Orientador: Maria Luiza Silveira Mello / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-07-22T19:22:37Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Garcia_SimoneLopes_M.pdf: 3905156 bytes, checksum: a41eb69b400c0c1984d156c63e481ef6 (MD5) Previous issue date: 1997 / Resumo: Ninfas de 30., 40. e 50. estádios e adultos de ambos os sexos de Panstrongylus megistus de hábito domiciliar e silvestre, bem e pouco alimentados, foram submetidos a choques de temperatura de O°C e 40° C por 1h e 12 h. Após o choque, os insetos retomavam a temperatura e umidade controle (28°C e 80% UR), e foram acompanhados diariamente durante um período de 30 a 35 dias para se determinar os níveis de sobrevivência. Para a análise de fenótipos nucleares foram utilizadas ninfas de 50. estádio de hábito domiciliar e pouco alimentadas as quais foram submetidas a choques de 40°C por 1h e 12h e a O°C por 1h. A dissecação dos insetos para a retirada dos túbulos de Malpighi foi efetuada imediatamente após o choque, 10 e 30 dias após. O objetivo foi determinar alterações decorrentes do choque de temperatura, visando promover manutenção mais adequada em insetário e interpretar alterações em insetos provenientes do meio ambiente em esquemas experimentais. Os resultados indicaram variabilidade de resposta aos choques térmicos com relação aos parâmetros estudados. A variabilidade foi dependente da temperatura a que os insetos foram mantidos, duração do tratamento, fase do desenvolvimento e sexo. Choques hipertérmicos de curta duração pouco afetaram a sobrevivência dos insetos, principalmente das ninfas, enquanto os de longa duração foram letais na maioria dos casos. Quanto à ocorrência de mudas, pouca alteração se verificou após choques hipertérmicos, ao contrário do verificado após choques hipotérmicos, os quais se mostraram mais eficazes em promover uma diminuição nessa frequência Choques hipotérmicos, especialmente os de longa duração, promoveram uma queda drástica na taxa de sobrevivência dos espécimes. Os fenótipos nucleares mais frequentes tanto nos insetos do grupo controle quanto nos submetidos a choques, foram os núcleos considerados normais, ou seja, com um pequeno e conspícuo corpo heterocromático (cromossomo Y). Os fenótipos alterados, presentes inclusive nos grupos controle, foram núcleos em degeneração, apoptóticos, com suspeita de apoptose, com heterocromatina aparentemente descompactada, gigantes, gigantes em degeneração, com suspeita de apoptose e gigantes com a heterocromatina aparentemente descompactada. Dentre os fenótipos alterados em maior frequência foram encontrados núcleos suspeitos de apoptose seguidos por núcleos em degeneração e núcleos com a heterocromatina aparentemente descompactada. Um aumento estatisticamente significante nos núcleos em degeneração foi constatado com o decorrer dos dias para dissecação dos espécimes. Núcleos apoptóticos foram observados principalmente após choques hipertérmicos, independente da duração do choque e do tempo pós-choque, enquanto núcleos suspeitos de apoptose foram mais frequentes em insetos dissecados 30 dias após o choque. A maior frequência de núcleos com aparente descompactação da heterocromatina ocorreu em insetos submetidos a choques hipertérmicos, independente da duração do tratamento. Houve uma elevação na frequência de núcleos gigantes após choques hipertérmicos, embora esta não tenha se intensificado com o aumento da duração do tratamento. Os poucos insetos sobreviventes aos choques de 40°C por 12 h, apresentaram uma diminuição significante, quando dissecados 30 dias após o choque, constatando-se também uma interação entre os fatores dias pós-choque e temperatura de choque. Núcleos gigantes em degeneração foram observados com maior frequência após choques hipertérmicos, enquanto um aumento na frequência de núcleos gigantes com suspeita de apoptose foi observado após aumento na duração do tratamento. Com a elevação da temperatura, verificou-se um aumento na frequência de núcleos apoptóticos, gigantes com suspeita de apoptose e núcleos com aparente descompactação da heterocromatina. Os dados levantados para Panstrongylus megistus mostraram-se diferentes dos previamente relatados para Triatoma infestans, salientando a importância de estudos para diferentes espécies, dado o seu comportamento particular / Abstract: Domestic and silvatic third, fourth and fifth instar nymphs and male and female adults of Panstrongylus megistus Burmeister with different feeding conditions were submitted to thermal shocks at ooe and 40oe for 1 and 12 hours. After the shock the insects were retumed to normal temperature and humidity conditions and followed for 30 to 35 days in order to determine survival rates, molting and nuclear phenotypes ofMalpighian tubules. Since feeding and living conditions were not significant factors in the survival rates of specimens submitted to the thermal shock, fasting domestic fifth instars mal e nymphs were used in order to investigate nuclear phenotypes. The insects were submitted to thermal shocks at ooe (1 hour) and 40oe (1 hour and 12 hours) being retumed to control conditions (28°e). The insects were dissected right after shock, 10 and 3 O days after shock for cytological analysis of their Malpighian tubule. The objective was to investigate the changes promoted by the shocks with views to provi de adequate laboratory conditions and to understand changes caused by experimental schemes. The results indicate that the response varies according to temperature, duration of treatment, development stage and sexo Short hyper thermic shocks had little effect, mainly for the nymphs, while long shocks were lethal in the majority of studied cases. About molting, few alterations were observed after hyper thermic shocks in contrast to hypothermic shocks which promoted a falI in the observed frequency. Hypothermic shocks, specially long ones, promoted a drastic fall in the survival rate of the specimens. The most frequent phenotype observed was the one considered normal, not only for the control group but also for the insect submitted to the shocks. Altered phenotypes, found also in nuclear group, included degenerated, apoptotic, suspected of apoptosis, heterocromatin partially or completely unraveled, giant nuclei, this last phenotype being classified also as usual, degenerated, suspected of apoptosis and with heterocromatin partially unraveled. Among the altered phenotypes the predominant one was the suspected of apoptosis nuclei, followed by degenerated and heterocromatin partially unraveled nuclei. There were a rising statistically significant in the frequency of degenerated nuclei when analyzed 30 days after shock. Apoptotic nuclei were observed specially after hyper thermic shocks independently of duration of shock and time after shock. However, suspect of apoptosis nuclei were more frequently observed 30 days after shock. The most frequency of apparently unraveled heterocromatin nuclei occurred after hyper thermic shocks no matter the duration of the shock. A rising in the frequency of giant nuclei was observed after hyper thermic shocks although it did not increase for insects submitted to long duration shocks. The few remain from long hyper thermic shocks presented a significant fall when analyzed 30 days after shock. An interaction between the factors days and temperature was verified for this experimental condition. Degenerated giant nuclei were observed mostly after hyper thermic shocks, while it was observed a rising in the fTequency of suspected of apoptosis giant nuclei after long shocks. The rising in the temperature of the shock caused a rising in the frequency of apoptotic, suspects of apoptosis giant and apparently unraveled heterocromatin nuclei. The data collected for Panstrongylus megistus behaved differently from the data collected previously for Triatoma infestans. Therefore, it shows the importance of studies conceming different species taking into account their peculiar behavior / Mestrado / Parasitologia / Mestre em Ciências Biológicas

Orientador : Claudio Luiz Messias / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-07-14T15:26:54Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Leite_Breno_M.pdf: 2673386 bytes, checksum: 42342676c4ba7beb778732388d4fc4b4 (MD5) Previous issue date: 1987 / Resumo: Este trabalho foi realizado com o objetivo de traçar o perfil de um grupo de linhagens de Metarhizium anisopliae oriundas do banco de germoplasma pertencente ao Departamento de Genética e Evolução da UNICAMP, e comparar com dados obtidos em bioensaios realizados com ninfas do vetor da doença de Chagas; Panstrongylus megistus. Os estudos revelaram que 11 linhagens do grupo pertenciam à variedade minor, 2 à variedade major e as duas restantes, já se sabia, eram mutantes auxotróficos obtidos a partir da linhagem E9; nenhuma correlação com virulência foi encontrada quando analisou-se os resultados de LT50 com relação a resistência à luz ultravioleta, atividade enzimática (amilolítica, lipolítica e proteolítica) e crescimento radial. Notou-se, entretanto, que as linhagens com deficiência na produção de uma ou mais enzimas apresentaram baixa virulência em relação às outras. Detectou-se ainda, diferenças no tempo e forma de germinação das linhagens da variedade major. A ausência de correlação entre atividade enzimática e virulência foi encarada como sendo um indicador da heterogeneidade do grupo estudado / Abstract: 15 strains of Metarhizium anisopliae from germplasm bank of the Genetics and Evolution Department. UNICAMP, were caracterized on ultraviolet resistance. enzimatic activity radial growth and some other biological aspects. The results obtained during the caracterization were compared with the data obtained in bioassays, which each strain was utilized against numphs of Panstrongylus megistus. The experiments pointed out 11 strains belonging to minor variety, 2 strains to major variety and the remained, previously determined, were autrotrophic mutants. No correlation was founded between LT50 to each caracteristics determined, however, strains showing difficult to produce one or more enzymes presented low virulence. Some differences were detected on the way of germination in major varieties. The lack of correlation between enzimatic activity and virulence was thought to be an indicator of the heterogeneity on the group analised. / Mestrado / Mestre em Biologia

Orientador: Maria Luiza Silveira Mello / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-08-02T17:56:41Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Garcia_SimoneLopes_D.pdf: 5378281 bytes, checksum: 84ab71d223c77465ab9f02749d30fbb3 (MD5) Previous issue date: 2002 / Resumo: O efeito dos choques térmicos, quentes e mos, foi estudado buscando-se investigar a ocorrência de tolerância termal em Panstrongylus megistus. A taxa de sobrevivência e mudas foi acompanhada em ninfas de 5º estádio e alados de ambos os sexos de P. megistus após choques térmicos seqüenciais nos quais o primeiro foi de 35°C ou 40°C (1 h) (hipertérmico) ou de 5°C ou O°C (1 h) (hipotérmico) precedendo um choque mais severo de 40°C ou O°C (12 h), respectivamente. Os choques foram separados por intervalos de 8, 18, 24 ou 72 h a 28°C. A fim de se investigar se a tolerância termal nessa espécie era acompanhada por alterações nucleares, ninfas foram dissecadas após intervalos de 24 h, 10 e 30 dias seguindo-se o segundo choque, para determinação e contagem de fenótipos nucleares em túbulos de Malpighi. Demonstrou-se tolerância aos choques quentes e mos sendo que dependendo da temperatura do choque, do intervalo entre os tratamentos à 28°C, fase do desenvolvimento e sexo, a intensidade de tolerância desenvolvida diferiu. Enquanto a tolerância ao calor nas ninfas se verificou quando o período entre os choques foi de até 24 h (choque inicial a 35°C) ou mais (choque inicial a 40°C), taxa expressiva de tolerância nos alados foi verificada apenas em condições de 8 h de intervalo entre os choques, sendo o choque inicial dado a 40°C. Também diferindo do que acontece nas ninfas, cuja tolerância ao choque mo se expressou de modo semelhante em todas as situações analisadas, nos alados foi demonstrada expressiva tolerância ao choque mo apenas quando o choque inicial foi dado a O°C e o tempo entre choques seguidos ultrapassou 18 h. As fêmeas apresentaram maior tolerância termal. Os resultados de tolerância termal foram os primeiros reportados em triatomíneos e sugerem o envolvimento de proteínas de choque térmico (HSP), embora outros mecanismos possam também estar envolvidos. Essa ação protetora, no entanto, parece perder a eficácia com o desenvolvimento do inseto. Igualmente foram encontrados modelos diferentes de alterações nos fenótipos nucleares induzidos pelos choques quentes e mos e identificados após reação de Feulgen. Tolerância ao choque quente envolveu alterações morfológicas representadas por um decréscimo na forma de morte celular por apoptose simultaneamente a um aumento nas respostas de sobrevivência celular. Choques mos seqüenciais não envolveram fusão celular/nuclear e ainda elicitaram aumento de necrose com a avanço do tempo pós-choque. As temperaturas de 40 e 0° C foram mais efetivas que as temperaturas de 35 e 5°C em elicitar tolerância ao calor e ao mo, respectivamente, como foi demonstrado pela análise dos fenótipos nucleares. Diferentes choques térmicos podem ativar diferentes mecanismos de proteção celular contra o estresse em P. megistus, favorecendo uma adaptação do inseto a vários ecótopos. O efeito do jejum seguido por realimentação e choque térmico nos fenótipos nucleares de P. megistus foi também estudado citologicamente em túbulos de Malpighi de ninfas de 40. estádio. Os insetos foram mantidos em jejum até 100 dias a 28°C e sua sobrevivência examinada diariamente. Parte dos insetos em jejum foi realimentada e parte dos insetos em jejum, ou realimentados após jejum, recebeu um choque de 40°C por 1 h. A análise dos fenótipos foi procedida 1 e 7 dias após tais procedimentos. Detectou-se que após 40 dias de jejum, a taxa de sobrevivência dos espécimes foi alta (90)%), decrescendo logo após. Com o avanço do tempo de jejum, a frequência de necroses aumentou. Realimentação após jejum agiu como um estresse médio, aumentando a frequência de apoptose. Ausência de núcleos gigantes foi observada em todos os insetos. Embora o choque térmico tenha promovido um aumento na frequência de núcleos necróticos, não afetou a resposta ao jejum e à realimentação, já que não se verificou uma associação entre os fatores. Espécimes bem nutridos apresentaram uma menor taxa de fenótipos alterados quando comparados a espécimes mantidos em jejum ou realimentados após o jejum. Uma vez que períodos de estresse nutricional podem influenciar a distribuição geográfica e temporal das espécies, as alterações celulares, de morte ou proteção, podem contribuir para o conhecimento do comportamento de P. megistus em condições naturais e em laboratório. O efeito dos choques térmicos em espécimes infectados com Trypanosoma cruzi sobre a incidência de sobrevivência e mudas, fenótipos nucleares, prevalência e intensidade de infecção por Trypanosoma crozi bem como multiplicação e metaciclogênese, inclusive após choque quente (40°C, 1 h), foi investigado em P. megistus. Ninfas de 4º. instar foram submetidas a infecção com a cepa Y de T. crozi e acompanhadas durante 45 dias. O número de epimastigotas e tripomastigotas foi determinado por exame do conteúdo da glândula retal e os fenótipos nucleares de P. megistus estudados em seus túbulos de Malpighi. Demonstrou-se que o choque térmico não promoveu diferenças na sobrevivência e na incidência de mudas em espécimes infectados e não infectados. A infecção promoveu aumento na taxa de sobrevivência e decréscimo na ocorrência de mudas. Não houve diferença significante quanto à prevalência e à magnitude de infecção em espécimes submetidos ou não a choque térmico. Os espécimes submetidos a choque tiveram um decréscimo no número de epimastigotas e tripomastigotas, indicando que alterações na multiplicação do parasita e na metaciclogênese foram induzidas pelo choque térmico. Somente para núcleos com suspeita de apoptose, os fatores infecção e estresse, isoladamente, foram significantes, sugerindo que a presença do parasita possa ser um estímulo para indução do programa de morte celular. As alterações induzidas pela infecção em associação ao choque térmico, especialmente com relação à multiplicação e metaciclogênese, poderão vir a contribuir para nossa compreensão do sistema vetor-parasita, dos modelos epidemiológicos envolvidos e criação adequada desses insetos em laboratório / Abstract: The effects of heat and cold shocks on thermal tolerance in Panstrongylus megistus were studied. The incidence of survival and molting in fifth-instar nymphs and adults was determined following treatments in which a mild heat shock (35°C or 40°C, 1 h) or cold shock (5°C or O°C, 1 h) preceded a more drastic shock (40°C or O°C, 12 h), respectively. Sequential shocks were separated by intervals of 8, 18, 24 or 72 h at 28°C (control temperature). To investigate whether insect survival was accompanied by nuclear changes, fifth-instar nymphs were dissected 1, 10 and 30 days after the second shock and the frequency of nuclear phenotypes present in the Malpighian tubules was determined. Heat and cold shock tolerance was induced but varied according to shock temperature, interval between shocks at 28°C, developmental stage and sex. In contrast to the response in nymphs, for which higher values of heat tolerance were sustained for up to 24 h (preliminary shock at 35°C) or even longer (preliminary shock at 40°C) between sequential shocks, in adults marked tolerance was seen only when the intervals between shocks was = 8 h (preliminary shock at 40°C). Also in contrast to nymphs, which exhibited cold-tolerance is all conditions, adult insects acquired tolerance to more severe shocks only when the preliminary shock was given at O°C and the time between shocks was greater than 18 h. Females showed greater tolerance than males. These results are the first to show thermal tolerance in a bloodsucking hemipteran and suggest the involvement of heat shock proteins, although other protective mechanisms may also be operating. This cellular protection may become less effective as the insect develops. Heat and cold shocks produced different patterns and frequencies of nuclear phenotypes as shown by the Feulgen reaction. Heat shock tolerance involved a decrease in apoptosis and a simultaneous increase in cell survival responses' Sequential cold shocks did not involve cell/nuclear fusion and even elicited an increase in necrosis with increasing time after the shock. Temperatures of 40° and O°C were more effective than 35° and 5°e in eliciting heat and cold shock tolerance, respectively, as shown by cytologica1 analysis of the nuclear phenotypes. Different sequential thermal shocks can tigger different mechanisms of cellular protection against stress in P. megistus and may allow the insect to adapt to various ecotopes. The effect of fasting in association with refeeding and heat shock on the nuclear phenotypes of P. megistus was studied cytologically in Malpighian tubules of fourth-instar nymphs. The insects were fasted up to 100 days at 28°C and their survival followed daily. Groups of nymphs were separated each month, with part of the group being refed and the other part kept fasting. Insects in each of these subgroups received either a heat shock at 40°C for 1 h or where maintained at 28°C (no heat shock). The Malpighian tubules were removed 1 and 7 days after each assay and subjected to the Feulgen reaction for identification and counting of the nuclear. Insect survival was high (900.10) after 40 days of starvation but decreased thereafter. Only necrosis increased with the duration of fasting. Feeding after fasting acted as a mild stressing agent and increased the frequency of apoptosis. No giant nuclei was observed in the insects. Although heat shock increased the frequency of necrotic nuclei it did not affect the starvation and refeeding responses since there was significant interaction between factors. Well-nourished specimens showed a smaller frequency of altered phenotypes than starved or refed insects. Since periods of nutritional stress influence the geographic and temporal distribution of a species, cellular changes such as death or protective mechanisms can contribute to our understanding of the biological behaviour in P. megistus in natural or laboratory conditions. The incidence of survival and molting, the frequency of nuclear phenotypes, the frequency of infection by T. cruzi, and the grades of metacyclogenesis, including after heat shock (40°C, 1 h), were also investigated. Fourth-instar nymphs infected with the strain Y of T. cruzi and monitored for 45 days therea:fter. The number of epimastigotes and trypomastigotes was determined by examining the rectal gland contents. The Malpighian tubules were used to determine the nuclear phenotypes. Heat shock did not alter differences in the survival and molting rates in infected, compared to non-infected insects. However, infection increased the survival and decreased the molting rates. There were no significant changes in the prevalence and magnitude of infectivity following heat shock. Shocked insects showed reduced number of epimastigotes and trypomastigotes, indicating that changes in the multiplication of the parasite and metacyclogenesis were affected by heat shock. Infection and stress increased the frequency of nuclei suspected of apoptosis and suggest that the presence parasite could induce apoptosis. The changes induced by infection in association with heat shock, especially the multiplication and metacyclogenesis of T. cruz; and the mechanisms of resistance developed in the vector, may contribute to our understanding of the vector-parasite system, of the epidemiological patterns involved and adequate rearing of P. megistus in the laboratory / Doutorado / Doutor em Parasitologia

Resumo: Chagas. disease or American Trypanosomiasis has the protozoan Trypanosoma cruzi as the etiologic agent. The disease is present in most Latin American countries and its control relies mainly on the fight against triatomine vectors. Among the triatomine species found in Brazil, Panstrongylus megistus shows a high degree of adaptability to the domestic environment and is considered of great epidemiological importance since Triatoma infestans elimination. This work had as the main objective, through the sequencing of nuclear ribosomal DNA markers, the molecular characterization of specimens and populations of Panstrongylus megistus from Parana state. Specimens from other states were also included in this study. From all of the 37 specimens submitted to DNA extraction and sequencing, 32 sequences could be analyzed for two selected markers in question - the first and second internal transcribed spacer (ITS-1 and ITS-2) of nuclear ribosomal DNA. Overall, 24 different haplotypes were identified among the analyzed specimens of Panstrongylus megistus, when studied molecular markers ITS-1 and ITS-2 together. The intergenic region length varied between 1357 and 1366 base pairs, with an average of 1361.1 base pairs. The overall length of the alignment for all haplotypes was described with 1366 bp, including insertions/deletions. ITS-1 showed a greater length in its base pairs, as well a greater diversity of haplotypes mainly due to numerous insertions/deletions. Because of this, ITS-2 fragment landed more information for the haplotypes distribution analysis. It was detected a greater number of haplotypes in insects from the first plateau of Parana. This greater diversity supports the origin and dispersion hypothesis of Panstrongylus megistus from .Mata Atlantica. coastal. At the second plateau was observed only 2 haplotypes, which are coincident with the first plateau. At the third plateau was attended of 4 haplotypes, 3 of them different from others, and only 1 haplotype not found in other states. The CH-2 haplotype was found in all studied Parana regions, as well as the states of Rio Grande do Sul and Sergipe. This can be appointed, until this moment, as the haplotype that probably began spreading the specie, at Parana state, from the endemism center. The increase of insects. numbers studied and the use of new molecular markers may get relevant information to reinforce the specie origin and dispersal theory and provide data to assist in epidemiological monitoring of these vectors.

Objetivos: Realizou-se estudos de dinâmica populacional de colônias de Panstrongylus megistus Burmeister, 1835 (Hemíptera: Reduviidae) espontaneamente estabelecida em Galinheiro Experimental (GE). Interpretou-se as correlações entre os fatores climáticos e os dados populacionais observados. Métodos: Pesquisou-se população triatomínica espontaneamente instalada em GE localizado no Sítio Carandá, Araraquara-SP, Brasil no período de novembro de 1998 a março de 2002. Através de revisões sistemáticas, marcação do dorso, soltura e recaptura; estudo da dinâmica populacional foi procedido pela análise das distribuições das freqüências de insetos de Kiritani-Nakasuji e pelo uso do índice de correlação linear de Pearson aplicado aos dados climáticos e populacionais. Resultados: Obteve-se colonização espontânea do GE por Panstrongylus megistus. O tamanho da população variou de 19 a 208 indivíduos. Maior presença de ninfas nos períodos de inverno e verão e de adultos durante a primavera e outono; as fêmeas permaneceram mais tempo no abrigo que os machos; estes estiveram em maior número na maior parte das revisões (razão de sexo = 1,22). O ciclo de desenvolvimento completo de ninfa I-adulto foi 540 dias, a sobrevivência diária para todos os estádios foi de 0,9975 e a sobrevivência total foi de 0,2573; não houve correlação significativa entre os dados populacionais e os fatores climáticos segundo índice de correlação linear de Pearson (r = 0,1780 para temperatura e r = 0,1078 para pluviosidade). Conclusões: Os GEs constituem ferramenta bastante útil para estudos ecológicos de triatomíneos; as colônias desenvolvidas em ecótopos artificiais por P. megistus são estáveis; disponibilizou-se dados relativos a estudos anteriores; são necessários novos estudos para esclarecer melhor o comportamento de domiciliação dessa espécie que é K-estrategistas conforme RABINOVICH, 1972 / Studies on spontaneous domiciliation in experimental chickens houses for wild populations of triatomines in the municipal district of Araraquara, São Paulo, in the period of XI/1998 III/2002. Objective: Studies of the dynamic of population, of colonies of Panstrongylus megistus Burmeister, 1835 (Hemiptera:Reduviidae) spontaneously established in chickens houses (CH) was accomplished. The correlation between climate factors and population data observed were interpreted. Method: The population of Triatominae spontaneously established in a chicken house of the ranch Carandá, Araraquara, SP, Brazil in the period of November of 1998 to March of 2002. Was researched by systematic revisions, dorsum markings, release and recapture; the study of the dynamic of the population was proceeded by the Kiritani-Nakasuji method for analysing of the insects stage-frequency data and by the Pearson´s linear correlation index applied to climatic and population data. Results: A spontaneous colonisation of the chicken house by Panstrongylus megistus was obtained. The size of the population varied from 19 to 208 individual. The greatest presence of nymphs was in the winter and summer time and the great presence of adults was during spring and fall; the females stayed more time in the shelter than the males; those ones were in the greatest number in the majority of the revisions (Sex ratio =1,22). The cycle of the development from nymph I to adult was 540 days, the daily survival for all stages was 0,9975 and the total survival was 0,2573; and according to the Pearson´s linear correlation index, it had not significant correlation between population data and climate factors (r= 0,1780 for temperature and r= 0,1078 for rainfall). Conclusion: The chicken house constitute a useful tool for ecological studies of Triatominae, the colonies of Panstrongylus megistus which are developed in artificial ecotopes are stable, data from previous studies was disposed and new researches are necessary to better clarify the dwelling behaviour of this specie, that according to RABINOVICH, 1972 is K- strategical.

Objetivos: Realizou-se estudos de dinâmica populacional de colônias de Panstrongylus megistus Burmeister, 1835 (Hemíptera: Reduviidae) espontaneamente estabelecida em Galinheiro Experimental (GE). Interpretou-se as correlações entre os fatores climáticos e os dados populacionais observados. Métodos: Pesquisou-se população triatomínica espontaneamente instalada em GE localizado no Sítio Carandá, Araraquara-SP, Brasil no período de novembro de 1998 a março de 2002. Através de revisões sistemáticas, marcação do dorso, soltura e recaptura; estudo da dinâmica populacional foi procedido pela análise das distribuições das freqüências de insetos de Kiritani-Nakasuji e pelo uso do índice de correlação linear de Pearson aplicado aos dados climáticos e populacionais. Resultados: Obteve-se colonização espontânea do GE por Panstrongylus megistus. O tamanho da população variou de 19 a 208 indivíduos. Maior presença de ninfas nos períodos de inverno e verão e de adultos durante a primavera e outono; as fêmeas permaneceram mais tempo no abrigo que os machos; estes estiveram em maior número na maior parte das revisões (razão de sexo = 1,22). O ciclo de desenvolvimento completo de ninfa I-adulto foi 540 dias, a sobrevivência diária para todos os estádios foi de 0,9975 e a sobrevivência total foi de 0,2573; não houve correlação significativa entre os dados populacionais e os fatores climáticos segundo índice de correlação linear de Pearson (r = 0,1780 para temperatura e r = 0,1078 para pluviosidade). Conclusões: Os GEs constituem ferramenta bastante útil para estudos ecológicos de triatomíneos; as colônias desenvolvidas em ecótopos artificiais por P. megistus são estáveis; disponibilizou-se dados relativos a estudos anteriores; são necessários novos estudos para esclarecer melhor o comportamento de domiciliação dessa espécie que é K-estrategistas conforme RABINOVICH, 1972 / Studies on spontaneous domiciliation in experimental chickens houses for wild populations of triatomines in the municipal district of Araraquara, São Paulo, in the period of XI/1998 III/2002. Objective: Studies of the dynamic of population, of colonies of Panstrongylus megistus Burmeister, 1835 (Hemiptera:Reduviidae) spontaneously established in chickens houses (CH) was accomplished. The correlation between climate factors and population data observed were interpreted. Method: The population of Triatominae spontaneously established in a chicken house of the ranch Carandá, Araraquara, SP, Brazil in the period of November of 1998 to March of 2002. Was researched by systematic revisions, dorsum markings, release and recapture; the study of the dynamic of the population was proceeded by the Kiritani-Nakasuji method for analysing of the insects stage-frequency data and by the Pearson´s linear correlation index applied to climatic and population data. Results: A spontaneous colonisation of the chicken house by Panstrongylus megistus was obtained. The size of the population varied from 19 to 208 individual. The greatest presence of nymphs was in the winter and summer time and the great presence of adults was during spring and fall; the females stayed more time in the shelter than the males; those ones were in the greatest number in the majority of the revisions (Sex ratio =1,22). The cycle of the development from nymph I to adult was 540 days, the daily survival for all stages was 0,9975 and the total survival was 0,2573; and according to the Pearson´s linear correlation index, it had not significant correlation between population data and climate factors (r= 0,1780 for temperature and r= 0,1078 for rainfall). Conclusion: The chicken house constitute a useful tool for ecological studies of Triatominae, the colonies of Panstrongylus megistus which are developed in artificial ecotopes are stable, data from previous studies was disposed and new researches are necessary to better clarify the dwelling behaviour of this specie, that according to RABINOVICH, 1972 is K- strategical.

Orientador: Maria Luiza Silveira Mello / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-08-20T03:24:19Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Alvarenga_EleniceMonte_M.pdf: 2829254 bytes, checksum: 964b17aaf1c7f50d4471a7be569aaa6d (MD5) Previous issue date: 2011 / Resumo: A cromatina pode existir em núcleos interfásicos em dois estados distintos: como eucromatina e como heterocromatina, podendo ser esta constitutiva ou facultativa. Em células somáticas do final da fase ninfal dos hemípteros reduviídeos Triatoma infestans e Panstrongylus megistus há núcleos grandes, poliploides, nos quais a heterocromatina apresenta-se como corpos conspícuos (cromocentros), daí tais células apresentarem-se como um bom modelo para investigação de características morfológicas e funcionais da cromatina. Em estudos sobre a constituição cromatínica, a composição em bases do DNA é algo muito explorado, dado o conteúdo informativo dos achados. Já quando se objetiva a investigação da funcionalidade da cromatina, mais recentemente, tem-se feito uso da abordagem epigenética. Neste trabalho buscou-se investigar a composição em bases do DNA destas células, associando-a aos domínios cromatínicos aí existentes e também à presença das NORs. Por meio de colorações fluorescentes com Cromomicina A3 (CMA3)/Distamicina e 4',6-diamidino-2-fenilindol (DAPI)/Actinomicina D concluiuse que o DNA dos cromocentros de T. infestans e P. megistus são ricos em sequências AT e pobres em GC. Isto foi ainda confirmado por imunodetecção de 5-metilcitosina, que ocorreu somente na eucromatina, e tratamento de ninfas de T. infestans com 5-aza-2'-deoxicitidina (agente demetilante), seguido da análise dos fenótipos nucleares e análise de imagem, em que se observou expansão somente da área eucromática. Com o método de AgNOR evidenciou-se que a região rica em bases GC ao redor do cromocentro coincide com um acúmulo de proteínas argirofílicas, o que sugere associação com NORs. A presença de modificações epigenéticas nas caudas das histonas na cromatina destes insetos foi investigada por meio do uso de anticorpos contra marcadores epigenéticos específicos, permitindo identificar a participação diferencial dos mesmos na composição e na estrutura dos territórios heterocromáticos. Assim, observou-se hipoacetilação e hipermetilação de histonas na região do corpo heterocromático, o que indicaria uma possível ação da modificação de histonas na manutenção da estrutura heterocromática nas células somáticas de ambas as espécies de reduviídeos. Por meio da avaliação da ação de drogas inibidoras de deacetilases de histonas sobre a cromatina dos insetos percebeu-se que, quando ninfas de T. infestans e P. megistus foram tratadas com as drogas, houve aumento na frequência de necroses e, no caso específico do tratamento com tricostatina A (TSA) e butirato de sódio (NaBt), ocorreu descompactação da heterocromatina. Sugere-se que o tratamento com TSA e NaBt afete o processo de deacetilação de histonas, o qual seria, então, um fator importante na estruturação dos cromocentros. A observação da ocorrência de mudas e da sobrevivência de ninfas de T. infestans, realizada a fim de se avaliar a ação do ácido valproico (VPA) sobre o desenvolvimento dos insetos, mostrou que a droga, assim como a injeção de solução salina, reduziu seu período de sobrevivência, além de afetar a ocorrência de mudas / Abstract: Chromatin in interphase cell nuclei can be present in two distinct states: euchromatin and heterochromatin, which may be constitutive or facultative. In somatic cells at the end of the nymphal stage of Triatoma infestans and Panstrongylus megistus there are large nuclei, in which heterochromatin is presented as conspicuous bodies (chromocenters). These cells are an appropriate model for investigation of morphological and functional characteristics of the chromatin. In studies about chromatin constitution, the base DNA composition is explored due to the informational content of the findings. If the objective is to investigate the chromatin functionality, recently has been used the epigenetic approach. In the current study, the aim was to investigate the DNA base composition in these cells, associating with the chromatin domains therein and also the presence of NORs. Through fluorescent stains with Chromomycin A3 (CMA3)/Distamycin and 4',6-diamidino-2-fenilindole (DAPI)/Actinomycin D was found that the chromocenters DNA of T. infestans and P. megistus were AT-rich and GC-poor. This was also confirmed by immunodetection of 5-methylcytidine, which occurred only in the euchromatin, and by T. infestans nymphs treatment with 5-aza-2'- deoxycytidine (demethylating agent), followed by nuclear phenotypes analysis and image analysis, in which expansion was observed only in the euchromatic area. AgNOR test evidenced that the GC-rich region around the chromocenter coincides with an accumulation of argyrophilic proteins, suggesting association with NORs. Epigenetic modifications on histone tails in chromatin of these insects were investigated by using antibodies against specific epigenetic markers, in order to identify their differential participation in the composition and structure of these heterochromatic regions. It was observed hypoacetylation and hypermethylation in heterochromatic body area, suggesting a possible action of histones modification in the maintenance of the heterochromatic structure in somatic cells of both species of reduviids. Through evaluation of histones deacetylases inhibitors action on the chromatin, it was observed that when T. infestans and P. megistus nymphs were treated with these drugs there was an increase in the frequencies of necrosis, and in the specific case of Trichostatin A (TSA) and sodium butyrate (NaBt), occurred heterochromatin decondensation. It is suggested that treatments with TSA and NaBt could affect the histones deacetilation process, which would be an important factor in chromocenters structuring. Observations of the molting occurrence and survival of T. infestans nymphs, carried out in order to evaluate the action of valproic acid (VPA) on the development of insects, showed that this drug, as well as injection of saline, reduced the survival period, besides affecting the molting occurrence / Mestrado / Biologia Celular / Mestre em Biologia Celular e Estrutural

El presente trabajo, tiene como finalidad identificar las fuentes de alimentación de Panstrongylus herreri procedentes de la localidad de Cajaruro (Utcubamba-Amazonas), donde se señala su presencia en ambientes domésticos y está considerado como vector principal de la Enfermedad de Chagas en el nororiente del Perú. Para ello, se planteó utilizar la prueba de precipitación en tubo capilar conocida como prueba de precipitina, desarrollado en fase líquida; esto nos brinda información acerca del tipo de sangre ingerida por el vector. Para la prueba de precipitación, se empleó como antígeno el contenido intestinal del triatomino y como anticuerpo el antisuero precipitante obtenido de conejos inmunizados con suero de humano, perro, gato, cobayo y pollo. El trabajo consta de dos etapas: en la primera etapa se estandarizó la preparación de antisueros que contenían a los anticuerpos precipitantes, asimismo se utilizó ninfas de Triatoma infestans del IV y V estadío criadas en el laboratorio, las cuales fueron alimentadas con sangre de perro, cobayo y hombre, determinándose el rendimiento de la prueba en cuanto a su sensibilidad y especificidad, y en la segunda etapa se evaluaron ejemplares de Panstrongylus herreri procedentes de dos localidades (El Ron y Hebrón) del distrito de Cajaruro, departamento de Amazonas, a través de la prueba ya estandarizada. / The current work has the finality of identify the feeding sources of Panstrongylus herreri obtained from the location of Cajaruro (Utcubamba-Amazonas) where its presence distinguishes in domestic environments and is considered to be a principal vector of Chagas's disease in the nor east of Peru. For it, we propose to use the test of capillary tube precipitation known as precipitin test, developed in liquid phase; this give to us information over the type of blood consumed by the vector. For the precipitation test, there was used the intestinal content of the triatomine bugs as antigen and as antibody the precipitated antiserum obtained of rabbits immunized with human, dogs, cats, guinea-pigs and chickens serums. The work consists of two stages: In the first stage there was standardized the preparation of antiserums that contains the precipitated antibodies, likewise there was used nymphs of Triatoma infestans of IV and V stages maintained in the laboratory, which were fed with dog, guinea-pig and human blood, resolving the yield of the test as his sensibility and specificity, and in the second stage there were evaluated specimens of Panstrongylus herreri proceeding from two localities (El Ron and Hebrón) from Cajaruro's district, department of Amazonas, through the test already standardized.

Made available in DSpace on 2016-08-10T10:55:14Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Suleimy Marinho Fernandes Cardoso.pdf: 1298477 bytes, checksum: 2bc33390b33dfabc78bb1026fbca028f (MD5) Previous issue date: 2006-08-30 / The objective of this study was to evaluate the diversity of found vectors as well as their habitat preference and apatial distribution in a region around Brasília within the area of direct influence of the reservoir of the Corumbá IV hydroelectric power plant (UEH Corumbá IV) comparing the data with the history of occurrence and prevalence of the Chagas disease in the region and the environmental impact of the power plant. In canopies of guariroba palm trees (Syagrus oleraceae) and graveteiro nests (Phacellodomus rufifrons) 1981 triatomines (barbeiros) were collected belonging to the species Rhodnius neglectus, Panstrongylus neglectus, Panstrongylus diasi and Psammolestes tertius within February 19th 2005 and January 21st 2006. The triatomines were also searched for in armadillo holes, hen houses, and rural houses but no specimens were found. A parasitological examination was performed and none of the triatomines analyzed were contaminated by Trypanosoma cruzi despite the notification of Chagas disease cases in the surrounding cities of the study area. In conclusion, despite the presence of R. neglectus, pontecial vector, it was not possible to detect T. cruzi in the analyzed insects. However, the risk of human and triatomines infection should be carefully evaluated. / O objetivo deste trabalho foi fazer um levantamento de vetores encontrados, bem como sua preferência de habitat e a sua distribuição espacial, numa região do entorno de Brasília, dentro da área de influência direta da usina hidrelétrica Corumbá IV (UHE Corumbá IV), relacionando os dados com a história de ocorrência e prevalência da doença de Chagas na região e o provável impacto ambiental. Em copas de palmeiras guariroba (Syagrus oleracea) e ninhos de graveteiro (Phacellodomus rufifrons) foram coletados 1.981 triatomíneos (barbeiros), pertencentes às espécies Rhodnius neglectus, Panstrongylus geniculatus, Panstrongylus diasi e Psammolestes tertius, no período de 19 de fevereiro de 2005 a 21 de janeiro de 2006. Os triatomíneos também foram procurados em buracos de tatu, galinheiros e em residências rurais, mas nenhum espécime foi encontrado. Foi realizado exame parasitológico e nenhum dos triatomíneos analisados estavam contaminados pelo Trypanosoma cruzi, embora ocorra notificação de casos da doença de Chagas nas cidades vizinhas da região em estudo. Concluindo assim que, apesar da presença de R. neglectus potencial vetor, não foi possível constatar a presença do T. cruzi nos insetos examinados, porém o risco de infecção humana e de triatomíneos deve ser cuidadosamente avaliado.

El presente trabajo, tiene como finalidad identificar las fuentes de alimentación de Panstrongylus herreri procedentes de la localidad de Cajaruro (Utcubamba-Amazonas), donde se señala su presencia en ambientes domésticos y está considerado como vector principal de la Enfermedad de Chagas en el nororiente del Perú. Para ello, se planteó utilizar la prueba de precipitación en tubo capilar conocida como prueba de precipitina, desarrollado en fase líquida; esto nos brinda información acerca del tipo de sangre ingerida por el vector. Para la prueba de precipitación, se empleó como antígeno el contenido intestinal del triatomino y como anticuerpo el antisuero precipitante obtenido de conejos inmunizados con suero de humano, perro, gato, cobayo y pollo. El trabajo consta de dos etapas: en la primera etapa se estandarizó la preparación de antisueros que contenían a los anticuerpos precipitantes, asimismo se utilizó ninfas de Triatoma infestans del IV y V estadío criadas en el laboratorio, las cuales fueron alimentadas con sangre de perro, cobayo y hombre, determinándose el rendimiento de la prueba en cuanto a su sensibilidad y especificidad, y en la segunda etapa se evaluaron ejemplares de Panstrongylus herreri procedentes de dos localidades (El Ron y Hebrón) del distrito de Cajaruro, departamento de Amazonas, a través de la prueba ya estandarizada. / The current work has the finality of identify the feeding sources of Panstrongylus herreri obtained from the location of Cajaruro (Utcubamba-Amazonas) where its presence distinguishes in domestic environments and is considered to be a principal vector of Chagas's disease in the nor east of Peru. For it, we propose to use the test of capillary tube precipitation known as precipitin test, developed in liquid phase; this give to us information over the type of blood consumed by the vector. For the precipitation test, there was used the intestinal content of the triatomine bugs as antigen and as antibody the precipitated antiserum obtained of rabbits immunized with human, dogs, cats, guinea-pigs and chickens serums. The work consists of two stages: In the first stage there was standardized the preparation of antiserums that contains the precipitated antibodies, likewise there was used nymphs of Triatoma infestans of IV and V stages maintained in the laboratory, which were fed with dog, guinea-pig and human blood, resolving the yield of the test as his sensibility and specificity, and in the second stage there were evaluated specimens of Panstrongylus herreri proceeding from two localities (El Ron and Hebrón) from Cajaruro's district, department of Amazonas, through the test already standardized.