Orientador: Elisabeth Criscuolo Urbinati / Banca: Cleni Mara Marzocchi Machado / Banca: Luis Henrique Montrezor / Banca: João Batista Kochenborger Fernandes / Banca: Flávio Ruas de Moraes / Resumo: O sistema imune é dividido em duas partes que se complementam: o sistema imune inato (não específico) e o adquirido (específico). O sistema imune inato é considerado como a primeira linha de defesa e inclui barreiras físicas (pele e muco) e componentes celulares e moleculares (macrófagos, células killer e fatores solúveis de imunidade, como lisozima, proteínas do sistema complemento, peptídeos antimicrobianos, entre outros). No processo de criação, o sistema imune dos peixes pode ser prejudicado por vários fatores, mas efeitos benéficos podem ser observados com o uso de substâncias conhecidas como imunoestimulantes. Dentre os imunoestimulantes estudados, os glicanos vêm sendo amplamente utilizados como importantes indutores de mecanismos não específicos de defesa. Em algumas espécies de peixes tropicais, como o pacu (Piaractus mesopotamicus) e matrinxã (Brycon amazonicus), estudos observaram o papel da vitamina C como imunoestimulante avaliando a hematologia dos peixes como indicador das alterações imunológicas. O número de leucócitos e de trombócitos é considerado importante indicador de seu estado de saúde. Entretanto, não são conhecidos estudos que avaliem outros parâmetros imunológicos bem como os efeitos do glicano nas respostas imunológicas inatas de peixes tropicais. O pacu, por ser uma espécie onívora, de fácil cultivo e adaptada a ampla variedade de alimentos, tem grande importância na piscicultura brasileira e por esta razão foi escolhido como modelo experimental nesta pesquisa. O objetivo deste trabalho foi testar, inicialmente, técnicas para avaliação de alguns mecanismos inatos de defesa (atividade respiratória de leucócitos e concentração e atividade de lisozima) nesta 37 espécie tropical, cujos resultados são apresentados no capítulo 2 desta tese. Este estudo registrou essas respostas imunes inatas no pacu ...(Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: The immune system is divided in two parts that complement each other: the specific and non-specific immune system. The non-specific immune system is the primary defence line and includes natural barriers (skin and mucus) and cellular and molecular components (macrophages, natural killer cells, immune soluble factors, like lysozyme, complement, antimicrobials peptides, among others). In all farming, the immune system of fish may be damaged by many factors, but the benefic effects may be observed using immunostimulants. It has been of common knowledge that glucans are the most known of them and are being used like nonspecific defence mechanisms stimulants. In some tropical fish species, such as pacu (Piaractus mesopotamicus) and matrinxã (Brycon amazonicus), studies evaluated vitamin C effect as immunostimulant, considerating the fish hematology as immune alterations indicator. The leucocytes and trombocytes number is considerated an important health indicator. However, there are no studies evaluating different immune parameters and the glucan effect in innate immune response of tropical fish. The pacu is an omnivore specie of great importance to Brazilian fish farming. For this reason, it was chosen as experimental model in this research. The aim of this work was to test some techniques for evaluation of some defence innate mechanisms (burst oxidative and lysozyme) in this tropical specie, whose results are showed in chapter 2 of this work. This research recorded these immune responses of pacu and established adequate methodologies for its determination. After, this study evaluated the effect of glucan, administered to intraperitoneal injection and incorporated in the diet, in stimulation of some immune systems components of pacu. Besides, it was also verified 39 the stress responses after the capture of pacu fed with diets supplemented with glucan ...(Complete abstract, click electronic access below) / Doutor

Orientador: Elisabeth Criscuolo Urbinati / Coorientador: Fábio Sabbadin Zanuzzo / Banca: Marco Antonio de Andrade belo / Banca: Janessa Sampaio de Abreu / Resumo: Manejos inerentes da piscicultura intensiva, como o transporte, desencadeiam resposta de estresse nos animais, podendo causar perdas na produtividade. Como alternativa, o β-glucano, um polissacarídeo derivado da parede celular de cereais, bactérias e fungos, vem sendo muito utilizado na aquicultura pelo seu efeito imunoestimulante. Há evidências de que o β-glucano minimiza os efeitos negativos do estresse por atuar no sistema imune, porém é pouco investigado o seu efeito direto sobre a resposta clássica de estresse. Neste contexto, o presente estudo avaliou, em juvenis de pacu, o uso oral de 0.1% de duas gerações de β-glucano, de diferentes graus de pureza e processamentos, na resposta de estresse e no sistema imune inato, após transporte e inoculação com Aeromonas hydrophila. Avaliamos a concentração de cortisol e glicose plasmáticos como indicadores da resposta de estresse, a atividade respiratória de leucócitos, a atividade hemolítica do sistema complemento, a atividade de lisozima e contagem total e diferencial de leucócitos, como indicadores do sistema imune inato, e o hematócrito, número de eritrócitos, concentração de hemoglobina e volume corpuscular médio de eritrócitos como indicadores hematológicos. As duas gerações de β-glucano utilizadas modularam os níveis de cortisol circulantes, mantendo os níveis elevados até 24 horas após o transporte, sem alteração após o desafio bacteriano. O β-glucano aumentou a atividade hemolítica do sistema complemento e de lisozima apó... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Inherent handling in intensive fish farming, such as transport, trigger stress response in animals, and may cause losses in productivity. As an alternative, the β-glucan, a polysaccharide derived from the cell walls of cereals, bacteria and fungi, has been widely used in aquaculture due their immunostimulatory effect. The β-glucan minimizes the negative effects of stress by acting on the immune system, but it is little investigated its direct effect on the classical stress response. In this context, the present study evaluated in pacu, the oral administration of 0.1% of two generations of β-glucan, with different degrees of purity and processing methods, on the stress and innate immune system responses, after transport and inoculation with Aeromonas hydrophila. We evaluated the plasma concentration of cortisol and glucose, as stress response indicators, the respiratory activity of leukocytes, the hemolytic activity of the complement system, lysozyme activity and total and differential counts of leukocytes as innate immune system indicators, and hematocrit, number of erythrocytes, hemoglobin concentration, and mean corpuscular volume of erythrocytes as hematological indicators. The two generations of β-glucan modulated the circulating levels of cortisol, keeping the high levels 24 hours after transportation, without changes after the bacterial challenge. The β-glucan increased the hemolytic activity of the complement system and lysozyme after handling and after bacterial inoculation, and kept the population of circulating leukocytes after recovery of leukopenia, demonstrating the immunostimulatory effect. The general results of this study suggest the strengthening of the immune response of pacu juveniles fed for 15 with feed containing 0,1% β-glucan derived from yeast cell wall (Sacaromyces cerevisiae) days before stressful ... (Complete abstract click electronic access below) / Mestre

Orientador: Maria Célia Portella / Coorientador: Rosangela Kiyoko Jomori Bonichelli / Banca: Lizandra Amoroso / Banca: Margarida Maria Barros / Banca: Luís André Nassr de Sampaio / Banca: Rodrigo Takata / Resumo: Estudos sobre anomalias esqueléticas em larvas e juvenis têm sido desenvolvidos em várias espécies de peixes produzidas comercialmente. Isso porque o desenvolvimento ósseo anormal pode promover o aumento do custo de produção devido à diminuição da sobrevivência, efeitos negativos no crescimento, pior conversão alimentar, além do aumento da susceptibilidade à doenças. Os fatores causadores de anormalidades esqueléticas em larvas e juvenis de peixes são, principalmente, fatores nutricionais, ambientais e de origem genética. Porém, nada se sabe sobre esse assunto em espécies sul-americanas, como o pacu. Desta forma, o objetivo desta pesquisa foi descrever o desenvolvimento ósseo do pacu; avaliar a incidência de anomalias esqueléticas durante o desenvolvimento larval; verificar o papel da vitamina A na má formação esquelética e a expressão gênica envolvida nesse processo; e conhecer o turnover isotópico (13C) do tecido ósseo e muscular pela influência da vitamina A, com a utilização da técnica de isótopos estáveis / Abstract: Studies on skeletal anomalies in larvae and juveniles have been developed for several fish species commercially produced. The reason is because these anomalies cause many problems to aquaculture, such as increased production costs due to decreased survival, adverse effects on growth, decreased feed conversion, and increased susceptibility to diseases. The factors that determine the incidence of skeletal anomalies in fish larvae and juveniles are mainly nutritional, environmental and genetic. However, nothing is known about this subject in South American species, such as the pacu. Therefore, we aimed to describe the bone development of pacu; to evaluate the incidence of skeletal anomalies during larval development; to study the role of vitamin A in skeletal formation and the gene expression involved in this process, and to understand the turnover of vitamin A in bone and muscle tissues with the use of stable isotopes technique / Doutor

Orientador: Flávio Ruas de Moraes / Banca: Claudinei da Cruz / Banca: Eduarado Makoto Onaka / Resumo: O cromo trivalente é um micronutriente essencial para saúde dos animais atuando no metabolismo de carboidratos, gorduras e proteínas. Porém produz efeitos antagônicos como redução do cortisol plasmático e potencialização da insulina. A suplementação na dieta de peixes visa à redução de problemas decorrentes do estresse devido à melhora do sistema imune. Assim o presente trabalho avaliou o cromo trivalente como agente imunomodulador, utilizando 0, 12, 18, 36 mg de cromo/kg de dieta durante 90 dias, estudando o desempenho produtivo, a hematologia e a resposta celular na inflamação aguda induzida por infiltrado de Aeromonas hydrophila e tioglicolato na bexiga natatória de pacus (Piaractus mesopotamicus). Para o ensaio de desempenho e hematologia os peixes foram distribuídos em esquema fatorial 4X2, sendo quatro tratamentos e duas repetições. Os dados revelaram que não houve interferência do cromo na conversão alimentar, no ganho de peso, no ganho de comprimento total, no ganho de comprimento parcial e na taxa de crescimento específico. O número de eritrócitos, hematócrito e o volume corpuscular médio embora apresentassem diferenças significativas (P<0,05) após 90 dias de suplementação em relação aos peixes não suplementados, mostraram amplas e inconclusivas oscilações. Portanto a suplementação com cromo trivalente não interferiu nestes parâmetros...(Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: The trivalent chromium is an essential element animal's health acting over carbohydrates, fat and proteins metabolism. However, this substance produces antagonist effects such as reduction of plasma cortisol and increase of insulin. The purpose of the supplemented given to fishes was to decrease disturbance caused by stressing factors due to immunity improvement. Therefore, the present work aimed to evaluate the trivalent chromium as an immunomodulator substance by using 0, 12, 18, and 36 mg/kg of chromium offered during 90 days, to study the growth, blood parameters and cellular response in acute inflammation induced by Aeromonas hydrophila and thioglycolate in the swim bladder of Pacu (Piaractus mesopotamicus). Fishes were allocated into four groups, at a 4X2 factorial and two replicates. Data revealed there was no influence of chromium on feed conversion, weight gain, total length gain, partial length gain and specific growth rate. Although some differences (P<0.05) were found for erythrocytes number, hematocrit and mean corpuscular volume (MCV) values after 90 days of experiment in comparison to non supplemented fishes, all differences found were wide and showed no conclusive oscillations. The fishes were euthanatized by deepening of anesthesia and exudates was collected. The results showed a progressive accumulation of total inflammatory cells after 6, 24 and 48 h for both stimulated groups. Control group was injected saline solution. The results showed a progressive accumulation of total inflammatory cells after 6, 24 and 48 h for both stimulated groups. Fishes fed diet consisting of 18 mg/kg of trivalent chromium presented an accentuated inflammatory reaction, with accumulation of thrombocytes, lymphocytes and of a lesser amount of macrophages in A. hydrophila induced fishes. Lymphocytes and thrombocytes were predominant in thioglycolate induced fishes...(Complete abstract, click electronic access below) / Mestre

Orientador: Elisabeth Criscuolo Urbinati / Coorientador: Flávia Maria de Souza Carvalho / Banca: Marisa Narciso Fernandes / Banca: Luiz Roberto Furlan / Resumo: Quando as células de um organismo são expostas a um estressor, elas respondem sintetizando um grupo de proteínas denominadas proteínas de choque térmico (heat shock proteins - hsp), agrupadas em quatro famílias: hsp-90, hsp-70, hsp-60 e pequenas hsp's, sendo a família das hsp-70 a mais conservada e filogeneticamente ubíqua, e que tem sido considerada indicador molecular da resposta de estresse. O objetivo deste estudo foi caracterizar as respostas fisiológicas e moleculares de pacus (Piaractus mesopotamicus) submetidos à elevação exógena do cortisol, utilizando a expressão do gene da hsp-70 como ferramenta de determinação da resposta molecular. Um total de 104 peixes (67,5±11,7 g) recebeu implantes intraperitoniais de manteiga de cacau contendo 0, 50 e 100 μg cortisol /g de peso vivo, e foi amostrado 1, 3, 6 e 24 horas após o implante, para determinação das concentrações séricas de cortisol, sódio e potássio e plasmáticas de glicose e cloreto. Um grupo foi amostrado antes do implante (grupo basal). Para a expressão gênica foram analisados o grupo basal e o injetado com 50 μg cortisol/g. O cortisol circulante aumentou a partir de 1 hora após o implante dos péletes contendo cortisol e se manteve alto até 24 horas depois. A resposta da glicose circulante acompanhou as elevações do cortisol no sangue, confirmando sua ação gliconeogênica, porém houve ausência de respostas nos indicadores iônicos. A expressão do gene hsp70 do pacu mostrou leve aumento 3 e 6 horas após o implante, mas foi mais expressiva 24 horas depois, indicando a possibilidade do uso da expressão gênica da hsp70 como marcador de elevação dos níveis de cortisol e da resposta de estresse / Abstract: When the cells of an organism are exposed to a stressor, they respond by synthesizing a group of proteins called heat shock proteins (hsp), which are grouped into four families: Hsp-90, Hsp-70, Hsp-60 and small hsp's, where the family of Hsp-70 is the most conserved and phylogenetically ubiquitous, and has been considered an indicator of molecular stress response. The aim of this study was to characterize the molecular and physiological responses of pacu (Piaractus mesopotamicus) to elevation exogenous cortisol, using gene expression of hsp-70 as a tool for determining the molecular response. A total of 104 fish (67.5 ± 11.7 g) received intraperitoneal implants of cocoa butter containing 0, 50 and 100 mg cortisol / g of live weight and were sampled 1, 3, 6 and 24 hours after implantation for determination of serum cortisol, sodium and potassium and plasma glucose and chloride. One group was sampled before implantation (baseline group). For gene expression were analyzed the baseline group and the injected with 50 mg cortisol / g. The cortisol increased from 1 hour after implantation of pellets containing cortisol and remained high until 24 hours later. The response of circulating glucose followed elevations of cortisol in the blood, confirming gluconeogenic action, but there were no responses in ion indicators. The expression of the hsp70 gene showed slight increase 3 and 6 hours after implantation, but was more pronounced after 24 hours, indicating the possibility of using gene expression of hsp70 as a marker of increased levels of cortisol and stress response / Mestre

Orientador: Ricardo de Oliveira Orsi / Banca: Margarida Maria Barros / Banca: Lidia Maria Ruv C Barreto / Resumo: O cultivo intensivo de peixes em tanque-rede pode induzir ao estresse fisiológico, promovendo queda de desempenho do animal e da imunocompetencia. A utilização de imunoestimulantes, como a própolis, pode melhorar a imunidade inata dos animais e fornecer resistência a patogenos durante períodos de estresse elevado. Os objetivos deste trabalho foram avaliar o efeito da própolis em juvenis de pacu, criados em tanques-rede e arraçoados com baixas e altas frequências alimentares, por meio do desempenho produtivo e das enzimas intestinais. Foram utilizados juvenis de pacu (Piaractus mesopotamicus), distribuídos em 18 tanques-rede com estocagem de 90 alevinos/m3 com peso médio inicial de 27,57±7,21 g. Foram utilizados três níveis de própolis incorporada na ração comercial, nos seguintes tratamentos: 0,0; 1,0 e 10,0 g de própolis/kg de ração, fornecidas em duas frequências alimentares: quatro e 24 vezes ao dia em um delineamento fatorial (3x2) e com taxa de alimentação de 7,0%. Os resultados foram analisados por ANOVA, seguida do teste de Tukey para comparação de médias. A suplementação de própolis na dieta melhorou o ganho de peso dos animais, na frequência alimentar de 24 vezes ao dia. Entretanto, quando a frequência alimentar foi menor os níveis de própolis não melhoraram o ganho de peso / Abstract: Intensive fish farming in net cages can lead to physiological stress, thus impairing animal performance and resistance to diseases. The use of immunostimulants, such as propolis, can bring benefits mainly in the initial phases of the culture. This work aimed at evaluating the effect of propolis in juveniles of Pacu, reared in net cages and fed high and low feeding frequencies, by analyzing their performance and digestive enzmes. Pacus were distributed in 18 cages with 90 fish/m3 and 27.57±7.21 g. Three levels of propolis were added in fish diet (0.0; 1.0 and 10.0g/kg) supplied in two feeding frequencies (four and 24/day) in a factorial arrangement (3x2) and a feeding rate corresponding to 7% of fish weight. Results were analyzed by ANOVA and Tukey test comparison of averages.Fish diet with propolis with a feeding frequency of 24 times a day resulted in improved weight gain / Mestre

Orientador: Elisabeth Criscuolo Urbinati / Coorientador: Dalton José Carneiro / Banca: Elisabete Maria Macedo Viegas / Banca: Nancy Carneiro / Resumo: O presente experimento avaliou o efeito de diferentes níveis de levedura seca de destilaria alcoólica (Saccharomyces cerevisiae) em dietas para juvenis de pacu (Piaractus mesopotamicus) sobre aspectos do metabolismo, desempenho produtivo e composição corporal. Em delineamento em blocos casualizados, em esquema de parcela subdividida no tempo ("Split Plot in Time") foram testados quatro níveis de substituição da farinha de peixe por levedura, 25, 50, 75 e 100 %, com duas avaliações, aos 45 e 87 dias do início do experimento. As dietas foram fornecidas duas vezes ao dia, ad libtum. Duzentos peixes foram distribuídos em 20 tanques com capacidade para 1330 l, instalados no interior de uma estufa e com fluxo individual de água. Os parâmetros de qualidade de água mantiveram-se adequados ao longo do experimento. Foi possível a substituição da farinha de peixe por levedura até o nível de 75 % sem se constatar prejuízo nos diversos parâmetros analisados. O nível mais elevado de levedura na dieta (100 %) levou aos piores resultados de desempenho produtivo, com menor taxa de crescimento instantâneo. Não houve influência significativa dos tratamentos sobre a composição corporal dos peixes, exceto pela maior concentração de material mineral no corpo dos peixes que receberam 100 % de substituição. Este nível de substituição provocou alta mortalidade. Foi observado, nos peixes alimentados com dietas contendo 100 % de substituição de farinha de peixe por levedura, hiperglicemia e decréscimo no glicogênio hepático, conteúdo total de lipídios e proteína plasmática. Seguindo o mesmo padrão de resposta, os hepatócitos apresentaram a mais baixa área e volume do citoplasma no mesmo tratamento. Aumento nos níveis de hematócrito foram detectados nos peixes que receberam dieta com 100 % de proteína fornecida pela levedura, aos 87 dias. As demais dietas com levedura... / Abstract: The present experiment assessed the effect of inclusion of different levels of the single cell protein molasses yeast (Saccharomyces cerevisiae) in the diet of juvenile pacu (Piaractus mesopotamicus) replacing fish meal. Five isoproteic (26 % CP) and isocacloric (4000 kcal GE/kg) diets were formulated in which the levels of substitution by yeast were 25, 50, 75 and 100 % and tested in two periods, following a Split Plot in Time design. Diets were fed twice a day ad libitum. Two hundred fish were allotted in 20 cement tanks of 1330 l, with continuous water flow, and sampled at 45 and 87 days after start feeding. It was possible to include until 75 % of molasses yeast in substitution of fish meal without negative effects in the parameters analyzed. The highest level of yeast in the diet (100 %) showed delayed growth, with low specific growth rate and did not affected significantly the body composition, excepting for higher mineral content. The same level of yeast provoked high mortality of fish. Its was observed hyperglycemia and decrease in liver glycogen, total liver lipid content and plasma protein in fish fed on diet containing 100 % molasses yeast. Following the same pattern of response hepatocytes showed the lowest area and volume of cytoplasm, at the same treatment. Increase in hematocrit levels appeared at 100 % molasses yeast diet only at 87 days. The other molasses yeast diets (25, 50 and 75 %) presented similar performance compared to control diet. Concluding, the results of the present study suggest that the diet with total replacement of fish meal by molasses yeast showed an antinutritional effect / Mestre

Orientador: Julieta Rodini Engrácia Moraes / Coorientador: Flávio Ruas de Moraes / Coorientador: Gustavo da Silva Claudiano / Banca: Rogério Salvador / banca: Laura Satiko Okada Nakaghi / Resumo: Bactérias do gênero Aeromonas causam infecção caracterizada por septicemia, sendo a forma aguda desta afecção a mais prevalente em peixes. Esta bacteriose é responsável por altas taxas de morbidade e mortalidade, ocasionando grandes perdas no setor de produção aquícola. Deste modo, o entendimento de sua fisiopatogenia é de suma importância ao desenvolvimento de estratégias voltadas à intervenção e controle da aeromonose em peixes. Este trabalho visou caracterizar por meio de estudos morfológicos e microbiológicos a fase aguda do processo séptico em diferentes tecidos de pacus (Piaractus mesopotamicus) infectados experimentalmente com Aeromonas hydrophila. Para isso, 160 pacus com peso médio de 250g foram inoculados por via celomática com A. hydrophila (1,78 x 109 UFC/mL) e nos tempos pré-estipulados de 0 (controle), 1, 3, 6 e 9 horas pós-inoculação (hpi) os animais foram anestesiados e o material biológico coletado para realização de exames microbiológicos, histopatológicos e ultraestruturais. Foi evidenciada a presença de necrose, processos degenerativos, alterações vasculares e associação da bactéria a essas lesões nos tecidos estudados, principalmente 6 e 9 horas após a inoculação. / Abstract: Aeromonas bacteria cause infection characterized by septicaemia and acute septicemic form of this disease is the most prevalent in fish. This bacteriosis is responsible for high morbidity and mortality rates, causing considerable losses in the aquaculture sector. Thus, understanding its pathophisiology is crutial to the development of strategies for intervention and control of fish aeromonosis. This study aimed to characterize by morphological and microbiological studies the acute phase of septic process in different tissues of pacu (Piaractus mesopotamicus) experimentally infected with Aeromonas hydrophila. Hence, 160 pacus weighing approximately 250g were inoculated via coelomic route with A. hydrophila (1.78 x 109 CFU / mL) and pre-operative times of 0 (control), 1, 3, 6, and 9 hours post-inoculation (hpi) the animals were anesthetized and the biological material collected for performing microbiological, histopathological and ultrastructural analysis. They showed the presence of necrosis, degenerative processes, vascular damage and close association of the bacteria to these lesions in tissues, mainly 6 and 9 hours after inoculation / Mestre

Orientador: Flávio Ruas de Moraes / Banca: Luiz Edvaldo Pezzato / Banca: Maurício Laterça Martins / Resumo: Este trabalho estudou o efeito do cortisol exógeno e do tamanho dos peixes na susceptibilidade à infecção por Aeromonas hydrophila em Piaractus mesopotamicus. Foram testadas quatro concentrações da bactéria (zero; 6x106; 6x107 e 6x108 ufc/mL) em peixes submetidos ou não a injeção de 0,04 mg cortisol/kg de peso vivo, divididos em dois blocos de acordo com o peso (entre 15 e 25g e 30 e 40g), totalizando 16 caixas, cada uma com seis peixes. O cortisol foi injetado intraperitonealmente no lado esquerdo do abdome do peixe, 24 horas antes da inoculação com bactéria. Os inóculos de A. hydrophila foram diluídos em solução salina até a obtenção das concentrações desejadas, e inoculados intraperitonialmente no lado direito do abdome, tornando possível a identificação de possíveis lesões provocadas pelas injeções. Durante sete dias foram observadas, a cada 12 horas, a mortalidade e os sinais clínicos, sendo feita necropsia dos peixes mortos. Os sobreviventes foram necropsiados ao final do experimento. A aplicação do cortisol exógeno e o tamanho dos peixes não interferiram na ocorrência de sinais clínicos, uma vez que somente os inoculados com a maior concentração da bactéria apresentaram pequena lesão hemorrágica no local da injeção, independentemente do tamanho e da presença do cortisol exógeno. Peixes dos grupos que receberam as duas maiores concentrações de bactérias apresentaram a cavidade abdominal hemorrágica. Observou-se que apenas a maior concentração de bactéria provocou a morte dos animais durante o período estudado. Verificou-se a interferência do cortisol e do tamanho do peixe na susceptibilidade à Aeromonas hydrophila, sendo que as altas taxas de mortalidade ocorrem mais rapidamente em peixes menores e que receberam a injeção de cortisol / Abstract: The present work evaluated the effects of exogenous cortisol and fish size in the susceptibility for Aeromonas hydrophila infection in Piaractus mesopotamicus. Four bacteria concentrations (zero; 6x106; 6x107 and 6x108 cfu/mL) were tested in fish injected or not with 0.04 mg of cortisol/body weight 24 hours before bacteria inoculation. Fish were divided in two groups by weight, ranging from 15 to 25g and from 30 to 40g, occupying 16 tanks with six fish each. Cortisol was injected intraperitoneally on the left side of fish abdomen. Aeromonas hydrophila inoculums were diluted in saline solution to reach the expected concentrations. Bacteria were injected intraperitonially on the right side of the abdomen, therefore, it was possible to identify any lesions caused by both injections. Mortality and clinical signs were observed every 12 hours during seven days. Necropsy was performed as soon as possible in dead fish, and in all of survivor fish at the end of the test. Exogenous cortisol applications and fish size did not present influence in the occurrence of clinical signs, as well only fish inoculated with the highest bacteria concentration showed a small hemorrhagic lesion in the injection point, independently of size and presence of exogenous cortisol. Fish that received the two highest concentrations of bacteria showed hemorrhagic abdominal cavity. Only the highest bacteria concentration caused death of the animals during the experiment. It was possible to observe the influence of cortisol and fish size in the susceptibility to A. hydrophila hence the higher mortality occurs faster in small fish that received the cortisol injection / Mestre

Resumo: Em peixes, o 'beta'- glucano apresenta uma potente função imunoestimulante sendo cada vez maior a sua utilização como suplemento alimentar, aumentando significantemente a resistência à exposição infecciosa. Este prebiótico tem função de prevenir a colonização de patógenos por intensificar a ativação de macrófagos, proporcionando benefícios ao trato gastrointestinal e resultando em melhor desempenho e resistência a doenças. Este estudo teve a finalidade de avaliar os efeitos do 'beta' - glucano adicionado às rações peletizadas e extrusadas sobre o desempenho produtivo, indicadores de estresse, perfil hematológico e sobrevivência do pacu. Este experimento foi conduzido no Laboratório de peixes ornamentais, do Centro de Aqüicultura da UNESP (CAUNESP), em Jaboticabal, São Paulo. Foram utilizados 640 juvenis de pacu, com 24,7 ± 2,0 g, distribuídos em 32 aquários de vidro (130L). Os parâmetros físico - químicos da água foram mensurados quinzenalmente. Os peixes foram alimentados duas vezes ao dia, uma pela manhão e outra ao fim do dia. Os experimentos apresentaram um delineamento experimental inteiramente casualizado em esquema fatorial 2 x 4, utilizando níveis de inclusão do 'beta'- glucano de: 0 (controle), 0,1%, 0,2% e 0,3% por kg/ ração. Os níveis de'beta'-glucano avaliados neste estudo, não proporcionaram ganhos significativos no desempenho produtivo de juvenis de pacu, porém o tratamento 0,3% apresentou melhores resultados no GP, PF e TCE. A administração do 'beta'- glucano na dieta, durante todo período experimental, provocou alterações nos parâmetros hematológicos e indicadores de estresse do pacu. Os peixes alimentados com o 'beta'-glucano apresentaram maior resistência à infecção da bactéria A. hidrophila. Sendo assim, o tratamento 0,1% apresenta um custo/kg inferior e garante eficácia na saúde de juvenis de pacu. / Abstract: In fish, glucano has shown a potent immunostimulant function. The use of glucano is increasing significantly the resistance to diseases after infectious exposition. This prebiotic may be prevent the bacterial colonization, and activated macrophages, been beneficial to the digestive tract, resulting in better performance and disease resistance. This study will evaluate the glucano effects added in palletized and extruded diets of fish, analyzing fish perfOrmance, stress indicators, hematological profile and survival of pacu. This study was driven in Laboratory of ornamental fish, on Centro de Aqüicultura of UNESP (CAUNESP), in Jaboticabal, São Paulo. Were used 640 pacu juveniles, with 24,7 ± 2,0 g, distributed in 32 aquarium (130 L). The physical and chemical water parameters were measured every two weeks. Fish were fed twice a day, in the morning and another at the end of the day. In this trial were used 640 pacu juveniles (24.7 ± 2.0 g) distribuided in 32 aquariums (20 fish/aquarium). Throughout the experimental period, water remained at 26.5 oC and the others limnological parameters (dissolved oxygen, pH, alkalinity, ammonia and conductivity) stayed within normal values for the specie. The experimental trial design was entirely casualized in factorial scheme 2 x 4, evaluating two proceeding of diets (extruded and pelletized) and four 'beta' - glucan levels in diets: 0 (control), 0.1%, 0.2% and 0.3% with four repetitions. In this study,'beta' - glucan levels do not provide significant gains on pacu juveniles performance, but treatment with 0,3% - glucan showed better results of weight gain, weight final and specific growth rate. The administration of glucan in the diet, caused changes in hematological parameters and stress indicators in pacu. The fishes fed with glucan showed greater resistance to infection with A. hidrophila. Thus, treatment with 0,1% of glucan presented a lower cost/kg and shows efficiency in health of pacu juveniles. / Orientador: João Batista Kochenborger Fernandes / Coorientador: Elisabeth Criscuolo Urbinati / Banca: Sérgio Fonseca Zaiden / Banca: Fabiana Pilarski / Mestre