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Caracterização de isolados de Colletotrichum musae no Estado de PernambucoSANTOS, Paulo Cézar das Nações 17 February 2011 (has links)
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Previous issue date: 2011-02-17 / Conselho Nacional de Pesquisa e Desenvolvimento Científico e Tecnológico - CNPq / From a socioeconomic perspective, the banana, one of the most consumed fruit, has great importance worldwide. The Brazilian production of this fruit presents particular geographic distribution, since it is present in all States of the federation. In the State of Pernambuco, the banana is grown in all the regions, occupying about 80000 permanent jobs in the field, with two distinct poles of banana production: the Zona da Mata and Vale do São Francisco. Among the limiting factors for this crop, there are the post-harvest diseases such as anthracnose, caused by Colletotrichum musae. This disease causes significant losses in production, manifesting itself mainly in the fruit at maturity stage. In order to verify the diversity of this pathogen isolated from C. musae from banana production fields of three municipalities (Vicência, São Vicente Férrer and Machados) of the Pernambuco State were characterized for daily mycelial growth rate (DMGR), colony color, reverse plate, topography, presence of sectors and microsclerotia, conidial morphology, biochemical tests, pathogens and molecular. The 60 isolates, based on morphological characters of shape and size of conidia, were identified as C. musae, followed with morphological measurements from 9.3 to 30.2 x 2.6 to 12.6 μm ( x = 15.0 x 4.9 μm, n = 6000). Most isolates showed conidia straight, oblong, with rounded apices. As for the DMGR, all isolates showed growth averaged more than 1.0 cm.day–1, ranging from 1.21 to 1.63 cm.day–1. It was found three groups of striking color to the colonies: white, cream and salmon, while the presence of sectors ranging from zero to eight per isolate. Most isolates (53) metabolized the ammonium tartrate as the sole source of carbon, while for citric acid, all isolates except the isolate CMM 3219, were not able to metabolize this carbon source. The pathogenic characterization showed significant differences in the epidemiological parameter AUDPC in fruits inoculated with injury, indicating the existence of variation in aggressiveness among isolates. For fruit inoculated and no injuries, the AUDPC was not estimated for 20 isolates because there was no injury. The dendrogram generated by UPGMA (Unweighted Pair Group Method with Arithmetic Mean) cluster analysis of DNA bands obtained with the combination of three primers (GTG5, GACA and 820) by ISSR-PCR allowed the separation of three groups of isolates to 62% by Jaccard’s similarity coefficient. The group I was composed of isolates from Vicência Group II isolates São Vicente Férrer and group III, Machados. The results suggest that isolates of C. musae can be discriminated as to their origin because they had genetic similarity between them. The ISSR markers in this study appear to be useful tools in the study of C. musae. / Do ponto de vista socioeconômico, a banana, uma das frutas mais consumidas, possui grande importância mundial. A produção brasileira dessa frutífera apresenta particular distribuição geográfica, já que está presente em todos os Estados da federação. No Estado de Pernambuco, a banana é cultivada em todas as microrregiões, ocupando cerca de 80 mil postos de trabalho permanente no campo, havendo dois pólos distintos de produção de banana: a Zona da Mata e o Vale do São Francisco. Dentre os fatores limitantes para esta cultura, destacam-se as doenças pós-colheita, como a antracnose, causada pelo fungo Colletotrichum musae. Essa doença causa perdas significativas na produção, manifestando-se, principalmente, na fruta em estádio de maturação. Com a finalidade de verificar a diversidade desse fitopatógeno, isolados de C. musae provenientes de campos de produção de banana de três municípios (Vicência, São Vicente Férrer e Machados) do Estado de Pernambuco foram caracterizados quanto à taxa de crescimento micelial diária (TCMD), coloração da colônia, reverso da placa, topografia, presença de setores e de microescleródios, além da morfologia de conídios, testes bioquímicos, patogênicos e moleculares. Os 60 isolados, com base nos caracteres morfológicos de formato e tamanho de conídios, foram identificados como C. musae, com as seguidas medidas morfológicas 9,3-30,2 x 2,6-12,6 μm ( x = 15,0 x 4,9 μm, n = 6000). A maioria dos isolados avaliados apresentaram conídios retos, oblongo, com ápices arredondados. Quanto à TCMD, todos os isolados apresentaram crescimento médio superior a 1,0 cm.dia–1, variando de 1,21 a 1,63 cm.dia–1. Foram encontrados três grupos marcantes de coloração de colônia: branca, creme e salmão, enquanto que a presença de setores variou de zero a oito por isolado. A maioria dos isolados (53) metabolizou o tartarato de amônio como fonte exclusiva de carbono, enquanto que para o ácido cítrico, todos os isolados, com exceção do isolado CMM 3219, não foram capazes de metabolizar essa fonte de carbono. A caracterização patogênica mostrou diferenças significativas para o parâmetro epidemiológico AACPD em frutas inoculadas com ferimento, indicando a existência de variação da agressividade entre os isolados. Para as frutas sem ferimentos e inoculadas, a AACPD não foi estimada para 20 isolados, pois não houve lesões. O dendrograma gerado pela análise de agrupamento UPGMA (Unweighted Pair Group Method with Arithmetic Mean) das bandas de DNA obtidas com a combinação dos três primers (GTG5, GACA e 820) por ISSR-PCR possibilitou a separação de três grupos de isolados a 62% pelo coeficiente de similaridade de Jaccard. O grupo I foi formado pelos isolados provenientes de Vicência; grupo II, isolados de São Vicente Férrer e grupo III, de Machados. Os resultados sugerem que isolados de C. musae podem ser discriminados quanto à sua origem por apresentarem similaridade genética entre si. Os marcadores ISSR, nesse estudo, parecem ser ferramentas bastante úteis no estudo populacional de C. musae.
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Caracterização morfofisiológica de Corynespora cassiicola (Berk. e Curt.) Wei isolado de três hospedeiros no AmazonasSousa, Francy Mary Galúcio 30 November 2010 (has links)
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Previous issue date: 2010-11-30 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / Corynespora cassiicola has been related causing damages in several crops of economic importance in Amazonas State, principally Solanaceae and Cucurbitaceae families affecting production by significative form. This study aimed to characterize C. cassiicola isolates through colony morphology, sporulation, mycelial growth and spore dimension on culture media PDA, PSA, OEA and CA. Five mm-diameter disks taken from colonies grown on PDA medium for 15 days were transferred to Petri dishes containing each medium under room temperature and continuous light. The study was installed using randomized block design in a factorial 4 x 5 x 3 (culture media x isolates x hosts) with five replications. The effects of culture media varied to isolates of same host and among different hosts. Mycelial growth was observed in CA. The most spore production was observed in PDA and PSA media. A high variation of aspect and colonies coloration was observed among same host isolates and isolates of different hosts in all culture media. Variation trough spore dimension of C. cassiicola isolates was observed in all culture media tested. / O fungo Corynespora cassiicola já foi relatado causando danos em diversas culturas de interesse comercial no Estado do Amazonas, principalmente das famílias Solanaceae e Cucurbitaceae, afetando de forma significativa a produção. Este estudo teve como objetivo caracterizar isolados de C. cassiicola quanto a morfologia das colônias, esporulação, crescimento micelial e dimensão dos conídios nos meios de cultura BDA, BSA, AvA e CA. Discos de 5mm de diâmetro retirados de colônias crescidas em meio BDA por 15 dias, foram transferidos para o centro de placas de Petri contendo os meios de cultura e mantidas à temperatura ambiente sob luz contínua. O estudo seguiu esquema fatorial 4 x 5 x 3 (meios de cultura x isolados x hospedeiros) com cinco repetições. Os efeitos dos meios de cultura variaram para isolados do mesmo hospedeiro e entre hospedeiros diferentes. Maior crescimento micelial foi observado no meio CA. A maior produção de esporos foi observada nos meios BDA e BSA. Foi verificado uma ampla variação de aspecto e coloração das colônias entre os isolados do mesmo hospedeiro e entre isolados de hospedeiros diferentes em todos os meios de cultura. Também houve variação quanto às dimensões dos conídios dos isolados de C. cassiicola em todos os meios de cultura testados.
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Caracterização fisiológica, produção de biocompostos e biomassa em substrato agroflorestal amazônico de Pleurotus e Lentinus.Castillo, Teresa Alarcón, 92-99245-8233 21 February 2009 (has links)
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Previous issue date: 2009-02-21 / FAPEAM - Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado do Amazonas / This work presents the analysis of mycelial growth of Pleurotus ostreatus (Jacq .: Fr.) Kumm.
DPUA 1533, Pleurotus ostreatus (Jacq.: Fr.) Quél. cv. Florida DPUA 1534, Lentinus citrinus
Walleyn & Rammeloo DPUA 1535 and Neolentinus lepideus (Fr.) Redhead & Ginns DPUA
1536, in natural and complex media under different growing conditions to verify production
of biocompounds against fungi and bacteria, to evaluate vertical mycelial growth, to analyze
the production of proteases and biomass in agroindustrial residues selected by solid
fermentation. Antimicrobial activity of mushrooms against Candida albicans DPUA 1336,
Cryptococcus laurentii DPUA 1501, Aspergillus flavus DPUA1836, Escherichia coli DAUPE
224 and Mycobacterium smegmatis ATCC 607 was determined by the Gelose Block Method
and Minimum Inhibitory Concentration. For the production of Pleurotus and Lentinus
proteases by solid state fermentation, the cultivations were realized on 200 g of cupuaçu shell
+ rice husk (CC+CA); cupuaçu shell + bran rice (CC+FA), in flask of transparent glass,
humidity 60% and pH 6,0 and the sterilization of the substrates was accomplished at 121
°C/90 minutes for two consecutive days. Each flask was inoculated with 12 agar disks (10
mm in diameter) from stock culture and allowed to fermented for 15 days at 25 °C, without
light and mycelial growth was determined in centimeters every 24 hours. For determination of
proteolityc activity at 440 nm solution of azocasein 1% (p/v), pH 7,2 was used. L. citrinus
was the specie selected for biomass production. In this stage for the accomplishment of the
fermentation in the solid-state were prepared 5 kg plastic bags containing different
combinations and proportions of cupuaçu shell, rice husk and rice bran. Methods were carried
out to evaluate the formation, development of the primordia, total culture time, number of
production flows and analysis of centesimal composition of basidiomas of L. citrinus in
triplicate. The results demonstrate that the composition of culture media, the time of
cultivation, the light and the temperature influence significantly in the growth of Lentinus and
Pleurotus species, on culture media analyzed. In the experimental conditions, those
mushrooms express antimicrobial activity against most fungi and bacteria tested, however L.
citrinus and N. lepideus didn't express antimicrobial activity against Aspergillus flavus. The
mixture of cupuaçu shell and rice husk (1: 1) stimulated the vertical growth rate of L. citrinus
(13 cm), P. ostreatus (12.6 cm) and N. lepideus (12.3 cm). The best averages of the activity
and effect of the proteolytic enzyme extraction conditions were determined in the crude
extract of P. ostreatus (24.0 U / g) and L. citrinus (22.0 U / g) obtained in the NaCl 2 solution
% at 36 °C and with distilled water at 25 °C. In the biomass production, the best averages of
biological efficiency (61.0%), productivity (0.86%), production rate (32.0%) and protein
(13.44%) were observed in the formulations different agroforestry substrates that depending
on the concentration have demonstrated the viability of the process for the growth and
production of L. citrinus DPUA 1535. / Este trabalho apresenta a análise do crescimento de Jacq.: Fr.) Kumm.
DPUA 1533, Pleurotus ostreatus (Jacq.: Fr.) Quél. cv. Florida DPUA 1534, Lentinus citrinus
Walleyn & Rammeloo DPUA 1535 e Neolentinus lepideus (Fr.) Redhead & Ginns DPUA
1536, em meios natural e complexo sob diferentes condições de cultivo, para verificar a
produção de biocompostos contra fungos e bactérias, avaliar o crescimento micelial vertical,
analisar a produção das proteases e biomassa em resíduos agroindustriais selecionados por
fermentação sólida. A atividade antimicrobiana dos cogumelos frente à Candida albicans
DPUA 1336, Cryptococcus laurentii DPUA 1501, Aspergillus flavus DPUA 1836,
Escherichia coli DAUPE 224 e Mycobacterium smegmatis ATCC 607 foi determinada pelo
Método do Bloco de Gelose e pela Concentração Mínima Inibitória. Para a produção de
proteases de Pleurotus e Lentinus por fermentação no estado sólido, os cultivos foram
realizados em 200 g de casca de cupuaçu + casca de arroz (CC+CA); casca de cupuaçu +
farelo de arroz (CC+FA), em frasco de vidro transparente, umidade 60% e pH 6,0. A
esterilização dos substratos foi realizada a 121 °C/90 minutos/dois dias consecutivos. Em
cada frasco foram inoculados 12 discos de 10 mm de diâmetro e a fermentação foi conduzida
a 25 oC, sem luminosidade por 15 dias, determinando-se a velocidade de crescimento micelial
em centímetros, a cada 24 horas. Para determinação da atividade proteolítica a 440 nm foi
utilizado solução de azocaseina 1% (p/v), pH 7,2. L. citrinus foi a espécie selecionada para
produção de biomassa. Nesta etapa para a realização da fermentação no estado sólido foram
preparados sacos plásticos de 5 kg contendo diferentes combinações e proporções de casca de
cupuaçu, casca de arroz e farelo de arroz. Efetuaram-se processos para avaliar a formação,
desenvolvimento dos primórdios, tempo total de cultivo, número de fluxos de produção e
análises de composição centesimal de basidiomas de L. citrinus em triplicata. Os resultados
demonstraram que a composição dos meios de cultura, o tempo de cultivo, a luz e a
temperatura influenciam significativamente no crescimento das espécies de Lentinus e
Pleurotus, nos meios de cultura analisados. Nas condições experimentais, esses cogumelos
expressaram atividade antimicrobiana contra a maioria dos fungos e bactérias testados,
contudo L. citrinus e N. lepideus não expressaram atividade antimicrobiana frente Aspergillus
flavus. A mistura de casca de cupuaçu com casca de arroz (1:1) estimulou a velocidade de
crescimento vertical de L. citrinus (13 cm), P. ostreatus (12,6 cm) e N. lepideus (12,3 cm). As
melhores médias da atividade e efeito das condições de extração de enzimas proteolíticas
foram determinadas no extrato bruto de P. ostreatus (24,0 U/g) e L. citrinus (22,0 U/g),
obtidos na solução de NaCl 2%, a 36 °C e com água destilada, a 25 °C. Na produção de
biomassa, as melhores médias de eficiência biológica (61,0 %), produtividade (0,86 %), taxa
de produção (32,0 %) e proteína (13,44 %) foram observadas nas formulações realizadas com
os diferentes substratos agroflorestais que dependendo da concentração têm demonstrando a
viabilidade do processo para o crescimento e produção de L. citrinus DPUA 1535.
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Inibição do crescimento micelial de Macrophomina phaseolina (Tassi.). Goid por óleos vegetais. / Inhibition of mycelial growth of Macrophomina phaseolina (Tassi.).UGULINO, Andressa Lacerda Nóbrega 03 May 2018 (has links)
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ANDRESSA LACERDA NÓBREGA UGULINO - DISSERTAÇÃO PPGSA ACADÊMICO 2017..pdf: 676544 bytes, checksum: 0dd2e41c1011a60929ca0702449f6287 (MD5) / Made available in DSpace on 2018-05-03T18:31:57Z (GMT). No. of bitstreams: 1
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Previous issue date: 2017 / O fungo Macrophomina phaseolina (Tassi.). Goid é o agente etiológico de uma das principais doenças na cultura do feijão-caupi, vulgarmente conhecida como podridão cinzenta do caule. Em decorrência da falta de produtos fitossanitários registrados para o controle desta doença um aumento na busca por métodos de controle alternativo é cada vez mais comum. O objetivo do presente trabalho foi avaliar o efeito de óleos essenciais sobre o crescimento micelial do fungo M. phaseolina. Os óleos testados foram de hortelã (Mentha sp.), eucalipto (Eucalyptus spp.), copaíba ( Copaifera sp.) e alecrim-da-chapada (Lippia gracilis), nas concentrações 0,4; 0,6; 0,8 e 1,0%. Os óleos foram incorporados ao meio de cultura do tipo BDA e posteriormente vertidos em placas de Petri de 90x15mm, após a solidificação do meio, discos de 8mm contendo o micélio do patógeno foram repicados para as placas com os respectivos tratamentos. O experimento foi conduzido no delineamento experimental inteiramente casualizado (DIC) em arranjo fatorial 4 x 4 + 1 +1, sendo dezesseis tratamentos mais uma testemunha negativa e uma testemunha positiva que constou da aplicação suplementar no meio (BDA) do fungicida Sportak 450 EC (Procloraz), e cinco repetições, totalizando 90 parcelas experimentais. Posteriormente todas as placas foram transferidas para incubadora do tipo B.O.D. (biochemical oxygen demand) a 27 ± 2 ºC. Foram realizadas medições diárias do diâmetro da colônia em dois sentidos perpendiculares até que tomasse toda a superfície do meio de cultura de uma das placas. Os dados obtidos foram interpretados por meio de análise de variância não paramétrica e as médias foram comparadas pelo teste de Kruskal-wallis, a 5% de probabilidade de erro e Scott Knott a 5% de probabilidade nos casos em que existiram
diferenças significativas e normalidade dos dados. Os óleos essenciais de hortelã e alecrimda-chapada apresentaram melhores resultados quanto a inibição do crescimento micelial, enquanto que os óleos de eucalipto e copaíba apesar de potencialmente promissores, apresentaram inibição intermediária do crescimento micelial do fungo. / Macrophomina phaseolina (Tassi.). Goid is the etiological agent of one of the major diseases in cowpea bean crop, commonly known as gray rot stem. Due to the lack of registered phytosanitary products to control this disease, the search for alternative control methods is increasingly common. The objective of this study was to evaluate the effect of essential oils on the mycelial growth of M. phaseolina. The oils tested were Mentha sp.,Eucalyptus spp., Copaifera sp., and Lippia gracilis at concentrations of 0.4; 0.6; 0.8 and 1.0%. The work was conducted in Phytopathology Laboratory of the Federal University of Campina Grande. Daily measurements of the colony diameter were performed in two perpendicular directions until it filled the entire surface of the culture medium of one of the plates. The experiment was conducted in a completely randomized experimental design in a factorial arrangement 4 x 4 + 1+1, with sixteen treatments plus one negative control and one positive control, which consisted of the supplemental application in the medium (BDA) of the fungicide Sportak 450 EC (Procloraz), and five replications, totaling 90 experimental plots. The data were interpreted through non-parametric analysis of variance and the means were compared by the Kruskal-wallis test, with a 5% probability of error and Scott Knott at 5% probability in cases where there were significant differences and data normality. The Mentha sp. essential oil and Lippia gracilis showed better results in inhibiting mycelial growth, while the Eucalyptus essential oil and Copaifera, although potentially promising, showed intermediate inhibition of fungal mycelial growth.
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