Made available in DSpace on 2014-06-12T15:52:13Z (GMT). No. of bitstreams: 2 arquivo2830_1.pdf: 12426045 bytes, checksum: 373eadff9d5b0a2bba2fac0933300fe7 (MD5) license.txt: 1748 bytes, checksum: 8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33 (MD5) Previous issue date: 2011 / Faculdade de Amparo à Ciência e Tecnologia do Estado de Pernambuco / O alumínio é um elemento ubiquitário e sem papel biológico definido, aplicado em tratamento de água devido sua ação floculante. Seu acúmulo em ambientes aquáticos, mesmo em condições alcalinas, acarreta ação tóxica para a biota aquática, sobretudo quando a exposição se dá num período prolongado, causando doenças em especies de peixes podendo levar a morte. Organismosteste como a tilapia tem grande potencial em ferramentas no biomonitoramento de áreas impactadas. Objetivamos, avaliar enzimas hidrolases da tilápia-do-Nilo por indução a exposição de concentrações desse metal. Neste contexto, foram utilizadas sete enzimas de tilápias-do-Nilo O. niloticus, a saber: AChE cerebral, AChE muscular, BChE muscular, pepsina, tripsina, quimotripsina e amilase intestinal; como biomarcadores, através da indução a exposição ao alumínio em ensaios in vivo (análises dos grupos induzidos a exposição) e in vitro (indução por incubação a partir de amostras do grupo controle do ensaio in vivo). Os peixes foram cultivados e expostos a diferentes concentrações de alumínio, delineando três grupos experimentais: Tratamento Grupo Controle (TGC, sem exposição ao Al2(SO4)3); Tratamento Grupo 1 ppm de Al2(SO4)3 (TG1); Tratamento Grupo 3 ppm de Al2(SO4)3 (TG3). O cultivo foi realizado durante um período ininterrupto de 14 dias, com alimentação ad libitum, fotoperíodo 12:12, troca dinâmica da água (80%) e monitoramento diário dos parâmetros físico-químicos da qualidade de água. Em seguida, coletadas amostras de fígado e brânquias e imersas em CH2O (10%) para posterior análise, enquanto cérebro, músculo e intestino foram macerados e homogeneizados, obtendo o extrato bruto (E.B.) para as análises enzimáticas. Não houve alterações morfológicas nas avaliações das brânquias e do fígado da tilápia. As três enzimas colinesterásicas apresentaram aumento de atividade nos grupos expostos ao alumínio (TG1 e TG3), tanto nos ensaios in vivo quanto nos in vitro. A AChE cerebral teve atividade máxima de 126.93 ± 13.20% e 160.13 ± 10.92%, in vivo e in vitro, respectivamente, nos tratamentos expostos a concentração de 3 ppm (TG3), em relação ao tratamento grupo controle (TGC, 100%). Nas mesmas condições, também aumentou a da AChE muscular, com 163.81 ± 0.30% e 138.77 ± 4.07%. Entre as colinesterases, a BChE apresentou resultado mais expressivo no tratamento in vitro, 168.28 ± 5.49% e 196.17 ± 4.08%, para os grupos TG1 e TG3. Das quatro enzimas digestivas analisadas, a pepsina in vivo apresentou menor atividade, 65.01 ± 1.04% (TG1) e 61.06 ± 1.90% (TG3), embora todas as demais, tripsina, quimotripsina e amilase intestinal tenham demonstrado redução de sua atividade em ambos os ensaios, in vivo e in vitro. Nas análises experimentais in vivo a atividade da quimotripsina e da amilase intestinal demonstraram redução significativa entre os tratamentos, sobretudo em relação ao TG3, 73.0 ± 1.8% e de 60.20 ± 3.95%, respectivamente. A atividade in vitro da tripsina foi menor do que a in vivo, inclusive entre os tratamentos TG1 e TG3. Os resultados demonstram a relevância da aplicação de biomarcadores enzimáticos de O. niloticus. O aumento da atividade colinesterásica e a redução na atividade de principais enzimas do metabolismo digestivos, forneceram resultados que indicam a presença do alumínio. Sugerimos o procedimento como ferramenta útil e alternativa no monitoramento de áreas impactadas pelo metal

Foram coletadas 137 amostras sanguíneas de 132 espécimes diferentes, pertencentes a sete espécies de Strigiformes (n=92) e onze espécies de Falconiformes (n=45), entre os meses de setembro de 2008 e julho de 2009. As amostras foram submetidas a hemograma completo, pesquisa de hemoparasitos através da avaliação do esfregaço sanguíneo, sexagem através da técnica de PCR e mensuração da atividade de colinesterases plasmáticas através do método de Ellman (1961). Apenas sete corujinhas-do-mato (Megascops choliba) apresentaram hemoparasitos (5,3 % do total de rapinantes). Houve diferença significativa conforme o estado de saúde da ave, sendo que a todos os animais clinicamente hígidos não estavam infectados, porém 20,4% dos animais com desordens clínicas apresentavam hemosporídeos. Quantitativamente, a parasitemia mediana dos animais infectados foi de 3,8 hemácias parasitadas por 10.000 hemácias, um índice de infecção relativamente baixo. A grande maioria dos parâmetros hematológicos não apresentou diferenças estatísticas em função da presença ou ausência de hemoparasitos, o que na maioria dos casos caracterizou uma infecção branda e pouco patogênica. A atividade de colinesterases plasmáticas apresentou uma distribuição normal, com uma média geométrica de 0,8333 micromoles/mL e desvio padrão geométrico de 1,7087 µmols/mL. A atividade de colinesterases plasmáticas apresentou diferenças estatísticas significativas entre Falconiformes (0,5705±1,6497 µmols/mL) e Strigiformes (1,0070±1,5620 µmols/mL). Não houve diferenças significativas entre machos ou fêmeas e adultos ou jovens dentre os Falconiformes ou Strigiformes. Falconiformes não hígidos apresentaram valores surpreendentemente mais baixos do que os clinicamente hígidos. Entre os Strigiformes, os espécimes de cativeiro apresentaram valores mais baixos de atividade de colinesterases plasmáticas do que os de vida livre. A atividade de colinesterases plasmáticas foi significativamente diferente entre os animais com hemoparasitos (mediana geométrica = 2,0132 µmols/mL) e sem hemoparasitos (mediana geométrica = 0,8331 µmols/mL). Este estudo contribui com informações relevantes sobre a ocorrência de hemosporídeos em aves de rapina do Estado de São Paulo, alertando as Instituições sobre a necessidade de monitoração destes protozoários sanguíneos. Além disso, contribui com dados inéditos sobre a atividade de colinesterases plasmáticas em rapinantes. / 137 blood samples were collected from 132 different specimen, belonging to seven species of Strigiformes (n=92) and eleven species of Falconiformes (n=45), from September 2008 to July 2009. Samples were submitted to complete hemogram, survey for hemoparasites through evaluation of blood smears, sex identification by PCR and measurement of plasmatic cholinesterases by the method of Ellman (1961). Only seven black-capped-screech-owls (Megascops choliba) were positive for hemoparasites (5,3% of total raptors). There were significative difference according to avian health status; all the clinicaly higid animal were not infected, but 20,4% of animals with clinical desorders presented haemosporidians. Quantitatively, the average parasitemia was 3,8 parasited erythrocytes in 10.000 erythrocytes, a infection rate relatively low. The most of hematologic parameters did not present statistic differences in function of presence or absence of hemoparasites, what in most of the cases characterized a low and not much pathogenic infection. The plasmatic cholinesterase activity presented normal distribution, with geometric average of 0,8333 micromoles/mL and geometric standard deviation of 1,7087 µmols/mL. The plasmatic cholinesterase activity presented statistic differences between Falconiformes (0,5705±1,6497 µmols/mL) and Strigiformes (1,0070±1,5620 µmols/mL). There were not significative differences between males of females and adults or youngs between Falconiformes or Strigiformes. Non-higid Falconiformes presented surprisiling much low values than those clinically higid. Between Strigiformes, the captivity specimens present much lower plasmatic cholinesterase activity values than free ranging animals. The plasmatic cholinesterase activity was signifactively different among animal with hemoparasites (geometric average = 2,0132 µmols/mL) and without hemoparasites (geometric average = 0,8331 µmols/mL). This research contributes with relevant information about the haemosporidian occurence in raptors of State of São Paulo, alerting the Institutions about the necessity of monitorizing haemoprotozoa. Besides that, contributes with unpublished data about the plasmatic cholinesterase activity in raptors.

Submitted by Cristiane Chim (cristiane.chim@ucpel.edu.br) on 2016-08-08T12:45:35Z No. of bitstreams: 1 Dissertação_Mestrado_Josi _Ok entrega.pdf: 1279441 bytes, checksum: b07d8cf9a6b4075d879e41b64c62ec12 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-08-08T12:45:35Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Dissertação_Mestrado_Josi _Ok entrega.pdf: 1279441 bytes, checksum: b07d8cf9a6b4075d879e41b64c62ec12 (MD5) Previous issue date: 2015-03-26 / Conselho Nacional de Pesquisa e Desenvolvimento Científico e Tecnológico - CNPq# / #-2555911436985713659# / #600 / Pesticides are highly neurotoxic and may produce a series of health problems. The aim of this study was to look at correlations between the cholinergic syndrome symptoms and biological markers with depressive episode in a rural population. The study involved 100 workers involved in family agriculture of tobacco from southern Brazil. AChE and BChE activities and serum oxidative stress parameters were evaluated and no association was found between cholinergic syndrome, major depression and biological parameters. Of total sample 18% have psychiatric disorders, time of exposure was 23.4±25.5 years. The time of pesticides exposure was higher in depressive subjects than non-depressed one. Symptoms of cholinergic syndrome for muscarinic effects, nicotinic effects, and central effects were higher in depressive than non-depressed subjects, respectively. Correlation analysis shows that symptoms of cholinergic syndrome affecting central nervous system was positively correlated with BChE activity, and nitric oxide levels only in depressive subjects. In conclusion, although the use of pesticides did not increase the risk for major depressive episode in our sample, depressive subjects had increased disturbances in cholinergic system probably due an increase in the oxidative stress and alterations in cholinergic system arising from the chronic exposure to pesticides. / Introdução: Os pesticidas são altamente neurotóxicos e podem produzir uma série de problemas de saúde. Objetivo: O objetivo deste estudo é avaliar as correlações entre os sintomas da síndrome colinérgica e marcadores biológicos na depressão maior em uma população rural. Métodos: O estudo envolveu 100 trabalhadores envolvidos na agricultura familiar de tabaco do Sul do Brasil. As atividades da AChE e BChE e parâmetros de estresse oxidativo foram avaliados no sangue, e correlação entre a síndrome colinérgica e parâmetros biológicos foram investigados de acordo com o diagnóstico de depressão maior. Resultados: Da amostra total 18% apresentaram transtornos psiquiátricos, o tempo de exposição aos agrotóxicos foi de 23,4±25,5 anos. O tempo de exposição a pesticidas foi maior em indivíduos com depressão atual do que em não deprimidos. Os sintomas da síndrome colinérgica para efeitos muscarínicos, efeitos nicotínicos, e os efeitos centrais foram maiores nos indivíduos com depressão maior do que nos indivíduos não deprimidos, respectivamente. A análise de correlação mostra que os sintomas da síndrome colinérgica que afetam o sistema nervoso central foi positivamente correlacionada com a atividade BChE e com os níveis de óxido nítrico, apenas em indivíduos depressivos. Conclusão: Em conclusão, verificamos que o uso de agrotóxicos não aumentou o risco de depressão em nossa amostra, mas os indivíduos depressivos apresentaram aumento nos sintomas do sistema colinérgico provavelmente devido a um aumento do estresse oxidativo e alterações no sistema colinérgico decorrentes do tempo de exposição aos agrotóxicos.

A extensiva utilização de pesticidas pode acarretar significativas alterações relacionadas à saúde humana e ambiental. Pesticidas organofosforados e carbamatos têm sido os maiores responsáveis por inúmeros casos de intoxicações e óbitos em todo o mundo. O presente estudo visou analisar as condições ocupacional-ambientais e de saúde de 30 trabalhadores rurais. Utilizou-se um questionário semi-estruturado adaptado, análise da atividade das colinesterases sanguíneas, dos eosinófilos absolutos, hematócrito e medida de pico de fluxo expiratório para a coleta de dados. Todos os trabalhadores eram do sexo masculino, 50% meeiros, predominando a faixa etária de 15 a 21 anos ( amp;#61504; 37% ), a escolaridade de 1 a 4 anos (47%), o tempo de serviço de 61 a 120 meses (43,33%) e a faixa salarial de até um salário mínimo vigente (66,67%). Os organofosforados inseticidas foram os pesticidas mais utilizados. Para o preparo e aplicação dos pesticidas, os equipamentos de proteção individual eram utilizados de forma incompleta. Dos trabalhadores entrevistados 28,33 % relataram sintomas relacionados à exposição aos pesticidas. Detectou-se diminuição da atividade da colinesterase eritrocitária de 74% dos trabalhadores, mas apenas um foi considerado intoxicado. Observou-se aumento de eosinófilos em 85% dos hemogramas. Não houve diferença significativa entre as medidas de pico de fluxo expiratório (PFE) antes e após exposição aguda aos pesticidas pelo teste t de Student (p amp;#8804; 0,05) nem correlação significativa entre as variáveis de estudo (idade, tempo de serviço, eosinófilos, hematócrito, picos de fluxos expiratórios e colinestersases sanguíneas). O perfil dos trabalhadores aponta para urgentes compromissos no sentido de criar políticas de assistência técnica e campanhas educativas capazes de reduzir os riscos de intoxicação bem como de ampliar os fatores de proteção à saúde desses trabalhadores rurais.

Foram coletadas 137 amostras sanguíneas de 132 espécimes diferentes, pertencentes a sete espécies de Strigiformes (n=92) e onze espécies de Falconiformes (n=45), entre os meses de setembro de 2008 e julho de 2009. As amostras foram submetidas a hemograma completo, pesquisa de hemoparasitos através da avaliação do esfregaço sanguíneo, sexagem através da técnica de PCR e mensuração da atividade de colinesterases plasmáticas através do método de Ellman (1961). Apenas sete corujinhas-do-mato (Megascops choliba) apresentaram hemoparasitos (5,3 % do total de rapinantes). Houve diferença significativa conforme o estado de saúde da ave, sendo que a todos os animais clinicamente hígidos não estavam infectados, porém 20,4% dos animais com desordens clínicas apresentavam hemosporídeos. Quantitativamente, a parasitemia mediana dos animais infectados foi de 3,8 hemácias parasitadas por 10.000 hemácias, um índice de infecção relativamente baixo. A grande maioria dos parâmetros hematológicos não apresentou diferenças estatísticas em função da presença ou ausência de hemoparasitos, o que na maioria dos casos caracterizou uma infecção branda e pouco patogênica. A atividade de colinesterases plasmáticas apresentou uma distribuição normal, com uma média geométrica de 0,8333 micromoles/mL e desvio padrão geométrico de 1,7087 µmols/mL. A atividade de colinesterases plasmáticas apresentou diferenças estatísticas significativas entre Falconiformes (0,5705±1,6497 µmols/mL) e Strigiformes (1,0070±1,5620 µmols/mL). Não houve diferenças significativas entre machos ou fêmeas e adultos ou jovens dentre os Falconiformes ou Strigiformes. Falconiformes não hígidos apresentaram valores surpreendentemente mais baixos do que os clinicamente hígidos. Entre os Strigiformes, os espécimes de cativeiro apresentaram valores mais baixos de atividade de colinesterases plasmáticas do que os de vida livre. A atividade de colinesterases plasmáticas foi significativamente diferente entre os animais com hemoparasitos (mediana geométrica = 2,0132 µmols/mL) e sem hemoparasitos (mediana geométrica = 0,8331 µmols/mL). Este estudo contribui com informações relevantes sobre a ocorrência de hemosporídeos em aves de rapina do Estado de São Paulo, alertando as Instituições sobre a necessidade de monitoração destes protozoários sanguíneos. Além disso, contribui com dados inéditos sobre a atividade de colinesterases plasmáticas em rapinantes. / 137 blood samples were collected from 132 different specimen, belonging to seven species of Strigiformes (n=92) and eleven species of Falconiformes (n=45), from September 2008 to July 2009. Samples were submitted to complete hemogram, survey for hemoparasites through evaluation of blood smears, sex identification by PCR and measurement of plasmatic cholinesterases by the method of Ellman (1961). Only seven black-capped-screech-owls (Megascops choliba) were positive for hemoparasites (5,3% of total raptors). There were significative difference according to avian health status; all the clinicaly higid animal were not infected, but 20,4% of animals with clinical desorders presented haemosporidians. Quantitatively, the average parasitemia was 3,8 parasited erythrocytes in 10.000 erythrocytes, a infection rate relatively low. The most of hematologic parameters did not present statistic differences in function of presence or absence of hemoparasites, what in most of the cases characterized a low and not much pathogenic infection. The plasmatic cholinesterase activity presented normal distribution, with geometric average of 0,8333 micromoles/mL and geometric standard deviation of 1,7087 µmols/mL. The plasmatic cholinesterase activity presented statistic differences between Falconiformes (0,5705±1,6497 µmols/mL) and Strigiformes (1,0070±1,5620 µmols/mL). There were not significative differences between males of females and adults or youngs between Falconiformes or Strigiformes. Non-higid Falconiformes presented surprisiling much low values than those clinically higid. Between Strigiformes, the captivity specimens present much lower plasmatic cholinesterase activity values than free ranging animals. The plasmatic cholinesterase activity was signifactively different among animal with hemoparasites (geometric average = 2,0132 µmols/mL) and without hemoparasites (geometric average = 0,8331 µmols/mL). This research contributes with relevant information about the haemosporidian occurence in raptors of State of São Paulo, alerting the Institutions about the necessity of monitorizing haemoprotozoa. Besides that, contributes with unpublished data about the plasmatic cholinesterase activity in raptors.

Submitted by Rosangela Silva (rosangela.silva3@unioeste.br) on 2017-08-30T17:39:39Z No. of bitstreams: 2 Isabella Calvo Bramatti.pdf: 1175071 bytes, checksum: b4b43f726550d831d384392724e6c260 (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) / Made available in DSpace on 2017-08-30T17:39:39Z (GMT). No. of bitstreams: 2 Isabella Calvo Bramatti.pdf: 1175071 bytes, checksum: b4b43f726550d831d384392724e6c260 (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Previous issue date: 2017-02-06 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES / Tamoxifen is classified as a selective estrogen receptor modulator, with much use in the treatment of breast cancer. Quercetin has aroused interest, mainly for its antioxidant action, which may minimize the damage caused by tamoxifen. Due to the lack of studies about the coadministration of quercetin with tamoxifen, the objective of this study was to elucidate the effect upon the cholinergic activity and antioxidante defense. At the study, ovariectomized rats were separated into groups and treated with tamoxifen (5 mg.Kg-1), quercetin (22,5 mg.Kg-1) and the coadministration of tamoxifen (5 mg.Kg-1) plus quercetin (22,5 mg.Kg-1). The hippocampus was isolated and utilized for the determination of acetylcholinesterase and butyrylcholinesterase activity, superoxide dismutase and catalase activity, and the oxidative damage markers (lipid peroxidation and dosage of thiols groups). It was possible observe the oxidant effect of tamoxifen at the hippocampus, where acted like an antagonist at the estrogen receptors, increasing the lipid peroxidation, levels of thiol groups and attenuating catalase activity; in addition to a cholinergic effect, with the decrease of acetylcholinesterase and butyrylcholinesterase activity. When coadministered the quercetin with tamoxifen, it can be seen that at a situation of oxidative stress, the quercetin acts like pro oxidant in the studied. / Tamoxifeno é classificado como um modulador seletivo dos receptores de estrogênio (SERM), sendo muito utilizado no tratamento contra o câncer de mama. A quercetina tem particularmente despertado interesse, principalmente por sua ação antioxidante a qual supostamente poderia vir a minimizar os danos causados pelo tamoxifeno. Devido à falta de estudos sobre a coadministração da quercetina com o tamoxifeno e a ambiguidade sobre a ação de ambos no cérebro, o objetivo deste estudo foi elucidar o efeito sobre a atividade colinérgica e defesa antioxidante. No estudo, ratas ovariectomizadas foram separadas em grupos e tratadas com tamoxifeno (5 mg.Kg-1), quercetina (22,5 mg.Kg-1) e a coadministração de tamoxifeno (5 mg.Kg-1) mais quercetina (22,5 mg.Kg-1). O hipocampo foi isolado e utilizado para a determinação da atividade da acetilcolinesterase, butirilcolinesterase da superóxido dismutase e catalase e dos marcadores de dano oxidativo (lipoperoxidação e dosagem de grupamentos tióis). Foi possível observar a ação oxidante do tamoxifeno no hipocampo, onde agiu como antagonista nos receptores de estrogênio, aumentando a lipoperoxidação, os níveis de tióis e diminuindo a atividade da catalase; além de um efeito colinérgico com a diminuição da atividade da acetilcolinesterase e butirilcolinesterase. Quando coadministrada a quercetina com o tamoxifeno, pode-se observar que em uma situação de estresse oxidativo, a quercetina age como pró-oxidante na dose estudada.

Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / Metabolic syndrome (MetS) is characterized by the presence of set cardiovascular risk factors such as hypertension, hyperglycemia, dyslipidemia and abdominal obesity. This pathology has been widely discussed due to the impact of cardiovascular disease (CVD), has been a concern for public health. In addition to the classic risk factors of this syndrome, has been indicated the presence of a low-grade chronic inflammation in their patients, which is considered a key point in the development of atherosclerosis and CVD. Some inflammatory markers has been used in order to diagnose cardiovascular asymptomatic patients at risk, as the levels of C-reactive protein (CRP) and uric acid and the activity of myeloperoxidase enzyme (MPO). In addition, studies have shown close relation of the purinergic and cholinergic systems in control of the inflammatory process. The ATP molecule has been considered a pro-inflammatory, while adenosine, which is the end product of ATP hydrolysis, appears to play protective action and anti-inflammatory. Acetylcholine (ACh), in turn, performs anti-inflammatory functions to inhibit secretion of cytokines by immune cells. In this context, the objective of this study was to investigate in serum and lymphocytes of 20 patients with MetS, the activity of the enzymes nucleoside triphosphate diphosphohydrolase (NTPDase), ectonucleotídeo pyrophosphatase / phosphodiesterases (E-NPP), adenosine deaminase (ADA), which control ATP and adenosine extracellular levels, and to analyze the activity of acetylcholinesterase (AChE) and butyrylcholinesterase (BuChE) enzymes, which control the extracellular ACh level in order to effect the purinergic and cholinergic systems in patients with inflammatory action MetS. The results showed a decreased activity of the enzymes NTPDase and ADA in lymphocytes from patients with MetS. Moreover, we observed an increase in activity of the E-NPP and ADA in the serum of these patients. In addition, an increase in activity of both cholinesterase AChE and BuChE was observed in lymphocytes and serum, respectively. Finally, patients with MetS showed higher levels of CRP and uric acid as well as increased activity of MPO. Thus, the present results show the presence of an inflammatory state in patients with MetS by both the increase in inflammatory markers classics, and by immunomodulation triggered by purinergic and cholinergic systems. The lower activity of NTPDase in lymphocytes results in increased availability of extracellular ATP to stimulate inflammation and to influence the activity of other enzymes purinergic. Likewise, the high cholinesterase activities results in decreased availability of ACh extracellular, reducing the anti-inflammatory cholinergic effect. Thus, one may indicate that the purinergic and cholinergic systems have important effects in modulating the inflammatory process present in MetS, and the parameters mentioned in this research can useful in clinical medicine, to monitor the disease. / A Síndrome Metabólica (SMet) caracteriza-se pela presença de um conjunto de fatores de risco cardiovasculares, como hipertensão, hiperglicemia, dislipidemia e obesidade abdominal. Essa patologia tem sido amplamente discutida em virtude do impacto das doenças cardiovasculares (DCVs), já sendo uma preocupação em termos de saúde pública. Além dos fatores de riscos clássicos dessa síndrome, indica-se a presença de uma inflamação crônica de baixo grau nos seus portadores, a qual é considerada ponto chave no desenvolvimento de aterosclerose e de DCVs. Alguns marcadores inflamatórios têm sido utilizados com o intuito de diagnosticar pacientes assintomáticos sob risco cardiovascular, como os níveis de proteína C-reativa (PCR) e de ácido úrico, bem como a atividade da enzima mieloperoxidase (MPO). Além disso, pesquisas têm demonstrado estreita relação dos sistemas purinérgico e colinérgico com o controle do processo inflamatório. O ATP tem sido considerado uma molécula pró-inflamatória, enquanto que a adenosina, produto final da hidrólise do ATP, parece desempenhar ações protetoras e anti-inflamatórias. A acetilcolina (ACh), por sua vez, desempenha funções anti-inflamatórias por inibir a secreção de citocinas pelas células imunes. Nesse contexto, o objetivo deste trabalho foi verificar, em soro e linfócitos de 20 pacientes com SMet, a atividade das enzimas nucleotídeo trifosfato difosfoidrolase (NTPDase), ectonucleotídeo pirofosfatase/fosfodiesterases (E-NPP), adenosina desaminase (ADA), as quais controlam os níveis de ATP e adenosina extracelulares, assim como analisar a atividade das enzimas acetilcolinesterase (AChE) e butirilcolinesterase (BuChE), as quais controlam o nível extracelular de ACh, tendo em vista o efeito dos sistemas purinérgico e colinérgico nas ações inflamatórias dos pacientes com SMet. Os resultados obtidos demonstraram uma diminuição da atividade das enzimas NTPDase e ADA em linfócitos de pacientes com SMet. Por outro lado, observou-se um aumento na atividade da E-NPP e ADA em soro desses pacientes. Em adição, um aumento na atividade de ambas as colinesterases AChE e BuChE foi observado em linfócitos e soro , respectivamente. Além disso, os pacientes com SMet apresentaram níveis maiores de PCR e ácido úrico, bem como maior atividade da enzima MPO. Com isso, os resultados deste trabalho evidenciam a presença de um estado inflamatório nos pacientes com SMet tanto pelo aumento dos marcadores inflamatórios clássicos, quanto pela imunomodulação desencadeada pelos sistemas purinérgico e colinérgico. A menor atividade da NTPDase em linfócitos resulta em maior disponibilidade de ATP extracelular para estimular a inflamação, influenciando a atividade das demais enzimas purinérgicas. Da mesma forma, uma maior atividade das colinesterases resulta em menor disponibilidade de ACh extracelular, diminuindo o efeito colinérgico anti-inflamatório. Dessa forma, pode-se indicar que os sistemas purinérgico e colinérgico apresentam importantes efeitos na modulação do processo inflamatório presente na SMet, podendo ser úteis na clínica médica e no monitoramento da patologia.

Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / Type 1 diabetes (T1D) is a disease characterized by the individual's inability to produce the hormone insulin due to destruction of pancreatic β-cells by the immune cells of the organism itself. So far, there is no 100% effective therapy for treating the symptoms of T1D. Current treatments involve constant monitoring of blood glucose levels and regular insulin injections. Inflammatory processes are associated with the development and progression of T1D, and so new therapies involving drugs with anti-inflammatory properties have been the subject of increasing interest in the scientific community. Polyphenols are a class of heterocyclic compounds that include anthocyanins and rosmarinic acid, both known for their antioxidant and anti-inflammatory properties. We studied the effects of two polyphenol rich extracts (cooked potato and rosemary) and a concentrate of anthocyanins in a model of type 1 streptozotocin-induced diabetic rats. The extracts were administered by gavage for 30 days. After this period, the rats were euthanized and we assessed acetylcholinesterase (AChE) activity in lymphocytes and serum butyrylcholinesterase (BuChE) activity, because of the importance of these enzymes as biomarkers of inflammation. The activities of both enzymes were shown to be increased in diabetic rats compared to controls. The cooked potato peel extract and concentrated anthocyanins did not altered AChE activity in lymphocytes, probably due to low bioavailability, while rosemary extract was a potent inhibitor and reverted the activity to normal levels. None of the treatments had any effect on serum BuChE activity. These results support the involvement of inflammatory processes on TD1 pathology and present the rosemary extracts as a promising alternative for future phytochemical therapies for the treatment of inflammatory-related diseases, such as type 1 diabetes. / O diabetes tipo 1 (DT1) é uma doença caracterizada pela incapacidade do indivíduo de produzir o hormônio insulina devido à destruição das células-β pancreáticas pelas células imune do próprio organismo. Ainda não existe uma terapia 100 % eficaz para tratar os sintomas do DT1. Os tratamentos atuais envolvem monitoramento constante dos níveis de glicose do sangue e injeções periódicas de insulina. Os processos inflamatórios estão associados com o desenvolvimento e a progressão do DT1 e, por isso, novas terapias envolvendo fármacos com propriedades anti-inflamatórias têm sido alvo crescente de interesse no meio científico. Os polifenois são uma classe de compostos heterocíclicos dos quais fazem parte as antocianinas e o ácido rosmarínico, conhecidos por suas propriedades antioxidantes e anti-inflamatórias. Neste trabalho, estudamos os efeitos de dois extratos ricos em polifenois batata cozida e alecrim - e de um concentrado de antocianinas em um modelo de ratos com diabetes tipo 1 induzido por estreptozotocina. Os extratos foram administrados por gavagem durante 30 dias. Após, os ratos foram eutanasiados e verificou-se os efeitos do tratamento sobre a atividade da acetilcolinesterase (AChE) de linfócitos e da butirilcolinesterase (BuChE) de soro, devido à importância dessas enzimas como biomarcadores de inflamação. As atividades de ambas as enzimas mostraram-se aumentadas nos ratos diabéticos em relação aos controles. O extrato de casca de batata cozida e as antocianinas concentradas não alteraram significativamente a atividade da AChE em linfócitos, provavelmente devido à sua baixa biodisponibilidade, enquanto o extrato de alecrim foi um potente inibidor dessa enzima. Nenhum dos tratamentos surtiu efeito sobre a atividade da BuChE de soro. Estes resultados reforçam a hipótese inflamatória na patologia do DT1 e apresentam o extrato de alecrim como uma possível terapia secundária para o tratamento de doenças associadas à inflamação, como o diabetes tipo 1.

Um método analítico constituído por extração em fase sólida molecularmente impressa (MISPE) e cromatografia gasosa acoplada à espectrometria de massas (GC-MS) foi desenvolvido para análise de metabólitos dialquil fosfatos (dietil tiosfato - DETP e dietil ditiosfato - DEDTP) em amostras de urina. Um polímero de impressão molecular (MIP) foi sintetizado utilizando-se 4-vinilpiridina como monômero funcional e etileno glicol dimetacrilato como reagente de ligação cruzada. A etapa de condicionamento foi realizada da seguinte forma: 3 mL de acetonitrila, 3 mL de tampão fosfato dibásico 0,1 mol L-1, pH 11,0 e 2 mL de água foram percolados por um cartucho de polipropileno contendo o MIP. A etapa de extração foi executada utilizando 1,0 mL de amostra de urina com pH previamente ajustado para 3,0. Finalmente, os analitos foram eluídos com 3 mL de acetonitrila e derivatizados com uma solução de  2,3,4,5,6-brometo de  pentafluorobenzil a 3% em acetonitrila, a temperatura ambiente durante 1h. A amostra foi analisada por GC-MS. Curvas de calibração analítica para DETP e DEDTP foram construídas utilizando-se uma mistura de urina de diferentes indivíduos voluntários e em seis níveis de concentração. O método foi linear na faixa de  10-500 µg L-1, com r = 0,99 e limite de detecção de 3,0 µg L-1, para ambos os analitos. A precisão intra-dias e inter-dias foram avaliadas com base na porcentagem de desvio padrão relativo (%RSD) e todos os resultados foram inferiores a 15% para ambos os analitos. O método foi preciso, exato, com boa recuperação e robustez. Posteriormente o método foi utilizado para determinar as concentrações de DETP e DEDTP em amostras de urina de ratos expostos a dissulfoton. Além da concentração de dialquil fosfatos, foram determinadas a atividade de colinesterase sanguínea e a incidência de micronúcleos em eritrócitos policromáticos destes mesmos animais, a fim de se estabelecer uma relação entre a dose de exposição ao dissulfon e os parâmetros avaliados. Observou-se que a atividade de colinesterase plasmática não reflete muito bem a correlação entre a dose de exposição e efeito, ao contrário da colinesterase eritrocitária. A concentração de dialquil fosfatos refletiu uma boa correlação com a dose de exposição. Através da frequência de micronúcleos em eritrócitos policromáticos, foi possível observar que, a semelhança de outros praguicidas organofosforados (OF), o dissulfoton é capaz de causar mutagenicidade. / An analytical method constituted by molecularly imprinted solid phase extraction (MISPE) and gas chromatography mass spectrometry (GC-MS) was developed for analyses of benzene metabolites (diethyl thiophosphate - DETP and diethyl dithiophosphate - DEDTP) in human urine samples. A molecularly imprinted polymer (MIP) for DETP was synthesized using 4-vinylpiridine as functional monomer and ethylene glycol dimethacrylate as cross linker. The conditioning step of the MISPE was processed flowing though the MIP cartridge 3 mL of acetonitrile, 3 mL of dibasic phosphate buffer 0.1 mol L−1 pH 11 and 2 mL of water. The extraction step was executed using 1.0 mL of urine sample with pH previously adjusted to 3.0. Finally, the analytes were eluted with 3 mL of acetonitrile and derivatized with 2,3,4,5,6-pentafluorobenzyl bromide 3% at room temperature during 1h. The sample was analyzed by GC-MS. Analytical calibration curves for DETP and DEDTP were constructed using a pool of urine sample and for six levels of concentration. The method was linear from 10 to 500 μg L−1, with r = 0.99 and limit of detection of 3.0 μg L−1, for both analytes. The within-day and between-day precisions were evaluated (as percentage of RSD) and all results were < 15% for both analytes. The method was accurate, with good recovery and robustness. Later this method was used to determine the concentrations of DETP and DEDTP in urine samples of rats exposed to disulfoton. Besides the concentration of dialkyl phosphates, it was determined blood cholinesterase activity and the incidence of micronucleated polychromatic erythrocytes in the same animals, in order to establish a relationship between the dose of exposure and the evaluated parameters. It was observed that the plasma cholinesterase activity did not reflect very well the correlation between exposure dose and effect, unlike the erythrocyte cholinesterases. The concentration of dialkyl phosphates gave a good correlation with exposure dose. By the frequency of micronucleated polychro-matic erythrocytes was possible to observe that, similarly to other organophosphates pesticides (OPs), disulfoton can causes mutagenicity. / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES

Submitted by Sandra Pereira (srpereira@ufrrj.br) on 2016-08-01T17:07:57Z No. of bitstreams: 1 2011 - Juliana Mariano Torres.pdf: 1156662 bytes, checksum: 6ae713d0002e13c804fc2eba73bd8f5b (MD5) / Made available in DSpace on 2016-08-01T17:07:57Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2011 - Juliana Mariano Torres.pdf: 1156662 bytes, checksum: 6ae713d0002e13c804fc2eba73bd8f5b (MD5) Previous issue date: 2011-07-22 / Conselho Nacional de Desenvolvimento Cient?fico e Tecnol?gico, CNPq. / The increase in life expectancy is a worldwide occurrence that shows the relative success of public health politics, and Brazil is among the countries where people are living longer and in better physical health. But the increase in life expectancy has a negative effect: the appearance of degenerative diseases typical of old age, including several forms of dementia, like Alzheimer?s Disease (AD) that is certainly the most important. It is an irreversible and progressive disease characterized by neuronal deterioration that results in loss of cognitive functions such as memory, communication skills, judgment and reasoning. Donepezil, rivastigmine and galantamine are medicines used for the treatment of AD and act reversibly inhibiting the acetylcholinesterase (AChE). Evidences suggest that the enzyme butyrylcholinesterase (BChE), closely related to AChE, plays a significant role in AD because it is involved in neural functions such as cholinergic co-regulation and non-cholinergic neurotransmission. The aim of this research is to provide new substances with anticholinesterase action by using ?-carboline derivatives from the natural product harmane and carry out a kinetic study to determine the inhibition profile of the enzymes AChE e BChE, which could help in the discovery of new compounds which could be useful in the treatment of AD. Firstly, a screening was carried out with seven ?-carboline derivatives. In a second stage, a kinetic investigation, employing Ellman?s method, was run with these compounds and all of them presented high anticholinesterase action for both AChE and BChE. All seven derivatives presented a non-competitive reversible inhibition. / Torres, Juliana Mariano. ESTUDO CIN?TICO DA ATIVIDADE ANTICOLINESTER?SICA DE DERIVADOS -CARBOL?NICOS DO PRODUTO NATURAL HARMANA. 2011. Disserta??o (mestrado em Qu?mica Org?nica). Instituto de Ci?ncias Exatas, Departamento de Qu?mica, Universidade Federal Rural do Rio de Janeiro, Serop?dica, RJ, 2011. O aumento da expectativa de vida ? um fen?meno mundial que mostra o relativo sucesso de pol?ticas de sa?de p?blica, e o Brasil se inclui entre os pa?ses em que as pessoas est?o vivendo por mais tempo e em condi??es melhores de sa?de. No entanto, o aumento da expectativa de vida tem como efeito negativo o aparecimento de doen?as degenerativas, t?picas de idades mais avan?adas, incluindo-se as v?rias formas de dem?ncia e entre estas, a mais importante ?, sem d?vida, a Doen?a de Alzheimer (DA), patologia irrevers?vel e progressiva caracterizada pela deteriora??o neuronal que resulta em perda de fun??es cognitivas, tais como mem?ria, capacidade de comunica??o, julgamento e racioc?nio. Para o tratamento da DA s?o utilizados f?rmacos como o donepezil, galantamina e rivastigmina, os quais agem inibindo revers?velmente a acetilcolinesterase (AChE). Evid?ncias sugerem que a enzima butirilcolinesterase (BChE), intimamente relacionada com a AChE, tem um papel significante na DA, uma vez que est? envolvida em fun??es neurais tais como a corregula??o da neurotransmiss?o colin?rgica e n?o-colin?rgica. Esta pesquisa pretendeu estudar novas subst?ncias com a??o anticolinester?sica utilizando derivados -carbol?nicos do produto natural harmana, bem como fazer um estudo cin?tico a fim de descobrir qual o perfil de inibi??o das enzimas AChE e BChE, a fim de buscar novos compostos que poderiam ser ?teis no tratamento dos sintomas da DA. Desta forma, foi efetuada preliminarmente uma triagem com 7 derivados -carbol?nicos e posteriormente foi realizada uma investiga??o cin?tica com estes compostos, uma vez que, todos apresentaram alta a??o anticolinester?sica tanto para AChE quanto para BChE. A cin?tica enzim?tica foi estudada segundo o m?todo de Ellman. Contudo, observou-se que todos os 7 derivados apresentaram uma inibi??o revers?vel n?o competitiva.