O estudo dos mecanismos neurobiológicos associados a memórias aversivas tem aplicações potenciais à prevenção e ao tratamento de patologias psiquiátricas associadas a memórias traumáticas. Em particular, o processo de reconsolidação, através do qual memórias evocadas são novamente estabilizadas, tem sido visto como um possível mecanismo na origem desses transtornos e, ao mesmo tempo, um alvo para estratégias terapêuticas. Experiências precoces influenciam o desenvolvimento e a maturação de circuitos encefálicos, e a sua interação com a carga genética do indivíduo, pode influenciar as estratégias de enfrentamento de situações aversivas ao longo da vida, gerando indivíduos resilientes ou vulneráveis ao desenvolvimento de transtornos psiquiátricos. Dentro deste contexto, o objetivo principal desta tese foi estudar diferentes experiências precoces, em modelos animais, e seu efeito sobre o processo de reconsolidação de memórias aversivas e, consequentemente, sobre o desenvolvimento de padrões de conduta de resiliência ou vulnerabilidade. Foram utilizados dois modelos, em ratos: a manipulação neonatal e a separação materna. Os resultados obtidos mostram que ambas intervenções levaram a um aumento dos cuidados que a mãe dedica à prole, mas a separação materna induziu um comportamento mais inconsistente, que reflete menor qualidade; consistentemente, a prole de ambos os sexos exibiu alterações na secreção de corticosterona frente a um contexto previamente pareado com um estímulo aversivo, e os machos mostraram generalização do medo a um contexto novo após a experiência. A manipulação neonatal, além de gerar um aumento do cuidado materno, levou a um aumento dos níveis centrais de ocitocina nas mães. A prole do sexo masculino exibiu comportamento de congelamento diminuído no contexto condicionado a um estímulo aversivo. Ambas intervenções geraram resistência à reconsolidação da memória aversiva condicionada, através de um mecanismo que parece envolver o hipocampo dorsal mas não a amígdala basolateral; o hipocampo ventral de ratos machos separados no período neonatal mostrou uma diminuição de espécies reativas de oxigênio e nitrogênio, sugestivo de atenuação de alguns mecanismos de plasticidade. Estes resultados apontam que os padrões de comportamento frente a situações aversivas são afetados pelas experiências neonatais, como reportado anteriormente, e que a manipulação parece gerar uma conduta mais resiliente enquanto a separação está associada ao surgimento de um padrão de comportamento mais vulnerável. A reconsolidação de memória de medo alterada em conjunto com a generalização da memória e a inconsistência comportamental da mãe encontrados neste trabalho e as alterações estruturais e funcionais na amígdala nestes animais, reportadas anteriormente, tornam a separação materna um modelo promissor para o estudo de mecanismos neurobiológicos dos transtornos psiquiátricos associados a memórias traumáticas. / The prevention and treatment of psychiatric pathologies associated with traumatic memories benefits from the study of the neurobiological mechanisms underlying aversive memories. In particular, the reconsolidation process, through which retrieved memories are restabilized, has been regarded both as a possible mechanism at the origin of these disorders and as a target for therapeutical strategies. Early life experiences impact the development and maturation of brain circuits, and their interaction with the individual’s genetic load may influence the coping mechanisms throughout life, generating individuals that are resilient or vulnerable to psychiatric disorders. Therefore, the aim of this thesis was to study, in an animal model, different early interventions and their effect on fear memory reconsolidation, and consequently the development of behavioral patterns of resilience or vulnerability. Neonatal handling and maternal separation in rats were used as early intervention models. The results obtained show that both interventions led to an increase in the amount of care the dam provides to the offspring, but maternal separation increased behavioral inconsistency, which reflects low quality behavior; consistently, both male and female offspring exhibited changes in corticosterone secretion in response to a context that was previously paired with an aversive stimulus and males showed fear generalization to a novel context after the experience. Neonatal handling increased both maternal care and central oxytocin levels in the dam. The male offspring showed reduced freezing behavior in the context conditioned to an aversive stimulus. Both interventions generated resistance to conditioned fear memory reconsolidation, through a mechanism that appears to involve the dorsal hippocampus but not the basolateral amygdala; the ventral hippocampus of males that were separated in the neonatal period had decreased reactive oxygen and nitrogen species, suggesting attenuated plasticity mechanisms. These results suggest that behavioral patterns which emerge when facing aversive situations are affected by neonatal experiences, as reported previously, and that neonatal handling appears to result in resilience while maternal separation appears to be associated with a pattern of vulnerability. Changes in fear memory reconsolidation together with memory generalization and maternal behavior inconsistency, found in this work, and the structural and functional changes in the amygdala, reported earlier, suggest that maternal separation is a promising model to study the neurobiological mechanisms of psychiatric pathologies associated with traumatic memories.

Em estudos anteriores do laboratório, mediante paradigma farmacológico de injeção sistêmica de morfina, foi examinada a influência dos opióides no desempenho do comportamento maternal em ratas. Foi verificado que injeções centrais de naloxona e de CCK na PAG rostral lateral (rPAGl) revertem a inibição opioidérgica desse comportamento. Dando continuidade ao estudo da ação da PAG no comportamento maternal, foi proposto investigar neste trabalho possíveis alterações dele por meio da administração local de morfina na rPAGl de ratas lactantes. Esse tem se mostrado um paradigma eficiente e capaz de fornecer pistas do arcabouço farmacológico e neurofisiológico que integram a intrincada rede neuroanatômica que o permeia. Assim, por meio de um método adequado como a estereotaxia, é possível avaliar em termos neuroanatômicos, de modo mais isolado e eficiente, a interação da PAG nesse comportamento. As ratas lactantes, da linhagem Wistar, que receberam injeções centrais de morfina apresentaram diferenças estatisticamente significantes nos parâmetros de prénutrição do comportamento maternal. A busca e agrupamento e a construção de ninho foram interrompidos por meio do tratamento opióide. Com esse mesmo tratamento, foi verificado também a alteração da latência, estatisticamente significante, nos parâmetros de forrageamento e de grooming de filhotes. Dessa maneira, o comportamento materno total (CMT) mostrouse inibido nas ratas tratadas com morfina. Tais resultados são interpretados como ação da rPAGl na modulação da decisão do comportamento, a qual é decorrente de interações neuroanatômicas com outros sítios cerebrais. Portanto, os dados sugerem que a rPAGl interfere em parâmetros comportamentais relacionados ao início ou ao estabelecimento do comportamento maternal, mas não afeta comportamentos reflexos de nutrição dos filhotes como a cifose. / By using pharmacologycal approaches such as systemic injections of morphine, it has been possible to reveal the inhibitory influence of opioids on rat maternal behavior (MB). Also, it has been reported that central infusions of naloxone or CCK into the rostral lateral PAG restore maternal behavior in lactating rats treated with morphine. This research investigates possible interferences of morphine in MB, through central infusions of this drug in rPAGl of lactating rats. This is an efficient paradigm to provide pharmacological and neurophysiological cues in the functional neuroanatomy of maternal behavior. Stereotaxical procedures were used to place cannulas directed to the PAG area, inject morphine into the PAG and evaluate its behavioral effects. Lactating Wistar rats received central infusions of morphine and showed significant differences in the various parameters. Retrieval and nest building were disrupted. This treatment alters latencies of foraging and pup grooming as well. Thus, full maternal behavior (FMB) was inhibited in the opioidergic treatment. The results suggest an involvement of a PAG role in opioidergicmodulation in maternal behavior. This modulation is provided for rPAGl, which have many neuroanatomical relations with another brain sites. These data suggest a role for rPAGl in ongoing of maternal behavior, but not in reflex nurturance behaviors like kyphosis.

A presente dissertação foi elaborada em dois experimentos. No primeiro experimento objetivou-se determinar o dia do parto através de alterações físicas e circulatórias locais, e avaliar o pH da secreção da glândula mamária comparando dois métodos em éguas no pré-parto. Foram utilizadas 30 éguas gestantes sem raça definida (SRD), durante duas estações de monta (2015 e 2016), com idade de 10±4 anos, e peso corporal de 560±57 kg. Foram observadas possíveis alterações na área pélvica, abdominal, edema vulvar e a coloração da mucosa vaginal até o dia do parto através de fotográfias sequênciais, e as fotos foram analisadas individualmente e classificadas usando um sistema de escore. Para mensuração do pH, foi utilizado o peagâmetro portátil (Quimis®) e o teste de pH em fita (Fusion®). As colheitas iniciaram a partir de 310 dias de gestação. Para às mensurações do pH, foi utilizado um modelo misto sendo a égua o efeito aleatório e o tempo como efeito fixo. As associações entre as diferentes mensurações de pH foram avaliadas por meio de correlação de Momento-produto de Pearson. Para avaliar o escores físicos e circulatórios locais os dados foram analisados pelo teste de razão de Probabilidade Qui-Quadrado e por regressão, para observar a frequência dos escores 1, 2 ou 3 até o dia do parto. O nível de significância utilizado foi de 5%. O pH da secreção mamária pode ser utilizada para determinar o dia do parto, independente do método utilizado. A coloração de mucosa vaginal e edema vulvar podem auxiliar na predição do dia do parto, porém não devem ser utilizados como único método. No segundo experimento, o objetivo foi estudar o relacionamento entre a égua e e sua cria no primeiro dia pós-parto, e relacionar o fator progênitor sobre o comportamento do potro. Foram utilizadas 22 éguas multíparas e seus respectivos potros em duas temporadas de parto (2015 e 2016). Os progenitores eram formados por jumento e equinos. O etograma foi delineado considerando-se os comportamentos característicos apresentados por éguas e potros, e divididos em atividades de interação entre égua e produto, atividades do produto, postura e outros comportamentos. As observações foram realizadas no primeiro dia pós-parto durante 10 horas a cada 2 minutos, através de observação direta com rota de amostragem focal da égua e sua cria. Foi realizada a análise de frequência dos comportamentos ao longo do tempo, considerando cada par (égua/potro) como uma unidade experimental. As frequências dos comportamentos de interação, postura e outros comportamentos das éguas foram analisadas pelo teste de Qui-Quadrado para proporções iguais. Para dependência do comportamento do potro sobre o tipo de progênitor foi realizado o teste de Qui-Quadrado de Pearson. O nível de significância utilizado foi 5%. Concluí-se que no primeiro dia pós-parto as éguas buscam auxiliar a mamada, enquanto os potros mamam e descansam. Potros e muares apresentam diferenças na postura. / The present dissertation was elaborated in two experiments. The first experiment aimed to determine the day of birth through local physical and circulatory changes, and to evaluate the pH of the mammary gland secretion comparing two methods of mares in preparturient. Thirty non-defined pregnant mares (SRD) were used during two mating seasons (2015 and 2016), aged 10 ± 4 years, and body weight of 560 ± 57 kg. Possible alterations in pelvic, abdominal, vulvar edema and vaginal mucosa staining until the day of delivery were observed through sequential photographies, and the photos were analyzed individually and classified using a scoring system. For pH measurement, the portable pHmeter (Quimis®) and the pH strip test (Fusion®) were used. Crops started at 310 days of gestation. For the pH measurements, a mixed model was used, the mare being the random effect and the time as a fixed effect. The associations between the different pH measurements were evaluated through Pearson\'s Moment-product correlation. In order to evaluate the local physical and circulatory scores, the data were analyzed by the chi-square probability and regression test to observe the frequency of scores 1, 2 or 3 until the day of delivery. The level of significance was 5%. The pH of the mammary secretion can be used to determine the day of delivery, regardless of the method used. The coloration of vaginal mucosa and vulvar edema may aid in the prediction of the day of delivery, but should not be used as the sole method. In the second experiment, the objective was to study the relationship between the mare and her offspring on the first postpartum day, and to relate the progenitor factor to the foal behavior. Twenty - two multiparous mares and their respective foals were used in two calving seasons (2015 and 2016). The parents were formed by donkeys and horses. The etogram was delineated considering the characteristic behaviors presented by mares and foals, and divided into activities of interaction between mare and product, product activities, posture and other behaviors. The observations were performed on the first day postpartum for 10 hours every 2 minutes, through direct observation with the focal sampling route of the mare and her offspring. The behavioral frequency analysis was performed over time, considering each pair (mare / foal) as an experimental unit. The frequencies of the interaction behaviors, posture and other behaviors of the mares were analyzed by the Chi-square test for equal proportions. For the dependence of the behavior of the foal on the type of progenitor was carried out the test of Chi-Square of Pearson. The level of significance was 5%. It was concluded that on the first day postpartum the mares seek to assist the feeding, while the foals suck and rest. Foals and mules show differences in posture.

Dentre os mamíferos, a ordem Primates é caracterizada por uma gestação longa e, normalmente, nascimento de um único filhote por período reprodutivo. Ainda assim, as fêmeas primatas dão a luz a filhotes pouco desenvolvidos, que requerem grande investimento parental, realizado principalmente por elas. O prolongado período pós-parto, em que o filhote depende integralmente de seu cuidador para alimentação, transporte e proteção, é chamado de infância e perdura até o momento em que o indivíduo é capaz de sobreviver sozinho. Nesse período é possível observar o estilo de cuidado materno, medido através do investimento da mãe em cuidados para seu filhote. É nesse mesmo período que as relações afetivas entre mãe e filhote e com os outros membros do grupo são estabelecidas. Em algumas espécies de mamíferos, incluindo primatas, há diferença entre o investimento materno das mães em relação ao sexo do filhote ou a paridade e posição hierárquica delas. Nesse trabalho, verifiquei o efeito da paridade da mãe e do sexo do filhote sobre o estilo de cuidado materno e desenvolvimento físico e social dos filhotes de um grupo semi-livre de macacos-prego. Além disso, a presente pesquisa deu continuidade a um estudo anterior, com o mesmo grupo, também sobre estilo de cuidado materno e desenvolvimento dos filhotes. Assim, também foi objetivo deste trabalho comparar estas variáveis em função de mudanças na demografia do grupo e nas condições ambientais. Os dados foram coletados no Parque Ecológico do Tietê entre setembro de 2006 e abril de 2008, através dos métodos de animal-focal e todas as ocorrências, e analisados através de análises de agrupamentos e de variância. O estilo de cuidado materno parece estar relacionado com a paridade da mãe, mães primíparas têm maior investimento, de maneira geral, em amamentação, transporte e manutenção da proximidade de seus filhotes, enquanto multíparas investem mais em catação, mas as diferenças não foram significativas. O desenvolvimento físico e social dos filhotes não foi afetado pela mudança na demografia do grupo, mas sim pela mudança das condições ambientais. Uma alteração na disponibilidade do alimento provisionado provocou aumento nas taxas de locomoção do grupo em busca de alimento. O aumento na distância entre mães e filhotes também foi observado e esteve relacionado ao crescimento das redes familiares que promovem a proteção do filhote por indivíduos aparentados que não somente suas mães. O investimento materno foi maior em filhotes machos. Quanto ao desenvolvimento, filhotes fêmeas se alimentaram e se locomoveram independentemente mais que filhotes machos, ainda que a locomoção independente tenha sido maior para machos no início do desenvolvimento. Filhotes fêmeas, no entanto, mantiveram relações de proximidade mais fortes com a mãe e com os outros membros do grupo. O maior investimento materno em machos, independente da paridade das mães, é esperado em populações de primatas em que a oferta de alimento não é limitante do sucesso reprodutivo das fêmeas e em que, portanto, o sexo com maior variabilidade de sucesso reprodutivo em função de habilidades competitivas é o masculino. / In comparison with other mammals, the order Primates is characterized by a prolonged gestation and by the birth of a single offspring in each reproductive period. Besides, female primates give birth to very immature infants that require great parental investment performed mainly by the mothers. Infancy is the post-partum period in which the young is completely dependent on its care-giver for feeding, transportation and protection, and lasts up until the individual is capable of surviving on its own. During this period we can observe the style of maternal care by measuring the mothers investment in care given to her offspring. The affiliative relationship between the infant and its mother, as well as with other members of the social group are established throughout this same period. In some mammal species, including primates, maternal care can differ according to the sex of the infant, and on female parity and hierarchical position. In this study I investigate the effect of mothers parity and on infants sex on the style of maternal care and on the physical and social development of the offspring in a group of semi-free tufted capuchin monkeys. Furthermore, this research followed a previous study, carried out with the same group of monkeys, also regarding the style of maternal care and development of young. Therefore it is also the goal of this study to compare these variables considering differences in group demography and in the environmental conditions between the two study periods. Data were collected at Parque Ecológico do Tietê from September 2006 to April 2008. Data were collect through focal-animal and all occurrences methods, and analyzed by cluster and variance analysis. The style of maternal care seems to be related to the parity of the mother. Primiparous mothers generally invest more in nursing, transportation and in maintaining proximity with their offspring while multiparous mothers invest more in grooming. However the differences were not statistically significant. The physical and social development of the young were not affected by the demographic changes undergone by the group, but were, on the other hand, affected by changes in environmental conditions. An alteration in the availability of provisioned food resulted in an increase in the rate of locomotion of the group in search for food. An increase in the distance between mother and offspring was also noted and was related to the growth of family networks, leading to the protection of the young by kin related individuals besides their mother. There was greater maternal investment in male infants. Regarding infant development, female infants had higher frequencies of independent feeding and locomotion than male infants, even though independent locomotion was greater for males at the beginning of their development. Female infants also maintained greater proximity with their mothers and with other members of the group than male infants. A greater maternal investment in male offspring, independent of the parity of mothers, is expected in primate populations living in areas where food supply is not limiting of females reproductive success, which is the case of the study area, because in such populations males present greater variability than females in reproductive success.

A aloamamentação parece desafiar o princípio geral de que o cuidado materno deve restringir-se à própria prole. Embora a aloamamentação em cobaias domésticas Cavia porcellus - espécie em que um macho dominante pode reproduzir-se com várias fêmeas em um sistema de harém e em que os filhotes são precoces e capazes de ingerir alimentos sólidos logo depois do nascimento - já tenha sido observada, não foi submetida até o momento a um estudo sistemático. Na presente pesquisa, realizada com cobaias comuns (Etapa 1) e cobaias albinas (Etapa 2), buscamos descrever os aspectos básicos da interação fêmea-filhote ao longo das primeiras quatro semanas de vida dos filhotes, comparando a freqüência e a duração da amamentação de fêmeas mantidas sozinhas com a sua ninhada (Condição FS, 20 fêmeas) à de fêmeas pareadas quando as ninhadas tinham no máximo 3 dias de diferença (Condição FP, 19 pares de fêmeas), uma condição em que pode surgir aloamamentação. Verificou-se que, apesar da existência de apego em relação à mãe (os filhotes na condição FP permaneciam próximos à mãe e mamaram mais dela do que da fêmea alheia), aproximadamente 60 % dos filhotes alomamaram. A aloamamentação, que se concentrou na primeira semana de vida com um decréscimo marcado em seguida e que não era sempre recíproca, decorreu basicamente da iniciativa dos filhotes. Os resultados não apóiam a hipótese funcional da aloamamentação enquanto competição entre os filhotes por um superávit de alimentação, mas indicam que constitui uma estratégia oportunista dos filhotes, propiciada pelas características da organização social das cobaias. / Allosuckling seems to challenge the general principle according to which maternal care should be retricted to offspring. While already reported, allosuckling in domestic guinea pigs Cavia porcellus - a species in which males may breed with several females, in a harem system, and in which pups are precocious and able to ingest solid food shortly after birth - has not been, to now, systematically described. The aim of the present research, performed with common guinea pigs (Phase 1) and albino guinea pigs (Phase 2) was to describe female-pups interactions throughout development, and to compare such interactions in isolated females with their litter (FS condition, 20 females) and in paired females with their litter (FP condition, 19 pairs), a condition in which allosuckling performance is likely to happen. In spite of pups\' attachment to their mothers (in condition FS, pups remained nearer to their mother than to the other lactating female and had longer and more frequent nursing episodes with her), allosuckling was relatively frequent (approximately 60% of pups were allonursed). Allosuckling peak occurred during the first week of life and markedly decreased thereafter, being mainly under the control of pups. Results do not favor a functional explanation of allosuckling as a competitive strategy of pups for a surplus of food, but suggest it is an opportunistic strategy which is made possible by the specific nature of guinea pigs social organization.

Excessive and compulsive ethanol drinking is one of the most serious public health issues. Therefore, it is vital to increase the knowledge about risks and protection for alcohol use disorders (AUD) to optimize prevention and treatment strategies. Ethanol consumption commonly initiates during adolescence when extensive neuronal maturation and development also occurs. Early exposure to ethanol is a risk factor for AUD, but the effects of adolescent drinking and the basis for the individual susceptibility to AUD are not fully understood. The interactions between genotype and environmental factors determine the individual risk for AUD and this thesis aimed to examine the environmental impact. The specific aims were to investigate 1) how early-life conditions affect adolescent voluntary ethanol drinking, behavioural profiles, endogenous opioids and response to treatment with an opioid antagonist (naltrexone), and 2) whether alterations detected in the offspring may be mediated by variations in maternal behaviour. A rodent maternal separation (MS) model was used to mimic a protective and risk-inducing early-life environment, respectively, with the use of 15 min (MS15) or 360 min (MS360) of daily MS. The main findings were 1) the MS360, but not the MS15 rats, responded to naltrexone following adolescent ethanol drinking; all adolescent rats had a high voluntary ethanol intake independent of early environmental conditions whereas in the adult groups the MS360, but not the MS15 rats, increased their ethanol intake and preference over time; adolescent ethanol exposure resulted in higher dynorphin levels in hippocampus and higher Met-enkephalin-Arg6Phe7 in the amygdala, independently of rearing conditions, 2) behavioural profiling using the multivariate concentric square field™ test showed: the young MS360 rats had increased risk assessment and risk taking behaviour compared to the young MS15 rats; the young MS15 rats increased, whereas the young MS360 rats decreased, their risk assessment and risk taking behaviour over time; differences in pup-retrieval strategies where the MS360 dams retrieved some pups into a safe area but as compared to MS15 rats they left more pups in a risk area; increased risk assessment behaviour in the MS360 dams immediately after weaning. Taken together, early-life environmental conditions alter adult but not adolescent drinking, the response to naltrexone, and behaviour in dams and offspring. Adolescent rats consumed more ethanol independent of rearing conditions and displayed increased opioid levels in brain areas related to cognition and addiction.

Thesis (M.S.)--University of Michigan, 1987. / "A research report submitted in partial fulfillment of the requirents for the degree ..."

Thesis (M.S.)--University of Michigan, 1989.

Thesis (M.S.)--University of Michigan, 1989.

Thesis (M.S.)--University of Michigan, 1987. / "A research report submitted in partial fulfillment of the requirents for the degree ..."