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AVALIAÇÃO DA GENOTOXICIDADE E MUTAGENICIDADE DO BIODENTINE / EVALUATION OF GENOTOXICITY AND MUTAGENICITY OF BIODENTINE

Logar, Gustavo de Almeida 23 May 2014 (has links)
Made available in DSpace on 2016-01-26T18:55:40Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Gustavo Logar.pdf: 371330 bytes, checksum: 461b03ba76909955dcf6db3c8b004b60 (MD5) Previous issue date: 2014-05-23 / The Biodentine is a new material suitable for various clinical situations in dentistry. Despite being a promising material, there are few studies evaluating the characteristics of this material, especially its genotoxicity and mutagenicity. Objective: This study aims to evaluate the genotoxic and mutagenic potential of Biodentine "in vivo". Methods: We used 24 Wistar albino rats, males were divided into 3 groups: A - 8 rats where specimens of Biodentine measuring 2 mm in diameter x 10mm length on the dorsum were placed, B - 8 rats, which received cyclophosphamide in single subcutaneous dose (50mg/kg) on the first day of the experiment (positive control group), C - 8 rats where specimens measuring 2 mm in diameter x 10mm long without Biodentine on the dorsum were placed (negative control group). After 24 hours, all animals were euthanized and material from bone marrow of femurs was collected to perform the Comet assay and micronucleus test. Results: Biodentine showed levels of DNA damage (tail intensity %) in bone marrow cells of 23.57 ± 7.70, cyclophosphamide of 27,43 ± 7,40 and negative control of 24.75 ± 5 55 (p < 0.05). The average number of micronuclei in the exposed Biodentine group was 6.25 (standard deviation - SD = 3.53), in the group exposed to cyclophosphamide was 9.75 (SD = 2.49) and negative control group was 0.75 (SD = 1.03) (p < 0.0001). Conclusion: The Biodentine showed an increase in the frequency of micronuclei, but no genotoxicity effect by the Comet assay. / O Biodentine é um novo material indicado para diversas situações clínicas na odontologia. Apesar de ser um material promissor, ainda há poucos trabalhos avaliando as características deste material, em especial sua genotoxicidade e mutagenicidade. Objetivo: Este estudo visa avaliar o potencial genotóxico e mutagênico do Biodentine in vivo . Material e métodos: Foram utilizados 24 ratos Wistar albinos, machos, distribuídos em 3 grupos: A 8 ratos onde foram colocados corpos de prova medindo 2mm de diâmetro x 10mm de comprimento com Biodentine no subcutâneo do dorso; B 8 ratos, que receberam ciclofosfamida em dose única subcutânea (50mg/kg) no primeiro dia do experimento (grupo controle positivo); C 8 ratos onde foram colocados corpos de prova medindo 2mm de diâmetro x 10mm de comprimento sem Biodentine no subcutâneo do dorso (grupo controle negativo). Após 24 horas, todos os animais foram eutanasiados e material da medula óssea dos fêmures foi coletado para realização do Teste do Cometa e do Teste do micronúcleo. Resultados: O Biodentine apresentou níveis de danos no DNA (tail intensity %) em células da medula óssea de 23,57 ± 7,70, a ciclofosfamida de 27,43 ± 7,40 e o controle negativo de 24,75 ± 5,55 (p<0,05). A média de micronúcleos no grupo exposto ao Biodentine foi de 6,25 (desvio padrão DP= 3,53), no grupo exposto a ciclofosfamida foi de 9,75 (DP= 2,49) e no grupo de controle negativo foi 0,75 (DP= 1,03) (p<0,0001). Conclusão: O Biodentine apresentou aumento na frequência de micronúcleos, mas não apresentou efeito genotóxico observado pelo teste do Cometa.
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Avaliação do dano genético no uso repetido de anestésicos locais: um estudo experimental em ratos / Avaliação do dano genético no uso repetido de anestésicos locais: um estudo experimental em ratos / Evaluation of genetic damage in repeated use of local anesthetics: an experimental study in rats / Evaluation of genetic damage in repeated use of local anesthetics: an experimental study in rats

Oliveira, Mariliza Casanova de 26 March 2013 (has links)
Made available in DSpace on 2016-07-18T17:53:11Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Mariliza.pdf: 910731 bytes, checksum: 21aa8bdaf81f9c020e8cdee92ae30dcb (MD5) Previous issue date: 2013-03-26 / Studies with some local anesthetics showed that these can cause genetic damage. But local anesthetics has not been tested against the genotoxicity of repeated use. Objective: The aim of this study was to evaluate the genotoxic potential of local anesthetics with single dose and repeated, through the micronucleus test. Methods: We used 80 Wistar rats, male, 12 weeks old, divided into 6 groups: A - 16 rats received lidocaine hydrochloride intraperitoneally (4.4 mg / kg), B - 16 rats received 3% mepivacaine intraperitoneally (4.4 mg / kg), C - 16 rats received 4% articaine intraperitoneally (7.0 mg / kg) D - 16 rats received prilocaine 3% intraperitoneally (6.0 mg / kg) E - 08 rats received cyclophosphamide in single subcutaneous dose (50mg/kg) (positive control group) F - 08 rats received 0.5 ml of saline intraperitoneally (negative control group). Eight rats from Group A, B, C and D received the dose of anesthetic only once at the first day of the experiment and the remainder were dosed daily for five days. The Kruskal-Wallis test followed by a multiple comparisons Student-Newman-Keuls test was used for statistical analysis. Results: The median of micronuclei in the lidocaine group exposed for 1 day was 1.00 and by 5 days was 0.50, mepivacaine for 1 day and for 5 days was 1.00, articaine for 1 day was 1.00 and for 5 days 0.00, prilocaine for 1 day and 5 days was 0.00, cyclophosphamide was 10.00 and the negative control group exposed for 1 day was 1.00 and exposed for 5 days was 0.00 (p<0.0001). There was a statistical difference between the number of micronuclei in relation to the positive control group and all local anesthetics studied (related to the anesthetic type and duration of exposure) (p=0.0001) but not for the negative control group (p>0.05). Conclusion: There was no increase in micronuclei frequency in relation to exposure to 1 or 5 days in all local anesthetics evaluated. / Estudos com alguns anestésicos locais mostraram que estes podem causar dano genético. Porém ainda não foi testada a genotoxicidade frente ao uso repetido destes. Objetivo: O objetivo deste estudo foi avaliar o potencial genotóxico de anestésicos locais em dose única e repetida, por meio do teste de micronúcleo em ratos Wistar. Material e métodos: Foram utilizados 80 ratos Wistar, machos, com 12 semanas, divididos em 6 grupos: A 16 ratos receberam cloridrato de lidocaína via intraperitoneal (4,4 mg/kg); B 16 ratos receberam mepivacaína a 3% via intraperitoneal (4,4 mg/kg); C 16 ratos receberam articaína a 4% via intraperitoneal (7,0 mg/kg); D 16 ratos receberam prilocaína a 3% via intraperitoneal (6,0 mg/kg); E 08 ratos receberam ciclofosfamida em dose única subcutânea (50mg/kg) (grupo controle positivo); F 08 ratos receberam 0,5ml de soro fisiológico via intraperitoneal (grupo controle negativo). Oito ratos do grupo A, B, C e D receberam a dose do anestésico apenas uma vez no primeiro dia do experimento e os demais receberam doses diárias durante cinco dias. O teste de Kruskal-Wallis, seguido das comparações múltiplas de Student-Newman-Keuls, foi utilizado para análise estatística. Resultados: A mediana de micronúcleos no grupo exposto a Lidocaína por 1 dia foi de 1.00 e por 5 dias foi de 0.50, a Mepivacaína por 1 dia e por 5 dias foi de 1.00, a Articaína por 1 dia 1.00 e por 5 dias 0.00, a Prilocaína por 1 dia e por 5 dias 0.00, a ciclofosfamida foi 10.00 e no grupo de controle negativo exposto por 1 dia foi 1,00 e no exposto por 5 dias foi de 0,00 (p<0,0001). Houve diferença estatística entre o número de micronúcleos em relação ao grupo controle positivo e todos os anestésicos locais estudados (quanto ao tipo e tempo de exposição) (p=0,0001), porém não em relação ao grupo controle negativo (p>0,05). Conclusão: Não foi observado aumento da frequência de micronúcleos com relação à exposição de 1 ou 5 dias em todos os anestésicos locais avaliados.
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AVALIAÇÃO DA GENOTOXICIDADE E MUTAGENICIDADE DO BIODENTINE / EVALUATION OF GENOTOXICITY AND MUTAGENICITY OF BIODENTINE

Logar, Gustavo de Almeida 23 May 2014 (has links)
Made available in DSpace on 2016-07-18T17:53:13Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Gustavo Logar.pdf: 371330 bytes, checksum: 461b03ba76909955dcf6db3c8b004b60 (MD5) Previous issue date: 2014-05-23 / The Biodentine is a new material suitable for various clinical situations in dentistry. Despite being a promising material, there are few studies evaluating the characteristics of this material, especially its genotoxicity and mutagenicity. Objective: This study aims to evaluate the genotoxic and mutagenic potential of Biodentine "in vivo". Methods: We used 24 Wistar albino rats, males were divided into 3 groups: A - 8 rats where specimens of Biodentine measuring 2 mm in diameter x 10mm length on the dorsum were placed, B - 8 rats, which received cyclophosphamide in single subcutaneous dose (50mg/kg) on the first day of the experiment (positive control group), C - 8 rats where specimens measuring 2 mm in diameter x 10mm long without Biodentine on the dorsum were placed (negative control group). After 24 hours, all animals were euthanized and material from bone marrow of femurs was collected to perform the Comet assay and micronucleus test. Results: Biodentine showed levels of DNA damage (tail intensity %) in bone marrow cells of 23.57 ± 7.70, cyclophosphamide of 27,43 ± 7,40 and negative control of 24.75 ± 5 55 (p < 0.05). The average number of micronuclei in the exposed Biodentine group was 6.25 (standard deviation - SD = 3.53), in the group exposed to cyclophosphamide was 9.75 (SD = 2.49) and negative control group was 0.75 (SD = 1.03) (p < 0.0001). Conclusion: The Biodentine showed an increase in the frequency of micronuclei, but no genotoxicity effect by the Comet assay. / O Biodentine é um novo material indicado para diversas situações clínicas na odontologia. Apesar de ser um material promissor, ainda há poucos trabalhos avaliando as características deste material, em especial sua genotoxicidade e mutagenicidade. Objetivo: Este estudo visa avaliar o potencial genotóxico e mutagênico do Biodentine in vivo . Material e métodos: Foram utilizados 24 ratos Wistar albinos, machos, distribuídos em 3 grupos: A 8 ratos onde foram colocados corpos de prova medindo 2mm de diâmetro x 10mm de comprimento com Biodentine no subcutâneo do dorso; B 8 ratos, que receberam ciclofosfamida em dose única subcutânea (50mg/kg) no primeiro dia do experimento (grupo controle positivo); C 8 ratos onde foram colocados corpos de prova medindo 2mm de diâmetro x 10mm de comprimento sem Biodentine no subcutâneo do dorso (grupo controle negativo). Após 24 horas, todos os animais foram eutanasiados e material da medula óssea dos fêmures foi coletado para realização do Teste do Cometa e do Teste do micronúcleo. Resultados: O Biodentine apresentou níveis de danos no DNA (tail intensity %) em células da medula óssea de 23,57 ± 7,70, a ciclofosfamida de 27,43 ± 7,40 e o controle negativo de 24,75 ± 5,55 (p<0,05). A média de micronúcleos no grupo exposto ao Biodentine foi de 6,25 (desvio padrão DP= 3,53), no grupo exposto a ciclofosfamida foi de 9,75 (DP= 2,49) e no grupo de controle negativo foi 0,75 (DP= 1,03) (p<0,0001). Conclusão: O Biodentine apresentou aumento na frequência de micronúcleos, mas não apresentou efeito genotóxico observado pelo teste do Cometa.
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Potencial de Tradescantia pallida cv. Purpurea para biomonitoramento da poluição aérea de Santo André - São Paulo, por meio do bioensaio Trad - MCN e do acúmulo foliar de elementos tóxicos / Potential of Tradescantia pallida cv. Purpurea for biomonitoring air pollution in Santo André-SP, by means of Trad-MCN assay and leaf acumulation of toxic elements

Savoia, Eriane Justo Luiz 19 April 2007 (has links)
O presente estudo foi desenvolvido para verificar se o bioensaio Trad-MCN, desenvolvido com inflorescências de Tradescantia pallida cv. Purpurea pode discriminar riscos clastogênicos em diferentes locais e épocas na cidade de Santo André-SP, contaminada por diferentes tipos de poluentes, determinar se as variações da freqüência de micronúcleos podem ser explicadas por fatores ambientais característicos da região e verificar se o potencial acumulador de elementos químicos de T. pallida pode ser usado para mapeamento de fontes emissoras de poluentes contendo metais e outros compostos tóxicos. Vasos com a planta foram expostos em locais com alta contaminação por ozônio (Capuava e Escola), em locais com maior emissão veicular (Centro e Parque Celso Daniel) e em uma área supostamente pouco contaminada (Parque do Pedroso). Durante o período de setembro de 2003 a setembro de 2004, vinte inflorescências jovens foram colhidas quinzenalmente e a freqüência de micronúcleos (MCN) foi estimada. Durante o período de maio a junho de 2004, folhas em diferentes posições nas inflorescências da planta foram colhidas para determinação da concentração de elementos químicos, entre os quais metais pesados, pelo método da ativação de nêutrons. As condições ambientais observadas foram suficientemente estressantes para promover o aumento da freqüência de micronúcleos. O bioensaio Trad-MCN identificou forte risco clastogênico em áreas com maior emissão veicular. Entretanto, a freqüência de micronúcleos em Capuava e no Centro não foram preditas somente por poluentes atmosféricos da região. Condições climáticas extremas, como temperaturas mínima e máxima, baixa umidade relativa do ar e baixa precipitação contribuíram para a intensificação da formação de MCN. Para um sistema eficiente de biomonitoramento é recomendável minimizar os efeitos dos fatores climáticos. A análise por ativação de nêutrons identificou um evidente acúmulo foliar de elementos importantes para biomonitoramento da poluição aérea, tais como: Ba, Ce, Co, Cr, Cs, La, Rb, Sb, Sc e Zn. Verificou-se que a concentração dos metais nas folhas inseridas nas inflorescências não teve relação com a formação de micronúcleos, porém, eles foram marcadores de locais específicos, auxiliando no mapeamento das fontes poluidoras de cada região estudada. A concentração de Ba foi mais elevada nas folhas provenientes das áreas centrais, podendo ser considerado marcador de emissão veicular e La e Zn destacaram-se na área industrial da cidade, sendo considerados marcadores da emissão do pólo petroquímico. Considerando as condições em que foi desenvolvido o presente estudo, a análise das concentrações foliares de elementos tóxicos, foi mais adequada para mapear fontes de emissão de poluentes na atmosfera de Santo André. / The present study aimed at verifying if the Trad-MCN assay, developed with inflorescences of Tradescantia pallida cv. Purpurea might discriminate clastogenic risks among sites and periods at the Santo André city, contaminated by different air pollutants, determining if the variations in the frequency of micronuclei can be explained by environmental factors that characterize the stress situation in each site and verify if the accumulator potential of chemical elements of T. pallida may be used to indicate pollutant sources containing metals or other toxic compounds. Potted plants were exposed in sites characterized by high air contamination by ozone (Capuava and School) and in sites reached by high vehicular emissions (Downtown and C. Daniel Park). From September/2003 to September/2004, twenty young inflorescences were be-weekly collected from each site and the frequencies of micronuclei (MCN) were estimated. From May/2004 to June/2004, leaves of T. pallida inserted in different positions on the inflorecences were collected to determine the concentrations of chemical elements, by instrumental neutron activation analysis, among them heavy metals. The environmental conditions were stressing enough to promote an increase of chromosomal breakages in pollen mother cells of inflorescences of T. Pallida. The Trad-MCN assay identified strong clastogenic risks at the sites reached by vehicular emissions. However, the frequency of micronuclei at Capuava and Downtown could not be only predicted by pollutants that characterized the air contamination in both sites. More extreme climatic conditions, mainly low and high temperatures, low relative humidity and low rainfall, intensified the formation of MCN. Therefore, the biomonitoring system should be improved in order to minimize this negative influence of climatic factors. The neutron activation analysis identified an evident leaf accumulation of important elements for biomonitoring air pollution, such as: Ba, Ce, Co, Cr, Cs, La, Rb, Sb, Sc and Zn. There was no relation between the concentrations of metals in the leaves inserted in the inflorescences and the frequency of micronuclei, however, the metal accumulation could discriminate specific sites, contributing to the mapping of polluted sources in each region studied. Leaf concentrations of Ba were higher in central areas, so that they can be considered markers of vehicular emissions. La and Zn were evidently accumulated in leaves from the industrial areas of the city, being considered indicators of emissions from the petrochemical pole. Taking in account the conditions in which the present study was developed, the analysis of leaf concentrations leaves of toxic elements was more adequate to map emission sources of air pollutants in Santo André.
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Utilização do Teste de Micronúcleo na avaliação da toxicidade dos azo corantes Disperse Red 1, Disperse Orange 1 e Disperse Red 13 / Use of Micronuclei Test in the evaluation of toxicity of azo dyes Disperse Red 1, Disperse Orange 1 and Disperse Red 13

Chequer, Farah Maria Drumond 11 July 2008 (has links)
Atualmente, a utilização de azo corantes pelas indústrias de tingimento constitui um problema ambiental e de saúde, considerando o lançamento de quantidades elevadas para o meio ambiente e a falta de dados toxicológicos dos corantes disponíveis para as indústrias. Vários estudos têm demonstrado o potencial genotóxico de diversos corantes azóicos, porém para os corantes Disperse Red 1, Disperse Orange 1 e o Disperse Red 13, não foram encontrados dados na literatura relativos à sua capacidade de dano ao material genético. Considerando que esses corantes são empregados em processos de tingimento no Brasil, esse trabalho teve como objetivo a avaliação de sua atividade mutagênica, utilizando o teste de micronúcleo (MN) em linfócitos humanos e em células HepG2. Os resultados obtidos no teste com linfócitos, demonstram que na menor concentração testada (0,2 µg/mL), o número de micronúcleos presentes foi semelhante ao controle negativo, mas esse número aumenta à medida que eleva-se a concentração. No entanto, a partir da concentração de 1,0 µg/mL, este valor começa a decair. Isso provavelmente se deve à citotoxidade dos corantes, levando à morte celular ou redução da divisão celular e, conseqüentemente, não há a formação de micronúcleo. Embora o perfil de mutagenicidade dos três corantes seja semelhante, o corante Disperse Red 13 parece ter maior potencial de dano sobre os linfócitos em relação aos demais, seguido pelo Disperse Red 1 e Disperse Orange 1, respectivamente. Os resultados obtidos para o teste de MN em células HepG2 foram semelhantes aos obtidos no teste feito em linfócitos. O aumento do número de micronúcleos em relação ao aumento da concentração dos corantes, ocorreu até o limite de 2,0 µg/mL em células HepG2, excetuando-se o corante Disperse Red 13, para o qual o limite foi de 1,0 µg/mL. E a partir desses pontos, considerados como limites, ocorreu uma redução no número de MN. Para este sistema celular, os três corantes parecem ter potencial mutagênico bastante semelhante. Portanto, a análise dos resultados mostrou que os corantes Disperse Red 13, Disperse Red 1 e Disperse Orange 1 são mutagênicos para sistemas celulares diferentes. Foi também avaliado Índice de Proliferação do Bloqueio de Citocinese (IPBC), que permite a avaliação de toxicidade celular ou atraso no ciclo celular por meio da determinação da proliferação celular nas culturas. Porém, neste estudo não foram observadas diferenças estatísticas entre o controle negativo e as concentrações testadas. Nossos resultados confirmam que os azo corantes constituem uma importante classe de contaminantes ambientais e devem ser avaliados e utilizados de forma cautelosa. / Currently, the use of azo dyes for the textile industries can causes direct and/or indirect effects on human health and on the environment, considering the discharge of industrial effluents that contain toxic dyes and the lack of reports in the literature about the toxic effects of these compounds. Several studies have been demonstrated the genotoxic effect of diverse azo dyes, however for the dyes Disperse Red 1, Disperse Orange 1 and Disperse Red 13 no information about their capacity to cause DNA damage was found in the literature. Considering that these dyes are used for dying processes in Brazil, the main of this work was the evaluation of the mutagenic activity of Disperse Red 1, Disperse Orange 1 and Disperse Red 13, using the micronucleus assay (MN) in human lymphocytes and HepG2 cells. For the lymphocytes assay, we observed that the number of micronucleus induced by the lowest concentration of each dye (0,2 µg/mL) was similar to the negative control. For the other concentrations we observed a dose response micronucleus formation, until 1,0 µg/mL. Above this concentration, the number of micronucleus has decreased, probably because of the cytotoxic effects of the dyes, which leads to cellular death or reduction of cellular division and, consequently, does not have the micronucleus formation. Although the mutagenicity profile of the three dyes is similar, Disperse Red 13 seems to be the strongest for the lymphocytes, followed by Disperse Red 1 and Disperse Orange 1, respectively. For the HepG2 cells the results were similar to the lymphocytes. For the three dyes we noted a dose dependent increase in the frequency of micronuclei. However, for the HepG2 the threshold for this increase was 2,0 µg/mL, except for Disperse Red 13, which the limit was at 1 µg/ml, after this point a reduction in the MN number occurred. For this cellular system, the three dyes seem to have similar mutagenic potential. Therefore, our results suggest that the dyes Disperse Red 13, Disperse Red 1 and Disperse Orange 1 are potentially mutagenic for different cellular systems. Besides, cytokinesis-block proliferation index (CBPI) was calculated, in order to evaluate cellular toxicity or delay in the cellular cycle through of the determination of the cellular proliferation in the cultures. No statistical difference was detected between the tested concentrations and the negative control. Our results confirmed that azo dyes constitute an important class of environmental contamination and they should be evaluated and used carefully.
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Avaliação da citotoxicidade e da genotoxicidade da mistura da clorexidina com hipoclorito de sódio sobre diferentes linhagens celulares / Evaluation of the Interaction between Sodium Hypochlorite and Chlorhexidine Gluconate and its Effect on Cytotoxicity and Genotoxicity of cell cultures

Azambuja Junior, Nilton 14 September 2012 (has links)
O uso de irrigação com solução de hipoclorito de sódio a 1% (NaOCl) seguida de irrigação final com solução de clorexidina a 2%(CHX) pode promover uma melhor antissepsia do sistema de canais radiculares do que as abordagens tradicionais. Já foi relatado que estas substâncias quando entram em contato dentro do sistema de canais radiculares produzem subprodutos a partir de sua mistura, que apresentam uma fase líquida e uma fase sólida precipitada que permanece nas paredes do canal radicular. Sua ação citotóxica em cultura de células ainda não foi estudada. O objetivo deste estudo foi avaliar o efeito desta mistura e seus subprodutos in vitro sobre a viabilidade celular. Para avaliar se o grau de diferenciação pode afetar a sobrevivência celular foram escolhidas para o experimento fibroblastos de gengiva humana (FMM1) que são células mais diferenciadas e células-tronco de polpa dentária humana (PDH3) menos diferenciadas. Métodos: partes iguais de soluções de hipoclorito 1% (NaOCl) e digluconato de clorexidina 2% (CHX) foram misturadas e os subprodutos obtidos. Os grupos experimentais testados foram: G1- CHX, G2- NaOCl + CHX(fase líquida), G3- NaOCl + CHX(fase sólida). Quatro(4) diferentes concentrações (100%, 1%, 0,5% e 0,25%) das substâncias de G1 e G2 e do meio de cultivo condicionado pelo G3, foram aplicadas às culturas de células. A viabilidade celular foi mensurada pelo teste de redução do MTT (n=24/concentração/substância/células) e a genotoxicidade através de contagem de micronúcleos apenas para as concentrações das substâncias de 0,5% e 0,25% (número de micronúcleos/1000 células em cada contagem, 2 contagens), ambos em 24 horas após o contato de 15 minutos com as substâncias testadas. Os dados foram analisados por ANOVA complementado por teste de Tukey(p<0,05) para o MTT e qui-quadrado para genotoxicidade. Como resultados da viabilidade celular a dose letal de 50%(DL50) ocorreu apenas nas concentrações menores que 5% no G1, e ao redor de 1% para G2 e G3. Como resultados do teste de genotoxicidade os mesmos números de micronúcleos foram encontrados para todos os grupos em duas contagens de 1000 células. As células PDH3 apresentaram maior viabilidade que a FMM1 com maior número de células em concentrações maiores das substâncias testadas, demonstrando maior resistência de células menos diferenciadas. Como não houve diferença estatística no número de micronúcleos entre os grupos do teste de genotoxicidade inferimos que não houve aumento do número de micronúcleos entre os grupos de teste e o controle. Portanto, a solução de CHX a 2% quando aplicada sobre as células em cultura in vitro não foi biocompatível em concentrações de diluição acima de 0,5%; não foi genotóxica, pois não houve aumento na formação de micronúcleos nem com o grupo da clorexidina nem com a fase líquida da mistura ou com o precipitado. / New antimicrobial therapies have been introduced in Endodontics for periapical lesions and treatment-resistant infections. Alternating irrigating solutions such as 1% sodium hypochlorite (NaOCl) solution and 2% chlorhexidine (CHX) solution has shown promising results. However, inside the root canal system the NaOCl and CHX interact producing byproducts (Bps) represented by a liquid (Liq) and a solid precipitated (Sol) that remain on the canal walls. Objectives: To study the cytotoxicity of such Bps and CHX using cultured fibroblasts (FMM1) and stem cells(PDH3). Two cell lines were chosen to test if different differentiated cell types would present different survival results. Methods: Equal parts of 1% NaOCL and 2% CHX solutions were mixed and the Bps were obtained. Three drug solutions were tested: cell culture medium dilution of CHX, cell culture medium dilution of Liq and cell culture medium conditioned by the Sol byproduct. They were prepared in fresh medium in 4 different concentrations (100%, 1%, 0,5%, 0,25%) and applied to the cells for 15 minutes. In the control wells the cells grew on fresh medium. Cytotoxicity was measured by using the MTT reduction assay in 24 replicates per concentration per solution. Twenty-four hours later cell viability was analyzed. Micronucleus counting was used to check genotoxicity (number of micronucleus/ 1000 cell, 2 counting). Data was evaluated through ANOVA test with post hoc Tukey(p<0,05) for MTT assay and qui-square for genotoxicity. Lethal dose concentration 50%(LD50) was obtained in concentrations less than 0,5% with CHX and around 1% for Liq and Sol. there were obtained same number of micronucleous for all the substances tested. PDH3 cells presented higher survival rate to higher concentrations, so they were more resistant than FMM1. There was no statistical difference between control and tested groups for genotoxicity. 2% CHX solution when applied to cell cultures was not biocompatible in concentrations above 0,5%; there is no increase in micronucleous number with tested substances.
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"Efeitos clastogênicos em Tradescantia (Trad-MCN) induzidos por campos magnéticos de freqüência extremamente baixa (ELF)" / Extremely low frequency magnetic fileds (ELF) induce clastogenic effects in Tradescantia (Trad-MCN)

Sollitto, Ciliane Matilde 31 August 2005 (has links)
Os efeitos clastogênicos de campos magnéticos de freqüência extremamente baixa (ELF) foram investigados usando o bioensaio Tradescantia pallida (Trad-MCN). Inflorescências expostas durante 8 horas a doses de ELF-416mG, 833mG, e 4160mG, prescritas para exposição do público e ocupacional, apresentaram freqüência de micronúcleos aumentada no grupo que recebeu a maior dose (10.32±7.31), comparado com os demais (p=0.00, Kruskal-Wallis). Foi demonstrado que a exposição à ELF, induz danos ao DNA de Tradecantia. Estes resultados encorajam o uso deste bioensaio para avaliar a utilidade do monitor em estudos de campo, auxiliando na caracterização da função do ELF como causa de neoplasmas / The clastogenic effects of the extremely low frequency magnetic fields (ELF) were investigated using Tradescantia pallida micronucleus assay (Trad-MCN). Inflorescences exposed during 8 hours to doses of ELF-416mG, 833mG, e 4160mG, prescribed for public and occupational exposures, showed increased frequency of micronuclei in the group receiving the highest dose (10.32±7.31), compared with others (p=0.00, Kruskal-Wallis). We demonstrated that an ELF exposure induces DNA damage in Tradescantia. This results encourages the use of this assay to evaluate the usefulness of this monitor in field studies, helping to characterize the role of ELF in causing neoplasm
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Avaliação da atividade genotóxica de lodo de esgosto tratado do Estado de São Paulo com o teste de micronúcleo em células germinativas de Tradescantia (Trad-MN) / Assessment of the genotoxic activity of treated sludge from São Paulo sewage treatment plants with the micronuclei assay in germ cells of Tradescantia (Trad-MN)

Mielli, Ana Cristina 16 October 2008 (has links)
O lodo de esgoto gerado em estações de tratamento de esgoto pode conter substancias tóxicas ainda não regulamentadas nas legislações nacionais e internacionais. Dentre elas as genotóxicas tem recebido especial atenção. Este trabalho teve como objetivos avaliar a genotoxicidade de amostras de lodo de esgoto tratado de diferentes Estações de Tratamento de Esgoto (ETE) do Estado de São Paulo com o teste de micronúcleo em Tradescantia e ampliar os conhecimentos sobre o potencial de utilização da Tradescantia pallida em substituição ao clone 4430. Todas as ETEs estudadas apresentaram pelo menos uma amostra positiva para o teste de micronúcleo em Tradescantia sendo necessários mais estudos para elucidar quais os compostos são responsáveis pelo efeito observado. Os resultados sugerem que a Tradescantia pallida pode substituir o clone 4430 no teste de micronúcleo, porém esse ensaio tem aplicabilidade limitada em programas de monitoramento. / The sludge produced in sewage treatment plants can contain toxic substances which are not yet regulated by national and international legislation. Among these, the genotoxic substances are of great concern. The present paper aimed at evaluating the genotoxicity of treated sludge samples collected in different Sewage Treatment Plants (STP) located in the State of São Paul, Brazil. The micronucleus assay in Tradescantia was the test chosen for this evaluation. Another objective of the study was to verify it Tradescantia pallida could replace the clone 4430 in the Trad-MN assay. All the STPs studied have presented at least one positive sample for the micronucleus assay in the Tradescantia. Further studies are required in order to determine which compounds are responsible for the observed effect. The results obtained suggest that T. pallida can replace clone 4430 in the micronucleus assay, however, this assay presents limited applicability in monitoring programs.
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Comparação da eficiência do tratamento por fotoeletrocatálise em relação à cloração química convencional na redução da mutagenicidade de azo corantes empregando o ensaio de micronúcleos / Comparison of the efficiency of the treatment by photoelectrocatalysis in relation to conventional chemical chlorination in the reduction of the mutagenicity of azo dyes using micronucleus assay

Oliveira, Gisele Augusto Rodrigues de 09 April 2010 (has links)
Os azo corantes Disperse Red 1, Disperse Orange 1 e Disperse Red 13 são amplamente utilizados para o tingimento de fibras e são mutagênicos para o ensaio de Salmonella/microssoma e para o ensaio de micronúcleos. O aumento da complexidade e dificuldades para o tratamento de efluentes têxteis tem levado à busca constante de novas metodologias para o tratamento destes rejeitos. A cloração é um método amplamente empregado para a desinfecção de águas e efluentes, mas também para remover ou reduzir a cor do efluente a fim de atender o padrão de emissão da legislação brasileira. Porém, muitos trabalhos mostram que este tratamento muitas vezes não é capaz de remover a mutagenicidade dos corantes e em alguns casos pode até aumentar a toxicidade da amostra. Já a fotoeletrocatálise, aparentemente, é eficiente tanto na degradação desses compostos em amostras aquosas como na redução da atividade mutagênica, como demonstraram alguns ensaios preliminares. Este trabalho tem como objetivo a avaliação da eficiência do tratamento por fotoeletrocatálise na remoção da mutagenicidade dos azo corantes Disperse Red 1, Disperse Orange 1 e Disperse Red 13 presentes em amostras aquosas em comparação à cloração química convencional utilizando o teste de micronúcleos (MNs) em células HepG2. Os resultados demonstraram que a freqüência de MNs induzidos pelas diferentes concentrações testadas das soluções dos corantes estudados não foram significativamente diferentes do controle negativo. Nossos dados também revelaram que os índices de proliferação do bloqueio da citocinese (IPBC) em cultura de células HepG2 tratadas com os três corantes após a cloração e fotoeletrocatálise também não apresentaram diferenças estatísticas em relação aos seus respectivos controles negativos. A análise comparativa dos azo corantes Disperse Red 1, Disperse Orange 1 e Disperse Red 13 clorados e fotoeletrocatalisados com os corantes originais estudados pelo nosso grupo (CHEQUER, 2008; CHEQUER et al., 2009) mostrou uma diminuição no número de MNs indicando que após os tratamentos houve a remoção da mutagenicidade a partir da concentração de 1,0 µg/mL para os três corantes estudados. Portanto, podemos concluir que a cloração química convencional e a fotoeletrocatálise, nas condições testadas, são eficientes na remoção da mutagenicidade dos azo corantes Disperse Red 1, Disperse Orange 1 e Disperse Red 13 em relação à indução de micronúcleos. / The azo dyes Disperse Red 1, Disperse Orange 1 and Disperse Red 13 are widely used in dyeing processes and are mutagenic for Salmonella/microsome and micronucleus assays. The increasing of the complexity and difficulties for treatments of textile effluents has led to a constant search for new methodologies for the treatment of these wastewaters. Chlorination is a method extensively used for water and wastewaters disinfection and to remove or reduce the color of effluents in order to respect the standard of discharges issued by the Brazilian legislation. However, a lot of studies have shown that this treatment is not often able to remove the mutagenicity of the dyes, and in some cases it may even increase the toxicity of the sample. On the other hand, photoelectrocatalysis is apparently efficient both in the degradation of these compounds in aqueous samples and in reduction of the mutagenic activity, as demonstrated by some preliminary assays. This study aims to evaluate the efficiency of the photoelectrocatalysis treatment in the removal of the mutagenicity of the azo dyes Disperse Red 1, Disperse Orange 1 and Disperse Red 13 present in aqueous sample in comparison to conventional chemical chlorination using the micronucleus test (MNs) in HepG2 cells. The results showed that the frequency of MNs induced by different tested concentrations of the solutions of the studied dyes were not significantly different from the negative control. Our data also revealed that the cytokinesis-block proliferation index (CPBI) in cultures of HepG2 cells treated with the three dyes after chlorination and photoelectrocatalysis also showed no statistical differences related to the their respective negative controls. The comparative analysis of azo dyes chlorinated and photoelectrocatalysed Disperse Red 1, Disperse Orange 1 and Disperse Red 13 with the original dyes studied by our group (CHEQUER, 2008; CHEQUER et al., 2009) showed a decrease in the number of MNs indicating that after the treatments occurred the removal of the mutagenicity potencial at concentration of 1,0 µg/mL for the three dyes studied. Therefore, we conclude that conventional chemical chlorination and photoelectrocatalysis, under the conditions tested, are effective in removing of the mutagenicity of the azo dyes Disperse Red 1, Disperse Orange 1 and Disperse Red 13 related to induction of micronucleus.
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Avaliação da atividade genotóxica de lodo de esgosto tratado do Estado de São Paulo com o teste de micronúcleo em células germinativas de Tradescantia (Trad-MN) / Assessment of the genotoxic activity of treated sludge from São Paulo sewage treatment plants with the micronuclei assay in germ cells of Tradescantia (Trad-MN)

Ana Cristina Mielli 16 October 2008 (has links)
O lodo de esgoto gerado em estações de tratamento de esgoto pode conter substancias tóxicas ainda não regulamentadas nas legislações nacionais e internacionais. Dentre elas as genotóxicas tem recebido especial atenção. Este trabalho teve como objetivos avaliar a genotoxicidade de amostras de lodo de esgoto tratado de diferentes Estações de Tratamento de Esgoto (ETE) do Estado de São Paulo com o teste de micronúcleo em Tradescantia e ampliar os conhecimentos sobre o potencial de utilização da Tradescantia pallida em substituição ao clone 4430. Todas as ETEs estudadas apresentaram pelo menos uma amostra positiva para o teste de micronúcleo em Tradescantia sendo necessários mais estudos para elucidar quais os compostos são responsáveis pelo efeito observado. Os resultados sugerem que a Tradescantia pallida pode substituir o clone 4430 no teste de micronúcleo, porém esse ensaio tem aplicabilidade limitada em programas de monitoramento. / The sludge produced in sewage treatment plants can contain toxic substances which are not yet regulated by national and international legislation. Among these, the genotoxic substances are of great concern. The present paper aimed at evaluating the genotoxicity of treated sludge samples collected in different Sewage Treatment Plants (STP) located in the State of São Paul, Brazil. The micronucleus assay in Tradescantia was the test chosen for this evaluation. Another objective of the study was to verify it Tradescantia pallida could replace the clone 4430 in the Trad-MN assay. All the STPs studied have presented at least one positive sample for the micronucleus assay in the Tradescantia. Further studies are required in order to determine which compounds are responsible for the observed effect. The results obtained suggest that T. pallida can replace clone 4430 in the micronucleus assay, however, this assay presents limited applicability in monitoring programs.

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