Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / INTRODUCTION: The proper integrity and functioning of the central structures are important for the linguistic and cognitive development and the Long Latency Auditory Evokes Potentials (LLAEP) allow the evaluation of the hearing information processing, considered as indicator of cognitive development, mainly in preterm infants, that present risks to alterations of hearing and language processing. The preterm infants are also vulnerable to cellular alterations. These alterations may cause several diseases during the neonatal period. The research of the oxidative metabolism through the Micronucleus Essay allows the identification of these alterations in cellular level. PURPOSE: To evaluate the LLAEPs and the oxidative metabolism of term and premature infants. MATERIAL AND METHODS: This study consisted of newborns with no more than one month old that came to the Hospital Universitário de Santa Maria (HUSM) to the Neonatal Hearing Screening (NHS). The infants were divided in control group (CG) and study group (SG), with term and premature infants, respectively. The sample consisted of 15 individuals in each group for the oxidative metabolism evaluation and 15 term infants and 10 premature infants for the LLAEP evaluation. For the micronucleus test, epithelial cells of the mouth mucosa were collected, with acytobrush. The cells were analyzed in a laboratory. The LLAEPs were researched in binaural form, through insertion earphones, with frequent speech stimulation /ba/ and rare /ga/, analyzing only the exogenous potentials (P1, N1, P2 e N2). RESULTS: In general, for the oxidative metabolism research, there was statistically significant difference between the groups in the analysis of the Micronucleus Test. The number of altered micronucleus and cells was higher for the group of premature infants when compared with the group of term infants. For the LLAEPs there was no statistically significant difference for the latencies of the members P1 and N1. CONCLUSIONS: After this study, it was concluded that premature infants present higher index of cellular damage in nuclear level when compared with term infants. In the electrophysiological evaluation of the cortical potential, it was possible to observe the exogenous components P1 and N1, but there was no difference between the groups. More studies in this area are necessary in order to better understand the characteristics of these potentials in newborn and young infants. / INTRODUÇÃO: A integridade e funcionamento adequado das estruturas centrais são importantes para o desenvolvimento cognitivo e linguístico, e os Potenciais Evocados Auditivos de Longa Latência (PEALL) permitem avaliar o processamento da informação auditiva, sendo considerados como indicadores do desenvolvimento cognitivo, principalmente em prematuros, os quais são de risco para alterações do processamento auditivo e de linguagem. Os recém-nascidos prematuros também são vulneráveis à alterações celulares, sendo que as mesmas podem causar diversas doenças no período neonatal. A pesquisa do metabolismo oxidativo por meio do Teste de Micronúcleos permite a identificação dessas alterações em nível celular. OBJETIVO: Avaliar os PEALL e o metabolismo oxidativo em recém-nascidos a termo e prematuros. MATERIAL E MÉTODO: Participaram do estudo recém-nascidos com até um mês de vida que compareceram ao Hospital Universitário de Santa Maria (HUSM) para realização da Triagem Auditiva Neonatal (TAN). Os neonatos foram divididos em grupo controle (GC) e grupo estudo (GE), sendo constituídos por recém-nascidos a termo e prematuros, respectivamente. A amostra foi constituída por 15 indivíduos em cada grupo para avaliação do metabolismo oxidativo, e 15 recém-nascidos a termo e 10 prematuros para avaliação dos PEALL. Para o teste de micronúcleos foram coletadas células epiteliais da mucosa oral, por meio do esfregaço da mucosa oral, com uma escova cytobrush. As células foram analisadas em laboratório. Os PEALL foram pesquisado de forma binaural, por meio de fones de inserção, com estímulo de fala frequente /ba/ e raro /ga/, sendo analisados apenas os potenciais exógenos (P1, N1, P2 e N2). RESULTADOS: De maneira geral, para a pesquisa do metabolismo oxidativo, houve diferença estatisticamente significante entre os grupos para as análises do Teste de Micronúcleos, sendo que o número de micronúcleos e de células alteradas foi maior no grupo de prematuros quando comparados com o grupo de recém-nascidos a termo. Para os PEALL não houve diferença estatisticamente significante para as latências dos componentes P1 e N1. CONCLUSÕES: A partir desse estudo pode-se concluir que os recém-nascidos prematuros apresentaram um índice maior de danos celulares a nível nuclear quando comparados com os recém-nascidos a termo. Na avaliação eletrofisiológica dos potenciais corticais, foi possível observar os componentes exógenos P1 e N1, porém não houve diferenças entre os grupos. São necessários mais estudos nessa área, a fim de se conhecer melhor as características desses potenciais em recém-nascidos e crianças pequenas.

O objetivo do presente estudo foi avaliar os efeitos genotóxicos/citotóxicos ocasionados por disjuntores de Haas em células epiteliais esfoliadas da mucosa bucal de pacientes submetidos a tratamento ortodôntico, por meio do ensaio de micronúcleos. Participaram do estudo 22 pacientes entre 06 a 12 anos de idade, de ambos os gêneros, que necessitaram de disjuntores de Haas para correção de mordida cruzada posterior. Foi efetuada a coleta de células epiteliais da mucosa da bochecha, por meio de raspagem suave com escova científica. As células foram coletadas antes (T0), um mês após a instalação do aparelho (T1) e 3 meses após o travamento dos disjuntores (T2). As células foram processadas para obtenção de lâminas, as quais foram coradas com o método de Feulgen/Fast Green para quantificação do número de células normais, cariolíticas, picnóticas, brotos nucleares, bi/trinucleadas e com a presença de micronúcleos, em microscospia de luz. Os resultados foram submetidos à analise estatistica por meio do teste ANOVA, seguido do pós-teste de Tukey. O nível de significância adotado foi de 5%. Os resultados demonstraram que não houve diferença estatisticamente significante com relação à preença de micronúcleos, nos períodos avaliados (p>0,05). Os brotos nucleares sofreram aumento em T1 (p>0,05), com retorno aos níveis baseline em T2. Em relação às outras anormalidades (células cariolíticas, picnóticas e bi/trinucleadas), houve aumento significante em T1 e T2 (p<0,0001). Concluindo, este estudo demonstrou que os disjuntores de Haas não ocasionaram aumento de micronúcleos em células da mucosa bucal. Entretanto, foram observadas aumento estatisticamente significante das células cariolíticas, picnóticas e bi/trinucleadas durante o tratamento, sugerindo possíveis efeitos citotóxicos. / The aim of the present study was to evaluate the genotoxic and cytotoxic effects caused by Haas appliance through micronuclei assay in buccal mucosa epithelial cells of patients submitted to orthodontic treatment. The study included 22 patients between 06 and 12 years of age, both genders, who required Haas appliance for correction of posterior crossbite. Epithelial cells from the cheek mucosa were collected performed by gentle scraping scientific toothbrush. The cells were collected before (T0), one month after the device was installed (T1) and 3 months after the appliance immobilization (T2). The cells were processed to obtain slides and Feulgen/Fast Green was used as staining method for counting the number of normal, karyolytic, pyknotic, nuclear buds, binucleated and micronucleus cells under light microscopy. The cellular abnormalities were evaluated with the parametric tests for comparison of the means by ANOVA test followed by the Tukey post-test. The significance level was 5%. The results of this study showed that there were no statistically significant results for the micronuclei in the evaluated periods (p>0,05). Nuclear buds increased in T1 (p<0,05), returning to baseline levels in T2. In relation to the other abnormalities (cariolytic, pyknotic and bi/trinucleated cells), there were a significant increase in T1 and T2 (p<0.0001). In conclusion, this study demonstrated that Haas appliance did not cause micronuclei increase in cells of buccal mucosa. However, a statistically significant increase in cariolytic, pyknotic and bi/trinucleated cells were observed during treatment, suggesting possible cytotoxic effects.

Um método analítico constituído por extração em fase sólida molecularmente impressa (MISPE) e cromatografia gasosa acoplada à espectrometria de massas (GC-MS) foi desenvolvido para análise de metabólitos dialquil fosfatos (dietil tiosfato - DETP e dietil ditiosfato - DEDTP) em amostras de urina. Um polímero de impressão molecular (MIP) foi sintetizado utilizando-se 4-vinilpiridina como monômero funcional e etileno glicol dimetacrilato como reagente de ligação cruzada. A etapa de condicionamento foi realizada da seguinte forma: 3 mL de acetonitrila, 3 mL de tampão fosfato dibásico 0,1 mol L-1, pH 11,0 e 2 mL de água foram percolados por um cartucho de polipropileno contendo o MIP. A etapa de extração foi executada utilizando 1,0 mL de amostra de urina com pH previamente ajustado para 3,0. Finalmente, os analitos foram eluídos com 3 mL de acetonitrila e derivatizados com uma solução de  2,3,4,5,6-brometo de  pentafluorobenzil a 3% em acetonitrila, a temperatura ambiente durante 1h. A amostra foi analisada por GC-MS. Curvas de calibração analítica para DETP e DEDTP foram construídas utilizando-se uma mistura de urina de diferentes indivíduos voluntários e em seis níveis de concentração. O método foi linear na faixa de  10-500 µg L-1, com r = 0,99 e limite de detecção de 3,0 µg L-1, para ambos os analitos. A precisão intra-dias e inter-dias foram avaliadas com base na porcentagem de desvio padrão relativo (%RSD) e todos os resultados foram inferiores a 15% para ambos os analitos. O método foi preciso, exato, com boa recuperação e robustez. Posteriormente o método foi utilizado para determinar as concentrações de DETP e DEDTP em amostras de urina de ratos expostos a dissulfoton. Além da concentração de dialquil fosfatos, foram determinadas a atividade de colinesterase sanguínea e a incidência de micronúcleos em eritrócitos policromáticos destes mesmos animais, a fim de se estabelecer uma relação entre a dose de exposição ao dissulfon e os parâmetros avaliados. Observou-se que a atividade de colinesterase plasmática não reflete muito bem a correlação entre a dose de exposição e efeito, ao contrário da colinesterase eritrocitária. A concentração de dialquil fosfatos refletiu uma boa correlação com a dose de exposição. Através da frequência de micronúcleos em eritrócitos policromáticos, foi possível observar que, a semelhança de outros praguicidas organofosforados (OF), o dissulfoton é capaz de causar mutagenicidade. / An analytical method constituted by molecularly imprinted solid phase extraction (MISPE) and gas chromatography mass spectrometry (GC-MS) was developed for analyses of benzene metabolites (diethyl thiophosphate - DETP and diethyl dithiophosphate - DEDTP) in human urine samples. A molecularly imprinted polymer (MIP) for DETP was synthesized using 4-vinylpiridine as functional monomer and ethylene glycol dimethacrylate as cross linker. The conditioning step of the MISPE was processed flowing though the MIP cartridge 3 mL of acetonitrile, 3 mL of dibasic phosphate buffer 0.1 mol L−1 pH 11 and 2 mL of water. The extraction step was executed using 1.0 mL of urine sample with pH previously adjusted to 3.0. Finally, the analytes were eluted with 3 mL of acetonitrile and derivatized with 2,3,4,5,6-pentafluorobenzyl bromide 3% at room temperature during 1h. The sample was analyzed by GC-MS. Analytical calibration curves for DETP and DEDTP were constructed using a pool of urine sample and for six levels of concentration. The method was linear from 10 to 500 μg L−1, with r = 0.99 and limit of detection of 3.0 μg L−1, for both analytes. The within-day and between-day precisions were evaluated (as percentage of RSD) and all results were < 15% for both analytes. The method was accurate, with good recovery and robustness. Later this method was used to determine the concentrations of DETP and DEDTP in urine samples of rats exposed to disulfoton. Besides the concentration of dialkyl phosphates, it was determined blood cholinesterase activity and the incidence of micronucleated polychromatic erythrocytes in the same animals, in order to establish a relationship between the dose of exposure and the evaluated parameters. It was observed that the plasma cholinesterase activity did not reflect very well the correlation between exposure dose and effect, unlike the erythrocyte cholinesterases. The concentration of dialkyl phosphates gave a good correlation with exposure dose. By the frequency of micronucleated polychro-matic erythrocytes was possible to observe that, similarly to other organophosphates pesticides (OPs), disulfoton can causes mutagenicity. / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES

Made available in DSpace on 2017-07-24T19:22:03Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Juliana L Geus.pdf: 4903915 bytes, checksum: 8d7a5502117481a71579a6da1c94de8c (MD5) Previous issue date: 2016-12-09 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / The aim of this study was to clinically evaluate the longevity of tooth whitening in smokers, quantify nicotine in teeth exposed to cigarette smoke, as well as evaluate the genotoxic effect of cigarettes through the micronucleus frequency. For this study were conducted four studies. In studies 1 and 2, sixty patients, thirty smokers and thirty nonsmokers, were submitted to at-home bleaching with carbamide peroxide (CP) 10% for three hours daily during three weeks. The color was assessed using the Vita Easyshade spectrophotometer, and shade guides Vita classical organized by value and Vita Bleachedguide D-MASTER, after 12 and 30 months of bleaching, before and after dental prophylaxis. In study 3, sixty-nine teeth were exposed to smoke of 400 cigarettes (positive control). In one group, the dental prophylaxis was performed and, in another, the in-office leaching with hydrogen peroxide (HP) 35%. The color was evaluated initially, after exposure to cigarette smoke, and after dental prophylaxis or in-office bleaching. The teeth of each group were analyzed by gas chromatography and mass spectrometry in order to measure the amount of nicotine in each group. The study 4 consisted of a systematic review that evaluated the frequency of micronuclei in smokers and nonsmokers. Data from studies 1 and 2 showed that for both groups, the main factor was statistically significant (p <0.001). An effective bleaching was observed in both groups at 12 months after dental prophylaxis, however, a dental darkening was observed after 30 months for both groups. In study 3, the amount of nicotine was higher in the positive control group (3.3 ± 1.3 mg / g of tooth), then the prophylaxis group (2.1 ± 1.4 mg / g) and bleaching group (0.8 ± 0.3 mg / g). There was a visually perceptible dental darkening in all groups exposed to cigarette smoke (p <0.001). In the study 4 was a significant difference in the frequency of micronuclei in smokers compared to nonsmokers, however the Chi2 test showed high heterogeneity in the methodology of the assessed studies (p <0.00001). It can be concluded that the bleaching with 10% CP was stable in both groups at 12 months, while the extrinsic stains of diet and smoking were removed by dental prophylaxis, which did not occur in the evaluation of 30 months. Cigarette smoke penetrates in the tooth structure, however the dental prophylaxis and bleaching with PH 35% removed partially the nicotine of tooth. A higher frequency of micronuclei in exfoliated cells of smokers was found in comparison with non-smokers. / O objetivo deste estudo foi avaliar clinicamente a longevidade do clareamento dental em pacientes fumantes, quantificar a nicotina em dentes expostos à fumaça de cigarro, bem como avaliar o efeito genotóxico do cigarro através da frequência de micronúcleos. Para tanto foram realizados quatro estudos. Nos estudos 1 e 2, sessenta pacientes, trinta fumantes e trinta não fumantes, foram submetidos ao clareamento com peróxido de carbamida (PC) 10% por três horas diárias durante três semanas. A cor foi avaliada utilizando o espectrofotômetro Vita Easyshade, e as escalas de cor Vita classical organizada por valor e Vita Bleachedguide 3D-MASTER, após 12 e 30 meses do clareamento, antes e depois de profilaxia dental. No estudo 3, sessenta e nove dentes foram expostos à fumaça de 400 cigarros (controle positivo). Em um grupo foi realizada profilaxia dental e em outro, clareamento de consultório com peróxido de hidrogênio (PH) 35%. A cor foi avaliada inicialmente, após a exposição à fumaça do cigarro, e após a profilaxia dental ou o clareamento em consultório. Os dentes de cada grupo foram analisados por cromatografia gasosa e espectrometria de massas, a fim de mensurar a quantidade de nicotina em cada grupo. O estudo 4 consistiu de uma revisão sistemática que avaliou a frequência de micronúcleos em fumantes e em não fumantes. Os dados dos estudos 1 e 2 mostraram que para ambos os grupos, apenas o fator principal tempo foi estatisticamente significativo (p < 0,001). Um clareamento eficaz foi observado em ambos os grupos na avaliação de 12 meses, após profilaxia dental, no entanto, um escurecimento dental foi observado após 30 meses para ambos os grupos. No estudo 3 a quantidade de nicotina foi maior no grupo controle positivo (3,3 ± 1,3 μg/g de dente), seguida pelo grupo profilaxia (2,1 ± 1,4 μg/g) e grupo clareamento (0,8 ± 0,3 μg/g). Houve um escurecimento dental visualmente perceptível em todos os grupos expostos à fumaça do cigarro (p < 0,001). No estudo 4 foi observada uma diferença significativa na frequência de micronúcleos em fumantes quando comparados aos não fumantes, porém o teste Chi2 revelou alta heterogeneidade na metodologia dos estudos avaliados (p < 0,00001). Pode-se concluir que o clareamento com PC 10% manteve-se estável em ambos os grupos aos 12 meses, quando as manchas extrínsecas da dieta e do cigarro foram removidas por profilaxia dental, o que não ocorreu na avaliação de 30 meses. A fumaça do cigarro penetra na estrutura dental, no entanto a profilaxia dental e o clareamento com PH 35% removeram parcialmente a nicotina do dente. Foi encontrada uma maior frequência de micronúcleos em células esfoliadas de fumantes em comparação com não fumantes.

Made available in DSpace on 2017-07-24T19:22:31Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Juliana Larocca Geus.pdf: 2198997 bytes, checksum: 8d29399aeb40e13ac3aa426797a08b0e (MD5) Previous issue date: 2014-02-25 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / The aim of this study was to clinically evaluate the effectiveness, stability of color, dental sensitivity and genotoxicity of at-home bleaching with 10% carbamide peroxide (CP) in smokers and nonsmokers. For this study, two experiments were conducted. In Experiment 1 were selected 60 patients with central incisors A2 or darker, compared to Vita classical shade guide (Vita Zahnfabrik, Bad Säckingen, Germany), 30 smokers (S- experimental group) and 30 non-smokers (NS - control group). The bleaching was carried out with 10% CP (Whiteness Perfect, FGM, Joinville, Santa Catarina, Brazil) for a period of 3 hours daily for three weeks.The color was assessed by Vita classical (Vita Zahnfabrik, Bad Säckingen, Germany) and spectrophotometer Vita Easyshade (Vita Zahnfabrik, Bad Säckingen, Germany) initially during bleaching (1st, 2nd and 3rd weeks) and after this procedure (1 week and 1 month). The tooth sensitivity was recorded by the patients, using a 0-4 scale and visual analogue scale (VAS) of 10 cm. The Experiment 2 was conducted in the same sample of Experiment 1. The color was evaluated using Vita Bleachedguide 3D-MASTER (Vita Zahnfabrik, Bad Säckingen, Germany) in the same periods that Experiment 1. The genotoxicity of bleaching was evaluated by the frequency of micronuclei (MN) in the gingival tissue before and after bleaching. Data from two experiments were evaluated by analysis of variance two-factor repeated measures and Tukey's test for contrast of means (α=0.05). Data from ΔSGU and ΔE showed an effectiveness of dental bleaching in both groups after three weeks of treatment.The prevalence of tooth sensitivity was similar between groups. The frequency of MN in the experimental group was significantly higher than in the control group regardless of bleaching treatment. It can be concluded that the effectiveness of bleaching and tooth sensitivity resulting from the procedure does not seem to be affected by smoking and dental bleaching with 10% carbamide peroxide can be considered a safe procedure. / O objetivo deste estudo foi avaliar clinicamente a efetividade, estabilidade da cor, sensibilidade dental e genotoxicidade do clareamento caseiro com peróxido de carbamida (PC) 10% em pacientes fumantes e não fumantes. Para este estudo foram realizados dois experimentos. No Experimento 1 foram selecionados 60 pacientes com os incisivos centrais com cor A2 ou mais escuros, por comparação com a escala Vita classical (Vita Zahnfabrik, Bad Säckingen, Alemanha), sendo 30 fumantes (FU - grupo experimental) e 30 não fumantes (NF - grupo controle). O clareamento dental foi realizado com PC 10% (Whiteness Perfect –FGM, Joinville, Santa Catarina, Brasil) pelo período de 3 h diariamente, durante três semanas. A cor foi avaliada por meio da escala Vita classical e espectrofotômetro Vita Easyshade (Vita Zahnfabrik, Bad Säckingen, Alemanha), inicialmente, durante o clareamento dental (1ª, 2ª e 3ª semanas) e após este procedimento (1 semana e 1 mês). A sensibilidade dental foi registrada pelos próprios pacientes, através da escala 0-4 e escala visual analógica (EVA) de 10 cm. O Experimento 2 foi realizado na mesma amostra do Experimento 1. A cor foi avaliada através da escala Vita Bleachedguide 3D-MASTER (Vita Zahnfabrik, Bad Säckingen, Alemanha) nos mesmos períodos do Experimento 1. A genotoxicidade do clareamento foi avaliada através da frequência de micronúcleos (MN) do tecido gengival, antes e após o clareamento. Os dados dos dois Experimentos foram avaliados por análise de variância de dois fatores para medidas repetidas e teste de Tukey para o contraste das médias (α = 0,05). Os dados de variação de unidades de escala Vita (ΔUEV) e variação de cor (ΔE) mostraram efetividade do clareamento dental em ambos os grupos após três semanas de tratamento. A prevalência de sensibilidade dental foi semelhante entre os grupos. A frequência de MN no grupo experimental foi significativamente maior que no grupo controle, independentemente do tratamento clareador. Pode-se concluir que a efetividade do clareamento e a sensibilidade dental decorrentes do procedimento não parecem ser afetadas pelo hábito de fumar e o clareamento dental com peróxido de carbamida 10% pode ser considerado um procedimento seguro. Palavras-chave: Clareamento dental; Tabaco; Testes para Micronúcleos; Sensibilidade da dentina.

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:30:56Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2009-12-17Bitstream added on 2014-06-13T20:01:10Z : No. of bitstreams: 1 ventura_bc_dr_rcla.pdf: 1747414 bytes, checksum: d6fd71edeabed9a63deeb67289ab785e (MD5) / Os azocorantes são substâncias químicas extremamente utilizadas em indústrias têxteis que podem induzir mudanças no material genético de organismos expostos, mesmo que essas alterações no DNA não se expressem de imediato. Foram avaliadas as citotoxicidade, genotoxicidade e mutagenicidade de diferentes concentrações (1, 10, 100 e 1000 mg/L – na ausência dos microorganismos – e 50 e 200 mg/L – na presença dos microorganismos) do azocorante Black Dye Commercial Product (BDCP), antes e após tratamentos de biodegradação por diversos microrganismos (1. “Pool” de bactérias heterotróficas provenientes de uma estação de tratamento biológico de efluentes, 2. Levedura Candida viswanathii, e 3. Fungo Basidiomiceto Phanerochaete chrysosporium), por meio de diferentes técnicas citogenéticas (coloração convencional, bandamento C, bandamento RON, bandamento por fluorocromos base-específicos CMA/DAPI e hibridação in situ fluorescente – FISH) aplicadas sobre o organismo teste Allium cepa. Pela técnica citogenética de coloração convencional, foi possível verificar que o corante, com e sem ação microbiana, induziu apoptose, necrose, células micronucleadas, aberrações cromossômicas e alterações nucleares. As aberrações cromossômicas e alterações nucleares foram visualizadas em todos os estágios do ciclo celular: na intérfase foram observados brotos nucleares e células poliplóides; na prófase, perdas de material genético; na metáfase, aderências cromossômicas, perdas cromossômicas, C-metáfases e poliploidias; na anáfase e telófase, multipolaridades, pontes e perdas cromossômicas. Os brotos nucleares apareceram com maior freqüência nas células submetidas aos testes do azocorante tratado com microorganismos, sendo que esse tipo de alteração deve estar associado à presença dos metabólitos do corante. As freqüências de micronúcleos... / Azo dyes are chemical substances extremely used by textile industries that may induce changes in the genetic material of exposed organisms, even if these changes in the DNA do not express themselves immediately. Cytotoxicity, genotoxicity and mutagenicity evaluations of the different azo dye (BDCP) concentrations were performed (1, 10, 100 e 1000 mg/L – without microorganisms – and 50 and 200 mg/L – with microorganisms), before and after biodegradation tests, using different microorganisms (1. Heterotrofic bacteria ”pool” proceeding from an effluent biological treatment station, 2. Candida viswanathii - Yeast, and 3. Phanerochaete chrysosporium - Basidiomicet Fungi), by means the different cytogenetical assays (conventional staining, C-banding, RON-banding, CMA/DAPI banding and fluorescent in situ fluorescent hybridization), using Allium cepa as test organism. By the conventional staining cytogenetic assay, it was possible to verify that the azo dye induced apoptosis, necrosis, micronuclei, chromosome aberrations and nuclear alterations. The chromosome aberrations and nuclear alterations were visualized in all phases of the cell cycle: in the interphase were observed nuclear buds and polyploidizated cells; in the prophase were observed genetic material losses; in the metaphase were observed chromosome adherences, chromosome losses, C-metaphases and polyploid cells; and in the anaphase and telophase were observed multipolar cells, chromosome bridges and chromosome losses. The frequencies of nuclear buds were the higher when the cells had been submitted to the azodye treated with microorganisms, suggesting that this kind of alteration must be associated to the presence of the azodye metabolites. The micronuclei and chromosome breaks frequencies... (Complete abstract click electronic access below)

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:22:59Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2008-03-05Bitstream added on 2014-06-13T20:10:13Z : No. of bitstreams: 1 bianchi_j_me_rcla.pdf: 700606 bytes, checksum: e0d730f76b54734539c18e1d9a52fbe4 (MD5) / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / Os agrotóxicos, substâncias químicas muito utilizadas para combater pragas na agricultura e nas residências, além de contribuírem para o aumento da produtividade e, conseqüentemente, o crescimento economia, também são responsáveis pela contaminação ambiental, quando utilizados indiscriminadamente, e por muitos casos de intoxicações e doenças genéticas nos seres humanos. Dependendo de sua composição química, degradabilidade e persistência no ambiente, os agrotóxicos podem comprometer a cadeia alimentar e afetar o ecossistema como um todo. Dentre os agrotóxicos bastante utilizados em todo o mundo, está o organofosforado malation. Pelo seu amplo uso, torna-se preocupante os possíveis danos que este inseticida possa promover no meio ambiente e nos organismos a ele expostos, pois alguns trabalhos já mostram esta sua ação detrimental. Desta forma, este trabalho investigou o potencial de indução de danos no DNA, para diferentes concentrações de malation, por meio das técnicas de aberrações cromossômicas e teste do micronúcleo em A. cepa e micronúcleo e ensaio do cometa em células HTC (hepatoma tissue culture). Nos testes com células meristemáticas e F1 de A. cepa, expostas por 24 e 48 horas ao malation, foram verificadas freqüências significativamente elevadas de AC e MN. Após 24 horas de exposição, não houve aumento na quantidade de AC, mas sim de MN. A análise das células F1 de A. cepa, juntamente com o teste de AC, forneceu dados importantes sobre a fixação dos danos genéticos induzidos pelo malation. Nenhum resultado relevante de citotoxicidade foi verificado em A. cepa. Após passarem pelo teste de recuperação, somente as células expostas às menores concentrações testadas apresentaram diminuição nos índices de AC e MN. / Pesticides, chemicals widely used to combat pest in agriculture and in homes, besides contribute to the increase productivity and the economy, are also responsible for environmental pollution and for many intoxications cases and genetic diseases in human beings. Depending on their chemical composition, degradability and degree of persistence in the environment, the pesticides can endanger the food chain and affect the entire ecosystem. Among the pesticides most used in the world is the organophosphate malathion. Due to its widespread use it has been worrying the possible damages that can promote this insecticide in the environment and in organisms exposed to it. This study investigated the induction potential of DNA damage with several malathion concentrations using chromosomic aberration (CA) techniques, micronucleus test (MN) in A. cepa and micronucleus and comet assay in hepatoma tissue culture (HTC). In A. cepa tests, meristematic and F1 cells exposed for 24 and 48 hours to malathion showed significative frequencies of CA and MN. After 24 hours of exposure, there was no increase in the CA amounts, but was observed an increase to frequency of MN. The F1 cells analysis, together with the CA tests, provided important data on the genetic damages fixation induced by malathion. No relevant results of citotoxicity were verified in A. cepa. After the recovery test, the cells exposed to the smaller tested concentrations of malathion showed reduction of AC and MN indices. In the HTC cells test, was verified by the comet assay, genotoxic effects for all the tested concentrations, after exposure for 24 hours to the insecticide, but by the micronucleus tests, no significative results were found. These data suggest that the DNA lesions were repaired and not elapsed in mutation. With the concomitant realization of different tests, the clastogenic action of malathion could be verified.

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:24:37Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2011-06-15Bitstream added on 2014-06-13T20:31:49Z : No. of bitstreams: 1 silva_go_me_sjc.pdf: 1111622 bytes, checksum: e539d76b4d826d8bae2e60a44de64ea5 (MD5) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / Cimentos endodônticos podem liberar componentes tóxicos que interagem com os tecidos periapicais. A proposta deste trabalho foi avaliar a citotoxicidade e genotoxicidade de quatro cimentos endodônticos (EndoREZ, RoekoSeal, AHPlus e cimento experimental à base de óleo-resina da Copaifera multijuga) utilizando ensaios biológicos. Os cimentos foram mixados e incubados em estufa de umidade relativa a 37°C com 5% CO2 por 24 h. A exposição do meio de cultura aos cimentos ocorreu após 12 h do endurecimento dos cimentos. Células V79 foram expostas às diluições dos extratos por 24 h e a sobrevivência celular foi mensurada fotometricamente. A viabilidade celular foi mensurada pelo teste de MTT em espectrofotômetro e a genotoxicidade, indicada pela formação de micronúcleos, foi determinada após 24h do período de exposição. Os resultados da taxa de sobrevivência celular e a quantidade de danos ao DNA foram estatisticamente analisados pelo teste de Kruskal-Wallis (p<0,05). A citotoxicidade em relação ao grupo controle decresceu na seguinte ordem EndoREZ > Copaíba ≥ AH Plus > RoekoSeal. A formação de micronúcleos (MN) para indicar a genotoxicidade foi induzida somente pelos extratos do EndoREZ, sendo mais genotóxico que o EMS (controle positivo) / Endodontic sealers could release toxic components that may interact with periapical tissues. The purpose of this study was to evaluate the cytotoxicity and genotoxicity of four endodontic sealers (EndoREZ, RoekoSeal, AHPlus and experimental root canal sealer- based on Copaifera multijuga oil-resin) using routine cell biology techniques. The sealers were mixed and incubated in a humidified incubator at 37°C with 5% CO2 in air for 24 h. The exposure of the culture medium to the sealers occurred after 12 h of cure. V79 cells were exposed to dilutions of this extracts for 24 h and cell survival was measured photometrically. The cell viability was measured by MTT test in a spectrophotometer and the genotoxicity as indicated by the formation of micronuclei was determined after a 24 h exposure period The results of the cell survival rates and the amount of DNA damage was statistically analyzed for Kruskal-Wallis (p<0.05) test. The ranking of cell survival from the most to the least toxic material was: EndoREZ> Copaíba ≥ AH Plus > RoekoSeal. The formation of micronuclei (MN) to indicate genotoxicity was induced only by extracts of EndoREZ, being more genotoxic than EMS (positive control)

Orientador: Cleverton Roberto de Andrade / Resumo: O óleo essencial de Melaleuca alternifolia (tea tree oil - TTO) é composto por aproximadamente 100 componentes, sendo que os de maior concentração são o terpinen-4-ol e gama-terpineno. Os estudos da sua capacidade citotóxica têm demonstrado efeito sobre linhagens neoplásicas malignas. O objetivo do trabalho foi avaliar a capacidade citotóxica e mutagênica do TTO e seus componentes, terpinen-4-ol e gama terpineno em culturas celulares. Duas linhagens de carcinomas espinocelulares orais e uma linhagem de ceratinócitos foram analisadas por: (1) Análise colorimétrica de Metiltetrazolium (MTT); (2) Teste do Micronúcleo. Os resultados foram expressos na forma de ensaios de susceptibilidade e grau de mutagenicidade. Posteriormente foram analisados por one-way Anova com pós-teste de Tukey. Os valores de IC50 obtidos nas análises de MTT das células expostas ao TTO foram de 0,2% para a HaCaT, 0,14% para a HSC-3 e 0,17% para a SCC-25. Para a exposição ao terpinen-4ol, os valores de IC50, foram 0,5%, 0,3% e 0,45% para as linhagens HaCaT, HSC-3 e SCC-25, respectivamente. O gama-terpineno, não demonstrou atividade citotóxica expressiva, não sendo possível calcular o IC50. O TTO não demonstrou mutagenicidade nas linhagens HaCaT e HSC-3. O terpinen-4-ol, não foi capaz de produzir mutagenicidade em nenhuma das linhagens em estudo. Conclui-se que tanto o TTO quanto o terpinen-4-ol apresentam capacidade citotóxica sobre as linhagens HaCaT, HSC-3 e SCC-25. O TTO não foi mutagênico nas linhagens... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: The essential oil of Melaleuca alternifolia (tea tree oil - TTO) consists of about 100 components, and the highest concentration are terpinen-4-ol and gammaterpinene. Studies of their cytotoxic capacity have shown effect on malignant neoplastic lineages. The aim of this study was to evaluate the cytotoxic and mutagenic capacity of TTO and main soluble components, terpinen-4-ol and gama-terpinene in cell cultures. Two lineages of oral squamous cell carcinoma and a keratinocyte cell were analyzed: (1) colorimetric analysis Metiltetrazolium (MTT); (2) Micronucleus assay. The results were expressed as susceptibility tests and degree of mutagenicity. The statistical test used in the analysis was one-way ANOVA (Tukey test). The IC50 values obtained from the MTT analysis of cells exposed to TTO were 0.2% for HaCaT, 0.14% for HSC-3, and 0.17% for SCC-25. For exposure to terpinen-4ol, IC50 values were 0.5%, 0.3% and 0.45% for HaCaT, HSC-3 and SCC-25, respectively. The gamma-terpinene didn't show significant cytotoxic activity, therefore it was impossible to calculate the IC50. The TTO was unable to produce mutagenicity in HSC-3 and HaCaT. The terpinen-4-ol was not mutagenic in any of the lineages tested. In conclusion, both the TTO and terpinen- 4-ol had cytotoxic capacity on HaCaT, HSC-3 and SCC-25. The TTO was unable to produce mutagenicity in HSC-3 and HaCaT. The terpinen-4-ol was not mutagenic in any of the lineages tested. / Mestre

Made available in DSpace on 2016-01-26T18:55:37Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Mariliza.pdf: 910731 bytes, checksum: 21aa8bdaf81f9c020e8cdee92ae30dcb (MD5) Previous issue date: 2013-03-26 / Studies with some local anesthetics showed that these can cause genetic damage. But local anesthetics has not been tested against the genotoxicity of repeated use. Objective: The aim of this study was to evaluate the genotoxic potential of local anesthetics with single dose and repeated, through the micronucleus test. Methods: We used 80 Wistar rats, male, 12 weeks old, divided into 6 groups: A - 16 rats received lidocaine hydrochloride intraperitoneally (4.4 mg / kg), B - 16 rats received 3% mepivacaine intraperitoneally (4.4 mg / kg), C - 16 rats received 4% articaine intraperitoneally (7.0 mg / kg) D - 16 rats received prilocaine 3% intraperitoneally (6.0 mg / kg) E - 08 rats received cyclophosphamide in single subcutaneous dose (50mg/kg) (positive control group) F - 08 rats received 0.5 ml of saline intraperitoneally (negative control group). Eight rats from Group A, B, C and D received the dose of anesthetic only once at the first day of the experiment and the remainder were dosed daily for five days. The Kruskal-Wallis test followed by a multiple comparisons Student-Newman-Keuls test was used for statistical analysis. Results: The median of micronuclei in the lidocaine group exposed for 1 day was 1.00 and by 5 days was 0.50, mepivacaine for 1 day and for 5 days was 1.00, articaine for 1 day was 1.00 and for 5 days 0.00, prilocaine for 1 day and 5 days was 0.00, cyclophosphamide was 10.00 and the negative control group exposed for 1 day was 1.00 and exposed for 5 days was 0.00 (p<0.0001). There was a statistical difference between the number of micronuclei in relation to the positive control group and all local anesthetics studied (related to the anesthetic type and duration of exposure) (p=0.0001) but not for the negative control group (p>0.05). Conclusion: There was no increase in micronuclei frequency in relation to exposure to 1 or 5 days in all local anesthetics evaluated. / Estudos com alguns anestésicos locais mostraram que estes podem causar dano genético. Porém ainda não foi testada a genotoxicidade frente ao uso repetido destes. Objetivo: O objetivo deste estudo foi avaliar o potencial genotóxico de anestésicos locais em dose única e repetida, por meio do teste de micronúcleo em ratos Wistar. Material e métodos: Foram utilizados 80 ratos Wistar, machos, com 12 semanas, divididos em 6 grupos: A 16 ratos receberam cloridrato de lidocaína via intraperitoneal (4,4 mg/kg); B 16 ratos receberam mepivacaína a 3% via intraperitoneal (4,4 mg/kg); C 16 ratos receberam articaína a 4% via intraperitoneal (7,0 mg/kg); D 16 ratos receberam prilocaína a 3% via intraperitoneal (6,0 mg/kg); E 08 ratos receberam ciclofosfamida em dose única subcutânea (50mg/kg) (grupo controle positivo); F 08 ratos receberam 0,5ml de soro fisiológico via intraperitoneal (grupo controle negativo). Oito ratos do grupo A, B, C e D receberam a dose do anestésico apenas uma vez no primeiro dia do experimento e os demais receberam doses diárias durante cinco dias. O teste de Kruskal-Wallis, seguido das comparações múltiplas de Student-Newman-Keuls, foi utilizado para análise estatística. Resultados: A mediana de micronúcleos no grupo exposto a Lidocaína por 1 dia foi de 1.00 e por 5 dias foi de 0.50, a Mepivacaína por 1 dia e por 5 dias foi de 1.00, a Articaína por 1 dia 1.00 e por 5 dias 0.00, a Prilocaína por 1 dia e por 5 dias 0.00, a ciclofosfamida foi 10.00 e no grupo de controle negativo exposto por 1 dia foi 1,00 e no exposto por 5 dias foi de 0,00 (p<0,0001). Houve diferença estatística entre o número de micronúcleos em relação ao grupo controle positivo e todos os anestésicos locais estudados (quanto ao tipo e tempo de exposição) (p=0,0001), porém não em relação ao grupo controle negativo (p>0,05). Conclusão: Não foi observado aumento da frequência de micronúcleos com relação à exposição de 1 ou 5 dias em todos os anestésicos locais avaliados.