Orientador: João Martins Pizauro Junior / Banca: Luis Henrique Souza Guimarães / Banca: Marcio Hipolito / Resumo: Durante a metamorfose dos anuros, além da natação, a cauda tem como função fornecer nutrientes necessários para as transformações morfofisiológicas da fase larval aquática em adultos terrestres, pois os animais não se alimentam durante esse período. A fosfatase alcalina é uma enzima importante na mobilização do fosfato necessário para o anabolismo de biomoléculas essenciais à vida, enquanto a fosfatase ácida é uma marcadora lisossomal. Nesse sentido, o objetivo desse estudo foi avaliar a atividade das fosfatases ácida e alcalina obtidas da cauda de girinos de rã-touro (Lithobates catesbeianus), visando fornecer informações acerca do processo de mobilização de nutrientes durante o desenvolvimento e a metamorfose. Os animais foram mantidos em aquários a 27 °C, e separados por estádios de desenvolvimento. As caudas foram coletadas de animais em cada estádio e homogeneizadas em tampões acetato, TRIS.HCl ou 2-amino-2-metil-1-propanol, contendo MgCl2 2 mM e ZnCl2 1 μM, centrifugadas a 10000 g, durante 10 minutos, a 4°C, congeladas em nitrogênio líquido e armazenadas a -70 °C. A atividade de p-nitrofenilfosfatase foi estável quando as amostras homogeneizadas foram armazenadas em diferentes valores de pH, contudo, a atividade da fosfatase alcalina reduziu aproximadamente 70% após 12 horas de armazenamento no pH 4. O pH ótimo aparente para a hidrólise do p-nitrofenilfosfato pelas fosfatases ácida e alcalina foi 5,0 e 10,5, respectivamente, enquanto a hidrólise do pirofosfato de sódio e do ATP para as atividades de pirofosfatase e ATPase foram de 7,5 e 7,0. A temperatura ótima para a atividade das fosfatases ácida e alcalina foi 45°C por 15 minutos de reação. O estudo da ação de compostos sobre a atividade da fosfatase alcalina revelou que o arsenato, EDTA, metavanadato, teofilina, levamisol, íons fosfato e o p-hidroximercuriobenzoato agem... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: During anurans metamorphosis, besides swimming, the tail has the function to supply with nutrients the morphophysiological changes of the larval aquatic stage to terrestrial adults, because the animals do not eat during this period. Alkaline phosphatase is an important enzyme in phosphate mobilization required to the anabolism of essential biomolecules, whereas the acid phosphatase is a lysosomal marker. Thus, the aim of this study was to evaluate the activity of acid and alkaline phosphatase obtained from the tail of bullfrog tadpoles (Lithobates catesbeianus), to provide information about the process of nutrients mobilization during development and metamorphosis. The animals were kept in aquaria at 27 °C, and separated by stages. The tails were collected from animals at each stage and homogenized in acetate buffers, Tris.HCl or 2-amino-2-methyl-1-propanol, containing 2 mM MgCl2 and 1 mM ZnCl2, centrifuged at 10000 g for 10 minutes at 4 °C, frozen in liquid nitrogen and stored at -70 °C. The activity of p-nitrophenylphosphatase was stable when the homogenized samples were stored at different pH values, however, alkaline phosphatase activity decreased about 70% after 12 hours of storage at pH 4. The apparent optimum pH for the hydrolysis of p-nitrophenylphosphate by acid and alkaline phosphatase was 5.0 and 10.5, respectively, while the hydrolysis of sodium pyrophosphate and ATP by the activities of pyrophosphatase and ATPase were 7.5 and 7.0. The optimum temperature for the activity of acid and alkaline phosphatases was 45 ° C for 15 minutes of reaction. The study of the action of compounds on the activity of alkaline phosphatase revealed that arsenate, EDTA, metavanadate, theophylline, levamisole, phosphate ions and p-hydroxymercurybenzoate act as inhibitors, and arsenate showed greater inhibition... (Complete abstract click electronic access below) / Mestre

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:23:05Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2013-02-27Bitstream added on 2014-06-13T19:28:58Z : No. of bitstreams: 1 goncalves_am_me_araiq.pdf: 787474 bytes, checksum: 139bd29c3e4939fc72732e4ef1db4333 (MD5) / Durante a metamorfose dos anuros, além da natação, a cauda tem como função fornecer nutrientes necessários para as transformações morfofisiológicas da fase larval aquática em adultos terrestres, pois os animais não se alimentam durante esse período. A fosfatase alcalina é uma enzima importante na mobilização do fosfato necessário para o anabolismo de biomoléculas essenciais à vida, enquanto a fosfatase ácida é uma marcadora lisossomal. Nesse sentido, o objetivo desse estudo foi avaliar a atividade das fosfatases ácida e alcalina obtidas da cauda de girinos de rã-touro (Lithobates catesbeianus), visando fornecer informações acerca do processo de mobilização de nutrientes durante o desenvolvimento e a metamorfose. Os animais foram mantidos em aquários a 27 °C, e separados por estádios de desenvolvimento. As caudas foram coletadas de animais em cada estádio e homogeneizadas em tampões acetato, TRIS.HCl ou 2-amino-2-metil-1-propanol, contendo MgCl2 2 mM e ZnCl2 1 μM, centrifugadas a 10000 g, durante 10 minutos, a 4°C, congeladas em nitrogênio líquido e armazenadas a -70 °C. A atividade de p-nitrofenilfosfatase foi estável quando as amostras homogeneizadas foram armazenadas em diferentes valores de pH, contudo, a atividade da fosfatase alcalina reduziu aproximadamente 70% após 12 horas de armazenamento no pH 4. O pH ótimo aparente para a hidrólise do p-nitrofenilfosfato pelas fosfatases ácida e alcalina foi 5,0 e 10,5, respectivamente, enquanto a hidrólise do pirofosfato de sódio e do ATP para as atividades de pirofosfatase e ATPase foram de 7,5 e 7,0. A temperatura ótima para a atividade das fosfatases ácida e alcalina foi 45°C por 15 minutos de reação. O estudo da ação de compostos sobre a atividade da fosfatase alcalina revelou que o arsenato, EDTA, metavanadato, teofilina, levamisol, íons fosfato e o p-hidroximercuriobenzoato agem... / During anurans metamorphosis, besides swimming, the tail has the function to supply with nutrients the morphophysiological changes of the larval aquatic stage to terrestrial adults, because the animals do not eat during this period. Alkaline phosphatase is an important enzyme in phosphate mobilization required to the anabolism of essential biomolecules, whereas the acid phosphatase is a lysosomal marker. Thus, the aim of this study was to evaluate the activity of acid and alkaline phosphatase obtained from the tail of bullfrog tadpoles (Lithobates catesbeianus), to provide information about the process of nutrients mobilization during development and metamorphosis. The animals were kept in aquaria at 27 °C, and separated by stages. The tails were collected from animals at each stage and homogenized in acetate buffers, Tris.HCl or 2-amino-2-methyl-1-propanol, containing 2 mM MgCl2 and 1 mM ZnCl2, centrifuged at 10000 g for 10 minutes at 4 °C, frozen in liquid nitrogen and stored at -70 °C. The activity of p-nitrophenylphosphatase was stable when the homogenized samples were stored at different pH values, however, alkaline phosphatase activity decreased about 70% after 12 hours of storage at pH 4. The apparent optimum pH for the hydrolysis of p-nitrophenylphosphate by acid and alkaline phosphatase was 5.0 and 10.5, respectively, while the hydrolysis of sodium pyrophosphate and ATP by the activities of pyrophosphatase and ATPase were 7.5 and 7.0. The optimum temperature for the activity of acid and alkaline phosphatases was 45 ° C for 15 minutes of reaction. The study of the action of compounds on the activity of alkaline phosphatase revealed that arsenate, EDTA, metavanadate, theophylline, levamisole, phosphate ions and p-hydroxymercurybenzoate act as inhibitors, and arsenate showed greater inhibition... (Complete abstract click electronic access below)

Orientador: João Martins Pizauro Junior / Banca: Sandra Regina Pombeiro Sponchiado / Banca: Flávio José dos Santos / Banca: Luis Henrique Souza Guimarães / Banca: Marcio Hipolito / Resumo: Os processos de formação, crescimento, remodelação e, quando necessário, reparo do tecido ósseo ocorrem pela ação coordenada e regulada dos eventos químicos e fisiológicos que participam das ossificações intramembranosa e endocondral, sendo assim, o desequilíbrio das biomoléculas envolvidas no processo, pode levar ao desenvolvimento de patologias ósseas. Durante a metamorfose dos anuros, ocorrem acentuadas e perceptíveis alterações morfológicas que possibilitam a transição do animal do ambiente aquático para o terrestre, sendo a remodelação do esqueleto uma das transformações mais notáveis. Dentre as formas de se estudar o mecanismo de calcificação biológica, as enzimas fosfatase alcalina e fosfatase ácida tartarato-resistente são utilizadas por serem consideradas marcadores bioquímicos da ação dos osteoblastos e dos osteoclastos, respectivamente. Neste sentido, foram realizados estudos em girinos e rãs de Lithobates catesbeianus com o objetivo de se compreender melhor tais processos de ossificação. A média da atividade específica para a hidrólise do pNFF (pH=10,5) pela fosfatase alcalina solubilizada por fosfatidilinositol fosfolipase C-específica (PIPLC) de Bacillus cereus, entre as diferentes regiões ósseas nas diferentes idades do animal, foi de 1142,57 U.mg-1, enquanto que para a hidrólise do PPi (pH=8,0) foi de 1433,82 U.mg-1. Dentre os compostos testados sobre a atividade enzimática, aquele que mais influenciou foi o EDTA, com aproximadamente 67% de inibição para a ati... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: The processes of formation, growth, remodeling and, when necessary, repair of the bone tissue occur through the coordinated and regulated action of the chemical and physiological events that participate in the intramembranous and endochondral ossifications, thus, the imbalance of the biomolecules involved in the process,maylead to the development of bone pathologies. During anuran's metamorphosis, there are marked and perceptible morphological changes that allow thetransition of the animal from the aquatic to the terrestrial environment, and the skeleton remodeling is one of the most remarkable transformations. Among the ways to study the mechanism of biological calcification, the enzymes alkaline phosphatase and tartrate-resistant acid phosphatase are used as biochemical markers of the action of osteoblasts and osteoclasts, respectively. In this sense, studies were carried out on tadpoles and frogs of Lithobates catesbeianusin order to better understand such ossification processes. The mean of the specific activity for the hydrolysis of pNPP(pH=10.5) by the alkaline phosphatase solubilised by Bacilluscereusphosphatidylinositol-specific phospholipase C (PIPLC)between the different bone regions at different ages of the animal was 1142.57 U.mg-1, while for the hydrolysis of PPi (pH=8.0) was 1433.82 U.mg-1. Among the compounds tested on the enzymatic activity, the one that most influenced was EDTA, with approximately 67% inhibition for pNPPase activity, and77% for PPase. In the ... (Complete abstract click electronic access below) / Doutor

Orientadora: Karina Anhezini de Araújo / Banca: Jose Antonio Vasconcelos / Banca: Gabriel Giannattasio / Banca: Milton Carlos Costa / Banca: Hélio Rebello Cardoso Júnior / Resumo: Frank Ankersmit ainda é relativamente pouco conhecido no Brasil, mas na Holanda (seu país), em toda Europa e nos Estados Unidos, principalmente, ele é uma assumidade na área de teoria e filosofia da história. "Chegou" no Brasil através da, e graças à, repercussão de seus escritos pós-modernistas da década de 1980, traduzidos e publicados na revista Topoi em 2001. Esses escritos provocaram meu interesse em sua obra, e o desejo de investigá-la um pouco mais. Na medida em que fui também traduzindo, diversificando e aprofundando leituras, percebi que o pós-modernismo foi apenas um capítulo de sua jornada, e que uma história intelectual de Ankersmit deveria ir além, ampliar seu escopo. Esta tese se propõe a dar esse passo além, e a ler Ankersmit também a partir de outros embates, giros temáticos e conceitos por ele apresentados, desde a publicação de sua primeira obra em inglês, Narrative Logic (1983), até escritos mais recentes, em especial, Meaning, Truth and Reference in Historical Representation (2012). No interregno dessa pesquisa, outros "Ankersmites" emergiram, diferentes versões dele mesmo e de sua obra, precipitadas por algumas transições: do narrativismo para o representacionalismo; do pós-modernismo a um tipo de pós-pós-modernismo; do idealismo ao realismo histórico; movendo-se da linguagem para a experiência sublime, mas sem perder de vista o solo da representação; pensando a representação tanto no campo da política quanto no da historiografia. E, por fim... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Frank Ankersmit still is a relatively new name in Brazil, although in The Kingdom of the Netherlands (his homeland), throughout Europe and in the United States of America, he is a prominent, well-known and respected theorist and philosopher of history. He arrived in Brazil through (and thanks to) the repercussion of his postmodern writings of the 1980s, translated and published in the journal of history Topoi in 2001. These writings incited my interest in his work in 2007, and gave me the desire to investigate further. Furthermore, insofar as I have been translating his texts, diversifying and deepening readings, I have realized that postmodernism was nothing but one chapter of his journey, and that an intellectual history of Ankersmit should go far beyond, enlarging its scope. This dissertation proposes to take this step even further, by reading Ankersmit also from other intellectual perspectives, debates and conceptual 'twists and turns' he has been thorough, from the publication of his first book in English, Narrative Logic (1983), to his more recent developments especially in Meaning, Truth and Reference in Historical Representation (2012). In the meantime, other 'Ankersmites' emerged, different versions of himself, precipitated by some transitions: from narrativism to representationalism; from postmodernism to post-postmodernist type of theory; from idealism back to historical realism; moving from language to (sublime) experience, but without losing sight of representation's firm soil; accounting for representation both in the field of politics and in historiography. And finally, trying to innovate the maximum and to repeat or vary the minimum of what he and others have said before, entangled by a longing for originality and distinction, a desire for authenticity, and a passion for (taking) historical writing... (Complete abstract click electronic access below) / Doutor

Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências Agrárias. Programa de Pós-graduação em Aquicultura / Made available in DSpace on 2012-10-23T14:55:31Z (GMT). No. of bitstreams: 1 258289.pdf: 376583 bytes, checksum: 56b7e45ac28709f75738d0feb729c18f (MD5)

Submitted by Jonathan Michelson De Menezes (jonathan.menezes@unesp.br) on 2018-10-01T17:56:40Z No. of bitstreams: 1 TESE FINAL_CD.pdf: 4117528 bytes, checksum: c5bbdb37a43a5147acef0f984d21c2d2 (MD5) / Approved for entry into archive by Maria Luiza Carpi Semeghini (luiza@assis.unesp.br) on 2018-10-01T23:08:58Z (GMT) No. of bitstreams: 1 menezes_j_dr_assis_int.pdf: 4117528 bytes, checksum: c5bbdb37a43a5147acef0f984d21c2d2 (MD5) / Made available in DSpace on 2018-10-01T23:08:58Z (GMT). No. of bitstreams: 1 menezes_j_dr_assis_int.pdf: 4117528 bytes, checksum: c5bbdb37a43a5147acef0f984d21c2d2 (MD5) Previous issue date: 2018-08-10 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / Frank Ankersmit ainda é relativamente pouco conhecido no Brasil, mas na Holanda (seu país), em toda Europa e nos Estados Unidos, principalmente, ele é uma assumidade na área de teoria e filosofia da história. “Chegou” no Brasil através da, e graças à, repercussão de seus escritos pós-modernistas da década de 1980, traduzidos e publicados na revista Topoi em 2001. Esses escritos provocaram meu interesse em sua obra, e o desejo de investigá-la um pouco mais. Na medida em que fui também traduzindo, diversificando e aprofundando leituras, percebi que o pós-modernismo foi apenas um capítulo de sua jornada, e que uma história intelectual de Ankersmit deveria ir além, ampliar seu escopo. Esta tese se propõe a dar esse passo além, e a ler Ankersmit também a partir de outros embates, giros temáticos e conceitos por ele apresentados, desde a publicação de sua primeira obra em inglês, Narrative Logic (1983), até escritos mais recentes, em especial, Meaning, Truth and Reference in Historical Representation (2012). No interregno dessa pesquisa, outros “Ankersmites” emergiram, diferentes versões dele mesmo e de sua obra, precipitadas por algumas transições: do narrativismo para o representacionalismo; do pós-modernismo a um tipo de pós-pós-modernismo; do idealismo ao realismo histórico; movendo-se da linguagem para a experiência sublime, mas sem perder de vista o solo da representação; pensando a representação tanto no campo da política quanto no da historiografia. E, por fim, tentando variar o máximo e repetir o mínimo do que ele e outros disseram anteriormente sobre os mais variados assuntos, enredado pelo anseio por originalidade, autenticidade e distinção, e por uma paixão pela escrita da história “como ela é”. Desse modo, decidi olhar para esse autor e sua obra desde a perspectiva da metamorfose. Parto da compreensão de que a tradição historicista alemã é um elemento comum, um cantus firmus, que permeia sua obra toda, e que se nota pelo desejo de Ankersmit por encontrá-lo em lugares onde ele normalmente não é visto; de traduzi-lo para diferentes idiomas, como o da filosofia da linguagem contemporânea; de fazer combinações improváveis, e, assim, de reabilitá-lo do aparente ostracismo em que foi posto na teoria da história e na historiografia. Contudo, esta investigação pretende demonstrar que, pelas características de Ankersmit – esse teórico mutante, esse “assaltante intelectual” (intelectual plunderer), como ele mesmo se chamou, sempre em movimento –, mais do que uma tradução ou recuperação, o que sua obra prefigura é uma metamorfose do historicismo. Dos paradoxos que a permeiam, talvez esse seja o maior, tornando a tarefa de estudá-la uma atividade tanto complexa quando fascinante. Ao menos para este pesquisador. / Frank Ankersmit still is a relatively new name in Brazil, although in The Kingdom of the Netherlands (his homeland), throughout Europe and in the United States of America, he is a prominent, well-known and respected theorist and philosopher of history. He arrived in Brazil through (and thanks to) the repercussion of his postmodern writings of the 1980s, translated and published in the journal of history Topoi in 2001. These writings incited my interest in his work in 2007, and gave me the desire to investigate further. Furthermore, insofar as I have been translating his texts, diversifying and deepening readings, I have realized that postmodernism was nothing but one chapter of his journey, and that an intellectual history of Ankersmit should go far beyond, enlarging its scope. This dissertation proposes to take this step even further, by reading Ankersmit also from other intellectual perspectives, debates and conceptual ‘twists and turns’ he has been thorough, from the publication of his first book in English, Narrative Logic (1983), to his more recent developments especially in Meaning, Truth and Reference in Historical Representation (2012). In the meantime, other ‘Ankersmites’ emerged, different versions of himself, precipitated by some transitions: from narrativism to representationalism; from postmodernism to post-postmodernist type of theory; from idealism back to historical realism; moving from language to (sublime) experience, but without losing sight of representation’s firm soil; accounting for representation both in the field of politics and in historiography. And finally, trying to innovate the maximum and to repeat or vary the minimum of what he and others have said before, entangled by a longing for originality and distinction, a desire for authenticity, and a passion for (taking) historical writing ‘as it is’. For this reason, I decided to see the author and his oeuvre from the perspective of the metamorphosis, a theme not so far away from his own theoretical inclinations. So, I depart here from the ‘realization’ that the German historicist tradition is a species of common ground, a cantus firmus, which permeates his writings, and which can be observed by Ankersmit’s desire to find historicism in philosophical places where it is not normally seen nor expected; to translate it into different languages, such as the contemporary philosophy of language; to propose improbable combinations, and, then, to rehabilitate historicism from the apparent ostracism to which it was delegated in the theory of history and historiography. However, along these lines I want to argue that, taking Ankersmit’s intellectual persona seriously into consideration – a mutant theoretician, an ‘intellectual plunderer’ (as he once called himself), always on the move –, what his work prefigurates, more than a translation or a retrieval of historicism, is a metamorphosis of historicism. From the all the paradoxes we encounter in Ankersmit’s work, perhaps this is the greatest and the more fascinating. At least for me. / CAPES: 88881.134902/2016-01

Made available in DSpace on 2015-08-20T17:10:05Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2015-03-25. Added 1 bitstream(s) on 2015-08-20T17:25:54Z : No. of bitstreams: 1 000841459_20170325.pdf: 280698 bytes, checksum: ddf6fe87e9e3214412eb46b4c5b5c542 (MD5) Bitstreams deleted on 2017-03-31T12:19:19Z: 000841459_20170325.pdf,. Added 1 bitstream(s) on 2017-03-31T12:20:22Z : No. of bitstreams: 1 000841459.pdf: 1087156 bytes, checksum: 876dbf5e07c145d71a408ab1d097865f (MD5) / A calcificação biológica é um processo muito bem regulado, no qual os diferentes tipos de tecidos, células, organelas e biomoléculas, participam na coordenação e regulação de eventos metabólicos envolvidos na deposição de fosfato de cálcio, sob a forma de cristais de hidroxiapatita. As alterações morfológicas ocorridas nos anuros, durante a metamorfose, são extremamente acentuadas e perceptíveis, sendo uma delas a remodelação do esqueleto. Os eventos relacionados à ossificação em girinos raramente são descritos na literatura. A fosfatase ácida tartarato resistente tem sido amplamente utilizada como um marcador específico de osteoclastos, células que participam do processo de reabsorção e de remodelação do tecido ósseo, enquanto a fosfatase alcalina tem sido usada como marcador de osteoblastos, células responsáveis pela formação do tecido ósseo. Estudos efetuados por vários pesquisadores, com o objetivo de determinar, principalmente, as enzimas presentes nas vesículas extracelulares dos condrócitos, têm revelado a presença de outras enzimas, além da fosfatase alcalina que são importantes para o processo de calcificação biológica. Assim, no presente trabalho foi avaliada a variação na atividade das fosfatases no processo de ossificação no período de desenvolvimento dos membros de Lithobates catesbeianus, a fim de contribuir na compreensão deste processo não somente em anuros, mas também nos demais vertebrados. Os animais foram dessensibilizados em água com gelo, decapitados, os membros foram removidos, em seguida os ossos foram descarnados e homogeneizados, centrifugados, sendo o sobrenadante aliquotado, congelado em nitrogênio líquido e armazenado a -70ºC para posteriores atividades enzimáticas e dosagem de proteína no extrato. As enzimas, fosfatase ácida e fosfatase alcalina, apresentaram estabilidade em todos os pH de armazenamento estudados... / Biological calcification is a tight regulated process in which different types of tissues, cells, organelles, and biomolecules participate in the coordination and regulation of metabolic events involved in accumulating calcium phosphate, in the form of hidroxiapatite crystals. The morphological changes that occur during anuran metamorphosis are extremely accentuated and perceptible, such as the remodeling of the skeleton. The ossification events are rarely described for tadpoles in the literature. The tartarate resistant acid phosphatase has been widely used as a specific marker of osteoclasts, cells that participate in the process of resorption and remodeling of bone tissue, while the alkaline phosphatase has been used as a marker for osteoblasts, cells responsible for bone tissue formation. Studies conducted by many researchers with the aim of determining, mainly, the enzymes in chondrocyte extracellular vesicles have revealed the presence of other enzymes, in addition to alkaline phosphatase, which are important to the process of biological calcification. Thus, in the present study, the changes in the activity of phosphatases in the ossification process during the development of the limbs of Lithobates catesbeianus was evaluated, with the aim to contribute to the understanding of this process not only in anurans, but also in other vertebrates. The animals were desensitized in water with ice, decapitated and limb bones were removed and homogenized, centrifuged, and the supernatant aliquoted, frozen in liquid nitrogen and stored at -70ºC for subsequent enzymatic activities and protein quantification. The enzymes, acid phosphatase and alkaline phosphatase, remained stable in all of the studied storage pH, the apparent pH optimum of hydrolysis of p-nitrophenyl phosphate (PNPP) was of 5.0 and 10.5, respectively, and the enzymes were stable at 45ºC and the t1/2 was 60 minutes at 55ºC for alkaline...

Orientador: João Martins Pizauro Junior / Banca: Marta Verardino de Stéfani / Banca: Luis Henrique Souza Guimarães / Resumo: A calcificação biológica é um processo muito bem regulado, no qual os diferentes tipos de tecidos, células, organelas e biomoléculas, participam na coordenação e regulação de eventos metabólicos envolvidos na deposição de fosfato de cálcio, sob a forma de cristais de hidroxiapatita. As alterações morfológicas ocorridas nos anuros, durante a metamorfose, são extremamente acentuadas e perceptíveis, sendo uma delas a remodelação do esqueleto. Os eventos relacionados à ossificação em girinos raramente são descritos na literatura. A fosfatase ácida tartarato resistente tem sido amplamente utilizada como um marcador específico de osteoclastos, células que participam do processo de reabsorção e de remodelação do tecido ósseo, enquanto a fosfatase alcalina tem sido usada como marcador de osteoblastos, células responsáveis pela formação do tecido ósseo. Estudos efetuados por vários pesquisadores, com o objetivo de determinar, principalmente, as enzimas presentes nas vesículas extracelulares dos condrócitos, têm revelado a presença de outras enzimas, além da fosfatase alcalina que são importantes para o processo de calcificação biológica. Assim, no presente trabalho foi avaliada a variação na atividade das fosfatases no processo de ossificação no período de desenvolvimento dos membros de Lithobates catesbeianus, a fim de contribuir na compreensão deste processo não somente em anuros, mas também nos demais vertebrados. Os animais foram dessensibilizados em água com gelo, decapitados, os membros foram removidos, em seguida os ossos foram descarnados e homogeneizados, centrifugados, sendo o sobrenadante aliquotado, congelado em nitrogênio líquido e armazenado a -70ºC para posteriores atividades enzimáticas e dosagem de proteína no extrato. As enzimas, fosfatase ácida e fosfatase alcalina, apresentaram estabilidade em todos os pH de armazenamento estudados... / Abstract: Biological calcification is a tight regulated process in which different types of tissues, cells, organelles, and biomolecules participate in the coordination and regulation of metabolic events involved in accumulating calcium phosphate, in the form of hidroxiapatite crystals. The morphological changes that occur during anuran metamorphosis are extremely accentuated and perceptible, such as the remodeling of the skeleton. The ossification events are rarely described for tadpoles in the literature. The tartarate resistant acid phosphatase has been widely used as a specific marker of osteoclasts, cells that participate in the process of resorption and remodeling of bone tissue, while the alkaline phosphatase has been used as a marker for osteoblasts, cells responsible for bone tissue formation. Studies conducted by many researchers with the aim of determining, mainly, the enzymes in chondrocyte extracellular vesicles have revealed the presence of other enzymes, in addition to alkaline phosphatase, which are important to the process of biological calcification. Thus, in the present study, the changes in the activity of phosphatases in the ossification process during the development of the limbs of Lithobates catesbeianus was evaluated, with the aim to contribute to the understanding of this process not only in anurans, but also in other vertebrates. The animals were desensitized in water with ice, decapitated and limb bones were removed and homogenized, centrifuged, and the supernatant aliquoted, frozen in liquid nitrogen and stored at -70ºC for subsequent enzymatic activities and protein quantification. The enzymes, acid phosphatase and alkaline phosphatase, remained stable in all of the studied storage pH, the apparent pH optimum of hydrolysis of p-nitrophenyl phosphate (PNPP) was of 5.0 and 10.5, respectively, and the enzymes were stable at 45ºC and the t1/2 was 60 minutes at 55ºC for alkaline... / Mestre

FundaÃÃo de Amparo à Pesquisa do Estado do Cearà / Diante de um sentimento particular e do reconhecimento nacional do autor surgiu o desejo de encontrar na obra infantil de Monteiro Lobato, e, em suas cartas, pistas que nos levam a crer em uma proposta intencional de metamorfose social atravÃs da leitura de boa qualidade, iniciada desde cedo, no perÃodo de formaÃÃo cognitiva da crianÃa Deste modo, a presente dissertaÃÃo tem o compromisso de tentar promover um olhar diferenciado sobre a literatura infantil lobatiana com a proposta de identificar a intencionalidade do autor em sua atitude literÃria. Portanto visamos promover a valorizaÃÃo das iniciativas sÃcio-literÃrias do escritor sem esquecer suas atitudes pedagÃgicas que visavam à formaÃÃo dos pequenos leitores atravÃs do contato com idÃias trabalhadas em seu texto Assim tem-se como um dos objetivos verificar como o texto de Lobato utiliza recursos literÃrios (simbÃlicos) para dar inÃcio à transformaÃÃo social atravÃs dos pequenos leitores analisando se as histÃrias das aventuras da turma do SÃtio transmitem atravÃs da construÃÃo simbÃlica, um modo diferenciado de lidar com os saberes do mundo real, tornando a crianÃa mais crÃtica e ativa Fazer uma releitura da obra infantil de Monteiro Lobato a partir do contributo dos estudos jà realizados, alÃm de promover um regresso à infÃncia tambÃm possibilitarà a valorizaÃÃo da diversidade interpretativa de sua obra, uma vez que dentre os vÃrios projetos existentes âMetamorfoses Lobatianas: um olhar sobre a proposta sÃcio-pedagÃgica da Literatura Infantil de Monteiro Lobatoâ tem como foco a valorizaÃÃo do projeto social do autor, que dedicou boa parte de sua vida promovendo a conscientizaÃÃo de seus contemporÃneos a respeito da real necessidade de mudanÃa e progresso / Devant un sentiment particulier et la reconnaissance nationale de lâauteur il a surgi le dÃsir de trouver dans lâÅuvre enfantine de Monteiro Lobato et en ses lettres des signes que nous peuvent emmener à une expresse proposition de mÃtamorphose sociale à travers la lecture de bonne qualitÃ, trÃs tÃt dÃbutÃe, dans la pÃriode de formation cognitive de lâenfant Ainsi la prÃsente dissertation sâengage à essayer de promouvoir un regard diffÃrencià vers la littÃrature enfantine de Lobato avec la proposition dâidentifier lâintention de lâauteur en son attitude littÃrature En fait, nous concevons de promouvoir la valorisation des initiatives sÃcio-littÃraires de lâÃcrivainz sans oublier ses attitudes pÃdagogiques qui envisageaient la formation des petits lecteurs à travers le contact avec les idÃes travaillÃes en son texte De cette faÃon, nous avons comme objectif de vÃrifier en quelle mesure le texte de Lobato utilise des ressources littÃraires (symboliques) envisageant la transformation sociale à travers les petits lecteurs. De ce point de vue nous montrerons si les histoires de la classe du SÃtio transmettent, à travers la construction symbolique un mode spÃcifique de toucher les savoirs du monde rÃel en rendant lâenfant plus critique et active Faire une nouvelle lecture de lâoeuvre enfantine de Monteiro Lobato à partir lâapport des Ãtudes dÃjà faits en outre de promouvoir un retour à lâenfance permettra aussi la valorisation de la diversità interprÃtative de son Åuvre car parmi les plusieurs projets MÃtamorphoses Lobatiennes : un regard vers la proposition sÃcio-pÃdagogique de la LittÃrature Enfantine de Monteiro Lobato focalise la valorisation du projet social de lâauteur qui a dÃdià une bonne partie de sa vie à proportionner à ses concitoyens la conscience de la rÃelle nÃcessità de changement et de progrÃs

Orientador: João Martins Pizauro Júnior / Banca: Marcia Regina Cominetti / Banca: Marcos Túlio de Oliveira / Banca: Andrei Leitão / Banca: Luis Henrique Souza Guimarães / Resumo: A metamorfose dos anfíbios é um processo altamente regulado que envolve a participação de hormônios e biomoléculas na morte celular e absorção da cauda, a qual libera nutrientes para as transformações morfofisiológicas necessárias para a ocupação do meio terrestre. Dentre os nutrientes liberados, o fosfato é essencial para a síntese de ATP, membranas biológicas, ácidos nucleicos e metabólitos fosforilados, bem como para a regulação de processos degradativos e da atividade de enzimas. Neste sentido, a identificação e caracterização cinética das fosfatases que participam da absorção da cauda de girinos de Lithobates catesbeianus, durante a passagem da fase larval aquática para a adulta terrestre, poderão contribuir para a compreensão dos eventos envolvidos na morte celular e na liberação de nutrientes. O estudo revelou aumento da atividade das fosfatases ácida e alcalina, de aproximadamente 30 e 17 vezes, respectivamente, no período da metamorfose. A centrifugação diferencial do extrato bruto da cauda e os estudos cinéticos, permitiram a identificação de três fosfatases distintas, sendo uma fosfatase ácida solúvel, uma fosfatase ácida ligada à membrana e uma fosfatase alcalina ligada à membrana por meio da âncora de fosfatidilinositol. A fosfatase ácida ligada à membrana revelou Vm=104,5 U.mg-1; Km=0,29 mM e nH=0,9; a solúvel, Vm= 25,9 U.mg-1; Km=0,33 mM e nH =0,8, enquanto a fosfatase alcalina ligada à membrana revelou Vm=10,5 U.mg-1; Km=0,2 mM e nH=1,0, para a hidrólise do pN... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Amphibian metamorphosis is a tightly regulated transformation that involves the participation of hormones and other biomolecules in cell death and tail absorption, to release nutrients for the morphophysiological changes necessary for the occupation of the terrestrial environment. Among these nutrients, the phosphate is essential for the synthesis of ATP, biological membranes, nucleic acids and phosphorylated metabolites; regulation of degradative processes and of enzymes activity. In this sense, the identification and characterization of the phosphatases that participate in the absorption of the tail of Lithobates catesbeianus during the transition from the aquatic larval phase to the terrestrial adult, may contribute to the understanding of the events involved in cell death and nutrient release.The study showed that there was an increase in the activity of the acid and alkaline phosphatases of approximately 30 and 17 fold, respectively, in the metamorphosis period. The differential centrifugation of the tail crude extract, as well as the kinetic tests, allowed the identification of three distinct phosphatases, a soluble acid phosphatase, a membrane bound acid phosphatase and an alkaline phosphatase bound to the membrane by the anchor of phosphatidylinositol. The kinetic characterization of membrane bound acid phosphatase revealed Vm=104.5 U.mg-1; K0.5=0.29 mM and nH=0.9; the soluble, Vm= 25.9 U.mg-1; K0.5=0.33 mM and nH =0.8, while the membrane bound alkaline phosphatase revealed Vm=10.5 U.mg-1; K0.5=0.2 mM and nH=1.0, for pNPP hydrolysis. The mass spectrometry results showed the presence of three protein phosphatases, two serine/threonine, being one PP2A, one PP1 and one tyrosine, PTP-LMW. Studies using specific substrates for PP2A and PTP-LMW and inhibitor for PP1 confirmed their presence in the tail of the tadpoles of L. catesbeianus. In addition, the separation in different protein fractions, allowed... / Doutor