Ett blodstatusprov är en viktig analys inom både human- och veterinärmedicin för att bedöma hälsotillståndet hos patienter och för att upptäcka eventuella hematologiska avvikelser. Denna analys utförs med automatiska cellräknare där en del av analysen är att differentiera och kvantifiera de olika leukocyttyperna. Vid sjukdom är det vanligt att blodet innehåller ett förhöjt antal avvikande leukocyter, vilket automatiska cellräknare kan ha svårt att kvantifiera. Då bör referensmetoden manuell leukocytdifferentiering utföras som komplement. Syftet med studien var att jämföra leukocytantalet från katt- och hundblodprover kvantifierade av den automatiska cellräknaren ProCyte Dx, med en manuell celldifferentiering. Detta studerades genom att utvärdera hur väl metodernas resultat överensstämde. Differentialräkning utfördes på blodprov från 20 katter och 16 hundar, med ProCyte Dx och genom manuell celldifferentiering. Resultatet visade inga signifikanta skillnader mellan metoderna för lymfocyter och eosinofiler, men däremot för monocyter. För neutrofiler observerades signifikanta skillnader mellan metodernas resultat för katt, men inte för hund. Resultaten visade en stark korrelation mellan metodernas resultat för neutrofiler hos både katt och hund (r=0,92 resp. 1,0), men även för eosinofiler hos katt (r=0,88). Hos hund visade resultatet en stark korrelation för lymfocyter (r=0,83) men även för monocyter (r=0,89). En viss förskjutning i differens mellan metodernas resultat kunde observeras, särskilt för neutrofiler där resultatet indikerar att fler av denna celltyp kvantifierats manuellt än av ProCyte. Sammantaget visar studiens resultat inga signifikanta skillnader mellan metoderna för majoriteten av de undersökta leukocyttyperna. Rekommendationen är dock att komplettera med en manuell celldifferentiering om resultatet från den ProCyte-utförda celldifferentieringen avviker från normala värden. / A blood count analysis is performed using hematology analyzers where part of it is to differentiate and quantify the different kinds of leukocytes. Sometimes a complementary manual differential count is required, e.g. in presence of abnormal cells. The purpose of this study was to compare the leukocyte count for cat and dog blood samples performed by the hematology analyzer ProCyte Dx with a manual leukocyte count. This was done by evaluating the agreement of the results from the two methods. Differential counts with blood samples from 20 cats and 16 dogs were performed using ProCyte and manual differential counts. The result implied no significant differences between the two methods for lymphocytes and eosinophils. Monocytes however, showed a significant difference. For neutrophils, a significant difference was found for cats but not for dogs. The result demonstrated a strong correlation between the methods for neutrophils for both feline (r=0,92) and canine (r=1,0) blood samples, as well as for feline eosinophils (r=0,88). Furthermore, the result demonstrated a strong correlation for canine lymphocytes (r=0,83) and monocytes (r=0,89). A mean difference bias between the result of the two methods was noticed, especially for neutrophils where a larger number of neutrophils was counted manually than by ProCyte. In summary, the result of the study showed no significant differences between the methods for the majority of the examined leukocyte kinds. The recommendation is to use manual differential counts as a complement when the result from the leukocyte differential count performed by ProCyte is abnormal.

BAKGRUND: Leukocyter ingår i kroppens immunförsvar vilket skyddar oss mot b.la. angrepp av bakterier och virus. Vid högintensivt fysiskt arbete så hamnar vi i ett s.k. ”open window” där vi är som mest mottagliga för sjukdomar. Tidigare studier har visat att vid långvarig, högintensivt fysiskt arbete ökar leukocytantalet, vilket leder till att kroppen sätter upp ett försvar mot angrepp.SYFTE: Studiens syfte var att undersöka effekten på leukocyter och dess undergrupper, om de ökade efter ett långvarigt högintensivt fysiskt arbete, i detta fall Vasaloppet. METOD: Mätningar har gjorts via kapillärt blodprov, de gjordes innan start och efter målgång och analyserades sedan i Hemocue WBC Diff. RESULTAT: Totala leukocytantalet ökade med 6,8, neutrofila granulocyterna ökade med 6,7, monocyterna ökade med 0,2 och de basofila granulocyterna ökade med 0,03. Lymfocyterna minskade med  -0,1 och de eosinofila granulocyterna minskade med -0,55.  KONKLUSION: Långvarigt, ansträngande, fysiskt arbete, leder till en ökning av leukocyter och vissa undergrupper. Detta innebär att immunförsvaret påverkas och man hamnar i det så kallade ”open window”. Till framtida studier skulle det vara intressant att se hur immunförsvaret påverkas av träning under en längre period.

Leukocyter, vita blodkroppar, utgör en del av kroppens immunförsvar. De utmognar från hematopoetiska stamceller i benmärgen. Leukocyterna kan delas in i neutrofila granulocyter, lymfocyter, monocyter, eosinofila granulocyter och basofila granulocyter. För att bestämma antalet leukocyter i blodet analyseras leukocytpartikelkoncentration (B-LPK) med cellräknare. Om B-LPK är förhöjt eller sänkt utförs en differentialräkning av leukocyter (B-Diff) för att se i vilket cellsystem förändring föreligger. Den manuella analysen utförs på perifera blodutstryk färgade med cytokemisk färg, May-Grünwald Giemsa. Utstryket granskas i ett automatiskt mikroskopiskt system som räknar, fotograferar och förklassificerar leukocyter efter deras utseende. DiffMaster Octavia och CellaVision DM1200 är två varianter av ett sådant instrument från samma tillverkare (CellaVision AB, Lund, Sverige). Syftet med studien var att utföra en metodjämförelse mellan dessa instrument genom analys av 60 patientprov bestående av venöst blod taget i EDTA-rör. Proven samlades in slumpmässigt från patienter (32 män och 28 kvinnor) mellan 19-95 år. Resultaten visade enligt tvåsidigt parat t-test ingen signifikant skillnad avseende differentialräkning av neutrofila granulocyter, lymfocyter och monocyter. Korrelationen var 0,95, 0,91 respektive 0,68. Det fanns dock en signifikant skillnad mellan instrumenten avseende differentialräkning av eosinofila- och basofila granulocyter, korrelationen var 0,91 respektive 0,20. När endast 200 celler räknas kan ett resultat på 2 % skilja upp till 1-5 %. Därför blir skillnader på leukocyttyper som utgör enstaka procent i blodet normalt mycket stora. Metodjämförelsen visade att båda instrumenten ger samma resultat och anses därför likvärdiga vid analys av manuell B-Diff. / Leukocytes, white blood cells, are cells of the immune system. They are produced and derived from hematopoietic stem cells in the bone marrow. Leukocytes can be divided into neutrophils, lymphocytes, monocytes, eosinophils and basophils. To determine the numbers of leukocytes in blood the leukocyte particle concentration (B-LPK) can be analyzed by cell counters. When B-LPK is elevated or lowered a differential count of leukocytes (B-Diff) is performed to see in which cell systems the change exists. The manual analysis involves peripheral blood smears stained with a cytochemical color, May-Grünwald Giemsa. The smear examined in an automatic microscopically system that counts, photographs and pre-classify leukocytes by its appearance. DiffMaster Octavia and CellaVision DM1200 are two variants of such instruments from the same manufacturer (CellaVision AB, Lund, Sweden). The aim of the study was to do a comparison between these instruments by analyzing 60 samples consisting venous blood in EDTA-tubes. The samples were collected randomly from patients (32 men and 28 women) between 19-95 years old. The results from two-sided paired t-test showed no significant difference between the differential count of neutrophils, lymphocytes and monocytes. The correlation was 0,95, 0,91 and 0,68. However, there was a significant difference between the instruments differential count of eosinophils and basophils, the correlation was 0,91 and 0,20. When counting only 200 cells a profit of 2 % distinguish up to 1-5 %. Abnormalities in leukocytes which represents only a few percent in blood can therefore be very large. Method comparison showed that both instruments give the same results and are considered equivalent in analysis of manual B-Diff.

No description available.

Sammansättningen av leukocyter i perifert blod varierar med olika sjukdomstillstånd och analys av cellerna är avgörande vid diagnostisering och uppföljning av olika leukemier.  Manuell mikroskopering och utvärdering av leukocyterna är tidskrävande och inte alltid självklar eftersom det krävs personal med hög kompetens och erfarenhet för bedömning av cellerna. En tillförlitlig förklassificering av den manuella differentialräknaren CellaVision DM1200 är därför av stort intresse för att underlätta kvantifiering och klassificering av cellerna. För att se om instrumentets förklassificering påverkades av infärgningen undersöktes färglösningens inverkan genom ändringar i fosfatbuffertens pH. Blodutstryk som härstammade från 10 patientprov färgades in med buffertar med pH 6.0, 6.8 och 7.5. Studien visade på en god positiv korrelation i samtliga pH-justerade buffertar, men med bäst resultat för pH 6.0 och 6.8. CellaVision DM1200:s förklassificering av eosinofila granulocyter påverkades mest av pH ändringar, vilket kan förklaras av deras starkt acidofila granula. / In peripheral blood the composition of leukocytes vary due to diseases and therefore analysis of the cells is critical in diagnosing and monitoring various leukemias. Manual microscopy and evaluation of the leukocytes is time consuming and not always clear, and it requires educated staff with long experience to assess the cells. A reliable automatic pre-classification of the cells with the system CellaVision DM12000 is therefor of great interest to facilitate quantification and classification of leukocytes. To evaluate if the instrument’s pre-classification were affected by staining, changes of the current staining solution used in clinical assessment where made by adjustment of the phosphate buffer pH. Examined blood smears that were descendent from 10 different samples were stained in buffers with pH 6.0, 6.8 and 7.5. This study showed a high positive correlation in all of the pH-adjusted buffers with the best results in pH 6.0 and 6.8. CellaVision DM1200’s pre-classification of eosinophilic granulocytes were most affected by changes in pH, which can be explained by their strongly acidophilic granules.

Vid blodgivning donerar blodgivare blod frivilligt. Blodet kan sedan användas inom sjukvården för exempelvis blodtransfusion, vilket kräver blodprodukter kompatibla med patienten. Förekomst av leukocyter i blodprodukter medför en ökad risk för febrila transfusionsreaktioner hos transfunderade patienter. Därför krävs det att vid framställning leukocytreducera blodprodukter och utföra kvalitetskontroll. Med analysen B-leukocytpartikelkoncentration (LPK) kan totalantalet leukocyter i helblod beräknas. Flödescytometri är en metod som kan analysera optiska och fluorescerande egenskaper hos exempelvis celler i en suspension, vilket kan användas för att kvantifiera cellantal. BD Leucocount™-Kit (BD Biosciences) är avsett för flödescytometrisk analys av antalet kvarvarande leukocyter i leukocytreducerade blodprodukter. Vid framställning av blodprodukter ska helblodspåsen vila vid rumstemperatur i minst 3 timmar efter blodgivning. I Falun används antingen ett dagsprogram där produktion sker samma dag som blodgivningen, eller ett övernattningsprogram där produktion sker dagen därpå. Prover från 505 kontrollerade erytrocytenheter, samlade i Falun, har påvisat en skillnad i leukocytkoncentration beroende på vilket program som använts. Anledningen till att erytrocytenheternas leukocytinnehåll skiljer sig är inte känt. Syftet med denna studie är därav att undersöka om vilotiden har någon effekt på leukocytkoncentrationen i helblodspåsar. LPK varierade mellan helblodspåsarna. Ett ökande leukocytantal observerades över tid i majoriteten av helblodspåsar, inklusive medelvärde. Däremot kunde inte hypotesprövning påvisa statistisk signifikans. Hypotesen om att leukocytantalet ökar över tid går emot grundläggande hematologi. Utifrån resultaten i denna studie kan inte hypotesen bevisas. Vidare studier bör genomföras. / During blood donation, blood donors donate blood voluntarily. The blood can then be used in healthcare for, for example, blood transfusions, which requires blood products compatible with the patient. The presence of leukocytes in blood products increases the risk of febrile transfusion reactions in transfused patients. Therefore, leukocyte-reduction in blood products is necessary during production. Each blood center must perform quality control on produced blood products. With the analysis B-leukocyte particle concentration (LPK), the total number of leukocytes in whole blood can be calculated. Flow cytometry is a method that can analyze the optical and fluorescent properties of, for example, cells in a suspension, which can be used to quantify cell numbers. The BD Leucocount™-Kit (BD Biosciences) is intended for flow cytometric analysis of the number of leukocytes remaining in leukocyte-reduced blood products. When producing blood products, the whole blood bag should rest at room temperature for at least three hours after the donation. In Falun, either a day program is used where production takes place on the same day as the blood was donated, or an overnight program where production takes place the next day. Samples from 505 controlled erythrocyte units, collected in Falun, have shown a difference in leukocyte concentration depending on the program used. The reason why the leukocyte content of erythrocyte units differs is not known. The purpose of this study is therefore to investigate whether the resting period has any effect on the leukocyte concentration in whole blood bags. The LPK varied between the whole blood bags. An increasing leukocyte count was observed over time in most of the whole blood bags. However, hypothesis testing did not show statistical significance. The hypothesis that leukocyte counts increase goes against basic hematology. Based on the results of this study, the hypothesis cannot be proven. Further studies should be conducted. / <p>Vårdförbundet tilldelade Leo Svahn stipendium 2021 för <em>bästa kandidatuppsats inom biomedicinsk laboratorievetenskap</em>.</p>