Made available in DSpace on 2018-08-01T23:27:09Z (GMT). No. of bitstreams: 1 tese_10801_Divulgação de Defesa-Lorena Ziviani.pdf: 224268 bytes, checksum: f8656faf87a05e682c596aa01c8b3597 (MD5) Previous issue date: 2017-04-03 / As espécies pertencentes ao gênero Astyanax são, em geral, similares morfologicamente e sua separação tem sido historicamente difícil. Atualmente, a monofilia do gênero é amplamente rejeitada. Além disso, foram observadas variações morfológicas entre populações de Astyanax intermedius, provenientes de drenagens costeiras do norte do Espírito Santo e rio Mucuri/BA. Além dos caracteres morfológicos tradicionais, características dos gametas mostram grande variabilidade e têm sido estudadas em Characiformes. Sendo assim, nesse estudo comparou-se a morfologia e ultraestrutura dos ovócitos de seis populações de piabas, tradicionalmente identificadas como A. cf. intermedius, provenientes de quatro drenagens costeiras do norte do Espírito Santo e do sul da Bahia, utilizando técnicas de microscopia de luz e microscopia eletrônica de varredura. Fêmeas sexualmente maduras foram coletadas através de métodos tradicionais entre os meses de novembro de 2015 a janeiro de 2016. As análises morfométricas dos gametas foram realizadas utilizando o software Image-Pro Plus. O diâmetro dos ovócitos e a profundidade e diâmetros interno e externo da micrópila não presentaram alterações significativas, exceto a altura da zona radiata, que aumentou significativamente na população do rio Mucuri (p<0,05). Análises histoquímicas de carboidratos mostraram características ovocitárias similares entre as populações. A superfície da região micropilar e microvilosidades presentes na membrana plasmática apresentaram variações morfológicas entre as populações, entre indivíduos de uma mesma população, e ainda em um mesmo indivíduo. As variações observadas podem estar relacionadas à plasticidade fenotípica e/ou polimorfismo. Além disso, a população do rio Mucuri possivelmente compreende uma espécie distinta ainda não descrita. No entanto, estudos moleculares, citogenéticos e morfológicos se fazem necessários, a fim de contribuir com a elucidação do status taxonômico entre as populações de A. cf. intermedius.

Orientador: Carmem Silvia Fontanetti Christofoletti / Banca: Gisela de Aragão Umbuzeiro / Banca: Juliana da Silva / Banca: Denis Moledo de Souza Abessa / Banca: Maria Izabel Souza Camargo / Resumo: O estuário de Santos já foi um exemplo de degradação ambiental, porém medidas dos órgãos responsáveis pelo saneamento ambiental resultaram em melhoria na qualidade das águas, mas os sedimentos e a biota continuam contaminados. Os moluscos bivalves são bons bioindicadores de poluição ambiental, devido a seu hábito séssil e filtrador, e à capacidade de acumular diversas substâncias. Mytella falcata é uma espécie comum em regiões tropicais, encontrada semi-enterrada no sedimento, podendo fornecer dados sobre as condições do mesmo. Neste trabalho, bivalves da espécie Mytella falcata residentes em três pontos do estuário de Santos com diferentes níveis substâncias potencialmente poluidoras, foram analisado a fim de caracterizar a população residente nestes pontos. As técnicas utilizadas foram o ensaio do cometa, o teste do micronúcleo e a análise histopatológica das brânquias, incluindo técnicas histoquímicas, ultramorfológica e ultra-estrutural. As análises demonstraram que a espécie pode ser para avaliar danos genotóxicos, mutagênicos e citotóxicos. Utilizando o ensaio do cometa os indivíduos dos pontos B e C mostraram níveis significativamente maiores de danos ao DNA quando comparados aos animais do ponto A. Quanto a análise dos micronúcleos os animais de todos os pontos apresentaram resposta muito semelhante. A morfologia dos filamentos branquiais desta espécie mostrou-se muito similares a de espécies próximas e na análise histopatológica foram observadas alterações nos pontos B e C; as principais foram o desprendimento do epitélio da região lateral do filamento, modificação na morfologia deste epitélio, aumento na produção de muco e processos envolvidos na eliminação de células e renovação das mesmas. Os dados obtidos mostraram que todas as técnicas resultaram no diagnóstico de que os animais residentes no ponto... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: The Santos estuary which is located in São Paulo, Brazil, was considered one of the major examples of coastal degradation. Nowadays the quality of this environment has improved, but the sediment and the biota are still contaminated. Bivalve mollusks are sedentary, filter-feeding invertebrates that have been widely used to monitor aquatic habitats. Mytella falcata is very common in tropical areas and lives buried in the sediment. In this study, the mussel Mytella falcata, from three sites of Santos estuary, were analyzed; the three sites presented different levels of harmful substances. The aim of this analysis was to characterize the animals that live in this area. The techniques applied were the comet assay, micronucleus test and histopathological analysis of the gill filaments, including the histochemistry and scanning and transmission electron microscopy. Laboratory tests demonstrated that the species can be used as bioindicator. The analyzed specimens from sites B and C, showed higher levels of DNA damage when compared to those from site A. The micronucleus test presented no difference between the three sites. Mytella falcata gill filaments showed high similarity to other Mytilidae species. The histopathological analysis demonstrated some alterations in sites B and C. The major alterations were the detachment of epithelial cells from the lateral surface, changes in the morphology of this epithelium, increase in mucous production and processes involved in cell elimination and renovation. The damages found in animals from sites B and C were considered as adaptations to the exposition to pollutants. The lack of difference between animals from sites B and C were related with the distance between animals and sediment. In conclusion, this study confirm that sediments act as a deposition site for pollutants and alert the authorities for the manner of dealing with this sediment... (Complete abstract click eletronic access below) / Doutor

A reabsorção dentária fisiológica em dentes decíduos representa um fenômeno natural e programado pelo organismo, seguido pela substituição da dentição temporária pela permanente. Para estudar os mecanismos e moléculas desencadeadoras envolvidas na indução da reabsorção fisiológica foram utilizados caninos e incisivos decíduos de gatos com dois meses de vida. O caráter programado da reabsorção dentária fisiológica motivou o estudo da participação da apoptose neste processo e sua marcação positiva foi evidenciada pela técnica TUNEL modificada nos cementoblastos, fibroblastos do tecido pulpar, do ligamento periodontal e nos restos epiteliais de Malassez dos dentes decíduos. Uma das proteínas envolvidas na indução da apoptose em eventos fisiológicos, a proteína morfogenética óssea 4 (BMP-4), foi detectada nos cementoblastos e células do ligamento periodontal do dente decíduo por hibridização in situ com radioisótopos. Topograficamente observou-se uma similaridade entre a expressão de Bmp-4 e a técnica TUNEL modificada em cortes idênticos. Uma intensa marcação de Bmp-4 foi também observada nos ameloblastos do dente permanente. Para a análise da participação dos clastos na rizólise, foi avaliada via hibridização in situ, a expressão de gelatinase B, uma metaloproteinase da matriz extracelular sintetizada por estas células. Os resultados encontrados indicam a morte celular programada como o provável “gatilho biológico” da reabsorção dentária fisiológica e a proteína BMP-4 como uma das moléculas indutoras da apoptose na reabsorção dentária fisiológica, por mecanismo autócrino e parácrino. A marcação de gelatinase B nos clastos presentes na reabsorção foi a mesma localizada nos clastos, da reabsorção óssea, indicando semelhança entre estas células. / The physiologic tooth resorption occurs as a natural and programmed phenomenon and results in the shedding of deciduous teeth. The resorptive process is not continuos, but alternates with periods of repair. To study the activators and effectors that trigger the physiologic tooth resorption, we used cat deciduos incisors and canines. These animals were two months old and showed different stages of tooth resorption. We analysed the participation of apoptosis by TUNEL staining in physiologic tooth resorption because of it programmed pattern. Some cementoblasts showed positive in TUNEL staining along the primary roots at the same and at the opposite side of dental follicle. Many apoptotic positive cells were found in periodontal ligament that propably were fibroblasts, and some groups of cells suggesting epithelium rests of Malassez. Some apoptotic pulp cells were also identified. In situ hybridization was used to detect Bmp-4 mRNA on tissues sections using [35S] – UTP-labeled riboprobes as described by VAINIO et al. in 1991. We detected in primary tooth, the expression of Bmp-4 mRNA in cementoblasts and in some cells in the periodontal ligament. Indeed we found this molecule in ameloblasts of permanent germ. We found strong correlation between the results obtained by TUNEL and the expression of Bmp-4. Some apoptotic cells in primary tooth were also expressing Bmp-4. To analyse the distribution of clasts in physiological resorption we used gelatinase B, matrix metalloproteinase, in situ hybridization in identical sections. We observed abundant clasts expressing gelatinase B mRNA in radicular surface and the same expression inside of the clasts in bone resorption. These results imply that programmed cell death could trigger the physiological tooth resorption and the expression of molecule Bmp-4 mediates apoptosis by autocrine and paracrine control. The same expression of gelatinase B by clasts associated with bone and tooth resorption indicate similarity between these cells. These results were analysed in microscope with bright and dark field and the images were digitalized.These findings contribute to further understand tooth resorption mechanism, to develop specific terapies to control inflammatory tooth resorption and to accelerate or paralyse the physiological tooth resorption in special clinical situations.

Submitted by Jorge Silva (jorgelmsilva@ufrrj.br) on 2016-10-11T19:43:22Z No. of bitstreams: 1 2014 - Maria Luiza Ribeiro de Oliveira.pdf: 7923335 bytes, checksum: b4bf6ee6e3e8616e057c10373b9ec475 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-10-11T19:43:22Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2014 - Maria Luiza Ribeiro de Oliveira.pdf: 7923335 bytes, checksum: b4bf6ee6e3e8616e057c10373b9ec475 (MD5) Previous issue date: 2014-09-26 / CAPES / The aim of this study was to morphologically characterize the external appendages (buccula, rostrum; stridulatory groove; scutellum of male legs and genitalia of females) Triatoma carcavalloi, Triatoma circummaculata and Triatoma rubrovaria compare the morphology and morphometry of exoc?rios bodies and opercula of eggs through optical and scanning electron microscopy, besides examining the bionomic characteristics of T. carcavalloi in laboratory conditions, providing subsidies to assess the vectorial capacity of this species. Morphostructural the differences of adults were illustrated in scutellar region where only one species, T. circummaculata, presented in the harth form median depression. In the analyzes of the cephalic region, stridulatory groove is in the form of "U" shaped and T. circummaculata "V" T. carcavalloi and T. rubrovaria the buccula and T. carcavalloi described how to T. rubrovaria "U" and T. circummaculata "V". Already the rostrum of T. carcavalloi, T. circummaculata and T. rubrovaria presented two side slits 1 + 1 at the apex. Were analyzed and highlighted significant differences in the length, width and diameter of the body and lid of the eggs of T. rubrovaria, T. carcavalloi and T. circummaculata. In the femurs of the legs of the three species, in both sexes a pair of subapical denticles were found. The spongy pits were found only in males, tibia of fore and middle legs. Regarding the biology of T. carcavalloi, the average incubation period of the eggs in T. carcavalloi was 22.7 days. The largest number of eggs / female / week was observed during the warmer months and the eggs that failed to hatch were fertile. The first day of blood meal was 3.13 days after hatching, on average. The intermoult period N1-N2 averaged de18,52 days; N2-N3 was 62.77 days; N3-N4 was 86.93 days; N4-N5 and N5 was 119.05 days, adult was 193.43 days. The overall average of feeds throughout the nymphal development was 13.4. The results achieved for starvation resistance indicated that the nymphs of 3rd, 4th and 5th stages have higher resistance than adults, and in this case the males were less resistant than females. The highest mortality rate was recorded in N3 (22.2%). The median survival was 25.6 weeks for adultos.O total life cycle was long, averaging 503.4 dias. A general evaluation of the results showed that in all studied morphological characters there were significant differences in all three species, putting each species in its specific status. However, the species that differs in the largest number of features, particularly the size of the structures is T. circummaculata. The data obtained in addition to expanding the knowledge of T. carcavalloi bion?mico contribute to the assessment of the possible role of this species in the transmission of T. cruzi. / O objetivo deste trabalho foi caracterizar morfologicamente os ap?ndices externos (b?cula, rostro; sulco estridulat?rio; escutelo de machos, patas e genit?lia de f?meas) deTriatoma carcavalloi, Triatoma circummaculata e Triatoma rubrovaria, comparar a morfologia e a morfometria dos exoc?rios dos corpos e op?rculos dos ovos atrav?s da microscopia ?tica e eletr?nica de varredura, al?m de examinar as caracter?sticas bion?micas de Triatoma carcavalloi em condi??es de laborat?rio, fornecendo subs?dios para avaliar a capacidade vetorial dessa esp?cie. Foram ilustradas as diferen?as morfoestruturais dos adultos na regi?o escutelar onde apenas uma esp?cie, T. circummaculata, apresentou a forma codiforme na depress?o mediana. Nas an?lises da regi?o cef?lica, o sulco estridulat?rio ? em forma de ?U? em T. circummaculata e em forma de "V" em T. carcavalloi e T. rubrovaria, as b?culas de T. carcavalloi e T. rubrovaria apresentaram a forma de ?U? e T. circummaculata de ?V?. J? o rostro de T. carcavalloi, T. circummaculata e T. rubrovaria apresentaram duas fendas laterais 1+1 no ?pice. Foram analisadas e evidenciadas diferen?as significativas no comprimento, largura e di?metro do corpo e do op?rculo dos ovos de T. rubrovaria, T. carcavalloi e T. circummaculata. Nos f?mures das patas das tr?s esp?cies, em ambos os sexos foram encontrados um par de dent?culos subapicais. As fossetas esponjosas foram encontradas somente nos machos, nas t?bias das patas anteriores e medianas. Em rela??o a biologia de Triatoma carcavalloi, o per?odo m?dio de incuba??o dos ovos em T. carcavalloi foi de 22,7 dias. O maior n?mero de ovos / f?mea /semana foi observado durante os meses mais quentes e os ovos que n?o eclodiram eram f?rteis. O primeiro dia de repasto sangu?neo foi de 3,13 dias ap?s a eclos?o, em m?dia. O per?odo de intermuda N1-N2 foi em m?dia de18,52 dias; N2-N3 foi 62,77 dias; N3-N4 foi 86,93 dias; N4-N5 foi 119,05 dias e N5-adulto foi 193,43 dias. A m?dia geral de alimenta??es durante todo o desenvolvimento ninfal foi de 13,4. Os resultados logrados para resist?ncia ao jejum indicaram que as ninfas de 3?, 4? e 5? est?dios apresentam maior resist?ncia do que os adultos, e neste caso os machos foram menos resistentes do que as f?meas. A taxa de mortalidade mais alta foi registrada em N3(22,2%). A sobreviv?ncia m?dia foi de 25,6 semanas para os adultos.O ciclo de vida total foi longo, com m?dia de 503,4 dias.Uma avalia??o geral dos resultados apontou que em todos os caracteres morfol?gicos estudados houveram diferen?as significantes nas tr?s esp?cies, colocando cada esp?cie em seu status espec?fico. Entretanto, a esp?cie que difere em maior n?mero de caracter?sticas, principalmente no tamanho das estruturas ? Triatoma circummaculata. Os dados obtidos al?m de ampliar o conhecimento bion?mico de Triatoma carcavalloi contribuem para a avalia??o de uma poss?vel participa??o desta esp?cie na transmiss?o do T. cruzi.

Este trabalho trata do desenvolvimento de um equipamento de desbastamento iônico aplicado ao afinamento de amostras para análise com a técnica de microscopia eletrônica de transmissão (MET). A técnica de MET é uma das mais importantes para a caracterização da microestrutura de praticamente todas as classes de materiais sólidos. Contudo, esta técnica requer amostras suficientemente finas (espessuras típicas da ordem de 100 nm) para que os elétrons transmitidos proporcionem informação relevante da microestrutura. Com exceção do sistema de vácuo, todos os demais componentes do equipamento (fonte de íons, câmara de vácuo, fonte de alta tensão e suporte mecânico das amostras) foram construídos na UFRGS. O equipamento foi testado através da preparação de amostras de silício. As amostras obtidas apresentam áreas de observação amplas e suficientemente finas permitindo uma caracterização microestrutural detalhada mesmo com feixes de elétrons acelerados com potencial de 120 kV. Além disso, os valores de taxa de desbaste em torno de 1,5 mm/h foram obtidos em amostras bombardeadas com íons de Ar+ acelerados com um potencial de 6 kV. Tais resultados mostram que o equipamento tem uma performance semelhante a um equipamento comercial A segunda contribuição do trabalho foi a de introduzir um estudo sistemático sobre a formação de camadas amorfas e a produção de átomos auto intersticiais dentro da região cristalina das amostras de silício. Trata-se de um assunto atual pois tais efeitos ainda não são bem conhecidos. Apesar do estudo ter sido realizado em um material específico (Si), os resultados obtidos podem ser aproveitados como modelo para outros materiais. A formação de camadas amorfas foi caracterizada em função dos parâmetros: ângulo de incidência e energia do feixe de íons de Ar+ e temperatura da amostra durante a irradiação. A produção e/ou injeção de átomos auto intersticiais na região cristalina foi estudada em função do ângulo de incidência e da energia do feixe de íons. Os resultados mostram que a espessura da camada amorfa cresce com o aumento da energia e do ângulo de incidência do feixe e com a diminuição da temperatura do alvo. A taxa de produção de átomos intersticiais dentro da região cristalina apresenta um máximo para ângulos em torno de 15° independentemente da energia do feixe de íons.

Charles Hansen propôs descrever a solubilidade em três parâmetros: um de dispersão, um polar e outro de ligações de hidrogênio, que podem ser obtidos a partir dos parâmetros de solubilidade de outras substâncias de forma gráfica. Os parâmetros dos solventes, assumidos como coordenadas cartesianas, são analisados em um algoritmo computacional de ajuste de função para obter os parâmetros do soluto e uma esfera de solubilidade que engloba todos os solventes que solubilizam o soluto. Sabe-se que, variações de temperatura do sistema não afetam de forma relevante os valores dos parâmetros de solubilidade, mas também se sabe que um aumento de temperatura pode aumentar a quantidade solubilizada de um soluto e assim, solventes antes considerados maus podem se converter em bons solventes. Com isso, este trabalho visou avaliar os parâmetros de solubilidade de Hansen de dois solutos, ácido esteárico e palmítico, em 20 diferentes solventes puros e 10 misturas de solventes, por meio de sua metodologia, aprimorada com o uso da microscopia óptica com controle de temperatura. Tal modificação visou determinar a temperatura de saturação dos solutos em diferentes solventes e assim encontrar um patamar de temperatura ótimo de trabalho para se obter uma proporção igualitária entre bons e maus solventes que é uma condição que favorece a obtenção de parâmetros e raio de solubilidade mais precisos. Os resultados obtidos pela microscopia (ensaios dinâmicos) apresentaram bastante similaridade com a metodologia tradicional (ensaios estáticos). Ambos ensaios encontraram para o ácido palmítico que a uma temperatura de 22 °C obtém-se quantidades equilibradas de bons e maus solventes. Para o ácido esteárico, esta temperatura foi de 28 °C nos ensaios estáticos e 31 °C nos ensaios dinâmicos. Pode-se perceber que nestas condições as quantidades de bons e maus solventes foram próximas, o que propiciou um ajuste e obtenção de parâmetros de solubilidade mais precisos. Pode-se constatar o aumento do raio de solubilidade e uma diminuição do número de anomalias com o aumento da temperatura. Diante dos resultados obtidos, foi possível afirmar que o aprimoramento sugerido pode substituir os ensaios propostos pela metodologia de Hansen trazendo ganhos de tempo decorrido de análise e em precisão do ajuste. Portanto, sugere-se que a metodologia de Hansen seja executada nas temperaturas de 31 °C para o ácido esteárico e 22 °C para o ácido palmítico. / Charles Hansen proposed to describe the solubility in three parameters: a dispersion, a polar and another of hydrogen bonding parameters, which can be graphically obtained from the solubility parameters of other substances. The solvents parameters, assumed as Cartesian coordinates, are analyzed in a computational function adjustment algorithm and a solubility sphere that encompasses all solvents that solubilize the solute. Variations in temperature of the system do not significantly affect the values of the solubility parameters, but an increase in temperature can increase the solubilized amount of a solute. Consequently, solvents previously considered bad may become good solvents. The aim of this work was to evaluate the Hansen solubility parameters by means of its methodology in 20 different pure solvents and 10 solvent mixtures, improved with the use of optical microscopy with temperature control. The purpose of this modification was to determine the saturation temperature of the solute in different solvents and to find an optimum working temperature level to obtain similar amounts of good and bad solvents, which is a condition that favors the achievement of more precise parameters and solubility radius. The results obtained by the microscopy (dynamic tests) have presented great similarity with the traditional methodology (static tests). Both tests found that at 22 °C, balanced amounts of good and bad solvents are obtained for palmitic acid. For stearic acid, it was found this condition at 28 °C for static tests and 31 °C for dynamic tests. It could also be noticed that it is possible to find a temperature range in which the amounts of good and bad solvents are similar. It also allowed an adjustment and obtaining of parameters of more precise solubility. It was possible to verify the increase in solubility radius and decrease in the number of anomalies with increasing temperature. From the obtained results, it was possible to affirm that the suggested improvement can replace the tests proposed by the Hansen methodology, carrying time gains from analysis and accuracy of the adjustment performed in the computational stage. Therefore, it is suggested that Hansen methodology be performed at 31 °C for stearic acid and 22 °C for palmitic acid.

Através de um hamiltoniano efetivo baseado no tratamento de NAMBU POT.90 para o BCS, no qual incluímos além do emparelhamento monopolar o emparelhamento quadrupolar, discutimos a relação entre esse modelo e o modelo de bósons interagentes. Uma aplicação e feita a cadeia o (6) do IBM, que corresponde ao limite GAMA-instável do modelo de bohr. As dificuldades encontradas e uma possível generalização para o modelo são discutidas. / The nambu mechanism for BCS theory is extended with inclusion of quadrupole pairing in adition to the usual monopole pairing. An effective Hamiltonian is constructed and its relation to the IBM is discussed. We discussed the faced difficulties and a possible generalization of the model.

A pesar de que todavía no existe un documento legal que exija el control microbiológico de superficies, en la mayoría de ambientes del sector alimentario, cada vez más, el sector alimentario es consciente de la importancia que tiene verificar el plan de limpieza y desinfección. Así, los programas de limpieza y desinfección se diseñan con el objetivo de reducir, y en algunos casos, eliminar la carga bacteriana y restos de materia orgánica e inorgánica de las superficies alimentarias. De esta forma, se pretende minimizar el riesgo de contaminación cruzada para garantizar un producto seguro y de calidad. Actualmente, un factor a considerar en el diseño del plan de higienización es la eliminación de unas estructuras denominadas biofilms, las cuales, no se habían tenido en consideración hasta que no se han desarrollado sistemas que permiten realizar su detección.Tanto es así que en los últimos años ha ido creciendo el interés en la investigación, desarrollo y/o mejora de técnicas rápidas, fiables y sencillas para evaluar la contaminación de superficies. Sin embargo, el conocimiento acerca de su validez en el uso industrial práctico es todavía escaso. Este trabajo describe y compara técnicas tradicionales y rápidas para evaluar la contaminación microbiológica en superficies y la formación de biofilms en condiciones experimentales, especialmente este estudio se ha llevado a cabo con microorganismos alterantes y patógenos como L. monocytogenes y posteriormente y con la experiencia adquirida, se ha llevado a cabo un estudio de monitorización y establecimiento de límites críticos en una industria alimentaria. Además, el trabajo destaca la importancia de aislar los microorganismos del ambiente industrial y las posibilidades y perspectivas de futuro para utilizar las técnicas descritas en el ambiente industrial como herramientas de verificación de la limpieza y control de superficies.Por otra parte, este trabajo recoge la experiencia adquirida durante tres meses en el extranjero en la cual se evaluó la eficacia distintas sustancias antimicrobianas sobre piel de animales para su posible implantación dentro de los métodos de descontaminación de canales que se están regulados en Estados Unidos de América. / Despite there is not a legal document demanding a microbiological control of surfaces, the concern on the importance of monitoring its hygiene sanitation is growing among most of alimentary industries. Consequently, most sanitation programs are designed to reduce, or even eliminate, the microbial contamination, and organic food debris of food surfaces. This measure is meant to minimize the recontamination risk to guarantee a safety product. Nowadays, a factor to take into account to design sanitation programs is a microbial community called biofilm which was omitted in the past until efficient tools to detect it were developed.Therefore there is growing interest in research and development of novel tools to study, detect, and characterize microbes and biofilms in industrials environments. However, knowledge about their validity in practical industrial use is still scarce. This dissertation describes and compares traditional and rapid methods used to evaluate surface microbial contamination in laboratory conditions, later - using the acquired experience - a study of monitoring and microbiological criteria for food industry has been implemented. In addition the study addresses the importance of isolating microorganisms from industrial environment in order to reach more effective sanitation programs.On the other hand, this dissertation describes the experience acquired during several months in the United States of America. During this research stage, the efficacy of several decontamination substances was evaluated on animal hides for its implementation in the regulated American decontamination carcasses.

L'objectiu principal d'aquesta tesi és el desenvolupament d'una nova eina de caracterització local, basada en tècniques de microscòpia d'escombrat, que permeti estudiar la propagació de la llum en medis de guiat òptic. Aquest nou microscopi s'anomena microscopi òptic de camp proper (SNOM). L'aplicació d'aquest nou instrument a diferents estructures i dispositius òptics integrats ha permès obtenir informació del comportament de la propagació de la llum en funció dels paràmetres del procés tecnològic. La informació que és pot obternir es pot separar en dues parts: una caracterització topogràfica que permet estudiar l'estructura morfològica del dispositiu (rugositat de la superfície, dimensions geomètriques dels dispositius, etc) amb gran resolució (~nm), i sense malmetre la mostra; per altra banda, capturant les ones evanescents presents a la superfície de l'estructura, s'estudia la propagació modal de la llum a través del dispositiu, amb una resolució per sota del límit de difracció, essent l'única tècnica que permet aquest tipus de caracterització. Addicionalment s'obté la l'índex de refracció efectiu de propagació per la guia, i la mesura del paràmetre de decaïment del camp evanescent. El microscopi s'ha construït al propi laboratori, i és del tipus "stand-alone", perfectament compatible amb un banc òptic de mesura. Els rangs del microscopi són de 300mmx150mm en el pla de la mostra, i de 5mm verticalment. El control de la distància punta-mostra és del tipus "tuning fork shear force control".El tipus de mostres estudiades es basen en la tecnologia de silici. Primer s'han estudiat dispositius basats en guies de nitrur de silici d'estructura en esglaó, amb un nucli de 200nm. S'ha estudiat la distribució modal en funció de l'amplada de la guia, i s'ha determinat l'índex efectiu de propagació. Finalment s'ha caracteritzat l'atac Reactive Ion Etching per obtenir esglaons < 10nm.A continuació s'han estudiat dispositius basats en l'estructura ARROW, del tipus multicapa, amb un nucli ~3mm. S'ha determinat la condició de propagació monomode, s'ha avaluat el camp evanescent vertical i lateral de guies rectes, s'ha estudiat la unió en Y d'un interferòmetre Mach-Zehnder, i finalment s'ha mesurat a través del camp evanescent, la longitud d'acoblament d'un acoblador direccional.Finalment, la última part de la tesi s'ha dedicat a explorar l'ús de diferents tècniques litogràfiques per modificar guies microfabricades de forma estàndard, per tal d'obtenir dispositius nous i de menors dimensions. Les guies modificades són guies de nitrur de silici. La primera tècnica estudiada és una combinació de litografia Làser i atac químic, i s'ha aconseguit visualtizar un nou comportament en aquestes guies, la conversió de mode TE a TM. La segona tècnica estudiada és una combinació de litografia AFM i atac RIE, i s'ha determinat les condicions d'atac per provocar canvis significatius en la propagació de la llum / The main objective of this thesis is to develop a new instrument, a Scanning Near-Field Optical Microscope (SNOM), based on scanning microscopy techniques, for the characteritzation of optical guiding devices. Applied to different integrated optical structures and devices, information on the light propagation as a function of technological parameters will be obtained.The obtained information can be separated in two branches: first, a topographic characterization, which allows to study the morphology of the structure (surface roughness, geometric dimensions, etc) with a resolution below 1nm without any special preparation of the sample; and second, an optical characterization which allows to study the light propagation with a resolution below the classical diffraction limit. By picking up the evanescent waves presents on the surface of the optical guiding devices the modal propagation is visualized, being the unique technique allowing such measurement. Also the decay length of the evanescent field is characterized, as well as the effective refractive index of the structure. The home-made built microscope is a stand-alone design, fully compatible with a standard optical bench for the characterization of optical waveguiding devices. The ranges of the microscope are 300mmx150mm in the plane and 5mm vertical, and the tip-sample distance control is based on tuning fork shear force control. Based on silicon technology, two different waveguide structures has been studied. The first one is a silicon nitride based rib waveguides, with a thin core of about 200nm The modal propagation depending on the width of the structure is characterized, as well as the evanescent field. Finally, the Reactive Ion Etching used to make the rib has been teste to produce steps below 10nm. The second structure is known as ARROW structure, which is a multilayer structure with a core similar to that of a fiber (~3mm). In this case the single mode propagation condition has been determined, and the vertical and lateral evanescent field have been measured. A Y-branch of an interferometer has been also studied, and finally the coupling length of a directional coupler has been experimentally determined.The last part of the thesis is devoted to the modification of standard microfabricated optical waveguides by new lithographic techniques, in order to obtain new and smaller devices. The first technique is a combination of laser lithography and chemical etching, and by modifying a standard rib silicon nitride waveguide is has been observed a polarization conversion (TE-TM conversion). The second technique is a combination of AFM-lithography and RIE, which allows nanometer-scale modifications. The results of this new technique shows whether the modification can significantly changes the propagation conditions or not

La superficie articular es un indicador pronóstico del éxito del implante osteocondral criopreservado y podría constituirse en parámetro para el control de la calidad del proceso de almacenamiento de este tipo de tejidos. Objetivos: fotografiar la superficie articular de injertos osteocondrales frescos, crear un sistema de clasificación de los principales aspectos morfológicos de la superficie condral de los injertos y determinar los cambios que en ellos produce la congelación a - 40 ºC y la criopreservación a -196 ºC según la escala diseñada. Metodología: se empleó un microscopio electrónico de barrido ambiental para fotografiar la superficie condral sin técnicas de fijación. Se clasificaron los principales aspectos morfológicos y se validó la escala según variabilidad inter e intra-observador. Las imágenes de los injertos congelados y criopreservados se obtuvieron siguiendo la misma metodología. Conclusiones: el microscopio de barrido ambiental es una herramienta útil para fotografiar la superficie de injertos osteocondrales frescos, congelados y criopreservados. La superficie articular de los injertos frescos no es totalmente lisa, hallándose diversos aspectos clasificables en un sistema cualitativo para la detección de cambios en situaciones experimentales o patológicas. La superficie del injerto congelado presenta aumento de colinas y protuberancias al compararlos con los injertos frescos y criopreservados, así como un mayor número de lagunas condrocíticas vacías. La superficie del injerto criopreservado muestra aumento de colinas y protuberancias al compararlos con los injertos frescos. Los condrocitos del tejido criopreservado difieren del fresco algunas oportunidades, mostrando imágenes de posible lesión en su membrana asi como lagunas vacías.