LOPES, Tiago Deiveson Pereira. Potencial antidermatofítico de Mo-CBP4, uma proteína ligante à quitina de sementes de Moringa oleifera. 2016. 104 f. Dissertação (Mestrado em Bioquímica)-Centro de Ciências, Universidade Federal do Ceará, Fortaleza, 2016. / Submitted by José Jairo Viana de Sousa (jairo@ufc.br) on 2016-08-03T20:07:36Z No. of bitstreams: 1 2016_dis_tdplopes.pdf: 2164027 bytes, checksum: f658448ab9dc0c04c309f8347b4b887d (MD5) / Approved for entry into archive by José Jairo Viana de Sousa (jairo@ufc.br) on 2016-08-03T20:09:43Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2016_dis_tdplopes.pdf: 2164027 bytes, checksum: f658448ab9dc0c04c309f8347b4b887d (MD5) / Made available in DSpace on 2016-08-03T20:09:43Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2016_dis_tdplopes.pdf: 2164027 bytes, checksum: f658448ab9dc0c04c309f8347b4b887d (MD5) Previous issue date: 2016 / Dermatophytosis constitute an important public health problem, affecting about 25% of world population. Several drugs are available for the dermatophytosis treatment, but they cause many adverse effects, including severe toxicity, drug interactions, low efficacy and resistance. Thus, there is a need for the development of new drugs with improved efficacy and safety. Medicinal plants are a valuable source of natural products that can act as drugs, being an alternative to conventional treatments. Moringa oleifera Lamarck, a plant native from Northeast of India, is widely used for its nutritional, therapeutic and water purification properties. Thus, this study aimed to evaluate the antidermatophytic potential of Mo-CBP4, a chitin-binding protein purified from M. oleifera seeds. By in vitro assays, Mo-CBP4 showed inhibitory activity against the fungus Trichophyton mentagrophytes, with a MIC50 of 500 µg/mL. In contrast, Mo-CBP4 did not inhibit the fungus T. rubrum, even at a higher concentration (1000 µg/mL). Mo-CBP4 (500 μg/mL) was able to inhibit the conidia germination of T. mentagrophytes, but not the mycelial growth. In relation to the mode of action, the antifungal activity of Mo-CBP4 does not seem to involve the carbohydrate interaction site since the protein remained active even when incubated with 0.15 M N-acetyl-D-glucosamine. The antifungal activity of Mo-CBP4 appears to result from the increased permeability of the conidia cell membrane and induction of oxidative stress within the cell, cause by this protein. Mo-CBP4 also showed antifungal activity against T. mentagrophytes by in vivo assays. In dermatophytosis model using albino Swiss female mice the hydrogel containing Mo-CBP4 (5 and 10 mg/g) was effective, reducing the lesion severity and shortening the infection period. The findings indicate that Mo-CBP4 has potential for development of a novel antifungal drug for clinical treatment of dermatophytosis caused by the fungus T. mentagrophytes. / As dermatofitoses são consideradas um problema de saúde pública, afetando cerca de 25% da população mundial. Vários medicamentos estão disponíveis no mercado para tratar dermatofitoses, porém essas drogas trazem muitos efeitos adversos, incluindo elevada toxicidade, interações medicamentosas, pouca eficácia e desenvolvimento de resistência. Assim, a busca por novas drogas mais seguras e eficazes é imperativa. As plantas medicinais constituem uma valiosa fonte de produtos naturais capazes de atuar como fármacos, caracterizando-se como uma alternativa aos tratamentos convencionais. Moringa oleifera Lamarck, uma planta originária do Norte da Índia, é bastante utilizada por suas propriedades nutricionais, purificadora de água e terapêuticas. Diante disso, esse trabalho objetivou avaliar o potencial antidermatofítico de Mo-CBP4, uma proteína ligante à quitina, purificada de sementes de M. oleifera. Através de ensaios in vitro, Mo-CBP4 apresentou atividade inibitória frente ao fungo Trichophyton mentagrophytes, apresentando um CIM50 de 500 μg/mL. Contrariamente, Mo-CBP4 não inibiu o fungo T. rubrum, mesmo em uma concentração mais elevada (1000 μg/mL). Mo-CBP4 (500 μg/mL) foi capaz de inibir a germinação de conídios de T. mentagrophytes, mas não o crescimento micelial. Em relação ao modo de ação, a atividade antifúngica de Mo-CBP4 não parece envolver o sítio de interação a carboidrato desde que mesmo incubada com N-acetil-D-glucosamina 0,15 M permaneceu ativa. A atividade antifúngica de Mo-CBP4 parece resultar do aumento da permeabilidade da membrana dos conídios e indução de estresse oxidativo no interior das células, causado pela proteína. Atividade antifúngica de Mo-CBP4 contra T. mentagrophytes foi também verificada em ensaio in vivo. Em modelo de dermatofitose animal, utilizando camundongos albinos Swiss fêmeas, o hidrogel contendo Mo-CBP4 (5 e 10 mg/g) se mostrou eficaz no tratamento da infecção causada por T. mentagrophytes, diminuindo a gravidade das lesões e abreviando o tempo de infecção. Os dados obtidos indicam que Mo-CBP4 tem potencial para o desenvolvimento de uma nova droga antifúngica a ser utilizada no tratamento de dermatofitose causada por T. mentagrophytes.

CYSNE, J. R. B. Propagação in vitro de Moringa oleifera L. 2006. 81 f. Dissertação (Mestrado em Agronomia/Fitotecnia) - Centro de Ciências Agrárias, Universidade Federal do Ceará, Fortaleza, 2006. / Submitted by Francisco Lacerda (lacerda@ufc.br) on 2014-07-18T19:45:02Z No. of bitstreams: 1 2006_dis_jrbcysne.pdf: 884419 bytes, checksum: 6eecdbad2c65befd109e4046a55788d1 (MD5) / Approved for entry into archive by José Jairo Viana de Sousa(jairo@ufc.br) on 2014-07-21T18:32:46Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2006_dis_jrbcysne.pdf: 884419 bytes, checksum: 6eecdbad2c65befd109e4046a55788d1 (MD5) / Made available in DSpace on 2014-07-21T18:32:46Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2006_dis_jrbcysne.pdf: 884419 bytes, checksum: 6eecdbad2c65befd109e4046a55788d1 (MD5) Previous issue date: 2006 / Moringa Moringa oleifera Lam is a tree plant belonging to the family Moringaceae widely used for the chemical properties its seeds. In this work, we attempted to develop a basic protocol for the micropropagation of the plant. Shoot apexes originating from in vitro germinated seedlings on Murashige and Skoog (MS) medium were used as primary explants. Adventitious shoots obtained from field growing trees were also isolated and inoculated on Wood Plant Medium (WPM) for the same purpose. Subjecting the seeds to various regimes and sequences of surface sterilization using sodium hypochlorite (NaOCl) showed that the best regime is the use of 0.25% NaOCl for 10 minutes. In an attempt to micropropagate Moringa, excised adventitious shoots were cultured on MS medium for 12 days, following which they were transferred to MS medium supplemented with varying concentrations (0.0,0.05,1.25 and 6.25uM) of 6-Benzylaminopurine (BAP). Explants subjected to the medium containing 1.25uM BAP demonstrated the highest rate of multiplication of 89%. In order to optimize the regeneration of plants from the primary explants, they were subjected to combinations of BAP and Indol-3-butyric acid at various concentrations. Although the highest rate of regeneration and shoot elongation was obtained when equimolar concentrations of BAP and IBA of 0.25uM was supplemented in an MS medium, there was a sharp decrease in the rate of multiplication from 89.5% to 50.8% when the shoots were sub cultured onto the same medium after 28 days. Subjecting shoot apexes obtained from field growing plants to WPM and MS based medium formulations, it was discovered that WPM promoted better proliferation of the explant compared to all other medium. Using WPM supplemented with different concentrations of BAP (0.0,0.05,0.25,1.25), the medium containing 6.25uM BAP was found to result in formation of callus followed by shoot formation. Transferring the proliferating shoots to a medium containing 0.25uM BAP led to their development without formation of adventitious shoots. / A moringa, Moringa oleifera L., é uma árvore da família Moringaceae, destacando-se pelo uso intensivo das propriedades químicas de suas sementes. O presente trabalho objetivou estabelecer um protocolo básico para a micropropagação da moringa. Os ápices caulinares utilizados na micropropagação foram retirados de plântulas germinadas in vitro cultivadas em meio MS. Ápices caulinares de plantas adultas também foram isolados e cultivados em meio WPM. A desinfestação das sementes e dos ápices caulinares de plantas adultas foi realizada com diferentes concentrações de hipoclorito de sódio (NaOCl) sendo que a 0,25 % por 10 minutos, proporcionou os melhores resultados para o estabelecimento das culturas. Os ápices caulinares, excisados de plantas cultivadas em meio MS após, 12 dias da germinação, foram submetidos a diferentes combinações de 6-benzilaminopurina (BAP) (0,0; 0,05; 0,25; 1,25 e 6,25 μM). No meio com 1,25 μM de BAP verificou-se uma taxa de multiplicação de 8,9. A fim de maximizar a regeneração de plantas in vitro, foram realizados experimentos para avaliar as concentrações de BAP e de ácido indol-3-butírico (AIB) no meio de cultivo com diferentes concentrações e combinações. A melhor taxa de regeneração e alongamento de brotações foi obtida com o meio MS contendo 0,25 μM de BAP e 0,25 μM de AIB. Contudo após o subcultivo neste mesmo meio, observou-se uma redução na taxa de multiplicação de 8,95 para 5,08. Para os ápices provindos de plantas adultas foi realizado um ensaio testandose diferentes meios de cultura. O meio com os sais WPM promoveu um melhor estabelecimento para os ápices, visto que os mesmos se apresentavam menos vitrificados se comparados aos demais meios. Definido o meio WPM realizou-se um ensaio com diferentes combinações de BAP (0,0; 0,05; 0,25; 1,25 e 6,25 μM). O meio com 6,25 μM promoveu a formação de calo seguida da formação de brotações. Estas foram subcultivadas em meio contendo 0,25 μM de BAP onde se desenvolveram sem a formação de brotações laterais.

SOUSA, A. J. S. Caracterização do exsudato de sementes de Moringa oleífera Lamarck e investigação de seu papel na defesa do vegetal. 2013. 103 f. Dissertação (Mestrado em Bioquímica) - Centro de Ciências, Universidade Federal do Ceará, Fortaleza, 2013. / Submitted by Francisco Lacerda (lacerda@ufc.br) on 2014-10-17T18:00:34Z No. of bitstreams: 1 2013_dis_ajssousa.pdf: 1776110 bytes, checksum: 7a47d156c757dbc72f5f11d22cecdd5e (MD5) / Approved for entry into archive by José Jairo Viana de Sousa(jairo@ufc.br) on 2014-11-03T20:09:22Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2013_dis_ajssousa.pdf: 1776110 bytes, checksum: 7a47d156c757dbc72f5f11d22cecdd5e (MD5) / Made available in DSpace on 2014-11-03T20:09:22Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2013_dis_ajssousa.pdf: 1776110 bytes, checksum: 7a47d156c757dbc72f5f11d22cecdd5e (MD5) Previous issue date: 2013 / Moringa oleifera (moringa) is a species belonging to the family Moringaceae which is characterized as having high resistance to insects and fungi. Previous work carried out by our research group revealed the presence of chitin-binding proteins in moringa seeds, among them Mo-CBP3, suggesting a positive correlation between this protein and the plant resistance. At the onset of the new plant development, for germination to occur, seed imbibition is required, a process followed by exudation. In exudation process, primary and secondary metabolites are released in the medium outside the seeds, some of them protecting the new plant against herbivores and/or pathogens. This study aimed to characterize the chemical composition and biological activities of moringa seed exudate and to investigate the presence of Mo-CBP3 in the exudate, in order to contribute to the establishment of its physiological role. Initially, the best conditions for exudation were established, emphasizing the time and solvent. A higher exudation of seed proteins was observed in distilled water after 24 hours. This exudate showed the presence of activities related to primary (protease, β-1,3- glucanase, chitinase, trypsin inhibitor and papain inhibitor) and secondary (steroid and saponins) metabolites. Mo-CBP3 was also detected in the exudate, using polyclonal antibodies anti-Mo-CBP3. The presence of Mo-CBP3 in the moringa seed exudate was confirmed after chromatography on chitin matrix and analyses by dot blotting and polyacrylamide gel electrophoresis. The data obtained showed that the retained material on the chitin matrix corresponds to 0.26% of the total protein, it is recognized by anti-Mo-CBP3 and has electrophoretic profile similar to that of Mo- CBP3 which was purified from moringa seeds. In the activity tests to pathogens, the seed exudate showed no antifungal activity, under the conditions used, except for Candida parapsilosis which had a slight reduction in its growth rate. In contrast, a potent activity against nematode was found as the seed exudate was able to cause a mortality rate up to 100% of Meloidogyne incognita in J2 stage. When investigated the presence of Mo-CBP3 in moringa hoots, a plant organ that shows the exudation phenomen and is also able to interact directly with the nematode, positive results were found. In fact, Mo-CBP3 is present in moringa hoots, in the initial stages of the plant development, according to the results shown by ELISA and RT-PCR. The data, taken together, suggest that in the exudation phenomen, proteins must play essential roles. In the case of moringa, Mo-CBP3 already participates in the initial stages of development of this tree species, playing a role that must be related to protection against pathogens. / Moringa oleifera (moringa) é uma espécie pertencente à família Moringaceae que se caracteriza por ser muito resistente a insetos e fungos. Trabalhos prévios realizados por nosso grupo de pesquisa revelaram a presença de proteínas ligantes à quitina em sementes de moringa, dentre elas a Mo-CBP3, sugerindo uma correlação positiva entre essa proteína e a resistência da planta. No início do desenvolvimento da planta, para que ocorra a germinação, deve haver a embebição da semente, um processo seguido pela exsudação. Na exsudação, compostos do metabolismo primário e secundário são externalizados da semente, alguns deles exercendo ação de defesa da nova planta ao impedirem o ataque de herbívoros e/ou patógenos. O presente trabalho teve como objetivos caracterizar o exsudato de sementes de moringa quanto à composição bioquímica e atividade biológica e investigar a presença de Mo-CBP3 no exsudato, visando contribuir para o estabelecimento de seu papel fisiológico. Inicialmente, foram estabelecidas as condições de exsudação, dando ênfase ao tempo e solvente. Uma maior exsudação de proteínas foi observada em sementes embebidas com água destilada por 24 horas. Esse exsudato mostrou a presença de atividades inerentes a metabólitos primários (protease, β-1,3-glucanase, quitinase, inibidor de tripsina e inibidor de papaína) e secundários (saponinas e esteroides). Mo-CBP3 foi também detectada no exsudato, usando anticorpos policlonais anti-Mo-CBP3. A presença de Mo-CBP3 no exsudato de sementes de moringa foi confirmada após este ter sido submetido à cromatografia em matriz de quitina, procedida pela análise através de dot bloting e eletroforese em gel de poliacrilamida. Os dados obtidos mostraram que o material retido na matriz de quitina corresponde a 0,26% do total de proteínas exsudadas, é reconhecido pelo anticorpo anti-Mo-CBP3 e apresenta perfil eletroforético similar ao da Mo-CBP3 purificada de sementes de moringa. Na avaliação da atividade deste exsudato frente à fitopatógenos, ação contra fungos não foi detectada, nas condições de ensaio empregadas, exceto para Candida parapsilosis que mostrou uma discreta redução na taxa de crescimento. Contrariamente, uma potente atividade contra nematoide foi verificada, tendo sido o exsudato de sementes capaz de causar até 100% de mortalidade para indivíduos de Meloidogyne incognita em estágio de J2. Quando investigada a presença de Mo-CBP3 em raiz, um órgão vegetal que apresenta o fenômeno de exsudação e, também, é capaz de interagir diretamente com o nematoide, resultados positivos foram encontrados. De fato, Mo- CBP3 está presente em raízes de moringa, já nos estágios iniciais do desenvolvimento, conforme resultados mostrados por ELISA e através da técnica de RT-PCR. Os dados, em conjunto, sugerem que no fenômeno da exsudação, proteínas devem desempenhar funções essenciais e que, no caso da moringa, Mo- CBP3 já participa nos estágios iniciais do desenvolvimento dessa planta arbórea, papel este que pode estar relacionado com a proteção contra patógenos.

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Made available in DSpace on 2015-12-10T14:22:29Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2015-06-26. Added 1 bitstream(s) on 2015-12-10T14:28:30Z : No. of bitstreams: 1 000852081_20170626.pdf: 422935 bytes, checksum: e1874f683ced5ed4bd3fcc07e1fbb4f0 (MD5) Bitstreams deleted on 2017-06-30T13:45:03Z: 000852081_20170626.pdf,. Added 1 bitstream(s) on 2017-06-30T13:45:55Z : No. of bitstreams: 1 000852081.pdf: 836873 bytes, checksum: 08e748581ea59d72c9d85ea816d769e3 (MD5) Bitstreams deleted on 2017-08-24T16:17:02Z: 000852081.pdf,. Added 1 bitstream(s) on 2017-08-24T16:17:48Z : No. of bitstreams: 1 000852081.pdf: 836873 bytes, checksum: 08e748581ea59d72c9d85ea816d769e3 (MD5) / O desenvolvimento de novos fármacos com ação antioxidante tem sido um importante objeto de estudo, uma vez que a terapêutica farmacológica atual para o tratamento de doenças como Alzheimer, Parkinson, esclerose múltipla, doença de Huntington, epilepsia e alguns tipos de neoplasias pode ser realizada devido às propriedades antioxidantes de muitos compostos naturais e/ou sintéticos. Dessa forma, a busca por novos agentes antioxidantes é extremamente necessária e atualmente é objeto de interesse em novas pesquisas pela indústria cosmética, farmacêutica e nutricional. Neste contexto, este trabalho irá permitir o aumento do conhecimento sobre Moringa oleifera por meio da avaliação do potencial antioxidante, fotoprotetor e antiglicação dos extratos desta espécie, além de elucidar relatos etnobotânicos de sua utilização e enriquecer o conhecimento científico desta espécie amplamente empregada como planta medicinal. Além disso, porque são reduzidas as informações científicas sobre as atividades que serão avaliadas neste projeto / The development of new drugs with antioxidant action has been an important subject of study, since the current drug therapy for the treatment of diseases such as Alzheimer's, Parkinson's, multiple sclerosis, Huntington's disease, epilepsy and some types of cancer can be performed because the antioxidant properties of many natural and / or synthetic compounds. Thus, the search for new antioxidants is extremely necessary and is currently the subject of interest in new research by the cosmetic, pharmaceutical and nutritional industry. In this context, this work will enable increased knowledge on Moringa oleifera by evaluating the antioxidant potential, sunscreen and anti-glycation of the extracts of this species, besides elucidating ethnobotanical reports of its use and enrich the scientific knowledge of this widely used species with medicinal plant. In addition they are reduced scientific information on the activities to be evaluated in this project

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Submitted by Pedro Barros (pedro.silvabarros@ufpe.br) on 2018-08-17T22:49:50Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 811 bytes, checksum: e39d27027a6cc9cb039ad269a5db8e34 (MD5) DISSERTAÇÃO Livia Lais de Santana Silva.pdf: 1382903 bytes, checksum: e25b848c35a8e9115597040262fcf804 (MD5) / Approved for entry into archive by Alice Araujo (alice.caraujo@ufpe.br) on 2018-08-24T22:38:29Z (GMT) No. of bitstreams: 2 license_rdf: 811 bytes, checksum: e39d27027a6cc9cb039ad269a5db8e34 (MD5) DISSERTAÇÃO Livia Lais de Santana Silva.pdf: 1382903 bytes, checksum: e25b848c35a8e9115597040262fcf804 (MD5) / Made available in DSpace on 2018-08-24T22:38:30Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 811 bytes, checksum: e39d27027a6cc9cb039ad269a5db8e34 (MD5) DISSERTAÇÃO Livia Lais de Santana Silva.pdf: 1382903 bytes, checksum: e25b848c35a8e9115597040262fcf804 (MD5) Previous issue date: 2016-02-29 / CAPES / A WSMoL (do inglês water-soluble Moringa oleifera lectin) é uma lectina (proteína que reconhece carboidratos) proveniente das sementes da Moringa oleifera, as quais são utilizadas no tratamento de água. Algumas espécies de insetos podem atuar como vetores de doenças ou pragas agrícolas. O mosquito Aedes aegypti é o vetor da dengue e sabe-se que o extrato de sementes de M. oleifera e WSMoL são tóxicos para as larvas deste inseto. O extrato de sementes e WSMoL apresentaram uma concentração letal a 50% das larvas após 24 horas de exposição (CL₅₀) igual a 0,27 mg/mL e 0,197 mg/mL, respectivamente. Entretanto, para uma adequada utilização desse inseticida natural se faz necessário a realização de testes ecotoxicológicos a fim de avaliar os possíveis efeitos causados em organismos aquáticos não-alvo. Neste trabalho, foi avaliada a toxicidade de extrato de semente e WSMoL para larvas de Danio rerio, espécie de peixe muito utilizada na Ecotoxicologia devido à facilidade de observação de seu comportamento e desenvolvimento e serem sensíveis na fase larval. As larvas de D. rerio foram expostas a diferentes concentrações do extrato de sementes ou WSMoL por 168 horas (7 dias),tendo sido avaliados efeitos letais por meio da determinação da taxa de mortalidade. Além disso, efeitos sub-letais comportamentais e bioquímicos sobre a velocidade natatória das larvas e atividade da acetilcolinesterase, respectivamente,também foram avaliados. Foi observado um efeito dose dependente na taxa de mortalidade de D. rerio tanto para o extrato quanto para a lectina purificada. Após 24 horas, os valores de CL₅₀/₂₄h foram 0,365 e 0,21 mg/mL para extrato e WSMoL, respectivamente. Esses resultados mostram que a susceptibilidade das larvas de D. rerio a WSMoL foi similar a das larvas de A. aegypti (6% de diferença nos valores de LC₅₀/₂₄h) enquanto extrato é aproximadamente 34% mais potente para as larvas do mosquito. Após 96 horas, os valores de CL₅₀/₂₄h para extrato e WSMoL foram 0,031 e 0,135 mg/mL, respectivamente. Com relação à velocidade natatória dos indivíduos expostos ao extrato, houve um aumento significativo (p < 0,05) após incubação nas concentrações 0,03 e 0,27 mg/mL e uma diminuição para larvas incubadas com 0,81 mg/mL por esse mesmo período. Para incubação por 168 h, a velocidade foi maior que no grupo controle para os tratamentos a 0,27 e 0,81 mg/mL. Nos ensaios com WSMoL, a média da velocidade de natação de larvas expostas à lectina por 72 h foi significativamente (p < 0,05) menor que no controle nos tratamentos com 0,1 e 0,2 mg/mL. Para 168 h, a velocidade foi também menor que no controle no tratamento a 0,1 mg/mL enquanto para as concentrações de 0,02 e 0,05 mg/mL foi similar (p > 0,05) ao controle.Larvas expostas por 168 h ao extrato aquoso na concentração 0,81 mg/mL e a WSMoL na concentração de 0,1 mg/mL apresentaram uma redução significativa na atividade da acetilcolinesterase. Levando em consideração os resultados obtidos, esses inseticidas naturais devem ser usados cuidadosamente, uma vez que as concentrações necessárias para o controle de A. aegyptiforam podem também causar efeitos tóxicos letais e sub-letais para organismos não-alvo como o peixe D. rerio. Recomenda-se o uso em recipientes de armazenamento de água, e não em ecossistemas aquáticos como lagoas e lagos. / Some insect species can act as vectors of diseases or as agricultural pests. The WSMoL (water soluble Moringa oleifera lectin) is a lectin (protein that recognizes carbohydrate) derived from the seeds of Moringa oleifera, which are used in water treatment. The mosquito Aedes aegypti is the vector of dengue and it is known that M. oleifera seed extract and WSMoL are toxic to larvae of this insect. The seed extract and WSMoL showed a lethal concentration to 50% of the larvae after 24 hours of exposure (LC₅₀) equal to 0.27 mg/mL and 0.197 mg/mL, respectively. However, for proper use of these natural insecticides, it is necessary to carry out ecotoxicological tests in order to assess the possible effects on non-target aquatic organisms. In this work, the toxicity of seed extract and WSMoL to zebrafish (Danio rerio) larvae was evaluated. Danio rerio is a fish species very used in Ecotoxicology due to the ease of observation of its behavior and development and for being sensitive in the larval stage. D. rerio larvae were exposed to different concentrations of the seed extract or WSMoL for 168 h (7 days) and the lethal effects were assessed by determining the mortality rate. Additionally, behavioral and biochemical sublethal effects on larval swimming velocity and acetylcholinesterase activity, respectively, were also evaluated. It was observed a dose dependence effect on D. rerio mortality rate for both the extract and the purified lectin. After 24 h, the values of LC₅₀/₂₄h were 0.365 and 0.21 mg/mL to extract and WSMoL, respectively. These results show that the D. rerio larvae susceptibility to the WSMoL was similar to A. aegypti larvae (6% difference in LC₅₀/₂₄h values) while extract was about 34% more potent against mosquito larvae. After 96 h, the values of LC₅₀/₂₄h for extract and WSMoL were 0.031 and 0.135 mg/mL, respectively. Concerning the swimming velocity of individuals exposed to the extract there was a significant increase (p <0.05) after incubation for 72 h at 0.03 and 0.27 mg/mL and a decrease for larvae incubated at 0.81 mg/mL for this same period. For 168 h incubation, the velocity was higher than control group for treatments at 0.27 and 0.81 mg/mL. In tests with WSMoL, the average swimming velocity of larvae exposed to the lectin for 72 h was significantly (p <0.05) lower than the control on treatments with 0.1 and 0.2 mg/mL. For 168 h, the velocity was also lower than the control on treatment with 0.1 mg/mL, and with concentrations of 0.02 and 0.05 mg/mL the values were similar (p>0.05) to the control. Larvae exposed for 168 h to the aqueous extract at a concentration of 0.81 mg/mL and WSMoL at 0.1 mg/mL showed a significant reduction in the activity of acetylcholinesterase. Considering the results, these natural insecticides must be used carefully used since the concentrations necessary for the control of A. aegypti also can cause lethal toxic effects and sub-lethal to non-target organisms such as D. rerio fish. It is not recommended to use these natural insecticides in aquatic ecosystems such as ponds and lakes, but in water storage containers.

Made available in DSpace on 2018-08-01T20:28:05Z (GMT). No. of bitstreams: 1 tese_10037_Dissertação_Débora Machado Ferreira.pdf: 4120909 bytes, checksum: ee64255bc33c0e0860f2451e16f34f43 (MD5) Previous issue date: 2016-06-06 / A nanotecnologia tem recebido uma grande atenção, nas últimas décadas, devido às suas promissoras aplicações. As nanopartículas possuem aplicações em diversas áreas, como na área farmacêutica (sistemas de entrega de fármacos, cosméticos); indústria têxtil (roupas com propriedades antimicrobianas); medicina diagnóstica (imagem, biossensores de alta eficiência); energia (painéis solares); biorremediação, entre outros. Síntese convencional de nanopartículas pode envolver processos químicos e físicos caros que costumam usar materiais tóxicos com potenciais riscos tais como toxicidade ambiental, citotoxicidade e carcinogenicidade. Os problemas de toxicidade surgem a partir das substâncias como solventes orgânicos, agentes redutores e estabilizadores que são usados para evitar a aglomeração dos coloides. Como resultado, a presença destes agentes de toxicidade sobre as nanopartículas sintetizadas pode impedir sua aplicação biomédica. No entanto, todos estes fatores podem ser controlados através da produção mediada biologicamente. Por isso síntese de nanomateriais utilizando extratos vegetais se mostra um método rápido e não tóxico para a produção de nanopartículas metálicas. Esse método, também chamado de síntese verde, busca a utilização de compostos naturais como agentes redutores, proporcionando uma alternativa sustentável aos produtos tóxicos. Aqui propomos uma rota de síntese verde para a preparação de nanopartículas de ouro na presença de uma fração da resina de Virola oleifera baseada no planejamento fatorial tendo como variáveis concentração do extrato e pH. Caracterizamos utilizando espectroscopia UV-vis, espectroscopia RAMAN, espectroscopia FT-IR, MET, DLS e potencial zeta. Neste caso, o extrato vegetal utilizado foi capaz de reduzir o sal metálico, constatado pelo espectro de absorção na região do UV-vis, e fornecer estabilidade. As nanopartículas foram funcionalizadas com o extrato vegetal utilizado como foi observado no perfil de bandas da análise que mostra ligações químicas que ocorrem em sistemas híbridos de AuNPs. Também apresentaram boa dispersividade e tamanho homogêneo. Esperamos que este estudo contribua como uma alternativa às rotas tradicionais e tenha uma promissora aplicação biológica.

LUZ, P. B. Efeito protetor da lectina de sementes de Moringa oleifera na pancreatite aguda induzida por ceruleína em camundongos via modulação da inflamação e estresse oxidativo. 2017. 133 f. Tese (Doutorado em Farmacologia) - Faculdade de Medicina, Universidade Federal do Ceará, Fortaleza, Ceará, 2017. / Submitted by Farmacologia Pós-Graduação (posgfarmacologia@gmail.com) on 2017-07-31T15:30:02Z No. of bitstreams: 1 2017_tese_pbluz.pdf: 3256883 bytes, checksum: e491f2004c525ad6475a074ed7f1745a (MD5) / Approved for entry into archive by Erika Fernandes (erikaleitefernandes@gmail.com) on 2017-07-31T16:12:12Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2017_tese_pbluz.pdf: 3256883 bytes, checksum: e491f2004c525ad6475a074ed7f1745a (MD5) / Made available in DSpace on 2017-07-31T16:12:12Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2017_tese_pbluz.pdf: 3256883 bytes, checksum: e491f2004c525ad6475a074ed7f1745a (MD5) Previous issue date: 2017-02-03 / Acute pancreatitis (AP) is an inflammatory disease that primarily affects the pancreas, and can progress with insufficiency of many organs, such as lung and liver. Despite its significant morbidity and mortality rate, there are not therapeutic alternatives for PA cure. Moringa oleifera is a plant native to Asia, Africa and South America, with extensive expansion into the Brazilian Northeast and widely used in folk medicine. MoCBP4 is a lectin purified from M. oleifera seeds with anti-inflammatory and antinociceptive activities. The present study aimed to evaluated the effect of MoCBP4 on the functional, inflammatory and molecular alterations characteristic of PA in vivo and in vitro models. Mice were treated orally with MoCBP4 at doses 20, 40 and 80 mg/kg and after 1 hour they received five injections of cerulein (50 μg/kg) intraperitoneally at 1hour intervals between administrations.The animals were euthanized after 6 hours of the last administration of cerulein. The pancreas, lung, liver and blood were collected to evaluate the pancreatic edema, amylase, lipase, AST, ALT, MPO activity, TNF-α, IL-1β, IL-6, NP-SH, MDA, NO2-, COX-2, NF-ĸB and NOSi, in addition to histological analysis. Cytosolic Ca2+ levels were measured in acinar cells stimulated by cholecystokinin-8 (CCK). The effects of MoCBP4 were evaluated on TLC-S-induced acinar cell necrosis and on FMLP and PMA-stimulated neutrophils production of ROS.The statistical analyses were performed using analysis of variance followed by the Newman-Keuls or Kruskal Wallis/Dunn post hoc test. Values of p< 0.05 were considered statistically significant. MoCBP4 (20, 40 and 80 mg / kg) reduced, respectively, pancreatic edema (13%, 21% and 41%); amylase (18%, 14% and 28%); lipase (51%, 39% and 33%); AST (42%, 47% and 36%); ALT (30%, 50%, 37%); MPO activity in the pancreas (58%, 51% and 43%), lung (42%, 56% and 42%) and liver (51%, 66% and 56%). In the histological analysis, MoCBP4 at dose of 40mg / kg was able to significantly attenuate the inflammatory infiltrate and necrosis in the pancreas, besides reducing lung and hepatic damage. MoCBP4 (40 mg/kg) decreased the pancreatic levels of TNF-α, IL1-β and IL-6 (40%, 55% and 67%) and also reduced plasma levels of TNF-α and IL1-β (68% and 63%); MoCBP4 (40 mg/kg) increased plasma levels of NP-SH and significantly reduced MDA and NO2-. MoCBP4 (40 mg / kg) reduced the pancreatic immunostaining of COX-2, TNF-α, iNOS and NF-ĸB.MoCBP4 at concentration 1 μM reduced sustained levels of cytosolic Ca2+ on the acinar cells stimulated by CCK . MoCBP4 (1 μM) attenuated TLC-S-induced acinar cell necrosis in 73%. MoCBP4 (10 μM) attenuated ROS production by neutrophils stimulated by fMLP (59%) and PMA (58%). These data show that MoCBP4 protects against acute edematous pancreatitis induced by cerulein, and this effect is associated with attenuation of local and systemic inflammatory response mediated by reduction of neutrophils and pro-inflammatory cytokines, as well as oxidative stress and tissue injury.In isolated cells, MoCBP4 was able to attenuate neutrophil activation, in addition to reducing overall and sustained of Ca2+ in the acinar cell cytosol and, probably for this reason, reduced cell death by necrosis. / Pancreatite aguda (PA) é uma doença inflamatória que acomete primariamente o pâncreas, podendo evoluir com insuficiência de múltiplos órgãos, tais como pulmão e fígado. Apesar da sua significante taxa de morbidade e mortalidade, ainda não há alternativas terapêuticas para a cura da PA. Moringa oleifera é uma planta originária da Ásia, da África e da América do Sul com ampla ocorrência no nordeste brasileiro é largamente utilizada na medicina popular. A MoCBP4 é uma lectina purificada a partir das sementes de M. oleífera com comprovadas atividades anti-inflamatória e antinociceptiva. No presente estudo, foi avaliado o efeito da MoCBP4sobre as alterações funcionais, inflamatórias e moleculares características da PA em modelos in vivo e in vitro. Camundongos foram tratados com MoCBP4 nas doses de 20, 40 e 80 mg/kg por via oral e após 1 hora receberam cinco injeções de ceruleína (50µg/kg) por via intraperitoneal com intervalos de 1hora entre as administrações. A eutanásia dos animais ocorreu após 6 horas da última administração de ceruleína e o pâncreas, pulmão, fígado e sangue foram coletados para avaliação do edema pancreático, amilase, lipase, AST, ALT, atividade de MPO, TNF-α, IL-1β, IL-6, NP-SH, MDA, NO2-, COX-2, NFĸB e NOSi, além das análises histológicas. Alterações dos níveis de Ca2+ citosólico foram mensuradas em células acinares do pâncreas de camundongos estimuladas por colecistocinina-8 (CCK). Foram avaliados os efeitos da MoCBP4 sobre a necrose de células acinares induzida por TLC-S e sobre a produção de EROsem neutrófilos isolados da medula óssea estimulados por fMLP e PMA. Para estatística foi utilizado ANOVA/Teste de Newman-Keuls ou Kruskal Wallis/Teste de Dunn. P<0,05 foi aceito.MoCBP4 (20, 40 e 80 mg/kg) reduziu, respectivamente, o edema pancreático (13%, 21% e 41%); amilase (18%, 14% e 28%); lipase (51%, 39% e 33%); AST (42%, 47% e 36%); ALT (30%, 50%, 37%); atividade de MPO no pâncreas (58%, 51% e 43%), no pulmão (42%, 56% e 42%) e no fígado (51%, 66% e 56%). Na análise histológica, MoCBP4 na dose de 40mg/kg foi capaz de atenuar significantemente o infiltrado inflamatório e a necrose no pâncreas, além de reduzir danos pulmonar e hepático. MoCBP4 (40 mg/kg) diminuiu os níveis pancreáticos das citocinas TNF-α, IL1-β e IL-6 (40%, 55% e 67%) e também os níveis plasmáticos de TNF-α, IL1-β (68% e 63%); aumentou os níveis plasmáticos de NP-SH e reduziu significantemente MDA e NO2- no plasma. MoCBP4 (40 mg/kg) reduziu a imunomarcação de COX-2, TNF-α, iNOS e NF-ĸB no pâncreas. Em células acinares estimuladas por CCK, MoCBP4 (1 µM) reduziu os níveis sustentados de Ca2+citosólico. MoCBP4 (1 µM) atenuou a necrose de células acinares induzida por TLC-S em 73%. MoCBP4 (10 µM) atenuou a produção de EROs em neutrófilos estimuladas por fMLP (59%) e PMA (58%). Estes dados reunidos evidenciam que MoCBP4 protege contra a pancreatite aguda edematosa induzida por ceruleína, sendo este efeito associado à atenuação da resposta inflamatória local e sistêmica intermediada por redução dos neutrófilos e citocinas pró-inflamatórias, bem como pelo estresse oxidativo e lesão tecidual. Em células isoladas, MoCBP4 foi capaz de atenuar a ativação de neutrófilos, além de reduzir o aumento global e sustentado de Ca2+ no citosol de células acinares e, provavelmente, por esta razão, reduziu a morte celular por necrose.