Descrevem-se os achados clínicos e patológicos da intoxicação espontânea e experimental por Sida carpinifolia em caprinos. Os achados da intoxicação espontânea serão apresentados em dois artigos. Um deles relata pela primeira vez uma doença investigada em de 1997 no município de Lajeado, RS. O outro artigo descreve os aspectos clínicos e patológicos da intoxicação espontânea em dois surtos adicionais, ocorridos no ano de 2001 no município de Glorinha e em Porto Alegre, RS. Nesses trabalhos caracterizou-se através de exames clínicos, patológicos e ultra-estruturais uma doença de depósito lisossomal. Por análise do padrão de coloração com histoquímica de lectinas, em cortes histológicos do cerebelo, pâncreas e fígado, observou-se afinidade de marcação especificamente com Concanavalia ensiformis, Triticum vulgaris e T. vulgaris-succinilado, similar ao de alfa-manosidose hereditária ou adquirida por ingestão de plantas do gênero Swainsona, Oxytropis, Astragalus e Ipomoea. A caracterização do princípio tóxico da planta, associada com as lesões que induzem o quadro clínico, foi apresentada em forma de um artigo. A metodologia e resultados do estudo experimental da intoxicação por Sida carpinifolia serão aqui descritos. Para caracterizar o quadro clínico e patológico, foi administrada a 14 caprinos, divididos 7 grupos de dois indivíduos cada, Sida carpinifolia, secada a sombra e triturada por períodos de 15, 20, 40, 60, 90 e 120 dias. O consumo diário variou de 14 a 21g/kg nos diferentes grupos durante o experimento. Para outros 3 caprinos efetuou-se a administração forçada da planta seca por via oral, de 10 a 12,5 g/kg, durante 30 dias. O quadro clínico até os 30 dias de consumo da planta consistia principalmente de letargia, alteração intermitente da consistência das fezes e diminuição no ganho de peso. Por volta de 40 dias de consumo, os caprinos demonstravam também incoordenação motora aos estímulos e após os 60 dias de consumo ocorria incoordenação motora espontânea, com tremores musculares de cabeça e pescoço principalmente. As principais alterações histológicas e ultra-estruturais foram vacuolização e tumefação citoplasmática em neurônios, células da tireóide e pâncreas observadas com intensidade leve após 15 dias de consumo e acentuada após os 90 dias de consumo de Sida carpinifolia.

Descrevem-se os achados clínicos e patológicos da intoxicação espontânea e experimental por Sida carpinifolia em caprinos. Os achados da intoxicação espontânea serão apresentados em dois artigos. Um deles relata pela primeira vez uma doença investigada em de 1997 no município de Lajeado, RS. O outro artigo descreve os aspectos clínicos e patológicos da intoxicação espontânea em dois surtos adicionais, ocorridos no ano de 2001 no município de Glorinha e em Porto Alegre, RS. Nesses trabalhos caracterizou-se através de exames clínicos, patológicos e ultra-estruturais uma doença de depósito lisossomal. Por análise do padrão de coloração com histoquímica de lectinas, em cortes histológicos do cerebelo, pâncreas e fígado, observou-se afinidade de marcação especificamente com Concanavalia ensiformis, Triticum vulgaris e T. vulgaris-succinilado, similar ao de alfa-manosidose hereditária ou adquirida por ingestão de plantas do gênero Swainsona, Oxytropis, Astragalus e Ipomoea. A caracterização do princípio tóxico da planta, associada com as lesões que induzem o quadro clínico, foi apresentada em forma de um artigo. A metodologia e resultados do estudo experimental da intoxicação por Sida carpinifolia serão aqui descritos. Para caracterizar o quadro clínico e patológico, foi administrada a 14 caprinos, divididos 7 grupos de dois indivíduos cada, Sida carpinifolia, secada a sombra e triturada por períodos de 15, 20, 40, 60, 90 e 120 dias. O consumo diário variou de 14 a 21g/kg nos diferentes grupos durante o experimento. Para outros 3 caprinos efetuou-se a administração forçada da planta seca por via oral, de 10 a 12,5 g/kg, durante 30 dias. O quadro clínico até os 30 dias de consumo da planta consistia principalmente de letargia, alteração intermitente da consistência das fezes e diminuição no ganho de peso. Por volta de 40 dias de consumo, os caprinos demonstravam também incoordenação motora aos estímulos e após os 60 dias de consumo ocorria incoordenação motora espontânea, com tremores musculares de cabeça e pescoço principalmente. As principais alterações histológicas e ultra-estruturais foram vacuolização e tumefação citoplasmática em neurônios, células da tireóide e pâncreas observadas com intensidade leve após 15 dias de consumo e acentuada após os 90 dias de consumo de Sida carpinifolia.

Descrevem-se os achados clínicos e patológicos da intoxicação espontânea e experimental por Sida carpinifolia em caprinos. Os achados da intoxicação espontânea serão apresentados em dois artigos. Um deles relata pela primeira vez uma doença investigada em de 1997 no município de Lajeado, RS. O outro artigo descreve os aspectos clínicos e patológicos da intoxicação espontânea em dois surtos adicionais, ocorridos no ano de 2001 no município de Glorinha e em Porto Alegre, RS. Nesses trabalhos caracterizou-se através de exames clínicos, patológicos e ultra-estruturais uma doença de depósito lisossomal. Por análise do padrão de coloração com histoquímica de lectinas, em cortes histológicos do cerebelo, pâncreas e fígado, observou-se afinidade de marcação especificamente com Concanavalia ensiformis, Triticum vulgaris e T. vulgaris-succinilado, similar ao de alfa-manosidose hereditária ou adquirida por ingestão de plantas do gênero Swainsona, Oxytropis, Astragalus e Ipomoea. A caracterização do princípio tóxico da planta, associada com as lesões que induzem o quadro clínico, foi apresentada em forma de um artigo. A metodologia e resultados do estudo experimental da intoxicação por Sida carpinifolia serão aqui descritos. Para caracterizar o quadro clínico e patológico, foi administrada a 14 caprinos, divididos 7 grupos de dois indivíduos cada, Sida carpinifolia, secada a sombra e triturada por períodos de 15, 20, 40, 60, 90 e 120 dias. O consumo diário variou de 14 a 21g/kg nos diferentes grupos durante o experimento. Para outros 3 caprinos efetuou-se a administração forçada da planta seca por via oral, de 10 a 12,5 g/kg, durante 30 dias. O quadro clínico até os 30 dias de consumo da planta consistia principalmente de letargia, alteração intermitente da consistência das fezes e diminuição no ganho de peso. Por volta de 40 dias de consumo, os caprinos demonstravam também incoordenação motora aos estímulos e após os 60 dias de consumo ocorria incoordenação motora espontânea, com tremores musculares de cabeça e pescoço principalmente. As principais alterações histológicas e ultra-estruturais foram vacuolização e tumefação citoplasmática em neurônios, células da tireóide e pâncreas observadas com intensidade leve após 15 dias de consumo e acentuada após os 90 dias de consumo de Sida carpinifolia.

Submitted by (edna.saturno@ufrpe.br) on 2016-08-15T15:15:13Z No. of bitstreams: 1 Dayane Dias Coutinho Cavalcanti de Lima.pdf: 1147962 bytes, checksum: 722f856972e28117caec69de0bde4e3e (MD5) / Made available in DSpace on 2016-08-15T15:15:13Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Dayane Dias Coutinho Cavalcanti de Lima.pdf: 1147962 bytes, checksum: 722f856972e28117caec69de0bde4e3e (MD5) Previous issue date: 2013-02-25 / The aim of this paper is to describe the epidemiological, clinical and histopathological aspects of poisoning by Ipomoea verbascoidea in goats in Pernambuco, northeastern Brazil and reproduce experimentally the disease in goats. For this, we carried out the monitoring of the epidemiology of the disease in seven municipalities in the semiarid region of Pernambuco. Three spontaneously intoxicated goats were examined and then euthanized and necropsied (Group I). For the disease reproduction, the dried leaves of I. verbascoidea containing 0.02% swainsonine was supplied at doses of 4g/kg (80mg swainsonine/kg) for two groups of three animals. The goats in Group II received daily doses of the plant for 40 days and were euthanized on the 41st day of the experiment. Goats from Group III received daily doses of the plant during 55 days and were euthanized on the 120th day of the experiment. Other three goats constituted the control group (CG). In all groups cerebellar lesions were evaluated morphometrically; for this the molecular layer of the cerebellum and the Purkinje neurons area were measured. The main clinical signs and microscopic lesions in goats spontaneously poisoned were similar to those reported by swainsonine containing plants. In experimental goats (GII and GIII), the first nervous signals were observed between 22 and 27 days; clinically, the disease developed by these animals was similar to the spontaneous cases. The goats of GIII did not recover from the nervous picture. These results indicate that irreversible damage occurs when the goats continue ingesting the plant for more than 30 days after the observation of first clinical signs. In goats experimentally poisoned the lesions consisted of various degrees of neuronal cytoplasmic vacuolation in the cerebellum, basal ganglia, bulb at the height of the obex and telencephalon. By morphometric analysis, the molecular layer of the cerebellum of goats of Group I and III were thinner than goats of control group and the Purkinje neurons of goats were atrophic. These results demonstrate the irreversibility of the neuronal picture. / O objetivo deste trabalho é descrever os aspectos epidemiológicos, clínicos e histopatológicos da intoxicação espontânea por Ipomoea verbascoidea em caprinos em Pernambuco e a reprodução experimental da doença em caprinos. Para isso, realizou-se o acompanhamento da epidemiologia da doença em sete municípios do semiárido de Pernambuco. Três caprinos espontaneamente intoxicados foram examinados e, em seguida eutanasiados e necropsiados (Grupo I). Para reproduzir experimentalmente a doença, as folhas secas de I. verbascoidea contendo 0,02% de swainsonina, foram fornecidas na dose de 4 g/kg (80 mg de swainsonina/kg) a dois grupos de três animais. Os caprinos do Grupo II receberam a planta diariamente por 40 dias e foram eutanasiados no 41º dia de experimento. Os caprinos do Grupo III receberam a planta diariamente por 55 dias e foram eutanasiados no 120º dia de experimento. Outros três caprinos constituíram o grupo controle (GC). Em todos os grupos de lesões do cerebelo foram avaliadas morfometricamente, mediante mensuração da espessura da camada molecular e da área citoplasmática dos neurônios de Purkinje. Os principais sinais clínicos e lesões microscópicas foram semelhantes aos previamente reportados em animais intoxicados por plantas que contem swainsonina. Nos caprinos do GII e GIII, os primeiros sinais clínicos foram observados entre 22 e 27 dias; clinicamente a doença desenvolvida por esses animais foi semelhante aos casos espontâneos. Nenhum dos caprinos do GIII se recuperou dos sinais nervosos. Estes resultados indicam que ocorrem lesões irreversíveis quando os caprinos continuam ingerindo a planta por mais de 30 dias após a observação dos primeiros sinais clínicos. Nos caprinos do GII e GIII as lesões consistiam em diversos graus de fina vacuolização citoplasmática de neurônios do cerebelo, gânglios basais, bulbo na altura da obex e telencéfalo. Pela análise morfométrica, a camada molecular do cerebelo dos caprinos do Grupo I e III eram mais delgadas que às dos caprinos do grupo controle, e os neurônios de Purkinje estavam atróficos. Estes resultados demonstram a irreversibilidade do quadro neurológico.

Submitted by Mario BC (mario@bc.ufrpe.br) on 2018-11-06T12:12:18Z No. of bitstreams: 1 Dayane Dias Coutinho Cavalcanti de Lima.pdf: 1249764 bytes, checksum: cf831fe0153f8a007cd81850d9ba71e7 (MD5) / Made available in DSpace on 2018-11-06T12:12:18Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Dayane Dias Coutinho Cavalcanti de Lima.pdf: 1249764 bytes, checksum: cf831fe0153f8a007cd81850d9ba71e7 (MD5) Previous issue date: 2018-08-31 / The objective of this study was to characterize reproductive failures in goats with lysosomal deposit disease induced by the consumption of Ipomoea carnea subsp. fistulosa, using six goat females, divided in control group and test group, formed by two and four animals, respectively. The test group females were feed with commercial ration mixed with I. carnea, containing 0.02% swainsonine at a dose of 2 g / kg of Live Weight for 60 days. Clinical and neurological examinations were performed using the Head Raising Test and Stand up Test. The reproductive functions were evaluated through vaginal cytology, laparoscopic evaluations of the ovaries, histopathological analyzes of the uterus, uterine tubes, ovaries, pituitary, thyroid, encephalon, pancreas, kidneys and liver were performed, as well as serum progesterone through ELISA. The progesterone concentrations were analyzed by the SAEG 7.0 program, applying analysis of variance and regression. Reproductive failures were observed after 25 days of initiation of the plant supply and did not present with nerve signals characteristic of lysosomal deposit disease. These were only manifested after 40 days of ogram, applying analysis of variance and regression. Reproductive failures were observed after 25 days of initiation of the plant supply and did not present with nerve signals characteristic of lysosomal deposit disease. These were only manifested after 40 days of consumption of I. carnea. In the adaptation phase, all females (test group and control group) presented estrus, ovulation and cytology compatible with the phases of the cycle. From 21 days of experiment, the females of the test group showed no estrus behavior. Analysis of the vaginal smears showed changes from the second cycle evaluated, which consisted of cellularity incompatible with the estrous cycle phase, differing from the control females. Laparoscopy showed no ovulation during the experimental period, with observation of follicular recruitment. Serum progesterone concentrations of test and control goats did not differ from each other, taking into account the dosages throughout the experimental period. In the evaluation of the period corresponding to the last two cycles, there was a significant difference. Vacuolation lesions were observed in Purkinje neurons, follicular thyroid cells, pancreatic epithelial cells and hepatocytes. Vacuolation and degeneration of the teak cells were observed. It was concluded that goats intoxicated by Ipomoea carnea subsp. fistulosa, even in small amounts of the plant, may present reproductive failures. Lysosomal storage disease due to swainsonine intake, in addition to the nervous system, also affects the reproduction of goat females, compromising the estrous cycle due to changes in the progesterone hormone profile, probably associated with cell lesions in the ovaries. / Com o objetivo de caracterizar alterações reprodutivas em cabras com doença de depósito lisossomal induzida pelo consumo de Ipomoea carnea subsp. fistulosa, foram utilizadas seis fêmeas caprinas, distribuídas em grupo controle e grupo teste, formado por dois e quatro animais, respectivamente. As fêmeas do grupo teste receberam misturadas à ração, I. carnea, contendo 0,02% de swainsonina na dose de 2g/ kg de Peso Vivo durante 60 dias. Foram realizados exames clínicos e neurológicos, utilizando o Head Raising Test e Stand up Test. As funções reprodutivas foram avaliadas através de citologia vaginal, avaliações laparoscópicas dos ovários, análises histopatológicas do útero, tubas uterinas, ovários, hipófise, tireóide, encéfalo, pâncreas, rins e fígado, além de dosagem de progesterona (ELISA). As concentrações de progesterona foram analisadas pelo programa SAEG 7.0, aplicando análise de variância e regressão. Alterações reprodutivas foram observadas após 25 dias de início do fornecimento da planta e não cursaram com sinais neurológicos característicos de doença de depósito lisossomal. Estes só foram manifestados após 40 dias de consumo de I. carnea. Na fase de adaptação, todas as fêmeas apresentaram cio, ovulação e citologia vaginal compatível com as fases do ciclo. A partir de 21 dias de experimento, as fêmeas do grupo teste não demonstravam comportamento de cio. A análise dos esfregaços vaginais demonstrou alterações a partir do segundo ciclo avaliado, que consistiram de celularidade incompatível com a fase do ciclo estral, diferindo das fêmeas controles. À laparoscopia observou-se ausência de ovulação durante o período experimental, com observação de recrutamento folicular. As concentrações de progesterona das fêmeas teste e controles não diferiram entre si, levando em consideração as dosagens de todo o período experimental. Na avaliação do período correspondente aos dois últimos ciclos, houve diferença significativa. Foram observadas vacuolizações em neurônios de Purkinje, células foliculares da tireóide e epiteliais do pâncreas e em hepatócitos. Foi observada vacuolização e degeneração das células da teca. Concluiu-se que fêmeas caprinas intoxicadas por I. carnea, mesmo que em pequenas quantidades da planta, podem apresentar alterações reprodutivas. A doença de depósito lisossomal por ingestão de swainsonina, além do sistema nervoso central, afeta a reprodução desses animais, comprometendo o ciclo estral por alterações no perfil hormonal da progesterona, provavelmente associadas a lesões celulares nos ovários.

Descrevem-se os achados epidemiológicos, clínico-patológicos, ultra-estruturais e lectino-histoquímicos de herbívoros intoxicados naturalmente por Sida carpinifolia no Estado do Rio Grande do Sul, Brasil. Este estudo incluiu a elaboração de três artigos. Foi realizado um estudo retrospectivo de intoxicação natural por Sida carpinifolia em bovinos no Rio Grande do Sul, outro relata pela primeira vez uma intoxicação natural por esta planta em um animal silvestre e o terceiro artigo relata os achados patológicos observados em fetos de fêmeas caprina e bovina que foram intoxicadas experimentalmente e naturalmente respectivamente por Sida carpinifolia. No primeiro artigo foram afetados cinco bovinos entre os anos de 2001 a 2008. O quadro clínico foi caracterizado por emagrecimento, incoordenação, dificuldade de locomoção, tremores generalizados, quedas frequentes e morte. Microscopicamente as principais alterações foram vacuolização dos neurônios de Purkinje do cerebelo, vacuolização das células acinares do pâncreas e das células foliculares da tireoide. No segundo artigo, o cervídeo desenvolveu uma síndrome neurológica caracterizada por fraqueza muscular, tremores de intensão, déficit visual, quedas, postura e comportamento anormal. Os principais achados microscópicos foram vacuolização citoplasmática nos neurônios de Purkinje do cerebelo. No terceiro artigo duas cabras prenhes foram intoxicadas experimentalmente com Sida carpinifolia nas doses de 10 e 13 g/kg respectivamente durante 30 dias e foram acompanhados durante 15 dias após o consumo da planta. Após este período foram eutanasiadas e necropsiadas. Adicionalmente foi incluído um feto bovino no qual a mãe havia sido intoxicada naturalmente por S. carpinifolia. As principais alterações microscópicas observadas nos fetos foram vacuolização do epitélio dos túbulos renais, das células foliculares da tireoide e cerebelo com discreta vacuolização dos neurônios de Purkinje. Na microscopia eletrônica de todos os casos foi observado vacúolos contendo material finamente granulado e delimitado por membrana. Na lectinahistoquímica dos bovinos, do cervídeo e dos fetos observou-se marcação em neurônios com as lectinas Concanavalia ensiformis (Con-A), Triticum vulgaris (WGA) e Succinyl WGA (sWGA). / Describes the epidemiological, clinical, pathological, ultrastructural and lectinhistochemical herbivore naturally poisoned by Sida carpinifolia in Rio Grande do Sul, Brazil. This study included the preparation of three articles. We conducted a retrospective study of natural poisoning by Sida carpinifolia in cattle in Rio Grande do Sul and the other reports for the first time a natural poisoning by this plant in a wild animal. The third article reports the pathologic findings observed in fetuses of female goats and cattle that were naturally and experimentally poisoned by Sida carpinifolia respectively. In the first paper were affected five cattle between the years 2001 to 2008. The clinical picture was characterized by weight loss, incoordination, difficulty walking, generalized tremors, frequent falls and death. Microscopically the main changes were vacuolation of the Purkinje neurons of cerebellum, vacuolization of acinar cells of the pancreas and thyroid follicular cells. In the second paper, the deer developed a neurological syndrome characterized by muscular weakness, intention tremors, visual and standing-up deficits, falls, and abnormal behavior and posture. The main microscopic findings were vacuolation in Purkinje neurons of cerebellum. In the third paper were two pregnant goats experimentally poisoned with Sida carpinifolia in doses of 10 and 13 g / kg for 30 days and were followed for 15 days after consumption of the plant. Additionally included a bovine fetus where the mother had been poisoned by S. carpinifolia. The main microscopic changes observed in the fetuses were vacuolation of the epithelium of renal tubules, thyroid follicular cells in the cerebellum and mild vacuolation of Purkinje neurons. On electron microscopy all cases was observed vacuoles containing finely granular material and bordered by membrane. In lectin-histochemistry of cattle, the deer and fetuses was observed in neurons marking to lectins Concanavalia ensiformis (Con-A), Triticum vulgaris (WGA) e Succinyl WGA (sWGA).

INTRODUÇÃO:A neuraminidase 1 (chamada a seguir por Neu1) regula o catabolismo de sialoglicoconjugados nos lisossomos. A deficiência congênita da Neu1 é a base da sialidose, doença neurossomática grave associada a deformidades osteoesqueléticas, hipotonia e fraqueza muscular. Camundongos com deficiência de Neu1 desenvolvem uma forma atípica de degeneração muscular caracterizada porproliferação anormal de fibroblastoslevando a invasão nas fibras musculares, expansão da matriz extracelular (MEC), fragmentação do citoplasma, formação vacuolar e atrofia muscular. A ocorrência de atrofia muscular indica que a deficiência da Neu1 podeestar relacionada com o controle da massa muscular, a qual é dependente do equilíbrio entre síntese e degradação proteica.Uma característica principalnaMacroautofagia (denominada a seguir por autofagia) é a principal via de degradação intracelular sendo expressamente essencial para a homeostase celular e remoção de materiais citoplasmáticos. Objetivos: Avaliarseos efeitos da deficiência da Neuraminidase 1 afetama indução de autofagia e a formação de autofagossomos e determinar os efeitos do bloqueio da função lisossomal sobre o fenótipo muscular na deficiência da Neuraminidase1.Metodologia:Camundongos Neu1+/-foram cruzados e os filhotes genotipados, onde camundongos Neu1-/-(nocaute) e Neu1+/+(normal),foram utilizados no estudon total=90, sendo 10 em padronizações, 20 para coleta de fibroblastos e 60 para procedimentos in vivo, os grupos experimentais foram divididos em privação alimentar por 2 dias que, por meio da inibição do mTOR, induz a autofagia;grupo detratamento com Colchicina por 4 dias onde irá impedir a junção autofagossomo/lisossomonão havendo a degradaçãolisossomaleadicionado nos dois últimos dias de privação alimentar e o grupo de tratamento comRapamicina por 7 dias, droga com função de inibir seletivamente o mTOR.Após os tratamentos, os animais foram eutanasiadospara coleta dos músculos gastrocnêmios e tibiais anterior. Os músculos foram analisados apósas coloraçõeshistológicas porHematoxilina & Eosina e Fosfatase Ácida; Imunofluorescência de LC3-I/II; Western Blottingdas proteínas LC3-I/II, Lamp-1 e p62/SQSTM e a análise Ultra-estrutural. Além disso, foi realizada cultura de fibroblastos, os quais foram submetidos à privação de nutrientes e ao tratamento com Rapamicina, seguidos dasmesmas metodologias de análise invivo. Resultados:As análises histológicas através de H&E e Fosfatase Ácida não revelaram alterações consistentes na musculatura esquelética de animais submetidos aos tratamentos, mostrando em animais com deficiência de Neu1 um aumento anormal do espaço endomisial, e aumento da atividade lisossomalintracitoplasmáticos. Na análise ultra-estruturalobservou-se em todos os grupos, a presença de diversas estruturas com aspecto autofágico, de diferentes tamanhos, formas e constituintes. Naanálise da expressão do LC3 através de Western Blottingmostrou importante ativação do LC3-II na privação alimentar (com e sem administração de Colchicina) tanto em animais controles quanto em animais com deficiência de Neu1 e uma importante ativação do LC3-I em Rapamicina em ambos os grupos mostrando assim que houve um aumento da via da autofagia através do bloqueio do mTOR. Já na análise de Imunofluorescência não foi possível observar diferença consistenteentre os grupos.A análise in vitrode Western Blottingmostrou que tal ativação foi similar entre fibroblastos Neu1+/+e Neu1-/-. Conclusão:Os experimentos relacionados com a ativação ou inibição da autofagia, não resultaram em diferenças consideráveis entre músculos normais e músculos com deficiência de Neu1. Desta forma, podemos concluir com estes experimentos que aparentemente a Neu1, apesar de ser uma importante enzima lisossomal, não interfere com o processo de autofagia / Introduction:Neuraminidase 1 (hereinafter Neu1) regulates the catabolism of sialoglycoconjugates in lysosomes. The congenital deficiency of Neu1 is the basis of sialidosis, a severe neurosomatic disease associated with osteo-skeletal deformities, hypotonia, and muscle weakness. Mice with Neu1deficient develop an atypical form of muscle degeneration characterized by abnormal fibroblast proliferation leading to muscle fiber invasion, extracellular matrix expansion (ECM), cytoplasm fragmentation, vacuolar formation, and muscle atrophy. The occurrence of muscle atrophy indicates that deficiencyofNeu1 may be related to the control of muscle mass, which is dependent on the balance between synthesis and protein degradation. A major feature in Macroautophagy (hereinafter referred to as autophagy) is the main pathway of intracellular degradation being expressly essential for cellular homeostasis and removal of cytoplasmic materials. Objectives:To evaluate whether the effects of neuraminidase 1 deficiency affect autophagy induction and autophagosome formation and to determine the effects of lysosomal function block on muscle phenotype in neuraminidase 1 deficiency. Methodos:Mice Neu1+/-were crossbred and the genotyped pups, where mice Neu1-/-(knockout) and Neu1+/+(normal), were used in the study ntotal = 90, 10 for standardization, 20 for fibroblast collection and 60 for in vivo procedures, experimental groups were divided into food deprivation for 2 days that, through mTOR inhibition, induces autophagy; Colchicine treatment group for 4 days whereit will prevent autophagosome/lysosome junction without lysosomal degradation and added in the last two days of food deprivation and Rapamycin treatment group for 7 days, drug with function to selectively inhibit mTOR. After the treatments, the animals were euthanized to collect the anterior gastrocnemius and tibial muscles. The muscles were analyzed after histological staining by Hematoxylin & Eosin and Acid Phosphatase; LC3-I/II immunofluorescence; Western Blottingof LC3-I/II, Lamp-1 and p62/SQSTM proteins and Ultra-structural analysis. In addition, fibroblasts were cultured and subjected to nutrient deprivation and Rapamycin treatment, followed by the same in vivo analysis methodologies. Results:Histological analyzes by H&E and Acid Phosphatase did notreveal consistent changes in skeletal muscle of animals submitted to treatments, showing in animals with Neu1 deficiency an abnormal increase in endomysial space and increased intracytoplasmic lysosomal activity.In ultrastructural analysis, it was observed in all groups, the presence of several structures with autophagic aspect, of different sizes, shapes and constituents. The analysis of LC3 expression by Western Blottingshowed important activation of LC3-II in food deprivation (with and without Colchicine administration) in both control and Neu1 deficient animals and an important activation of LC3-I in Rapamycininboth groups,thus showing an increase in the autophagy pathway through mTOR blockade. In the immunofluorescence analysis, it was not possible to observe consistent difference between the groups. In vitro Western Blottinganalysis showed that such activation was similar between Neu1+/+and Neu1-/-fibroblasts. Conclusion: Experiments related to activation or inhibition of autophagy did not result in considerable differencesbetween normal muscles and Neu1 deficient muscles. Thus, we can conclude from these experiments that apparently Neu1, despite being an important lysosomal enzyme, does not interfere with the autophagy process

Descrevem-se os achados epidemiológicos, clínico-patológicos, ultra-estruturais e lectino-histoquímicos de herbívoros intoxicados naturalmente por Sida carpinifolia no Estado do Rio Grande do Sul, Brasil. Este estudo incluiu a elaboração de três artigos. Foi realizado um estudo retrospectivo de intoxicação natural por Sida carpinifolia em bovinos no Rio Grande do Sul, outro relata pela primeira vez uma intoxicação natural por esta planta em um animal silvestre e o terceiro artigo relata os achados patológicos observados em fetos de fêmeas caprina e bovina que foram intoxicadas experimentalmente e naturalmente respectivamente por Sida carpinifolia. No primeiro artigo foram afetados cinco bovinos entre os anos de 2001 a 2008. O quadro clínico foi caracterizado por emagrecimento, incoordenação, dificuldade de locomoção, tremores generalizados, quedas frequentes e morte. Microscopicamente as principais alterações foram vacuolização dos neurônios de Purkinje do cerebelo, vacuolização das células acinares do pâncreas e das células foliculares da tireoide. No segundo artigo, o cervídeo desenvolveu uma síndrome neurológica caracterizada por fraqueza muscular, tremores de intensão, déficit visual, quedas, postura e comportamento anormal. Os principais achados microscópicos foram vacuolização citoplasmática nos neurônios de Purkinje do cerebelo. No terceiro artigo duas cabras prenhes foram intoxicadas experimentalmente com Sida carpinifolia nas doses de 10 e 13 g/kg respectivamente durante 30 dias e foram acompanhados durante 15 dias após o consumo da planta. Após este período foram eutanasiadas e necropsiadas. Adicionalmente foi incluído um feto bovino no qual a mãe havia sido intoxicada naturalmente por S. carpinifolia. As principais alterações microscópicas observadas nos fetos foram vacuolização do epitélio dos túbulos renais, das células foliculares da tireoide e cerebelo com discreta vacuolização dos neurônios de Purkinje. Na microscopia eletrônica de todos os casos foi observado vacúolos contendo material finamente granulado e delimitado por membrana. Na lectinahistoquímica dos bovinos, do cervídeo e dos fetos observou-se marcação em neurônios com as lectinas Concanavalia ensiformis (Con-A), Triticum vulgaris (WGA) e Succinyl WGA (sWGA). / Describes the epidemiological, clinical, pathological, ultrastructural and lectinhistochemical herbivore naturally poisoned by Sida carpinifolia in Rio Grande do Sul, Brazil. This study included the preparation of three articles. We conducted a retrospective study of natural poisoning by Sida carpinifolia in cattle in Rio Grande do Sul and the other reports for the first time a natural poisoning by this plant in a wild animal. The third article reports the pathologic findings observed in fetuses of female goats and cattle that were naturally and experimentally poisoned by Sida carpinifolia respectively. In the first paper were affected five cattle between the years 2001 to 2008. The clinical picture was characterized by weight loss, incoordination, difficulty walking, generalized tremors, frequent falls and death. Microscopically the main changes were vacuolation of the Purkinje neurons of cerebellum, vacuolization of acinar cells of the pancreas and thyroid follicular cells. In the second paper, the deer developed a neurological syndrome characterized by muscular weakness, intention tremors, visual and standing-up deficits, falls, and abnormal behavior and posture. The main microscopic findings were vacuolation in Purkinje neurons of cerebellum. In the third paper were two pregnant goats experimentally poisoned with Sida carpinifolia in doses of 10 and 13 g / kg for 30 days and were followed for 15 days after consumption of the plant. Additionally included a bovine fetus where the mother had been poisoned by S. carpinifolia. The main microscopic changes observed in the fetuses were vacuolation of the epithelium of renal tubules, thyroid follicular cells in the cerebellum and mild vacuolation of Purkinje neurons. On electron microscopy all cases was observed vacuoles containing finely granular material and bordered by membrane. In lectin-histochemistry of cattle, the deer and fetuses was observed in neurons marking to lectins Concanavalia ensiformis (Con-A), Triticum vulgaris (WGA) e Succinyl WGA (sWGA).

Descrevem-se os achados epidemiológicos, clínico-patológicos, ultra-estruturais e lectino-histoquímicos de herbívoros intoxicados naturalmente por Sida carpinifolia no Estado do Rio Grande do Sul, Brasil. Este estudo incluiu a elaboração de três artigos. Foi realizado um estudo retrospectivo de intoxicação natural por Sida carpinifolia em bovinos no Rio Grande do Sul, outro relata pela primeira vez uma intoxicação natural por esta planta em um animal silvestre e o terceiro artigo relata os achados patológicos observados em fetos de fêmeas caprina e bovina que foram intoxicadas experimentalmente e naturalmente respectivamente por Sida carpinifolia. No primeiro artigo foram afetados cinco bovinos entre os anos de 2001 a 2008. O quadro clínico foi caracterizado por emagrecimento, incoordenação, dificuldade de locomoção, tremores generalizados, quedas frequentes e morte. Microscopicamente as principais alterações foram vacuolização dos neurônios de Purkinje do cerebelo, vacuolização das células acinares do pâncreas e das células foliculares da tireoide. No segundo artigo, o cervídeo desenvolveu uma síndrome neurológica caracterizada por fraqueza muscular, tremores de intensão, déficit visual, quedas, postura e comportamento anormal. Os principais achados microscópicos foram vacuolização citoplasmática nos neurônios de Purkinje do cerebelo. No terceiro artigo duas cabras prenhes foram intoxicadas experimentalmente com Sida carpinifolia nas doses de 10 e 13 g/kg respectivamente durante 30 dias e foram acompanhados durante 15 dias após o consumo da planta. Após este período foram eutanasiadas e necropsiadas. Adicionalmente foi incluído um feto bovino no qual a mãe havia sido intoxicada naturalmente por S. carpinifolia. As principais alterações microscópicas observadas nos fetos foram vacuolização do epitélio dos túbulos renais, das células foliculares da tireoide e cerebelo com discreta vacuolização dos neurônios de Purkinje. Na microscopia eletrônica de todos os casos foi observado vacúolos contendo material finamente granulado e delimitado por membrana. Na lectinahistoquímica dos bovinos, do cervídeo e dos fetos observou-se marcação em neurônios com as lectinas Concanavalia ensiformis (Con-A), Triticum vulgaris (WGA) e Succinyl WGA (sWGA). / Describes the epidemiological, clinical, pathological, ultrastructural and lectinhistochemical herbivore naturally poisoned by Sida carpinifolia in Rio Grande do Sul, Brazil. This study included the preparation of three articles. We conducted a retrospective study of natural poisoning by Sida carpinifolia in cattle in Rio Grande do Sul and the other reports for the first time a natural poisoning by this plant in a wild animal. The third article reports the pathologic findings observed in fetuses of female goats and cattle that were naturally and experimentally poisoned by Sida carpinifolia respectively. In the first paper were affected five cattle between the years 2001 to 2008. The clinical picture was characterized by weight loss, incoordination, difficulty walking, generalized tremors, frequent falls and death. Microscopically the main changes were vacuolation of the Purkinje neurons of cerebellum, vacuolization of acinar cells of the pancreas and thyroid follicular cells. In the second paper, the deer developed a neurological syndrome characterized by muscular weakness, intention tremors, visual and standing-up deficits, falls, and abnormal behavior and posture. The main microscopic findings were vacuolation in Purkinje neurons of cerebellum. In the third paper were two pregnant goats experimentally poisoned with Sida carpinifolia in doses of 10 and 13 g / kg for 30 days and were followed for 15 days after consumption of the plant. Additionally included a bovine fetus where the mother had been poisoned by S. carpinifolia. The main microscopic changes observed in the fetuses were vacuolation of the epithelium of renal tubules, thyroid follicular cells in the cerebellum and mild vacuolation of Purkinje neurons. On electron microscopy all cases was observed vacuoles containing finely granular material and bordered by membrane. In lectin-histochemistry of cattle, the deer and fetuses was observed in neurons marking to lectins Concanavalia ensiformis (Con-A), Triticum vulgaris (WGA) e Succinyl WGA (sWGA).

Submitted by Sandra Pereira (srpereira@ufrrj.br) on 2018-04-11T13:17:41Z No. of bitstreams: 1 2010 - Bruno Leite dos Anjos.pdf: 12893665 bytes, checksum: 99b4dd0f8ecdebb1f227aa0522ac061f (MD5) / Made available in DSpace on 2018-04-11T13:17:42Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2010 - Bruno Leite dos Anjos.pdf: 12893665 bytes, checksum: 99b4dd0f8ecdebb1f227aa0522ac061f (MD5) Previous issue date: 2010-08-17 / Conselho Nacional de Desenvolvimento Cient?fico e Tecnol?gico, CNPq, Brasil. / Cases of diseases induced by toxic plants in domestic herbivores are well reported throughout the world and have been studied also in Brazil. However, not much is known about the epidemiological and pathological aspectos of these conditions in free-living wildlife or bred in captivity. The risk for developing the toxicoses in captivity has been increasing, since natural habitats are destroyed by human action, and more centers of wildlife conservation and zoological comes are created. This study describes the epidemiological, biological and clinicopathological, lectin-histochemical and ultrastructural aspects of an outbreak of lysosomal storage disease of oligosaccharides induced by ingestion of Sida carpinifolia in young Sambar deer (Cervus unicolor) in the Rio-Zoo Foundation in the State of Rio de Janeiro, Brazil. Nine deer showed neurological signs characterized by motor and proprioceptive deficits. Then neurological signs were mainly depression, incoordination, dysmetria, ataxia, broad-based members, muscle tremors, loss of tongue tone, frequent falls and death. Grossly hematomas were observed secondary to trauma caused by dominant males of the flock, and whitish striations, especially in the renal cortex. Histologic changes included marked swelling/cytoplasmic vacuolization especially in neurons, progressing to neuronal lysis and axonal spheroids, in exocrine pancreas, thyroid follicular cells and renal tubular epithelial cells. In the lectin-histochemical examination the vacuoles were formed by the accumulation of oligosaccharides specially marked by the lectins WGA, WGA and Con-A. Ultrastructurally, the swelling/vacuolation corresponded to intense cytoplasmic distention of lysosomes, formation of residual bodies or dense granular fragments of membranes and mielinoides bodies. The study has shown the susceptibility of Cervus unicolor to swainsonine by ingestion of S. carpinifolia. Possibly poisoning the animals in this study was conducted by food restriction by the hierarchy among males in the group. It might also determine the marked similarity between clinical and pathological aspects in Sambar deer with the one presented by other herbivores. / Casos de doen?as induzidas por plantas t?xicas em herb?voros dom?sticos s?o bastante relatados por todo o mundo e v?m sendo estudados tamb?m no Brasil. Pouco se sabe, contudo, sobre os aspectos epidemiol?gicos e patol?gicos dessas condi??es em animais selvagens de vida livre ou criados em cativeiro. Os riscos de desenvolvimento dessas toxicoses em cativeiros v?m aumentando, conforme os habitats naturais s?o destru?dos pela a??o humana, e mais centros de conserva??o de vida silvestre e zool?gicos s?o criados. Nesse estudo s?o descritos os aspectos epidemiol?gicos, biol?gicos e clinicopatol?gicos, lectinohistoqu?micos e ultraestruturais de um surto de doen?a do armazenamento lisossomal de oligossacar?deos induzido pela ingest?o de Sida carpinifolia em cervos Sambar jovens (Cervus unicolor) no zool?gico da Funda??o Rio-Zoo no Estado do Rio de Janeiro. Nove cervos apresentaram sinais cl?nicos neurol?gicos caracterizados por d?ficits proprioceptivo e motor. Os sinais neurol?gicos inclu?ram principalmente depress?o, incoordena??o, dismetria, ataxia, membros em base ampla, tremores musculares, perda do t?nus lingual, quedas frequentes e morte. Macroscopicamente foram observados hematomas, secund?rios a traumas provocados por machos dominantes do rebanho, e estria??es esbranqui?adas, principalmente no c?rtex renal. As les?es histol?gicas inclu?am acentuada tumefa??o/vacuoliza??o citoplasm?tica especialmente em neur?nios, p?ncreas ex?crino, c?lulas foliculares da tireoides e do epit?lio renal, necrose neuronal com evolu??o para lise e esferoides axonais. Pelo exame lectino-histoqu?mico os vac?olos eram formados por ac?mulo de oligossacar?deos marcado especialmente pelas lectinas S-WGA, WGA e Con-A. Ultraestruturalmente, a tumefa??o/vacuoliza??o citoplasm?tica correspondeu ? intensa distens?o de lisossomos, forma??o de corpos residuais densos ou granulares, fragmentos de membranas e corpos mielinoides. O estudo demonstrou a suscetibilidade de Cervus unicolor ? swainsonina contida na S. carpinifolia. Possivelmente, a intoxica??o nos animais deste estudo ocorreu pela restri??o alimentar sofrida pelos animais mais jovens, decorrente da hierarquia entre machos no grupo. P?de-se determinar ainda a marcada similaridade do quadro cl?nico e patol?gico entre os cervos descritos nesse trabalho e outros herb?voros dom?sticos.