A disfunção temporomandibular (DTM) afeta os músculos da mastigação, a articulação temporomandibular e estruturas associadas, induzindo dor por mecanismos pouco compreendidos. A inflamação tem papel relevante nessas disfunções crônicas pela produção de mediadores químicos. A fractalquina (FK) é uma quimiocina expressa na membrana de neurônios, e seu receptor esta presente na microglia, sugerindo que a FK induz a ativação da microglia, promovendo mudanças funcionais e liberação de mediadores inflamatórios, envolvidas na manutenção de processos nociceptivos. As terapias medicamentosas possuem efeitos indesejáveis. O laser de baixa intensidade (LBI) é uma alternativa promissora para o alívio da dor. O efeito do LBI foi avaliado sobre a nocicepção de animais em modelo de dor persistente e foi capaz de reverter a hipersensibilidade mecânica por uma inibição da resposta inflamatória local e inibição central de fractalquina reforçando papel do LBI como uma alternativa terapêutica importante no alívio dor e modulação da resposta inflamatória em nível central. / Temporomandibular dysfunction (TMD) affects the chewing muscles, the temporomandibular joint and associated structures, inducing pain by poorly understood mechanisms. Inflammation has a relevant role in these chronic dysfunctions by the production of chemical mediators. Fractalkine (FK) is a chemokine expressed on the membrane of neurons, and its receptor is present in the microglia, suggesting that FK induces the activation of microglia, promoting functional changes and release of inflammatory mediators involved in the maintenance of nociceptive processes. Drug therapies have undesirable effects. Low-intensity laser (LILT) is a promising alternative for pain relief. The effect of LILT was evaluated on the nociception of animals in a persistent pain model and was able to reverse mechanical hypersensitivity by an inhibition of the local inflammatory response and central inhibition of fractalkine enhancing LIL\'s role as an important therapeutic alternative in pain relief and modulation Inflammatory response at the central level.

Queimaduras severas causam trauma às vítimas, pela perda de líquido corpóreo, injúria no sistema vascular cutâneo e demora na cicatrização das lesões. A irradiação com laser em baixa intensidade vem sendo estudada como tratamento alternativo, por ser uma terapia não-invasiva e capaz de acelerar o processo de cicatrização. O objetivo deste estudo foi avaliar os efeitos do laser de baixa potência (λ = 660 nm) em queimaduras de pele por histomorfometria e fluxometria laser Doppler utilizando duas condições de irradiação. Trinta e seis animais com duas queimaduras criadas por vapor foram divididos em três grupos: no grupo dose fracionada (GF), as lesões foram irradiadas com dose de 1 J/cm2 nos dias 1, 3, 8 e 10; no grupo dose única (GU), as lesões foram irradiadas com dose de 4 J/cm2 no dia 1. O grupo controle (GC) não foi irradiado. O fluxo sanguíneo foi monitorado nos dias 3, 8, 10, 15 e 21 e três animais por grupo foram sacrificados nestes momentos. Os grupos irradiados mostraram um pico de vasos neoformados no dia 15, enquanto que o pico do GC foi no dia 21. O número de vasos no GC foi significantemente maior que GF e GU no dia 21. Com relação ao fluxo sangüíneo, os grupos irradiados mostraram um valor mais alto que o controle no dia 8, porém, sem diferenças significantes entre os grupos. Estes achados sugerem que o laser acelera a cicatrização de queimaduras, porém, sem diferenças significativas entre as doses estudadas. / Severe burn injuries cause extensive damage and are notoriously complicated by loss of body fluids, injury in the cutaneous vasculature and delayed wound healing. Low intensity laser therapy (LILT) has been studied as an alternative method since it is a non invasive treatment and is able to accelerate wound healing. The purpose of the present study was to evaluate the effects of LILT (λ = 660 nm) in burned skin with two different doses by histomorphometry and laser Doppler flowmetry. Thirdy six male adult Wistar rats with two burns created on the back using water vapor were divided into 3 groups. In the fractioned dose laser group (GF), the lesions were irradiated with 1 J/cm2 on days 1, 3, 8 and 10; in the single dose laser group (GU), the lesions were irradiated with 4 J/cm2 on day 1. On control group (GC) lesions were not irradiated. The blood flow was measured on days 1, 3, 8, 10, 15 and 21 and three animals per group were sacrificed in these moments. Irradiated groups showed a peak of new blood vessels formation on day 15 while for GC the peak was on day 21. At this moment, the number of vessels in GC was significantly higher than GF and GS. Regarding to blood flux, irradiated groups displayed a higher value than GC on day 8, though no significant differences were observed. These findings suggest that LILT may accelerate skin repair, however, no significant differences were observed between the studied doses.

A terapia foto-dinâmica consiste na irradiação luminosa de um determinado tecido ou microorganismo previamente exposto à ação de um corante foto-sensibilizador. Ela é eficazmente utilizada em neoplasias e em processos infecciosos. No entanto, poucos estudos avaliam o efeito desta terapia em reparação tecidual. Estes trabalhos mostram resultados que variam entre satisfatórios e não-satisfatórios. Além disso, os estudos que envolvem a terapia com laser em baixa intensidade e a terapia foto-dinâmica em reparação tecidual preocupam-se, na maioria das vezes, com a organização e quantificação dos componentes da matriz extra-celular. Estudar o epitélio, em contrapartida, por meio das proteínas expressas pelos queratinócitos é igualmente importante, sabendo-se que a reparação da ferida depende também da organização e proliferação das células epiteliais. Este trabalho avaliou a reparação tecidual de excisões realizadas em dorso de ratos submetidas à irradiação com laser em baixa intensidade ou terapia foto-dinâmica mediada pelo corante azul de metileno. Para tal, realizou-se a análise morfológica e histomorfológica das feridas em determinados tempos experimentais, além da análise imunoistoquímica das citoqueratinas 10 e 14 e p63. Os resultados mostraram que a reparação tecidual foi favorecida com a irradiação laser em baixa intensidade, o que foi confirmado através das análises morfológica e histo-morfológica que mostraram fechamento prévio da ferida para este grupo experimental. Além disso, a expressão de citoqueratina 10 na língua epitelial formada nas feridas pertencentes ao grupo Laser precedeu a expressão da mesma nos outros grupos, o que indicou uma maturação acelerada do epitélio para este grupo. O grupo da terapia foto-dinâmica não apresentou aceleração da reparação tecidual bem como não a prejudicou. Isto sugere que a reparação tecidual frente à irradiação laser é diferente daquela encontrada com a terapia foto-dinâmica. Além disso, não houve atraso da reparação tecidual com a terapia foto-dinâmica, sugerindo que esta terapia foi segura e que devem ser consideradas suas vantagens em situações de infecção. / The photodynamic therapy involves delivering visible light of the appropriate wavelength into a tissue or microorganism previously exposed to a photo-sensitive dye. Its use is widely spread between neoplastic and infeccious diseases. Nevertheless, its effects upon wound healing has not yet been completely verified and the few studies concerning this subject present whether good or bad results. In addition, studies that involve low intensity laser therapy or photodynamic therapy on wound healing concern mostly on the organization and quantification of the extracellular matrix components. Studying the epithelium, on the other hand, by the keratinocyte expressed proteins is equally important, once the wound healing depends also of the organization and proliferation of the epithelial cells. This study evaluated the wound healing of excisions performed on the back of rats submitted to low intensity laser therapy or photodynamic therapy mediated by methylene blue dye. Morphological and histo-morphological analysis of the wounds in pre-determined periods were performed, as well as immunohistochemistry of citokeratins 10 and 14 and p63. The results showed that the wound healing was enhanced by the low intensity laser therapy, which was confirmed by the morphological and histomorphological analysis. The wound closure was previously seen for the laser group. The citokeratin 10 expression on the epithelial tongue of the wounds that belong to the laser group preceded the expression in the other groups, which indicated an accelerated maturation of this epithelium. The photodynamic therapy group did not present accelerated wound healing but did not present any delay as well. This suggests that the wound healing found for the laser group differs from that found for the photodynamic therapy group. Moreover, the lack of delay presented by the photodynamic therapy suggests a safe therapy with advantages regarding disinfection that should be considered in specific situations.

O bussulfano (BU) é um quimioterápico amplamente utilizado para o tratamento de doenças hematológicas e para o condicionamento de transplante de células hematopoiéticas (TCH). As doses plasmáticas desse medicamento são altamente citotóxicas, causando mucosite oral (MO) com alta frequência e gravidade. O BU exibe concentrações na saliva que são similares às encontradas no plasma; porém, ainda não foi confirmado se essa concentração salivar também é citotóxica para queratinócitos, fato que poderia constituir um risco a mais para ocorrência de MO. A prevenção e o tratamento da MO têm sido realizados com laserterapia de baixa intensidade (LTBI), em que a fotobiomodução (FBM) favorece a redução da frequência e da duração das lesões. O objetivo deste trabalho foi verificar se o BU encontrado na saliva é citotóxico e genotóxico para queratinócitos em cultura, bem como se a FBM minimiza esses efeitos. Foram estabelecidos os seguintes grupos experimentais: Grupo Controle (C) - queratinócitos sem nenhum tratamento; Grupo Controle Saliva (CS)- queratinócitos expostos a saliva artificial; Grupo Controle Irradiado (CI) - queratinócitos expostos a LTBI; Grupo Controle Saliva Irradiado (CSI) - queratinócitos expostos a saliva e a LTBI; Grupo BU (BU) - queratinócitos expostos a BU veiculado em saliva; Grupo BU Irradiado (BUI) - queratinócitos expostos a BU salivar e concomitantemente a LTBI. Inicialmente testou-se se a saliva artificial formulada não causava modificações na viabilidade dos queratinócitos cultivados. Em seguida, essas células foram expostas ao BU veiculado em saliva ou inserido diretamente no meio, em concentrações que variaram de 4,0?g/mL a 5,5?g/mL. Nesse ensaio, avaliou-se a viabilidade celular tanto no BU veiculado em saliva quanto do BU inserido no meio de cultura. Foi padronizado também um protocolo de LTBI para ser realizado nas células cultivadas, que incluiu três sessões de laserterapia (660nm, 100mW, 0,028 cm² área do spot, 20 segundos de tempo de irradiação, 8J/cm², 3571mW/cm2) com intervalo de 4h entre elas. Após essas padronizações, a concentração salivar de 5,5?g/mL de BU, que provocou menor viabilidade celular, foi utilizada em outros ensaios, que incluíram avaliação da taxa de morte celular pelo teste de TUNEL, do estresse oxidativo (quantificação da porcentagem de sequestro do radical DPPH, quantificação da superóxido dismutase e da catalase e nível de peroxidação lipídica) e da presença de danos no DNA por intermédio do ensaio cometa. A saliva artificial formulada não alterou a viabilidade celular quando comparada ao grupo controle, porém induziu menor taxa de sequestro do DPPH e níveis discretos de dano no DNA. O BU veiculado na saliva provocou maior redução da viabilidade celular quando comparado ao BU inserido diretamente no meio de cultura (p<0.001), sugerindo que a saliva potencializou o efeito tóxico do BU. Comparando com o grupo controle saliva, o Grupo bussulfano exibiu maior frequência de células TUNEL positivas (p<0.05), menor taxa de sequestro do radical DPPH (p<0.05), maior atividade da catalase (p<0.01) e maior taxa de peroxidação lipídica (p<0.01); não houve, contudo, diferenças em relação à presença da superóxido dismutase. Em comparação ao Grupo BU, o Grupo BU Irradiado exibiu menor quantidade de células TUNEL positivas (p<0.05), maior potencial de sequestro do radical DPPH (p<0.05), menor atividade da catalase (p<0.01) e menor taxa de peroxidação lipídica (p<0.01). Na análise de cometa, o Grupo BU exibiu maior porcentagem de DNA fragmentado em relação ao Grupo BUI (p<0.05). Concluiu-se que a concentração salivar do BU é tóxica para queratinócitos, induzindo estresse oxidativo e danos no DNA, porém a LTBI foi eficaz para a redução da citotoxicidade e da genotoxicidade do BU. / Busulfan (BU) is a chemotherapeutic drug largely used into hematological diseases treatment and also on the conditioning hematopoietic cell transplantation (TCH). BU plasma concentrations are highly cytotoxic, causing oral mucositis (OM) with high frequency and severity. BU salivary concentrations are similar to those found in plasma; however, it has not been confirmed whether the salivary concentration is also cytotoxic for keratinocytes, increasing risk for the occurrence of OM. Low intensity laser therapy (LILT) has been used for prevention and treatment of OM. Photobiomoduction (FBM) contributes to the reduction of frequency and lesions duration. This study aimed to verify if the BU found in saliva is cytotoxic and genotoxic for cultured keratinocytes, as well as whether FBM minimizes these effects. The following experimental groups were established: Control Group (C) - keratinocytes without any treatment; Control Group Saliva (CS) - keratinocytes exposed to artificial saliva; Irradiated Control Group (CI)- keratinocytes exposed to LILT; Control Group Irradiated saliva (CSI) - keratinocytes exposed to saliva and LILT; BU Group (BU) - keratinocytes exposed to salivary BU; BU Group Irradiated (BUI) - keratinocytes exposed to salivary BU and concomitantly to LILT. Initially it was tested the artificial formulated saliva effects over the viability of the cultured keratinocytes. Thereafter, in order to verify the cells viability, these cells were exposed to BU diluted into artificial saliva or medium culture, the concentrations ranged from 4.0 ?g / mL to 5.5 ?g / mL. A LILT protocol was also standardized, which consist three laser therapy sessions (660nm, 100mW, 0.028cm² spot areas, 20 seconds irradiation time, 8J / cm², 3571mW / cm ²) with 4 hours interval between them. After these preliminary tests, the BU salivary concentration of 5.5 ?g / mL, which provoked less cell viability, was submitted in other tests, including the evaluation of cell death rate by the TUNEL test, oxidative stress (quantification of the DPPH radical, quantification of superoxide dismutase and catalase and level of lipid peroxidation) and the presence of DNA damage through the comet assay. The formulated artificial saliva did not modify the cell viability when compared to the Control group, but induced a lower DPPH sequestration rate and a discrete level of DNA damage. The salivary BU promoted a greater reduction in cell viability when compared to BU inserted directly into the culture medium (p <0.001), suggesting that saliva increased the toxic effect of BU. Comparing with the Saliva Control group, the BU group showed a higher frequency of TUNEL positive cells (p <0.05), a lower sequestration rate of the DPPH radical (p <0.05), higher catalase activity (p <0.01) and a higher lipid peroxidation rate (p <0.01); however, there were no differences related to the presence of superoxide dismutase. Compared to the BU group, the irradiated BU group had a lower TUNEL positive cells rate (p <0.05), a higher DPPH radical sequestration potential (p <0.05), lower catalase activity (p <0.01) and lower peroxidation rate lipid profile (p <0.01). In the comet analysis, the BU group exhibited a higher percentage of fragmented DNA in relation to the irradiated BU Group (p <0.05). It was concluded that the salivary concentration of BU is toxic to keratinocytes, inducing oxidative stress and DNA damage, but LTBI has been effective in reducing the cytotoxicity and genotoxicity of BU.

A terapia com laser em baixa intensidade, conhecida como Low-intensity laser therapy (LILT), tem sido alvo de pesquisas que buscam esclarecer os mecanismos pelos quais o laser age na cicatrização de feridas. Este processo é dependente da transmissão de sinais entre epitélio e conjuntivo, os quais influenciam a proliferação e a migração celular, onde participam fatores de crescimento. O objetivo desta pesquisa foi verificar os efeitos da radiação com lasers vermelho e infravermelho em baixa intensidade na produção de fatores de crescimento por fibroblastos in vitro. Foi obtida uma cultura primária de fibroblastos gengivais humanos (linhagem FGH). As células foram cultivadas em placas de 96 poços (5 x 103 células /poço), em estado de quiescência (meio de cultura suplementado com 1% de soro fetal bovino) e irradiadas com lasers de diodo (AlGaAs - 660nm, e AlGaInP - 780nm). O laser em modo contínuo, foi aplicado em contato e na forma pontual. A potência utilizada foi de 40mW numa área de 0,042cm2 e com densidades de energia de 2, 3, 4, 5 e 6J/cm² com respectivos tempos de aplicação de 2, 3, 4, 5 e 6s. As culturas foram irradiadas duas vezes com 6h de intervalo. Os grupos controle positivo e negativo foram cultivados com 10% e 1% de soro fetal bovino, respectivamente e não receberam irradiação. A produção do fator de crescimento de queratinócitos (KGF) e do fator de crescimento de fibroblastos básico (bFGF) foi analisada e quantificada por ensaio imunoenzimático (método ELISA) no meio condicionado pelas células. Os dados foram comparados estatisticamente pela análise de variância e teste de Kruskal-Wallis complementados pelos testes de Tukey e Dunn, respectivamente (p<0,05). Culturas de todos os grupos produziram KGF e bFGF. Controles positivos produziram maior quantidade de KGF e bFGF que controles negativos. A produção de KGF foi similar em todos os grupos experimentais. A produção de bFGF foi significativamente maior nos grupos tratados com o laser infravermelho nas densidades de energia de 3J/cm2 e 5J/cm2 quando comparados com os controles. Baseados nas condições deste estudo, concluiu-se que a LILT não influencia a produção de KGF, porém, influencia positivamente a produção de bFGF de maneira dependente do comprimento de onda e da densidade de energia empregados. O infravermelho, nas densidades de energia de 3J/cm2 e 5J/cm2, é capaz de aumentar a produção deste fator de crescimento. Portanto, a utilização da LILT nestes parâmetros poderá constituir papel relevante na cicatrização de feridas. / Low-intensity laser therapy (LILT) has been the subject of researches to understand the mechanisms by which the laser acts stimulating wound healing. This process is dependent of a signaling transfer between epithelium and connective tissue and it influences cellular proliferation and migration. Growth factors are directly involved in these mechanisms. The aim of this study was to analyze the effects of red and infrared low-level laser on production of fibroblast growth factors by human gingival fibroblasts in vitro. The cells were obtained by primary culture (FGH cell line). They were grown in 96 wells plates (5x10³ cells / well) in a quiescence environment (1% fetal bovine serum) and then they were irradiated with a diode laser (GaAlAs - 660nm, and InGaAlP - 780nm). The continuous laser was applied in contact and in a punctual mode. The power was 40mW, the area of irradiation was 0,042cm2, the energy densities were 2, 3, 4, 5 and 6J/cm² with 2, 3, 4, 5 and 6s of time application, respectively. The cultures were irradiated twice with 6 h-interval. The positive and negative control groups were grown in 10% and 1% of bovine fetal serum, respectively and didn?t receive any irradiation. The production of keratinocyte growth factor (KGF) and basic fibroblast growth factor (bFGF) was analyzed and quantified by immunoenzymatic test (ELISA) in the conditioned medium. The data were compared statistically by analysis of variance and Kruskal-Wallis, complemented by Tukey?s and Dunn?s tests, respectively (p<0,05). Positive controls produced more KGF and bFGF than negative controls. The KGF production was similar in all experimental groups. The bFGF production was significantly higher in groups treated with infrared laser with energy densities of 3J/cm² and 5J/cm² when compared to controls. Based on these study conditions, authors concluded that LILT doesn?t influence KGF production although it positively influences bFGF production in a dependent manner from wavelength and energy density. Infrared laser with energy densities of 3J/cm² and 5J/cm² is capable of improving the production of this growth factor. Therefore the LILT in these parameters can constitute a relevant role on wound healing.

Submitted by Angela Maria de Oliveira (amolivei@uepg.br) on 2018-05-08T14:10:16Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 811 bytes, checksum: e39d27027a6cc9cb039ad269a5db8e34 (MD5) Cindy Perez.pdf: 5179683 bytes, checksum: 635b5b5638d67d9fce00cd048b13de75 (MD5) / Made available in DSpace on 2018-05-08T14:10:16Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 811 bytes, checksum: e39d27027a6cc9cb039ad269a5db8e34 (MD5) Cindy Perez.pdf: 5179683 bytes, checksum: 635b5b5638d67d9fce00cd048b13de75 (MD5) Previous issue date: 2016-02-19 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / Os biomateriais e a fotobioengenharia são técnicas usadas com o intuito de melhorar o reparo ósseo e prevenir a reabsorção dos alvéolos após exodontia. O objetivo deste estudo foi avaliar o efeito da Terapia de Laser de Baixa Intensidade (TLBI) comparativamente ao processo de reparo ósseo pós-exodontia em alvéolos de ratos tratados com hidroxiapatita +β -fosfato tricálcico (HA) e osso bovino inorgânico (OB). Foram utilizados 48 ratos machos divididos em seis grupos e subdivididos de acordo com o tempo de sacrificio (7 e 14 dias). C: coágulo, CL: Coágulo + TLBI, OB: osso bovino inorgânico, OBL: osso bovino inorgânico + TLBI, HA: hidroxiapatita +β -fosfato tricálcico e HAL: hidroxiapatita +β -fosfato tricálcico + TLBI. A TLBI (GaAlAs, λ780nm, 10mW, Ø0,4cm, 75J/cm2, 300s) foi aplicada no alvéolo imediatamente após exodontia, no dia seguinte, no terceiro e quinto dia após exodontia. Após 7 e 14 dias, 4 animais por grupos foram sacrificados. As amostras foram processadas e coradas com H-E para análise histológica e histomorfométrica. Aos 7 dias, encontrou-se uma maior quantidade de vasos sanguíneos em todos os grupos irradiados; e um maior número de osteoblastos mas somente houve diferença significante entre os grupos CL7 (coágulo + TLBI) e OB7 (osso bovino inorgânico). Aos 14 dias, observou-se novamente mais vasos sanguíneos nos grupos irradiados; como também, maior presença de matriz óssea; porém, não estatisticamente significantes. Com o protocolo usado no presente estudo concluímos que a TLBI mostrou uma tendência na estimulação na fase inicial do reparo ósseo, sugerida pela maior proliferação celular osteoblástica e endotelial. / Biomaterials and the photobioengineering are techniques that emerged in order to enhance bone healing and prevent the reabsorption of sockets after the tooth extraction. The aim of this study was to evaluate the effect of low level laser therapy (LLLT) comparatively to the process of bone healing in post extraction sockets of rats treated with hydroxyapatite + β-tricalcium phosphate (HA) and inorganic bovine bone (IBB). Forty-eight male rats were divided into 6 groups and subdivided according to sacrifice time (7 and 14 days): C: clot, CL: Clot + LLLT, IBB: inorganic bovine bone, IBBL: inorganic bovine bone + LLLT, HA: hydroxyapatite + β-tricalcium phosphate and HAL: hydroxyapatite + β-tricalcium phosphate + LLLT. The LLLT (GaAlAs, λ780nm, 10mW, Ø0,4cm, 75J/cm2, 300s) was applied to the socket immediately after the extraction, the next day, in the third and fifth day. At 7 and 14 day, 4 animals per group were sacrificed. Samples were processed and stained with H-E for histological and histomorphometric analysis. At 7 day, greater presence of blood vessels was observed in all irradiated groups; as well as more quantity of osteoblasts but there was only statistically different between CL7 (clot + LLLT) and OB7 (inorganic bovine bone) groups. At 14 day, more blood vessels were counted in the irradiated groups; a greater presence of matrix bone was observed suggesting bone formation; however, without statistical difference. In the protocol used in this work, we conclude that LLLT had a tendency in the bioestimulation of the bone healing in its early phase based in the better proliferation of endothelial and osteoblastic cells.

Vários estudos têm avaliado os efeitos do ultra-som e da radiação laser de baixa intensidade separadamente no reparo ósseo. No entanto, são escassas as comparações entre estas duas modalidades terapêuticas. Este estudo teve por objetivo avaliar e comparar, através de análise histomorfométrica e ensaio mecânico de flexão em três pontos, as conseqüências que estes agentes físicos podem trazer ao reparo do tecido ósseo em osteotomias transversais experimentais em tíbias de ratos. Foram utilizados 48 ratos com fratura cirúrgica unilateral parcial do terço superior de tíbia. Os animais foram divididos em três grupos de 16 animais. Em um grupo, o membro fraturado foi tratado com ultra-som pulsado de baixa intensidade (freqüência de 1,5 MHz, ciclo de trabalho 1:4, intensidade SATA 30 mW/centímetro quadrado) em sessões de 20 minutos, 5 vezes por semana, em 12 dias de tratamento. Em um segundo grupo, o membro fraturado foi tratado com laser As-Ga-Al (112,5 J/centímetro quadrado, 780 nm, 30 mW) em sessões de 2,5 minutos, 5 vezes por semana, em 12 dias de tratamento. O terceiro grupo serviu de controle, sendo submetido à mesma cirurgia na tíbia direita mas não recebeu qualquer tratamento. No ensaio mecânico, a carga no limite máximo suportada pelo grupo tratado com laser foi significantemente maior (p < 0,05) que os grupos tratado com ultra-som e controle. Na análise histomorfométrica, o grupo tratado com laser apresentou significância estatística quanto ao número e superfície de osteoblastos e volume e superfície de osteóide e o grupo ultra-som obteve significância para as superfícies de reabsorção e de osteoclastos. Pode-se concluir que o ultra-som acelerou o reparo ósseo (em relação ao grupo controle) por viabilizar mais rapidamente a fase de reabsorção, enquanto que a terapia laser foi capaz de acelerar ainda mais este processo por já promover predomínio de formação óssea no décimo nono dia pós-cirúrgico no modelo experimental utilizado neste estudo / Many studies have assessed the effects of ultra-sound and low intensity laser therapy separatedly in bone repair. However, the comparison between these two therapeutic modalities is rare. The objective of this study was to verify and compare, through histomorphometrical analysis and a three-point bending test, the consequences of these physical agents on bone healing in animals. 48 male Wistar rats were used with tibial bone partial osteotomy, divided into 3 groups of 16. In one group, rats had their fractured limb treated with GaAIAs laser (780 nm, 30 mW, 112,5 J/square contimeter) in 12 five times-a-week sections. In another group, rats were treated with low intensity pulsed ultra-sound (1,5 MHz, 30 mW/square centimeter) in 12 five times-a-week sections too. In a third group, animals were taken as control, being submitted to the same osteotomy but receiving no treatment. After 19 days the tibias were extracted and half of them were submitted to a three-point bending test and the other half to histomorphometric analysis. During the bending test, the maximum load at failure of the tibia in the laser group was significantly higher (p<0.05). Histomorphometry showed statistical significance in osteoblasts number and surface and osteoid volume and surface for the laser group, and eroded and osteoclasts surfaces for the ultra-sound group. Ultra-sound was able to enhance bone healing (compared to control group) by speeding up the reabsorption phase, while low intensity laser therapy could accelerate this process even more by promoting mostly new bone formation 19 days after osteotomy in this experimental model

A terapia com laser em baixa intensidade, conhecida como Low-intensity laser therapy (LILT), tem sido alvo de pesquisas que buscam esclarecer os mecanismos pelos quais o laser age na cicatrização de feridas. Este processo é dependente da transmissão de sinais entre epitélio e conjuntivo, os quais influenciam a proliferação e a migração celular, onde participam fatores de crescimento. O objetivo desta pesquisa foi verificar os efeitos da radiação com lasers vermelho e infravermelho em baixa intensidade na produção de fatores de crescimento por fibroblastos in vitro. Foi obtida uma cultura primária de fibroblastos gengivais humanos (linhagem FGH). As células foram cultivadas em placas de 96 poços (5 x 103 células /poço), em estado de quiescência (meio de cultura suplementado com 1% de soro fetal bovino) e irradiadas com lasers de diodo (AlGaAs - 660nm, e AlGaInP - 780nm). O laser em modo contínuo, foi aplicado em contato e na forma pontual. A potência utilizada foi de 40mW numa área de 0,042cm2 e com densidades de energia de 2, 3, 4, 5 e 6J/cm² com respectivos tempos de aplicação de 2, 3, 4, 5 e 6s. As culturas foram irradiadas duas vezes com 6h de intervalo. Os grupos controle positivo e negativo foram cultivados com 10% e 1% de soro fetal bovino, respectivamente e não receberam irradiação. A produção do fator de crescimento de queratinócitos (KGF) e do fator de crescimento de fibroblastos básico (bFGF) foi analisada e quantificada por ensaio imunoenzimático (método ELISA) no meio condicionado pelas células. Os dados foram comparados estatisticamente pela análise de variância e teste de Kruskal-Wallis complementados pelos testes de Tukey e Dunn, respectivamente (p<0,05). Culturas de todos os grupos produziram KGF e bFGF. Controles positivos produziram maior quantidade de KGF e bFGF que controles negativos. A produção de KGF foi similar em todos os grupos experimentais. A produção de bFGF foi significativamente maior nos grupos tratados com o laser infravermelho nas densidades de energia de 3J/cm2 e 5J/cm2 quando comparados com os controles. Baseados nas condições deste estudo, concluiu-se que a LILT não influencia a produção de KGF, porém, influencia positivamente a produção de bFGF de maneira dependente do comprimento de onda e da densidade de energia empregados. O infravermelho, nas densidades de energia de 3J/cm2 e 5J/cm2, é capaz de aumentar a produção deste fator de crescimento. Portanto, a utilização da LILT nestes parâmetros poderá constituir papel relevante na cicatrização de feridas. / Low-intensity laser therapy (LILT) has been the subject of researches to understand the mechanisms by which the laser acts stimulating wound healing. This process is dependent of a signaling transfer between epithelium and connective tissue and it influences cellular proliferation and migration. Growth factors are directly involved in these mechanisms. The aim of this study was to analyze the effects of red and infrared low-level laser on production of fibroblast growth factors by human gingival fibroblasts in vitro. The cells were obtained by primary culture (FGH cell line). They were grown in 96 wells plates (5x10³ cells / well) in a quiescence environment (1% fetal bovine serum) and then they were irradiated with a diode laser (GaAlAs - 660nm, and InGaAlP - 780nm). The continuous laser was applied in contact and in a punctual mode. The power was 40mW, the area of irradiation was 0,042cm2, the energy densities were 2, 3, 4, 5 and 6J/cm² with 2, 3, 4, 5 and 6s of time application, respectively. The cultures were irradiated twice with 6 h-interval. The positive and negative control groups were grown in 10% and 1% of bovine fetal serum, respectively and didn?t receive any irradiation. The production of keratinocyte growth factor (KGF) and basic fibroblast growth factor (bFGF) was analyzed and quantified by immunoenzymatic test (ELISA) in the conditioned medium. The data were compared statistically by analysis of variance and Kruskal-Wallis, complemented by Tukey?s and Dunn?s tests, respectively (p<0,05). Positive controls produced more KGF and bFGF than negative controls. The KGF production was similar in all experimental groups. The bFGF production was significantly higher in groups treated with infrared laser with energy densities of 3J/cm² and 5J/cm² when compared to controls. Based on these study conditions, authors concluded that LILT doesn?t influence KGF production although it positively influences bFGF production in a dependent manner from wavelength and energy density. Infrared laser with energy densities of 3J/cm² and 5J/cm² is capable of improving the production of this growth factor. Therefore the LILT in these parameters can constitute a relevant role on wound healing.

A terapia foto-dinâmica consiste na irradiação luminosa de um determinado tecido ou microorganismo previamente exposto à ação de um corante foto-sensibilizador. Ela é eficazmente utilizada em neoplasias e em processos infecciosos. No entanto, poucos estudos avaliam o efeito desta terapia em reparação tecidual. Estes trabalhos mostram resultados que variam entre satisfatórios e não-satisfatórios. Além disso, os estudos que envolvem a terapia com laser em baixa intensidade e a terapia foto-dinâmica em reparação tecidual preocupam-se, na maioria das vezes, com a organização e quantificação dos componentes da matriz extra-celular. Estudar o epitélio, em contrapartida, por meio das proteínas expressas pelos queratinócitos é igualmente importante, sabendo-se que a reparação da ferida depende também da organização e proliferação das células epiteliais. Este trabalho avaliou a reparação tecidual de excisões realizadas em dorso de ratos submetidas à irradiação com laser em baixa intensidade ou terapia foto-dinâmica mediada pelo corante azul de metileno. Para tal, realizou-se a análise morfológica e histomorfológica das feridas em determinados tempos experimentais, além da análise imunoistoquímica das citoqueratinas 10 e 14 e p63. Os resultados mostraram que a reparação tecidual foi favorecida com a irradiação laser em baixa intensidade, o que foi confirmado através das análises morfológica e histo-morfológica que mostraram fechamento prévio da ferida para este grupo experimental. Além disso, a expressão de citoqueratina 10 na língua epitelial formada nas feridas pertencentes ao grupo Laser precedeu a expressão da mesma nos outros grupos, o que indicou uma maturação acelerada do epitélio para este grupo. O grupo da terapia foto-dinâmica não apresentou aceleração da reparação tecidual bem como não a prejudicou. Isto sugere que a reparação tecidual frente à irradiação laser é diferente daquela encontrada com a terapia foto-dinâmica. Além disso, não houve atraso da reparação tecidual com a terapia foto-dinâmica, sugerindo que esta terapia foi segura e que devem ser consideradas suas vantagens em situações de infecção. / The photodynamic therapy involves delivering visible light of the appropriate wavelength into a tissue or microorganism previously exposed to a photo-sensitive dye. Its use is widely spread between neoplastic and infeccious diseases. Nevertheless, its effects upon wound healing has not yet been completely verified and the few studies concerning this subject present whether good or bad results. In addition, studies that involve low intensity laser therapy or photodynamic therapy on wound healing concern mostly on the organization and quantification of the extracellular matrix components. Studying the epithelium, on the other hand, by the keratinocyte expressed proteins is equally important, once the wound healing depends also of the organization and proliferation of the epithelial cells. This study evaluated the wound healing of excisions performed on the back of rats submitted to low intensity laser therapy or photodynamic therapy mediated by methylene blue dye. Morphological and histo-morphological analysis of the wounds in pre-determined periods were performed, as well as immunohistochemistry of citokeratins 10 and 14 and p63. The results showed that the wound healing was enhanced by the low intensity laser therapy, which was confirmed by the morphological and histomorphological analysis. The wound closure was previously seen for the laser group. The citokeratin 10 expression on the epithelial tongue of the wounds that belong to the laser group preceded the expression in the other groups, which indicated an accelerated maturation of this epithelium. The photodynamic therapy group did not present accelerated wound healing but did not present any delay as well. This suggests that the wound healing found for the laser group differs from that found for the photodynamic therapy group. Moreover, the lack of delay presented by the photodynamic therapy suggests a safe therapy with advantages regarding disinfection that should be considered in specific situations.

INTRODUÇÂO: A tireoidite crônica autoimune (TCA) é a principal causa de hipotireoidismo adquirido, o qual requer tratamento contínuo com levotiroxina (LT4). Até o momento, não há terapia capaz de regenerar o tecido tireóideo lesado e melhorar sua função. Como a terapia com Laser de baixa intensidade (LILT) foi eficaz em outras doenças autoimunes, bem como na regeneração de vários tecidos, o objetivo deste estudo foi avaliar a eficácia do Laser de baixa intensidade no tratamento de pacientes com hipotireoidismo decorrente de tireoidite crônica autoimune utilizando-se os seguintes parâmetros de resposta: a) o mapeamento dúplex-Doppler colorido da tireoide; b) a função tireóidea estimada pela dose de LT4 necessária para manter as concentrações séricas de T3 total, T4 total, T4 livre e TSH normais; c) as concentrações séricas de anticorpos antiperoxidase tireóidea (TPOAb) e antitireoglobulina (TgAb). MÉTODOS: Trata-se de ensaio clínico randomizado, placebo-controlado, conduzido no Instituto de Radiologia do Hospital das Clínicas da Faculdade de Medicina da Universidade de São Paulo, de março de 2006 a março de 2009, no qual foram incluídos 43 pacientes com hipotireoidismo causado por TCA. Todos eles apresentavam altas concentrações séricas de TPOAb e/ou TgAb e padrão ultrassonográfico compatível com TCA. Os pacientes foram randomizados em grupo L (submetido à LILT, n = 23) e P (submetido ao placebo, n = 20). Os limites da tireoide foram demarcados com o auxílio da ultrassonografia. Pacientes do grupo L submeteram-se à LILT (830 nm) e os do grupo P à função placebo do mesmo equipamento. Ambos os grupos foram submetidos, no total, à 10 sessões, duas vezes por semana, com a mesma técnica. Realizou-se pré e 30 dias pós-intervenção: o estudo ultrassonográfico (US) pelo modo-B, que incluiu o histograma computadorizado de escala de cinzas para estimar quantitativamente o índice de ecogenicidade; o US-Doppler colorido de amplitude atribuindo-se valores de 0 a 4 para os padrões de vascularização e o US-Doppler pulsado para estimar a velocidade de pico sistólico e o índice de resistividade das artérias tireóideas superiores e inferiores. Após o segundo US, os pacientes descontinuaram a LT4, a qual foi reintroduzida para os pacientes que apresentaram hipotireoidismo, em dose suficiente para obter normalização hormonal. Realizaram-se determinações séricas de T3 total, T4 total, T4 livre, TSH, TPOAb e TgAb pré-intervenção e no 1º, 2º, 3º, 6º e 9º meses pós-suspensão de LT4. RESULTADOS: No US modo-B pós-intervenção, verificou-se aumento estatisticamente significativo do índice de ecogenicidade no grupo L (1,24 ± 0,11) comparado ao P (0,98 ± 0,07; P < 0,001), assim como a proporção de pacientes com volume normal foi estatisticamente maior no grupo L (P = 0,005). O US-Doppler colorido de amplitude mostrou que o valor do padrão de vascularização foi estatisticamente maior no grupo P (2,3 ± 0,27) do que no L (1,87 ± 0,36; P = 0,033). Observou-se redução da dose de LT4 no grupo L (38,59 ± 20,22 g/dia) comparada à do P (106,88 ± 22,9 g/dia; p < 0,001). TPOAb foi menor no grupo L (681,91 ± 317,44 U/mL) do que no P (1176,40 ± 551,9 U/mL; p = 0,043). Não houve redução de TgAb e efeitos adversos. CONCLUSÕES: A LILT foi eficaz no tratamento da TCA, uma vez que no grupo L verificou-se: a) melhora da ecogenicidade, do volume e do padrão de vascularização da glândula tireoide no mapeamento dúplex-Doppler colorido; b) melhora da função da glândula tireoide, evidenciada pela redução da dose de LT4 necessária para tratar o hipotireoidismo c) modulação parcial da autoimunidade, demonstrada por meio da redução das concentrações séricas de TPOAb / INTRODUCTION: A chronic autoimmune thyroiditis (CAT) is the main cause of acquired hypothyroidism which requires continuous treatment with levothyroxine (LT4). So far there has been no such therapy which can make the damaged thyroid tissue regenerate, improving its function. As the low-intensity Laser therapy (LILT) was effective in other autoimmune diseases, as well as in regenerating several tissues, the objective of this study was to evaluate the efficacy of LILT in patients with hypothyroidism caused by CAT by utilizing the following response parameters: A) Color Doppler ultrasonography of thyroid; B) The thyroid function estimated by the dose of LT4 in order to keep the serum concentrations of normal T3, T4, free T4 (fT4) and TSH; C) The serum concentrations of thyroid peroxidase (TPOAb) and thyroglobulin antibodies (TgAb). METHODS: This is a placebo-controlled randomized clinical essay guided at the Institute of Radiology, Hospital das Clínicas da Faculdade de Medicina da Universidade de São Paulo from March 2006 to March 2009, made up of 43 patients with hypothyroidism caused by CAT. All the patients showed high serum concentrations of TPOAb and/or TgAb and ultrasound pattern compatible with CAT. The patients were randomized in L group (submitted to LILT, n = 23) and P group (submitted to placebo, n = 20). The limits of thyroid were marked off with the help of ultrasonography. The patients in L group were submitted to LILT (830 nm) and the patients in P group were submitted to the placebo function of the same equipment. Both groups were submitted a total of 10 sessions, twice a week, using the same technique. Pre- and 30 days post-intervention were applied: ultrasonographic study (US) by B-mode, which included the grey scale computerized histogram to quantitatively estimate the index of echogenicity; the amplitude color Doppler US with values given from 0 to 4 for the vascularization patterns and the pulsed Doppler US to estimate the systolic peak velocity and the index of resistivity of superior and inferior thyroid arteries. After the second US the patients discontinued the LT4, which was later re-introduced in the patients having hypothyroidism in a certain amount so as to be sufficient to obtain hormonal normalization. Serum determinations of total T3, total T4, fT4, TSH, TPOAb and TgAb pre-intervention were accomplished and also in the 1st, 2nd, 3rd, 6th and 9th month post-suspension of LT4. RESULTS: In post-intervention B-mode US a significant increase in the index of echogenicity in L group (1.24 ± 0.11) was statistically observed compared with the P group (0.98 ± 0.07; P < 0.001), as well as the proportion of patients with normal volume was shown statistically higher in L group (P = 0.005). The amplitude color Doppler US showed the standard value of vascularization was statistically greater in P group (2.3 ± 0.27) than in L group (1.87 ± 0.36; P = 0.033). Pulsed Doppler US showed an increase in the systolic peak velocity of the inferior thyroid arteries in L group (34.47 ± 4.81 cm/s) in relation to P group (26.12 ± 4.29 cm/s; P = 0.016). A reduction in the dose of LT4 in L group (38.59 ± 20.22 g/day) was observed compared with the one in P group (106.88 ± 22.9 g/day; p < 0.001). TPOAb was smaller in L-group (681.91 ± 317.44 U/mL) than in P-group (1176.40 ± 551.9 U/mL; p = 0.043). There was no reduction of TgAb and adverse effects. CONCLUSIONS: LILT was effective in the treatment of CAT, once L group showed: A) amelioration of echogenicity, of volume and of vascularization of the thyroid gland in the color Doppler ultrasonography; B) improvement of thyroid function, featured through the reduction in the necessary dose of LT4 to treat the hypothyroidism; C) partial modulation of autoimmunity demonstrated by reduction of TPOAb serum concentrations