Chronic pain alters sensory responses and carries a strong emotional component. Persistent pain can heighten pain experiences, resulting in hyperalgesia and allodynia. Further, patients suffering from chronic pain are more prone to experience a range of affective disorders including depression, sleep dysregulation, panic disorders, anxiety abnormalities and stress-related disorders including post-traumatic stress disorder (PTSD). Hence while pain serves a protective function to prevent additional physiological harm by driving behavioral and cognitive responses, chronic or persistent pain can lead to maladaptive nociceptive responses and exacerbate psychopathologies. Among brain regions, the amygdala is centrally situated to integrate the many descending and ascending signals to modulate the sensory and emotional components of pain. The amygdala is well studied for its role in fear and stress-related behavioral processes. The central nucleus of the amygdala (CeA), and in particular the lateral capsular subdivision of the CeA (CeLC), receives prominent ascending pain neurotransmission via the spino- parabrachioamygdaloid tract. In this pathway, peripheral nociceptive signals carried via primary sensory Aδ- and C-fibers terminate in the dorsal horn where second order neurons send projections via the spino-parabrachial pathway to the lateral parabrachial nucleus (LPBn). Thus, the LPBn collects cutaneous (mechanical and thermal), deep (muscular and articular) and visceral nociceptive signals and relays the information in a highly organized manner principally to the CeLC for nociceptive processing. In pain, the CeA and the LPBn-CeLC projections have been shown to undergo plasticity in the forms of enhanced synaptic transmission and alterations in neurotransmitter and receptor expression. Accordingly, the neurocircuit intersections in the CeA can modulate the sensory and emotional responses to pain. Yet despite these associations, the mediators and mechanisms underlying the emotional consequences of pain are poorly understood. Pituitary adenylate cyclase activating polypeptide (PACAP) is a neural and endocrine pleiotropic peptide important in the development and homeostatic regulation of many physiological systems. Recently, the expression of PACAP and its cognate PAC1 receptor has been shown to be upregulated in specific limbic regions by chronic stress. PACAP infusions into several limbic regions is anxiogenic, and altered blood PACAP levels and PAC1 receptor polymorphism have been associated with PTSD and other stress-related disorders. Here, we establish that CeLC PACAP originates from the LPBn as part of the spino-parabrachoamygdaloid pathway. Chronic pain enhanced PACAP expression along LPBn-CeLC projections, indicating it may be a component of pain- related plasticity. CeA PACAP signaling was sufficient to induce nociceptive hypersensitivity and anxiety-like behaviors. In a chronic neuropathic pain model, CeA PACAP signaling was found to contribute to heightened anxiety-like behaviors and nociceptive responses. Further, we characterized one prominent intracellular signaling mechanism through which CeA PACAP signaling influences these behaviors. In these experiments we provide evidence that CeA PACAP signaling plays an important role in the emotional components of pain and that alterations in CeA PACAP signaling are part of pain-related plasticity. This work establishes novel molecular mechanisms that underlie the emotional component of pain and may contribute to the development of chronic pain and associated affective disorders.

No presente trabalho, avaliamos o envolvimento da região Kölliker Fuse (KF) e núcleo parabraquial lateral (NPBL) nas respostas cardiorrespiratórias induzidas pela ativação dos quimiorreceptores centrais e periféricos em ratos não anestesiados. A injeção bilateral de muscimol (200 pmol/100 nl) no KF reduziu a ventilação basal (978 ± 100, vs. salina: 1436 ± 155 ml/kg/min). Injeção de muscimol no KF reduziu a hiperventilação (1827 ± 61, vs. salina: 3179 ± 325 ml/kg/min) e a taquicardia (380 ± 9, vs. salina: 423 ± 12 bpm), produzidos pela hipóxia (8% O2 - 10 min). Muscimol no KF reduziu a hiperventilação (1488 ± 277, vs. salina: 3539 ± 374 ml/kg/min) produzida por hipercapnia (7% CO2 - 10 min). Injeção de muscimol no NPBL promoveu um aumento de PAM (D = 119 ± 2, vs. salina: 104 ± 2 mmHg), mas não foi capaz de alterar a hiperventilação produzida por hipóxia e hipercapnia. Nossos experimentos mostram a participação da região KF, e não do NPBL, no controle do respiratório durante a ativação do quimiorreflexo central e periférico. / Here we evaluated the involvement of Kölliker-Fuse region (KF) and lateral parabrachial nucleus (LPBN) in the cardiorespiratory responses elicited by chemoreceptor activation in conscious rats. Bilateral injection of muscimol (200 pmol/100 nl) into the KF decreased resting ventilation (978 ± 100, vs. saline: 1436 ± 155 ml/kg/min). Muscimol injection into the KF reduced the increase in ventilation (1827 ± 61, vs. saline: 3179 ± 325 ml/kg/min) produced by hypoxia (8% O2 - 10 min) or hypercapnia (7% CO2 - 10 min) (1488 ± 277, vs. saline: 3539 ± 374 ml/kg/min). The injection of muscimol into the LPBN increased resting MAP (D =119 ± 2, vs. saline: 104 ± 2 mmHg). Muscimol into the LPBN did not change the increase in ventilation elicited by hypoxia or hypercapnia in unrestrained rats. The results of the present study suggest that KF region, but not LPBN, have mechanisms to control the ventilation in resting, hypoxic or hypercapnic conditions in conscious rats.

No presente trabalho, avaliamos o envolvimento da região Kölliker Fuse (KF) e núcleo parabraquial lateral (NPBL) nas respostas cardiorrespiratórias induzidas pela ativação dos quimiorreceptores centrais e periféricos em ratos não anestesiados. A injeção bilateral de muscimol (200 pmol/100 nl) no KF reduziu a ventilação basal (978 ± 100, vs. salina: 1436 ± 155 ml/kg/min). Injeção de muscimol no KF reduziu a hiperventilação (1827 ± 61, vs. salina: 3179 ± 325 ml/kg/min) e a taquicardia (380 ± 9, vs. salina: 423 ± 12 bpm), produzidos pela hipóxia (8% O2 - 10 min). Muscimol no KF reduziu a hiperventilação (1488 ± 277, vs. salina: 3539 ± 374 ml/kg/min) produzida por hipercapnia (7% CO2 - 10 min). Injeção de muscimol no NPBL promoveu um aumento de PAM (D = 119 ± 2, vs. salina: 104 ± 2 mmHg), mas não foi capaz de alterar a hiperventilação produzida por hipóxia e hipercapnia. Nossos experimentos mostram a participação da região KF, e não do NPBL, no controle do respiratório durante a ativação do quimiorreflexo central e periférico. / Here we evaluated the involvement of Kölliker-Fuse region (KF) and lateral parabrachial nucleus (LPBN) in the cardiorespiratory responses elicited by chemoreceptor activation in conscious rats. Bilateral injection of muscimol (200 pmol/100 nl) into the KF decreased resting ventilation (978 ± 100, vs. saline: 1436 ± 155 ml/kg/min). Muscimol injection into the KF reduced the increase in ventilation (1827 ± 61, vs. saline: 3179 ± 325 ml/kg/min) produced by hypoxia (8% O2 - 10 min) or hypercapnia (7% CO2 - 10 min) (1488 ± 277, vs. saline: 3539 ± 374 ml/kg/min). The injection of muscimol into the LPBN increased resting MAP (D =119 ± 2, vs. saline: 104 ± 2 mmHg). Muscimol into the LPBN did not change the increase in ventilation elicited by hypoxia or hypercapnia in unrestrained rats. The results of the present study suggest that KF region, but not LPBN, have mechanisms to control the ventilation in resting, hypoxic or hypercapnic conditions in conscious rats.

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Orientador: Patricia Maria de Paula / Banca: Luciane Helena Gargaglioni Batalhão / Banca: Lisandra Brandino de Oliveira / Resumo: Estudos recentes demonstram que os receptores purinérgicos estão presentes no núcleo parabraquial lateral (NPBL), uma estrutura pontina envolvida no controle da ingestão de sódio. No presente estudo, investigamos os efeitos das injeções do, -methyleneadenosine 5 -triphosphate (, -metileno ATP, agonista dos receptores P2X) sozinho ou combinado com o ácido piridoxalfosfato-6-azofenil-2',4'-disulfônico (PPADS, antagonista dos receptores P2X) ou suramin (antagonista não seletivo dos receptores P2) no NPBL sobre a ingestão de NaCl 1,8% induzida por depleção de sódio. Também investigamos os efeitos da injeção de, -metileno ATP sozinho ou combinado com o PPADS no NPBL sobre a pressão arterial média (PAM) e freqüência cardíaca (FC) em ratos saciados e depletados de sódio. Foram utilizados ratos Holtzman com implante de cânulas implantadas bilateralmente em direção ao NPBL. A depleção de sódio foi induzida pelo tratamento com o diurético furosemida (20 mg/kg do peso corporal) acompanhado de uma dieta deficiente em sódio por 24 horas. As injeções bilaterais de, -metileno ATP (2,0 e 4,0 nmol/0,2 μL) no NPBL aumentaram a ingestão de NaCl 1,8% induzida por depleção de sódio (25,3 ± 0,8 e 26,5 ± 0,9 mL/2 h, respectivamente, vs. salina: 15,2 ± 1,3 mL/2 h). O pré-tratamento com o suramin (2,0 nmol/0,2 μL) ou com o PPADS (4,0 nmol/0,2 μL) no NPBL aboliu os efeitos do, -metileno-ATP na ingestão de NaCl 1,8% (15,2 ± 1,2 e 16,9 ± 0,9 mL/2 h, respectivamente). As injeções de PPADS sozinho no NPBL não alteraram a ingestão de NaCl 1,8% (14,6 ± 0,8 mL/2 h vs. salina: 18,3 ± 1,8 mL/2 h). No entanto, as injeções de suramin sozinho no NPBL quase aboliram a ingestão de NaCl 1,8% (5,7 ± 1,9 mL/120 min, vs. salina: 15,5 ± 1,1 mL/120 min) e aumentaram a ingestão de sacarose 2% somente no tempo de 90 minutos (7,1 ± 1,3 vs. salina: 5,3 ± 0,8 mL/90 min) sem alterar...(Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Recent studies have shown that purinergic receptors are present in the lateral parabrachial nucleus (LPBN), a pontine structure involved in the control of sodium intake. In the present study, we investigated the effects of, -methyleneadenosine 5 -triphosphate (, - methylene ATP, selective P2X purinergic agonist) alone or combined with pyridoxalphosphate-6-azophenyl-2',4'-disulfonic acid (PPADS, P2X purinergic antagonist) or suramin (non-selective P2 purinergic antagonist) injected into the LPBN on sodium depletion-induced by 1.8% NaCl intake. We also investigated the effects of, -methylene ATP alone or combined with PPADS injected into the LPBN on mean arterial pressure (MAP) and heart rate (HR) on replete and sodium depleted rats. Male Holtzman rats with stainless steel cannulas implanted into the LPBN were used. Sodium depletion was induced by treating rats with the diuretic furosemide (20 mg/kg of body weight) followed by 24 h of sodium-deficient diet. Bilateral injections of, -methylene ATP (2.0 and 4.0 nmol/0.2 μL) into the LPBN increased sodium depletion-induced 1.8% NaCl intake (25.3 ± 0.8 and 26.5 ± 0.9 mL/2 h, respectively, vs. saline: 15.2 ± 1.3 mL/2 h). Pre-treatment with suramin (2.0 nmol/0.2 μL) or PPADS (4 nmol/0.2 μL) into the LPBN abolished the effects of, - methylene-ATP on 1.8% NaCl intake (15.2 ± 1.2 and 16.9 ± 0.9 mL/2 h, respectively). Injections of PPADS alone into the LPBN did not change 1.8% NaCl intake (14.6 ± 0.8 ml/2 h vs. saline: 18.3 ± 1.8 mL/2 h). However, injections of suramin alone into the LPBN strongly reduced 1.8% NaCl intake (5.7 ± 1.9 mL/120 min, vs. saline: 15.5 ± 1.1 mL/2 h) and increased the 2% sucrose intake only at 90 min (7.1 ± 1.3 vs. saline: 5.3 ± 0.8 mL/90 min), without changing 24h water deprivation-induced water intake (16.7 ± 1.8 mL/2 h vs. saline: 15.0 ± 2.1 mL/2 h)... (Complete abstract click electronic access below) / Mestre

Made available in DSpace on 2016-06-02T19:22:13Z (GMT). No. of bitstreams: 1 6779.pdf: 4081865 bytes, checksum: f8c80484ba3b15da8905a6d3499ac8f2 (MD5) Previous issue date: 2015-02-26 / Universidade Federal de Minas Gerais / The lateral parabrachial nucleus (LPBN) is an important area of the hindbrain circuitry involved in cardiorespiratory control. Adenosine triphosphate (ATP) is considered an important central neurotransmitter and purinergic receptors are present in the LPBN. The involvement of purinergic mechanisms of the LPBN in the cardiorespiratory control during hypoxia is still unknown. In the present study, we investigated the effects of alpha, beta-me ATP (P2X purinergic agonist) alone or combined with PPADS (P2 purinergic receptor antagonist) injected into the LPBN on cardiorespiratory responses induced by acute hypoxia (7% O2 for 60 min) in unanesthetized rats and chronic intermittent hypoxia (CIH) (10% O2, 8 hours/7 days) in anesthetized rats. Additionally, in another unanesthetized rats group, we investigated the effect of acute hypoxia (7% O2 for 60 minutes) on the activity of LPBN neurons and also the effect of alpha, beta-me ATP injected into the LPBN on Fos immunoreactivity at NTS induced by acute hypoxia (7% O2 for 60 min). In unanesthetized group, we used male Holtzman rats (290-310 g, n=8/group) with stainless steel cannulas implanted bilaterally into the LPBN. A polyethylene tubing was inserted into abdominal aorta through femoral artery for recording mean arterial pressure (MAP) and heart rate (HR). Respiratory frequency (fR), tidal volume (VT) and ventilation (VE) were recorded by whole-body plethysmography. The unanesthetized rats received bilateral injections of PPADS (4 nmol/0.2 &#956;L) into the LPBN 10 minutes before injections of alpha, beta-me ATP (2 nmol/0.2 &#956;L) or saline into the LPBN. Ten minutes after the LPBN injections, a hypoxic gas mixture (7% O2) was ventilated in the chamber for 60 minutes. In anesthetized group, we used Sprague Dawley rats (300-400 g, n=7) were exposed for 7 days to CIH (alternating 6 min periods of 10% O2 and 4 min of 21% O2 from 8 am to 4 pm; and continuous exposition to normoxic at 21% O2 from 4 pm to 8 am). Mean arterial pressure (MAP), heart rate (HR), renal sympathetic nerve discharge (RSND) and amplitude and phrequency of phrenic nerve activity (PNA) were recorded in rats anesthetized with urethane and alpha chloralose, vagotomized and mechanically ventilated. The anesthetized rats received a unilateral injections of alpha, beta-me ATP (2.0 nmol/50 nL) before, 10 and 30 minutes after PPADS (0.125 nmol/50 nL) into the LPBN. For immunohistochemistry group we used male Holtzman rats, we studied the expression of Fos in the LPBN and medial parabrachial nucleus (MPBN) of unanesthetized rats exposed to 1 h of acute hypoxia, on another group, the animals received a bilateral injections of alpha, beta-me ATP into the LPBN or saline 10 minutes (n= 5/group) before the acute hypoxia for 1 h. After this period, the rats were deeply anesthetized and perfused to remove the brains and carrying out immunohistochemical procedures. In unanesthetized rats, bilateral injections of alpha,beta-me ATP into the LPBN potentiated acute hypoxia-induced increase in VT (&#61508;&#61472;= 4.0±0.3 mL/kg, vs. saline 2.2±0.2 mL/kg, or 81% of increase, p= 0.005) and VE (&#61508;&#61472;= 871±55 mL/kg/min, vs. saline: 598±60 ml/kg/min, or 45% of increase, p= 0.009), without changing hypoxia-induced tachypnea (&#61508;&#61472;fR = 49±5 cpm, vs. saline: 48±5 cpm). The pre-treatment with PPADS into the LPBN abolished the responses produced by alpha, beta-me ATP. Bilateral injections of alpha,beta-me ATP into the LPBN did not affect the hypotension, and tachycardia induced by acute hypoxia. In normoxic anesthetized rats, unilateral injections of alpha, beta-me ATP (2.0 nmol/50 nL) into the LPBN increased MAP (&#916; = 10±2 mmHg, vs. saline: 0±1 mmHg, p<0.05), RSND (&#916; = 40±12%, vs. saline: 1±1%) and phrequency PNA (&#916; = 17±5 cpm, vs. saline: 0±1 cpm, p<0.05), without changing HR and amplitude PNA. Unilateral injection of PPADS into the LPBN abolished the increase in MAP (&#916; = 0±1 mmHg), RSND (&#916; = 3±3.1%) and phrequency PNA (&#916; = 1±1 cpm) produced by alpha, beta-me ATP injected into LPBN. In anesthetized CIH rats, the injection of alpha, beta-me ATP into the LPBN increased even more MAP (&#916; = 20±2, vs. saline: -1±1 mmHg), HR (&#916; = 25±5 bpm, vs. saline: -1±1 bpm) and amplitude PNA (&#916; = 87±31%, vs. saline: 2±1%), in addition to have increased also frequency PNA (&#916; = 17±5 cpm, vs. saline: -1±1 cpm). In immunohistochemistry group the acute hypoxia produces activation of the LPBN neurons (93 ± 8, vs. normoxic 22 ± 8 cells), while the injection of alpha, beta-me ATP into the LPBN potentiated the Fos expression in caudal NTS (NTSc; 88 ± 4, vs. saline: 42 ± 8 cells) and rostral NTS (NTSr, 62 ± 8, vs. saline: 38 ± 4 cells). In conclusion, our data suggest that the P2 receptors into the LPBN are involved in the cardiorespiratory responses induced by acute hypoxia and chronic intermittent hypoxia and these responses activate neurons in the NTS, suggesting possible direct or indirect projections between the LPBN and the NTS. / O núcleo parabraquial lateral (NPBL) é uma importante área da circuitaria do tronco encefálico envolvida no controle cardiorrespiratório. A adenosina trifosfato (ATP) é considerada um importante neurotransmissor e os receptores purinérgicos estão presentes no NPBL. O envolvimento de mecanismos purinérgicos do NPBL no controle cardiorrespiratório durante a hipóxia ainda é desconhecido. No presente estudo, investigamos os efeitos do alfa, beta-metileno ATP (alfa, beta-me ATP, agonista purinérgico P2X) sozinho ou combinado com PPADS (antagonista dos receptores purinérgicos P2) injetado no NPBL sobre as respostas cardiorrespiratórias induzidas por hipóxia aguda (7% O2 por 60 min) em ratos não anestesiados e hipóxia crônica intermitente (HCI, 10% de O2, 8 horas/7 dias) em ratos anestesiados. Além disso, em um outro grupo de ratos não anestesiados, investigamos o efeito da hipóxia aguda (7% de O2, durante 60 min) sobre a atividade dos neurônios do NPBL e também o efeito da injeção de alfa, beta-me ATP no NPBL sobre a imunorreatividade à proteína Fos no NTS induzido por hipóxia aguda. No grupo de ratos não anestesiados, foram utilizados ratos Holtzman (290-310 g, n = 8/ grupo) com cânulas de aço inoxidável implantadas bilateralmente no NPBL. Um tubo de polietileno foi inserido na aorta abdominal através da artéria femoral para registro da pressão arterial média (PAM) e frequência cardíaca (FC). A frequência respiratória (fR), volume corrente (VC) e ventilação (VE) foram registrados através da pletismografia de corpo inteiro. Os ratos não anestesiados receberam injeções bilaterais de PPADS (4 nmol/0,2 &#956;L) no NPBL 10 minutos antes da injeção de alfa, beta-me ATP (2 nmol/0,2 &#956;L) ou salina no NPBL. Dez minutos após as injeções no NPBL, uma mistura de gás hipóxico (7% de O2) foi ventilado na câmara, durante 60 minutos. No grupo de ratos anestesiado, foram utilizados ratos Sprague Dawley (300-400 g, n = 7) que foram expostos por 7 dias à HCI (alternando períodos de 6 minutos de 10% de O2 e 4 min de 21% O2 entre as 08:00- 16:00 hs; e exposição contínua à normóxia em 21% O2 entre as 08:00-16:00 hs). PAM, FC, atividade nervosa simpática renal (ANSR) e atividade do nervo frênico (ANF) foram registradas em ratos anestesiados com uretana e alfa cloralose, vagotomizados e ventilados mecanicamente. Os animais anestesiados receberam injeções unilaterais de alfa, beta-me ATP (2,0 nmol/50 nL) antes, 10 e 30 minutos após PPADS (0,125 nmol/50 nL) no NPBL. Para o grupo de imunohistoquímica, foram utilizados ratos Holtzman, onde estudamos a expressão da proteína Fos no NBPL e núcleo parabraquial medial (NPBM) de ratos não anestesiados submetidos a 1 h de hipóxia aguda. Em um outro grupo, os animais receberam injeções bilaterais no NPBL de alfa, beta-me ATP ou salina (n = 5/grupo) 10 minutos antes da hipóxia aguda durante 1 h. Após este período, os ratos foram anestesiados profundamente e perfundidos para a remoção dos encéfalos e realização de procedimentos de imunohistoquímica. Nos ratos não anestesiados as injeções bilaterais de alfa, beta-me ATP no NPBL potencializou o aumento no VC (&#61508;= 4,0 ± 0,3 ml/kg, vs. salina: 2,2 ± 0,2 mL/kg, ou 81% de aumento, p = 0,005) e VE (&#61508;= 871 ± 55 mL/kg/min, vs. salina: 598 ± 60 ml/kg/min, ou seja 45% de aumento, p = 0,009), sem alterar taquipneia (&#61508;fR = 49 ± 5 cpm, vs. salina: 48 ± 5 cpm) induzida por hipóxia aguda. O pré-tratamento com PPADS no NPBL aboliu as respostas de alfa, beta-me ATP. Injeções bilaterais de alfa, beta-me ATP no NPBL não afetou a hipotensão e taquicardia induzidos pela hipóxia aguda. Em ratos anestesiados expostos a normóxia por 7 dias, as injeções unilaterais de alfa, beta-me ATP (2,0 nmol/50 nL) aumentou a PAM (&#916; = 10 ± 2 mmHg, vs. salina: 0 ± 1 mmHg, p <0,05), ANSR (&#916; = 40 ± 12%, vs. salina: 1 ± 1%) e frequência da ANF (&#916; = 17 ± 5 cpm, vs. salina: 0 cpm ± 1cpm), sem alterar FC e a amplitude da ANF. O pré-tratamento com PPADS (0,125 nmol/50 nL) no NPBL aboliu o aumento da PAM (&#916; = 0 ± 1 mmHg), ANSR (&#916; = 3 ± 3,1%) e a frequência da ANF (&#916; = 1 ± 1 cpm) produzidos pela injeção de alfa, beta-me ATP. Em ratos anestesiados expostos à HCI, a injeção de alfa, beta-me ATP no NPBL aumentou ainda mais PAM (&#916; = 20 ± 2, vs. salina: -1 ± 1 mmHg), FC (&#916; = 25 ± 5 bpm, vs. salina: -1 ± 1 bpm) e a amplitude da ANF (&#916; = 87 ± 31%, vs. salina: 2 ± 1%), além de ter aumentado também a freqüência da ANF (&#916; = 17 ± 5 cpm, vs. salina: -1 ± 1 cpm, p <0,05). No grupo imunohistoquímica, a hipóxia aguda produziu a ativação dos neurônios do NPBL (93 ± 8, normóxia, vs. 22 ± 8 células), enquanto que a injeção de alfa, beta-me ATP no NPBL potencializou a expressão de Fos no NTS caudal (NTSc; 88 ± 4, vs. salina: 42 ± 8 células) e rostral (NTSr, 62 ± 8, vs. salina: 38 ± 4 células). Concluindo, nossos resultados sugerem que os receptores P2 do NPBL estão envolvidos nas respostas cardiorrespiratórias induzidas por hipóxia aguda e hipóxia crônica intermitente e essas respostas ativam neurônios no NTS, sugerindo possíveis projeções diretas ou indiretas entre o NPBL e o NTS.

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:23:33Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2010-07-30Bitstream added on 2014-06-13T20:30:21Z : No. of bitstreams: 1 menezes_mf_me_arafo.pdf: 831526 bytes, checksum: 44cecb40bcf8a2490778eb7d99c815ee (MD5) / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / Estudos recentes demonstram que os receptores purinérgicos estão presentes no núcleo parabraquial lateral (NPBL), uma estrutura pontina envolvida no controle da ingestão de sódio. No presente estudo, investigamos os efeitos das injeções do , -methyleneadenosine 5 -triphosphate ( , -metileno ATP, agonista dos receptores P2X) sozinho ou combinado com o ácido piridoxalfosfato-6-azofenil-2',4'-disulfônico (PPADS, antagonista dos receptores P2X) ou suramin (antagonista não seletivo dos receptores P2) no NPBL sobre a ingestão de NaCl 1,8% induzida por depleção de sódio. Também investigamos os efeitos da injeção de , -metileno ATP sozinho ou combinado com o PPADS no NPBL sobre a pressão arterial média (PAM) e freqüência cardíaca (FC) em ratos saciados e depletados de sódio. Foram utilizados ratos Holtzman com implante de cânulas implantadas bilateralmente em direção ao NPBL. A depleção de sódio foi induzida pelo tratamento com o diurético furosemida (20 mg/kg do peso corporal) acompanhado de uma dieta deficiente em sódio por 24 horas. As injeções bilaterais de , -metileno ATP (2,0 e 4,0 nmol/0,2 μL) no NPBL aumentaram a ingestão de NaCl 1,8% induzida por depleção de sódio (25,3 ± 0,8 e 26,5 ± 0,9 mL/2 h, respectivamente, vs. salina: 15,2 ± 1,3 mL/2 h). O pré-tratamento com o suramin (2,0 nmol/0,2 μL) ou com o PPADS (4,0 nmol/0,2 μL) no NPBL aboliu os efeitos do , -metileno-ATP na ingestão de NaCl 1,8% (15,2 ± 1,2 e 16,9 ± 0,9 mL/2 h, respectivamente). As injeções de PPADS sozinho no NPBL não alteraram a ingestão de NaCl 1,8% (14,6 ± 0,8 mL/2 h vs. salina: 18,3 ± 1,8 mL/2 h). No entanto, as injeções de suramin sozinho no NPBL quase aboliram a ingestão de NaCl 1,8% (5,7 ± 1,9 mL/120 min, vs. salina: 15,5 ± 1,1 mL/120 min) e aumentaram a ingestão de sacarose 2% somente no tempo de 90 minutos (7,1 ± 1,3 vs. salina: 5,3 ± 0,8 mL/90 min) sem alterar... / Recent studies have shown that purinergic receptors are present in the lateral parabrachial nucleus (LPBN), a pontine structure involved in the control of sodium intake. In the present study, we investigated the effects of , -methyleneadenosine 5 -triphosphate ( , - methylene ATP, selective P2X purinergic agonist) alone or combined with pyridoxalphosphate-6-azophenyl-2',4'-disulfonic acid (PPADS, P2X purinergic antagonist) or suramin (non-selective P2 purinergic antagonist) injected into the LPBN on sodium depletion-induced by 1.8% NaCl intake. We also investigated the effects of , -methylene ATP alone or combined with PPADS injected into the LPBN on mean arterial pressure (MAP) and heart rate (HR) on replete and sodium depleted rats. Male Holtzman rats with stainless steel cannulas implanted into the LPBN were used. Sodium depletion was induced by treating rats with the diuretic furosemide (20 mg/kg of body weight) followed by 24 h of sodium-deficient diet. Bilateral injections of , -methylene ATP (2.0 and 4.0 nmol/0.2 μL) into the LPBN increased sodium depletion-induced 1.8% NaCl intake (25.3 ± 0.8 and 26.5 ± 0.9 mL/2 h, respectively, vs. saline: 15.2 ± 1.3 mL/2 h). Pre-treatment with suramin (2.0 nmol/0.2 μL) or PPADS (4 nmol/0.2 μL) into the LPBN abolished the effects of , - methylene-ATP on 1.8% NaCl intake (15.2 ± 1.2 and 16.9 ± 0.9 mL/2 h, respectively). Injections of PPADS alone into the LPBN did not change 1.8% NaCl intake (14.6 ± 0.8 ml/2 h vs. saline: 18.3 ± 1.8 mL/2 h). However, injections of suramin alone into the LPBN strongly reduced 1.8% NaCl intake (5.7 ± 1.9 mL/120 min, vs. saline: 15.5 ± 1.1 mL/2 h) and increased the 2% sucrose intake only at 90 min (7.1 ± 1.3 vs. saline: 5.3 ± 0.8 mL/90 min), without changing 24h water deprivation-induced water intake (16.7 ± 1.8 mL/2 h vs. saline: 15.0 ± 2.1 mL/2 h)... (Complete abstract click electronic access below)

Made available in DSpace on 2016-06-02T19:22:11Z (GMT). No. of bitstreams: 1 6151.pdf: 1975366 bytes, checksum: 23b842452d75ee4bd80f5408eccc025c (MD5) Previous issue date: 2014-08-26 / Universidade Federal de Minas Gerais / Sodium intake is induced by facilitatory signals, such as angiotensin II (ANG II) and aldosterone. Hyperosmolarity and central cholinergic activation, classic antinatriorexigenic stimuli, also induce NaCl intake when the inhibitory mechanisms of the lateral parabrachial nucleus (LPBN) are deactivated. In the present study, we investigated the possible interaction between osmoreceptors and cholinergic and angiotensinergic mechanisms in the control of water and NaCl intake induced by different dipsogenic and/or natriorexigenic stimuli combined with the blockade of LPBN inhibitory mechanisms. Rats with stainless steel cannulas implanted in the lateral ventricle (LV) or subfornical organ (SFO) and bilaterally into the LPBN were used to study the effects of injections of atropine (muscarinic cholinergic antagonist), losartan or ZD 7155 (AT1 receptor antagonists) into the LV or SFO on water and 0.3 M NaCl intake induced by bilateral injections of moxonidine (&#945;2- adrenoceptor/imidazoline agonist) into the LPBN combined with a) plasma hyperosmolarity induced by intragastric (ig) 2 M NaCl; b) injections of carbachol (cholinergic agonist) into the LV or SFO; c) subcutaneous injections of furosemide (FURO) and captopril (CAP); d) injection of ANG II into the LV. Additionally, we also investigated whether acute application of osmotic, angiotensinergic and cholinergic stimuli would activate cultured SFO dissociated cells and if the same cell would be activated by different stimuli. In rats treated with ig 2 M NaCl, injections of moxonidine (0.5 nmol/0.2 &#956;l) into the LPBN increased water and 0.3 M NaCl intake. Injections into the LV or SFO of atropine (20 nmol/1.0 &#956;l and 2 nmol/0.1 &#956;l, respectively) or losartan (100 &#956;g/1.0 &#956;l and 1 &#956;g/0.1 &#956;l, respectively) abolished water and 0.3 M NaCl intake in rats treated with ig 2 M NaCl combined with moxonidine into the LPBN. Moxonidine injected into the LPBN also increased water and 0.3 M NaCl intake induced by FURO + CAP, injections of ANG II (50 ng/1.0 &#956;l) and carbachol (4 nmol/1.0 &#956;l) into the LV or carbachol (0.5 nmol/0.1 &#956;l) into the SFO. The blockade of AT1 receptors with injections of losartan into the LV or ZD 7155 (1 &#956;g/0.1 &#956;l) into the SFO abolished water and 0.3 M NaCl intake in rats treated with carbachol into the LV or SFO combined with LPBN injections of moxonidine. However, atropine injected into the LV, despite reducing water intake, did not change 0.3 M NaCl intake in rats treated with FURO + CAP or injection of ANG II into the LV combined with injections of moxonidine into the LPBN. Injections of losartan into the LV reduced 0.06 M sucrose intake, but did not change food intake induced by 24 h of food deprivation. Finally, in vitro studies showed that osmotic, angiotensinergic and cholinergic stimuli activate SFO dissociated cells and that different stimuli can activate the same SFO cell. Therefore, the results of the present study suggest that different stimuli, such as hyperosmolarity and central cholinergic activation, facilitate NaCl intake through activation of central angiotensinergic mechanisms. / A ingestão de sódio é induzida por sinais facilitatórios, como angiotensina II (ANG II) e aldosterona. A hiperosmolaridade e a estimulação colinérgica central, estímulos classicamente considerados antinatriorexigênicos, também induzem ingestão de NaCl quando os mecanismos inibitórios do núcleo parabraquial lateral (NPBL) são bloqueados. No presente estudo, investigamos a possível interação entre osmorreceptores e mecanismos colinérgicos e angiotensinérgicos centrais no controle da ingestão de água e NaCl induzida por diferentes estímulos dipsogênicos e/ou natriorexigênicos combinados com bloqueio dos mecanismos inibitórios do NPBL. Em ratos com cânulas de aço inoxidável implantadas no ventrículo lateral (VL) ou órgão subfornical (OSF) e bilateralmente no NPBL, foram estudados os efeitos de injeções de atropina (antagonista colinérgico muscarínico), losartan ou ZD 7155 (antagonistas de receptores AT1) no VL ou diretamente no OSF na ingestão de água e NaCl 0,3 M induzida por injeções bilaterais de moxonidina (agonista adrenérgico &#945;2/imidazólico) no NPBL combinadas com: a) hiperosmolaridade plasmática induzida por sobrecarga intragástrica de NaCl 2 M; b) injeções de carbacol (agonista colinérgico) no VL ou OSF; c) injeções subcutâneas de furosemida (FURO) e captopril (CAP); d) injeção de ANG II no VL. Adicionalmente, também foi investigado se a aplicação aguda de estímulos osmóticos, angiotensinérgico e colinérgico ativariam neurônios dissociados do OSF mantidos em cultura e se um mesmo neurônio seria ativado por diferentes estímulos. Em ratos tratados com NaCl 2 M ig, injeções de moxonidina (0,5 nmol/0,2 &#956;l) no NPBL aumentaram a ingestão de água e NaCl 0,3 M. Injeções no VL ou OSF de atropina (20 nmol/1,0 &#956;l e 2 nmol/0,1 &#956;l, respectivamente) ou losartan (100 &#956;g/1,0 &#956;l e 1 &#956;g/0,1 &#956;l, respectivamente) aboliram a ingestão de água e NaCl em ratos tratados com NaCl 2 M ig que receberam injeções de moxonidina no NPBL. Injeções de moxonidina também aumentaram a ingestão de água e NaCl 0,3 M induzida por FURO + CAP, injeções de ANG II (50 ng/1,0 &#956;l) e carbacol (4 nmol/1,0 &#956;l) no VL ou carbacol (0,5 nmol/0,1 &#956;l) no OSF. O bloqueio de receptores AT1 com injeções de losartan no VL ou ZD 7155 (1 &#956;g/0,1 &#956;l) no OSF aboliu a ingestão de água e NaCl 0,3 M em ratos tratados com injeção de carbacol no VL ou OSF combinada com injeções de moxonidina no NPBL. No entanto, injeção de atropina no VL, apesar de reduzir a ingestão de água, não alterou a ingestão de NaCl 0,3 M em ratos tratados com FURO + CAP ou injeção de ANG II no VL combinados com injeções de moxonidina no NPBL. Injeções de losartan no VL reduziram a ingestão de sacarose 0,06 M, mas não alteraram a ingestão de ração induzida por privação alimentar por 24 h. Finalmente, os estudos in vitro mostraram que estímulos osmóticos, angiotensinérgico e colinérgico ativam as células dissociadas do OSF e que diferentes estímulos podem ativar uma mesma célula do OSF. Portanto, os resultados do presente estudo sugerem que diferentes estímulos, tais como hiperosmolaridade e ativação colinérgica central, facilitam a ingestão de NaCl através da ativação de mecanismos angiotensinérgicos centrais.

Made available in DSpace on 2016-06-02T19:22:52Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2885.pdf: 1014245 bytes, checksum: f9caee9a0cfd9bbc23af2760d02bb6a9 (MD5) Previous issue date: 2009-12-07 / Universidade Federal de Minas Gerais / Previous studies have shown the importance of serotonergic GABAergic and aadrenergic mechanisms of the lateral parabraquial nucleus (LBPN) in the control of sodium intake. The importance of the central nucleus of the amygdala (CeA) for sodium intake induced by different protocols was also demonstrated. Considering the studies showing reciprocal connections between these two structures, the objective of the present study was to investigate if the increase of sodium and water intake produced by the blockade of serotonergic mechanism, or the activation of GABAergic receptors or &#945;2-adrenoceptors in the LPBN would depend on the CeA integrity. Male Holtzman rats with bilateral CeA lesions and bilateral stainless steel cannulas implanted in the LPBN were used to study the possible involvement of the CeA: 1) in water and 0.3 M NaCl intake produced by injections of the diuretic furosemide (FURO) combined with the angiotensin converting enzyme inhibitor captopril (CAP) subcutaneously (sc); 2) in the increase of 0.3 M NaCl intake induced by the blockade of serotonergic mechanisms or activation of the &#945;2-adrenoceptors of the LPBN in rats treated with FURO + CAP sc; 3) in 0.3 M NaCl intake induced by the activation of GABAergic receptorss of the LPBN in satiated and normovolemic rats. Additionally, the pharmacological blockade of the CeA neurons with bilateral injections of GABAA receptor agonist muscimol was performed in order to test if the effects of CeA electrolytic lesions after the blockade of the inhibitory mechanisms of the NPBL were due to destruction of CeA neurons or destruction of fibers of passage. CeA lesionedrats had a decrease in daily water intake in comparison to sham-lesioned rats during the whole period of test, while the reduction of daily 0.3 M sodium intake occurred after the eighth day of lesions. Animals with bilateral lesions of the CeA also showed a reduction in body weight when compared to sham lesioned-rats. Bilateral lesions of the CeA did not affect FURO+CAP induced-water (9.2 &#61617;&#61472;1.6 ml/2 h vs. sham lesion: 12.8 &#61617;&#61472;0.7 ml/2 h) and 0.3 M NaCl intake (6.5 &#61617;&#61472;3.5 ml/2 h vs. sham lesion: 5.2 &#61617;&#61472;0.9 ml/2 h). Bilateral lesions of the CeA (3 days) completely abolished the ingestion of water (0.1 &#61617;&#61472;0.05 ml/4 h vs. sham lesion: 8.2 &#61617;&#61472;3.5 ml/4 h) and 0.3 M NaCl (0.1 &#61617;&#61472;0.1 ml/4 h vs. sham lesion: 16.1 &#61617;&#61472;5.4 ml/4 h) induced by bilateral injections of muscimol (0.5 nmol/0.2 &#956;l) into the LPBN in satiated rats. Bilateral lesions of the CeA (5 to 18 days) also abolished the increase in 0.3 M NaCl (11,7 &#61617;&#61472;2,8 ml/2 h e 11,7 &#61617;&#61472;2,8 ml/2 h vs. sham lesion: 31,5 &#61617;&#61472;4,2 ml/2 h e 18,3 ± 3,1 ml/2 h) and water intake (6,7 &#61617;&#61472;1,8 ml/2 h e 13,8 &#61617;&#61472;2,7 ml/2 h vs. sham lesion: 19,9 &#61617;&#61472;3,2 ml/2 h e 22,4 &#61617;&#61472;2,5 ml/2 h) produced respectively by bilateral injections of moxonidine (0.5 nmol/0.2 &#956;l) or methysergide (4 &#956;g/0.2 &#956;l) into the LPBN in FURO + CAP treated-rats. Bilateral injections of muscimol (0.5 nmol) into the CeA abolished water (0.1 &#61617;&#61472;0.02 ml/4 h vs. saline: 8.8 &#61617;&#61472;3.2 ml/4 h) and 0.3 M NaCl intake (0.1 &#61617;&#61472;0.04 ml/4h vs. saline: 19.1 &#61617;&#61472;6.4 ml/4 h) induced by bilateral injections of muscimol (0.5 nmol/0.2 &#956;l) in the NPBL in satiated animals. Bilateral injections of muscimol (0.25 nmol/0.2 &#956;l) in the CeA abolished the increase of water (3.3 &#61617;&#61472;2.3 ml/2 h vs. saline: 26.4 &#61617;&#61472;6.7 ml/2 h) and 0.3 M NaCl intake (2.8 &#61617;&#61472;1.6 ml/2 h vs. saline: 29.7 &#61617;&#61472;7.2 ml/2 h) produced by the bilateral injections of moxonidine (0.5 nmol/0.2 &#956;l) into the NPBL. The present results show that CeA is essential for sodium and water intake after the blockade of LPBN inhibitory mechanisms. The suggestion is that CeA facilitatory mechanisms for sodium intake might be activated after the blockade of LPBN inhibitory mechanisms which might drive rats to ingest sodium. Therefore, if LPBN inhibitory mechanisms were acting normally, they may limit sodium intake because they inhibit CeA facilitatory signals for sodium intake. / Estudos anteriores demonstraram a importancia dos mecanismos serotoninergicos, GABAergicos e adrenergicos do nucleo parabraquial lateral (NPBL) na regulacao da ingestao de sodio hipertonico. Tambem ja foi demonstrada a importancia do nucleo central da amigdala (CeA) para a ingestao de sodio hipertonico induzida por diferentes protocolos. Considerando-se os estudos mostrando conexoes reciprocas entre essas duas estruturas, o objetivo do presente estudo foi investigar se o aumento da ingestao de sodio hipertonico produzido pelo bloqueio serotoninergico ou ativacao GABAergica ou adrenergica no NPBL dependeria da integridade do CeA. Em ratos com lesoes bilaterais do CeA e com canulas de aco inoxidavel implantadas bilateralmente no NPBL, foi estudado o possivel envolvimento do CeA: 1) na ingestao de agua e NaCl 0,3 M produzida pelo tratamento subcutaneo com o diuretico furosemida (FURO) combinado com o inibidor da enzima conversora de angiotensina captopril (CAP); 2) no aumento da ingestao de NaCl 0,3 M produzido pelo bloqueio de receptores serotoninergicos ou ativacao dos receptores adrenergicos &#945;2 do NPBL em ratos tratados com FURO + CAP sc; 3) na ingestao de NaCl 0,3 M induzida pela ativacao de receptores GABAergicos do NPBL em ratos saciados e normovolemicos. Adicionalmente, foi realizado o bloqueio farmacologico dos neuronios do CeA com injecoes bilaterais de muscimol, agonista de receptor GABAA, para verificar se os efeitos das lesoes eletroliticas do CeA apos o bloqueio dos mecanismos inibitorios do NPBL eram devido a destruicao de neuronios do CeA ou destruicao de fibras de passagem. Em animais com lesoes bilaterais do CeA a ingestao diaria de agua foi menor quando comparada aos animais com lesoes ficticias ao longo de todo periodo experimental, enquanto que a ingestao diaria de NaCl 0,3 M foi reduzida a partir do oitavo dia apos as lesoes. Esses animais apresentaram uma reducao no peso corporal persistente por todo periodo experimental comparado com o grupo com lesoes ficticias. As lesoes bilaterais do CeA nao afetaram a ingestao de agua (9,2 &#61617;&#61472;1,6 ml/2 h vs. lesoes ficticias: 12,8 &#61617;&#61472;0,7 ml/2 h) e NaCl 0,3 M (6,5 &#61617;&#61472;3,5 ml/2 h vs. lesoes ficticias 5,2 &#61617;&#61472;0,9 ml/2 h) induzida por FURO + CAP sc. As lesoes bilaterais do CeA (3 dias) aboliram a ingestao de NaCl 0,3 M (0,1 &#61617;&#61472;0,1 ml/4 h vs. lesoes ficticias: 16,1 &#61617;&#61472;5,4 ml/4 h) e de agua (0,1 &#61617;&#61472;0,05 ml/4 h vs. lesoes ficticias: 8,2 &#61617;&#61472;3,5 ml/4 h) induzida pelas injecoes bilaterais de muscimol (0,5 nmol/0,2 &#956;l) no NPBL de ratos saciados. As lesoes bilaterais do CeA (5 a 18 dias) tambem aboliram o aumento da ingestao de NaCl 0,3 M (11,7 &#61617;&#61472;2,8 ml/2 h e 11,7 &#61617;&#61472;2,8 ml/2 h vs. lesoes ficticias: 31,5 &#61617;&#61472;4,2 ml/2 h e 18,3 ± 3,1 ml/2 h) e agua (6,7 &#61617;&#61472;1,8 ml/2 h e 13,8 &#61617;&#61472;2,7 ml/2 h vs. lesoes ficticias: 19,9 &#61617;&#61472;3,2 ml/2 h e 22,4 &#61617;&#61472;2,5 ml/2 h) induzidos, respectivamente, pelas injecoes bilaterais de moxonidina (0,5 nmol/0,2 &#956;l) ou metisergida (4 &#956;g/0,2 &#956;l) em ratos previamente tratados com FURO+CAP sc. Injecoes bilaterais de muscimol (0,5 nmol/0,2 &#956;l) no CeA aboliram a ingestao de agua (0,1 &#61617;&#61472;0,02 ml/4 h vs. salina: 8,8 &#61617;&#61472;3,2 ml/4 h) e NaCl 0,3 M (0,1 &#61617;&#61472;0,04 ml/4h vs. salina: 19,1 &#61617;&#61472;6,4 ml/4 h) induzidas pela injecao bilateral de muscimol (0,5 nmol/0,2 &#956;l) no NPBL em animais saciados, como tambem as injecoes bilaterais de muscimol (0,25 nmol/0,2 &#956;l) no CeA aboliram o aumento da ingestao de agua (3,3 &#61617;&#61472;2,3 ml/2 h vs. salina: 26,4 &#61617;&#61472;6,7 ml/2 h) e NaCl 0,3 M (2,8 &#61617;&#61472;1,6 ml/2 h vs. salina: 29,7 &#61617;&#61472;7,2 ml/2 h) produzido pela injecao bilateral de moxonidina (0,5 nmol/0,2 &#956;l) no NPBL em animais tratados com FURO + CAP sc. Esses resultados demonstram que o CeA e essencial para a ingestao de sodio e agua que ocorre apos o bloqueio dos mecanismos inibitorios do NPBL. A sugestao e que mecanismos facilitatorios para a ingestao de sodio presentes no CeA seriam ativados apos o bloqueio dos mecanismos inibitorios do NPBL o que estimularia os animais a ingerirem sodio. Portanto, se estiverem atuando normalmente, os mecanismos inibitorios do NPBL limitariam a ingestao de sodio porque inibiriam os sinais facilitatorios para ingestao de sodio produzidos pelo CeA.

Made available in DSpace on 2016-06-02T19:22:09Z (GMT). No. of bitstreams: 1 5394.pdf: 2154328 bytes, checksum: 49114074adb778dc78d219f32b8ee5b4 (MD5) Previous issue date: 2013-03-22 / Sodium intake is induced by facilitatory signals, like angiotensin II and aldosterone Cell dehydration, a classical inhibitory signal for sodium intake, may also induce paradoxical sodium intake if the sodium intake inhibition by the ocitocinergic hypothalamic mechanism or by the lateral parabraquial nucleus (LPBN) is absent. Thus, the LPBN deactivation could modify the activity of hypothalamic oxytocinergic pathways or the gastric emptying control system, another inhibitory system, as well as facilitatory areas and the reward system. The aim of this study was to investigate the effect of LPBN injections of methysergide (4 &#956;g/0.2 &#956;l, serotonergic antagonist) in cell dehydrated animals on: activity of brain areas involved in ingestive behavior by measuring c-Fos protein immunoreactivity and tissue levels of dopamine, serotonin and metabolites or plasma hormone levels; pre-systemic satiety involving gastric emptying; selectivity of paradoxical sodium intake. The effect of disinhibition of the natriorexigenesis on the reward system was tested by repeated deactivations of the LPBN with muscimol (2 nmol/0.2 &#956;l; GABAA agonist) and its effect on ingestive behavior sensitization and water deprivation with partial rehydration followed by sodium access (WD-PR protocol) on the lateral hypothalamus self-stimulation (LHSS). Holtzman or Sprague-Dawley rats (280-320 g), intacts or operated (femoral vein cannulation and/or guide cannulas implanted in direction to the LPBN or bipolar electrode implanted in the hypothalamus), were used in the experiments. Animals treated with methysergide and hyperosmotic by gavage of 2 M NaCl (2 ml) compared to the control treatment (vehicle) showed: (a) increase in ir-Fos in the area postrema and intermediate nucleus of the solitary tract, subfornical organ and non-oxytocinergic neurons of the ventral portion of the paraventricular nucleus of the hypothalamus; (b) increase in tissue levels of dopamine in the amygdala, but not in the accumbens; (c) unchanged activity of oxytocinergic system (ir-Fos in oxytocinergic neurons and oxytocin plasma levels similar to control group). Hyperosmotic rats (iv infusion of 2 ml of 2 M NaCl) treated with methysergide and a gavage of 0.3 M NaCl (3 ml) showed a hypertonic gastric and intestinal content similar to the control group (vehicle) after gavage. In hydrated animals with a history of two previous treatments of muscimol into the LPBN, the hypertonic NaCl intake induced by muscimol was higher than the control animals pretreated with vehicle. The LHSS was not altered at any stage of WD-PR protocol, as well as in cell dehydrated animals in comparison with hydrated control group. The results demonstrate that the deactivation of the LPBN enhances specifically the intake of solutions containing sodium and suggest the involvement of the brain stem and the amygdala during the appetitive phase of the paradoxical sodium intake, while the deactivation of other inhibitory mechanisms (oxytocin and gastric retention) seems not to be essential. Furthermore, the repetition of LPBN deactivation sensitizes hydrated animals for sodium intake. Removing the inhibition of sodium appetite by partial rehydration in WD-PR does not change the LHSS reward. / A ingestão de sódio é induzida por sinais facilitadores, como a angiotensina II e a aldosterona. Apesar de classicamente considerada antinatriorexigênica, a desidratação celular também se mostra facilitadora da ingestão paradoxal de sódio quando a inibição da ingestão de sódio pelo mecanismo ocitocinérgico do hipotálamo ou pelo núcleo parabraquial lateral (NPBL) está desativada. A desativação do NPBL poderia, então, atuar sobre o mecanismo ocitocinérgico ou de controle do esvaziamento gástrico, ambos inibidores, ou ainda modificar a atividade de áreas facilitadoras ou envolvidas na recompensa. O objetivo deste estudo foi investigar o efeito da injeção de metisergida (4 &#956;g/0,2 &#956;l, antagonista serotonérgico) no NPBL em animais com desidratação celular sobre a: atividade de áreas encefálicas envolvidas no comportamento ingestivo, medindo-se imunorreatividade para proteína c-Fos e dosagem tecidual de dopamina, serotonina e metabólitos em áreas de interesse ou dosagem hormonal; saciedade pré-sistêmica envolvendo esvaziamento gástrico; seletividade da ingestão paradoxal de sódio. Também foi avaliado o possível efeito da desinibição da natriorexigênese sobre o sistema de recompensa através da sensibilização por desativações repetidas do NPBL pelo muscimol (2 nmol/0,2 &#956;l; agonista GABAA) e na privação hídrica com reidratação parcial e posterior acesso ao sódio (modelo PH-RP) sobre a autoestimulação elétrica do hipotálamo lateral (AEHL). Ratos (280-320 g) Holtzman ou Sprague-Dawley, intactos ou operados (canulação da veia femoral e/ou cânulas-guia direcionadas ao NPBL ou eletrodo bipolar no hipotálamo), foram utilizados nos experimentos. Animais tratados com metisergida e hiperosmóticos por gavagem de NaCl 2 M (2 ml) apresentaram, em relação ao tratamento controle (veículo): (a) aumento da ir-Fos na área postrema e núcleo do trato solitário intermediário, no órgão subfornical e em neurônios não ocitocinérgicos da porção ventral do núcleo paraventricular do hipotálamo; (b) aumento da concentração tecidual de dopamina na amígdala, mas não no accumbens; (c) atividade do sistema ocitocinérgico inalterada (ir-Fos em neurônios ocitocinérgicos e ocitocina plasmática semelhantes ao controle). Ratos tratados com metisergida e hiperosmóticos por infusão iv de NaCl 2 M (1,5 ml), que receberam uma gavagem de NaCl 0,3 M (3 ml) apresentaram conteúdo gástrico e intestinal hipertônico semelhantes ao controle (veículo) após a gavagem. Em animais hidratados com histórico de dois tratamentos prévios de muscimol no NPBL, a ingestão de NaCl hipertônico induzida por muscimol foi superior aos animais controle tratados previamente com veículo. A AEHL não foi alterada em nenhuma fase do protocolo PH-RP, assim como em animais com desidratação celular, em relação aos controles hidratados. Os resultados demonstram que a desativação do NPBL potencializa especificamente a ingestão de solução contendo sódio e sugerem a participação do tronco encefálico e da amígdala na fase apetitiva da ingestão paradoxal de sódio, enquanto a desativação de outros mecanismos inibidores (ocitocina e retenção gástrica) parece não ser essencial. Ainda, a repetição da desativação do NPBL sensibiliza a ingestão de sódio em animais hidratados. A remoção da inibição ao apetite ao sódio pela reidratação parcial na PHRP não altera a recompensa na AEHL.