing longterm equivalence. The 60-day post-surgical period was the only one in which histotoxicity was significantly higher (blend group). More studies shall be done in in order to better understand that variation.

Introdução: A aplicação clínica de biomateriais está se expandindo para diversas especialidades médicas. Dentre os diversos tipos de biomateriais, os classificados como temporários merecem atenção especial, pois são assimilados pelo organismo após exercerem sua função, evitando, assim, procedimento cirúrgico para sua retirada. O copolímero de poli (ácido láctico-co-glicólico) (PLGA) é um tipo de biomaterial temporário, rotineiramente utilizado na medicina na forma de fios de sutura e implantes ortopédicos. A mistura do PLGA com o poli (isopreno) resulta em uma blenda (PLGA / PI), de alta resistência e tenacidade, que foi desenvolvida pelo Laboratório de Biomateriais do Instituto de Engenharia da UFRGS. Entretanto, não existem estudos “in vivo” testando a reação óssea desta blenda. Objetivo: Testar a histotoxicidade da blenda de PLGA / PI em relação ao biopolímero já consagrado PLGA. Método: Foram utilizados 46 ratos machos wistar (Rattusnorvegicus - linhagem albina), divididos em 2 grupos conforme o material implantado (PLGA ou PLGA / PI) na calota craniana, e subdivididos em tempos de morte (15, 30, 60 e 90 dias). Os procedimentos foram realizados na Unidade de Experimentação Animal (UEA) do Hospital de Clínicas de Porto Alegre (HCPA). Após a morte, a calota craniana foi retirada, submetida ao exame histopatológico e aplicado o escore de Dadas e cols (14) modificado. Resultados: A diferença da histotoxicidade dos dois materiais não foi significativa nos períodos 15, 30 e 90 dias, porém foi significativa no período 60 dias. Conclusão: A histotoxicidade do PLGA / PI, ao final do estudo (90 dias), foi semelhante ao PLGA, demonstrando equivalência em longo prazo. O período de 60 dias pós-cirúrgico (grupo da blenda) foi o único em que a histotoxicidade mostrou-se significativamente maior. Mais estudos devem ser feitos para melhorar o entendimento desta variação. / Introduction: Clinical application of biomaterials is expanding to various medical specialties. Among the different types of biomaterials, those classified as temporary deserve special attention because they are assimilated by the body after exercising their function, thereby avoiding surgical procedure for their removal. Co-polymer poly (lactic-co-glycolic acid) (PLGA) is a type of temporary biomaterial, routinely used in medicine as suture threads and orthopedic implants. The mixture of PLGA with poly (isoprene) results in a high-strength and thoughness blend (PLGA / PI), developed by the Biomaterials Laboratory of the Engineering Institute/ UFRGS. However, there are no studies “in vivo” testing the bone reaction of that blend. Objective: To Test histotoxicity of PLGA / PI blend over the already established biopolymer, PLGA. Method: Forty six male Wistar rats (Rattus norvegicus – albino strain), divided into 2 groups according to the material (PLGA or PLGA / PI) implanted in the skull and sub divided into periods of death (15, 30, 60 and 90 days). The procedures were developed in the Animal Experiment Unit (AEU) of Hospital de Clínicas de Porto Alegre (HCPA). After death, the skull was removed, submitted to histopathologic examination and the modified Dadas’ et all score was used (14). Results: The histotoxicity difference of the two materials was not significant in the periods of 15, 30 and 90 days, but it was significant in the period of 60 days. Conclusion: At the end of the study (90 days), the PLGA / PI histotoxicity was similar to PLGA, showing longterm equivalence. The 60-day post-surgical period was the only one in which histotoxicity was significantly higher (blend group). More studies shall be done in in order to better understand that variation.

Submitted by JESSICA KIRSCH MICHELETTI null (jessicamicheletti@hotmail.com) on 2016-01-07T18:04:37Z No. of bitstreams: 1 JÉSSICA KIRSCH MICHELETTI.pdf: 1986588 bytes, checksum: dd0a0d26b8a3217f5d310580899619c8 (MD5) / Approved for entry into archive by Sandra Manzano de Almeida (smanzano@marilia.unesp.br) on 2016-01-08T15:53:32Z (GMT) No. of bitstreams: 1 micheletti_jk_me_prud.pdf: 1986588 bytes, checksum: dd0a0d26b8a3217f5d310580899619c8 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-01-08T15:53:32Z (GMT). No. of bitstreams: 1 micheletti_jk_me_prud.pdf: 1986588 bytes, checksum: dd0a0d26b8a3217f5d310580899619c8 (MD5) Previous issue date: 2015-12-16 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / A imersão em água fria (IAF) aparece no cenário atual como uma técnica recuperativa eficaz no meio esportivo, atuando sobre diferentes desfechos. Entretanto, o conceito de recuperação pós-exercício merece destaque, uma vez que análise de parâmetros isolados parece ferir esse conceito. Para tanto, a construção de um desenho a partir de um único mecanismo de estresse, com a mesma característica de aplicação de técnica e envolvendo elementos de dimensões diversas parece pertinente. Objetivo: analisar a recuperação após um treino imediato e verificar o comportamento isolados e em conjunto dos parâmetros clínicos, funcionais, metabólico e autonômico a partir do uso da IAF como técnica recuperativa. Métodos: Amostra composta por 64 jogadores de futebol do sexo masculino, randomizados em dois grupos, grupo controle (GC) e grupo experimental (GE). Os procedimentos foram realizados em duas etapas. 1ª: Participantes foram submetidos a testes basais de função muscular. 2ª: Após uma semana de descanso, foram submetidos a um treino chave (50 minutos) e imediatamente após realizaram a intervenção por 15 minutos, GE recebeu a IAF (13º±1ºC) e GC permaneceu sentado. As variáveis investigadas foram percepção subjetiva de dor, percepção de recuperação, alteração de sensibilidade, concentração de lactato sanguíneo, modulação autonômica cardíaca e os testes funcionais, estas foram mensuradas durante momentos específicos da recuperação até ao máximo 2 horas pós-treino chave. Para análise estatística utilizou-se o pacote estatístico SPSS Statistics 22.0. Para os dados numéricos, nos marcadores funcionais, a distribuição dos dados foi testada (Komolgorov-Smirnov) e como normal utilizou-se o teste t de Student para amostras independentes. Para os demais marcadores foram testados a esfericidade dos dados (teste de Mauchly). Os dados foram analisados utilizando a Análise de Variância para Medidas Repetidas (pós-teste de Bonferroni). Para os dados dicotomizados foi realizado para os dados de frequências relativa (%) da pontuação total (todos os desfechos) o teste Mann-Whitney. E para a frequência absoluta (de casos) o teste de qui-quadrado. Para calcular a probabilidade de recuperação foi utilizada regressão logística. Resultados: Dados numéricos: Para os desfechos clínicos, não foram observadas diferenças estatisticamente significantes entre os grupos, e ambos se recuperam no mesmo momento (15 minutos pós-treino chave). Para o desfecho metabólico, ambos os grupos se recuperaram no mesmo momento (2 horas pós-exercício). No desfecho função, não houve diferenças significantes entre momentos e entre grupos. Para análise da variabilidade da frequência cardíaca observou-se antecipação da recuperação de todos os índices no GE comparado ao GC. Dados dicotomizados: A análise em conjunto das categorias de variáveis não demonstrou melhor eficácia da técnica de IAF, em que o GC se recuperou 63,4% e o GE: 69,17. Quando avaliado os sistemas isolados há uma melhor probabilidade de chance da técnica em ser melhor para desfechos metabólico e autonômico. Conclusões: Gerais: Quando analisado em conjunto as categorias dos desfechos, as técnicas apresentam recuperações próximas, sem diferenças estatísticas. Específicos: Quando analisado as categorias de desfechos isoladas há elevada probabilidade de recuperação em até 2 horas pós-treino chave para participantes dos dois grupos nas variáveis clínicas, metabólica, autonômica e funcionais, exceção para o desfecho contração isométrica voluntária máxima (na análise dos dados dicotomizados). Para os conjuntos de variáveis metabólicas e autonômicas a probabilidade de recuperação mostrou-se maior para o GE (na análise dos dados dicotomizados). Por fim, o sistema autonômico é beneficiado com a técnica em ambas as análises. / Cold water immersion (CWI) appears in the current scenario as an effective recuperative technique in sports, working on different outcomes. However, the concept of post-exercise recovery deserves attention, since analysis of individual parameters seem to hurt this concept. Therefore, the construction of a drawing from a unique mechanism of stress, with the same technique application feature and involving elements of various dimensions seems pertinent. Objective: To analyze the immediately recovery after a training and to verify the isolated and combined behavior of clinical, functional, metabolic and autonomic parameters from the use of immersion in cold water as recuperative technique. Methods: A sample of 64 football players, randomized into two groups, control group (CG) and experimental group (EG). The procedures were performed in two stages. 1st: Participants underwent basic tests of muscle function. 2nd: After a week of rest, underwent a key workout (50 minutes) and immediately after the intervention performed for 15 minutes, GE received the IAF (13 ± 1 ° C) and GC stay sitting. The investigated variables were subjective perception of pain, perceived recovery, abnormal sensitivity, blood lactate concentration, cardiac autonomic modulation and functional tests, these were measured during specific recovery times up to a maximum two hours post training. Statistical analysis was performed using the statistical package SPSS Statistics 22.0. For numeric data, the functional markers, the distribution of the data was tested (Komolgorov-Smirnov) and as normal we used the t student test for independent samples. For the other markers were tested sphericity data (Mauchly test). Data were analyzed using analysis of variance for repeated measures (Bonferroni post-test). For dichotomized data was performed for data on frequency (%) of total score (all outcomes) Mann-Whitney test. And the absolute frequency (cases) chi-square test. To calculate the probability of recovery was used logistic regression. Results: numerical data: For clinical outcomes, statistically significant differences were observed between the groups, and both recover at the same time (15 minutes post training). For metabolic outcomes, both groups recovered at the same time (2 hours after exercise). The function outcome, there were no significant differences between moments and between groups. For the analysis of heart rate variability was observed anticipation of recovery of all indices in the EG compared to the CG. Dichotomized data: Analysis together variable categories did not show better efficacy CWI technique where the GC has recovered 63.4% and GE: 69,17. When assessed isolated systems there is a better chance of technique likely to be better for metabolic and autonomic outcomes. Conclusions: General: When analyzed together the categories of outcomes, the techniques presented close recoveries, with no statistical differences. Specific: When analyzed the categories of isolated outcomes there is high probability of recovery within 2 after training hours for participants of the two groups in clinical, metabolic, autonomic and functional, except for the outcome of maximal voluntary isometric contraction (in the analysis of dichotomized data). For groups of metabolic and autonomic variables the probability of recovery was higher for the GE (in the analysis of dichotomized data). Finally, the autonomic system is benefit from the technique in both analyses.

Submitted by Juliana Pampana Nicolau null (julianapampana@yahoo.com.br) on 2016-07-12T14:52:49Z No. of bitstreams: 1 Tese Doutorado Juliana Pampana Nicolau.pdf: 1262579 bytes, checksum: d130f3374dbb5a40ecba494efb96532e (MD5) / Approved for entry into archive by Ana Paula Grisoto (grisotoana@reitoria.unesp.br) on 2016-07-14T20:16:55Z (GMT) No. of bitstreams: 1 nicolau_jp_dr_araca.pdf: 1262579 bytes, checksum: d130f3374dbb5a40ecba494efb96532e (MD5) / Made available in DSpace on 2016-07-14T20:16:55Z (GMT). No. of bitstreams: 1 nicolau_jp_dr_araca.pdf: 1262579 bytes, checksum: d130f3374dbb5a40ecba494efb96532e (MD5) Previous issue date: 2016-06-28 / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / O Brasil é um grande produtor e exportador de carne de frango e, por isso, deve primar em fornecer o produto com segurança e qualidade. A Salmonella sp. destaca-se dentre os patógenos que podem contaminar a carne de frango e, para minimizar sua prevalência, a legislação brasileira permite o uso de até 5 ppm de hipoclorito de sódio no pré-resfriamento de carcaças de frango, enquanto que outros países preconizam o uso de ozônio e ácido láctico para a mesma finalidade. Este estudo objetivou verificar se diferentes concentrações de hipoclorito de sódio, ozônio e ácido láctico, utilizados isoladamente e em conjunto na descontaminação de carcaças de frango, são eficazes na eliminação desse patógeno e se provocam alterações em suas características de qualidade. Para pesquisar a eliminação da Salmonella sp., carcaças foram contaminadas com Salmonella Enteritidis e, em seguida, submetidas aos tratamentos com os sanitizantes. Para a pesquisa sobre as características da carne, as carcaças foram tratadas com os sanitizantes e analisadas quanto a pH, rancidez, cor e sabor. O hipoclorito de sódio foi o sanitizante mais eficiente para a descontaminação das carcaças e, também, o que mais provocou alterações nas características da carne, como a redução do pH e da rancidez e o aumento da luminosidade. Na análise sensorial, não se encontrou diferença entre os tratamentos com os diferentes sanitizantes. Concluiu-se que o uso isolado do hipoclorito de sódio na concentração máxima permitida no Brasil é suficiente para a eliminação do patógeno, não sendo necessária a utilização de outros sanitizantes para o mesmo fim, e que as alterações por ele provocadas não afetaram a aceitabilidade do produto. / Brazil is a major producer and exporter of poultry meat and must aim to provide the product with safety and quality. Salmonella sp. is among the pathogens that can contaminate poultry meat and, to minimize its prevalence, Brazilian laws allow the use of up to 5 ppm of sodium hypochlorite in the precooling of poultry carcasses while other countries recommend the use of ozone and lactic acid. This study aimed to investigate if sodium hypochlorite, ozone and lactic acid used in different concentrations for the decontamination of broilers carcasses, alone or in combination, are effective for eliminating this pathogen and if their use may change the quality characteristics of broiler meat. To investigate the elimination of Salmonella sp., the carcasses were contaminated with Salmonella Enteritidis and then treated with the sanitizers. For the evaluation of the meat characteristics, carcasses were treated with the sanitizers and analyzed for pH, rancidity, color and flavor. Sodium hypochlorite was the most efficient sanitizer for the decontamination of the carcasses and also the one which caused most changes in meat characteristics, such as lowering pH and rancidity and increasing lightness. Sensory analysis showed no difference among treatments. In conclusion, the use of sodium hypochlorite alone at the maximum allowable concentration in Brazil was enough to eliminate the pathogen, not requiring the use of any other sanitizers for the same purpose, and the changes it caused to meat characteristics did not affect the acceptability of the product. / FAPESP: 2013/22340-8

A produção de bacteriocina por Bactérias Ácido Lácticas tem atraído grande atenção por causa do seu status GRAS (Generally Recognized as Safe), e seu uso potencial como aditivo seguro para a conservação de alimentos. Em função de suas características antimicrobianas, as bacteriocinas têm sido testadas como bioconservadores em diversos produtos, mostrando atividade contra microrganismos patogênicos. Porém, o elevado custo de produção ainda tem sido um fator relevante para ampla utilização deste tipo de conservante. Portanto, o objetivo deste trabalho foi avaliar a viabilidade da produção de enterocinas, utilizando soro de leite parcialmente desmineralizado e água de maceração de milho (milhocina) como substrato. Foram avaliados 5 isolados de enterococos (Efm20, Efm22, Efm24, Efm25 e Efs27) produtores de enterocina em meio MRS frente a bactéria Listeria innocua CLIP 12612 e Listeria monocytogenes 2032. O meio de cutura MRS foi substituido na concentração de 25% por soro de leite ou milhocina. O ensaio da ação da enterocina foi realizado pelo método de difusão em poços. O caráter proteico da bacteriocina foi confirmado após incubação com enzimas proteolíticas α-quimiotripsina, protease e proteinase-K. A produção de peróxido de hidrogênio e ácido lático foram descartadas pela utilização de catalase e neutralização com NaOH. O sobrenadante livre de células (CFS) obtido em ambos substratos foram tratados a 80 °C e 100 °C, apresentando termoestabilidade. Os CFS obtidos em MRS com milhocina pelo isolado Efm22 (24 horas) atingiu 6400 UA/mL frente às duas bactérias indicadoras. Já os isolados Efm24 (24 horas) e Efm20 (18 horas) chegaram a 6400 UA/mL frente a Listeria innocua CLIP 12612. Em soro de leite, os maiores valores de UA/mL ocorreram pelos isolados Efm20, Efm25 e Efs27 (24 horas). Em conclusão, constatou-se que os substratos testados apresentam potencial para serem aplicados na fabricação de bioconservantes de produtos alimentícios. / The production of bacteriocin by Lactic Acid Bacteria has attracted great attention because of its GRAS (Generally Recognized as Safe) status, and its potential use as a safe additive for food preservation. Due to their antimicrobial characteristics, bacteriocins have been tested as bioconservatives in several products, showing activity against pathogenic microorganisms. However, the high cost of production has still been a relevant factor for the wide use of this type of preservative. Therefore, the objective of this work was to evaluate the viability of enterocin production using partially demineralized whey and corn steep liquor as substrate. Five Enterococcus isolates (Efm20, Efm22, Efm24, Efm25 and Efs27) were tested on MRS medium against Listeria innocua CLIP 12612 bacterium and Listeria monocytogenes 2032. The MRS culture medium was replaced at 25% concentration by whey or corn steep liquor.The assay of the action of enterocin was performed by the well diffusion method. The proteinic character of bacteriocina was confirmed after incubation with proteolytic enzymes α-chymotrypsin, protease and proteinase-K. The production of hydrogen peroxide and lactic acid were discarded by the use of catalase and neutralization with NaOH. The cell free supernatant (CFS) obtained on both substrates were treated at 80 ° C and 100 ° C, exhibiting thermostability. The CFS obtained in MRS with corn steep liquor by the Efm22 isolate (24 hours) reached 6400 AU / mL against the two indicator bacteria. On the other hand, the isolates Efm24 (24 hours) and Efm20 (18 hours) reached 6400 AU / mL compared to Listeria innocua CLIP 12612. In whey, the highest values of UA / mL occurred with the isolates Efm20, Efm25 and Efs27 (24 hours). In conclusion, it was verified that the substrates tested have potential to be applied in the manufacture of food product bioconservants.

Introdução: A aplicação clínica de biomateriais está se expandindo para diversas especialidades médicas. Dentre os diversos tipos de biomateriais, os classificados como temporários merecem atenção especial, pois são assimilados pelo organismo após exercerem sua função, evitando, assim, procedimento cirúrgico para sua retirada. O copolímero de poli (ácido láctico-co-glicólico) (PLGA) é um tipo de biomaterial temporário, rotineiramente utilizado na medicina na forma de fios de sutura e implantes ortopédicos. A mistura do PLGA com o poli (isopreno) resulta em uma blenda (PLGA / PI), de alta resistência e tenacidade, que foi desenvolvida pelo Laboratório de Biomateriais do Instituto de Engenharia da UFRGS. Entretanto, não existem estudos “in vivo” testando a reação óssea desta blenda. Objetivo: Testar a histotoxicidade da blenda de PLGA / PI em relação ao biopolímero já consagrado PLGA. Método: Foram utilizados 46 ratos machos wistar (Rattusnorvegicus - linhagem albina), divididos em 2 grupos conforme o material implantado (PLGA ou PLGA / PI) na calota craniana, e subdivididos em tempos de morte (15, 30, 60 e 90 dias). Os procedimentos foram realizados na Unidade de Experimentação Animal (UEA) do Hospital de Clínicas de Porto Alegre (HCPA). Após a morte, a calota craniana foi retirada, submetida ao exame histopatológico e aplicado o escore de Dadas e cols (14) modificado. Resultados: A diferença da histotoxicidade dos dois materiais não foi significativa nos períodos 15, 30 e 90 dias, porém foi significativa no período 60 dias. Conclusão: A histotoxicidade do PLGA / PI, ao final do estudo (90 dias), foi semelhante ao PLGA, demonstrando equivalência em longo prazo. O período de 60 dias pós-cirúrgico (grupo da blenda) foi o único em que a histotoxicidade mostrou-se significativamente maior. Mais estudos devem ser feitos para melhorar o entendimento desta variação. / Introduction: Clinical application of biomaterials is expanding to various medical specialties. Among the different types of biomaterials, those classified as temporary deserve special attention because they are assimilated by the body after exercising their function, thereby avoiding surgical procedure for their removal. Co-polymer poly (lactic-co-glycolic acid) (PLGA) is a type of temporary biomaterial, routinely used in medicine as suture threads and orthopedic implants. The mixture of PLGA with poly (isoprene) results in a high-strength and thoughness blend (PLGA / PI), developed by the Biomaterials Laboratory of the Engineering Institute/ UFRGS. However, there are no studies “in vivo” testing the bone reaction of that blend. Objective: To Test histotoxicity of PLGA / PI blend over the already established biopolymer, PLGA. Method: Forty six male Wistar rats (Rattus norvegicus – albino strain), divided into 2 groups according to the material (PLGA or PLGA / PI) implanted in the skull and sub divided into periods of death (15, 30, 60 and 90 days). The procedures were developed in the Animal Experiment Unit (AEU) of Hospital de Clínicas de Porto Alegre (HCPA). After death, the skull was removed, submitted to histopathologic examination and the modified Dadas’ et all score was used (14). Results: The histotoxicity difference of the two materials was not significant in the periods of 15, 30 and 90 days, but it was significant in the period of 60 days. Conclusion: At the end of the study (90 days), the PLGA / PI histotoxicity was similar to PLGA, showing longterm equivalence. The 60-day post-surgical period was the only one in which histotoxicity was significantly higher (blend group). More studies shall be done in in order to better understand that variation.

Submitted by Marco Antônio de Ramos Chagas (mchagas@ufv.br) on 2016-12-15T14:55:51Z No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 399989 bytes, checksum: b78aa7781df8301e72ce7e0ff6bdfbdc (MD5) / Made available in DSpace on 2016-12-15T14:55:51Z (GMT). No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 399989 bytes, checksum: b78aa7781df8301e72ce7e0ff6bdfbdc (MD5) Previous issue date: 2016-07-29 / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de Minas Gerais / Capítulo 1 - Foram conduzidos dois experimentos para avaliar os efeitos de tipo silagem e níveis de proteína bruta (PB) na dieta de bovinos Nelore. As dietas experimentais foram constituídas por silagem de Stylosanthes (SSt) ou silagem de milho (SM) com dois níveis de PB, 110 e 130 g PB/kg de dieta na matéria seca (MS). A relação volumoso: concentrado foi de 50:50 com base na MS. No Experimento 1, foram utilizados quatro bovinos com média de peso corporal inicial de 450 ± 37,9 kg, canulados no rúmen e abomaso. Os animais foram distribuídos em um quadrado latino 4 × 4, em esquema fatorial 2 × 2, com quatro períodos de 16 dias. Neste experimento, foram coletadas amostras de líquido ruminal, digesta abomasal, fezes, urina e sangue. Além disso, foram estimados os parâmetros cinéticos de degradação da MS, PB e fibra em detergente neutro (FDN). No Experimento 2, 40 bovinos com média de peso corporal inicial de 374 ± 16,5 kg, distribuídos em um delineamento inteiramente casualizado, em esquema fatorial 2 × 2, com dez repetições. O experimento teve duração de 99 dias, dividido em um período inicial de 15 dias de adaptação e um período de 84 dias de coleta de dados. No Experimento 2, foram avaliados o consumo, a digestibilidade dos nutrientes e o desempenho dos animais. As frações potencialmente degradáveis da MS, PB e FDN da SSt foram inferiores em relação a SM (P<0,004). As dietas contendo SSt apresentaram menor digestibilidade ruminal da matéria orgânica (MO) e menor digestibilidade total da MO, PB e FDN em comparação com as dietas contendo SM (P<0,050). As dietas contendo SSt apresentaram valores mais elevados de pH ruminal em comparação com dietas contendo SM (P=0,010). A concentração ruminal de N-NH 3 foi mais elevada para o nível de 130 g PB/kg de dieta, em comparação com 110 g PB/ kg de dieta (P<0,001). Os níveis de PB das dietas afetaram o nitrogênio ureico no sangue (P<0,001) e na urina (P=0,017), e em ambas as dietas contendo SSt e SM foram superiores para o nível de 130 g de PB/kg de dieta. As dietas contendo SSt apresentaram maior consumo de MS, MO, PB, FDN e fibra em detergente neutro indigestível (FDNi) em comparação dietas contendo SM (P<0,008). No entanto, a quantidade de nutrientes digeridos (kg/dia) foi semelhante entre os tratamentos (P>0,050). O tipo de silagem e nível de PB na dieta não apresentaram efeito sobre o desempenho produtivo (P>0,050), porém as dietas contendo SSt tenderam a diminuir a eficiência alimentar (P=0,085). Contudo, a SSt e o nível de 110 g PB/kg de dieta podem ser utilizados para alimentação na terminação de bovinos confinados. Capítulo 2 - Foram isoladas cento e cinquenta e uma cepas de bactérias do acido lático (BAL) da silagem de planta inteira de milho. As identificações foram baseadas na análise da sequência de rDNA 16S. As espécies predominantes foram Lactobacillus plantarum 53,0%, Pediococcus pentosaceus 11,9%, Lactobacillus buchneri 9,9%, Lactobacillus pentosus 5,3%, Weissella cibaria 4,6%, e Lactobacillus brevis 4,0%. As estirpes de Lactobacillus buchneri foram predominantes no dia 56 de ensilagem. Oito estirpes de L. buchneri foram pré-selecionadas de um total de 15 estirpes com base na taxa de crescimento e na produção de metabólitos. As estirpes selecionadas foram avaliadas na fermentação e estabilidade aeróbia de silagens de milho e cana-de-açúcar. Não houve melhoria no teor de MS, população de mofo e leveduras, perdas de MS e estabilidade aeróbia da silagem de milho (P>0,050) inoculadas com as estirpes 56.22, 56.27, 56.28, e 56.29. Enquanto as estirpes 56.1, 56.4 e a comercial 40788, quando inoculadas em silagem de cana-de-açúcar, apresentaram os maiores teores de MS e menores de perda de MS em comparação com a silagem contole (P<0,050). A estirpe comercial apresentou a menor população de mofos e leveduras após 90 dias de ensilagem (P = 0,024). No entanto, a estabilidade aeróbia não foi afetada. Após a exposição ao ar, todas as silagens deterioram e apresentaram elevada população de mofos e leveduras. A pré- seleção de estirpes de L. buchneri com base na produção de ácido acético apresentou os melhores resultados no processo de ensilagem. Assim, as estirpes 56.1 e 56.4 são promissoras para utilização como inoculante para silagem de cana-de-açúcar. / Chapter 1 - Two trials were conducted to evaluate the effects of silage crop and levels of dietary crude protein (CP) in Nellore beef cattle. The experimental diets consisted of Stylosanthes (StS) or corn silage (CS) with two levels of dietary CP, 110 and 130 g CP/kg diet on dry matter (DM) basis. The forage to concentrate ratio was 50:50 on a DM basis. In Experiment 1, four bulls were used, with an average initial body weight (BW) of 450 ± 37.9 kg, surgically cannulated in the rumen and abomasum. The bulls were assigned to a 4 × 4 Latin square with a 2 × 2 factorial design of treatments, and four 16-day periods. In this experiment, we collected ruminal fluid, abomasal digesta, feces, urine, and blood. In addition, the kinetic parameters of DM, CP and neutral detergent fiber (NDF) degradation were estimated. In Experiment 2, 40 bulls with an average initial BW of 374 ± 16.5 kg were distributed into a 2 × 2 factorial in a randomized design with ten replicates. The trial lasted 99 days and was divided into a 15-day period for adaptation and an 84-day period for data collection. The intake and digestibility of nutrients, as well as animal performance were evaluated in Experiment 2. The potentially degradable fractions of DM, CP, and NDF of StS were lower than CS (P<0.004). The diets containing StS showed lower ruminal digestibility of organic matter (OM) and lower total digestibility of OM, CP, and NDF than diets containing CS (P<0.050). The StS-based diets showed higher values for ruminal pH in comparison with CS-based diets (P=0.010). The ruminal NH 3 -N concentration was higher for the level of 130 g CP/kg diet in comparison with 110 g CP/kg diet (P<0.001). The dietary CP level affected urea nitrogen in blood (P<0.001) and urine (P=0.017), which in the diets containing StS and CS were higher at the level of 130 g CP/kg diet. The diets containing StS showed higher intake of DM, OM, CP, NDF, and indigestible neutral detergent fiber (iNDF) than diets containing CS (P<0.008). However, the amount of digested nutrients (kg/d) was similar between treatments (P>0.050). The silage crop and dietary CP levels had no effect on productive performance (P>0.050), but the StS-based diet tended to decrease feed efficiency (P=0.085). Thus, StS, as well as the level of 110 g CP/kg diet, can be used to feed finishing beef cattle. Chapter 2 - One hundred and fifty-one LAB strains were isolated from whole-plant corn silage in tropical weather. Their identifications were based on sequence analysis of 16S rDNA. The predominant species were Lactobacillus plantarum 53.0%, Pediococcus pentosaceus 11.9%, Lactobacillus buchneri 9.9%, Lactobacillus pentosus 5.3%, Weissella cibaria 4.6%, and Lactobacillus brevis 4.0%. Lactobacillus buchneri strains were predominant at day 56 of ensiling. Eight L. buchneri strains from a total of 15 were preselected, based on growth rate and metabolites production. The strains selected were evaluated on fermentation and aerobic stability of corn and sugarcane silages, four strains in each crop. There was no improvement of the inoculation with the strains 56.22, 56.27, 56.28, and 56.29 on the DM content, yeast and molds population, DM losses, and aerobic stability of corn silage (P > 0.050). Inoculated silages had lower concentration of acetic acid and higher ethanol in comparison with the control silage (P < 0.050). While the strains 56.1, 56.4, and 40788 showed highest DM content, and lowest DM losses when applied in sugarcane silage. At day 90 of ensiling, the commercial strain showed lowest population of yeasts and molds in sugarcane silage. However, the aerobic stability was not affected. After air exposure, all silages deteriorate and had high population of yeast and molds. Preselection of L. buchneri strains based on acetic acid production showed the best results on silage fermentation. Thus, the strains 56.1 and 56.4 are promising for use as an inoculant in sugarcane silages.

Orientadores: Ana Rita Morales, Otávio Cavalett / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Engenharia Química / Made available in DSpace on 2018-08-27T19:01:47Z (GMT). No. of bitstreams: 1 CosatedeAndrade_MarinaFernandes_M.pdf: 2991365 bytes, checksum: df7e463a288c5c88feea3df3157d956a (MD5) Previous issue date: 2015 / Resumo: Este projeto teve como objetivo realizar uma Avaliação do Ciclo de Vida comparando três formas de destinação do poli(ácido láctico) (PLA) e estudar a reciclagem deste polímero, que pode ser mecânica ou química. A reciclagem mecânica foi realizada por duas extrusões do PLA. No segundo processamento, o polímero proveniente da primeira extrusão foi dividido em duas partes, sendo que uma porção recebeu adição de um extensor de cadeia comercial. As amostras obtidas foram caracterizadas por Calorimetria Diferencial Exploratória (DSC), Cromatografia por Permeação em Gel (GPC), Índice de Fluidez, Análise Termogravimétrica (TGA), ensaio de resistência ao impacto Izod e ensaio de tração. Os resultados obtidos mostraram que o número de extrusões diminuiu a massa molar, o índice de fluidez e a estabilidade térmica e aumentou a cristalinidade do polímero. A presença do extensor de cadeia causou a recuperação dessas propriedades. Além disso, o módulo de elasticidade e o alongamento na ruptura sofreram alterações importantes com o aumento da cristalinidade do material. A reciclagem química foi realizada pela hidrólise do PLA, que gera ácido láctico, e posteriormente pela polimerização do ácido láctico, em que é obtido novamente PLA, através da policondensação direta. O ácido láctico foi caracterizado por Cromatografia Líquida de Alta Eficiência (HPLC) e o rendimento da reação obtido foi acima de 95%. O PLA polimerizado foi identificado por Espectroscopia do Infravermelho por Transformada de Fourier (FTIR) e sua massa molar foi medida por Cromatografia por Permeação em Gel (GPC). Os resultados da Avaliação do Ciclo de Vida para os métodos e categorias estudados mostraram que a reciclagem mecânica apresentou o menor impacto ambiental, seguida pela reciclagem química e pela compostagem. Dentre as formas de reciclagem, o insumo mais importante foi o consumo de energia elétrica / Abstract: This project aimed to conduct a Life Cycle Assessment comparing three forms of poly(lactic acid) (PLA) disposal and to study the mechanical and chemical recycling of this polymer. Mechanical recycling was performed by two extrusions of PLA. In the second extrusion, part of the material was processed with a commercial chain extender. The samples were characterized by Differential Scanning Calorimetry (DSC), Gel Permeation Chromatography (GPC), Melt Flow Index, Thermogravimetric Analysis (TGA), Izod test and Tensile test. The results showed that the molecular weight, Melt Flow Index and thermal stability decreased and the crystallinity degree of the polymer increased with the extrusion number. The presence of a chain extender recovered these properties. Furthermore, Young modulus and elongation at break undergo important changes with the crystallinity increase. The chemical recycling was performed by hydrolysis reaction, which produced lactic acid. PLA was obtained through the direct condensation polymerization from lactic acid monomer. Lactic acid was characterized by High Performance Liquid Chromatography (HPLC) and the reaction yield was above 95%. The polymerized PLA was identified by Fourier Transform Infrared Spectroscopy (FTIR) and Gel Permeation Chromatography (GPC). Considering the methods and impact categories studied, the Life Cycle Assessment showed that mechanical recycling had the lowest environmental impact, followed by chemical recycling and composting. Among the forms of recycling, the most important input was the electricity consumption / Mestrado / Ciencia e Tecnologia de Materiais / Mestra em Engenharia Química