Reclamation of Canada’s threatened wood bison (Bison bison athabascae) herd is complicated by cattle diseases. As part of an overall goal to conserve bison genetics, five studies were conducted to develop or adapting present reproductive technologies to produce disease-free in vivo-derived wood bison embryos. In Chapter 4, the efficacy of pLH and hCG for inducing ovulation and whether the effect was related to the size of the dominant follicle at the time of treatment was examined in wood bison during the anovulatory season . Ovulation rate with hCG (94%) was nearly two times greater than with pLH (54%), and bison with a growing follicle of ≥10 mm had a greater ovulatory response than those of 8-9 mm. In Chapter 5, the efficacy of pLH and hCG after superstimulation with single or two doses (48 hours apart) of FSH diluted in 0.5% hyaluronan was determined in wood bison. A greater superovulatory ovarian response was found in cows treated with hCG vs. LH during the anovulatory and ovulatory seasons (6.6 vs. 2.8 and 6.3 vs. 3.8 corpora lutea respectively). In addition, dividing the dose of FSH two resulted in greater superovulatory response in wood bison. However, the number of corpora lutea was still lower than expected as compared to cattle using the same two dose method of superovulation (15 corpora lutea; Tribulo et al., 2012). Therefore, in Chapter 6, the effect of the addition of a low dose of eCG at the end of the superstimulation protocol on ovarian response and embryo quality was examined. Although the number of ova/embryos recovered was higher in this study when compared with previous reports in wood bison, no effect of eCG on the number of corpora lutea and embryo quality was found. In Chapters 5 and 6, the effect of exogenous progesterone on embryo quality in wood bison during the anovulatory season was evaluated. We found that progesterone did not improve the number of freezable embryos in either study. In Chapter 7, the effect of lengthening of FSH treatment protocol on superovulatory response and embryo quality during the ovulatory and anovulatory seasons was examined. There was no effect of lengthening the FSH treatment protocol on ovarian response and embryo quality during the anovulatory season. However, embryo quality and ovulation rate were increased by the lengthened treatment protocol during the ovulatory season. Additionally, more freezable embryos (Grades 1 and 2) were obtained during the ovulatory season (1.8 embryos) vs. the anovulatory season (0.3 embryos). Overall, results confirm that superovulation can be performed in wood bison throughout the year, but a higher number of freezable embryos were obtained during the ovulatory season. The final chapter (Chapter 8) focused in the production of disease-free embryos in wood bison. Following superovulation, in vivo-derived wood bison embryos were exposed in vitro to Brucella abortus biovar 1. After incubation, embryos were submitted to the 10-step washing procedures recommended by the IETS to remove the pathogen. When the washing medium contained antibiotics, 100% Brucella-free embryos were obtained. These findings validate the washing procedures for the production of Brucella-free embryos in wood bison.

Made available in DSpace on 2014-08-13T14:50:41Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2013-08-14Bitstream added on 2014-08-13T18:01:00Z : No. of bitstreams: 1 000748968.pdf: 2613774 bytes, checksum: 9251a495567da57c3e93a78c32f41924 (MD5) / Nos últimos anos a gonadotrofina coriônica humana (hCG), por sua ação biológica semelhante ao hormônio luteinizante (LH), tem sido estudada não apenas como indutor da ovulação, mas também como agente luteotrófico. A ultrassonografia (US) Doppler, quando utilizada para análise ovariana, permite a avaliação hemodinâmica folicular e luteal, fornecendo importantes informações funcionais destas estruturas. Os objetivos deste estudo foram descrever as alterações hemodinâmicas de folículos pré-ovulatórios e, caracterizar o desenvolvimento estrutural e funcional do corpo lúteo (CL) de éguas tratadas com distintas doses de hCG, em diferentes momentos do ciclo estral. No experimento 1, éguas receberam 750, 1500, 2500 UI hCG ou NaCl 0,9%, por via intravenosa, na detecção de folículo pré-ovulatório ≥35 mm. A perfusão vascular (PV) folicular foi avaliada, por meio da US Doppler, a cada hora durante 12 primeiras horas pós-tratamento, e posteriormente, a cada 6 horas até ovulação. No experimento 2, foram utilizadas 750, 1500, 2500 UI hCG, para induzir ovulação, no dia da ovulação (D0) ou dois dias pós-ovulação (D2). A área, volume, PV luteal e concentração plasmática de progesterona (P4), foram avaliadas diariamente entre D0 e D8. Não foi detectado efeito da dose, do tratamento e tempo para PV folicular. No experimento 2, para todas as variáveis, não observou-se efeito da dose e tratamento, no entanto, ao longo dos dias, houve diferença significativa, exceto para área e volume luteal. A hCG, para induzir ovulação, não alterou a PV folicular pós-tratamento. Quando utilizada para induzir a ovulação, no D0, ou D2, não influenciou o desenvolvimento estrutural e funcional luteal, independente da dose / In recent years the hCG, because of its biological LH-like action, has been studied not only to induce ovulation, but also as luteotrophic agent. Doppler ultrasonography is a technique that allows the hemodynamic evaluation of follicular and luteal tissue, in real time, providing important functional information about these structures. This study aimed to describe the hemodynamics changes of pre-ovulatory follicles and characterize the structural and functional development of the corpus luteum of mares treated with different doses of hCG, at different times of estrous cycle. In experiment 1, mares were treated with 750, 1500, 2500 IU of hCG or NaCl 0.9%, intravenously, on presence of pre-ovulatory follicle ≥35mm. Doppler US exams, to evaluate the follicle vascular perfusion, were done every hour during first 12 hours post-treatment. Thereafter, it was done every 6 hours until ovulation. In experiment 2, treatment was performed with 750, 1500 or 2500 IU of hCG to induce ovulation, on the day of ovulation or two days post-ovulation. The luteal area, volume and vascular perfusion, and plasma progesterone concentration were evaluated daily from D0 to D8. No effect of dose and time was detected for follicle vascular perfusion. In experiment 2, there was no effect of dose and moment of treatment for all end points. Throughout the day, all end points presented significant difference, except the luteal area and volume. The hCG-treatment, to induce ovulation, did not increase follicle vascular perfusion post-treatment. hCG administered on the presence of follicle ≥35 mm, on D0 or on D2, had no positive influence on structural and functional development of corpus luteum, independent of dose

Orientador: Cezinande de Meira / Banca: João Carlos Pinheiro Ferreira / Banca: Thales Ricardo Rigo Barreiros / Resumo: Nos últimos anos a gonadotrofina coriônica humana (hCG), por sua ação biológica semelhante ao hormônio luteinizante (LH), tem sido estudada não apenas como indutor da ovulação, mas também como agente luteotrófico. A ultrassonografia (US) Doppler, quando utilizada para análise ovariana, permite a avaliação hemodinâmica folicular e luteal, fornecendo importantes informações funcionais destas estruturas. Os objetivos deste estudo foram descrever as alterações hemodinâmicas de folículos pré-ovulatórios e, caracterizar o desenvolvimento estrutural e funcional do corpo lúteo (CL) de éguas tratadas com distintas doses de hCG, em diferentes momentos do ciclo estral. No experimento 1, éguas receberam 750, 1500, 2500 UI hCG ou NaCl 0,9%, por via intravenosa, na detecção de folículo pré-ovulatório ≥35 mm. A perfusão vascular (PV) folicular foi avaliada, por meio da US Doppler, a cada hora durante 12 primeiras horas pós-tratamento, e posteriormente, a cada 6 horas até ovulação. No experimento 2, foram utilizadas 750, 1500, 2500 UI hCG, para induzir ovulação, no dia da ovulação (D0) ou dois dias pós-ovulação (D2). A área, volume, PV luteal e concentração plasmática de progesterona (P4), foram avaliadas diariamente entre D0 e D8. Não foi detectado efeito da dose, do tratamento e tempo para PV folicular. No experimento 2, para todas as variáveis, não observou-se efeito da dose e tratamento, no entanto, ao longo dos dias, houve diferença significativa, exceto para área e volume luteal. A hCG, para induzir ovulação, não alterou a PV folicular pós-tratamento. Quando utilizada para induzir a ovulação, no D0, ou D2, não influenciou o desenvolvimento estrutural e funcional luteal, independente da dose / Abstract: In recent years the hCG, because of its biological LH-like action, has been studied not only to induce ovulation, but also as luteotrophic agent. Doppler ultrasonography is a technique that allows the hemodynamic evaluation of follicular and luteal tissue, in real time, providing important functional information about these structures. This study aimed to describe the hemodynamics changes of pre-ovulatory follicles and characterize the structural and functional development of the corpus luteum of mares treated with different doses of hCG, at different times of estrous cycle. In experiment 1, mares were treated with 750, 1500, 2500 IU of hCG or NaCl 0.9%, intravenously, on presence of pre-ovulatory follicle ≥35mm. Doppler US exams, to evaluate the follicle vascular perfusion, were done every hour during first 12 hours post-treatment. Thereafter, it was done every 6 hours until ovulation. In experiment 2, treatment was performed with 750, 1500 or 2500 IU of hCG to induce ovulation, on the day of ovulation or two days post-ovulation. The luteal area, volume and vascular perfusion, and plasma progesterone concentration were evaluated daily from D0 to D8. No effect of dose and time was detected for follicle vascular perfusion. In experiment 2, there was no effect of dose and moment of treatment for all end points. Throughout the day, all end points presented significant difference, except the luteal area and volume. The hCG-treatment, to induce ovulation, did not increase follicle vascular perfusion post-treatment. hCG administered on the presence of follicle ≥35 mm, on D0 or on D2, had no positive influence on structural and functional development of corpus luteum, independent of dose / Mestre

Orientador: Anaglória Pontes / Resumo: O câncer de mama é uma doença maligna relativamente comum em mulheres adultas jovens, justificando a preocupação com a potencial toxicidade gonadal relacionada à quimioterapia. É importante considerar o encaminhamento precoce de pacientes jovens com câncer de mama que tenham desejos reprodutivos para especialistas, a fim de discutir sobre a preservação da fertilidade. A criopreservação de embriões ou de oócitos estão entre os principais métodos à disposição, e para conseguir isso, estimulação ovariana controlada (EOC) é o primeiro passo a ser considerado. O presente estudo tem como objetivo apresentar protocolo de estimulação ovariana em para preservação da fertilidade em pacientes com câncer de mama. De novembro de 2014 a dezembro de 2016, 109 pacientes com câncer de mama com menos de 40 anos de idade foram selecionadas para preservar seu potencial reprodutivo. Elas foram divididas de acordo com a fase do ciclo menstrual em que o estímulo ovariano foi iniciado: fase folicular inicial, fase folicular tardia e fase lútea. Para reduzir o tempo necessário da obtenção dos oócitos, este estudo utilizou o princípio do início aleatório, no qual a EOC pode ser iniciada durante qualquer período do ciclo menstrual sem consequências negativas. O letrozol foi utilizado durante toda a estimulação para diminuir as concentrações de estradiol, independentemente da imunohistoquímica tumoral. Na presença de tumores positivos ao estradiol, e indicação de quimioterapia neoadjuvante, o tamoxi... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Breast cancer is a relatively common malignancy in young adult women, justifying the concern about the potential gonadal toxicity related to chemotherapy. It is important to consider early referral of young breast cancer patients with reproductive desires to fertility specialists, in order to discuss the fertility preservation. Embryos or oocytes cryopreservation are among the main methods available, and to achieve that, controlled ovarian stimulation (COS) is the first step to be considered. From November 2014 to December 2016, 109 breast cancers patients under 40 years were enrolled to preserve their reproductive potential. They were divided according to the menstrual cycle status in: initial follicular phase, late follicular phase and luteal phase. In order to reduce the time necessary to obtain the oocytes, this study used the principle of random start, in which the COS can be initiated during any period of the menstrual cycle without negative consequences. Letrozole was used during all stimulation to reduce estradiol concentrations, regardless of tumor immunohistochemistry. In the presence of estradiol positive tumors, and indication of neoadjuvant chemotherapy, tamoxifen was administerd as an additional protective measure. A GnRH agonist was used to trigger ovulation, in order to mitigate the risk of ovarian hyperstimulation syndrome. The following parameters were analyzed: age, day of COS start, number of days required to COS, total FSH dosage, estradiol levels at fi... (Complete abstract click electronic access below) / Mestre

Understanding the fundamental physiological mechanisms underlying ovarian physiology is important for accomplishing ways to diagnose and treat ovulatory dysfunction. With the advancement of assisted reproductive technologies, it became imperative to understand the details of the factors that affect the follicular development, oocyte competence, and embryo production. In primates and large domestic species including women and mares, ovarian follicles grow in a wave-like fashion with waves that can be anovulatory or ovulatory. Although considerable progress has been made in understanding ovarian follicular dynamics, more knowledge needs to be acquired to treat ovulatory problems like luteinized unruptured follicle (LUF) syndrome. Such information can be applied to optimizing treatment outcomes through assisted reproductive technologies that can be of benefit to both humans and animals. Three studies involving five experiments were conducted to improve our understanding on: 1) follicular growth patterns and endocrine profiles of LUFs and dominant follicles of major anovulatory and ovulatory waves in women; 2) physiologic mechanisms underlying luteinized unruptured follicles (LUFs) in mares with the goal of providing a model for human anovulation; and 3) dynamic changes in intrafollicular growth factors and hormones during the dominance and impending ovulation phases in mares. The results from Study 1 indicated that growth and endocrinological differences existed among LUFs, and physiological anovulatory and ovulatory dominant follicles in women. These differences were observed in follicle growth rates, intervals between follicular events, and in systemic concentration of hormones. In Study 2, LUFs were induced in 100% of the mares evaluated using a prostaglandin synthesis inhibitor; differences in intrafollicular prostaglandins, estradiol, growth hormone (GH), cortisol, and PRL were observed. In Study 3, changes in the concentrations of intrafollicular growth factors and hormones such as insulin-like growth factor-1 (IGF-1), inhibin-A, activin-A, VEGF, and PRL were detected during the dominance and impending ovulation phases in mares. The above-mentioned findings will provide the basis to compare the intrafollicular growth factors and hormones of potential LUFs and normal ovulatory follicles in the future. In conclusion, the results from these studies will shed light in the design of future studies on mechanisms of LUF formation and the role of intrafollicular growth factors and hormones in ovulation in women, mares, and perhaps also in other species.

Submitted by FELIPE ANDREOTTA CAVAGNA null (cavfelipe@hotmail.com) on 2017-05-31T19:17:37Z No. of bitstreams: 1 Tese completa.pdf: 2237650 bytes, checksum: 4aa0720ebf0372b66b313eb30f80bbb1 (MD5) / Rejected by Luiz Galeffi (luizgaleffi@gmail.com), reason: Solicitamos que realize uma nova submissão seguindo a orientação abaixo: O arquivo submetido está sem a ficha catalográfica. A versão submetida por você é considerada a versão final da dissertação/tese, portanto não poderá ocorrer qualquer alteração em seu conteúdo após a aprovação. Corrija esta informação e realize uma nova submissão com o arquivo correto. Agradecemos a compreensão. on 2017-05-31T19:26:49Z (GMT) / Submitted by FELIPE ANDREOTTA CAVAGNA null (cavfelipe@hotmail.com) on 2017-06-23T20:07:51Z No. of bitstreams: 1 Tese completa.pdf: 2237650 bytes, checksum: 4aa0720ebf0372b66b313eb30f80bbb1 (MD5) / Rejected by Luiz Galeffi (luizgaleffi@gmail.com), reason: Solicitamos que realize uma nova submissão seguindo a orientação abaixo: O arquivo submetido está sem a ficha catalográfica. A versão submetida por você é considerada a versão final da dissertação/tese, portanto não poderá ocorrer qualquer alteração em seu conteúdo após a aprovação. Corrija esta informação e realize uma nova submissão com o arquivo correto. Agradecemos a compreensão. on 2017-06-28T16:19:54Z (GMT) / Submitted by FELIPE ANDREOTTA CAVAGNA null (cavfelipe@hotmail.com) on 2017-06-29T13:35:32Z No. of bitstreams: 2 Tese completa.pdf: 2237650 bytes, checksum: 4aa0720ebf0372b66b313eb30f80bbb1 (MD5) ficha catalografica.pdf: 3431 bytes, checksum: 21058e205bea5ad945658a418056a793 (MD5) / Rejected by Luiz Galeffi (luizgaleffi@gmail.com), reason: Solicitamos que realize uma nova submissão seguindo a orientação abaixo: A ficha catalográfica deve ser inserida na página subsequente à folha de rosto, de acordo com as normas de sua unidade. Corrija esta informação e realize uma nova submissão com o arquivo correto. 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É importante considerar o encaminhamento precoce de pacientes jovens com câncer de mama que tenham desejos reprodutivos para especialistas, a fim de discutir sobre a preservação da fertilidade. A criopreservação de embriões ou de oócitos estão entre os principais métodos à disposição, e para conseguir isso, estimulação ovariana controlada (EOC) é o primeiro passo a ser considerado. O presente estudo tem como objetivo apresentar protocolo de estimulação ovariana em para preservação da fertilidade em pacientes com câncer de mama. De novembro de 2014 a dezembro de 2016, 109 pacientes com câncer de mama com menos de 40 anos de idade foram selecionadas para preservar seu potencial reprodutivo. Elas foram divididas de acordo com a fase do ciclo menstrual em que o estímulo ovariano foi iniciado: fase folicular inicial, fase folicular tardia e fase lútea. Para reduzir o tempo necessário da obtenção dos oócitos, este estudo utilizou o princípio do início aleatório, no qual a EOC pode ser iniciada durante qualquer período do ciclo menstrual sem consequências negativas. O letrozol foi utilizado durante toda a estimulação para diminuir as concentrações de estradiol, independentemente da imunohistoquímica tumoral. Na presença de tumores positivos ao estradiol, e indicação de quimioterapia neoadjuvante, o tamoxifeno foi utilizado como uma medida de proteção adicional. Um agonista do GnRH foi utilizado para desencadear a maturação folicular final, diminuindo o risco de síndrome de hiperestimulação ovariana. Foram analisados os seguintes parâmetros: idade das pacientes, dia de início da EOC, número de dias de EOC, dose total de FSH, níveis de estradiol no dia de maturação folicular final, número de oócitos coletados e número de oócitos vitrificados. A idade média dos pacientes foi de 31,27 ± 4,22 anos. A duração média da EOC foi de 10,0 ± 1,39 dias. O número médio de oócitos coletados foi de 11,62 ± 7,96 e o número médio de oócitos vitrificados foi de 9,60 ± 6,87. A concentração média de estradiol no dia do desencadeamento da ovulação foi de 706,30 ± 450,48 pg / mL, e a dose média de FSH administrada foi 2610,00 ± 716,51 UI. Ao comparar os resultados de acordo com a fase do ciclo no qual a EOC foi iniciada, não houve diferenças significativas no número de oócitos colhidos e vitrificados, duração da estimulação ovariana e dos níveis de estradiol no dia do desencadeamento da ovulação. Observou-se uma diminuição estatisticamente significativa da dose total de FSH administrada nos grupos que iniciaram a EOC na fase folicular tardia e na fase lútea, quando comparada com a fase folicular inicial. Esses resultados sugerem que a criopreservação de oócitos ou embriões com um protocolo específico para pacientes com câncer de mama, é eficaz e pode ser oferecida a mulheres jovens submetidas a tratamento citotóxico que têm preocupações relacionadas ao seu futuro reprodutivo. / Breast cancer is a relatively common malignancy in young adult women, justifying the concern about the potential gonadal toxicity related to chemotherapy. It is important to consider early referral of young breast cancer patients with reproductive desires to fertility specialists, in order to discuss the fertility preservation. Embryos or oocytes cryopreservation are among the main methods available, and to achieve that, controlled ovarian stimulation (COS) is the first step to be considered. From November 2014 to December 2016, 109 breast cancers patients under 40 years were enrolled to preserve their reproductive potential. They were divided according to the menstrual cycle status in: initial follicular phase, late follicular phase and luteal phase. In order to reduce the time necessary to obtain the oocytes, this study used the principle of random start, in which the COS can be initiated during any period of the menstrual cycle without negative consequences. Letrozole was used during all stimulation to reduce estradiol concentrations, regardless of tumor immunohistochemistry. In the presence of estradiol positive tumors, and indication of neoadjuvant chemotherapy, tamoxifen was administerd as an additional protective measure. A GnRH agonist was used to trigger ovulation, in order to mitigate the risk of ovarian hyperstimulation syndrome. The following parameters were analyzed: age, day of COS start, number of days required to COS, total FSH dosage, estradiol levels at final follicular maturation day, number of collected oocytes and number of vitrified oocytes. The mean age of patients was 31.27±4.22 years. The average duration of COS was 10.0±1.39 days. The mean number of collected oocytes was 11.62±7.96 and the mean number of vitrified oocytes was 9.60±6.87. The mean estradiol concentration on the day of the trigger was 706.30±450.48 pg/mL, and the mean dose of FSH administered was 2610.00±716.51 IU. When comparing the outcomes according to the phase of the cycle in which COS was commenced, there were no significant differences in the number of oocytes collected and vitrified, ovarian stimulation length and estradiol levels on the day of the trigger. It was observed a statistically decrease of the total FSH dose administered in the groups starting COS in the late follicular phase and in the luteal phase, when compared to the initial follicular phase These results suggest that oocyte or embryos cryopreservation with a specific protocol for breast cancer patients, is effective, safe, and may be offered to young women undergoing cytotoxic treatment who have concerns related to their reproductive future.

CoordenaÃÃo de AperfeiÃoamento de Pessoal de NÃvel Superior / Avaliou-se a eficiÃncia de dois protocolos de induÃÃo e sincronizaÃÃo do estro e da ovulaÃÃo (âCIDR-Bâ âOVSYNCHâ) em 90 novilhas acÃclicas da raÃa Girolanda. Os animais foram distribuÃdos em trÃs grupos, onde o primeiro (n=30) foi submetido ao protocolo âOVSYNCHâ, que consiste na aplicaÃÃo intramuscular (IM) de 1,0ml de GnRH, sete dias depois 2,0ml de prostaglandina F2a (PGF2a), 48h depois mais 1,0ml de GnRH e IATF 16h apÃs a segunda dose de GnRH. O segundo grupo (n=30) foi submetido ao tocolo âCIDR-Bâ, que consiste na introduÃÃo do implante intravaginal âCIDR-Bâ juntamente com a aplicaÃÃo IM de 2,0ml de benzoato de estradiol (BE), apÃs 8 dias à feita a remoÃÃo do âCIDR-Bâ e a aplicaÃÃo IM de 500UI de gonadotrofina sÃrica da Ãgua prenhe (PMSG) e 2,0ml de PGF2a, 24h apÃs à feita mais uma aplicaÃÃo IM de BE e IATF 30h depois desta aplicaÃÃo, ou seja, 54h apÃs a remoÃÃo do âCIDR-Bâ. O rceiro grupo (n=30), grupo controle, nÃo foi submetido a tratamento hormonal. Os diagnÃsticos de gestaÃÃes foram feitos 35 dias apÃs a primeira, segunda e terceira nseminaÃÃes artificiais (IA) por meio de ultra-sonografia (US). TambÃm foi avaliado o custo/benefÃcio de cada protocolo. O tratamento âCIDRBâ mostrou-se mais eficiente em primeira IA (p<0,05), assemelhando-se ao grupo controle com taxas de concepÃÃo e prenhez de 60 e 50%, respectivamente, demonstrando ter uma qualidade de estro comparÃvel ao natural. Na segunda IA, os tratamentos foram equivalentes nas taxas de prenhez, mas diferiram nas de concepÃÃo (96% âCIDR-Bâ e 76% âOVSYNCHâ). Deste modo, o protocolo âCIDR-Bâ mostrouse mais eficiente na induÃÃo da puberdade em novilhas girolandas com melhores taxas de concepÃÃo e prenhez em primeira IA, reduzindo onsideravelmente a idade ao primeiro parto. AlÃm disso, apresenta-se economicamente viÃvel com possibilidade de reutilizaÃÃo do implante, devendo-se atentar aos cuidados com higiene e manipulaÃÃo do produto. / Two oestrus and ovulation synchronization protocols (CIDR-B and OVSYNCH) were tested on 90 acyclical Girolanda heifers. The animals were distributed in three groups. Group I (n=30) was submitted to the OVSYNCH protocol, consisting of: intramuscular (IM) application of 1.0 ml gonadotropin-releasing hormone (GnRH), 2.0 ml rostaglandin F2a (PGF2a) after 7 days, 1.0ml GnRH 48h later, then timed artificial insemination (TAI) 16h after the second application of GnRH. Group II (n=30) was submitted to the CIDR-B protocol, consisting of: introduction of intravaginal CIDR-B implant and application of 2.0 ml estradiol benzoate (EB) IM, implant removal after 8 days, application of 500 UI pregnant mare serum gonadotropin (PMSG) and 2.0 ml PGF2a, a second IM application of BE 24h subsequently, then TAI 30h later (i.e. 54h following implant removal). Group III (n=30; control group) received no hormonal treatment. Gestation was verified ltrasonographically 35 days after the first, second and third AI. The cost-benefit ratio of each protocol was also determined: The CIDR-B protocol was most efficient in the first AI in which it was comparable to the control group in providing a near-natural oestrus quality (conception and pregnancy rates of 60% and 50%, respectively; p<0.05). In the second AI, the two treatments yielded similar pregnancy rates, but differed in conception rates (96% for CIDR-B; 76% for OVSYNCH). Thus the CIDR-B protocol was the more efficient in inducing puberty in Girolanda heifers, featuring the best conception and pregnancy rates in the first AI and considerably reducing age at first birth. It is moreover economically feasible as the implant may be reused provided apropriate care is given to hygiene and handling.

A glutamina (Gln) e o glutamato (Glu) participam ativamente do metabolismo, sendo fontes de energia para células de intensa proliferação, como enterócitos, células do sistema imune, trofloblastos e embriões. O objetivo geral foi avaliar os efeitos da suplementação de Lglutamina e L-ácido glutâmico (1%) nas dietas: (a) marrãs desde a chegada ao local de experimentação até a manifestação do primeiro estro, seguido do primeiro ciclo estral e flushing (capítulo I), (b) primíparas no terço final da primeira gestação, seguida da lactação, intervalo desmame estro e terços inicial e médio até 73 dias da gestação subsequente (capítulo II); e nas dietas de leitões do desmame aos 49 dias de idade (capítulo III). No capítulo I, as fêmeas suplementadas durante o flushing, foram abatidas aos 5 dias de gestação para avaliação dos embriões e ovário. O número de corpos lúteos do grupo suplementado foi superior numericamente ao grupo controle (20,25 versus 17,88, respectivamente), sugerindo possível efeito da suplementação na taxa de ovulação, acompanhado do maior percentual de células vivas e menor de células mortas, com significância nas variâncias, indicativas de menor variabilidade e melhor homogeneidade das estruturas, levando a possível influência na viabilidade embrionária. No capítulo II, os pesos corporais e as espessuras de toucinho (ET) das primíparas não revelaram diferenças significativas nos períodos analisados. As concentrações de glutamina e glutamato no plasma sanguíneo foram significativas para o tratamento (p<0,05) até o parto, revelando concentrações maiores para as fêmeas suplementadas. Destacou-se diferença significativa na sobrevivência dos leitões no aleitamento em favor do grupo suplementado. Aos 73,45 ± 1,61 dias da segunda gestação, o peso dos fetos do grupo suplementado (p=0,0690) foi maior em relação aos do grupo controle. Os leitões desmamados (Capítulo III) foram avaliados em arranjo fatorial 2x2, sendo um fator a suplementação da mãe e outro a suplementação dos leitões. O peso ao desmame foi significativo para o fator Mãe, destacando maiores pesos para os leitões oriundos de mães controles (p=0,0296), contudo de 21 a 34 dias de idade, a conversão alimentar foi melhor para os leitões oriundos de mães suplementadas (p=0,0522). Ao final da terminação (133 dias de idade), os tratamentos não mostraram diferenças significativas em relação ao desempenho. Considerando que o peso dos leitões de mães controles iniciou superior ao desmame, os grupos se igualaram em relação ao peso final. Os resultados trazem novas perspectivas para futuras pesquisas em relação ao uso da suplementação de L-glutamina e L-ácido glutâmico, principalmente no flushing, nos terços inicial e médio da gestação, pois, pode influir positivamente na taxa de ovulação e desenvolvimento homogêneo e maior peso dos fetos. Além disso, a ação no desenvolvimento dos leitões, sobrevivência no aleitamento e quanto à integridade intestinal no período pós desmame também merecem atenção, o que pode contribuir, na abordagem interativa dos parâmetros, influência positiva na economia da produção. / Glutamine (Gln) and glutamate (Glu) actively participate in metabolism as energy sources for intense cells proliferation, such as enterocytes, immune cells, and embryos trophoblasts. The main objective was to evaluate the effects of L-glutamine and L-glutamic acid (1%) supplementation in the diets: (a) sows since arrival to the experimental place until the appearing of the first heat, followed by the first estrous cycle and flushing (chapter I), (b) gilts at the end of the first third of pregnancy, then lactation, weaning estrus interval and initial and middle thirds of up to 73 days of gestation subsequent (Chapter II); and in weaning diets of piglets at 49 days of age (Chapter III). In Chapter I, the females supplemented during the flushing were slaughtered at the 5th gestation day for embryos and ovary evaluation. The number of corpora lutea in the supplemented group was numerically higher than in the control group (20.25 vs. 17.88, respectively), suggesting a possible effect of supplementation on ovulation rate, accompanied by the highest percentage of live cells and smaller percentage of dead cells with significance on variances, which are indicative of lower variability and better structures homogeneity, leading to possible influence on embryo viability. In Chapter II, primiparous revealed no significant differences in the weights backfat thickness at the end of gestation, lactation and subsequent pregnancy. The glutamine and glutamate concentrations in blood plasma were significant for the treatment (p <0.05) until delivery, showing higher concentrations for supplemented females. Noteworthy the significant difference in the piglets survival during lactation in favor of the supplemented group. At 73.45 ± 1.61 days of the second pregnancy, the fetal weights in the supplemented group (p = 0.0690) was higher compared to the control groupy. Weaned piglets (Chapter III) were evaluated in a 2x2 factorial arrangement, with mother supplementation and piglets supplementation as factors. The weaning weight was significant for the control group, regardless of mothers supplementation (p = 0.0296), however, from 21 to 34 days of age, feed conversion was better for piglets from supplemented mothers (p = 0, 0522). By the end of termination (133 days of age), the treatments did not show significant differences, considering that the weight of controls piglets was heavier at weaning, the animals were equal with respect to final weight. The results open new perspectives for future research regarding the use of L-glutamine and L-glutamic acid supplementation, especially in flushing, in the early and middle thirds of pregnancy, since it can have a positively influence in ovulation rate, homogeneous development and greater fetues weight. Moreover, its effect on piglets development, both in the survival during lactation aspect, as to gut integrity in the post weaning period, also deserve attention, since the interactive approach can provide additives in the production economy.

Foram realizados cinco experimentos com o objetivo de sincronização do estro e indução da ovulação em tempo fixo em éguas. Experimento I: avaliou a eficácia de um novo protocolo hormonal para a sincronização do estro, sendo realizado durante o período transicional em éguas cujo status reprodutivo era desconhecido. Experimento II: foi delineado para determinar o momento ideal para retirada dispositivo intravaginal de progesterona (DIP), sendo o dispositivo retirado no dia 7, 8 ou 9 do protocolo de tratamento hormonal. Experimento III: testou se a eficiência do protocolo é dependente da fase do ciclo estral da égua e definiu o melhor momento para indução da ovulação. Experimentos IV e V: as éguas foram submetidas ao protocolo completo de sincronização da onda folicular e indução da ovulação em diferentes fases do ciclo estral ou com status reprodutivo conhecido. A hipótese testada foi de que a sincronização do estro e indução da ovulação, com o uso do DIP de 1,44g provoca a supressão do crescimento folicular e através da indução da ovulação, com hCG e GnRH, promove a ovulação dentro de 42 ± 6 horas de no mínimo 75% dos animais. Para isso, os efeitos das prostaglandinas e progestágenos foram avaliados quanto à capacidade de sincronizar a onda de crescimento folicular. Um novo tratamento para induzir a ovulação em tempo fixo foi testado com uma combinação de GnRH e hCG em dois momentos estratégicos (D10 e D12) visando maximizar o número de éguas ovuladas. O protocolo com administração de prostaglandina no D0, D6 e D8 juntamente com a colocação do DIP mantido durante 8 dias (D0 ao D7) demonstrou ser eficaz para suprimir a taxa de crescimento folicular em éguas cíclicas. Nas éguas submetidas a este protocolo as ovulações que ocorreram naturalmente se concentraram entre os dias 10 e 13 do tratamento. Foi testada a eficiência da indução da ovulação no D10 e D12. Na maioria dos animais tratados, o folículo pré-ovulatório foi responsivo à combinação de GnRH e hCG promovendo o sucesso da indução da ovulação. A eficiência do protocolo hormonal testado para sincronização do estro e da ovulação foi de 76,73%, sustentando a hipótese deste estudo. Novos estudos devem ser realizados em um maior número de animais para possíveis adequações na terapia hormonal e verificação do resultado em um grande número experimental de animais. / Five experiments were conducted with the objective of estrus synchronization and fixed time ovulation induction in mares. Experiment I: evaluated the efficacy of a new hormonal protocol for estrus synchronization in mares whose reproductive status was unknown during the transitional period. Experiment II: was designed to determine the best time to remove the P4 intravaginal device (PID). The device was removed on day 7, 8 or 9 of the hormonal treatment protocol. Experiment III: tested if protocol efficiency depends on the stage of mares estrus cycle and indicated the best time for hormonal induction of ovulation. Experiments IV and V: mares were submitted to the full protocol of follicular wave synchronization and ovulation induction at different stages of estrus cycle or at known reproductive status. The tested hypothesis was that the estrus synchronization and induction of ovulation, using an PID of 1.44g, causes suppression of follicular growth, and ovulation induction using hCG and GnRH promote ovulation within 42 ± 6 hours of at least 75% of treated animals. The effect of prostaglandin and progestagens at specific times were evaluated for the ability to synchronize follicular wave. A new treatment to induce fixed time ovulation was tested with GnRH and hCG combination in two strategic moments (D10 and D12) to maximize the number of ovulated mares. Administration of prostaglandin at D0, D6 and D8 together with PID maintained for 8 days (D0 to D7) proved to be effective to suppress follicular growth during reproductive period. In mares submitted to this protocol, ovulation occurred naturally and concentrated between D10 and D13. The ovulation induction efficiency was tested at D10 and D12. Most of the animals had preovulatory follicle responsiveness to GnRH and hCG, promoting the success of ovulation induction. The efficiency of the tested synchronization of estrus and ovulation induction protocol was 76.73% and supported the hypothesis of this study. Further studies should be performed on a larger number of animals for possible adjustments in hormonal therapy and verification of the result in a large number of animals.

A glutamina (Gln) e o glutamato (Glu) participam ativamente do metabolismo, sendo fontes de energia para células de intensa proliferação, como enterócitos, células do sistema imune, trofloblastos e embriões. O objetivo geral foi avaliar os efeitos da suplementação de Lglutamina e L-ácido glutâmico (1%) nas dietas: (a) marrãs desde a chegada ao local de experimentação até a manifestação do primeiro estro, seguido do primeiro ciclo estral e flushing (capítulo I), (b) primíparas no terço final da primeira gestação, seguida da lactação, intervalo desmame estro e terços inicial e médio até 73 dias da gestação subsequente (capítulo II); e nas dietas de leitões do desmame aos 49 dias de idade (capítulo III). No capítulo I, as fêmeas suplementadas durante o flushing, foram abatidas aos 5 dias de gestação para avaliação dos embriões e ovário. O número de corpos lúteos do grupo suplementado foi superior numericamente ao grupo controle (20,25 versus 17,88, respectivamente), sugerindo possível efeito da suplementação na taxa de ovulação, acompanhado do maior percentual de células vivas e menor de células mortas, com significância nas variâncias, indicativas de menor variabilidade e melhor homogeneidade das estruturas, levando a possível influência na viabilidade embrionária. No capítulo II, os pesos corporais e as espessuras de toucinho (ET) das primíparas não revelaram diferenças significativas nos períodos analisados. As concentrações de glutamina e glutamato no plasma sanguíneo foram significativas para o tratamento (p<0,05) até o parto, revelando concentrações maiores para as fêmeas suplementadas. Destacou-se diferença significativa na sobrevivência dos leitões no aleitamento em favor do grupo suplementado. Aos 73,45 ± 1,61 dias da segunda gestação, o peso dos fetos do grupo suplementado (p=0,0690) foi maior em relação aos do grupo controle. Os leitões desmamados (Capítulo III) foram avaliados em arranjo fatorial 2x2, sendo um fator a suplementação da mãe e outro a suplementação dos leitões. O peso ao desmame foi significativo para o fator Mãe, destacando maiores pesos para os leitões oriundos de mães controles (p=0,0296), contudo de 21 a 34 dias de idade, a conversão alimentar foi melhor para os leitões oriundos de mães suplementadas (p=0,0522). Ao final da terminação (133 dias de idade), os tratamentos não mostraram diferenças significativas em relação ao desempenho. Considerando que o peso dos leitões de mães controles iniciou superior ao desmame, os grupos se igualaram em relação ao peso final. Os resultados trazem novas perspectivas para futuras pesquisas em relação ao uso da suplementação de L-glutamina e L-ácido glutâmico, principalmente no flushing, nos terços inicial e médio da gestação, pois, pode influir positivamente na taxa de ovulação e desenvolvimento homogêneo e maior peso dos fetos. Além disso, a ação no desenvolvimento dos leitões, sobrevivência no aleitamento e quanto à integridade intestinal no período pós desmame também merecem atenção, o que pode contribuir, na abordagem interativa dos parâmetros, influência positiva na economia da produção. / Glutamine (Gln) and glutamate (Glu) actively participate in metabolism as energy sources for intense cells proliferation, such as enterocytes, immune cells, and embryos trophoblasts. The main objective was to evaluate the effects of L-glutamine and L-glutamic acid (1%) supplementation in the diets: (a) sows since arrival to the experimental place until the appearing of the first heat, followed by the first estrous cycle and flushing (chapter I), (b) gilts at the end of the first third of pregnancy, then lactation, weaning estrus interval and initial and middle thirds of up to 73 days of gestation subsequent (Chapter II); and in weaning diets of piglets at 49 days of age (Chapter III). In Chapter I, the females supplemented during the flushing were slaughtered at the 5th gestation day for embryos and ovary evaluation. The number of corpora lutea in the supplemented group was numerically higher than in the control group (20.25 vs. 17.88, respectively), suggesting a possible effect of supplementation on ovulation rate, accompanied by the highest percentage of live cells and smaller percentage of dead cells with significance on variances, which are indicative of lower variability and better structures homogeneity, leading to possible influence on embryo viability. In Chapter II, primiparous revealed no significant differences in the weights backfat thickness at the end of gestation, lactation and subsequent pregnancy. The glutamine and glutamate concentrations in blood plasma were significant for the treatment (p <0.05) until delivery, showing higher concentrations for supplemented females. Noteworthy the significant difference in the piglets survival during lactation in favor of the supplemented group. At 73.45 ± 1.61 days of the second pregnancy, the fetal weights in the supplemented group (p = 0.0690) was higher compared to the control groupy. Weaned piglets (Chapter III) were evaluated in a 2x2 factorial arrangement, with mother supplementation and piglets supplementation as factors. The weaning weight was significant for the control group, regardless of mothers supplementation (p = 0.0296), however, from 21 to 34 days of age, feed conversion was better for piglets from supplemented mothers (p = 0, 0522). By the end of termination (133 days of age), the treatments did not show significant differences, considering that the weight of controls piglets was heavier at weaning, the animals were equal with respect to final weight. The results open new perspectives for future research regarding the use of L-glutamine and L-glutamic acid supplementation, especially in flushing, in the early and middle thirds of pregnancy, since it can have a positively influence in ovulation rate, homogeneous development and greater fetues weight. Moreover, its effect on piglets development, both in the survival during lactation aspect, as to gut integrity in the post weaning period, also deserve attention, since the interactive approach can provide additives in the production economy.